UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad, Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Nombre: Howard Salamea Mishel Profesor: B.Q.F. García Carlos Curso: 5 to año Paralelo: “A” Grupo: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 14 de Junio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 21 de Junio del 2016 PRACTICA # 2
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TEMA: INTOXICACIÓN POR FORMALDEHÍDO Animal de Experimentación: Cobayo. Vía de Administración: Vía Intraperitonial
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Conocer los diversos síntomas y de más manifestaciones que produce la intoxicación por formaldehído en un cobayo de experimentación.
2. Adquirir la destreza para realizar las reacciones de identificación. 3. Reconocer mediante la observación de los colores características, la presencia de formaldehido. SUSTANCIAS Y REACTIVOS: MATERIALES:
Jeringuilla de 10 cc. Varilla Espátula Probeta Panema Perlas de vidrio Bureta Soporte universal Cinta plástica Lámpara de alcohol Fosforo Pinzas Porta tubo Tubos de ensayo
Formol al 40%- Alcohol Ácido tartárico Permanganato de potasio al 1% Ácido Oxálico Ácido Sulfúrico puro Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff) Cloruro de Fenil Hidracina al 4% Nitroprusiato de Sodio al 2.5% Hidróxido de Sodio Ácido Clorhídrico. Ferricianuro de potasio al 5-10% Hidróxido de Potasio al 12% Ácido cromotrópico Leche Cloruro Férrico. Agua destilada
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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Tabla de disección Cronómetro Equipo de disección Bisturí Vasos de precipitación 200 y 500 ml. Erlenmeyer Equipo de destilación. Pipetas Guantes de látex Mascarilla Mandil Gorro Balanza Cocineta
PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4.
Limpiar y desinfectar el área de trabajo. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo Colocamos el cobayo en el panema. Se administró 8 ml de la solución de formaldehido inyectado por vía intraperitoneal y anotar el tiempo. 5. Observar las manifestaciones que se presenten. 6. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir el cobayo. 7. Se realizó la observación del estado de las vísceras. 8. Recoger en un vaso de precipitación la sangre así también colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el mismo. 9. Pasar el contenido anterior en el balón del equipo de destilación. 10. Agregar las 50 perlas de vidrio. 11. Armamos el equipo de destilación asegurando con la cinta plástica para que no hayan fugas. 12. Se destila con 20 ml NaOH 0.1 N, sometiendo calor con movimiento circular del mechero. 13. Obtenida la solución madre del residuo de la destilación, después que se ha eliminado por completo el cianuro, se practican las diferentes reacciones de reconocimiento. 14. Una vez terminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO a) RECONOCIMIENTO EN LA ATMOSFERA. Esta investigación comprende esencialmente dos fases:
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“
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1. Captación por paso del aire de los borboteadores contenido agua destilada montados en serie. 2. Valoración propiamente dicha por medio de una reacción coloreada como la del ácido cromotrópico en medio ácido sulfúrico. b) RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS. Luego de haber destilado la muestra en las circunstancias anteriormente descritas, se deben realizar las reacciones con suma rapidez a fin de evitar que el toxico se combine con otras sustancias orgánicas, pues de no hacerse así, sería difícil encontrar trazas de él. 1. REACCIÓN DE SCHIFF: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. REACCIÓN DE RIMIN.I A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 3. CON LA FENILHIDRACINA. En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella. 4. REACCIÓN DE MARQUIS. Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. 5. CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO. Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6. REACCIÓN DE HEHNER.
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Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. GRÁFICOS.
1. Pesar Formaldehido y preparar solucion.
4. Disección del cobayo
2. Inyectar 10 mL de toxico de cianuro al cobayo, por via intraperitonial.
5. Colocación de las vísceras (picadas lo más finas posibles)
3. Colocación del cobayo en el panema para observar todas las manifectaciones.
6. Se arma el equipo de destilación y comien
7. Se recoge el destilado, para las reacciones de identificación.
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS.
