Volumen 2, número 7 by Alianzas & Tendencias BUAP

AGUA Infografías Tecnológicas

C O N T E N I D O

BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

Rector, José Alfonso Esparza Ortíz Secretario General, René Valdiviezo Sandoval Vicerrector de Investigación y Estudios de Posgrado, Ygnacio Martínez Laguna Centro Universitario de Vinculación y Transferencia de Tecnología, Efraín Rubio Rosas Coordinador de Oficina de Comercialización de Tecnología, Martín Pérez Santos

ALIANZAS Y TENDENCIAS BUAP revista trimestral de ciencia y tecnología Año 2, Nº 7, 2017 Editor, Martín Pérez Santos

ALIANZAS Y TENDENCIAS BUAP. Año 2, Nº 7, JulioSeptiembre de 2017, es una publicación trimestral editada por la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, con domicilio en 4 sur 104, Col. Centro, C.P. 72000, Puebla Pue., Tel. +52 222 2295500 Ext. 2234, www.ditco.buap.mx, Editor responsable: Dr. Martín Pérez Santos, alianzasytendencias@correo.buap.mx, Reserva de Derechos al uso exclusivo 04-2016-061316422200-203, ISSN (en trámite), ambos otorgados por el Instituto Nacional de Derecho de Autor de la Secretaría de Cultura. Responsable de la última actualización de este número la Dirección de Innovación y Transferencia de Conocimiento de la BUAP, Dr. Martín Pérez Santos, domicilio en Prolongación de la 24 Sur y Av. San Claudio, Ciudad Universitaria, Col. San Manual, Puebla, Pue., México, C.P. 72570, fecha de la última modificación, 30 de junio de 2017. Las opiniones expresadas por los autores no necesariamente reflejan la postura del editor de la publicación. Queda estrictamente prohibida la reproducción total o parcial de los contenidos e imágenes de la publicación sin previa autorización de la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Portada: Jesús Juárez Flores Web Master: Eduardo Hernández Ronquillo Diseño: Jenny Román Hermida

EDITORIAL 1 Patentes Universitarias Gabriela Sánchez Esgua

7 Las vesículas extracelulares y su papel en salud y el cáncer Sandoval Montiel Alvaro Adrian, Hernández Cortés Paulina, Guerrero Reyes Jonathan, Anaya Ruiz Maricruz, y Rosas Murrieta Nora Hilda

12 Tendencias tecnológicas en el área de Energías Limpias

Carla de la Cerna Hernández

15 Inoculación de plántulas micropropagadas de caña de azúcar con bacterias benéficas para potenciar su producción

América Paulina Rivera Urbalejo, Osvaldo

Rodríguez Andrade, Yolanda Elizabeth Morales García, Verónica Quintero Hernández, Julieta Mariana Muñoz Morales, Adriana Carbajal Armenta, Eric Romero Navarro, Ariana de Jesús Ramos, y Jesús Muñoz Rojas

27 Tendencias tecnológicas en el área de Salud y Farmacéutica Jesús Leal

30 Úlcera de pie diabético: mapeo de publicaciones científicas y patentes Martín Pérez-Santos

33 Tendencias tecnológicas en el área de Agroalimentación Azucena Monge

CONSEJO EDITORIAL Editor en Jefe Dr. Martín Pérez Santos Oficina de Comercialización de Tecnología Centro Universitario de Vinculación y Transferencia de Tecnología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, México

Editores Asociados Dr. Jesús Muñoz Rojas Laboratorio de Ecología Molecular Microbiana, Centro de Investigaciones en Ciencias Microbiológicas, Instituto de Ciencias, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, México. Dra. Maricruz Anaya Ruiz Laboratorio de Biología Celular, Centro de Investigación Biomédica de Oriente, Instituto Mexicano del Seguro Social. Puebla, México.

Dra. Carla de la Cerna Hernández Oficina de Comercialización de Tecnología Dirección de Innovación y Transferencia de Conocimiento, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, México. Dr. Abdelali Daddaoua Departamento de Protección Ambiental, Estación Experimental del Zaidín, Consejo Superior de Investigaciones Científicas, Granada, España.

Miembros del Consejo Editorial Dra. Patricia Talamás Rohana Departamento de Infectómica y Patogénesis Molecular, CINVESTAV-IPN. México, México.

Dr. Jaime Cid Monjaráz Facultad de Electrónica, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México.

Dra. Verónica Vallejo Ruiz Centro de Investigación Biomédica de Oriente, Instituto Mexicano del Seguro Social. Puebla, Puebla, México.

Dr. Manuel González Pérez Posgrado en Ingeniería Biomédica, Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla. Puebla, Puebla, México.

Dr. José Guadalupe Rendón Maldonado Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Sinaloa. Culiacán, Sinaloa, México.

Dr. Juan Manuel López Oglesby Posgrado en Ingeniería Biomédica, Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla. Puebla, Puebla, México.

Dr. Rodolfo Hernández Gutierrez Unidad de Biotecnología Médica y Farmacéutica CIATEJ/CONACYT. Guadalajara, Jalisco, México. Dra. Adriana López Domínguez División de Gestión Tecnológica e Innovación, Instituto Mexicano del Seguro Social. México, México. Dr. Gerardo Landeta Cortés Centro Universitario de Vinculación, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México. Dra. Patricia Bernal Guzmán Imperial College London, South Kensington Campus. London, United Kingdom. Dr. Miguel Matilla Vázquez Departamento de Protección Ambiental, Estación Experimental del Zaidín, Consejo Superior de Investigaciones Científicas. Granada, España. Dr. Yolanda Elizabeth Morales García Biotecnología, Facultad de Ciencias Biológicas, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México. Dr. Fernando Reyes Cortés Facultad de Electrónica, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México.

Dr. Antonio del Río Portilla Instituto de Energías Renovables, Universidad Nacional Autónoma de México. Temixco, Morelos, México. Dr. Eric Reyes Cervantes Centro Universitario de Vinculación, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México. Dra. Karla Cedano Villavicencio Instituto de Energías Renovables, Universidad Nacional Autónoma de México. Temixco, Morelos, México. Dra. Griselda Corro Hernández Instituto de Ciencias, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México. Dr. Miguel Angel Villalobos López Centro de Investigación en Biotecnología Aplicada, Instituto Politécnico Nacional, Tepetitla de Lardizábal, Tlaxcala, México. Dr. Efraín Rubio Rosas Centro Universitario de Vinculación, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Puebla, Puebla, México. Dr. Manuel Mendez Mendez Centro de Estudios Tecnológicos, Industrial y de Servicios 104. Puebla, Puebla, México.

EDITORIAL Hoy en día, y gracias a la elevada demanda de alimentos, la industria alimenticia se enfrenta al reto de proporcionar productos de alta calidad que posean una seguridad sanitaria; es decir, libres de contaminantes biológicos y/o químicos, como patogénos, alérgenos, residuos de agroquímicos, y toxinas. Para garantizar está seguridad, las empresas han utilizado técnicas de análisis que conllevan mucho tiempo y un alto costo derivado de la utilización de equipo sofistado. Partiendo de la necesidad de equipo y técnicas más eficientes y accesibles, ha surgido recientemente una ola de innovaciones tecnológicas, conocida como Biosensores, dispositivos bioelectrónicos que permiten la detección de contaminantes en alimentos. Los biosensores consisten de dos componentes básicos, un elemento de reconocimiento y un mecanismo de detección. El elemento de reconocimiento varía de acuerdo al analíto (aquello que se desea cuantificar), ya sea biológico (célula, ácido nucleico, anticuerpos, o enzimas) o químico (nanomateriales, polímeros). A su vez, el mecanismo de detección (dispositivo electrónico) es el responsable de obtener, amplificar e interpretar las señales biológicas y/o químicas entre la interacción del analito y el elemento de reconocimiento. Como ocurre con muchos desarrollos innovadores, algunos biosensores han tenido su origen en laboratorios de universidades o instituciones científicas. Prueba de ello es el biosensor Canary®, el cual detecta en 5 minutos la presencia, en lechugas, de la bacteria E. coli. Canary® fue desarrollado por el científico Todd Rider del Instituto Tecnológico de Massachusetts, y la patente respectiva fue licenciada a la empresa Pathsensors®. La tecnología utilizada por Canary® ha servido de base para el desarrollo, por parte de esta empresa, de otros dos biosensores de patógenos, Panther® y Zephyr®. En cuestion de análisis de patógenos en alimentos carnicos, los científicos Evangelyn Alocilja y Zarini Muhammad-Tahir de la Universidad del Estado de Michigan desarrollaron un biosensor que permite detectar en 20 minutos la presencia de las bacterias E. coli y Salmonella spp en productos carnicos frescos. Asi mismo, los científicos Nile Hartman, Dan Campbell y Paul Edmonds, del Instituto Tecnológico de Georgia inventaron el biosensor, basado en técnicas inmunológicas, para detectar Salmonella y Campyllobacter en carne fresca de cerdo; está última tecnología ha sido licenciada a la empresa Lumense®. Para detectar toxinas, utilizadas en acciones terroristas, el grupo de científicos, liderado por Ligley del Laboratorio de Investigación Naval de los Estados Unidos, diseñaron un biosensor (NRL Array Biosensor) capaz de detectar, por medio de anticuerpos, las toxinas del cólera y botulismo, así como las bacterias productoras de dichas toxinas, presentes en jitomate, maíz, frijol, y hongos. La tecnología de este biosensor ha sido licenciada a la empresa Hanson Technologies®, la cual comercializa al biosensor como Hanson Leopard®. El uso indiscriminado de atrazina (herbicida) para la obtención de mejores cosechas ha conllevado a la contaminación de aguas, afectando al ecosistema mediante un efecto nocivo sobre diversos anfibios; de igual modo, a dicho herbicida se le atribuyen efectos cancerígenos en humanos. Tratando de darle una solución a esta problemática, un grupo de científicos de la Universidad Autónoma de Barcelona y del Consejo Superior de Investigaciones Científicas, han diseñado un biosensor que permite la detección de la atrazina en jugo de naranja y agua potable. La tecnología base del biosensor se encuentra lista para licenciarse a cualquier empresa interesada. Los científicos méxicanos no permanecen ajenos a este tipo de biosensores; por ejemplo, un grupo de investigadores del Instituto Tecnológico Superior de Irapuato ha patentado un biosensor que determina la presencia de diversos compuestos pesticidas en cultivos de fresas. De igual manera, científicos de la Universidad Autónoma de Baja California ha desarrollado y patentado un biosensor que cuantifica la presencia de enzimas hidrolasas en alimentos. Así mismo, un biosensor que determina la cantidad de glucosa y fructosa en jarabes ha sido patentado por científicos del CINVESTAV-IPN. Sin embargo, pocos son los biosensores desarrollados por mexicanos, y esto nos conduce a una dependencia tecnológica de aquellos biosensores desarrollados en otros países. Por tal motivo, es necesario un fuerte apoyo a la investigación sobre nuevos biosensores, para de esta forma poner la tecnología al servicio de la cadena productiva de alimentos en nuestro país.

Dr. Martín Pérez Santos, Editor

BUAPSUMA 9

TÍTULOS DE PATENTES

en tercer trimestre

2017

Por: Gabriela Sánchez Esgua Oficina de Comercialización de Tecnología Benemérita Universidad Autónoma de Puebla gabriela.sanchez@correo.buap.mx

a BUAP continua impulsando la protección de patentes generadas en la máxima casa de estudios.

logros. Entre las patentes obtenidas en este periodo, se encuentran:

Es así, que suma la obtención de 9 patentes a las 7 ya conseguidas durante el primer semestre de 2017; logrando en lo que va del año el otorgamiento de 16 registros de patentes.

Proyecto de los Dres. Elias Manjarrez López y Jesús Ángel Tapia López, del Instituto de fisiología. Es un dispositivo electrónico, que permite mostrar en tiempo real las trayectorias de propagación de ondas electroencefalográficas (EGG) y permite determinar el centro de masa (CM); innovación que ofrece como ventaja su uso en casos de crisis epilépticas, en que el médico requiere monitorear en tiempo real las zonas cerebrales aproximadas que se activan.

L D

Tales invenciones han surgido de distintas facultades e institutos de la BUAP, por lo que en esta ocasión corresponde congratular a la comunidad académica involucrada en estos

Trayectómetro cerebrales

Trayectómetro

señales

eléctricas

Laboratorio portátil vía tarjetas de interfaz con comunicación programable Ésta innovación fue presentada por los Dres. Sergio Vergara Limón, Aurora Vargas Treviño, Fernando Reyes Cortés, Lilia Mantilla y Marciano Vargas, de la Facultad de Ciencias de la Electrónica. Invención relativa a un laboratorio portátil que utiliza tarjetas de interface de comunicación programable. Con la característica especial de integrar en un sola tarjeta: un diseño del osciloscopio, un generador de onda arbitraria, un generador de patrones digitales y un programa computacional, lo que representa un gran desarrollo de hardware, firmware y software.

Uso del n-acetilfenilalanilmetionina y sus derivados químicos como inhibidores de la neuraminidasa del virus de la influenza humana y animal En esta propuesta se destaca la vinculación que realiza la BUAP con otras instituciones, ya que ésta Invención emanó del trabajo colaborativo entre la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla (BUAP) y el Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS).

