LabMedica en Español Noviembre 2016 by Globetech

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LIDER MUNDIAL EN NOTICIAS DE ANALISIS CLINICOS ISSN 1068-1760

Vol. 33 No. 7 • 11/ 2016

NOTICIAS MEDICAS DEL DIA

.es ®

Análisis revoluciona diagnóstico del cáncer

Actualizan guías para diagnóstico de Clostridium Difficile

e ha desarrollado un nuevo análisis de sangre que podría detectar el cáncer con más antelación que nunca antes y que va a cambiar la forma en que el cáncer se diagnostica y, a su vez, llegar a salvar millones de vidas. El ensayo se basa en un simple análisis de sangre, que podría ser utilizado para identificar el cáncer en

e han liberado unas nuevas directrices sobre los mejores métodos para diagnosticar la infección por Clostridium difficile (CDI) y el último documento actualiza el original de 2009, e incluye recomendaciones relativas a la utilización de las nuevas tecnologías de diagnóstico tales como las pruebas de amplificación de áci-

dos nucleicos (NAAT). Los objetivos principales de esta actualización del documento de orientación son resumir la evidencia sobre el diagnóstico por el laboratorio, disponible actualmente sobre la CDI y formular y revisar las recomendaciones para optimizar las pruebas para CDI. Esta actualización es esencial pa-

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Image: Courtesy of Stanford University Medical Center

Prueba detecta alergias respiratorias en puntos de atención

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Prueba de cáncer colorrectal disminuye colonoscopias

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Noticias de IFCC . . . . . . . . . . 57 Nuevos Productos . . . . . . 20-50 Noticias de la Industria . . . . . 66

Biomarcadores para pronóstico de enfermedad renal crónica a enfermedad renal crónica (ERC) es un problema crítico de salud; los pacientes con ERC tienen una alta prevalencia en todo el mundo, y el número de pacientes con enfermedad renal terminal (ERT), que necesitan recibir terapia de reemplazo renal a un costo prohibitivo, está aumentando año tras año.

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Noticias Clínicas . . . . . . . . 4-65

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e ha desarrollado un análisis de sangre que detecta cuando la forma más común de cáncer de mama se ha vuelto resistente al tratamiento, podría duplicar el tiempo medio que tarda la enfermedad en progresar, de alrededor de dos meses y medio a alrededor de seis meses. La prueba detecta mutaciones en un gen llamado receptor de estrógeno 1, o ESR1, que indican cuáles receptores para la hormona femenina,

EN ESTA EDICION

a prueba de cribado que se utiliza con mayor frecuencia para el cáncer colorrectal en toda Europa es la prueba inmunoquímica fecal (FIT) y los pacientes con una puntuación positiva tras las pruebas FIT, a

l virus Zika sólo ha obtenido recientemente la atención debido a los grandes brotes en todo el mundo y una prueba de amplificación de ácidos nucleicos (NAAT) fácil de usar podría desempeñar un papel importante en la detección temprana de la infección y el tratamiento de los pacientes. El diagnóstico de virus Zika se ha basado, hasta ahora, en métodos serológicos, los cuales son a menudo largos de procesar o en las pruebas de

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Prueba rápida molecular detecta virus Zika

Análisis detecta subtipo de cáncer de mama

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n la actualidad, las pruebas de inmunoglobulina E para la detección de asma atópico y otros cuadros alérgicos se realizan en laboratorios centrales y proporcionan resultados después de varias semanas. Una novedosa prueba para los puntos de atención ofrece resultados en minutos, lo que mejora las condiciones de tratamiento. ver articulo en pág. 11

En la actualidad, no existe un método eficaz para predecir el pronóstico de la enfermedad renal crónica (ERC), pero los científicos han descubierto ahora que la medición de los D-aminoácidos, que se presentan sólo en cantidades pequeñas en humanos, proporciona información sobre el pronóstico continúa página 8

Calendario Internacional . . . 66 PUBLICADO EN COLABORACION CON

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Prueba de cáncer colorrectal disminuye colonoscopias viene de portada

continuación se les prescribe una colonoscopia. Sin embargo, el 94,8% de las personas que dan positivo con FIT no tienen cáncer colorrectal y esto significa que hay un número significativo de colonoscopias costosas e invasivas innecesarias, colocando una grave carga para el paciente y para el sistema sanitario. El cáncer colorrectal ocupa el segundo lugar entre todos los nuevos diagnósticos de cáncer y es responsable de aproximadamente 215.000 muertes al año, en Europa. El diagnóstico precoz es crucial, ya que aproximadamente el 97% de los pacientes con cáncer de colon, capturados en la etapa I, tendrán una tasa de supervivencia promedio de cinco años y la mayoría quedará curada, mientras que, si se detecta en la etapa IV las tasas de supervivencia promedio, caen al 7%. De los 41.500 pacientes diagnosticados con cáncer de colon en el Reino Unido cada año, sólo una muy pequeña proporción de ellos son diagnosticados con enfermedad en

estadio I, el 16% de los hombres y el 14% de las mujeres. Así como hay un aumento de la tasa de mortalidad con el diagnóstico tardío, también hay implicaciones económicas importantes puesto que el tratamiento de la enfermedad en etapa tardía es a menudo más costoso que el tratamiento de los pacientes con enfermedad en estadio temprano. Se ha anunciado que un análisis de sangre, la Prueba de Cribado para Cáncer Colorrectal NuQ Triage (VolitionRx Ltd., Namur, Bélgica; www.volitionrx.com), posiblemente reciba la Marca de Conformidad Europea (CE) a finales de 2016 y será comercializada a principios de 2017. La prueba ha demostrado el potencial de reducir colonoscopias en un 25%, mientras que mantiene casi el 97% de detección del cáncer colorrectal. Existen programas organizados de detección del cáncer colorrectal en 14 de los 28 estados de la UE, con otros 10 estados ofreciendo algún tipo de detección primaria accesible a través de instituciones públicas o privadas.

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ISSN 1068-1760 Vol.33 No.7. Publicado bajo licencia por Globetech Media LLC Copyright 2016. Todos los derechos están reservados y su reproducción en cualquier forma esta prohibida sin un permiso autorizado.

