Alumno: Liliana Carolina Vera Riera Curso: Quinto
Paralelo: A
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc
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Grupo N°5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 19 de julio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes 26 de julio del 2016
PRÁCTICA N° 7 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR PLOMO Animal de Experimentación: Rata Wistar Vía de Administración: Vía Parenteral (Intraperitoneal) Tiempos: Inicio de la práctica: 08:00am Hora de administración del toxico al cobayo: 08:10am Deceso del animal: 08:19am Hora de inicio de baño maría: 08:24 am
Síntoma: Hipoxia Pupila dilatada Convulsiones Perdida de actividad motora
Hora de finalización de baño maría: 09:05am Final de la práctica: 10:30am OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta en la rata ante la Intoxicación por Plomo 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el Plomo en el organismo del animal. 3. Conocer mediante pruebas de identificación cualitativa la presencia de Plomo presente en el organismo de la rata (viseras).
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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SUSTANCIAS MATERIALES Hidróxido de sodio Balanza Ácido acético Bisturí Cromato de potasio Bureta Yoduro de potasio Campana Tetracloruro de carbono Cinta plástica Ácido sulfúrico Cocineta Cloruro estannoso Cronómetro Yoduro de potasio Equipo de destilación. Nitrato de cadmio Equipo de disección Tetrametildiaminodifenilmetano Erlenmeyer Solución amoniacal de peróxido de Espátula hidrógeno al 3% Fosforo Óxido de plomo Gorro Bencidina Guantes de látex Peróxido de hidrógeno al 3% Jeringuilla de 10cc Agua destilada Lámpara de alcohol Mandil EQUIPOS Mascarilla Balanza analítica Panema Perlas de vidrio Pinzas Pipetas Porta tubo Probeta Soporte universal Tabla de disección Tubos de ensayo Varilla Vasos de precipitación 200 y 500 ml. Zapatones en caso de usar sandalias. PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4. 5. 6.
Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo. Tener todos los materiales a utilizar listos. Administramos a la rata wistar, 5 ml de cetona por vía intraperitoneal y anotamos el tiempo. Observamos los efectos que produce en la rata wistar. Procedimos a la disección con la ayuda del bisturí. Observamos el estado de las vísceras. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras (picadas
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lo más finas posibles). se trituran finalmente en presencia de agua para formar una masa fluida se la coloca en un balón de 1000 ml de capacidad; Se agrega de 15 – 20 ml de ácido clorhídrico concentrado y de 1-2 dg de clorato de potasio. Se coloca finalmente el balón en un baño maría hirviente en una campana; se agita frecuentemente para que el cloro que se forme este en intimo contacto con la materia orgánica; se debe agregar el tiempo 1-2 g de clorato de potasio Cuando cesa el desarrollo de cloro, se añaden nuevamente 2g de clorato de potasio, remplazando también el agua que eventualmente se haya evaporado. Cuando al agregar clorato de potasio, no se desarrolla más cloro se agrega cautelosamente más ácido clorhídrico. Estas operaciones se realizan hasta cuando no se tenga ningún líquido lípido de color amarillo por la presencia de cloro. Se deja entonces enfriar, se desplaza el cloro y el dióxido de cloro eventualmente presentes en una corriente de anhídrido carbónico, Se filtra en calienta para evitar la separación del cloruro de plomo.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: 1. Con el Cromato de Potasio.- Se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o en una cápsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un precipitado amarillo de cromato de potasio. Pb (NO3)2 + K2CrO4
CrO4Pb + 2KNO3
2. Con el Yoduro de Potasio.- Con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo cristalino de l2Pb soluble en caliente con agua y precipilable en frío como agujillas amarillas. Pb (NO3)2 + 2IK
PbI2 + 2KNO3
3. Con la Difenil tio Carbazona.- Esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono al reaccionar con el plomo produce un color rojo. 4. Con el Ácido Sulfúrico.- En solución diluida, produce un ,3recipitado blanco de sulfato de plomo; este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se disuelva el ptecipnado produce un color anranjado. 5. Con el Tetrametildiaminodifenilmetano.- En solución acética. Para realizar esta reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de peróxido
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de hidrógeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gota s de la solución muestra; el papel Oro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta a baño de maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar al plomo corno óxido de plomo. Así, se hace caer sobre el papel una gota de reactivo cerca de la zona donde se dejó caer las gotas de muestra. En caso positivo, en el punto de contacto aparece un color azul por la formación del hidrosol respectivo. 6. Con Bencidina.- A 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta que la Mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade 1/2 ml de peróxido de hidrógeno al 3%, se hierve un momento, se separa y lava el precipitado (por centrifugación o filtración) con a gua y finalmente se añaden gotas de bencidina sobre el precipitado. Un color azul nos indica, la presencia de plomo GRÁFICOS:
1.- Animal de experimentación
2.-Administramos el tóxico en la rata inmediatamente Lo colocamos dentro de la panera para observar su reacción
4.-Con el bisturí empezamos abrir nuestra rata
7.- Empieza el proceso de baño maría por 30 min
