UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez”
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA Y MICROBIOLOGÍA, BOTÁNICA Y PARASITOLOGÍA, TOXICOLOGÍA Y FARMACIA PRÁCTICA #3 NOMBRE: Liliana Carolina Vera Riera DOCENTE: Dr. Carlos García CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 28/06/2016 CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” 1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR METANOL Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 5 ml de Alcohol Metílico. 2. OBJETIVOS:
Identificar l o s s í n t o m a s q u e presenta la rata Wistar tras la intoxicación producida por alcohol metílico. Determinar mediante reacciones la presencia de alcohol metílico en la muestra.
3. FUNDAMENTO TEÓRICO: El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos. Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpia cristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar. La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
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4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS: MATERIALES -Vasos de precipitación -Pipetas -Erlenmeyer -Tubos de ensayo -Probeta -Perlas de vidrio -Agitador -Embudo -Guantes -Mascarilla -Gorro -Mandil -Aguja hipodérmica 10 ml -Cronómetro -Estuche de disección -Panema -Agitador -Fosforo -Pinzas -Cocineta -Espátula -Gradilla
EQUIPOS -Aparato de destilación -Baño marí -Campana -Balanza
fvgfvvvrgvzfgzd estilación -Baño maría -Campana
SUSTANCIAS - Cloruro de fenilhidracina fghfenilhidracina -Nitroprusiato sódico sódico -Hidróxido de sodio -Hidróxido de sodio -HCl -Cloruro de fenil hidracina -Ferricianuro de potasio Ácido sulfúrico -Leche -Cloruro férrico -Sulfato ferroso -Ácido sulfúrico -Ácido clorhídrico
MUESTRA -Destilado de vísceras vvvvívícerasvísceras del animal de experimentación.
5. PROCEDIMIENTO:
Desinfectar el área de trabajo y limpiar los materiales a utilizar. Preparar una solución de formaldehido al 4%. Administrar 5 ml de metanol por vía intraperitoneal. Observar los efectos que produce en el animal. Se procede a cortar el animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 ml ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. Con aproximadamente 15 ml del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 6.1 Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas pág. 2
de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 6.2 Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 6.3 Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. 6.4 Reacción de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. 6.5 Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6.6 Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. 7. GRÁFICOS:
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8. RESULTADOS OBTENIDOS.
8.1 Reacción de Schiff: positivo
8.2 Reacción de Rimini: positivo
8.4 Reacción de Marquis: positivo
8.5 Con el Ácido Cromotrópico: positivo
8.3 Con la Fenilhidracina: Positivo
8.6 Reacción de Hehner: positivo
9. OBSERVACIONES Al administrar el tóxico el animal (rata Wistar) presentó cierta inmovilidad, depresión del SNC y a los tres minutos se le cayeron las orejas, pero permanecía estable. A los siete minutos su respiración disminuyó y luego ya no respondió a estímulos oculares. 10. CONCLUSIÓNES Se llevó a cabo la administración de alcohol metílico en el animal de experimentación (rata wistar) y se observó los movimientos acelerados y torpes (nistagmos) de sus glóbulos oculares, tras este síntoma convulsiona y muere. Así mismo por medio de las reacciones de identificación de identifico el metanol proveniente del destilado de las vísceras del animal. 11. RECOMENDACIONES
Realizar asepsia en el área donde se trabaja, antes y después. Utilizar EPP. Aplicar normas de bioseguridad.
11. FIRMA DE RESPONSABILIDAD
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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez”
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE BIOQUÍMICA Y MICROBIOLOGÍA, BOTÁNICA Y PARASITOLOGÍA, TOXICOLOGÍA Y FARMACIA PRÁCTICA #4 NOMBRE: Liliana Carolina Vera Riera DOCENTE: Dr. Carlos García CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 28/06/2016 CURSO: Quinto Año PARALELO: “A” 1. TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR ETANOL Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 5 ml de Alcohol Metílico. 2. OBJETIVOS:
Identificar l o s s í n t o m a s q u e presenta la rata Wistar tras la intoxicación producida por alcohol etílico. Determinar mediante reacciones la presencia de alcohol etílico en la muestra.