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pacientes no diagnosticados. Se podría utilizar para examinar a las personas que están en situación de riesgo o son asintomáticos, lo que significa que podría detectar el cáncer incluso antes de que los síntomas comiencen a manifestarse. Los científicos de la Facultad de Medicina de la Universidad de Swansea (Reino Unido; www.swansea.ac.uk) han optimizado esta prueba en los últimos cuatro años en más de 300 individuos utilizando cáncer de esófago como un ejemplo. Los estudios incluyeron controles sanos, pacientes con pre-cáncer y pacientes con cáncer. La sangre es coloreada con anticuerpos, que funcionan como marcadores para ver si se han producido cambios en la superficie. El análisis de sangre se demora alrededor de 30 minutos y los científicos calculan que los costos de cada prueba serían de alrededor de 35 libras esterlinas o 46 dólares. La prueba fue capaz de diferenciar voluntarios sanos y pacientes con una condición precancerosa del esófago, de los que tenían cáncer. En los individuos sanos de control, se detectan sólo unas pocas células mutadas por millón de glóbulos rojos con un promedio de alrededor de cinco por millón, pero en los pacientes con cáncer, este número puede aumentar en más de 10 veces para llegar a 50-100 mutantes por millón. En pacientes que reciben quimioterapia, que están expuestos a fármacos que inducen, deliberadamente, mutaciones en el ADN, los niveles pueden ser de varios cientos por millón. Curiosamente, estas mutaciones en los glóbulos rojos no juegan un papel directo en el proceso de desarrollo del cáncer. Ellos son “daños colaterales”, producidos en las células sanguíneas que circulan como un subproducto de un cáncer en desarrollo internamente. El beneficio de la mutación de células sanguíneas es que se puede controlar de una manera sencilla, eficiente y no invasiva. La prueba en sangre tarda unas horas en el laboratorio y se puede hacer en cualquier departamento de patología estándar, ya que utiliza equipo de laboratorio corriente. Gareth Jenkins, PhD, profesor e investigador principal, dijo: “La prueba detecta cambios, conocidos como mutaciones, en las proteínas de la superficie celular de los glóbulos rojos. Estas proteínas azucaradas actúan como un “Velcro” para pegar las proteínas de reconocimiento celular a la superficie celular. En las células mutadas, el “Velcro” falta, por lo que las células están “desnudas” para la proteína de interés. Cuando se colorean las células con anticuerpos fluorescentes que detectan las proteínas de reconocimiento celular se pueden diferenciar las proteínas normales de las células mutadas lo cual permite que se calcule la frecuencia de células mutantes por persona”. El estudio fue presentado el 6 de septiembre de 2016, en el Festival de Ciencias Británico, realizado en la Universidad de Swansea, Reino Unido. Imagen: La investigación sugiere que un nuevo análisis de sangre, que está diseñado para detectar el cáncer hasta 10 años antes de que aparezcan los síntomas, podría estar disponible en un plaza de cinco años (Fotografía cortesía de Pablo Paul/Alamy). V

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Análisis detecta subtipo de cáncer de mama viene de portada

estrógeno, en las células cancerosas, que generalmente son impulsados por la hormona, han evolucionado para quedarse permanentemente encendidos, lo que significa que los tratamientos hormonales que bloquean la producción de estrógeno ya no serán eficaces. Los científicos del Instituto de Investigación del Cáncer (Londres, Reino Unido; www.icr.ac.uk) y sus colegas, analizaron muestras de sangre de un total de 783 mujeres que participaron en dos grandes ensayos clínicos de fase III de nuevos tratamientos para los cánceres de mama avanzados, positivos para el receptor de estrógeno, que representan las tres cuartas partes de todos los casos. La extracción de ADN se realizó utilizando el Kit de ácidos nucleicos circulantes, QIAamp (Qiagen, Hilden, Alemania; www.qiagen.com). El ADN libre total se cuantificó a partir de plasma usando RNasa P como el gen de referencia. Para el análisis de la mutación de ESR1, el equipo utilizó análisis, comercialmente disponibles, de reacción en cadena de la polimerasa múltiplex digital de gotitas (ddPCR) para las siete mutaciones más comunes de ESR1. La ddPCR fue realizada en un sistema QX200 (Bio-Rad, Hércules, CA, EUA; www.bio-rad.com). Un ensayo multiplex fue considerado positivo si se observaban, por lo menos, dos gotitas, mutantes de ESR1. Los resultados obtenidos en la ddPCR multiplex fueron caracterizados adicionalmente usando ensayos uniplex ddPCR. Los investigadores encontraron que casi el 40% de las muestras de sangre disponibles, de los 162 pacientes, tomadas al entrar en el estudio, tenían mutaciones en el receptor de estrógeno. Estas mujeres respondieron mejor al fulvestrant, que retrasa la progresión de la enfermedad por 5,7 meses, frente a los 2,6 meses del grupo cuando recibían exemestano. Para las mujeres sin mutaciones ESR1, ambos tratamientos, fulvestrant y exemestano, tenía la misma eficacia. Los científicos también observaron un segundo ensayo que había comparado el tratamiento con fulvestrant y un placebo al tratamiento con fulvestrant y palbociclib. Encontraron que el 25,3% de las muestras de sangre de pacientes tenían mutaciones del receptor de estrógeno en este ensayo. Pero debido a que el palbociclib está dirigido contra moléculas diferentes, los pacientes tuvieron los mismos resultados, independientemente de si o no tenían la mutación en el receptor de estrógeno. Nicholas Turner, MD, PhD, un oncólogo médico y líder del equipo dijo: “Nuestros resultados muestran que el cáncer de mama con y sin mutaciones ESR1 son subtipos distintos que responden de manera diferente al tratamiento. Estos subtipos se pueden diagnosticar de manera sencilla y barata a partir de un análisis de

sangre, y deben ser considerados para futuros ensayos clínicos de cáncer de mama avanzado con el fin de asegurar que las pacientes están recibiendo el mejor tratamiento para su cáncer. Por primera vez deberíamos poder utilizar una prueba potencialmente simple para ayudar a elegir el mejor tratamiento para las mujeres con cáncer avanzado, después de que su tratamiento inicial ha fallado. Nos hace falta confirmar los resultados en otro ensayo antes de poder poner en práctica esto clínicamente”. El estudio fue publicado el 1 de septiembre de 2016, en la revista Journal of Clinical Oncology.

