PUNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Liliana Carolina Vera riera Curso: Quinto Paralelo: A Grupo N°: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 12 Julio de 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 19 de Julio de 2016
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PRÁCTICA N° 5 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO. Animal de Experimentación: Cobayo Vía de Administración: Vía Parenteral. Objetivos de la práctica: 1. Observar la sintomatología del cobayo al ejercer su efecto el cloroformo. 2. Determinar el tiempo en el que actúa el tóxico para causar la muerte en el cobayo. 4. identificar mediante reacciones la presencia de cloroformo en las vísceras del animal.
MATERIALES Bata de laboratorio Equipo de destilación Mechero Guantes de látex Gorro Campana Zapatones Espátula Mascarilla Pipetas Erlenmeyer
SUSTANCIAS Acido tartárico Alcohol de 95ª Nitrato de plata Potasa alcohólica Percloruro de hierro Beta naftol Solución alcohólica concentrada de potasa Timol Resorsinol
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
Paá gina 1
Tubos de ensayo Vasos de precipitación Jeringuilla de 10cc Instrumentos de disección
Piridina Cristal de yodo Clorhidrato de piperacina Reactivo de Benedict
EQUIPOS
Balanza analítica
PROCEDIMIENTO 1) Tomar las medidas de bioseguridad y usar el EPP. 2) Tener los materiales listos en la mesa de trabajo. 3) Con la jeringuilla tomamos 10 ml de cloroformo e inyectamos al cobayo (vía parenteral). 4) Colocamos el cobayo en la campana. 5) Observamos la sintomatología que causa el tóxico en el animal de experimentación. 6) Esperamos el tiempo de defunción. 7) Una vez muerto el cobayo, se procede a amarrarlo en la tabla de disección. 8) Tomamos el bisturí y procedemos a rasurar al cobayo. 9) Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y con una jeringa aspirar la sangre. 10) Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de precipitación. 11) Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras. 12) Transvasamos a un balón y colocamos las perlas de vidrio, agregar además una pequeña cantidad de ácido tartárico y unos 3ml de agua destilada. 13) Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un Erlenmeyer. 14) Armar el equipo de destilación y poner las vísceras a destilar durante 30 minutos y con la ayuda de lámparas de alcohol calentar con movimientos circulares. 15) Finalmente, en el destilado se realizan las reacciones de identificación:
Reacción con alcohol y nitrato de plata. Reacción de dunas Reacción de Lustgarten Reacción de fujiwara Reacción de roseboom Reacción de Benedict
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
Paá gina 2
Reacciones:
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
Paá gina 3
1.-En un tubo de ensayo, se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras de alcohol al 95%, que contiene de nitrato de plata. Se inflama la mezcla y se observa que esta arde con una l ama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata. Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH O
ClK + HCO2K + H 2
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones. A una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.
2. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
Paá gina 4
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
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3. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.
4. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
5. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
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GRÁFICOS
ADMINISTRACION DEL TÓXICO
OBSERVAMOS SÍNTOMAS
DECESO
EN LA TABLA DE DISECCIÓN SE RASURA Y SE PROCEDE A ABRIR EL COBYAO PARA EXTRAER SUS ÓRGANOS
VÍSCERAS EN EL BALÓN
SE MIDE EL NaOH 20% DESTILA
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Reacción con alcohol y nitrato de plata: POSITIVO
Reacción de Dunas: POSITIVO
Positivo característico (timol)
Positivo característico (resorcina)
Reacción de Lustgarten: Positivo no característico (b naftol)
Reacción de Roseboom:
Reacción de benedict
OBSERVACIONES
En la realización de ésta práctica se pudo analizar la diversa sintomatología en el cobayo, entre ellos: perdida de actividad motora, estado de sueño profundo, hinchazón abdominal, e hipoxia. Observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboró para la presencia del tóxico (cloroformo) en el animal de experimentación.
CONCLUSIONES
Aprendimos a reconocer los síntomas provocados por el cloroformo luego de su administración en el animal de experimentación (cobayo).
