UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad, Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Nombre: Howard Salamea Liria Mishel Profesor: B.Q.F. García Carlos Curso: 5 to año Paralelo: “A” Grupo: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 21 de Junio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 28 de Junio del 2016 PRACTICA # 3
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TEMA: INTOXICACIÓN POR METANOL Animal de Experimentación
Rata wistar
Tóxico:
Metanol
Vía de Administración:
Vía Intraperitoneal
Ceguera
SÍNTOMAS
Nistagmas Convulsiones Vomito
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Determinar la presencia del toxico, en este caso del metanol en el animal de experimentación, con las respectivas reacciones de identificación. 2. Observar los principales efectos que el animal de experimentación sufre luego de la intoxicación. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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MATERIALES o Jeringa de 5 cc o Varilla o Espátula o Probeta o Campana o Panema o Perlas de vidrio o Bureta o Soporte universal o Cinta plástica
SUSTANCIAS
Metanol. Acido tartárico. Coluro de Fenilhidracina al 4%. Nitroprusiato de sodio al 2.5 %. Hidróxido de Sodio 0.1 N Ferricianuro de potasio. Hidróxido de potasio 12%. Ácido cromotrópico. Agua destilada. Ácido sulfúrico concentrado. Leche. Cloruro férrico
o Lámpara de alcohol o Fosforo o Pinzas o Cocineta o Porta tubo o Tabla de disección o Cronómetro o Equipo de disección o Bisturí o Vasos de precipitación 200 y 500 ml. o Erlenmeyer o Equipo de destilación. o Tubos de ensayo o Pipetas o Guantes de látex o Mascarilla o Mandil o Gorro o Zapatones en caso de usar sandalias
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PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4.
Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo. Colocamos el cobayo en el panema. Tener todos los materiales a utilizar listos. Administramos al cobayo, 5 ml de metanol por vía intraperitoneal y anotamos el tiempo. 5. Observamos los efectos que produce en el cobayo. 6. Luego inyectamos 15 ml del toxico en tres dosis durante el lapso de 35 minutos hasta la muerte del animal. 7. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del bisturí. 8. Observamos el estado de las vísceras. 9. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles). 10. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación. 11. Armamos correctamente el equipo de destilación (método de soxhleth), asegurando que no existan fugas que conlleven a pérdidas del destilado. 12. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara de alcohol esto con movimiento circular. 13. Al producto de la destilación (destilado), le colocamos una lámina de cobre al rojo vivo hasta que se observe el desprendimiento de partículas de color gris, con esto convertimos el metanol a metanal y procedimos a realizar las reacciones de identificación. 14. Una vez terminada la práctica se limpia todo el material y el área utilizada.
REACCIONES DE REACIONES DE RECONICIMIENTO 1. REACCIÓN DE SCHIFF: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
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2. REACCIÓN DE RIMINI: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
3. CON LA FENILHIDRACINA: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
4. CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
5. REACCIÓN DE HEHNER: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
GRÁFICOS:
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Animal de experimentación cobayo
2
Inyectar 10 ml el toxico (metanol)
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Observar los síntomas del cobayo luego de la administración del toxico
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Triturar las vísceras
7
Preparar el equipo de destilación
5
Extraer las vísceras del cobayo
8
Obtener el destilado para realizar el análisis
4
Colocar al cobayo en la tabla de disección
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Transformación del metanol en metanal para su identificación
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS
REACCIÓN DE SHIFF: Reacción positivo
Antes
REACCIÓN DE RIMIDI Reacción positivo
Antes CON LA FENIL HIDRACINA Reacción positivo
Antes
color violeta
Después color azul intenso
Después Color rojo grosella.
Después
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CON ÁCIDO CROMOTRÓPICO Reacción Positivo
Antes
coloración roja.
Después
REACCIÓN DE HEHNER Reacción
Positivo
Antes
coloración rojo violeta.