Imagen: El sistema de reacción en cadena de polimerasa QX200 digital en gotitas (ddPCR) (Fotografía cortesía de Bio-Rad).

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Biomarcadores para pronóstico de enfermedad renal crónica viene de portada

de la ERC. Los D-aminoácidos, los enantiómeros de los L-aminoácidos, son cada vez más reconocidos como biomarcadores potenciales en varias enfermedades. Los nefrólogos en la Escuela de Postgrado de la Universidad de Medicina de Osaka (Osaka, Japón; www.osaka-u.ac.jp) reclutaron, de forma prospectiva, a 118 pacientes consecutivos con ERC en estadios 3, 4 y 5, que no estaban en diálisis, a partir de un único departamento de nefrología entre agosto de 2005 y enero de 2009. Se recolectaron las muestras basales de sangre de los pacientes después de un ayuno de 12 horas en tubos plásticos para preparar plasma. Los enantiómeros de los aminoáci-

dos fueron cuantificados utilizando una plataforma de micro cromatografía líquida de alto rendimiento bidimensional (HPLC-2D). Los derivados de los aminoácidos, con 4-fluoro-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol (NBD), fueron separados usando una columna de fase inversa (Shiseido, Tokio, Japón; www.hplc.shiseido.co.jp). El tiempo de retención de los ácidos NBD-aminoácidos fue determinado mediante enantiómeros auténticos de los aminoácidos, y las cantidades fueron determinadas por las líneas de calibración. Todos los datos cuantitativos se obtuvieron mediante detección de fluorescencia. En la segunda dimensión, se utilizó la HPLC-espectrometría de masas (MS/MS) para confirmar la presen-

DPA-Dx* Análisis multiplex dirigido con perfiles de alergias personalizados Diagnósticos moleculares para alergias— Ir al grano

Diferenciación entre múltiples sensibilizaciones y reacciones cruzadas Evaluación del riesgo de reacciones alérgicas severas Selección dirigida de los pacientes adecuados para inmunoterapia específica Manejo óptimo del paciente para mejor calidad de vida

Perfil

Componentes de los alergenos

DPA-Dx Polen 1

Abedul (rBet v1, v2, v4, v6) Pasto (rPhl p1, p5, p7, p12)

DPA-Dx Pediátrico 1

Leche (nBos d, d4, d5, d6, d8) Huevo (nGal d1, d2, d3, d4) Maní (rAra h1, h2, h3, h9)

DPA-Dx Leche 1 Leche (nBos d, d4, d5, d6, d8) DPA-Dx Maní 1

Maní (rAra h1, h2, h3, h5, h6, h7, h9) Abedul (rBet v1)

DPA-Dx Venenos de Insectos 2

Abeja (rApi m1, m2, m10) Avispa (Ves v1, v5)

*DPA-Dx = diagnósticos definidos de alergenos parciales

Para más información, contacte a la Dra. Astrid Starke

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cia de los D-aminoácidos en las matrices biológicas reales. Los instrumentos API-5000 y Triple Quad 5500 (AB Sciex, Framingham, MA, EUA; www.sciex.com), fueron utilizados como instrumentos de MS/MS. Los científicos descubrieron que se detectaron 16 de los 21 D-aminoácidos en la sangre de los pacientes con ERC. Los análisis posteriores revelaron que la D-serina y la D-asparagina estaban asociados con la progresión de la ERC; el riesgo de progresión a ERT se elevó de dos a cuatro veces, en aque-

llos con los niveles más altos de los Daminoácidos. Los autores llegaron a la conclusión de que su estudio proporcionará el método novedoso con el cual los médicos podrán identificar a los pacientes con ERC en alto riesgo de progresar a ERT. La información de los D-aminoácidos permitiría seleccionar el mejor tratamiento para la persona individual, así como el descubrimiento de una terapia nueva. El estudio fue publicado originalmente, en línea, el 18 de mayo de 2016, en la revista Scientific Reports.

Actualizan guías para diagnóstico de Clostridium difficile viene de portada

mejorar el diagnóstico de CDI y para mejorar la uniformidad en el diagnóstico de CDI con fines de vigilancia entre los países europeos. Los científicos que trabajan bajo los auspicios de la Sociedad Europea de Microbiología Clínica y Enfermedades Infecciosas (ESCMID, Basilea, Suiza; www.escmid.org), identificaron 795 nuevos estudios, de los cuales se excluyeron 693 y 102 fueron seleccionados para ser revisados. De éstos, 61 adicionales fueron excluidos, dejando 41 estudios disponibles que se utilizaron para apoyar las nuevas directrices. Las razones para la exclusión incluyeron pruebas de referencia incorrectas o inconsistentes, pruebas de índice incorrectas o inconsistentes, almacenamiento incorrecto de las muestras y ensayos incompletos de las muestras. Un total de 43 estudios también fueron considerados del meta-análisis original de los cuales 28 fueron excluidos y 15 utilizados. Se evaluaron diversos ensayos de laboratorio disponibles de proveedores comerciales por su capacidad para diagnosticar con exactitud la CDI. Se usó un ensayo de referencia, típicamente el ensayo de neutralización de la citotoxicidad celular (CNNA) o el cultivo toxigénico (TC) para investigar la exactitud de varias pruebas que han surgido desde 2009. Entre estos se incluyeron los inmunoensayos enzimáticos (EIA) que detectan la glutamato deshidrogenasa o las toxinas A y B y las nuevas NAAT. Las recomendaciones más fuertes basadas en la evidencia de todos los estudios, en el meta-análisis, fueron: las muestras a ser analizadas para CDI no deben limitarse a los casos en los que un médico las ha recomendado específicamente; se puede usar un

