UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD ESCUELA DE BIOQUIMUCA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGIA
NOMBRE: Chávez Ibañez Maria DOCENTE: Bioq. Farm. García Carlos Msc. CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: Martes, 21 de junio del 2016 FECHA DE ENTREGA: Martes, 28 de Junio del 2016 CURSO: Quinto PARALELO: ¨A¨ GRUPO: 2 INTOXICACIÓN POR ETANOL
PRÁCTICA N° 4
SINTOMAS
o Ceguera o Nistagmos o Convulsiones OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA o Observar que sintomatología presenta el cobayo ante la intoxicación por Etanol. o Realizar las reacciones químicas correspondientes para verificar la presencia de Etanol.
MATERIALES: o o o o o o
Soporte de hierro Pinza de nuez Vaso de precipitación 250ml Matraz Erlenmeyer 250ml Equipo de decisión Bisturí
Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
10
o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o
Mangueras Balón de destilación Agitador Mechero de alcohol Tabla de disección Panema Cronometro Jeringa de 10ml Probeta de 50ml Refrigerante Cinta de embalaje Aro de hierro Fosforo Piola Pipetas Pinza para tubos Funda plástica Perlas de vidrio Tubos de ensayos Mandil Mascarilla Guantes de látex
SUSTANCIAS: o o o o o o o o o o o o o
Agua destilada Cloruro de fenilhidracina 4 % Nitroprusiato de sodio 2,5 % Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1N Leche Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4) Cloruro férrico ( Cl3Fe ) Ácido clorhídrico (HCl) Hidróxido de potasio 12 % (KOH) K3Fe(CN)6 Formol Aceite mineral Ácido tartárico Etanol
PROCEDIMIENTO 1. Desinfectar el área de trabajo y previamente tener todos los materiales a utilizarse limpios y secos. 2. Preparamos la solución problema 3. Administramos 10 ml. de etanol por vía peritoneal 4. Seguidamente se coloca el cobayo en el panema. 5. Observar que sintomatología presenta el cobayo ante la intoxicación por metanol y tomar en cuenta el tiempo en que muere. 6. Una vez el cobayo muerto lo trasladamos a la taba de disección previamente se coloca una funda sobre la tabla para evitar contaminación alguna 7. Se debe cuidadosamente amarar sus extremidades con ayuda de unas piolas en los extremos de la tabla para facilitar abrir al cobayo. 8. Raspamos el área donde se realizara el corte y después con cuidado se procede abrir el cobayo . 9. Observamos detenidamente todos los órganos que han sido afectados por la intoxicación del etanol. 10. Colocando las vísceras afectadas, en un vaso de precipitación, procediendo a picar lo más fino posible 11. Añadimos un acidulante, previamente preparado (2 gr AC. Tartárico 2% +50ml H2O destilada y agitamos) en la muestra (vísceras) y en matraz colocamos 20ml NaOH 0.1N en el cual se recogió los vapores de etanol, emitidos tras la destilación efectuada. 12. Se arma el equipo de destilación correctamente. 13. Abrimos la llave para que empiece el proceso de destilación por 30 minutos 14. Al terminar el proceso de destilación se procede a realizar las reacciones químicas pertinentes para la detectar etanol.
Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
15. Una vez concluida la práctica se limpia y desinfecta la área donde se trabajó ya que puede causar contaminación debido a restos que se hayan regado durante la práctica, dejar todos los materiales limpios y los reactivos empleados bien cerrados, ordenados donde corresponde. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: 1. Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 3. Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella. 5. Con el Ácido Cromotrópico: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6. Reacción de Hehner: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta GRÁFICOS:
1. Preparamos los 10ml que vamos a inyectar
2. Inyectamos al cobayo vía intraperitoneal
3. se realiza la disección al cobayo
Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
5. se añaden 25ml de solución de ácido tartarico
4. se separa las vísceras afectadas y fluidos
7. Se añaden las 50 perlas de vidrio
6. se transvasa a un balón para posterior destilación.
8. Se monta el equipo de destilación y se destila.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: 1) REACCIÓN DE SHIFF:
Reacción
Positivo característico
violeta
2) REACCIÓN DE RIMINI:
Reacción
positivo característico
azul intenso
Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
3) CON LA FENIL HIDRACINA: 1. Reacción
positivo característico
Coloración rojo
grosella
4) CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO:
Reacción
positivo característico
5) REACCIÓN DE HEHNER:
Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
rojo
Reacción
positivo característico
violeta
OBSERVACIONES o En la realización de ésta práctica al haber administrado los ml de etanol por vía peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del animal después de 50 minutos, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicación con etanol. o Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del etanol (toxico) en el cobayo. CONCLUSIONES En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del toxico (etanol) al organismo de un animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de etanol en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta práctica. RECOMENDACIONES o Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación. o Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla. o Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. o Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. o Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida o Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica. Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
CUESTIONARIO: 1. Cuál es la Toxicología del etanol? Impide la coordinación correcta de los miembros, pérdida temporal de la visión. Puede afectar al sistema nervioso central provocando mareos, somnolencia, confusión, estados de euforia, pérdida temporal de la visión. En ciertos casos se produce un incremento en la irritabilidad del sujeto intoxicado como también en la agresividad; en otra cierta cantidad de individuos se ve afectada la zona que controla los impulsos, volviéndose impulsivamente descontrolados y frenéticos. Finalmente, conduce al coma y puede provocar la muerte. 2. Cuáles son las sinonimias del Etanol? Alcohol etílico Metilcarbinol Alcohol potable. 3. Cuáles son los tipos de contacto con Etanol? Ingestión del Etanol
Síntomas en caso de ingestión: Confusión, vértigo, somnolencia, dolor de cabeza y pérdida de conocimiento. Inhalación del Etanol
Síntomas en caso de inhalación: tos, dolor de garganta, somnolencia y dolor de cabeza. Piel del Etanol: Síntomas en caso de contacto con piel: piel seca. Ojos del Etanol: Síntomas en caso de contacto con ojos: Enrojecimiento y dolor.
GLOSARIO: Azeótropo (o mezcla azeotrópica) es una mezcla líquida de dos o más compuestos químicos que hierven a temperatura constante y que se comportan como si estuviesen formadas por un solo componente. Sidra.- Es una bebida alcohólica de baja graduación (desde menos del 3 % en vol. en el caso de la sidra doux francesa, hasta un máximo del 8 % en vol.) fabricada con el zumo fermentado de la manzana. Frenetico.- Que muestra una exaltación violenta del ánimo.
Todo es veneno nada es veneno, todo depende de la dosis
Ácido cromotrópico.orgánico de fórmula(HO)2C10H4(SO3H)2, naftaleno dissulfonado e diidroxilado.
Es un
un compuesto derivado do
Concentración sérica.- La concentración es aquella que una sustancia tiene en el suero sanguíneo de un individuo. si es 60% sería que 60 gramos de sustancia hay en 100 ml de plasma. Sustrato.- Es la superficie en la que una planta o un animal vive. El sustrato puede incluir materiales bióticos o abióticos. BIBLIOGRAFIA: o Sousa G. Metanol y Etanol.2009. . (Consultado el 25 de junio del 2014). Disponible: o http://profesores.fi-b.unam.mx/l3prof/Carpeta%20energ%EDa%20y %20ambiente/MetanolEtanol.pdf o Cardona C. Simulación de los Procesos de obtención de Etanol a partir de caña de azúcar y maíz.2000. (Consultado el 25 de junio del 2014). Disponible: http://revistas.utp.edu.co/index.php/revistaciencia/article/viewFile/6859/4 011
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