Cabe mencionar que el desarrollo de instrumentos controlados por computadora está permitiendo automatizar procesos de caracterización y medición de diferentes sistemas usados en diversas áreas del conocimiento, reduciendo los tiempos de medición y/o caracterización. En la que participaron por los Dres. Thomas Scior, Ygnacio Martínez Laguna y Luz Karina Cuanalo Contreras, de la Facultad de Ciencias Químicas y del Instituto de Ciencias por parte de la BUAP. Y los Dres. Julio Roberto Reyes Leyva, Juan Carlos Flores Alonso y Luis Márquez Domínguez del Centro de Investigación Biomédica de Oriente (CIBIOR) del IMSS.

Tarjeta de interfaz

La mencionada patente, es concerniente al uso del N-acetilfenilalanilmetionina para preparar una composición farmacéutica útil para el tratamiento de la influenza viral. El compuesto N- acetilfenilalanilmetionina tiene la facultad de inhibir la actividad enzimática de la enzima neuraminidasa.

Uso del ácido propanoico 3-[(2,5dimetilfenil) carbamoil]-2-(piperazin-1-il) y sus derivados químicos como inhibidores de la neuraminidasa del virus de la influenza humana y animal Esta creación, de igual forma es resultado del trabajo en equipo entre la BUAP y el CIBIOR del IMSS. Que involucra nuevamente a los Dres. Thomas Scior, Ygnacio Martínez Laguna y Luz Karina Cuanalo Contreras, de la Facultad de Ciencias Químicas y del Instituto de Ciencias por parte de la BUAP. Y los Dres. Julio Roberto Reyes Leyva, Juan Carlos Flores Alonso y Luis Márquez Domínguez del Centro de Investigación Biomédica de Oriente (CIBIOR) del IMSS.

Y se refiere al uso del ácido propanoico 3[(2,5-dimetilfenil) carbamoil]-2-(piperazin-1il), para preparar una composición farmacéutica útil para el tratamiento de la influenza viral. El compuesto ácido propanoico 3-[(2,5-dimetilfenil) carbamoil]-2(piperazin-1-il) tiene la facultad de inhibir la actividad enzimática de la enzima neuraminidasa.

Robot móvil para investigación En la Facultad de Ciencias de la Electrónica se gestó esta patente por los Dres. Sergio Vergara Limón, Salvador Ayala Raggi y Jesús Sánchez Sevilla. Que describe un dispositivo que proporciona un robot móvil que consiste una plataforma superior y una plataforma inferior, una cámara de captura de imágenes del entorno, una computadora para procesamiento de imágenes y toma de decisiones de movimiento del robot, un sistema para el control de los movimientos del robot, un sistema de movimiento que consiste de dos ruedas de tracción independientes y dos rudas de libre giro, y un sistema de circuitos integrados.

Robot móvil Mejora de la compensación de ganancia finita en amplificadores operacionales para integradores de tiempo discreto Patente generada por el Dr. Víctor Rodolfo González Díaz, adscrito a la Facultad de Ciencias de la Electrónica.

Prototipo en CII, integrador en tiempo continúo.

Iniciativa que proporciona una mejora en la compensación de ganancia en DC sin aumentar los recursos del sistema. El esquema cambia la topología de la compensación de ganancia, de modo que se compensa tanto al error de fase del amplificador integrador, como al error de ganancia. Circuito integrador en tiempo continuo insensible a la ganancia finita El Dr. de la Facultad de Ciencias de la Electrónica, Víctor Rodolfo González Díaz, obtiene otra patente más. Relativa a un circuito integrador en tiempo continuo insensible a la ganancia finita. Esta característica es otorgada gracias a la aplicación sobre un método de compensación de ganancia en amplificadores operacionales para circuitos integradores en tiempo continuo, basado en compensar el error inducido por la baja ganancia al leer la tierra analógica del amplificador, e inyectar el error con una etapa de muy baja ganancia que no aumenta los recursos del amplificador integrado.

Circuito

Trazado de circuito integrado de patrón geométrico de comparador de voltaje de alta velocidad Este patrón, también creado por el Dr. Víctor Rodolfo González Díaz, de la Facultad de Ciencias de la Electrónica. Es un circuito con la característica fundamental de ser comparador de niveles de voltaje, diseñado en tecnologías nanométricas. El reto de éste diseño es que las prestaciones de los dispositivos son limitadas, lo que hace difícil hacer comparadores de voltaje confiables y de alta resolución. La topología propuesta mejora la confiabilidad del circuito; ha sido tratado en un proceso de 65 nanómetros, obteniendo resultados que lo coloca en una posición novedosa en comparación con circuitos de la misma tendencia.

Prototipo de circuito integrado

de la Oficina de Comercialización de Tecnología. Dicho programa tiene como objetivo convocar al personal académico y administrativo, así como estudiantes de la Institución, que hayan realizado una invención (sin divulgación previa o bien, no más de 12 meses de haber divulgado) a participar en la protección de ésta como patente. Programa que ha mostrado resultados satisfactorios, lo que se refleja con 16 títulos de patentes obtenidos a tan solo 3 trimestres transcurridos de este año 2017.

Calentador solar de placa termo-continuos Es Roberto Álvarez Zavala, perteneciente a la Facultad de Ciencias Físico Matemáticas quien propuso está Innovación. Que ofrece un dispositivo para calentar agua por exposición a la radiación solar, construido por piezas que incorporan tanto el colector como el contenedor de aluminio; basado en el hecho que se observa al calentar el agua: el agua de mayor temperatura tiende a subir mientras la más fría tiende a bajar.

Es indiscutible el esfuerzo de la BUAP y de los creadores de las invenciones protegidas, mismos que han respondido con entusiasmo año con año al programa “Apoyo al registro de patentes”, impulsado por la BUAP a través

Diseño de página: Jesús Juárez Flores

Alianzas y Tendencias, Vol. 2, No. 7

Las vesículas extracelulares y su papel en la salud y el cáncer.

Extracellular vesicles and their role in health and cancer La comunicación entre células es esencial para la homeostasis de los organismos. Existen al menos cinco tipos de comunicación celular (Tabla 1) que en su mayoría ocurren cuando algunas células liberan moléculas llamadas ligandos que actúan sobre los receptores proteicos de otras células, (blanco o diana). A pesar de los diversos estudios sobre este mecanismo, quedan algunas dudas por responder. ¿Cómo logran llegar con especificidad las moléculas a su destino celular al ser liberadas las moléculas al torrente sanguíneo y linfático? ¿cómo evaden al sistema inmunológico y a enzimas degradadoras como proteasas? Este paradigma está siendo abordado con el estudio de estructuras derivadas de los sistemas celulares, denominadas vesículas extracelulares.

Sandoval Montiel Alvaro Adrian1 Hernández Cortés Paulina2 Guerrero Reyes Jonathan1,2 Anaya Ruiz Maricruz2 Rosas Murrieta Nora Hilda1 1

Centro de Química, ICUAP, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Centro de Investigación Biomédica de Oriente, IMSS

Tabla 1. Vías canónicas de comunicación celular Tipo de comunicación celular Endócrina Parácrina Autócrina

Yuxtácrina Nerviosa

Origen-blanco de la señal Células de glándulas endócrinas-células somáticas Células locales-células locales Las mismas células originan y responden a la señal Células adyacentes se comunican mediante uniones gap Célula nerviosa-célula nerviosa o músculo

tipo de moléculas segregadas Hormonas que viajan por la sangre Proteínas, factores de crecimiento Proteínas, factores de crecimiento Proteínas, factores de crecimiento

Sandoval-Montiel, A. A., Hernández-Cortés, P., Guerrero-Reyez, J., Anaya-Ruiz, M., y RosasMurrieta, N. H. Las vesículas extracelulares y su papel en la salud y el cáncer. Alianzas y Tendencias. 2017, 2 (2): 29-32. Recibido: 10 julio 2017. Aceptado: 9 agosto 2017.

Neurotransmisores

Las vesículas extracelulares son estructuras evolutivamente conservadas, y son aquellos fragmentos rodeados de membrana celular que son secretados de manera controlada por las células vivas. Estas vesículas participan en la comunicación intercelular sin necesidad de contacto directo entre células, gracias a que su contenido recorre largas distancias a través del torrente sanguíneo, linfa u otros fluidos. La célula emisora “carga” de información (lípidos, proteína, glicoproteínas y pequeños RNAs) a las vesículas extracelulares, que posteriormente son excretadas al medio extracelular y, al ser captadas por la célula diana, producirán un efecto específico a través de la información que portan.

Las vesículas celulares pueden, por ejemplo, transmitir señales entre neuronas o entre células del sistema neuroendócrino (vesículas sinápticas). También se conocen vesículas que pueden degradar intracelularmente macromoléculas (sistema lisosomal). Sin embargo, en el pasado no se considero que todas las vesículas extracelulares tuvieran un papel fisiológico, en especial las vesículas de tamaños más pequeños -exosomas- (50 a 100 nm) las cuales son producidas por la mayoría de las células. Sólo recientemente se ha reconocido su papel en la fisiología y en enfermedades [1-6]. Las vesículas extracelulares son diversas y han sido clasificadas por sus características físicas de tamaño, índice de sedimentación, contenido, etc. También artículo de revisión

pueden clasificarse según su origen, ya que pueden surgir a partir de células normales, cancerosas, apoptóticas, etc. En la Tabla 2 se pueden observar ejemplos de los tipos de vesículas que se conocen en la actualidad. Dos principales tipos de vesículas son producidas por las células normales: los exosomas (50 a 100 nm) y las microvesículas en células normales (100 a 1000 nm) [6], y células cancerosas (0.5 a 10 µm). Tabla 2. Principales características morfológicas y marcadores moleculares en vesículas extracelulares de células normales y células cencerígenas. Tipos de vesículas extracelulares Tamaño

Exosomas

50-100 nm

Microvesículas 100-1,000 nm Vesículas apoptóticas

50-500 nm

Oncosomas

500 nm

Oncosomas 1-10 µm grandes

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apoptóticos son más grandes y se forman durante la destrucción de células que entran en el proceso de apoptósis

Las vesículas extracelulares cumplen múltiples funciones como acarreadores de información de célula a célula. Acarrean macromoléculas como proteínas, DNA y RNA; especialmente un tipo de RNA llamado microRNA (miRNA) que es responsable de inhibir la expresión de proteínas (Figura 2). El miRNA se acopla al RNA mensajero (mRNA) de manera específica y evita su unión con los ribosomas. El destino celular de las vesículas depende de las proteínas que tengan en sus membranas. Así mismo, la carga vesicular es muy variada y específica para cada destino celular. Constantemente se descubren nuevas moléculas en las microvesículas, tanto de células normales como provenientes de células cancerosas, por lo que para tener una noción actualizada del contenido vesicular se han creado dos bases de datos de libre acceso: Vesiclepedia y Evpedia[7].

Apariencia por Principales microscopía Composición marcadores Sedimentación electrónica lipídica proteínicos Fosfatidil serina expuesta, Tetraspaninas 1.13-1.10 g/ml 100,000 x g Forma de copa enriquecida en (63, CD9), alix colesterol, y TSG101 esfingomielina y ceramidas Fosfatidil Integrinas, No Forma serina selectinas y 100,000 x g determinado irregular expuesta ligando CD40 1,200 x g No 10,000 x g 1.16-1.28 g/ml heterogénea Histonas determinado 100,000 x g Fosfatidil serina expuesta, No Forma enriquecida en EGFRvIII 10,000 x g determinado irregular colesterol, esfingomielina y ceramidas Fosfatidil serina HDSP1, expuesta, HSPA9, Forma enriquecida en H2AFX, 1.10-1.15 g/ml 10,000 x g irregular colesterol, SLC25A6, esfingomielina CK18, Cav-1 y ceramidas Densidad en sacarosa

Los mecanismos involucrados en la formación de las vesículas extracelulares son diversos también. Por ejemplo, los exosomas y las microvesículas se forman de manera dramáticamente distintas, ya que mientras los exosomas maduran a partir de sistemas membranales llamados cuerpos multivesiculares (Figura 1A), las microvesículas se forman mediante evaginaciones de la membrana plasmática (Figura 1A). En el otro extremo, los cuerpos apoptóticos se forman en el proceso de destrucción de células apoptóticas (Figura 1B), y se diferencian de las vesículas extracelulares provenientes de células normales en su contenido, ya que los primeros pueden contener organelos mientras que las segundas no [6].

Figura 1. Algunos tipos de vesículas extracelulares y su procedencia. A) Los exosomas (representados por los pequeños círculos azules) se forman y maduran dentro de la célula en sistemas membranosos, mientras que las microvesículas se forman como evaginaciones de la membrana plasmática. B) Los cuerpos

Figura 2. Vesícula extracelular. Se representan algunas de las moléculas descritas en las vesículas extracelulares. Se sugiere que las proteínas en las membranas de estas vesículas, como las tetraspaninas y las integrinas pudieran ser las encargadas de definir su destino celular. Además, las vesículas incluyen moléculas transmembranales, glicoproteínas, así como moléculas citosólicas encargadas del transporte molecular y chaperonas. Así mismo, se transportan ácidos nucleicos como DNA y RNAs.