hisopo rectal para el análisis por cultivo (toxigénico), pruebas NAAT o de glutamato deshidrogenasa (GDH) EIA, en pacientes con íleo aparente (intestino inactivo sin sonidos intestinales discernibles); los ensayos independientes, individuales, no son fiables y no deben ser utilizados: un algoritmo de dos pasos es necesario. Este algoritmo de dos pasos implica una combinación de ensayos rápidos con exámenes de seguimiento: Ruta uno- el procedimiento de dos etapas debe comenzar ya sea con una prueba NAAT o GDH EIA. Las pruebas negativas deben ser tratadas como CDI negativas, mientras que las pruebas positivas deben ir seguidas por una prueba EIA para las toxinas A/B con el fin de confirmar el resultado. Ruta dos - el procedimiento de dos etapas debe empezar con tanto la prueba EIA GDH y la prueba EIA para la toxina A/B. Si ambas pruebas dan resultados positivos, es probable que la CDI esté presente. Si ambas pruebas son negativas, la CDI es poco probable que esté presente, sin embargo, si la GDH es positiva y la prueba para la toxina A/B es negativa, entonces las pruebas pueden opcionalmente ser objeto de seguimiento con una prueba NAAT o de TC. E. J. Kuijper profesor de microbiología experimental y autor principal del estudio, dijo: “Las nuevas directrices están destinadas para uso entre los microbiólogos, gastroenterólogos, infectólogos médicos y profesionales de control de infecciones. Nuestro objetivo es no sólo mejorar el diagnóstico de CDI, sino también estandarizar el proceso de diagnóstico en toda Europa para permitir una mejor vigilancia de la enfermedad”. El estudio fue publicado en línea el 22 de julio de 2016, en la revista Clinical Microbiology and Infection. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Prueba rápida molecular detecta virus Zika viene de portada

amplificación de ácidos nucleicos (NAAT), tales como la reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa, en tiempo real (RT-PCR). La RTPCR requiere el uso de instrumentos de alta precisión para las reacciones de ciclado térmico y personal cualificado para realizar el protocolo complejo y la interpretación de los datos. Los científicos de Orion Diagnostica OY (Espoo, Finlandia; www.oriondiagnostica.com) y un colega británico, han desarrollado una NAAT alternativa, el ensayo de amplificación basado en la transcripción inversa de invasión de hebras (RT-SIBA) para la detección rápida del virus Zika. Durante las reacciones RT-SIBA, el ácido ribonucleico (ARN), del virus Zika, primero se transcribe inversamente a ADN complementario (cADN), seguido de amplificación y detección del cADN en condiciones de reacción isotérmica. La prueba SIBA se basa en un oligonucleótido de invasión (OI) de cadena sencilla, recubierto por una recombinasa, para la separación de un dúplex diana complementario. También compararon el desempeño de la RT-SIBA con la PCR en tiempo real, para la detección del virus Zika. La reacción RT-SIBA se realizó utilizando el dispositivo de PCR en tiempo real, Agilent Mx3005P (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, EUA; www.agilent.com) y reacciones paralelas, utilizando un dispositivo de detección de fluorescencia portátil, Orion GenRead, que es adecuado para las aplicaciones en los puntos de atención o en el campo. El equipo encontró que en la RT-SIBA, el tiempo hasta los resultados positivos para 1.000 copias de la plantilla de ARN transcrito in vitro se obtuvo después de un promedio de 17 minutos. A la inversa, los resultados positivos, para 1.000 copias de la plantilla de transcripción de ARN in vitro, por RT-PCR, se obtuvieron después de un promedio de 68 minutos. La RT-SIBA permite la transcripción inversa simultánea del ARN del virus Zika y la amplificación del cADN, a la misma temperatura de reacción. Esto permite la detección rápida del ARN del virus Zika en un tiempo máximo de 30 minutos y fue significativamente más rápido que el método de RT-PCR. El virus de la fiebre amarilla, del dengue 1, del Nilo Occidental, el virus Chikungunya o cualquiera de los 15 microorganismos diferentes, no relacionados, no fueron detectados por la RT-SIBA y los ensayos de RT-PCR Zika. Esto puede indicar que tanto los ensayos RT-SIBA como RT-PCR, son específicos, para la detección del ARN del virus Zika. Los autores concluyeron que la rápida detección y la alta sensibilidad analítica mostrada por la prueba RT-SIBA para la detección de virus Zika, así como la tolerancia a la inhibición derivada de la muestra, demuestran que el método puede ser una herramienta de diagnóstico molecu-

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lar de gran alcance para la detección del virus Zika. Dado que el método se puede ejecutar en dispositivos portátiles y de relativamente bajo costo, puede ser aplicada en la rápida respuesta a los brotes. El estudio fue publicado el 1 de septiembre de 2016, en la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. Imagen: Una cápside del virus Zika, coloreado por cadenas. Una nueva investigación sugiere que un análisis basado en la amplificación de la invasión de las cadenas de transcripción reversa (RT-SIBA) mejorará la detección rápida del virus Zika (Fotografía cortesía de Wikimedia Commons).

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Combinación de dos pruebas reduce tasas de fallas en diagnóstico del cáncer e recomienda efectuar la prueba de Papanicolaou (Pap) a las mujeres entre 21 y 65 años de edad como prueba para el cribado del cáncer de cuello de cuello uterino. Las mujeres de 30 años o más de edad que dan resultados negativos en las pruebas complementarias pueden esperar hasta cinco años para su siguiente prueba pero, no obstante, los médicos recomiendan que se practiquen exámenes anuales. En los últimos años, se han aplicado en la práctica clínica las pruebas para los virus del papiloma humano de alto riesgo (VPHar), las cuales buscan averiguar sobre la presencia y la relevancia de células escamosas atípicas, cuyo significado es indeterminado y se las ha complementado con la citología. Unos científicos del Hospital Metodista de Houston (Houston, TX, EUA; www.houstonmethodist.org) y sus colegas, revisaron de forma retrospectiva la correlación de las pruebas de citología, histología y VP-