Las reacciones de reconocimiento de este tóxico, entre ellas: la reacción con alcohol y nitrato de plata, reacción de dunas, reacción de Lustgarten, “Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
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reacción de Roseboom, reacción de Benedict, dieron resultados positivos característicos lo que nos indica que si hubo presencia de cloroformo en la muestra. RECOMENDACIONES
Asegurar el equipo para impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida.
GLOSARIO CLOROFORMO. Triclorometano. También llamado cloroformo o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no inflamable, incoloro, de olor dulzón. BETA NAFTOL. 2-Naftol, o β-naftol, es un sólido cristalino incoloro de fórmula C10H7OH, es un isómero de 1-naftol, que difieren según la ubicación el hidroxilo de naftaleno. Los naftoles son los homólogos del naftaleno de fenol, con el grupo hidroxilo más reactivo que en los fenoles. Ambos isómeros son solubles en alcohol, éter y cloroformo. Se pueden utilizar en la producción de tinta s en la síntesis orgánica. Por ejemplo, 2-naftol se hace reaccionar para formar 1,1'Binaftaleno-2,2'-diol. Es uno de los derivados de la naftalina más importantes, se parecen a los fenoles en sus propiedades químicas y tiene distintas aplicaciones en la industria química. TIMOL. El timol (2-isopropil-5-metilfenol) es una sustancia cristalina incolora con un olor característico que está presente en la naturaleza en los aceites esenciales del tomillo o del orégano, que se encuentra a la vez el cimeno y el timeno. PIRIDINA. Es un líquido incoloro de olor característico desagradable. Pertenece a la familia de los compuestos aromáticos heterocíclicos, y está estructuralmente relacionada al benceno, siendo la única diferencia entre ellos el reemplazo de un grupo CH del anillo bencénico por un átomo de nitrógeno
CUESTIONARIO ¿CUÁLES SON LAS PROPIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DEL CLOROFORMO? “Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
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El cloroformo es un líquido incoloro, volátil y no inflamable con un característico olor dulzón. Factor de conversión (20 o C, 101 kPa): 4,97 mg/m3 = 1ppm Peso molecular: 119,38 Fórmula molecular: CHCl3 Solubilidad: ligeramente soluble en agua, miscible con alcohol, éter, benceno, sulfuro de carbono y tetracloruro de carbono. Punto de fusión: –63 oC Punto de ebullición: 62 oC Presión de vapor: 21 kPa a 20 oC Densidad: 4,1 veces la del aire Límite de explosividad: – Umbral de olor: 20 ppm (100 mg/m3)
¿CUÁLES SON LOS USOS DEL CLOROFORMO?
Fue utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por
esta razón las personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores. En química se utiliza en la separación orgánica. En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión. Se utiliza en síntesis orgánica. Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente). En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química.
¿INDIQUE EL TRATATMIENTO PARA EL CLOROFORMO? En vista de que el cloroformo sufre conjugación mercaptúrica en su paso por el organismo, algunos autores proponen a la N-acetilcisteína como un posible tratamiento de las intoxicaciones con cloroformo. La N-acetilcisteína, por su capacidad de inhibir la formación de radicales libres generados por el cloroformo y sus metabolitos, ha presentado efectividad en algunos casos en el tratamiento de intoxicaciones por cloroformo, incluso combinado con otros antioxidantes naturales, como la vitamina E. BIBLIOGRAFÍA Julian, I. (2003). Quimica. En I. Julian, Diccionario de Quimica. Madrid: Editorial Complutense.