Las vesículas extracelulares provenientes de células normales cumplen diversas funciones fisiológicas, como por ejemplo, estimular la maduración de los espermatozoides al acarrear factores de las células del epidídimo [6]. La presencia de vesículas en el tracto genital femenino facilita al espermatozoide su encuentro con el ovocito [8]. Otra función que cumplen las vesículas extracelulares provenientes de células normales es la de acarrear miR-143, un miRNA, que inhibe el crecimiento de células tumorales [9] (Figura 3A). Condiciones como el tabaquismo pueden inhibir la secreción de vesículas con miR-143, por lo que el tumor puede crecer. En modelos animales se han utilizado vesículas extracelulares provenientes de células madre, para reparar condiciones experimentales de daño en órganos y tejidos. Se han observado mejorías en artículo de revisión

ataques cardiacos [10-12], quemaduras [13,14], daño al riñon[15], daño al hígado [16-18], daño al pulmón [19-21], etc. Esto abre las puertas a la posibilidad de que en el futuro se implementen terapias con medios de células madre ricos en vesículas extracelulares y libres de células [22]. La otra cara que hemos comenzado a reconocer de las vesículas extracelulares es su papel en favorecer el cáncer. Existen evidencias de que las vesículas extracelulares provenientes de células cancerosas contienen factores de crecimiento que utilizan tanto para su autoconsumo (ruta autócrina) como para comunicarse con otras células (ruta parácrina) (Tabla1) para su desarrollo y crecimiento [23] (Figura 3A). Las células tumorales secretan vesículas para reclutar otras estirpes celulares que favorecen su desarrollo, su escape del tumor primario y la inhibición a la respuesta inmunológica [24]. Para lograr esto, las vesículas extracelulares provenientes de células cancerígenas modifican a las células endoteliales (CE) circundantes y promueven el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos (angiogénesis) para alimentar al tumor en crecimiento [25]. Las vesículas extracelulares de células cancerígenas también modifican la conducta de fibroblastos convirtiéndolos en fibroblastos asociados a células tumorales [26]. Los fibroblastos les ayudan a degradar la matriz extracelular (MEC) para entrar a la corriente sanguínea o a los vasos linfáticos, en camino a invadir otros órganos blanco (metástasis) [27]. Estas vesículas extracelulares también son capaces de regular la respuesta inmune ya que reclutan células inmunológicas que secretan inhibidores de la respuesta inmune, ocultándolas de células que pueden eliminarlas, como las células NK (Natural Killers, por sus siglas en inglés) (Figura 3B) [23]. Así mismo, las vesículas extracelulares provenientes de células cancerígenas pueden modificar el microambiente donde iniciarán una metástasis. Esto lo hacen a través de la modificación epigenética de células del nuevo ambiente, mediante proteínas y miRNAs [28]. Las células tumorales son capaces de penetrar en la médula ósea (MO) (Figura 3C), donde podrán tomar al menos dos caminos. Por una parte, mediante vesículas extracelulares modificarán a células madre que se trasladarán a los sitios de metástasis para ayudar a las células tumorales a invadir [29]. Otro camino que pueden tomar las células tumorales es aprovechar a las vesículas extracelulares provenientes de células madre, para adquirir un fenotipo durmiente o de latencia; es decir, entrarán en una fase G0 donde ya no se dividirán y permanecerán por años o incluso décadas, en pequeños cúmulos o microtumores dentro de la médula ósea [30]. Estas células

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eventualmente podrán reactivarse y volver a ser metastásicas. Por su estado de latencia serán difíciles de eliminar con los tratamientos anticancerígenos sistémicos [31]. Para migrar fuera del tumor primario, las células tumorales adquieren un fenotipo que les confiere movilidad, mediante un proceso llamado transición epitelio-mesenquima (EMT, por sus siglas en inglés), que les facilitará invadir otros órganos y tejidos [32]. En este estado, las células tumorales comienzan a secretar un nuevo tipo de microvesículas de gran tamaño (0.5-10 µm) llamadas oncosomas y oncosomas grandes (Figura 3D y Tabla 2) [33, 34]. Este tipo de vesículas son indicativas de estadíos avanzados de cáncer y se propone que contribuyen a modificar el microambiente del sitio de metástasis [24].

Figura 3. Formas en las que las microvesículas extracelulares influyen en el desarrollo tumoral: A) Las vesículas extracelulares (círculos anaranjados) provenientes de células normales (blancas con núcleo azul) pueden regular a las células del tumor (azules con núcleo blanco) por vías parácrinas. Las células tumorales a su vez responden a sus propias vesículas extracelulares (círculos azules) (señales autócrinas). B) Las vesículas extracelulares del tumor (circulos azules) pueden incidir sobre células endoteliales (CE) provocando angiogénesis, al actuar sobre los fibroblastos provocando la degradación de la matriz extracelular y al actuar sobre las células del sistema inmune modulando su respuesta. C) Las células cancerosas son capaces de entrar a la médula ósea (MO) y adquirir un fenotipo latente, al absorber las vesículas extracelulares de células madre (CM) presentes en la médula ósea. D) Las células tumorales capaces de invadir han pasado por la transición epitelio-mesenquima (EMT) y liberan un nuevo tipo de vesículas extracelulares llamadas oncosomas y oncosomas grandes (círculos azules grandes) que se mezclan con otras vesículas provenientes del tumor (círculos azules pequeños) o de células normales (círculos anaranjados). Esta mezcla de vesículas puede afectar células de otros tejidos y contribuir a formar el nicho premetastásico.

artículo de revisión

Las vesículas extracelulares pueden encontrarse en todos los fluidos del cuerpo, incluyendo sangre, linfa, semen, lágrimas, saliva, orina, líquido cefalorraquídeo [6]. Estos fluidos contienen una mezcla heterogénea de vesículas extracelulares de diversos orígenes que hasta el día de hoy ha sido difícil separar y clasificar [35, 36]. Las vesículas extracelulares derivadas de células cancerosas tienden a presentar moléculas sobreexpresadas en los tumores y su contenido ayuda a la metástasis. Por ello, son una fuente interesante de biomarcadores para diagnóstico y seguimiento. Además existen al menos tres formas de usar estos procesos en el tratamiento contra el cáncer: 1) mediante la inhibición de la producción de vesículas extracelulares derivadas de células cancerosas, 2) evitando que las vesículas extracelulares derivadas de células cancerosas sean tomadas por otras células y 3) eliminando a las vesículas extracelulares derivadas de células cancerosas que se encuentran en circulación. Esto podría reducir la angiogénesis tumoral, conducir a un fallo en la formación del nicho metastásico y aumentar la respuesta inmunológica contra el tumor. En la actualidad, se esta analizando el papel clave que tienen las vesículas extracelulares en la homeostasis celular y orgánica, así como el papel de las vesículas extracelulares derivadas de células tumorales en el desarrollo del cáncer. Mientras más se conozca sobre los mecanismos implicados en la producción de las vesículas, su destino celular y las formas de modificarlas, se podrá avanzar en el tratamiento eficiente de diversas enfermedades incluyendo, por supuesto, el cáncer. Bibliografía [1] Akers JC, Gonda D, Kim R, Carter BS, Chen CC. Biogenesis of extracellular vesicles (EV): exosomes, microvesicles, retrovirus-like vesicles, and apoptotic bodies. J Neurooncol 2013;113:111. [2] Colombo M, Raposo G, Thery C. Biogenesis, secretion, and intercellular interactions of exosomes and other extracellular vesicles. Annu Rev Cell Dev Biol 2014;30:255-89. [3] Dreyer F, Baur A. Biogenesis and Functions of Exosomes and Extracellular Vesicles. Methods Mol Biol 2016;1448:201-16. [4] Kalra H, Drummen GP, Mathivanan S. Focus on Extracellular Vesicles: Introducing the Next Small Big Thing. Int J Mol Sci 2016;17:170. [5] Keller S, Sanderson MP, Stoeck A, Altevogt P. Exosomes: from biogenesis and secretion to biological function. Immunol Lett 2006;107:1028.

Alianzas y Tendencias, Vol. 2, No. 7

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artĂculo de revisiĂłn

PRODUCCIÓN DE BIODIESEL A PARTIR DE ACEITES VEGETALES +Biodiesel+ 357 documentos ICP:C11B1/00 2007-2016 TENDENCIA TEMPORAL 87

100 50

11 12 14

MX2011003237A “Proceso para la producción de Biodiesel mediante radiación solar como fuente de energía” Perteneciente a investigadora de la BUAP

59 64 26 21

PAÍSES CON MAYOR CONSUMO DE PETRÓLEO*

PAÍSES CON MAYOR NÚMERO DE PATENTES

E. U 247

E. U 19,150,000

China 49

China 9,400,00

Australia 10

Japón 4,452,00

PRINCIPALES PROPIETARIOS DE PATENTES

Agrisoma Biosciences Livefuels Alltech Edeniq Terravia Holdings Schillinger Genetics Mertec Ms Technologies Stine Seed Farm Monsanto Technology

1 2 2 3

*Número de barriles al día

10 12

66 60

69 70

MÉXICO OCUPA EL SÉPTIMO LUGAR EN PUBLICACIÓN DE PATENTES AL CONTAR CON 3 SOBRE ESTA TEMÁTICA ESPECÍFICA, TENIENDO UN CONSUMO DE 2,073,000 BARRILES DE PETRÓLEO AL DÍA Realizado: Carla de la Cerna Hernández Ofician de Comercialización de la Tecnología DITCo-BUAP Fuente: Patente Inspiration; LENS.

PRODUCTOS DE CUIDADO DE LA PIEL Preparaciones cosméticas con formas físicas específicas

1496 doc. patente 2007-2017

250 200 150

2017

0 2016

L´OREAL PROCTER & GAMBLE FOAMIX LTD LIPOTEC SA GALDERMA RES & DEV MARY KAY INC DOW CORNING GALDERMA SA JOHNSON & JOHNSON CONSUMER

143

50 2015

100

2014

102 107 93

2013

156 161

2012

194

2011

164 159 147

2010

2009

Tendencia Temporal

2008

2007

Principales empresas propietarias

Palabras con mayor recurrencia en el Título y Resumen

159

614

146

Países con mayor número de patentes • • • •

México ocupa el 3er lugar en producción de cosméticos, después de Estados Unido.s y Brasil En el mercado interno aporta el 0.7% de la industria manufacturera. Generó 24 mil empleos directos México exporta a más de 100 países productos relacionados con la industria cosmética.

Elaborado por: Carla de la Cerna Hernández, 2017 Fuente: Patent Inspiration *Secretaría de Economía, 2009

TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES 497 patentes 2007-2017

Por medio de procesos químicos y físicos de catálisis

2007

2008

2009

2010

2011

2012

65 47

2013

2014

2015

2016

En México*, los centros urbanos descargaron aproximadamente 229.73 m3/s de aguas residuales

2017

Países con el agua más contaminada

Afganistán Chad Haití Alemania 20

E. U 16

“A nivel mundial, es probable que más del 80% de las aguas residuales sean vertidas al medio ambiente sin un tratamiento adecuado”**

México 1

Creado por Macrovector - Freepik.com

Elaborado por: Carla de la Cerna Hernández, 2017 OCT-BUAP *Año 2012 **UNESCO 2017

Fuente: Patent Inspiration

China 205 Japón 48

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Inoculación de plántulas micropropagadas de caña de azúcar con bacterias benéficas para potenciar su producción. Inoculation of micropropagated sugarcane seedlings with beneficial bacteria to boost their production.

RESUMEN La caña de azúcar es una planta de alta producción mundial, a partir de la cual se obtienen muchos productos, entre los que destacan el azúcar y el etanol. Una forma de elevar los rendimientos mundiales de esta planta es implementando formas alternativas de cultivo en las que se puede incluir: la micropropagación efectiva de plántulas, su inoculación con bacterias benéficas y la introducción de estas plantas inoculadas en campo. En esta revisión se muestra una alternativa eficiente para realizar la micropropagación efectiva de diferentes variedades de la caña de azúcar y se discuten las aplicaciones que podrían tener las plántulas obtenidas, enfatizando la incorporación de bacterias benéficas, estudios de colonización, estudios de promoción del crecimiento y el incremento del estado de salud de las plantas. Palabras clave: Micropropagación, caña de azúcar, bacterias benéficas, inoculación, fitoestimulación.

ABSTRACT Sugar cane is a plant of high world production, from which many products are obtained, among them sugar and ethanol. One way to raise the world yields of this plant is to implement alternative forms of cultivation which can include the effective micropropagation of seedlings, their inoculation with beneficial bacteria and the introduction of these inoculated plants in the field. This review shows an efficient alternative to carry out the effective micropropagation of different varieties of sugarcane and discusses the applications that the seedlings could have, highlighting the incorporation of beneficial bacteria, colonization and growth promotion studies, and the increment of the health plants state.

