Practica toxi etanol 4

UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR

UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGIA, BOTANICA Y PARASITOLOGÍA, TOXICOLOGIA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Nombre: Howard Salamea Liria Mishel Profesor: B.Q.F. Carlos García Curso: 5 to año Paralelo: “A” Grupo: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 21 de Junio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 28 de Junio del 2016 PRACTICA BF.5.09-04

10

TEMA: INTOXICACIÓN POR ETANOL Animal de Experimentación

Rata wistar

Tóxico:

Etanol

Vía de Administración:

Vía Intraperitoneal

Via de administracion

10 ml de etanol

Convulsión

SÍNTOMAS

secreción ocular presencia de orina

TIEMPOS Inicio de la práctica:

8:00am

Hora de administración del toxico al cobayo:

8:30 am

Deceso del animal:

9: 00 am

Inicio de la destilación:

9:20 am

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 1

Finalización de la destilación:

10:00 am

Final de la práctica:

10:30 am

OBJETIVO DE LA PRÁCTICA  

Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación por etanol.

Determinar mediante varias pruebas de identificación la presencia del etanol en el cobayo.

MATERIALES:

SUSTANCIAS:

 Jeringuilla de 10cc

 Agua destilada

 Campana

 Etanol

 Cronómetro

 Permanganato de potasio

 Equipo de disección

 Ácido sulfúrico puro

 Tabla de disección

 Sol. saturada de ácido oxálico

 Bisturí

 Reactivo de Schiff

 Vaso de precipitación

 Cloruro de fenilhidracina al 4%

 Erlenmeyer

 Nitroprusiato de sodio al 2,5%

 Equipo de destilación.

 Sol. de hidróxido de sodio

 Tubos de ensayo

 Ácido clorhídrico

 Pipetas

 Cloruro de fenilhidracina

 Guantes de látex

 Ferricianuro de potasio

 Mascarilla

 Hidróxido de potasio al 12%

 Mandil

 Ácido cromotrópico

 Balanza  Probetas

 Leche  Cloruro férrico Diluyente

 Mechero de alcohol  Perlas de vidrio

FUNDAMENTO El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de euforia.

Al mismo tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas ralentiza los

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 2

movimientos, impide la coordinación correcta de los miembros etc. Finalmente conduce al coma y puede provocar la muerte.

Para investigar el alcohol en medios biológicos, se somete la muestra a una destilación con arrastre de vapor con las consideraciones ya establecidas anteriormente.

Una vez obtenido el destilado, una pequeña porción es separada y se la agrega a una solución de cromato de potasio; se adiciona a la mezcla ácido sulfúrico puro en condiciones que se formen 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las 2 capas; en caso de existir alcohol se debe producir una coloración azul verdosa en el punto de unión de las dos capas.

PROCEDIMIENTO 1. A continuación se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Con la jeringuilla tomamos 10 ml de etanol e inyectamos al cobayo (vía parenteral) 3. Colocamos el cobayo en la campana 4. Observar la sintomatología del toxico en el animal de experimentación.

5. Esperamos el tiempo de defunción.

6. Una vez muerto el cobayo se procede a amarrarlo en la tabla de disección.

7. Tomamos el bisturí # 11 y lo colocamos en el soporte de bisturí y procedemos a

rasurar al cobayo.

8. Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presión sobre las costillas y con una jeringa aspirar la sangre.

9. Retirar los órganos sin excepción de uno y los colocamos en un vaso de precipitación.

10. Luego procedemos a trocear muy fino los órganos con unas tijeras.

11. Transvasamos a un balón y colocamos las perlas de vidrio, agregar además una pequeña cantidad de ácido tartárico y unos 3ml de agua destilada.

12. Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer.

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 3

13. Armar el equipo de destilación y poner las vísceras a destilar durante 30 minutos y con la ayuda de lámparas de alcohol calentar con movimientos circulares.

14. Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de identificación:  Reacción de SCHIFF  Reacción de RIMINI  Reacción con la fenilhidracina  Reacción con el Ac.Cromotropico  Reacción de HEHNER

REACCIONES: 1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al 1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3 minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir 1ml de Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff).

Produce un color violeta intenso si es positivo.

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 4

2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una coloración azul intensa si es positivo.

3. Con la fenilhidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 3 gotas de solución de ferrocianuro de potasio al 5%, posterior a esto añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo grosella en caso de ser positivo.

4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido cromotrópico+ 3 gotas de ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de calentarla a la llama si es positivo.

5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul violeta si es positivo.

GRÁFICOS

1) Preparamos los 10ml que vamos a inyectar

2) Inyectamos al cobayo vía intraperitoneal

4) se separa las vísceras afectadas y fluidos

5) se añaden 25ml de solución de ácido tartarico

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

3) se realiza la disección al cobayo

6) se transvasa a un balón para posterior destilación.

Página 5

7) Se añaden las 50 perlas de vidrio

8) Se monta el equipo de destilación y se destila.

9) al destilado se le agregan 10 g de dicromato de potasio y 10 a 20 ml de ac. Sulfúrico hasta que la solución cambie a un color negro

10) se realizan las reacciones de reconocimiento.

REACCIONES 

Reacción de Schiff Reacción

ANTES

Positivo

coloración violeta

DESPUÉS

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 6



Reacción de Rimini Reacción

Positivo

Coloración azul intensa

ANTES 

DESPUÉS

Reacción con Fenilhidracina Reacción

positivo

Coloración Rojo Grosella

ANTES 

DESPUÉS

Reacción con el Ácido cromotrópico

Reacción

Positivo

coloración roja

ANTES

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

DESPUÉS

Página 7



Reacción de Hehner Reacción

Positivo

Coloración rojo violeta

ANTES

DESPUÉS

OBSERVACIONES  En la realización de ésta práctica al haber administrado los ml de etanol por vía peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del animal después de 50 minutos, durante su agonía presentó mareos, perdida de la visión, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicación con etanol.  Es importante mencionar que a través de la aplicación de las reacciones de identificación en medios biológicos, observamos la coloración de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del etanol (toxico) en el cobayo.

