UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE BIOQUIMICA Y MICROBIOLOGIA, BOTANICA Y PARASITOLOGÍA, TOXICOLOGIA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Nombre: Howard Salamea Liria Mishel Profesor: B.Q.F. Carlos García Curso: 5 to año Paralelo: “A” Grupo: 5 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 19 de Julio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 26 de Julio del 2016 PRACTICA BF.5.09-05 TEMA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
Animal de Experimentación
Rata wistar
Tóxico:
Cloroformo
Vía de Administración:
Vía Intraperitoneal
Volumen administrado;
10 ml de cloroformo
Vomito
SÍNTOMAS
Vértigo Nauseas Cefaleas
TIEMPOS Inicio de la práctica: 8:00am Hora de administración del toxico al 8:30 am cobayo: Deceso del animal: 9: 00 am Inicio de la destilación: 9:20 am Finalización de la destilación: 10:00 am Final de la práctica: 10:30 am
Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
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OBJETIVO DE LA PRÁCTICA
Determinar la presencia del toxico, en este caso del cloroformo en el animal de experimentación, con exámenes químicos colorimétricos.
Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este sufre luego de la intoxicación.
FUNDAMENTO El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, peropoco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble. El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata. MATERIALES Jeringa de 10 cc
Equipo de disección
Varilla
Bisturí
Espátula
Vasos de precipitación 200 y
Probeta
500 ml.
Campana
Tubos de ensayo
Panema
Pipetas
Fosforo
Guantes de látex
Pinzas
Mascarilla
Cocineta
Mandil
Porta tubo
Gorro
Tabla de disección Perlas de vidrio.
SUSTANCIAS NaOH (20%)
Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
Ácido tartárico cloroformo Agua destilada alcohol de 95% nitrato de plata potasa alcohólica cloruro de potasio beta naftol
amoniaco diluido percloruro de hierro resorsinol piridina
EQUIPO: Equipo de destilación
PROCEDIMIENTO 1) Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo. 2) La bioseguridad: colocarse la mascarilla, bata de laboratorio, gorro, zapatones y los guantes. 3) Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de cloroformo se toma de manera segura al animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras. 4) Se administra la cantidad de 10 ml de cloroformo y se deja el animal en la meseta. 5) Se observan las reacciones y conducta post-administración. 6) Transcurrido el tiempo de la muerte del animal se procede a colocarlo en mesa de disección. 7) Con ayuda de una tijera o una hoja guillet se rasura el pelaje del abdomen del animal para facilitar el corte. 8) Con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación. 9) Observamos los cambios que presentan sus órganos. 10) Con ayuda del equipo de disección se trituran las entrañas y se colocan en el balón 11) A las vísceras ya picadas le añadimos 10ml de ácido tartárico, y lo llevamos a un balón. Una vez ya instalado el equipo de destilación se instala el balón y se da inicio al proceso de destilación por el lapso de 2 horas. 12) Luego de terminada destilación, se procede a tomar una pequeña cantidad de destilado para proceder a realizar las reacciones de reconocimiento en medios biológicos.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Reacciones en medio biológico
Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación. 1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata. 2. Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. 3. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo. 4. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. 5. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. 6. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. GRÁFICOS
Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO SOLUCION ALCOHOLICA: positivo caracterĂstico
Se inflama la mescla contenida en el tubo de ensayo de cloroformo, alcohol y unas gotas de nitrato de plata; se observa que esto arde con una llama de borde verde y que al final se forma un precipita de cloruro de plata dando resulta positivo caracterĂstico
Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
1. Reacción de dunnas: Reacción
positivo característico
Antes
Después
2. Reacción de lustgarten: Reacción
positivo no característico
Antes
Después
3. Reacción de fujiwara: Reacción
Antes
positivo característico
Después
Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
4. Reacción de roseboom: Reacción
positivo no característico
Después
Antes
5. Reacción de benedict: Reacción
Antes
positivo no característico
Después