América Paulina Rivera Urbalejo1 Osvaldo Rodríguez Andrade1 Yolanda Elizabeth Morales García1.2 Verónica Quintero Hernández1.3 Julieta Mariana Muñoz Morales2 Adriana Carbajal Armenta2 Eric Romero Navarro2 Ariana de Jesús Ramos2 Jesús Muñoz Rojas1* 1

Grupo Ecología y Supervivencia de Microorganismo, Universidad Autónoma de Puebla 2

Biotecnología BUAP 3

CONACYT-BUAP

*Autor corresponsal: joymerre@hotmail.com

Yolanda Elizabeth Morales García, Verónica Quintero Hernández, Julieta Mariana Muñoz Morales, Adriana Carbajal Armenta, Eric Romero Navarro, Ariana de Jesús Ramos, y Jesús Muñoz Rojas. Inoculación de plantas micropropagadas de caña de azúcar con bacterias benéficas para potenciar su producción. Alianzas y Tendencias. 2017, 2 (7): 15-26. Recibido: 14 julio 2017. Aceptado: 25 agosto 2017.

INTRODUCCIÓN La caña de azúcar es una planta de gran interés agrícola que se cultiva ampliamente en los países tropicales, siendo los países que más producen este cultivo: Brasil, India, China, Tailandia, Pakistán, México, Filipinas, Australia, Argentina, Indonesia y artículo de investigación

Colombia (1). La mayor parte de la producción mundial de caña de azúcar es destinada para la obtención de azúcar. Sin embargo, diversos productos pueden obtenerse a partir de esta planta, entre los que destacan el etanol y butanol que son usados como bio-combustibles (2–4). Cabe destacar que éstos biocombustibles son una fuente renovable y presentan ventajas frente a los combustibles fósiles, porque éstos son convertidos completamente a dióxido de carbono (CO2) y agua (H2O); productos que pueden considerarse inocuos para el medio ambiente. A partir de la caña de azúcar también se puede obtener papel, cemento furfural, celulosa microcristalina, conglomerado de fibra de caña de azúcar, alimento para animales, composta, dextrano, glucosa, sorbitol, biogás, entre otros productos (5,6).

Limitantes en la producción de caña de azúcar Los factores que afectan la producción de caña de azúcar de forma general son aquellos que se relacionan con el medio o entorno geográfico, los que resultan de características climáticas y edafológicas naturales y los que resultan de la degradación del suelo por influencia antropogénica. Estos factores influyen directamente en el precio de los productos derivados de su procesamiento, como el azúcar, que han mostrado una tendencia creciente en los mercados nacionales e internacionales (7). En relación con el medio geográfico los factores que se consideran son: El clima, el relieve y el tipo de suelo. El clima interviene mediante las precipitaciones (cantidad y distribución), la temperatura y la radiación solar (8–11). La caña de azúcar es una de las gramíneas con más exigencia de radiación solar para realizar la fotosíntesis, razón por la cual los días nublados afectan directamente su productividad. El relieve es un elemento importante en la redistribución de la humedad y del calor, por lo que se debe considerar nivelar el área de cultivo de una forma que se permita la fluidez del agua para su correcta distribución (12), sin que se llegue al extremo de causar erosión del suelo debida a una fluidez excesiva. La caña de azúcar se adapta a casi todos los tipos de suelo, sin embargo, en suelos ricos en magnesio donde la relación calcio/magnesio (Ca/Mg) es muy baja, la productividad de cultivos es poco favorable (13,14). De la misma forma ocurre si el contenido en carbonato de calcio es alto. La degradación del suelo está relacionada con la actividad y necesidades del humano. El desarrollo histórico-social y político de los pueblos conjuntamente con las necesidades económicas ha provocado el uso exagerado de la tierra para suplir las necesidades de alimentos; lo cual conduce al empobrecimiento de materia orgánica de los suelos

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(15,16). Los suelos donde se cultiva continuamente a la caña de azúcar quedan desprovistos de materia orgánica, bebido a que la planta demanda una elevada cantidad de nutrimentos y en consecuencia el suelo puede ir sufriendo degradación lo que hace que en ciclos posteriores se apliquen cada vez mayores dosis de fertilizante para observar los mismos rendimientos. Por ejemplo en Hawaii se aplican en promedio 400 Kg de nitrógeno/hectárea (N/ha) para obtener los rendimientos adecuados. La caña de azúcar particularmente requiere de altas cantidades de fertilizante nitrogenado para cubrir sus necesidades fotosintéticas y desde el surgimiento de la revolución verde (17), se ha incrementado su uso, observando una aplicación promedio en México de 300 Kg de N/ha para obtener los rendimientos esperados (18). Sin embargo, es conocido que solo un porcentaje pequeño es absorbido por la plantas (25-40%) el restante se pierde por lixiviación hacia mantos acuíferos provocando la eutrofización de éstos (17). La influencia humana ha provocado también efectos adversos sobre los suelos como la salinización por uso excesivo de fertilizantes (ej. cloruro de potasio), destrucción de la estructura y compactación, contaminación por el uso de herbicidas y pesticidas (17).

El uso de azúcar de caña comparado con el uso de jarabe de maíz Como se mencionó anteriormente uno de los principales problemas para producir a la caña de azúcar, es el elevado nivel de nitrógeno combinado (nitratos o compuestos de amonio) que la planta requiere para su desarrollo, lo cual se traduce en un elevado costo para la producción de azúcar (7). En la actualidad se prefiere usar jarabe de maíz como edulcorante, el cual contiene un alto contenido de fructosa y debido a que es más económico (19). Este jarabe se obtiene a partir de almidones de maíz, usando un proceso que involucra una hidrólisis del almidón hasta glucosa y su conversión a fructosa mediante una enzima llamada glucosa isomerasa (20). Actualmente casi todos los refrescos, jugos industriales y golosinas usan jarabe de alta fructosa en sus procesos de elaboración. Sin embargo, el uso de éste jarabe tiene el inconveniente de que puede resultar perjudicial para la salud de las personas ya que aparentemente causa obesidad (20,21). Esto ocurre principalmente debido a que la fructosa es una molécula energética que ingresa a las células humanas sin regulación por insulina, lo que hace que los sistemas metabólicos se encuentren activos y junto con una escasa actividad de ejercicio de los individuos se conduce a un almacenamiento de energía en forma de triacilglicéridos y/o lípidos (22). Incluso hay autores que relacionan el consumo de artículo de investigación

bebidas y alimentos que contienen fructosa con el incremento de casos de diabetes (23). Una alternativa para evitar el riesgo innecesario que conduce el consumo de alta fructosa, es volver a introducir azúcar de caña en las bebidas y alimentos, para ello se requiere estrategias que permitan el abaratamiento de la producción de azúcar, así como la disminución de los costos de producción de la caña de azúcar. En este escrito proponemos usar plantas que requieran un bajo nivel de fertilizante nitrogenado con rendimientos elevados de producción.

Caña de azúcar y la fijación biológica de nitrógeno Recordemos que el nitrógeno combinado se obtiene mediante el proceso de Haber-Bosch, donde se requieren temperaturas muy elevadas; que se alcanzan consumiendo combustibles derivados de petróleo (17), razón por la que solo los países ricos en petróleo pueden disponer de fertilizantes a bajo costo. Brasil por mucho tiempo no tuvo la facilidad de adquirir estos productos (previo al descubrimiento de petróleo en ese país), por lo que tradicionalmente se usaron cantidades de fertilizante muy bajas (60 Kg de N/ha) (24,25), no obstante los rendimientos de caña de azúcar han sido similares a los obtenidos en otros países como México y Estados Unidos donde los cultivos son fertilizados con altas cantidades de nitrógeno (18). Además, en Brasil no se ha detectado disminución de las reservas de nitrógeno del suelo donde se cultiva caña de azúcar a pesar de décadas de cultivo y la cantidad de materia orgánica de sus cultivos se mantiene. Esto fue muy interesante a la vista de investigadores de todo el mundo ya que sugiere fuertemente que el proceso de Fijación Biológica de Nitrógeno (FBN) está ocurriendo en las plantas de caña de azúcar cultivadas en Brasil (24,26,27). La FBN es un proceso realizado por bacterias que son capaces de captar el nitrógeno de la atmósfera (N2) y transformarlo a amonio (NH4+) mediante una enzima llamada nitrogenasa (28). Es un proceso natural y las plantas podrían tomar los derivados de amonio para realizar todas sus funciones metabólicas. Cerca del año 1990 se demostró que la FBN se lleva a cabo en la caña de azúcar cultivada en Brasil y posteriormente también se demostró con cultivos de caña de azúcar en Filipinas y Japón (29–32). En estos trabajos se observó que algunas variedades obtienen hasta el 70% de nitrógeno a través de la FBN pero en otras no se observó contribución alguna mediante este proceso. Desde entonces se desencadenó una fiebre entre la comunidad científica para identificar a la bacteria responsable de llevar a cabo la FBN en asociación con la caña de azúcar (33–36). Sin

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embargo, a pesar de que se han aislado muchas bacterias tanto de la rizósfera como endófitas de la caña de azúcar, no se conoce cuál de ellas podría contribuir con la mayor tasa de FBN. La rizósfera se define como la zona del suelo influenciada por los exudados de las raíces de las plantas y endófito se refiere a los microorganismos que viven en el interior de las plantas sin causar daño; principalmente en zonas vasculares, intercelulares y menos frecuentemente de forma intracelular (28). En 1992 Johana Döbereiner sugirió que las bacterias endófitas de la caña de azúcar contribuyen, de manera más significativa que las rizosféricas en el proceso de FBN, ya que este tipo de bacterias podrían escapar a los efectos fisicoquímicos adversos del suelo, así como a la competencia con otros microorganismos y podrían recibir de una forma más directa los nutrientes necesarios para su multiplicación y para la expresión de la nitrogenasa para una FBN efectiva (35). En 1988 se dio a conocer una nueva bacteria con la capacidad de fijar nitrógeno y que fue aislada del interior de caña de azúcar (34), esta bacteria es conocida en la actualidad como Gluconacetobacter diazotrophicus. Durante mucho tiempo se pensó que la bacteria G. diazotrophicus podría ser una de las especies que más contribuye con la tasa de FBN observada en este cultivo, ya que bajo condiciones in vitro, esta bacteria crece y fija nitrógeno de manera óptima en condiciones de acidez y concentraciones de sacarosa similares a las encontradas en el interior de fluidos de la caña de azúcar. Se sugirió también que G. diazotrophicus podría promover y aumentar el crecimiento de la caña de azúcar a través de efectos hormonales debido a su capacidad de producir ácido indol acético (IAA) y giberelinas (37,38).

Bacterias benéficas y plantas micropropagadas de caña de azúcar Usando plantas de caña de azúcar micropropagadas (libres de bacterias), obtenidas mediante técnicas de cultivo de tejidos, ha sido posible comprobar que G. diazotrophicus es capaz de colonizar distintos tejidos de esta planta, así como también de estimular su crecimiento, predominantemente a través de mecanismos de tipo hormonal y en dependencia del genotipo bacteriano y la variedad de caña de azúcar (39,40). Aunque el cultivo de tejidos de la caña de azúcar fue propuesto y desarrollado por Heinz y Mee en 1969 con el propósito de preservar el germoplasma (41), en la actualidad la micropropagación vegetativa es una técnica adecuada para la obtención de cientos de plántulas con características idénticas y libres de bacterias (axénicas), que sirven para llevar a cabo experimentos de inoculación bacteriana, evaluar los sitios de colonización y sus efectos sobre la planta ya artículo de investigación

sean benéficos o patogénicos (42). A pesar de los esfuerzos realizados, aún no se ha identificado a la bacteria responsable de la mayor tasa de FBN en caña de azúcar, posiblemente los consorcios de bacterias podrían ser los responsables de este fenómeno y no una bacteria sola. La búsqueda de microorganismos que potencien el crecimiento de las plantas ha sido una tarea que se ha desarrollado desde principios del siglo XIX y que se ha incrementado alrededor de 1970 hasta nuestros días. Algunas bacterias como Azospirillum brasilense, Enterobacter sp., Burkholderia unamae, Rhizobium sp., tienen el potencial de promover el crecimiento de plantas (28,43,44). Azospirillum brasilense ha sido ampliamente usado como inoculante para incrementar el tamaño de plantas de tipo gramínea como el maíz (45). En caña de azúcar se han usado de forma exitosa especies de bacterias como Herbaspirillum seropedicae y G. diazotrophicus para incrementar los rendimientos de los cultivos; estas dos bacterias son endófitas de la caña de azúcar (39,46). Aprovechando las investigaciones de los últimos años se pueden obtener plántulas de caña de azúcar mediante micropropagación de cultivo de tejidos, para inocularlas con bacterias benéficas. Debido a que estas plántulas están libres de bacterias (40), se puede asegurar la colonización y establecimiento de las bacterias inoculadas en la plántula (39,42). La introducción de estas plantas en la agricultura, aseguraría el éxito productivo, abaratando los costos de producción debido al efecto promotor que estas bacterias brindarían a las plantas. Se podrían incorporar diversos tipos de bacterias benéficas, por ejemplo; productoras de sustancias inhibitorias, degradadoras de compuestos tóxicos, solubilizadoras de fosfatos, fijadoras de nitrógeno, o con otro tipo de características obteniendo beneficios adicionales (46). Las bacterias productoras de sustancias inhibitorias pueden eliminar a microorganismos patógenos para plantas evitando que las plantas enfermen (44,47), las plantas pueden mantenerse sanas y en consecuencia la productividad se asegura evitando el uso de fungicidas y antibióticos. Un ejemplo de una bacteria que es productora de sustancias inhibitorias es Pseudomonas sp. (figura 1), que inhibe el crecimiento de la bacteria patógena de piña Pantoea ananatis. Por otro lado las bacterias degradadoras de compuestos tóxicos podrían disminuir los niveles de herbicidas y pesticidas que han sido usados durante años en la agricultura moderna mediante la remediación desarrollada en la rizósfera de las plantas (rizoremediación), lo que sería bastante deseable para una agricultura sana y cuyos productos no sean causantes de problemas en el humano por la acumulación de los tóxicos (17).