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Har mediante el uso de una base de datos de la garantía de calidad de los laboratorios de citología que contenía 130.648 pruebas de Papanicolaou (Pap) interpretadas en BioReference Laboratories (Houston, TX, EUA; www.bioreference.com) y en el hospital Metodista de Houston desde el 1º de marzo de 2013 hasta el 30 de junio de 2014. Entre las 47.499 pacientes a quienes se les habían realizado conjuntamente la citología y las pruebas para VPH, se les realizaron biopsias de seguimiento a 1.654 de ellas. La sensibilidad de las pruebas de VPHar y de Papanicolaou fue de 80,8 % y 81,2 %, respectivamente, para detectar cualquier tipo de displasia cervicovaginal y de 91,3 % y 90,9 %, respectivamente, para las lesiones cervicovaginales de alto grado. Para los 253 casos de lesiones cervicovaginales de alto grado confirmadas mediante biopsia (neoplasia cervical intraepitelial de grado 2+, adenocarcinoma in situ o carcinoma), las tasas de falsos negativos para

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las pruebas de VPHar y Papanicolaou fueron de 8,7 % y 9,1%, respectivamente. Cuando se combinaron las pruebas, los equipos encontraron que sólo tres de esos 253 casos tuvieron resultados negativos dobles, tanto para la prueba de Papanicolaou como para la de VPHar. Por lo tanto, la tasa de falsos negativos para las pruebas conjuntas de citología y VPHar, fue de sólo el 1,2%. El estudio fue publicado en la edición de mayo de 2016 de la revista Cancer Cytopathology.

Tecnología con infrarrojo para detectar colitis mínimamente invasiva as enfermedades inflamatorias del intestino, que incluyen la colitis ulcerativa y la enfermedad de Crohn, implican la inflamación crónica de la totalidad o parte del tracto digestivo y pueden llevar a complicaciones que amenazan la vida tales como el cáncer colorrectal. La evaluación de esta inflamación sigue siendo un reto y el diagnóstico clínico se consigue actualmente mediante la colonoscopia, que utiliza un endoscopio o tubo flexible con una luz y una cámara para examinar el tracto digestivo. Unos científicos de la Universidad del Estado de Georgia (Atlanta, GA, EUA, www.gsu.edu) han diseñado un método mínimamente invasivo para el cribado de la colitis ulcerosa, una enfermedad debilitante del tracto gastrointestinal, con el empleo de una novedosa tecnología de infrarrojo, que podría significar un método rápido y rentable para la detección de la enfermedad y que elimina la necesidad de biopsias y pruebas invasivas del cuerpo humano. Dicha técnica consiste en un análisis de suero, el líquido claro que se puede separar de la sangre coagulada, para determinar el aumento de los niveles de mannosa, un azúcar que es marcador de la colitis, utilizando espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier con reflectancia total atenuada (ATR-FTIR). En el estudio, fueron examinados unos ratones de dos categorías para detectar la colitis, utilizando la espectroscopia ATR-FTIR. El primer grupo incluía ratones con eliminación selectiva de los genes de la interleuquina 10 (IL-10), conocidos como ratones con interleuquina 10 knockout (o IL10 -/-), los cuales desarrollan la colitis a través de las células inmunes T helper. Esta enfermedad de los ratones IL10 -/- se parece mucho en sus características fisiológicas, histológicas y bioquímicas a la colitis crónica de los humanos. En el segundo grupo de ratones, se indujo la colitis mediante la administración de dextrano sulfato de sodio. La colitis de estos ratones es similar a la colitis ulcerosa de los seres humanos. En ambos grupos, se recogieron y analizaron muestras de sangre y de heces. También se hicieron análisis para los ratones de los grupos de control. Los científicos encontraron que la espectroscopia ATR-FTIR fue una herramienta eficaz para la detección de la colitis en el suero de los ratones, ya que mostró un aumento significativo de los niveles de mannosa, un indicador de la colitis. El estudio fue publicado el 20 de abril de 2016, en la revista Journal of Biophotonics.

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Prueba detecta alergias respiratorias en puntos de atención a identificación de pacientes con asma no controlada mediada por la inmunoglobulina E sigue siendo un área de alta necesidad insatisfecha y se calcula que, en Europa, más de 30 millones de personas están afectadas por el asma, y aproximadamente la mitad de los pacientes siguen sin estar controlados. Las pruebas actuales para la inmunoglobulina E se llevan a cabo en los laboratorios centrales y se pueden demorar hasta varias semanas antes de que se conozcan los resultados; Sin embargo, las pruebas para los puntos de atención (POC), en el consultorio del profesional de la salud, tienen el potencial de reducir el tiempo desde la consulta hasta el diagnóstico y la decisión de tratamiento, con lo que se mejoran los resultados en los pacientes. La concentración total de inmunoglobulina E (IgE) en la sangre (Total IgE) es un biomarcador importante para el diagnóstico y el manejo del asma atópico y otras enfermedades alérgicas. La IgE elevada puede ser utilizada como un primer indicador para el asma atópico en la población general. En los pacientes con asma, los niveles más altos de IgE se asocian con un aumento de la gravedad del asma y con la reducción de la función pulmonar. Se ha introducido recientemente, una herramienta de diagnóstico novedosa, de punto de atención, que se puede usar en el consultorio, el Sistema Niji y la prueba de IgE total (Novartis, Basilea, Suiza; www.novartis. com) la cual proporciona niveles de IgE total cuantitativos en unos 12 minutos, utilizando aproximadamente 30 μL de sangre obtenida por punción digital. La prueba tiene un intervalo dinámico de 30 a 1500 UI/mL, lo que permite un diagnóstico rápido en el consultorio para los trastornos alérgicos mediados por la IgE, en conjunción con otros hallazgos clínicos. El Sistema Niji no requiere ninguna preparación de la muestra, configuración demorada o cualquier procedimiento de calibración. Las evaluaciones de desempeño clínicas y no clínicas, realizadas con la prueba de IgE total Niji demostraron un desempeño comparable al de las pruebas de laboratorio de referencia que se comercializan actualmente. La prueba puede ser una herramienta útil para los profesionales de la salud como una ayuda en el diagnóstico de las enfermedades alérgicas, mediadas por IgE, en conjunción con otros hallazgos clínicos en su consultorio. El Sistema Niji es para uso por los profesionales de la medicina y se compone de un analizador pequeño de mesa, accesorios opcionales y cartuchos desechables, específicos, para cada prueba. Se basa en una tecnología, patentada, piroeléctrica que permite el diseño de pruebas de inmunoensayo rápidas, sensibles, usando muestras de sangre capilar sin procesar. Esto permite el desarrollo de pruebas, que cuantifican las pro-