OBSERVACIONES Pude observar que al administrar cloroformo puro por vía intraperitoneal a la rata ésta presentó picazón, convulsiones, se orinó, se observó además secreción ocular y por ultimo presentó necropsia de la mayor parte de las vísceras al momento de abrirlo. Observar con que sustancia se va a trabajar, ya que por su toxicidad se debe usar guantes y mascarilla. CONCLUSIÓN Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica,
es decir, se determinó el CLOROFORMO que estaba presente en las vísceras del animal y la cual fue causante de su muerte. RECOMENDACIONES Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar
accidentes. Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
Desechar el material usado, y los restos del cobayo en un lugar seguro que no
valla a ocasionar problemas a la comunidad. Utilizar mascarilla, guantes y gorro para evitar posible contaminación con el
toxico. GLOSARIO: Anestésico: son fármacos universalmente utilizados por multitud de profesionales de la salud(anestesiólogos, cirujanos, enfermeros, odontólogos,podólogos, dermatól ogos, internistas, médicos veterinarios,etc.) a diario que, a concentraciones suficientes, evitan temporalmente la sensibilidad en el lugar del cuerpo de su administración. Su efecto impide de forma transitoria y perceptible, la conducción del impulso eléctrico por las membranas de los nervios y el músculo localizadas. Fosfogeno: el fosgeno es un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado. Cuando se libera fosgeno líquido, éste se transforma rápidamente en gas que permanece cerca del suelo y se propaga con rapidez (es más denso que el aire y por esa razón se expande hacia áreas más bajas). Al fosgeno también se le conoce por su denominación militar. Hipoxia: es un estado en el cual el cuerpo completo (hipoxia generalizada), o una región del cuerpo (hipoxia de piel loca), se ven privado del suministro adecuado de oxígeno. Laxitud: Conducta libre o relajada, o falta de firmeza de una persona ocasionada por inhalación de toxicos muy fuertes en grandes cantidades. Narcosia: Estado de inconsciencia producida por un narcótico; sueño artificial. Narcótico. Que produce sueño, somnífero, estupefaciente. Sustancia que tiene esta propiedad. CUESTIONARIO
Que es el cloroformo? El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no inflamable, incoloro, de olor penetrante. Se descompone lentamente por acción combinada del oxígeno y la luz solar, transformándose en fosgeno (COCl2) y cloruro de hidrógeno (HCl) según la siguiente ecuación: 2 CHCl3 + O2 → 2 COCl2 + 2 HCl Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.
por lo cual se aconseja conservarlo en botellas de vidrio color ámbar y lejos de la luz.2 ¿El cloroformo para qué sirve? Tiene usos como anestésico en medicina, antes anestesiaban con cloroformo o con éter, en la actualidad se usa para preservar tejidos y huesos. En el laboratorio de química se utiliza el cloroformo como solvente. La mayor parte es usada en la industria en producción de fluorocarbono 22, que se usa como refrigerante, en frezers, aires acondicionados, etc. Es usada como solventes para la extracción y purificación de antibióticos, alcaloides, vitaminas y algunos saborizantes. También se usa como solvente industrial en fotografía y lavado en seco. Preparación de tintes y pesticidas. Es usada como solventes para la extracción y purificación de antibióticos, alcaloides, vitaminas y algunos saborizantes. ¿Qué riesgos tiene? Puede causar narcosis, paro cardiorrespiratorio o muerte tardía por lesiones hepáticas y renales. El cloroformo líquido puede provocar desengrasado de la piel y quemaduras de tipo químico. De acuerdo a la concentración y a la duración de la exposición al cloroformo produce dolores de cabeza, somnolencia, sensación de borrachera, laxitud, mareos, náuseas, excitación, pérdida de conciencia, depresión respiratoria, coma y muerte en narcosis. Los obreros expuestos a concentraciones bajas de este producto adquieren una dependencia que presentan síntomas de índole neurológico y gastrointestinal, parecidos a los que se dan en los casos de alcoholismo crónico. En los estados tardíos de exposición se ha comprobado efectos carcinógenos en las ratas, por lo que cabe sospechar que también sea cancerígeno para el hombre.
BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA Toxicidad por metanol y su efecto sobre las vías visuales Disponible en: vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3373.pdf AUTORIA Bioq. Farm. García Carlos MSc. Machala, 26 de Julio del 2016 FIRMAS DE RESPONSABILIDAD _________________________ MISHEL HOWARD SALAMEA Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.