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Por ejemplo Sphingomonas sp. realiza la rizoremediación de lindano y Pseudomonas putida KT2440 tiene el potencial de llevar a cabo la rizoremediación de suelos con naftaleno (48,49). La capacidad de estas bacterias para degradar compuestos tóxicos podría aprovecharse para ser integrada a plántulas propagadas por cultivo de tejidos y usar estas plántulas con propósitos de rizoremediación.

Figura 1.Halo de inhibición causado por Pseudomonas sp. (centro de la caja) contra el crecimiento de Pantoea ananatis (inicialmente estriada en toda la placa).

Micropropagación de caña de azúcar Una manera exitosa para micropropagar diferentes variedades de caña de azúcar. Ejemplos de variedades micropropagadas mediante esta metodología son las siguientes: MY 5514 (MY=Mayari-Cuba), MEX 57473 (MEX=México), MEX 69290, CP 72-2086 (CP=Canal Point-Florida EUA), SP 701141 (SP=Sao Paulo-Brasil) y ZMEX 5532 (Tabla 1) (39). Las variedades de caña de azúcar micropropagadas, corresponden a variedades de sitios geográficos distintos, obtenidas en años diferentes y con características fenotípicas distintas. Esto sugiere que la metodología de micropropagación propuesta podría funcionar con cualquier variedad de caña de azúcar. Tabla 1. Tiempo aproximado de obtención de callos de diferentes variedades de caña de azúcar, usando 15 mg de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Variedad de caña de azúcar MY 5514 MEX57 473 MEX 69 290 CP 72-2086 SP 70 1141 ZMEX 5532

Aparición de callos (días) 15 20 25 30

+ +

++ ++

+++ +++

+++

+ + ++

+ + +++

++ ++ +++

+++ +++ +++

+ Significa la aparición de callos y ++ ó +++ el nivel de propagación.

artículo de investigación

Obtención del meristemo apical El meristemo apical de la caña de azúcar contiene la célula germinal; cuya característica principal es que tiene la capacidad de reproducirse y diferenciarse a células especializadas para la generación de una plántula (41). Para obtener el meristemo apical se prefieren plantas de entre 5-8 meses de edad. Los tallos deben ser cortados y deshojados parcialmente, dejando los entrenudos superiores sin deshojar con un extremo de punta (hoja). Estos tallos que contienen el meristemo apical deben etiquetarse para no confundirlos y transportarlos, con agua en la base de los tallos, hasta el laboratorio. Una vez en el laboratorio, los tallos deben ser nuevamente deshojados y cortados en ambos extremos hasta obtener un tallo con hoja de aproximadamente 20 cm de longitud (Fig. 2A). Estos pequeños tallos podrán colocarse en botellas Pyrex de 1 L de capacidad, y se lavarán durante 60 segundos con una solución de etanol al 70% con dos gotas de tween 20, para la desinfección del material (Fig. 2B). Posteriormente la solución deberá decantarse y a los tallos contenidos en el frasco se le aplicarán dos lavados extra con agua destilada estéril (Fig. 2C). A continuación los tallos serán sometidos a esterilización química, llenando la botella con una solución de hipoclorito de sodio al 1.5 % y agitando suavemente durante 20 minutos (Fig. 2D). El hipoclorito de sodio será decantado y el exceso deberá ser enjuagado, realizando 5 lavados de 5 minutos cada uno, con agua destilada estéril, bajo condiciones de flujo laminar (área estéril). Los tallos esterilizados serán manipulados con pinzas y material estéril en el resto del desarrollo del explante. Cuidando la orientación de los tallos, estos deben deshojarse con mucho cuidado usando bisturís estériles (Fig. 2E). Cada vez el tamaño de los esquejes se irá haciendo más pequeño, simulando a una pirámide (Fig. 2F y 2G). Una vez que se haya observado la ubicación del meristemo apical (cúspide de la pirámide), se procederá a cortar en finas rodajas al delgado tallo (Fig. 2H), dentro de una solución de citrato de sodio al 1%. El citrato de sodio impide el proceso de oxidación el cual es una limitante en el proceso de la obtención de un explante. Debe de tenerse mucho cuidado en el manejo de las rodajas, ya que es muy importante no perder la dirección correcta de éstas, pues células colocadas en dirección incorrecta no generarán callo. Una vez obtenidas las rodajas, estas deben colocarse sobre medios de cultivo “Murashigue and Skoog” (MS) (50), suplementado con 10% de agua de coco, conteniendo además 2 hormonas: 1 mg de cinetina y 15 mg de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4 D) (dosis alta de esta hormona) (Fig. 2I, 2J y 2K) (39). Nota: a) Si la

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dirección de la rodaja fue perdida, entonces ésta se colocará perpendicularmente al medio. b) El tiempo que transcurre desde que el tallo es esterilizado y enjuagado hasta que se colocan las rodajas en el medio MS, no debe superar los 15 minutos. Tiempos superiores pueden disminuir la eficiencia de la obtención de callos.

Figura 2. Pasos fundamentales realizados para obtener el meristemo apical de la caña de azúcar.

Obtención de callos Los frascos conteniendo los explantes realizados deben cubrirse con papel aluminio para evitar el paso de luz; ya que genera oxidación en las células (Fig. 2L) y posteriormente se deben colocar en una cámara de incubación que oscilaba entre 25-28°C. Los explantes colocados en MS-hormona (15 mg de 2,4D) deben dejarse en oscuridad durante 5 días y después deben ser pasados a medios MS sin hormonas hasta la aparición de callos. Es importante resaltar que los explantes sufren un efecto de oxidación generado posiblemente por la presencia del exceso de hormona. Los explantes deben dejarse en oscuridad hasta la aparición de los primeros callos. Mediante metodologías donde solo se usan 3 mg de 2,4-D en los medios de cultivo de tejido, los callos de algunas variedades de caña de azúcar se obtienen en un tiempo de aproximadamente 30 días, no obstante, algunas variedades como la MY 5514, CP 72-2086 y la SP 70 1141 sufren oxidación en el transcurso de los días y no es posible obtener callo. Sin embargo, cuando se usa una dosis elevada de 2,4-D (15 mg), se observa que a los 5 días todos los explantes muestran la aparición de zonas cafés (inicio de oxidación); pero cuando los explantes son transvasados a medios sin hormona las zonas cafés retornaron a un color “beige” y comienzan a generar callo entre los 10 a 20 días posteriores dependiendo de la variedad de caña de azúcar, ganando tiempo en la obtención de plántulas (Tabla 1). Usando una dosis tóxica de 2,4D y transvasando el explante a frascos sin hormona, es posible obtener callo de diversas variedades de caña de azúcar (Figura 3). artículo de investigación

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son transferidas a macetas a condiciones de invernadero. Las plántulas se dejan crecer bajo las condiciones previamente descritas hasta que alcanzar el borde superior del tubo (40 días aproximadamente). Figura 3. Callos de caña de azúcar obtenidos por micropropagación de cultivo de tejidos. A) Callos en obscuridad, B) Callos expuestos a la luz.

Diferenciación a plántulas Los frascos con callos deben transferirse a cámaras con un fotoperiodo de luz/oscuridad 16/8, provisto por una lámpara fluorescente fría (50 µmol m-2s-1), entre 25-28°C, donde comienzan a pigmentarse de verde (Fig. 3B). En esta etapa las células sufren diferenciaron a plántulas, observando la aparición de puntos verdes en los callos de los cuales derivarán cientos de plántulas. Los brotes verdes deben ser transferidos a medios MS nuevos sin hormonas (Fig. 4A y B) e incubarse bajo las mismas condiciones de fotoperiodo y temperatura.

Figura 4. Diferenciación de callos a plántulas (A) y trasplante a medios nuevos donde las plántulas comienzan a desarrollarse (B).

Individualización La diferenciación a plántulas desde que los callos son expuestos a la luz hasta la obtención de una planta individualizada ocurre en un periodo aproximado de 90 días. La aparición de zonas verdes en los callos ocurre desde los 5 días posteriores a la exposición de la luz. Estas zonas se incrementan con el tiempo (Figura 4A). Cada punto verde se diferenciará hasta formar plántulas pequeñas (Fig. 4B) que crecerán en forma de macollos (Fig. 5A). Estos macollos deben ser periódicamente limpiados de las zonas de oxidación (zonas negras), bajo condiciones de esterilidad, y divididos en macollos más pequeños (Fig. 5B). Las plantas diferenciadas, una vez que han enraizado, deben ser separadas bajo condiciones de esterilidad y trasplantadas en tubos de 2.5 de ancho X 20 cm de largo tipo Pyrex, conteniendo 10 ml de medio MS sin hormonas. Cabe señalar que los tubos deben taparse con algodón estéril, ya que éste permite el paso constante de aire pero mantiene la esterilidad; lo cual permite una mejor adaptación de las plantas cuando

Figura 5. A) Macollo de plántulas diferenciadas a partir de callos después de 70 días de exposición a la luz. B) Macollo dividido a partir de otro como en A y después de eliminar las zonas de oxidación. C y D) Plántulas individualizadas a partir de macollo (B) 90 días después de la exposición a la luz.

Las plántulas obtenidas son clasificadas de acuerdo al tamaño, para homogenizar los experimentos posteriores. Las plántulas son finalmente individualizadas en tubos independientes en donde se crecen hasta alcanzar el tamaño adecuado (Figs. 5C y 5D) para llevar a cabo la inoculación con bacterias benéficas.

Evaluación de contaminación de callos y plántulas La contaminación en callos y en plántulas de caña de azúcar es visible de forma macroscópica, por ejemplo algunos callos contaminados con hongos cambian inmediatamente su color “beige” a color negro, además los hongos terminan invadiendo y creciendo por encima de los callos. En el caso de contaminación por bacterias, estas crecen como colonias sobre el medio MS; en la periferia de los callos o las plántulas. Sin embargo, se ha cuestionado si los callos y plántulas donde no se percibe contaminación a la vista humana, podrían contener bacterias en estado de dormancia y que posteriormente pueden regresar de un estado “viable no cultivable” a un estado cultivable. Para evaluar la presencia de artículo de investigación

contaminación en callos y plántulas, se toman muestras al azar de callos ó plántulas, que son maceradas en morteros estériles (dilución 1:10 peso/volumen) y se cultivan sobre diferentes medios. Se sugiere usar tanto medios mínimos como ricos, por ejemplo se podrían usar: medio MM9-glucosa, Rojo Congo, MacConkey, LB (Luria Bertani), PY, LGI y MESMA. Los callos y los lotes de plántulas que resulten con crecimiento positivo de bacterias u hongos deben ser descartados, para evitar que las plántulas enfermen y para contar con plántulas axénicas en caso de requerirlas para experimentos de inoculación (51).

Inoculación de plántulas Una vez que se cuenta con plántulas individualizadas, estas pueden ser inoculadas con bacterias benéficas de interés o bien directamente pasar a la etapa de adaptación; en caso de solo querer propagarlas. Para el caso de inoculación con bacterias benéficas, se deben elegir plántulas individualizadas de tamaño similar para evaluar la colonización de éstas, su potencial promotor de crecimiento o bien el impacto en la bioremediación de bacterias acopladas a las plantas (39). Las plantas micropropagadas, listas para llevar a cabo la inoculación, son obtenidas en un periodo de 4 meses desde el explante. Un ejemplo de cómo se puede realizar la inoculación de bacterias en plántulas se da a continuación. La inoculación de G. diazotrophicus en caña de azúcar se realiza colocando la raíz de las plántulas micropropagadas en una suspensión bacteriana durante una hora (Fig. 6A y 6B) (51), posteriormente estas deben colocarse en macetas que contienen vermiculita estéril, se riegan con una solución que contiene las sales necesarias y una proporción basal de nitrato de amonio (10 mg). Las plantas posteriormente se colocan bajo condiciones de invernadero (Fig. 6C y 6D). En el invernadero las plantas son regadas con agua estéril de forma periódica y se evalúan los parámetros experimentales que se requieran, en los tiempos requeridos en días posteriores a la inoculación (dpi). En la actualidad se conocen bacterias que promueven el crecimiento de la caña de azúcar y estas pueden ser usadas para incrementar los rendimientos (26,39,40), por esta razón las plántulas inoculadas con bacterias benéficas podrían ser utilizadas para sembrarlas en campo después del periodo de adaptación (15 días en maceta) con el fin de incrementar los rendimientos de los cultivos (46). En nuestra experiencia las plántulas de caña de azúcar pueden ser colonizadas muy bien por bacterias benéficas usando la estrategia de sumergirlas durante una hora en una suspensión bacteriana (1X108

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Unidades Formadoras de Colonia/ml). Por ejemplo se ha explorado la capacidad de diferentes cepas de G. diazotrophicus (PAl 3, PAl 5T, UAP 5560 y UAP 5541 portando el plásmido pRGS561), para colonizar a las plántulas micropropagadas (39,51,52). Previo a la maniobra de inoculación debemos preparar la suspensión bacteriana, para lo cual se recomienda que las cepas crezcan en su medio de cultivo hasta la fase estacionaria. En el caso de las cepas de G. diazotrophicus, éstas se crecen durante 48 horas en medio liquido MESMA a 30°C y luego se inoculan en medios nuevos y se crecen hasta una densidad óptica 0.8 a 450 nm (108 UFC/ml) (52). Las células son centrifugadas y lavadas 2 veces con una solución de MgSO4 10 mM. Finalmente las células deben ser resuspendidas en el mismo volumen inicial y la suspensión final puede ser usada para inocular a las plántulas.