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teínas, anticuerpos, moléculas de medicamentos y metabolitos en la sangre capilar y otros líquidos corporales en un tiempo de 10 a 15 minutos. Vas Narasimhan, MD, Director Global de Desarrollo de Drogas y director médico de Novartis, dijo: “Las pruebas para los puntos de atención son una herramienta importante para los profesionales de la salud que les permiten tomar decisiones informadas sobre el tratamiento dentro de una sola sesión, lo que ayuda a asegurar que los pacientes no se pierdan durante el seguimiento y en última instancia, mejora el manejo y los resultados de los pacientes”.

Imagen: El cartucho desechable específico del ensayo Niji para medir la inmunoglobulina E total (IgE) en sangre total (Fotografía cortesía de Novartis).

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Prueba de aliento podría mejorar diagnóstico del cáncer de pulmón os investigadores han encontrado que una firma de biomarcadores de cuatro compuestos orgánicos volátiles (COV) en la respiración, facilita el diagnóstico precoz del cáncer de pulmón y la monitorización no invasiva de la efectividad del tratamiento. El aire exhalado contiene miles de compuestos orgánicos volátiles que varían en composición y patrón en función de, por ejemplo, el estado de salud de una persona. Se ha descubierto un subconjunto de 4 VOCs de carbonilo, en el aliento exhalado de los pacientes con cáncer de pulmón. Ser capaces de identificar esta “firma” para el cáncer de pulmón a través de un simple análisis de la respiración se ha convertido en una de las vías más prometedoras para el diagnóstico de la enfermedad. Ahora la prueba se utiliza para monitorizar la recurrencia de la enfermedad después de la cirugía. Erin M. Schumer, MD, MPH, Víctor van Berkel,

MD, PhD, y sus colegas de la Universidad de Louisville (Louisville, KY, EUA, http://louisville.edu) analizaron muestras de aliento recogidas antes y después de la cirugía del 31 de pacientes con cáncer de pulmón y compararon sus niveles de COV con carbonilo con las muestras de 187 pacientes sanos. Los investigadores encontraron una disminución significativa en los niveles generales de COV de carbonilo después de la cirugía, y 3 de los 4 VOCs de carbonilo se normalizaron después de la cirugía, coincidiendo con los niveles en el grupo de control. “La rápida normalización de la casi totalidad de los cuatro compuestos después de la cirugía proporciona una fuerte evidencia de que son producidos directamente por el ambiente tumoral”, dijo el Dr. Schumer, “Este estudio confirma que la tecnología es exacta”. El Dr. Schumer pone de relieve la necesidad de la detección temprana: “Esperamos que el análisis del aliento nos permitirá diagnosticar a los

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pacientes con cáncer de pulmón primario o recurrente mucho antes de que sufren síntomas, cuando tenemos más opciones para su tratamiento”. Por otra parte, los pacientes con cáncer de pulmón son seguidos actualmente después de la cirugía con una tomografía computarizada (TC) del pecho, que puede ser inconveniente, cara, y expone a los pacientes a la radiación. El estudio, realizado por Schumer E., et al, fue publicada el 9 de junio de 2016, en la revista de la Sociedad de Cirujanos Torácicos The Annals of Thoracic Surgery.

Novedoso dispositivo mejora detección del cáncer as células tumorales circulantes (CTC) son células malignas que se han escapado de un tumor primario hacia el torrente sanguíneo y tienen el potencial de formar metástasis en sitios distantes anatómicamente. Un método recientemente desarrollado para aislar las células cancerosas que se han escapado de un tumor pronto podría allanar el camino para tener un diagnóstico y un tratamiento mejores. El proceso es sencillo e implica un dispositivo especial que fuerza el paso de las células presentes en una muestra de sangre a través de pequeños embudos, que conducen a las células cancerosas y a las células de la sangre en corrientes separadas, con base en sus diferencias de tamaño y rugosidad. Unos científicos de la Universidad de Columbia Británica (Vancouver, BC, Canadá; www.ubc.ca) utilizaron polidimetilsiloxano (PDMS) para fabricar el dispositivo de microfluidos. Inicialmente se utilizaron procesos de separación de células para llenar el dispositivo de microfluidos utilizando solución salina tamponada con fosfatos (PBS) con Pluronic F127 al 0,2%, con el fin de evitar la adsorción de células no específicas a la pared del dispositivo. Con el fin de evaluar el papel que desempeña la deformabilidad de las células en el desempeño de la separación, los científicos midieron el tamaño de las células, mediante la suspensión de las muestras de células en PBS y las visualizaron utilizando un microscopio invertido, Ti-U (Nikon, Tokio, Japón; www.nikon.com) y una cámara con CCD DS2MBW de Nikon. El tamaño de las CTC y de los leucocitos de los pacientes con mCRPC se determinó a partir de la imagen de campo brillante de las células separadas en suspensión, dibujando un círculo en el borde exterior de cada una de las células objetivo. Los científicos pudieron demostrar en los pacientes con cáncer de próstata metastásico, resistente a la castración, en el cual las CTC no son significativamente más grandes que los leucocitos; las CTC se pueden capturar con base en su deformabilidad, con un rendimiento 25 veces mayor que con el sistema convencional CellSearch (Raritan, NJ, EUA, www.cellsearchctc.com). Por último, las CTC que fueron separadas utilizando este método se recogen en suspensión y quedan disponibles para su caracterización molecular subsiguiente. El estudio fue publicado el 7 de abril de 2016 en la revista Small.

