UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGIA, BOTANICA Y PARASITOLOGÍA, TOXICOLOGIA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Nombre: Howard Salamea Liria Mishel Profesor: B.Q.F. García Carlos Curso: 5 to año Paralelo: “A” Grupo: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 19 de Julio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 26 de Julio del 2016 PRACTICA BF.5.09-07
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TEMA: INTOXICACIÓN POR PLOMO
Animal de Experimentación
Rata wistar
Tóxico:
plomo
Vía de Administración:
Vía Intraperitoneal
Cantidad de administración
10 g de plomo
Ceguera
SÍNTOMAS
Nistagmas Convulsiones Vomito
“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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TIEMPOS Inicio de la práctica:
8:00am
Hora de administración del toxico al cobayo:
8:30 am
Deceso del animal:
9: 00 am
Inicio de la destilación:
9:20 am
Finalización de la destilación:
10:00 am
Final de la práctica:
10:30 am
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Determinar la presencia del toxico, en este caso del metanol en el animal de experimentación, con las respectivas reacciones de identificación. 2. Observar los principales efectos que el animal de experimentación sufre luego de la intoxicación. FUNDAMENTO Las comidas como frutas, vegetales, carnes, granos, mariscos, refrescos y vino pueden contener grandes cantidades significantes de plomo. El humo de los cigarros también contiene pequeñas cantidades de plomo. El plomo es uno de los 4 metales que tienen un mayor efecto dañino sobre la salud humana. Este puede entrar en el cuerpo humano a través de la comida (65%), agua (20%), y aire (15%). El plomo ocurre de forma natural en el ambiente, pero las mayores concentraciones que son encontradas en el ambiente son el resultado de las actividades humanas. El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizaran las reacciones de identificación que a continuación se detallan
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MATERIALES
VIDRIO: -Vasos de precipitación -Pipetas -Erlenmeyer -Tubos de ensayo -Probeta -Perlas de vidrio -Agitador -Embudo OTROS -Guantes -Mascarilla -Gorro -Mandil -Aguja hipodérmica 10 mL -Cronómetro -Estuche de disección -Panema -Agitador -Fosforo -Pinzas -Cocineta -Espátula -Gradilla
SUSTANCIAS - KOH -Ácido acético -Cromato de potasio -Yoduro de potasio -Di fenil tío carbazona -Ácido Sulfúrico -Cloruro Estannoso -Nitrato de Cadmio -Solución Amoniacal -Peróxido EQUIPOS de hidrógeno 3% -Bencidina -Aparato de destilación -NaOH -Balanza -HCl -Baño maría -K4CLO -Campana
PROCEDIMIENTO Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Diluir 10g de Nitrato de plomo Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10g de Nitrato de plomo previamente diluidos. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar Ácido clorhídrico 20 ml y perlas de vidrio. Destilar, recoger el destilado en Clorato de potasio 4 g.
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Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
Luego de terminada la destilación, se procede a realizar las reacciones de reconocimiento
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Con el cromato de potasio: se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o en una capsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un precipitado amarillo0 de cromato de potasio. Pb(NO3)2 + K2CrO
CrO4Pb + 2KNO3
Con el yoduro de potasio: con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo cristalino de I2Pb soluble en caliente con agua y precipitable en frio como agujillas amarillas. Pb(NO3)2 + 2IK
PbI2 + 2KNO3
Con la Difenil tío carbazona: esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono, al reaccionar con el plomo produce un color rojo. Con el ácido sulfúrico: en una solución diluida, produce un precipitado blanco de sulfato de plomo, este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se disuelva el precipitado produce un color anaranjado. Con el tetrametildiaminodifenilmetano: es una solución acética. Para realizar esta reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de peróxido de hidrogeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gotas de la solución muestra; el papel filtro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta en baño, maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar el plomo como oxido de plomo. Así, se hace caer sobre el papel una gota de reactivo cerca de la zona donde se dejó caer las gotitas de la muestra. En caso positivo, en el punto de contacto aparece un color azul por la formación de hidrosol respectivo. Con la bencidina: a 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta la que mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade ½ ml de peróxido de hidrogeno al 3% se hierve cuando momento, se separa y lava el precipitado (por centrifugación o filtración) con agua y finalmente se añaden gotas de bencidina sobre el precipitado. Un color azul nos indica la presencia de plomo
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GRÁFICOS:
RESULTADOS OBTENIDOS 8.1 Cromato de potasio: positivo
8.2 Yoduro de potasio: positivo
8.3 Difenil tío Carbazona: positivo
8.4 Ácido Sulfúrico: positivo
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8.1 Reacción de Nessler: positivo
8.3 Reacción de Fritsh: positivo
8.2 Reacción de Yodoformo: positivo
8.4 Reacción de Frommer: positivo
OBSERVACIONES Hemos observado que al administrar el toxico (metanol) por vía intraperitoneal el cobayo presentó cierta inmovilidad, depresión del SNC, a los 3 minutos se le cayeron las orejas pero permanecía estable, a los 7 minutos el ritmo respiratorio disminuyo, a los 11 minutos no responde a estímulos oculares, con la sobredosis que se le fue administrado murió inmediatamente a los 70 minutos. Presentó necropsia de las vísceras. CONCLUSIONES Se llevó a cabo la administración de plomo a la rata Wistar y se pudo observar la sintomatología que es similar a la presentada en las personas tras una intoxicación por plomo, así mismo mediante las reacciones cualitativas se identifica el plomo proveniente del destilado de las vísceras del animal
RECOMENDACIONES Realizar la asepsia del área a trabajar. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones. Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del toxico.
