UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad, Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Nombre: Howard Salamea Mishel Profesor: B.Q.F. García Carlos Curso: 5 to año Paralelo: “A” Grupo: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 14 de Junio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 21 de Junio del 2016
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PRACTICA # 1 TEMA: INTOXICACIÓN POR CIANURO Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por cianuro de sodio. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el toxico (cianuro de sodio 5%). 3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de cianuro. MATERIALES
Jeringuilla de 10cc Balanza Varilla Espátula Probeta Campana Panema para colocar animales en experimentación Perlas de vidrio Bureta Soporte universal Cinta plástica Lámpara de alcohol
“TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
SUSTANCIAS
Cianuro de sodio Hidróxido de Sodio 0.1 N Acido tartárico 2gr. Agua destilada Sulfato ferroso Cloruro férrico Ácido sulfúrico 0.1N Sulfato de cobre solución Acido pícrico solución Solución de yodo.
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Fosforo Pinzas Cocineta Porta tubo Tabla de disección Cronómetro Equipo de disección Bisturí Vasos de precipitación 200 y 500 ml. Erlenmeyer Equipo de destilación. Tubos de ensayo Pipetas Guantes de látex Mascarilla Mandil Gorro Zapatones en caso de usar sandalias.
PROCEDIMIENTO 1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Pesamos 1.06 gr de Cianuro de Sodio y diluir en 20 ml de agua destilada para preparar una solución al 5 % 3. Colocamos el cobayo en el panema. 4. Se administró 5ml de la solución de Cianuro de Sodio preparado al 5% por vía intraperitoneal y anotar el tiempo. 5. Observar las manifestaciones que se presenten. 6. Inyectar 3 ml más del toxico 7. Volver a inyectar 5 ml del toxico hasta su muerte. 8. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir el cobayo 9. Se realizó la observación del estado de las vísceras. 10. Recoger en un vaso de precipitación la sangre así también colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el mismo. 11. Pasar el contenido anterior en el balón del equipo de destilación. 12. Armamos el equipo de destilación (método de soxhleth), asegurando con la cinta plástica para que no hayan fugas. 13. Se destila con 20 ml NaOH 0.1 N, sometiendo calor con movimiento circular. 14. El residuo de la destilación, después que se ha eliminado por completo el cianuro, se practican las diferentes reacciones de reconocimiento. REACCIONES DE REACIONES DE RECONICIMIENTO
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1. AZUL DE PRUSIA: Una pequeña porción del destilado (después de comprobar su alcalinidad) se agrega unos pocos cristales de sulfato ferroso, un exceso de ácido sulfúrico y unas de solución diluida de cloruro férrico, se calienta y agita levemente y se adiciona ácido clorhídrico diluido, obteniéndose un color azul intenso llamado azul de Prusia. 2. REACCIÓN DE FENOLFTALEÍNA: Se agrega una pequeña porción de destilado unas gotas de solución de sulfato de cobre (1:2000) y previamente una gota de fenolftaleína, con lo que se producirá un intenso color rojo debido a la oxidación de la fenolftaleína. 3. CON ÁCIDO PÍCRICO: A una pequeña cantidad de la muestra, se le agregan unas gotas de ácido Pícrico al 2 %; en caso positivo el color amarillo de del reactivo de torna anaranjado. 4. CON SOLUCIÓN DE YODO: Al adicionar unas cuantas gotas de la muestra sobre una solución de yodo, se producirá la decoloración del yodo en caso positivo. 5. CON YODURO DE PLATA: Si agregamos unas gotas de la solución muestra sobre un precipitado de yoduro de plata, se producirá la disolución del precipitado en caso positivo. 6. TRANSFORMACION DE CIANUROS A SULFOCIANUROS: Se alcaliniza la muestra con hidróxido de sodio o potasio y se adiciona hiposulfuro de amonio recientemente preparado. Se evapora a baño de maría y se recoge el residuo con ácido clorhídrico. Se filtra para eliminar el azufre que eventualmente pudiera estar presente y se agrega solución diluida de cloruro férrico. En caso positivo aparece un color rojo sangre por formación de sulfocianato férrico. NaCN+ (NH4)2S2
NaSCN + (NH4)2S
3NaSCN+ Cl3Fe
Fe (SCN) 3 + 3NaCl
GRÁFICOS
1. Pesar el cianuro y preparar solucion.
2. Inyeción de 5 mL de toxico al cobayo, por via intraperitonial.
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3. Colocación del cobayo en el panema para observar todas las manifectaciones.
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5. Colocación de las vísceras (picadas lo más finas posibles)
4. Disección del cobayo
6. Se arma el equipo de destilación.
7. Se recoge el destilado que contiene cianuro, para las reacciones de identificación.
8. Realización del programa de prácticas de toxicologia.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS
AZUL DE PRUSIA
Reacción
Positivo característico
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coloración color azul.
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REACCIÓN DE FENOLFTALEÍNA
Reacción
Positivo característico
color rojo intenso.
CON ÁCIDO PÍCRICO
Reacción
Positivo característico
Reacción
coloración anaranjada
CON SOLUCIÓN DE YODO Positivo característico
coloración anaranjada
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Reacción
CON SULFOCIANURO. Positivo No característico
Antes (color transparente) luego llevamos a B.Maria.
No hubo coloración rojo sangre.
Después (Positivo No caracteristico )
CON YODURO DE PLATA.
Reacción
Positivo característico
Antes (color transparente)
decoloración parcial.