Torres, L. M. (2002). Metanol. En L. M. Torres, Cuidados Criticos y Emergencias. Madrid: Aran Ediciones. “Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis”
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WEBGRAFÍA http://www.ecured.cu/index.php/Piridina http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003040.htm http://www.slideshare.net/JorgePerez24/biologia-reacciones-quimicas FIRMA DE RESPONSABILIDAD
______________ Liliana Vera Riera
ANEXOS: 1: ¿Qué es el cloroformo? ¿Qué es el cloroformo? El cloroformo es un líquido incoloro de aroma agradable no irritante y de sabor ligeramente dulce. Se enciende espontáneamente cuando alcanza temperaturas muy altas. En el pasado, el cloroformo fue usado como anestésico en cirugía; en la actualidad tal uso se ha abandonado. Hoy en día, el cloroformo se usa para manufacturar otros productos químicos. Pequeñas cantidades de cloroformo se forman cuando se añade cloro al agua. También se le llama triclorometano y tricloruro de metilo.
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¿Qué le sucede al cloroformo cuando entra al medio ambiente?
Se evapora fácilmente al aire.
La mayor parte del cloroformo en el aire eventualmente se degrada, aunque este es un proceso lento.
Los productos de degradación en el aire incluyen fosgeno (oxicloruro de carbono) y ácido clorhídrico; ambos son tóxicos.
No se adhiere muy bien al suelo; por tanto, puede filtrarse a través del suelo hacia el agua subterránea.
El cloroformo se disuelve fácilmente en agua y parte puede degradarse a otros productos químicos.
Permanece largo tiempo en el agua subterránea.
El cloroformo no parece acumularse en grandes cantidades en plantas o en animales.
¿Cómo podría yo estar expuesto al cloroformo?
Tomando agua o bebidas manufacturadas usando agua contaminada con cloroformo.
Respirando aire interior o aire libre si el aire contiene cloroformo, especialmente en el trabajo.
Comiendo alimentos que contienen cloroformo.
Por contacto de la piel con cloroformo o agua que contiene cloroformo, por ejemplo, en piscinas.
¿Cómo puede perjudicar mi salud el cloroformo? Respirar cerca de 900 partes de cloroformo por millón de partes de aire (900 ppm) por corto tiempo puede causar mareo, cansancio y dolor de cabeza. Respirar aire, ingerir alimentos, o tomar agua que contiene suficiente cloroformo por largo tiempo puede dañar el hígado y los riñones. El contacto de la piel con grandes cantidades de cloroformo puede producir ulceración. No se sabe si el cloroformo produce efectos en el sistema reproductivo o si causa defectos de nacimiento en seres humanos. Estudios en animales han demostrado abortos en ratas y ratones que respiraron aire con 30 a 300 ppm de cloroformo durante la preñez y también en ratas que comieron cloroformo durante la preñez. Las crías de ratas y ratones que respiraron cloroformo durante la preñez nacieron con defectos de nacimiento. Espermatozoides anormales se encontraron en ratones que respiraron aire con 400 ppm de cloroformo por unos pocos días.
¿Hay algún examen médico que demuestre que he estado expuesto al cloroformo?
Aunque las cantidades de cloroformo en el aire que usted exhala y en la sangre, orina y tejidos corporales pueden medirse, no hay ningún examen fidedigno para determinar a cuanto cloroformo estuvo expuesto o para averiguar si la exposición al cloroformo le afectará la salud.
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La medición del cloroformo en fluidos y tejidos corporales puede ayudar a determinar si usted ha tenido contacto con grandes cantidades de cloroformo, pero estos exámenes sirven solo por corto tiempo después de la exposición. El cloroformo en el organismo puede también indicar que usted ha tenido contacto con otros productos químicos.
¿Qué recomendaciones ha hecho el gobierno federal para proteger la salud pública?
La EPA limita la exposición en agua potable al conjunto de metanos con tres halógenos, entre los que se incluye el cloroformo, a 100 microgramos por litro de agua (100 µg/L). La EPA requiere que se le notifique en casos de derrames o de liberación al medio ambiente de 10 libras o más de cloroformo. La Administración de Salud y Seguridad Ocupacional (OSHA) ha establecido una concentración permisible máxima de 50 ppm de cloroformo en el aire del trabajo durante una jornada de 8 horas diarias, 40 horas semanals.
2: Artículo científico
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