3. FUNDAMENTO TEÓRICO: El etanol, uno de los derivados de la caña de azúcar más conocidos, se encuentra hoy en pleno apogeo en Cuba, pues además de su uso para elaborar bebidas, se investigan sus cualidades como combustible alternativo. En efecto, mientras en el archipiélago se utilizan decenas de miles de litros para fabricar alcoholes y también aguardientes, los Ministerios del Azúcar (MINAZ) y del Transporte (MITRANS) realizan estudios y trabajos conjuntos destinados a desarrollar su empleo para mover vehículos.
4. OBJETIVOS:
Observar la reacción que presenta el animal ante el tóxico. Determinar las reacciones de reconocimiento la presencia de alcohol etílico.
4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS: MATERIALES:
Guantes de látex Mascarilla Mandil Bisturí Equipo de disección Cinta Vaso de precipitación Erlenmeyer Equipo de destilación Jeringuilla de 10 cc. Tubos de ensayo Pipetas Cronómetro
SUSTANCIAS:
Ácido tartárico Etanol NaOH
5. PROCEDIMIENTOS:
Desinfectar el área de trabajo. Y tener los materiales listos. Preparar la solución problema. Administrar al animal 10 ml de etanol por vía peritoneal. Colocar a la rata en el panema. Observar la sintomatología que presenta. Tomar el tiempo cuando muere. Se debe rasurar al animal para poder hacer los cortes y extraer sus vísceras. Realizar el destilado y armar el equipo. Tomar el destilado y realizar las reacciones de reconocimiento.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 6.1 Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
6.2 Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 6.3 Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. 6.4 Reacción de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. 6.5 Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6.6 Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. 7. GRÁFICOS:
8. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
Reacción de Schiff: positivo
Reacción de Rimini: positivo
Ácido cromotrópico: positivo
Fenilhidracina: positivo
Reacción de Hehner: negativo
9. OBSERVACIONES Se observó que al momento que se le administro el toxico al cobayo este sufrió rápidamente una sintomatología como cefalea, convulsiones y una respiración lenta, aunque su muerte no se produjo al instante. 10. CONCLUSIONES Al finalizar la práctica concluimos que el etanol es un toxico letal en la dosis establecida ya que le causó la muerte al cobayo, aunque su efecto fue un poco lento, pero este tuvo una sintomatología al poco tiempo de su administración. 11. RECOMENDACIONES Utilizar la vestimenta adecuada para protegernos de cualquier accidente con algún toxico. Armar correctamente el equipo de destilación sellando bien en las uniones para que se realice bien la destilación.
12. CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son los primeros auxilios si hubiese contacto con etanol? Ingestión: Enjuagar la boca. Si el paciente está consciente dar de beber agua o leche que se desee. Si el paciente está inconsciente no provocar el vómito y mantener en posición lateral de seguridad. Requerir asistencia médica. Inhalación: Trasladar a la víctima a un lugar ventilado. Mantener en reposo y abrigado. Aplicar respiración artificial en caso de insuficiencia respiratoria. Solicitar asistencia médica. Contacto la piel: Quitar las ropas contaminadas. Lavar con agua abundante el área afectada. Requerir asistencia médica en caso de irritación persistente. Contacto con los ojos: Lavar con abundante agua durante 15 minutos, manteniendo los párpados abiertos. Acudir al oftalmólogo en caso de irritación persistente.
2. ¿Cuáles son las propiedades del etanol y su estabilidad? PROPIEDADES FISICO-QUÍMICAS
Estado físico: Liquido Color: Incoloro Punto de fusión: -117 ºC Temperatura de inflamación: 13 ºC Olor: Característico Punto de ebullición: 79 ºC Solubilidad: Miscible Temperatura de autoignicción: 363 ºC
ESTABILIDAD Y REACTIVIDAD Estabilidad: estable en condiciones normales de almacenamiento. Fuentes a evitar: Calor y humedad. Reacciona violentamente con oxidantes fuertes tales como, ácido nítrico o perclorato magnésico, originando peligro de incendio y explosión. 13. BIBLIOGRAFÍA O WEBGRAFÍA
www.t3quimica.com http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002680.htm http://www.drmoscoso.com/etanol.html http://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/99967-eetanol.pdf
14. FIRMA
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