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Identifican a mujeres en riesgo de pérdida ósea a osteoporosis se conoce como una enfermedad silenciosa porque los individuos que la padecen experimentan pocos síntomas visibles y esta condición progresiva se produce cuando los huesos crecen estructuralmente débiles y se vuelven más propensos a fracturarse o a romperse. Los marcadores bioquímicos de la resorción y la formación ósea, conocidos como marcadores de recambio óseo (MRO) han estado disponibles para propósitos clínicos durante muchos años y en las mujeres posmenopáusicas, los marcadores de recambio óseo se correlacionan con los índices histomorfométricos de recambio óseo, especialmente en los sitios de alta remodelación. Los niveles elevados de MRO también se asocian con mayores tasas de pérdida de masa ósea y mayor riesgo de fracturas. Los científicos de la Universidad de California, Los Ángeles (CA, EUA; www.ucla.edu) y sus colegas, realizaron un estudio para determinar si los

marcadores de resorción y formación, pueden ser combinados para medir la formación de hueso neta en todo el esqueleto. Las 685 mujeres que participaron en el Estudio de Salud de la Mujer a través de la Nación, tenían edades entre 42 y 52 años. Las mujeres eran o pre-menopáusicas o se encontraban en la perimenopausia temprana cuando se inscribieron en el estudio, y todas las participantes incluidos en este análisis, tuvieron su último periodo menstrual durante la parte de seguimiento del estudio. El marcador de la formación de hueso, la osteocalcina en suero (OC), fue medido usando el ensayo inmunorradiométrico ELSA-OSTEO en ng/mL (Cis-Bio International, Codolet, Francia; www.cisbio.com). El marcador de la resorción ósea, orina, el N-telopéptido (T-NTX), fue medido mediante un inmunoensayo enzimático de inhibición competitiva, Osteomark, en nanomoles equivalentes de colágeno óseo [BCE] (Ostex International Inc., Seattle, WA, EUA; www.

EL ANÁLISIS ELISA PARA 25OH VITAMINA D MÁS RÁPIDO DEL MERCADO

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ostex.com). La creatinina en orina se midió utilizando el autoanalizador Cobas Mira (Roche Diagnostics, Basilea, Suiza; www.roche.com). Las densidades minerales óseas (DMO) de la columna lumbar (LS) y del cuello femoral (FN), fueron evaluadas por absorciometría dual de rayos x. El estudio fue publicado el 23 de junio de 2016, en la revista Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism.

Niveles de mannosa en plasma pueden indicar riesgo de diabetes a obesidad se asocia con un mayor riesgo de una amplia gama de morbilidades, incluyendo resistencia a la insulina (IR), diabetes tipo 2 (T2D), enfermedad de hígado graso no alcohólico (NAFLD) y de enfermedad cardiovascular (CVD). Aunque la prevalencia de la obesidad sigue aumentando de manera espectacular en todo el mundo, todavía hace falta una clara comprensión de los mecanismos moleculares subyacentes implicados en la progresión de trastornos asociados; estos mecanismos han comenzado a ser investigados recientemente. Un equipo internacional de científicos, dirigidos por los del Instituto de Tecnología KTH-Real (Estocolmo, Suecia; www.kth.se) utilizaron un método basado en la biología de sistemas y redes integradas de células específicas para los tejidos hepáticos, adiposo y musculares. Los investigadores generaron redes integradas específicas de células (IN), mediante redes de interacción de fusión metabólica a escala del genoma, y transcripcional reguladoras y de proteína-proteína. Realizaron análisis transcriptómico de todo el genoma para determinar los cambios globales de expresión genética en el hígado y los tejidos adiposos de tres individuos obesos, sometidos a cirugía bariátrica e integraron estos datos en los INs, específicos de las células. Se secuenciaron un total de 48 muestras de los cuatro tipos de tejidos de los sujetos obesos utilizando los sistemas HiSeq 2000 y 2500 HiSeq (Illumina, San Diego, CA, EUA; www.illumina.com). Se realizó la medición de los niveles plasmáticos de glucosa, mannosa, fructosa, aminoácidos, y a-hidroxibutirato (AHB) utilizando una plataforma de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS), basada en un sistema de cromatografía líquida, ACQUITY de ultra alta resolución (UPLC, Waters Corporation, Milford, MA, EUA; w w w . waters.com) y un espectrómetro de masas, Thermo Finnigan LTQ-(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA; www.thermofisher.com), operados a una resolución nominal de la masa, que estaba equipado con una fuente de ionización por electrodispersión (ESI) y un analizador de masas de trampa lineal de iones (LIT). Adil Mardinoglu, PhD, autor principal del estudio, dijo: “Podemos medir la mannosa en la sangre de las personas delgadas u obesas e identificar si tienen un mayor riesgo de diabetes tipo 2, con base a sus niveles de mannosa”. El estudio fue publicado

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Biomarcador para pacientes con cáncer predice supervivencia los pacientes con cáncer los médicos les dicen cuánto tiempo tienen que vivir, y lo bien que responderán a los tratamientos, pero hay una manera de mejorar la exactitud de las predicciones de los médicos. Se ha desarrollado un nuevo método que podría conducir a una manera de hacer precisamente eso, a partir de datos sobre secuencias genéticas de los pacientes, con el fin de producir proyecciones más fiables para el tiempo de supervivencia y cómo podrían responder a posibles tratamientos. Los científicos de la Universidad de California-Los Ángeles (UCLA, California, EUA, www.ucla.edu) y sus colegas han desarrollado un método que analiza diversas isoformas de genes usando datos de moléculas de ácido ribonucleico (ARN) en muestras de cáncer. Estas isoformas son combinaciones de secuencias genéticas que pueden producir una enorme variedad de ARN y proteínas a partir de un solo gen. Ese proceso, llamada secuenciación de ARN, o ARN-seq, revela la presencia y la cantidad de moléculas de ARN en una muestra biológica. En el método desarrollado, los científicos analizaron las proporciones de secuencias genéticas, ligeramente di-