Despues (Positivo caracteristico (+)
OBSERVACIONES Hemos observado que al administrar el toxico (cianuro de sodio) por vía intraperitoneal el cobayo presentó: convulsiones con poco movimiento en la pierna inyectada, a los 2 minutos se puso agitado, daba patadas, a los 4 minutos se acostó a los 2 minutos más se empezó a deprimir (ojos y orejas), con la sobredosis que se le fue administrado murió inmediatamente a los 41 minutos. Presentó necropsia de las vísceras. CONCLUSIONES Mediante la realización de esta práctica podemos concluir que el toxico utilizado (cianuro de sodio al 5% ) es muy potente debido a las manifestaciones como apnea, poca movilidad y convulsiones que se presentaron en el animal, se debe realizar una correcta administración del toxico ya que la dosis no fue eficaz y de debió administrar un total de 13 ml del toxico y así se logró que el deceso sea “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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inmediato y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de cianuro de sodio en estos medios biológicos. Todas las reacciones de reconocimiento de hidróxido de sodio son indispensables para la verificación de una intoxicación, muerte por este tóxico.
RECOMENDACIONES Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar el bisturí ideal para la disección Asegurar al animal correctamente en la tabla para evitar autocontaminarnos. Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del toxico. GLOSARIO Víscera Una víscera o entraña es un órgano contenido en las principales cavidades del cuerpo humano y de los animales. Son vísceras, sobre todo los órganos del aparato respiratorio y aparato digestivo como:
Los pulmones. El corazón. El hígado. El páncreas. El bazo.
Hipoxia La Hipoxia es un estado de deficiencia de oxígeno en la sangre, células y tejidos del organismo, con compromiso de la función de éstos. Esta deficiencia de oxígeno puede ser debida amuchas causas, pero la más frecuente, especialmente en el ambiente aeronáutico, es la reducción de la presión parcial de oxígeno como consecuencia de la reducción de la presión atmosférica con la altitud. Somnolencia
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Se refiere a sentirse anormalmente soñoliento durante el día. Las personas que son soñolientas pueden quedarse dormidas en situaciones o momentos inapropiados La somnolencia excesiva durante el día (sin una causa conocida) puede ser un signo de un trastorno del sueño. La depresión, la ansiedad, el estrés y el aburrimiento pueden contribuir a una somnolencia excesiva, pero estas afecciones casi siempre causan fatiga y apatía. Cianuro El cianuro es una sustancia química, potencialmente letal, que actúa rápidamente y puede existir de varias formas, puede ser un gas incoloro como el cianuro de hidrógeno (HCN), o el cloruro de cianógeno (ClCN), o estar en forma de cristales como el cianuro de sodio (NaCN) o el cianuro de potasio (KCN), se describe con un olor a “almendras amargas”, pero no siempre emana un olor y no todas las personas pueden detectarlo. El cianuro también es conocido por su denominación militar AN (para el cianuro de hidrógeno) y CK (para el cloruro de cianógeno) CUESTIONARIO 1. ¿Con cuántos mg de cianuro puede morir un niño de 50 Kg? La ingestión de cianuro en dosis mínimas -50 miligramos resulta fatal. Por ende puede provocar la muerte. 2. ¿En qué plantas encontramos el Cianuro? Manzana (Malus domestica) Las semillas contienen glicósidos cianuro cianogénicos; en la mayoría de las especies, la cantidad presente en cada fruta no matará a una persona; pero si se ingiere suficientes semillas se llega a una dosis letal. Cerezo (Prunus cerasus), como así también otras especies (Prunus spp) tales como el Prunus persica|durazno (Prunus persica), ciruelo (Prunus domestica), almendro (Prunus dulcis), y el Prunus armeniaca|damasco (Prunus armeniaca). Las hojas y semillas contienen glicósidos cianogénicos Frijol (Phaseolus lunatus). Los frijoles crudos contienen peligrosas cantidades de linamarina, un glucósido cianuro cianogénico. El glucósido cianogénico puede ser encontrado en cantidades variables en césped de Johnson, semillas de durazno, almendras amargas, guisantes, albaricoques, raíz de cassava, bayas del sauco, semillas de lino y brotes de bambú. El brote de bambú contiene la cantidad más alta de glucósido cianogénico o azúcar de cianuro. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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3. ¿Cuál es la Dosis letal del cianuro? La dosis letal de cianuro para las personas por término medio es de 50 mg (Un sobre de azúcar contiene 10 g, por lo que si en vez de azúcar fuese cianuro, esa pequeña cantidad podría matar aproximadamente a 200 personas) BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA Byrd-Bredbenner, C., Beshgetoor, D., Moe, G., & Berning, J. (2010). Perspectivas en nutrición (octava ed.). México: McGrawHill. Un servicio de la Biblioteca Nacional de Medicina de EE.UU 16 de Mayo,2014MedlinePlus de:http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003208.htm El letal cianuro, 2010 TÓPICOS QUÍMICOS de: http://quimicadas.wordpress.com/2010/07/30/el-letal-cianuro/ Plantas tóxicas. 2014 EcuRed de: http://www.ecured.cu/index.php/Plantas_t%C3%B3xicas Docente, H. P., Lora, S., & Cianuro, P. O. R. (2001). Hospital Provincial Docente “Saturnino Lora” INTOXICACIÓN POR CIANURO, 5(4), 103– 107. AUTORIA Bioq. Farm. García Carlos MSc. Machala, 21 de Junio del 2016
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD
_________________________ MISHEL HOWARD SALAMEA
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