Serotipos de Salmonella spp aislados en el Laboratorio Regional de Sanidad Animal

SEROTIPOS DE SALMONELLA SPP AISLADOS EN EL LABORATORIO REGIONAL DE SANIDAD ANIMAL DE LA COMUNIDAD DE MADRID EN EL PERIODO 2009-2020

El objetivo de este trabajo es identificar los serotipos de Salmonella spp. aislados de muestras biológicas procedentes de animales y de productos para alimentación animal en el Laboratorio Regional de Sanidad Animal de la Comunidad de Madrid entre 2009 y 2020, y encontrar posibles relaciones según las matrices en las que se hayan aislado.

J. A. Díaz de Tuesta García 1 y A. Ortiz Cuevas 2

1 Responsable de Bacteriología y Parasitología. Laboratorio Regional de Sanidad Animal de la Comunidad de Madrid. 2 Jefe de Sección de microbiología de aguas. Laboratorio Municipal de Salud Pública del Ayuntamiento de Madrid.

El género Salmonella, perteneciente a la Familia Enterobacteriaceae, comprende bacilos Gram negativos, oxidasa negativos, anaerobios facultativos y no formadores de esporas. Por su importancia zoonótica, se incluye dentro de los Programas Nacionales de Vigilancia y Control (5, 6).

El género Salmonella se divide en dos especies: S. enterica y S. bongori; S. enterica se divide en seis subspecies: S. enterica subsp. enterica, salamae, arizonae, diarizonae, houtenae e indica.

1,02 %

0,51 % 3,57 %

10,71 %

5,61 % 20,92 %

22,96 %

34,69 % Alimoche Buitre leonado Cernícalo Codornices Gallina Halcón Milano Zorzal común

Según el esquema White-Kauffmann-Le Minor, basado en la identificación de los antígenos somáticos (O), flagelares (H) y capsular (Vi), el género Salmonella comprende más de 2.500 serotipos (4).

Los cinco serotipos más frecuentemente aislados, dentro del marco del Reglamento (CE) 2073 de 2005 y sus posteriores modificaciones, en la Unión Europea durante el año 2017, en alimentos y animales productores de alimentos, son, en este orden: S. Enteritidis, S. Typhimurium, S. Typhimurium monofásica, S. Infantis y S. Newport (7).

MATERIALES Y MÉTODOS

El origen de las muestras es diverso. Las matrices para alimentación animal proceden, en su mayoría, de Programas de Control Oficial de la Comunidad de Madrid.

Las muestras procedentes de aves silvestres y sus presas proceden de distintos estudios llevados a cabo por personal investigador del Museo Nacional de Ciencias Naturales (CSIC): doctores Guillermo Blanco Hervás, Juan Antonio Fargallo Vallejo e Isabel López Rull. Hay también muestras clínicas remitidas por veterinarios de animales de producción y animales exóticos.

El aislamiento de Salmonella se llevó a cabo en el Laboratorio Regional de Sanidad Animal de la Comunidad de Madrid. Este se realizó según el método descrito en la norma UNE/EN ISO6579:2003 (A1:2007 en el caso de heces, hisopos y vísceras), desde 2018, de acuerdo a la norma ISO 6579- 1:2017. Una descripción detallada del procedimiento seguido en el caso de aves silvestres se puede encontrar en otros estudios previos realizados por el mismo personal (1).

El serotipado se realizó en el Laboratorio Central de Veterinaria de Algete (MAPAMA, Cristina de Frutos Escobar), de acuerdo al esquema Kauffmann-WhiteLe Minor, Antigenic formulae of the Salmonella serovars (4).

De un total de 314 muestras con presencia de Salmonella 196 fueron muestras clínicas de aves, 58 de reptiles, 9 de mamíferos, 50 fueron muestras tomadas de alimentos para animales y una muestra de agua.

Las muestras procedentes de aves consisten en hisopos cloacales o bien heces. La distribución por especie animal se puede consultar en la figura.

Las muestras procedentes de reptiles consisten en hisopos de cloaca y, en algún caso, vísceras. Las especies de reptiles analizadas son: lagarto ocelado (45), lagartija cenicienta (7), lagarto verdinegro (2), eslizón (1), tortuga (1), pitón (1), serpiente (1).

S. Typhimurium monofásica es un ejemplo de cómo la salud humana y animal están relacionadas.

Las muestras procedentes de mamíferos consisten en heces. Las especies muestreadas fueron: porcino (6), musaraña (2) y ovino (1).

Las matrices de alimentación animal son las siguientes: 33 harinas (31 de carne, 1 de pescado y 1 de pluma), 7 piensos, 5 proteínas animales transformadas (PAT), 4 materias primas (grasa, alfalfa, masticable y galletas para perros) y un agua.

RESULTADOS

Los serotipos más frecuentes encontrados en alimentos para animales se muestran en la tabla 1. En cuanto a los serotipos más frecuentes encontrados en reptiles, están referidos en la tabla 2.

La especie Salmonella bongori y la subespecie S. enterica subsp diarizone, se encuentran preferentemente en animales de sangre fría y en el medio ambiente, mientras que las subespecies enterica y salamae, se encuentran más frecuentemente en animales de sangre caliente (4). En mamíferos, se aislaron 4 S. Mikawasima (porcino), 2 S. enterica subsp diarizonae (ovino y musaraña), 1 S. enterica subsp arizonae (porcino), 1 S. Typhimurium (porcino) y 1 S. 11:-:1,6 (musaraña).