Fig. 6. A) Esquema de inoculación de plántulas de caña de azúcar y trasplante posterior en macetas conteniendo vermiculita estéril. Las plántulas trasplantadas posteriormente deben ser regadas con la solución de MS modificada y un nivel adecuado de nitrógeno. Los experimentos en el invernadero se llevan a cabo bajo condiciones de esterilidad. B) Inoculación de plántulas micropropagadas de caña de azúcar con G. diazotrophicus. La raíz fue sumergida durante una hora en una suspensión bacteriana (1X108 UFC/ml). Fig. 6C y D. Plantas de 30 dpi (días posteriores a la inoculación) en condiciones de invernadero.

Colonización La colonización de la bacteria inoculada en la caña de azúcar podría ser evaluada mediante microscopia electrónica (42) y además contabilizando el número de bacterias presentes en rizósfera o como endófitas de raíz y tallo (39). Los resultados reportados a la fecha han sido muy similares por ambas metodologías. Una metodología reciente ha facilitado la cuantificación masiva de bacterias asociadas a las plantas (53). La colonización de bacterias se ha evaluado entre los 15 y 30 dpi. Este tiempo es suficiente para que la bacteria entre a la planta y se establezca en el interior de la raíz y tallo. El No. UFC/g de planta de G. artículo de investigación

diazotrophicus que se establece en raíz a los 30 dpi oscila entre 104 y 105 dependiendo de la variedad de caña de azúcar y el fenotipo de bacteria analizada (39,53).

Discusión Diferentes han sido las metodologías desarrolladas para micropropagar a la caña de azúcar (39–41,46). En general ha sido observado que dependiendo de la variedad de caña de azúcar se requiere de cierta concentración de hormonas (Cinetina y 2,4-D) para conseguir la obtención de callos (54). Sin embargo, si se usa una dosis elevada de 2,4-D (15 mg), se presupone que los explantes tomarán la proporción de hormona suficiente para su desarrollo y cuando son transferidas a un medio MS sin hormona, la cantidad de hormona tomada será suficiente para inducir la formación de callo; lo cual ocurre en las distintas variedades de caña de azúcar. La diferenciación a plántulas mediante la intoxicación con 2,4-D es muy similar en todas las variedades (alrededor de 90 días) y no es una limitante en la micropropagación de la caña de azúcar. En acuerdo con Heinz y Mee (41) mediante micropropagación vegetativa se obtienen cientos de plántulas de tamaño uniforme, que podrían usarse para una gran diversidad de experimentos u objetivos. Por ejemplo, ha sido demostrado que la propagación vegetativa tiene beneficios grandes para obtener líneas estables de plantas altamente heterocigóticas (55,56), así como los genotipos de papaya donde la forma tradicional de propagación ha fallado para producirlas. La micropropagación ha sido usada también para la multiplicación rápida durante la liberación de una nueva variedad antes de su propagación por métodos convencionales, por ejemplo, con la piña y la fresa (57,58). La micropropagación provee un medio de almacenaje de germoplasma para mantener un stock libre de enfermedades, en condiciones de medioambiente controladas (59,60) y a largo plazo por medio de la cryo-preservación a temperaturas bajas (-70°C). Además, las plantas micropropagadas también pueden usarse para evaluar la colonización de bacterias y la localización de bacterias endófitas, así como los efectos de inoculación bacteriana. Por ejemplo la colonización de G. diazotrophicus en la caña de azúcar se demostró con el uso de plantas axénicas obtenidas por micropropagación vegetativa, cuando éstas se sumergen durante una hora en una suspensión bacteriana. Además, G. diazotrophicus es capaz de establecerse en el interior de la planta en números similares a los reportados en plantas de caña de azúcar cultivadas en campo. Por otro lado, los callos generados en la micropropagación pueden ser usados para la transformación de células con ADN de

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interés (61). Algunas ventajas adicionales de contar con plantas micropropagadas de caña de azúcar son: A) se cuenta con una proporción suficiente de caña destinada como semilla, cuando el área destinada para la producción del cultivo de caña de azúcar es grande y la densidad de plantas de la variedad que se desea sembrar es muy baja. B) La micropropagación de caña de azúcar es mucho más rápida que la propagación natural, así que un cultivar nuevo se puede diseminar rápidamente (62). C) Se eliminan patógenos que normalmente se transmiten vía esqueje (63). Aun cuando ha sido planteado que podría generarse variación somaclonal en plantas derivadas de cultivo de tejido (61), los resultados de colonización de G. diazotrophicus observados, en plantas obtenidas por micropropagación son muy uniformes en cada variedad, mostrando que las plantas tienen características muy similares dentro de la misma variedad de caña de azúcar y que sus características principales para realizar una interacción con bacterias benéficas son mantenidas (39,51). Las plántulas de caña de azúcar micropropagadas por cultivo de tejidos pueden usarse para buscar a la mejor bacteria benéfica o grupos de bacterias benéficas (fijadoras de nitrógeno, estimuladoras de crecimiento, productoras de sustancias antagonistas de patógenos y bacterias bioremediadoras) que se asocian con las plantas. Con esas mejores asociaciones se podría aumentar la productividad de la caña de azúcar y se pueden disminuir los costos de producción beneficiando a la industria azucarera y a la producción de biocombustible (etanol); lo cual a su vez podría tener un impacto positivo en el medioambiente, debido a que éste tipo de combustibles no contaminan el medio ambiente y porque algunas bacterias podrían degradar los compuestos tóxicos usados en agricultura. Otros esfuerzos también se están realizando para disminuir los costos de producción de la caña de azúcar, por ejemplo, se están investigando el mecanismo de acumulación de sacarosa de éste tipo de plantas, para en un futuro poder contar con linajes de caña de azúcar que acumulen una mayor proporción de sacarosa y con mayor rentabilidad (64). La parte más costosa de la micropropagación de caña de azúcar es la división y transplante de las plántulas. Sin embargo, Okamoto y col., (65) diseñaron un sistema robotizado para la automatización de la división y el transplante de plántulas de caña de azúcar micropropagadas. La automatización de la micropropagación de la caña de azúcar, desencadenará sin duda una disminución en los costos de producción de éste tipo de material biológico (66).

artículo de investigación

CONCLUSIONES Y PERSPECTIVAS En general ha sido observado que dependiendo de la variedad de caña de azúcar se requiere de cierta concentración de hormonas (Cinetina y 2,4-D) para conseguir la obtención de callos. Sin embargo, con base a nuestra experiencia, cuando se usan 15 mg de 2,4-D, aparentemente los explantes toman la proporción de hormona suficiente para su desarrollo y cuando se transfirieren a un medio MS libre de hormonas, la cantidad previa adquirida por el tejido fue adecuada para inducir la formación de callo en todas las variedades de caña de azúcar exploradas. La diferenciación a plántulas fue muy similar en todas las variedades (alrededor de 90 días) y no fue una limitante en la micropropagación de la caña de azúcar. Cientos de plántulas de tamaño uniforme son obtenidas, que podrían usarse para una gran diversidad de experimentos u objetivos. Una de las aplicaciones poco exploradas es la incorporación de bacterias benéficas a las plántulas micropropagadas para asegurar su éxito en el campo. Las plantas micropropagadas también pueden usarse para evaluar la colonización de bacterias y la localización de bacterias endófitas, así como los efectos de inoculación bacteriana. Por ejemplo, G. diazotrophicus es capaz de colonizar a las plántulas de caña de azúcar micropropagadas, cuando éstas se sumergen durante una hora en una suspensión bacteriana. Las plántulas de caña de azúcar micropropagadas por cultivo de tejidos podrían usarse para buscar a la mejor bacteria benéfica o grupos de bacterias benéficas (fijadoras de nitrógeno, estimuladoras de crecimiento, productoras de sustancias antagonistas de patógenos) que se asocian con las plantas. Con esas mejores asociaciones se podría aumentar la productividad de la caña de azúcar y se pueden disminuir los costos de producción beneficiando a la industria azucarera y a la producción de biocombustible (etanol); lo cual a su vez podría tener un impacto positivo en el medioambiente, debido a que éste tipo de combustibles no contaminan el medio ambiente.

CONFLICTO DE INTERÉS Los autores no tienen ningún conflicto de interés.

AGRADECIMIENTOS Agradecemos a Vicerrectoría de Investigación y Estudios de Posgrados por el apoyo que otorgan para desarrollar la investigación del grupo Supervivencia de Microorganismos del Laboratorio de Ecología Molecular Microbiana (Proyectos 598, XXX y XXX). América Paulina Rivera Urbalejo es becaria Posdoctoral PRODEP-SEP, Osvaldo Rodríguez Andrade es becario CONACYT y Verónica Quintero-

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Hernández es Investigadora Cátedras CONACYT, por lo que agradecemos el apoyo de dichas instituciones.

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Alianzas y Tendencias, Vol. 2, No. 7

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artículo de investigación

TEMPORALIDAD EN PUBLICACIONES CIENTÍFICAS

TEMPORALIDAD EN SOLICITUDES DE PATENTE

140

80 120

100

50 40

30 40

10 0

0 2013

2014

2015

2016

2008

2017

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016

2017

PRINCIPALES INSTITUCIONES

PRINCIPALES PAÍSES SOLICITANTES

10 8 7

9 8

268

PRINCIPALES PAÍSES

PRINCIPALES SOLICITANTES Baijia Kangjian (Tianjin) Biotechnology Co.

Aristotle University Of Thessaloniki-…

Anhui Moyao Pharmaceutical Co.

Anhui Laotongzhuo Biotechnology Co.

Affliliated Hospital Of Jiangsu University

7% 10%

Yu Jinbiao

Li Yue

China

40%

11%

Estados Unidos Japón

Wan Xiaoyao

Nantong Baiwei Food Co.

Corea del Sur Alemania

Qingdao Municipal Hospital

32%

PRINCIPALES CIP

MERCADO GLOBAL

***

(CUIDADO DE HERIDAS) 300

271

250 200 17.0

150

17.6

18.9

18.2

19.6

20.3

100 50

A61Q

A61G

A61L

0 A61K

A61P

2016

2017

2018

2019

2020

Mil millones USD

Elaborado por: Jesús Valente Leal Rojas Dirección de Innovación y Transferencia de Conocimiento (DITCo) Oficina de Comercialización de Tecnología (OCT) Tel: (222) 2295500 Ext: 2332 Fuentes: *PATENTSCOPE ** SCOPUS *** http://www.marketsandmarkets.com/PressReleases/wound-care.asp

2021

enfermedades cardiovasculares PRINCIPALES SOLICITANTES

TEMPORALIDAD EN SOLICITUDES DE PATENTE* 4,500

Bacher, Gerald

312

Cavalli, Fabio

313

4,000

Novartis AG

3,500

Merck Patent GMBH

370

3,000

Geerts, Andreas

372

2,500

F. Hoffman-La Roche AG

375

2,000

Golz, Stefan

449

1,500

Brüggemeier, Ulf

450

1,000

Mondobiotech Laboratories AG

458

500

Bayer Healthcare AG

349

1,025

0 2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016

2017

TEMPORALIDAD EN PUBLICACIONES CIENTÍFICAS**

PRINCIPALES CIP 70,000 60,000 41,204 50,000 26,232 18,645

40,000 30,000

5,373

4,986 20,000

A61K

A61P

C07D

C07K

G01N

10,000 0 2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016

2017

13,714

PRINCIPALES PAÍSES

PRINCIPALES PAÍSES INSTITUCIONES

13,439 10%

Estados Unidos Reino Unido 9,471

Alemania

55%

12%

17,870

Italia Japón

7,051

15,525 14% 4,980

MERCADO INSUFICIENCIA CARDÍACA (Pronóstico global de fármacos)***

12,414 11.6

10.2

Elaborado por: Jesús Valente Leal Rojas Dirección de Innovación y Transferencia de Conocimiento (DITCo) Oficina de Comercialización de Tecnología (OCT) Tel: (222) 2295500 Ext: 2332

Mil Mollines USD

PRINCIPALES PAÍSES SOLICITANTES

3.2

3.6

4.1

4.7

5.3

6.1

6.9

7.9

8.9

2015 2016 2017 2018 2019 2020 2021 2022 2023 2024 2025 Fuentes: *PATENTSCOPE ** SCOPUS *** http://www.drug-dev.com/Main/Back-Issues/Heart-Failure-Market-to-Soar-to-118-Billion-by-202-1118.aspx

9,839

9,006

DISPOSITIVOS PARA DIAGNÓSTICO DE LA HIPOXIA CEREBRAL TEMPORALIDAD EN SOLICITUDES DE PATENTE* 50

TEMPORALIDAD EN PUBLICACIONES CIENTÍFICAS**

350

300

40 250

35 30

200

25 150

20 15

100

10 50

0 2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

PRINCIPALES PAÍSES SOLICITANTES Estados Unidos 250

2016

2008

2017

2009

¡Tengo miedo!