REACCIÓN DE SHIFF. Reacción
Negativo
No hay reactivo
REACCIÓN DE RIMIDI
Reacción
Negativo
No hay coloración color azul intensa.
Antes
Después
CON LA FENIL HIDRACINA Reacción Negativo
Antes
No hay color rojo grosella.
Después
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CON ÁCIDO CROMOTRÓPICO Reacción Positiva característica
Antes
Coloración roja.
Después
REACCIÓN DE HEHNER
Reacción
Positiva característica
Antes
Anillo violeta.
Después
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MUESTRA # 2 (Diluyente o tiñe) 1. REACCIÓN DE RIMINI:
Reacción azul intensa.
Positivo No caracteristica
Antes
No hay coloración color
Después
2. CON LA FENIL HIDRACINA: Reacción grosella.
Positivo no caracteristico
Antes
No hay color rojo
Después
3. CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO:
Reacción
Positiva característica
Coloración roja.
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Antes
Después
4. REACCIÓN DE HEHNER: Reacción
Positiva característica
Antes
Anillo violeta.
Después
OBSERVACIONES Se pudo observar las coloraciones que se producen cuando se adicionan los distintos reactivos de identificación en caso de ser positiva la presencia de formaldehidos, en una solución preparada con aceite vegetal y formol. CONCLUSIONES Al término de esta práctica podemos concluir que mediante las reacciones de reconocimiento se logró la identificación de formaldehido, compuesto químico que pueden estar presentes en productos de higiene, cosméticos, productos de limpieza, farmacéuticos y jabones industriales. RECOMENDACIONES Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones. Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del toxico. CUESTIONARIO. 1. A qué se debe la toxicidad del formaldehído? La toxicidad del Formaldehído se debe principalmente a sus propiedades altamente irritantes para los tejidos vivos que entran en contacto con él. Los síntomas más comunes de la exposición a Formaldehído son la irritación en los ojos, nariz y garganta. Estos síntomas se perciben a partir de concentraciones de entre 0,4 y 3 ppm. La variabilidad en la concentración de aparición de los efectos depende de cada exposición específica debido a que cada persona posee sus propios niveles de detección. 2. Quienes están mayoritariamente expuestos a esta sustancia? Los mayores niveles de exposición a Formaldehído están presentes en personas que viven cerca o trabajan en plantas de fabricación o transformación de esta sustancia. Personas que trabajan en laboratorios del área de la salud también pueden estar expuestas por causa de la utilización del Formaldehído con fines de preservación de especímenes, tejidos, órganos, etc. 3. Cuáles son los usos que tiene el formaldehído a nivel cosmético y de Farmacia : El formaldehído se usa como antitranspirante, antimicótico, desinfectante (colutorios, tabletas para la garganta), conservador (champúes) y queratolítico. Por todos estos usos puede formar parte de una amplia variedad de cosméticos y medicamentos: solución para permanentes, jabones, lociones de manos y corporales, pomadas, polvos, endurecedores de uñas, lacas de uñas, dentífricos, preparados para verrugas, etc. 4. Cuál es la dosis letal en humanos?