CONCLUSIONES

Teniendo en cuenta todos los serotipos más frecuentes aislados de las distintas matrices, y, analizando las posibles relaciones existentes entre ellos dentro del enfoque One Health, encontramos los siguientes serotipos predominantes: • En primer lugar hay que destacar los 71 aislados de S. Typhimurium monofásica, todos ellos procedentes de aves. Es cierto que hay un sesgo en este número de aislados, ya que las salmonelas aisladas en aves son un total de 203, número muy superior al de salmonelas aisladas en otras matrices. Este serotipo es un claro ejemplo de cómo la salud humana y animal están relacionadan. Es uno de los serotipos más frecuentemente aislados en casos de salmonelosis humanas, y también procedente de alimentos y animales de producción, principalmente de porcino (7).

Hay también estudios que indican una alta prevalencia de este serotipo en aves necrófagas, probablemente debido a su alimentación en muladares con subproductos de origen animal

TABLA 1. Serotipos más frecuentes encontrados en alimentos para animales.

S. Montevideo (6) S. Livingstone (6) S. Senftenberg (5)

S. Anatum (4)

S. Rissen (3) S. Typhimurium (3) 5 harina de carne; 1 agua Harina de carne

Harina de carne

3 pienso y 1 harina de carne

Harina de carne

Harina de carne

TABLA 2. Serotipos más frecuentes encontrados en reptiles.

S. Israel (18)

S. enterica subsp diarizonae (18)

S. 11:-:- (7)

S. entetrica subsp salamae (4) S. bongori (1) 16 lagarto ocelado, 1 lagartija cenicienta y 1 eslizón 17 lagarto ocelado y 1 lagartija cenicienta 4 lagartija cenicienta y 3 lagarto ocelado

Lagarto ocelado

TABLA 3. Serotipos más frecuentes aislados aves.

S. Typhimurium monofásica (71) S. entetrica subsp salamae (12) S. Israel (10) S. Typhimurium (9) S. Enteritidis (7) S. enterica subsp diarizonae (6) S. Choleraesuis (4) S. Mikawasima (3) S. 11:-:- (3) 35 buitre leonado, 31 alimoche, 4 milano, 1 codorniz 10 cernícalo, 1 milano, 1 alimoche 9 cernícalo, 1 buitre leonado 7 codorniz, 1 buitre leonado, 1 halcón 3 alimoche, 2 buitre leonado, 2 gallina 4 cernícalo, 2 buitre leonado 4 buitre leonado

2 gallinas, 1 buitre leonado 3 cernícalo

no destinados al consumo humano (1, 2, 3). En el caso de S. Typhimurium se comprueba la misma relación pero con menor número de aislados. Si se tienen en cuenta ambos serotipos, se encuentran aislados en aves, mamíferos y alimentos para consumo animal.

Los resultados hacen sospechar de algunas especies silvestres como reservorios de Salmonella.

También es interesante el número de aislados de S. Israel tanto en cernícalos como en reptiles. Esta relación es objeto de diversos estudios por parte de los doctores Juan Antonio Fargallo Vallejo e Isabel López Rull, en los que se puede comprobar la transmisión de este serotipo entre los cernícalos y sus presas (reptiles y micromamíferos). La misma relación trófica se observa en el caso de S. enterica subsp salamae. El serotipo S. Mikawasima se ha aislado tanto de mamíferos (porcino) como de aves. El serotipo S. Newport es uno de los serotipos que más ha aumentado su frecuencia en aislados procedentes tanto de casos humanos como en alimentos y animales de producción (7). En este estudio, ha sido aislado de 3 cernícalos, 2 lagartos ocelados, 1 tortuga, 1 serpiente y 1 buitre leonado, con lo que se puede comprobar la diversidad de especies animales en la que puede estar presente. Finalmente, otro de los serotipos incluidos en los de interés en salud pública (6), es S. Enteritidis. En este caso, ha sido aislado en 8 ocasiones, todas en aves; también coincide con los datos obtenidos de los aislados en animales de producción, principalmente en aves (7). Serotipos pertenecientes a la subespecie diarizonae han sido aislados en este estudio a partir de mamíferos, aves y reptiles, resultando, por tanto, una subespecie ubicua en el medio ambiente (4). En matrices para alimentación animal se han aislado 22 serotipos distintos. Los resultados de este estudio, especialmente determinados serotipos, hacen sospechar la importancia de algunas especies de fauna silvestre como reservorios de Salmonella así como el potencial riesgo de transmisión entre animales de producción y fauna silvestre o viceversa.

BIBLIOGRAFÍA

(1) Blanco, G., Díaz de Tuesta, J.A., 2018. Culture-and molecular-based detection of swine-adapted Salmonella shed by avian scavengers. Sci. Total Environ. 634, 1513-1518. (2) Blanco G (2015) Multiresistant Salmonella serovariedad Typhimurium monophasic in wintering red kites Milvus milvus in Segovia, central Spain. Journal of Raptor Research 49:339–341. (3) Blanco, G., 2018. Supplementary feeding as a source of multiresistant Salmonella in endangered Egyptian vultures. Transboundary and Emerging Diseases 65, 806-816. https://doi.org/10.1111/tbed.12806. (4) Patrick A.D. Grimont & François-Xavier Weill. WhiteKauffmann-Le Minor scheme. 2007. ANTIGENIC FORMULAE OF THE SALMONELLA SEROVARS. WHO Institut Pasteur. Collaborating Centre for Reference and Research on Salmonella. (5) Reglamento (CE) 2073 de 2005, de 15 de noviembre de 2005, y sus posteriores modificaciones, relativo a los criterios microbiológicos aplicables a los productos alimenticios. (6) Reglamento (CE) 2160 de 2003, de 17 de noviembre, y sus posteriores modificaciones, sobre el control de la salmonela y otros zoonóticos específicos transmitidos por los alimentos. (7) The European Union summary report on trends and sources of zoonoses, zoonotic agents and foodborne outbreaks in 2017. 2018 EFSA Journal, 16(12), e05500. 57-59.