200

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016

2017

PRINCIPALES INSTITUCIONES University College London

150 100

Australia

University of Pennsylvania

PCT

50 0

Rigshospitalet

Addenbrooke's Hospital

China

EPO

Harvard Medical School

PRINCIPALES SOLICITANTES PRINCIPALES PAÍSES Raumedic AG

7% 9%

Medtronic Inc

11%

Cosman Eric R

56%

Aesculap AG.

17%

691

Estados Unidos

PRINCIPALES CIP

G01L

37 A61N

Elaborado por: Jesús Valente Leal Rojas Dirección de Innovación y Transferencia de Conocimiento (DITCo) Oficina de Comercialización de Tecnología (OCT) Tel: (222) 2295500 Ext: 2332

24 A61F

Millones USD

53 A61M

Alemania

Japón

Canadá

MERCADO MUNDIAL (Oxímetros cerebrales)***

140

A61B

Reino Unido

80.4

Fuentes: 2013 *PATENTSCOPE ** SCOPUS *** http://www.micromarketmonitor.com/market-report/cerebral-oximeters-reports-4488823755.html

85.9

2014

91.7

2015

98.0

2016

104.6

2017

111.7

2018

Alianzas y Tendencias, Vol. 2, No. 7

Úlcera de pie diabético: mapeo de publicaciones científicas y patentes.

Diabetic foot ulcer: mapping of scientific publications and patents

Introducción Mundialmente, la diabetes mellitus es un problema de salud pública que ha mostrado un aumento dramático en las últimas dos décadas: 30 millones de casos en 1985, 177 millones en 2000, 285 millones en 2010, y un estimado de 360 millones de casos para el 2030. En este sentido, los pacientes con diabetes son propensos a múltiples complicaciones, entre las que se encuentra la úlcera del pie diabético, la cual se presenta en un 15% de los pacientes con diabetes [1]. Hoy en día, numerosas investigaciones han demostrado que las presiones plantares elevadas, originadas por las deformidades del pie y la inestabilidad de la marcha, están asociados con la ulceración del pie [2]. Debido al aumento de esta problemática de salud, es necesario un análisis que contribuya a evitar repetir investigaciones científicas. Una herramienta para realizar este tipo de análisis es la vigilancia tecnológica. Por ello, el objetivo del presente trabajo fue analizar las tendencias de investigación científica, y de patentes para el problema de ulceraciones en pie diabético.

Metodología La determinación del estado del arte en publicaciones científicas y patentes relativas al pie diabético se efectúo mediante la plataforma Thomson Innovation. La investigación cubrió aquellas publicaciones científicas y patentes disponibles en el periodo 2010-2014. La investigación se realizó utilizando los siguientes términos: “diabetes” or “diabetic” and “toe” or “foot” or “ankle” or “leg” or “limb” and “infection” or “ulcer” or “wound” or “osteomielitis” or “salvage” or “amputation”. Los resúmenes de las publicaciones y patentes fueron revisadas para determinar su relevancia.

Martín Pérez-Santos*

Oficina de Comercialización de Tecnología, Centro Universitario de Vinculación y Transferencia de Tecnología, Benemérita Universidad Autónoma de Puebla martin.perez@correo.buap.mx

Pérez-Santos M. Tendencias de innovación: úlcera de pie diabético Alianzas y Tendencias. 2017, 2 (7): 30-32. Recibido: 4 julio 2017. Aceptado: 25 agosto 2017.

Resultados Un total de 2,375 artículos científicos fueron publicados durante el período 2010-2014. La siguiente gráfica muestra el aumento constante de publicaciones entre esos años.

600 500

411

434

475

551

504

400 300 200 100 0 2010

2011

2012

2013

2014

Al determinar el país origen de las publicaciones se observó que Estados Unidos fue el país líder, seguido de Inglaterra, Italia, China, Alemania, Japón, India, Holanda y Canadá (siguiente gráfica). Cabe notar que ningún país latinoamericano se encontró dentro del Top Ten. Particularmente, México ocupo la posición 35 con un total de 13 artículos. artículo de investigaciòn

Alianzas y Tendencias, Vol. 2, No. 7

acuerdo con la gráfica siguiente, se puede observar un aumento constante conforme transcurren los años.

600 400

349

388

392 431

468

200 0

Por otro lado, el Top Five de las instituciones (universidades, centro, y/o empresas) fue representado por universidades de los Estados Unidos e Inglaterra. En este sentido, las cinco instituciones más influyentes en este sector incluyen a la Universidad de Washington, Universidad de Arizona, Universidad de Harvard, Universidad de Boston, y Universidad de Manchester. En el caso de México, su único representante fue el Instituto Mexicano del Seguro Social, con sólo tres artículos.

Universidad de Washington ------------57

Universidad de Arizona ----------------- 46

2010

2011

2012

2013

2014

Al igual que las publicaciones científicas, el país líder en patentes de pie diabético fue Estados Unidos, seguido de China, Comunidad Europea, y Australia. Ningún país latinoamericano se encuentro dentro del Top Ten. Particularmente, México tuvo un total de 8 documentos de patente.

Universidad de Harvard ---------------- 44 Universidad de Boston ------------------ 32 Universidad de Manchester ------------ 28

Las principales revistas utilizadas para publicar son mostradas en la siguiente gráfica. En ella se puede notar, a partir de su nombre, que tres de ellas son relativas al tema de heridas. 91

Journal of Vascular Surgery

International Journal of Lower Extremity Wounds

Journal of American Pediatric Medical Association

El Top Five de las empresas es representado por empresas ubicadas en Estados Unidos (Warner Lambert Co.), Alemania (Merz Pharma GMBH), Suiza (Hoffman La Roche, Actelion Pharmaceuticals), y Bélgica (Janssen Pharmaceuticals). Particularmente, México, es representado el Centro de Investigación en Química Aplicada, la Benemérita Universidad Autónoma de Puebla, y el Instituto Politécnico Nacional, con menos de tres patentes cada uno.

Janssen Pharmaceuticals ---------------------------101

Warner Lambert Co. ---------------------------------- 78

Actelion Pharmaceuticals---------------------------- 71

Hoffmann La Roche ------------------------------------ 71

Merz Pharma GMBH ---------------------------------- 71

International Wound Journal

Journal of Wound Care

Adicionalmente, y con relación a las patentes relativas a pie diabético, un total de 2,028 de patentes fueron publicadas durante el período establecido. De

artículo de investigaciòn

Alianzas y Tendencias, Vol. 2, No. 7

Discusión El presente estudio de vigilancia tecnológica se enfocó en un análisis de tendencias de investigación científica y patentes relativas al problema de pie diabético. Los resultados permiten concluir que tanto la investigación científica como la inversión en patentes ha permanecido constante derivado del aumento en incidencia de la diabetes mellitus, y particularmente de úlceras en pie diabético. Sin embargo, esta contante en publicaciones científicas y patentes es liderada por los principales países industrializados, particularmente Estados Unidos, donde sus universidades y empresas van a la vanguardia. Esta situación permite visualizar que los países con mayor incidencia de diabetes mellitus dependerán de aquellos descubrimientos científicos, y por ende de innovaciones (derivadas a través de patentes) originadas en los países líderes. Particularmente, México muestra una debilidad en investigación relativa a pie diabético, muy a pesar de estar entre los primeros lugares de incidencia de diabetes. Esta debilidad también es observable en materia de patentes, ya que menos de diez patentes son de origen de inventores mexicanos, lo que se traduce en una fuerte dependencia hacia la innovaciones allende frontera. En este sentido, y derivado de este análisis, es prioritario establecer una política de salud pública que incluya la investigación científica y desarrollo de innovaciones enfocadas al problema de pie diabético.

Bibliografía [1] Leone S, Pascale R, Vitale M, Esposito S. [Epidemiology of diabetic foot]. Infez Med 2012; 20 Suppl 1: 8-13. [2] Shaw JE, Sicree RA, Zimmet PZ. Global estimates of the prevalence of diabetes for 2010 and 2030. Diabetes Res Clin Pract 2010; 87: 414.

artículo de investigaciòn

DISPOSITIVOS DE UV-C PARA LA CONSERVACIÓN O ESTERILIZACIÓN DE FRUTAS Y VERDURAS

Principales países solicitantes de patentes

1156 documentos científicos y de patente encontrados

Tendencias en la actividad de patente entre 2007 y 2016 118

2007

BEIJING ACADEMY OF AGRICULTURE AND FORESTRY SCIENCES

2008

2009

2010

2011

2012

PANASONIC INTELLECTUAL PROPERTY MANAGEMENT CO., LTD. MEGAIR LTD. LG ELECTRONICS INC. LG ELECTRONICS INC. INSTITUTE OF AGRO-FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY, CHINESE ACADEMY OF… SEÚL BIO SYSTEM CO., LTD. SEOUL VIOSYS CO., LTD. JIANGNAN UNIVERSITY

2013

2014

2015

2016

Principales Códigos de Patentes A23B: Conservación, p.ej. mediante enlatado, de carne, pescado, huevos, frutas, verduras, semillas comestibles; maduración química de frutas y verduras; productos conservados, madurados o enlatados. A23L: Alimentos, productos alimenticios o bebidas no alcohólicas no cubiertos por las subclasesA21DoA23BA23J; su preparación o tratamiento. A61L:Procedimientos o aparatos para esterilizar materiales u objetos en general; desinfección, esterilización o desodorizarían del aire; aspectos químicos de vendas, apósitos, compresas absorbentes o artículos quirúrgicos; materiales para vendas, apósitos, compresas absorbentes o artículos quirúrgicos. A23N: Maquinas o aparatos para tratar las cosechas de frutas, vegetales o bulbos de flor a granel, no previstos en otro lugar; pelado de frutas o verduras a granel; aparatos para la preparación de alimentos para animales. F25D: Refrigeradores; cámaras frigoríficas; neveras; aparatos de enfriamiento o congelación no cubiertos por ninguna otra subclase.

REPÚBLICA DE COREA (ADMINISTRACIÓN PARA EL DESARROLLO RURAL)

Principales Titulares en Patentes

Temporalidad de Publicaciones Científicas

43 42

319 739

A23B

A23L

A61L

A23N

F25D

Principales Instituciones en Publicaciones Científicas CSIC - Centro de Edafologia Oacute;a y Biology Lacute;a aplicada del Segura CEBAS

52 46

Universidad de Buenos Aires

47 43

Universidad Nacional de La Plata

39 28 20 12

Zhejiang University Agricultural Research Organization of Israel Universidad Politecnica de Cartagena United States Department of Agriculture Agriculture et Agroalimentaire Canada Universite Laval

2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016

USDA Agricultural Research Service, Washington DC

Principales Países en Publicaciones Científicas

Potencial de Mercado Value of Global UV-C LED Market

MILLONES USD

259 166

2016

2017

2018

106

2019

2020

2021

Fuente : TrendForce http://press.trendforce.com/node/view/2662

Elaborado por: Blanca Azucena Monge López Fuente: WIPO 2017, PATENTSCOPE.

RECUBRIMIENTOS COMESTIBLES PARA FRUTAS Y VEGETALES Principales Titulares en Patentes

749 DOCUMENTOS CIENTIFICOS Y DE PATENTE ENCONTRADOA

Temporalidad de Publicaciones Científicas.

KUNMING UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY FRUITSYMBIOSE INC. GENERAL MILLS, INC. UNILEVER PLC PRODUCTION AND INNOVATION ON EDIBLE COATING, S.L. 2007

Tendencias en la actividad de patente entre 2007 y 2016

2008

2009

2010

2011

2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2013

2014

2015

2016

Principales Países en Publicaciones Científicas

2007

2012

2016

Principales países solicitantes de patentes

Principales Instituciones en Publicaciones Científicas

50 USDA ARS Western Regional Research Center WRRC

Universite de Bourgogne

Universitat Politècnica de València

UC Davis

23 19

ENSBANA Ecole Nationale Superieure de Biologie Appliquee a la Nutrition et a l'Alimentation

Potencial de Mercado Mercado global de empaques comestibles en millones de dólares

Principales Códigos de Patentes A23B A23L A23P A23G A21D

A23B: Conservación, p.ej. mediante enlatado, de carne, pescado, huevos, frutas, verduras, semillas comestibles; maduración química de frutas y verduras; productos conservados, madurados o enlatados. A23L: Alimentos, productos alimenticios o bebidas no alcohólicas no cubiertos por las subclases A21D o A23B-A23J; su preparación o tratamiento. A23P: Conformación o tratamiento de productos alimenticios no cubierto íntegramente por una sola de las otras subclases. A23G: CACAO; Productos a base de cacao, p. ej. chocolate; sucedáneos del cacao o de los productos a base de cacao; confitería; goma de mascar; helados; su preparación. A21D: Tratamiento, p.ej. conservación de la harina o de la masa, p.ej. por adición de ingredientes; cocción; productos de panadería; su conservación.