CUESTIONARIO 1. ¿Qué es el plomo? El plomo es un metal altamente tóxico, presente en el ambiente en forma natural, utilizado durante muchos años en productos domésticos. 2. ¿Dónde suele haber plomo en las viviendas? a. Pintura: Muchas viviendas construidas antes de 1978 tienen pintura con plomo. El plomo servía para intensificar el color y para que la pintura durara más en la pared. En 1978 el gobierno federal prohibió el uso en viviendas de pintura hecha a base de plomo. El plomo puede encontrarse: En casas de la ciudad, el campo o los suburbios. En departamentos, viviendas unifamiliares y en viviendas privadas y públicas. Dentro y fuera de la casa. b. Suelo: En el suelo alrededor de la vivienda. El plomo se deposita en el suelo proveniente de la pintura para exteriores u otras fuentes como la gasolina con plomo que se usaba antes en los autos. c. Polvo: En el polvo acumulado en la vivienda. El plomo puede depositarse en el polvo proveniente de pintura con plomo descascarada o de la tierra que llevan al hogar en su calzado las personas que ingresan. d. Agua: En el agua potable. Las cañerías de su casa pueden contener plomo. Llame al departamento de salud o empresa de servicios de agua local para averiguar cómo pueden analizar el agua para detectar si tiene plomo. El plomo no se puede ver ni oler ni tiene sabor, y hervir el agua no sirve para eliminar el plomo. 3. ¿Se puede prevenir la intoxicación por plomo? a. La intoxicación por plomo se puede evitar totalmente. Lo importante es lograr que los niños no entren en contacto con el plomo. Usted puede ayudar a proteger a sus hijos de la intoxicación por plomo de las siguientes maneras: Lave los pisos y las superficies con frecuencia, y lave a menudo las manos del niño, los chupetes o chupones y los juguetes para reducir la exposición al plomo. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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Use sólo agua fría corriente para beber, cocinar y hacer la leche para el bebé. Siempre deje correr el agua durante 1 minuto antes de beberla, en especial si no usa el agua desde hace varias horas. El agua caliente tiene más probabilidades de contener niveles más altos de plomo. La mayoría del plomo contenido en el agua de las viviendas suele provenir de las cañerías de la casa, no del abastecimiento local de agua. Evite usar remedios caseros para tratar enfermedades, y cosméticos que contienen plomo. Si su empleo o sus pasatiempos implican trabajar con productos a base de plomo, tome medidas básicas para disminuir la exposición al plomo (por ejemplo, dúchese y cámbiese la ropa después de terminar la tarea). Si tiene planes de remodelar una construcción hecha antes de 1978, es mejor contratar a un profesional para que haga el trabajo. No deje que los niños mastiquen nada que tenga pintura con plomo. Coma sano. No guarde alimentos en recipientes de cerámica ni en latas, porque pueden contener plomo.
GLOSARIO Sérica: Del suero sanguíneo o relacionado con él. Hipoglucemiantes orales: son un conjunto heterogéneo de drogas que se caracterizan por producir una disminución de los niveles de glucemia luego de su administración por vía oral, cumpliendo con este propósito a través de mecanismos pancreáticos y/o extrapancreáticos. Hemodiálisis:
Tratamiento
médico
que
consiste
en
eliminar
artificialmente las sustancias nocivas o tóxicas de la sangre, especialmente las que quedan retenidas a causa de una insuficiencia renal, mediante un riñón artificial (aparato).
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Dosis Letal: se denomina DL50 (abreviatura de Dosis Letal, 50%) a la dosis de una sustancia o radiación que resulta mortal para la mitad de un conjunto de animales de prueba. BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España. 2010.
AUTORIA Bioq. Farm. García Carlos MSc. Machala, 24 de Julio del 2016
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD
_________________________ MISHEL HOWARD SALAMEA
ANEXO CASO CLINICO Una niña de 4 años y 9 meses de edad, vecina de Guanacaste (zona rural), sin antecedentes patológicos perinatales, es referida al Hospital Nacional de Niños por un cuadro de dos meses y medio de evolución con debilidad en miembros inferiores, dificultad para la marcha y caídas frecuentes. Se conocía en ella el antecedente de haber estado en contacto con plomo, pues su padre se dedicaba, desde hacía 15 años, a la fabricación de plomadas para pesca utilizando baterías usadas. Un hermano mayor de la paciente había estado hospitalizado a los tres años de edad (1990), por intoxicación plúmbica crónica; en esa ocasión los niveles “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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de plomo sérico de la paciente en discusión, con tres meses de edad, eran de 46.8 ug/dl. Se anota además que desde un año antes del ingreso al hospital la madre notaba a la niña muy pálida y con episodios de fiebre intermitente. Al ingreso se encontró una niña cuyo peso era de 15 Kg, con una talla de 96 cm, muy pálida, con tinte subictérico, sumamente irritable, con cabello quebradizo, opaco y mal implantado. Una vez corroborado el diagnóstico con todos los medios disponibles se inició el tratamiento con EDTA sódico-cálcico 250 mg q8h por 5 días en un total de tres ciclos, los cuales fueron administrados en la Unidad de Cuidados Intensivos siguiendo las recomendaciones que se dan al respecto (Centro Nacional de Intoxicaciones). Los niveles de plomo después de cada ciclo fueron de 71.4, 65 Y59.2 ug/dl respectivamente. La función renal se mantuvo normal durante la terapia de quelación. Durante este último año la paciente ha tenido seguimiento en la consulta externa del Hospital donde se le ha dado orientación terapéutica al desarrollo psicomotor y control de la plumbemia. No se reportan complicaciones adicionales.
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