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La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina) para seres humanos (DL50) se encuentra entre 500 y 5000 mg/kg, que representa una cantidad total de entre 35 y 350 g para una persona de 70 kg de peso. 5. ¿Qué diagnósticos se debe realizar al paciente intoxicado por formaldehido? Cuando una persona presenta intoxicación por formaldehido es importante realizar a tiempo las siguientes pautas para saber cuál es el grado de afección que posee: La exposición aguda a formaldehído puede causar dermatitis, irritación leve de los ojos con lagrimación, e incluso ceguera. Dependiendo de la concentración en el aire inhalado, los pacientes pueden tener desde tos, congestión e irritación pulmonar, hasta asma y neumonía. La ingestión puede causar vómito, náusea y cólicos en el estómago, y lleva a insuficiencia de múltiples órganos. Examen físico La piel puede estar de color rojo, hinchada, y presentar descamación con ronchas. Es posible que haya alteración del color de los ojos por opacidades corneales, y pueden estar de color rojo y tener picazón. Es posible que haya pérdida de la visión. Se necesita un examen exhaustivo de los pulmones para excluir asma y otras enfermedades de las vías respiratorias. Es necesario examinar la mucosa nasal para buscar signos de enrojecimiento e hinchazón relacionados con la exposición. Pruebas No hay pruebas útiles para exposición o efectos biológicos. Pueden efectuarse pruebas de función pulmonar, radiografías de tórax, broncoscopia, gases arteriales, y endoscopia. La prueba de exposición bronquial a formaldehído o metacolina puede ayudar a establecer si está ocurriendo o no un proceso alérgico en las vías respiratorias. Los ojos se pueden examinar con una lámpara de hendidura y con colorante fluoresceína. 6. ¿Cuál es el tratamiento que se debe llevar a cabo cuando hay intoxicación por Formaldehido? Es necesario retirar al individuo de exposición adicional al formaldehído. Los síntomas y los efectos se tratan conforme ocurren. Los ojos y la piel se lavan con “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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cantidades copiosas de agua o solución salina. Pueden administrarse gotas oculares con antibiótico, y analgésicos. La dificultad respiratoria puede tratarse con oxígenos, broncodilatadores, inhaladores, y respiración con presión positiva intermitente. Un individuo que ha deglutido formaldehído debe recibir leche, agua, o carbón activado para desactivar la sustancia química. GLOSARIO Reacción de rimini: La reacción de Angeli-Rimini es una reacción orgánica entre un aldehído y lasulfonamida N-hidroxibencensulfonamida, en presencia de una base, formando un ácido hidroxámico El nitroprusiato, al igual que la nitroglicerina, causa relajación del músculo liso y es un vasodilatador arteriovenoso más rápido y potente. Formaldehído o metanal.-Es un compuesto químico, más específicamente un aldehído (el más simple de ellos) altamente volátil y muy inflamable, de fórmula H2C=O. Aceite mineral.-Es un subproducto líquido de la destilación del petróleo desde el petróleo crudo. Un aceite mineral en este sentido es un aceite transparente incoloro compuesto típicamente de alcanos y parafina cíclica. Broncodilatadores: son medicamentos que se usan para relajar el músculo liso de las vías respiratorias para "abrir" los pulmones. Dermatitis: La dermatitis es la inflamación de la piel causada por factores tales como: alergias, irritantes, luz ultravioleta, alimentos, medicamentos o hereditario. BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
Alves, C. A. (2012). scielo.com. Recuperado el 17 de junio de 2014, de sceilo.com: http://translate.google.com.ec/translate?hl=es&sl=pt&u=http://www.scielo.br/ scielo.php%3Fscript%3Dsci_arttext%26pid%3DS010040422012001000024&prev=/search%3Fq%3Dformol%2Bscielo%26biw%3 D1366%26bih%3D657
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TOXICIDAD DEL FORMALDEHÍDO (s.f.). Recuperado el 15 de Junio del 2016, de http://www.agroquibor.com/
ENCICLONET (s.f.). Recuperado el 15 de Junio del 2016, de http://www.enciclonet.com/ Méndez, T. R. De. (n.d.). UN CASO DE INTOXICACIÓN CRÓNICA POR FORMALDEHÍDO. Teresa Russo de Méndez. Cátedra de Anatomía Humana. Departamento de Ciencias Morfológicas. Facultad de Medicina. Universidad de Los Andes. Mérida. Venezuela., 8(2002), 1–4.
AUTORIA Bioq. Farm. García Carlos MSc. Machala, 21 de Junio del 2016
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD
_________________________ MISHEL HOWARD SALAMEA
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