2024 2023 2022 2021 2020 2019 2018 2017 2016 0.0

0.5

1.0

1.5

Fuente: http://www.transparencymarketresearch.com/edible-packaging-market.html

Elaborado por: Blanca Azucena Monge López Fuente: WIPO 2017, PATENTSCOPE.

COLORANTES NATURALES PARA ALIMENTOS

Principales países solicitantes de patentes

6406 documentos científicos y de patente encontrados

739 2808

1018

Principales Países en Publicaciones Científicas 695

204 94

Principales Titulares en Patentes

SYMRISE AG

BASF Aktiengesellschaft

DSM IP ASSETS B.V.

Temporalidad de Publicaciones Científicas

CADBURY ADAMS USA LLC THE CONCENTRATE MANUFACTURING COMPANY OF IRELAND WARNER-LAMBERT COMPANY

NESTEC S.A.

Tendencias en la actividad de patente entre 2007 y 2016 2007

2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016

Principales Instituciones en Publicaciones Científicas Central Food Technological Research Institute India Texas A and M University 2007

2008

2009

2010

2011

2012

2013

2014

2015

2016 Ohio State University Universitat Hohenheim

Principales Códigos de Patentes

Oregon State University Universidade Estadual de Campinas

A23K

Ministry of Education China

A23G

Council of Scientific and Industrial Research India Universiti Teknologi MARA

A61Q

Universidade de Sao Paulo - USP

Potencial de Mercado

A23L

Natural Food Colors Market

A61K

A23L: alimentos, productos alimenticios o bebidas no alcohólicas no cubiertos por las subclases A21DOA23B-A23J; su preparación o tratamiento, p. ej. cocción, modificación de las cualidades nutricionales, tratamiento físico; conservación de alimentos o de productos alimenticios, en general. A61K: Preparaciones de uso medico, dental o para el aseo. A61Q: Uso especifico de cosméticos o de preparaciones similares para el aseo. A23G: CACAO; Productos a base de cacao, p. ej. chocolate; sucedáneos del cacao o de los productos a base de cacao; confitería; goma de mascar; helados; su preparación. A23K: Alimentos para animales; métodos especialmente adaptados para su producción.

1.3

1.4

2016

2017

1.5

2018

1.6

2019

1.8

2020

1.9

2021

2.0

2022

2.2

2023

Fuente : http://www.researchnester.com/reports/natural-food-colors-market-globaldemand-growth-analysis-opportunity-outlook-2023/232

Elaborado por: Blanca Azucena Monge López Fuente: WIPO 2017, PATENTSCOPE

INSTRUCCIONES A LOS AUTORES ENVÍO DE MANUSCRITO Los manuscritos deben ser enviados por uno de los autores. El autor correspondiente deberá enviar el manuscrito junto con una carta de Derechos de Autor firmada por los autores del trabajo, en la que se haga constar que se trata de un artículo original, no publicado con anterioridad, ni puesta ha consideración de manera simultanea en otra revista. Los artículos deben enviarse por correo electrónico a la atención de: Dr. Martín Pérez Santos Director de la revista Alianzas y Tendencias: alianzasytendencias@correo.buap.mx LONGITUD DEL MANUSCRITO Artículo de Investigación: deberan contener entre 4000-8000 palabras, excluyendo figuras y tablas. Revisiones: deberán contener entre 800040000 palabras, excluyendo figuras y tablas. PREPARACIÓN DEL MANUSCRITO El manuscrito debe ser escrito en español en un estilo claro, directo y activo. Todas las páginas deben numerarse secuencialmente para facilitar una revisión y edición del manuscrito. SECCIONES DEL MANUSCRITO El manuscrito debe ser dividido en las siguientes secciones: 1. Carta de Derechos de Autor Es obligatorio presentar, junto con el manuscrito, una carta de derechos de autor firmada por el autor correspondiente en la que se declare: a) potencial interés de conflicto, b) reconocimiento de las contribuciones de los autores, c) reconocimiento de los organismos de financiación, y d) certificación de que el manuscrito se preparó de acuerdo con las "Instrucciones para Autores".

2. Título El título del manuscrito debe ser preciso y breve y no contener más de 120 carácteres. Los autores deben evitar el uso de abreviaciones no estandarizadas. 3. Nombres y afiliaciones de los autores Los nombres de los autores deben proporcionarse de acuerdo a previas citaciones o como los autores deseen que se publique, junto con su afiliación institucional, dirección postal, y dirección de correo electrónico. 4. Resumen estructurado Debe proporcionarse un resumen, en español e inglés, el cual debe ser claro, conciso, sin tener más de 250 palabras, e incluir los subencabezados explicítos. Se debe evitar el uso de abreviaturas, así como referencias. Idealmente, cada resumen debe incluir los siguientes subencabezados: antecedentes, objetivo, métodos, resultados y discusión. 5. Palabras clave Los autores deben proporcionar hasta 6 palabras clave en orden alfabético. 6. Organización del texto El texto principal debe iniciar en una página separada y debe estar dividida en página de título, resumen, y texto principal. El texto puede ser subdividido de acuerdo a las áreas a discutirse, las cuales deben seguirse de las secciones de Agradecimientos y Referencias. Los artículos de revisión deben mencionar cualquier revisión previa, reciente o antigua en el área y contener una discusión comprensiva iniciando con los antecedentes del área. Los autores deben evitar presentar material el cual haya sido publicado en revisiones previas. Se recomienda a los autores que comenten y discutan sus observaciones en una forma breve. Para los artículos de investigación, el manuscrito debe iniciar con una página de título y resumen seguido por el texto

principal, el cual debe estructurarse en secciones separadas, tales como Introducción, Metodología, Resultados, Discusión, Conclusión, Conflicto de Interés, Agradecimientos y Referencias. El estilo del manuscrito debe ser uniforme a través de todo el texto y debe utilizarse un tipo de letra de Times New Roman, tamaño 10. El término completo para una abreviación debe preceder su primera aparición en el texto, a menos que está sea una unidad de medida estándar. Las itálicas deben usarse para nombre binominales de organismos (Género y Especie) para énfasis y para palabras o frases no familiares. Las palabras noasimiladas del latín u otras lenguas deben también mostrarse en itálicas e.g., per se, in vivo, in vitro, in situ, versus, in silico, et al., i.e., etc. Simbolos y Unidades: Los simbolos griegos y carácteres especiales a menudo sufren cambios de formato y corrompen o se pierden durante la preparación del manuscrito para su publicación. Para asegurase de que todos los caracteres especiales están incrustados en el texto, dichos carácteres deben insertarse como un simbolo que no sea resultado de otro estilo de formato, de otra manera ellos se perderan durante la conversión al PDF. Para los parámetros deben utilizarse únicamente símbolos del ISO. Todas las clases de medidas deben reportarse solamente en el Sistema Internacional de Unidades. Dichas unidades deben escribirse siempre en Romano y separase del valor numérico por un espacio. 7. Conclusión Debe proporcionarse un pequeño párrafo que resuma el contenido del artículo, y que presente el resultado final de la investigación o proponga un estudio adicional sobre el tema. 8.

Conflicto de Interés

Las contribuciones financieras y cualquier potencial conflicto de interés debe ser establecido. Los autores deben listar las fuentes de financiamiento para el estudio. 9. Agradecimientos Debe agradecerse a cualquier (individuo/compañía/institución) que haya contribuido substancialmente al estudio para contenido intelectual, o haya estado involucrado en la redacción o revisión del manuscrito. 10. Referencias Las referencias deben ser numeradas secuencialmente (entre corchetes) en el texto y listadas en el mismo orden numérico. Todas las referencias deben ser completas y precisas. Las citas en línea deben incluir la fecha de acceso. Los títulos de las revistas deben ajustarse a las actuales abreviaturas de Index Medicus. Es necesario listar todos los autores si el número total de autores es 6 o menos, y para más de 6 autores utilizan 6 autores y luego et al. Los números de referencia deben estar finalizados y la bibliografía debe estar completamente formateada antes de la presentación del artículo. Las referencias deben ser listadas en el siguiente estilo de Vancouver: Revista: [1] Anaya-Ruiz M., Perez-Santos M. Innovation status of gene therapy for breast cancer. Asian Pac J Cancer Prev 2015; 16(9): 4133-6. Libro: [2] Minev BR. Cancer Management in Man: Chemotherapy, Biological Therapy, Hyperthermia and Supporting Measures. 1st ed. Springer: New York 2011. Capítulo de libro: [3] Khandia R, Sachan S, Munjal AK, Tiwari R, Dhama K. Tumor Homing Peptides: Promising Futuristic Hope for Cancer Therapy. In: Rahman A, Zaman K, Eds. Topics in Anti-Cancer Research. Bentham; 2016; 4386.

Memoria de Congreso: [4] Moran GW, Leslie F, McLaughlin JT. Gut hormones and appetite dysregulation in Crohn's disease. The Proceedings of the Nutrition Society, Malnutrition Matters, Joint BAPEN and Nutrition Society Meeting, Harrogate, UK, November 2-3, 2011. Resumen de Congreso: [5] Moss R, Bothos J, Filvaroff E, Merchant M, Eppler S, Yu W, et al. Phase Ib doseescalation study of MetMAb, a monovalent antagonist antibody to the receptor MET, in combination with bevacizumab in patients with locally advanced or metastatic solid tumors. American Society of Clinical Oncology - 10th annual meeting, Chicago, USA (2010). Sitio Web: [6] Organogenesis company website. Available at: www.organogenesis.com/products/bioac tive_woundhealing/apligraf.html. (Accessed on: January 4, 2011).

Tesis: [7] Lindh MB. Mechanisms determining efficacy of tyrosine kinase-targeting anticancer drugs. PhD thesis, Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden, April 2011. Patente: [8] Cid-Monjaraz J, Reyes-Cortes JF. Motion control system for a direct drive robot through visual servoing. WO2016193781 (2016). 11. Tablas y Figuras Las tablas de datos y figuras deben enviarse en formato de Microsoft Word. Cada tabla y figura debe incluir un título que por si mismo explique los detalles incluidos en cada caso. Las tablas y figuras deben numerarse secuencialmente en Arábigo con el número de la tabla o figura en negrita seguida de un título. El título debe ser en minúsculas con la primera letra en mayúsculas. Las tablas y figuras deben insertarse al texto inmediato a su referencia en el texto.

POLÍTICA EDITORIAL Las siguientes políticas de publicación son aplicadas por Alianzas y Tendencias. 1. Revisión por pares Alianzas y Tendencias sigue el procedimiento de revisión por ciego sencillo. Todos los artículos enviados están sujetos a una extensa revisión por pares en consulta con miembros del consejo editorial de la revista y con árbitros externos independientes (generalmente tres revisores). Todos los manuscritos son evaluados rápidamente, y la decisión esta basada en todos los comentarios de los revisores, tomada por el editor en jefe de la revista quien transmite la decisión a los autores. 2. Revisión de textos y pruebas Los artículos se deben escribir en español en un estilo claro y correcto a fin de mantener uniformidad a través del texto. Los artículos enviados son editados antes de su publicación. 3. Derechos de Autor Los artículos deben ser presentados por uno de los autores del manuscrito, y no deben ser presentados por nadie en su nombre. El autor principal/correspondiente deberá presentar una Carta de Derecho de Autor junto con el manuscrito, en nombre de todos los coautores (si los hubiere). El autor o autores confirmarán que el manuscrito (o parte de él) no ha sido publicado previamente o no está bajo consideración para su publicación en otro lugar. Además, cualquier ilustración, estructura o tabla que haya sido publicada en otro lugar debe ser reportada, y se debe obtener el permiso de copyright para la reproducción. 4. Apelaciones y Quejas Los autores que deseen presentar una queja deben remitirla al Editor en Jefe de la revista.

Las quejas al editor pueden ser enviadas a alianzasytendencias@correo.buap.mx 5. Conflicto de intereses Las contribuciones financieras a los trabajos que se informan deben ser claramente reconocidas, así como cualquier posible conflicto de intereses. 6. Prevención del Plagio Alianzas y Tendencias utiliza software libre para detectar casos de texto superpuesto y similar en los manuscritos enviados. Cualquier caso de superposición de contenido se examina más detenidamente por sospechas de plagio de acuerdo con las políticas editoriales del editor. Alianzas y Tendencias considera los siguientes tipos de plagio: i) reproducción de frases, ideas o hallazgos como propios sin el debido reconocimiento, ii) parafraseado pobre: copiar párrafos completos y modificar algunas palabras sin cambiar la estructura de las oraciones originales o cambiar la estructura de la oración pero no las palabras; iii) copiado literal de texto sin poner comillas y sin reconocer la obra del autor original; v) citación adecuada de una obra pero parafrasear mal el texto original (plagio no intencional).