Después
OBSERVACIONES Hemos observado que al administrar el toxico (metanol) por vía intraperitoneal el cobayo presentó cierta inmovilidad, depresión del SNC, a los 3 minutos se le cayeron las orejas pero permanecía estable, a los 7 minutos el ritmo respiratorio disminuyo, a los 11 minutos no responde a estímulos oculares, con la sobredosis que se le fue administrado murió inmediatamente a los 70 minutos. Presentó necropsia de las vísceras. CONCLUSIONES Al término de esta práctica podemos concluir que el veneno utilizado (metanol) es muy tóxico debido a las manifestaciones como la poca movilidad, convulsiones y coma que se presentaron en el animal, en primera instancia no se logró la muerte ya que la dosis fue muy baja pero al administrarle un total de 20 ml del toxico el deceso fue inmediato y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de metanol. “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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RECOMENDACIONES Realizar la asepsia del área a trabajar. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así intoxicaciones. Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del toxico.
CUESTIONARIO 1. ¿QUE ES EL METANOL? El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol metílico (o raramente alcohol de quemar), es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CH3OH (CH4O). 2. 3.
¿DÓNDE SE ENCUENTRA? Anticongelante Fuentes de calentamiento enlatadas Líquidos para copiadoras Líquido descongelante Aditivos para combustibles (mejoradores del octanaje) Removedor o disolvente de pintura Goma laca Barniz Líquido limpiador de parabrisas ¿CUÁLES SONLOS SINTOMAS ANTE UNA INTOXICACION?
Los síntomas pueden abarcar: Pulmones y vías respiratorias Dificultad respiratoria, paro respiratorio Ojos Ceguera, visión borrosa y dilatación de las pupilas Corazón y vasos sanguíneos Convulsiones y presión arterial baja “TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
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Sistema nervioso: Comportamiento agitado, coma, dolor de cabeza y epiléptica Piel y uñas Uñas y labios azulados Estómago e intestinos Dolor abdominal (fuerte), diarrea, problemas con la función hepática, náuseas, pancreatitis y vómitos.
4. ¿TOXICIDAD DEL METANOL? El metanol es extremadamente tóxico. Tan solo dos cucharadas pueden ser mortales para un niño y alrededor de 2 a 8 onzas pueden ser mortales para un adulto. La ceguera es común y a menudo permanente a pesar de los cuidados médicos. El pronóstico para la persona depende de la cantidad de tóxico ingerida y de la prontitud con que se reciba el tratamiento. GLOSARIO Embalsamamiento.- es una práctica que utiliza generalmente sustancias químicas, en especial resinas o bálsamos, y cuyo objetivo es preservar de la putrefacción la integridad de los cadáveres. Aspartame.es un edulcorante no calórico descubierto en 1965 por la multinacional farmacéutica G.D. Searl and Company. Que se emplea en numerosos alimentos en todo el mundo bajo varias marcas como Natreen y Canderel, además de NutraSweet, y que corresponde al código E 951 en Europa. Emanaciones: Desprendimiento o emisión de sustancias volátiles de un cuerpo hacia su alrededor. Mosto.- es el zumo de la uva que contiene diversos elementos de la uva como pueden ser la piel, las semillas, etc. Se considera una de las primeras etapas de la elaboración del vino. Acidosis.- Es una dolencia en la cual hay demasiado ácido en los líquidos del cuerpo. Es lo opuesto a alcalosis (una afección en la cual hay exceso de base en los líquidos corporales).
BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
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Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial CientíficoMédico. Madrid. España. 2010. Acción del metanol en el cuerpo humano (en línea)Disponible en:http://organicaudla3.wikispaces.com/ACCION+DEL+METANOL+SOBRE +EL+CUERPO+HUMANO
Los peligros del alcohol adulterado (en línea)Disponible en: http://www.alcoholinformate.org.mx/articulos.cfm?id=334 https://www.google.com.ec/?gfe_rd=cr&ei=I72nU8_2Ca_Q8gfx7IDgBQ&gw s_rd=ssl#q=metanol http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002680.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Metanol
AUTORIA Bioq. Farm. García Carlos MSc. Machala, 28 de Junio del 2016
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD
_________________________ MISHEL HOWARD SALAMEA
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