CONCLUSIONES En la realización de esta práctica de esta práctica se aprendió a reconocer los efectos o síntomas provocados por la administración del toxico (etanol) al organismo de un animal de experimentación, así como también hemos identificado la presencia de etanol en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta práctica.

RECOMENDACIONES  Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación.

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 8

 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla.  Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.  Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.  Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida  Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica.

GLOSARIO ETANOL El etanol, uno de los derivados de la caña de azúcar más conocidos, se encuentra hoy en pleno auge en Cuba, pues además de su uso para elaborar bebidas, se investigan sus cualidades como combustible alternativo.

Es el alcohol que se encuentra en bebidas como la cerveza, la sidra, el Vino y el brandy. Debido a su bajo punto de congelación, ha sido empleado como fluido en termómetros para medir temperaturas inferiores al punto de congelación del mercurio, -40 °C, y como anticongelante en radiadores de automóviles.

MAREO El mareo es un término que a menudo se utiliza para describir dos síntomas diferentes: sensación de mareo y vértigo. El mareo es una sensación como que uno se podría desmayar.Un mareo se presenta cuando al cerebro no está llegando suficiente sangre, lo cual puede suceder si:   

Se presenta una disminución repentina en la presión arterial.

Su cuerpo no tiene suficiente agua (deshidratado) a causa del vómito, la diarrea, la fiebre y otras afecciones.

Usted se levanta demasiado rápido después de sentarse o acostarse (esto es más común en personas mayores).

AGONÍA La agonía se caracteriza habitualmente por un largo deterioro general, marcado por episodios de complicaciones y efectos secundarios como sucede en algunos casos de cáncer. En general, durante el mes anterior a la muerte disminuyen de forma sustancial la energía, la actividad y el bienestar. Se observa un visible debilitamiento del paciente y para todos resulta evidente que la muerte se aproxima.

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 9

TÓXICO Es una complicación potencialmente mortal de otras afecciones intestinales que ocasiona un ensanchamiento (dilatación) del intestino grueso en cuestión de 1 hasta unos cuantos días. El megacolon tóxico ocurre como una complicación de una enfermedad intestinal inflamatoria, como la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn e infecciones del colon. El término "tóxico" significa que esta complicación ocurre con infección o inflamación y es muy peligrosa.

INTOXICACIÓN Una intoxicación es la entrada de un tóxico en el cuerpo en cantidad suficiente como para producir un daño. Entendemos por tóxico aquella sustancia que cuando se encuentra en una determinada concentración en el organismo de los seres vivos provoca un daño. No se debe confundir una intoxicación con una reacción alérgica, ya que ésta va a depender de una reacción exagerada del organismo ante un agente que no necesariamente es dañino. El grado de intoxicación dependerá tanto de la cantidad de veneno/tóxico ingerido como de las características propias de la persona (edad, peso, obesidad…).

CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles son las sinonimias del Etanol?

Alcohol etílico Metilcarbinol Alcohol potable.

2. ¿Cuáles son los tipos de contacto con Etanol?  Ingestión del Etanol Síntomas en caso de ingestión: Confusión, vértigo, somnolencia, dolor de cabeza y pérdida de conocimiento.  Inhalación del Etanol Síntomas en caso de inhalación: tos, dolor de garganta, somnolencia y dolor de cabeza.  Piel del Etanol Síntomas en caso de contacto con piel: piel seca.

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 10

 Ojos del Etanol Síntomas en caso de contacto con ojos: Enrojecimiento y dolor.

3. ¿Cuáles son los primeros auxilios en caso de contacto con Etanol?

1)Inhalación: respirar aire fresco, reposo, de ser necesario respiración artificial y atención médica inmediata.

2)Ingestión: No provocar vómito y si la persona esta consciente dar a beber agua, llamar a un médico de manera inmediata.

3)Contacto con piel: quitar la ropa contaminada y lavar con abundante agua, pedir asistencia médica si los síntomas empeoran.

4) Contacto con los ojos: lave con cuidado (de tener lentes de contacto, quitarlos), no poner ninguna sustancia sin indicación del médico, pedir asistencia médica aún en ausencia de síntomas.

4. ¿Cuáles son las propiedades físico-químicas del Etanol?

Estado físico: Liquido Color: Incoloro Punto de fusión: -117 ºC Temperatura de inflamación: 13 ºC Olor: Característico Punto de ebullición: 79 ºC Solubilidad: Miscible Temperatura de autoignicción: 363 ºC

BIBLIOGRAFÍA y WEBGRAFÍA Fundamentos de toxicología, Editorial: McGraw-Hill, Edición: 1a ED.2005  Etanol.2014 EcuRed de: http://www.ecured.cu/index.php/Etanol  Biblioteca de recursos. Agoníar. MSD salud de: https://www.msdsalud.es/manual-merck-hogar/seccion-1/muerteagonia.html  Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Mareo, MedlinePlus de: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003093.htm  Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU. Tóxico, “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 11

MedlinePlus de: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000248.htm  Tu centro médico online. Intoxicacion, Webconsultas , 2014 de: http://www.webconsultas.com/salud-al-dia/intoxicaciones/intoxicacion10743 AUTORIA Bioq. Farm. García Carlos MSc.

Machala, 28 de Junio del 2016

FIRMAS DE RESPONSABILIDAD

___________________________________ MISHEL HOWARD SALAMEA

“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”

Página 12