UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN SISTEMA NACIONAL DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN
LABORATORIO DE BIOLOGÍA # 8 Tema: Extracción Casera del ADN. Objetivo: Observar sin ayuda de ningún instrumento óptico, el ADN, utilizando materiales caseros cuyo costo no es alto. Materiales:
Sustancias:
Licuadora.
Enzimas (Jugo de piña).
Recipiente de vidrio.
Etanol CH3 OH
Vaso de precipitación.
Cloruro de Sodio NaCl.
Tubo de ensayo.
Detergente líquido.
Cuchillo.
Hígado de pollo.
Tabla de picar.
H2O
Agitados de vidrio. Gráficos:
Procedimientos: 1. Debemos cortar en pequeños trozos el hígado de pollo, luego lo colocamos en la licuadora y vertemos una taza de agua con una pizca de sal y licuamos durante 15 segundos. Finalmente, la mezcla resultante se filtra para eliminar cualquier partícula de gran tamaño.
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2. Luego vertemos el licuado en el vaso de precipitación y le agregamos dos cucharitas de detergente líquido y revolvemos suavemente con la ayuda de una cuchara sin formar espuma. Dejamos reposar durante 5 a 10 minutos. Sería conveniente que probaras con distintos detergentes ya que algunos no funcionaran tan bien como otros. Finalmente colocamos la mezcla en tres tubos de ensayo. 3. Añadimos una pizca, o cucharada de enzimas a cada envase y revolvemos con cuidado y lentamente por unos 5 minutos. Si mezclamos con demasiada rapidez o con mucha fuerza se corre el peligro de romper el ADN, con lo que no podríamos observarlo. 4. Inclinamos el envase de la mezcla y vertimos muy lentamente el alcohol en una proporción igual a la que hay de mezcla, de modo que se forme una capa sobre la misma. 5. Luego de unos minutos e podrá observar unos filamentos blancos dentro del alcohol, detergente y enzimas. Puedes retirarlo con la ayuda de un palillo. En este caso las proteínas y la grasa se quedan en la parte acuosa de la mezcla y el ADN asciende hasta llegar al alcohol. Observaciones: Observamos unos filamentos blancos dentro del alcohol y que se elevan de la mezcla del hígado, detergente y enzimas. En este caso los filamentos blancos representan el ADN.
Conclusiones: El agua con una pizca de sal es una mezcla isotónica. Es para lo que se va a sacar del hígado de pollo sufra lo menos posible. Es la licuadora se separan las células unas de otras, en esto ayuda también el detergente. Las enzimas, jugo de piña, suavizados de carne, cortan las proteínas y destruyen a las células, ya que se trata de romper lo que hay dentro de las mismas, dejando intacto el ADN y al añadir el alcohol se consigue separar el ADN, que tiene más afinidad con el alcohol que con el agua, lo que hace posible ver el ADN.
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Recomendaciones: Usar mandil Filtrar la mezcla, para eliminar partículas de gran tamaño Revolver suavemente la mezcla Probar el experimento con varios suavizantes Mezclar lentamente para evitar que se rompa el ADN Cuestionario: Investiga porque el jugo de piña actúa como una enzima. Las enzimas son unas sustancias que atacan a las proteínas de las células, lo que permite romperlas y separarlas del ADN, que es el material que buscamos. Si no disponemos de enzimas, podemos utilizar zumo de piña (el cual contiene papaína, sustancia que degrada las proteínas). ¿Porque utilizamos alcohol para separar el ADN de las células? El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.
Bibliográfica: Bioquímico. Carlos García MsC.
Wedgrafia: http://www.neoteo.com/extraccion-casera-de-adn-15213/
Autoría: Diana Godos.
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