5.-Sacamos todas las vísceras y las picamos para colocarlas en un vaso de precipitación
8.- Se filtra en calienta
6.-Colocamos todo esto en el balón para destilación
9.- Se realizan los ensayos respectivos
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO. 1. CON EL CROMATO DE POTASIO. (precipitado amarillo) Reacción
Positivo no característico
Antes (transparente)
anaranjado
Después (anaranjado)
2. CON YODURO DE POTASIO (precipitado amarillo) Reacción
positivo característico
Antes (transparente)
precipitado amarillo
Después (precipitado amarillo)
3. CON DIFENIL TIO CARBAZONA (color rojo) Reacción
Positivo característico
Antes (transparente)
rojo
Después (rojo)
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4. CON ÁCIDO SULFÚRICO (color anaranjado) Reacción
positivo no característico
Antes (transparente)
café
Después (café)
5. CON EL TETRAMETILDIAMINODIFENILMETANO (color azul) Reacción
positivo característico
Antes (transparente)
azul
Después (azul)
6. CON BENCIDINA (color azul) Reacción
Positivo no característico
Antes (transparente)
amarillo
Después (amarillo)
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OBSERVACIONES: En esta práctica ya no se empleó el método de destilación. Se realizó otro método con baño maría. Se observa que las vísceras de la rata estaban totalmente ennegrecidas y casi disueltas por el toxico (Plomo) En esta práctica se observa claramente la presencia del toxico en las vísceras de la rata por la coloración que toman las reacciones en el momento de las reacciones de diferenciación biológicas. Se observó que el tiempo de muerte de la rata fue de 9 minutos CONCLUSIONES. Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir, se determinó que el plomo que estaba presente en las vísceras del animal y la cual fue causante de su muerte, además de monitorear los principales efectos que caso antes y después de la muerte del animal. Todo esto mediante ensayos químicos colorimétricos y monitoreo de respuestas de forma organoléptica. RECOMENDACIONES: Al ser el plomo uno de los tóxicos volátiles estudiados en esta unidad, se llevar a cabo el manejo de implementos de bioseguridad, que cubra las vías aéreas, y si es posibles los ojos, además de siempre mantener la piel aislada de este toxico ya que se puede absorber vía tópica. Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar accidentes. Desechar el material usado, y los restos del cobayo en un lugar seguro que no valla a ocasionar problemas a la comunidad. CUESTONARIO 1. ¿APLICACIONES DEL NITRATO DE PLOMO? El nitrato de plomo (II) se ha usado históricamente en la fabricación de fósforos y explosivos especiales como la azida de plomo Pb(N3)2, en mordientes y pigmentos (pinturas de plomo...), para la coloración e impresión de tejidos, y en los procesos de producción de compuestos de plomo. Otras aplicaciones más recientes son, por ejemplo, como estabilizador térmico en el nylon y los poliésteres, como recubrimiento de las películas fototermográficas, y en los rodenticidas. 2. ¿CÓMO SE OBTIENE EL PLOMO A NIVEL INDUSTRIAL ? El compuesto se obtiene normalmente disolviendo plomo metálico u oxidado en una solución acuosa de ácido nítrico.13 El Pb(NO3)2 anhidrido puede cristalizar directamente a partir de la solución. No hay ninguna producción a escala industrial conocida. 3. ¿QUÉ TAN TÓXICO ES EL PLOMO? El Centro Internacional de Investigación del Cáncer (CIRC) ha clasificado los compuestos inorgánicos de plomo como potencialmente cancerígenos para el hombre (categoría 2A). Han “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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sido ligados al cáncer renal y al glioma en animales de laboratorio, y al cáncer renal, tumores cerebrales y cáncer de pulmón en el hombre, aunque los estudios con trabajadores expuestos al plomo suelen ser complejos, debido a que también lo suelen estar al arsénico.16 Una conocida función del plomo es la de sustituto del zinc en numerosas enzimas, como el ácido δ-aminolevulínico deshidratasa (o porfobilinógeno-sintasa) en la vía biosintética del hemo y la pirimidina-5'-nucleotidasa, importante para el metabolismo del ADN. GLOSARIO. Alifáticos: Los hidrocarburos alifáticos son compuestos orgánicos constituidos por carbono e hidrógeno cuyo carácter no es aromático. Cefalalgias: hace referencia a los dolores y molestias localizadas en cualquier parte de la cabeza, en los diferentes tejidos de la cavidad craneana, en las estructuras que lo unen a la base del cráneo, los músculos y vasos sanguíneos que rodean el cuero cabelludo, cara y cuello. En el lenguaje coloquial cefalea es sinónimo de dolor de cabeza. Irritación: Estado inflamatorio o una reacción dolorosa del organismo causados principalmente por algún tipo de alergia a agentes químicos o a otros estímulos. Neuropatía periférica : La neuropatía periférica significa que estos nervios no funcionan apropiadamente. Esta neuropatía puede ser un daño a un solo nervio o a un grupo de nervios. También puede afectar a los nervios en todo el cuerpo. Vértigos: El vértigo es una sensación ilusoria o alucinatoria de movimiento de los objetos que nos rodean o de nuestro propio cuerpo, por lo común, una sensación de giro. El vértigo suele deberse a un trastorno en el sistema vestibular. BIBLIOGRAFÍA Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-Médico. Madrid. España. 2010. WEBGRAFÍA Medline plus. Disponible en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article /002480.htm Disponible en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002480.htm Revisado por: BQF. Carlos García. Mg. Sc. Catedrático FIRMA
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ANEXOS
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