CULTIVO INVITRO Conjunto muy diverso de técnicas, o cultivo de material vegetal en condiciones asépticas dentro de un recipiente más o menos hermético en un medio nutritivo sintético y bajo condiciones ambientales controladas. Terminología: Esplanto: Porción de tejido que se extrae de la planta madre para utilizar en el CI. Esterilización: Proceso mediante el cual cualquier material se libera de microrganismos o esporas. Subcultivo: Traspaso de células, tejidos o órganos desde un medio de cultivo agotado a un medio fresco. VENTAJAS - Potencial de multiplicación muy grande. - Velocidad de multiplicación elevada. - Permite multiplicación de plantas estériles. - Las plantas obtenidas adquieren características propias de plantas en crecimiento juvenil. - Limita o suprime los pies madre. - Permite salvación de especies en vía de extinción. - Permite creación de bancos de plantas. - Economiza la mano de obra. - Calidad sanitaria excelente. - Especies que se le quieren aplicar técnicas de ingeniería genética. INCONVENIENTES - Coste más elevado. - Riesgo de mutaciones. - Dificultades de éxito. - Adaptación al medio. - Segregación de otras substancias segregadas por la planta en el medio que son tóxicas.
FACTORES QUE INFLUYEN EL ÉXITO DEL CULTIVO INVITRO 1. El material vegetal: Es el factor más importante, teniendo influencia sobre ella: -La edad de la planta. -Las condiciones planta madre. -Época de recogida. -Tamaño de esplanto. -Su posición en la planta. 2. Medio de cultivo: Funciones: Sirve de soporte físico o esplanto, les proporciona los nutrientes y sus componentes se utilizan para dirigir su crecimiento y desarrollo del material vegetal. El medio de cultivo puede ser: -Líquido. -Solidificado con un gel. Se compone de: Agua, Agar (derivado de un alga), azúcares, sales minerales, vitamina, aminoácidos y reguladores de crecimiento. 3. Condiciones de incubación: Su importancia es muy grande, cada planta necesita unos en concreto: Luz (fotoperiodos) termo periodos controlados.
FASES DEL CULTIVO INVITRO: 1 –Preparación planta madre (Se escogen las plantas madre) -Genotipo. -Estado fisiológico. -Estado -Edad. -Vigor. 2 Establecimiento del cultivo aséptico: consiste en el aislamiento de explantos y puesta en un medio sintético básico. Condiciones controladas El problema de está fase es la contaminación. 3 Multiplicación de las partes obtenidas: El explanto se introduce en un cultivo aséptico, después de un tiempo comienza la multiplicación de órganos y estructuras que darán lugar a nuevas plantas. Los brotes producidos pueden ser utilizados para aumentar en nuevas plantas para incrementar el número del subcultivo.
4 Elección del medio de enraizamiento Se utilizan plantas individuales con un medio no libre de reguladores del crecimiento solamente con auxinas.
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Aclimatación de explantos. Los explantos crecen enraizados son muy sensibles con frecuencia la supervivencia es muy baja. Transferencia al mundo natural: Se trasplantan a un medio de arraigo con un buen drenaje y en condiciones de elevada humedad y baja luminosidad. PUNTOS CRITICOS DEL CULTIVO INVITRO: - El establecimiento del cultivo estéril. - La vitrificación durante la fase de aclimatación invitro de las plantas.
CAMARA DE CULTIVO Es donde los cultivos o subcultivos que obtenemos se desarrollan. Cámara aclimatada con temperatura, luz y humedad controlada.