ferentes, dentro de las isoformas, lo que les permitió detectar diferencias importantes, pero sutiles, en las secuencias genéticas. Los científicos estudiaron tejidos de 2.684 personas con cáncer cuyas muestras fueron parte del Atlas del Genoma del Cáncer, de los Institutos Nacionales de la Salud, y pasaron más de dos años en el desarrollo del algoritmo para SURVIV (sigla en inglés para “análisis de supervivencia de la variación de isoformas de ARNm”). El equipo ha identificado alrededor de 200 isoformas que están asociadas con el tiempo de supervivencia para las personas con cáncer de mama; algunos predicen tiempos de supervivencia más largos, otros están asociados a tiempos más cortos. Armado con este conocimiento, los científicos podrían finalmente ser capaces de dirigirse a las isoformas asociados con tiempos de supervivencia más cortos con el fin de suprimirlas y luchar contra la enfermedad. Se evaluó el desempeño de los predictores de supervivencia utilizando una métrica llamada C-índice y encontraron que en los seis diferentes tipos de cáncer que analizaron, sus predicciones basadas en las isoformas se desempeñaron consistentemente mejor que las prediccio-

nes basadas en los genes convencionales. Yi Xing, PhD, profesor asistente y autor principal del estudio, dijo: “Nuestro hallazgo sugiere que las proporciones de isoformas suministran una firma molecular más robusta de los pacientes con cáncer en los conjuntos de datos, a gran escala, de ARNseq. En el cáncer, a veces un solo gen produce dos isoformas, una de las cuales promueve la metástasis y la otra, reprime la metástasis”. El estudio fue publicado el 9 de junio de 2016, en la revista Nature Communications (www.nature.com). Imagen: Un análisis SURVIV de las isoformas del cáncer de mama desarrolladas en la UCLA. Las líneas azules se asocian con una mayor supervivencia, y las líneas de color magenta con tiempos de supervivencia más cortos (Fotografía cortesía del profesor Yi Xing).

Mediciones adicionales de hormonas revelan alto riesgo de preeclampsia na prueba de sangre adicional para las mujeres embarazadas, predice con exactitud cuáles mujeres con alta función tiroidea están en riesgo de desarrollar preeclampsia. Los hallazgos podrían ayudar a identificar a las mujeres con embarazos de alto riesgo y potencialmente evitar el tratamiento innecesario que conlleva el riesgo de anomalías fetales. La preeclampsia es una condición que se produce durante la segunda mitad del embarazo, en la que las mujeres tienen la presión arterial alta y eliminan proteínas en la orina. Se presenta en un 2% a 8% de los embarazos y, en algunos casos conduce a graves complicaciones para la madre y el niño, incluyendo convulsiones, insuficiencia renal, hemorragia y parto prematuro. Científicos del Centro Médico de la Universidad Erasmus (Rotterdam, Holanda; www.erasmusmc.nl) midieron las hormonas de 5.153 mujeres durante el embarazo temprano, antes de la semana 18, y encontraron que las mujeres con niveles altos de la hormona tiroidea, pero niveles bajos de hormona gonadotropina coriónica humana (hCG) eran entre tres y once veces más propensas a desarrollar preeclampsia. Uno de los factores de riesgo para la preeclampsia es el hipertiroidismo, que puede ser causado por condiciones médicas tales como la enfermedad de Graves o los nódulos tiroideos tóxicos. Sin embargo, los altos niveles de hCG, una hormona que aumenta de manera natural durante el embarazo, también eleva la función de la tiroides, pero este tipo de hipertiroidismo, relacionado con el embarazo, no presenta un mayor riesgo de preeclampsia. La combinación de niveles altos-normales de tiroxina libre (T4L) con niveles bajos de hCG de menos de 20.000 UI/L) se asoció con un riesgo 11,1 veces mayor de preeclampsia. La combinación de niveles bajos de hormona estimulante de

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la tiroides (TSH) con niveles bajos de hCG de menos de 20.000 IU/L se asoció con un riesgo mayor de preeclampsia que oscila entre un riesgo mayor de 9,2 veces para TSH de menos de 0,1 mU/L, a un riesgo 8,7 veces mayor cuando la TSH se encontraba por debajo el percentil 5 y a un mayor riesgo 3,8 veces para TSH de menos de 0,4 mU/L. La combinación de niveles de T4 libre normales-altos y hCG de más de 20.000 o TSH baja y hCG de más de 20.000 no se asoció con un mayor riesgo de preeclampsia. Los autores llegaron a la conclusión que la medición adicional de la hCG en mujeres con pruebas de función tiroidea, normales a altas, mejora notablemente la identificación de las mujeres con alto riescias cien su Las gicas a n ó ó l bio sposic–i ––––o di –––– pósit e – –– evo d pa! ¡Nu n Euro e

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go de desarrollar preeclampsia. Tim I M Korevaar, MD, autor principal del estudio, dijo: “La mayoría de las mujeres embarazadas tendrán niveles altos de hormona tiroidea debido a un aumento natural de la hCG, en lugar de una enfermedad subyacente de la tiroides, como la enfermedad de Grave o nódulos tóxicos. Los médicos actualmente no buscan la preeclampsia, aunque muchos miden la hormona tiroidea durante el embarazo. Medir la hCG, también, puede ayudar a los médicos a interpretar con más exactitud las pruebas de función tiroidea en las mujeres embarazadas. El estudio fue presentado en el 18º Congreso Europeo de Endocrinología, celebrado del 28 mayo al 31 mayo de 2016, en Múnich, Alemania.

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Análisis de flujo lateral de orina detecta tuberculosis en adultos VIH+ a tuberculosis (TB) es una causa importante de muerte de las personas positivas para el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) y las pruebas de esputo convencionales para la TB requieren tiempo y no siempre son exactas para las personas con VIH. Una prueba para el punto de atención que no depende de la evaluación del esputo, si es lo suficientemente exacta, podría ayudarles a las personas con VIH (quienes presentan morbilidad y mortalidad altas), mediante la detección temprana de la tuberculosis que se puede pasar por alto con las pruebas de esputo convencionales. Un equipo internacional de expertos dirigido por los de la Facultad de Medicina Tropical de Liverpool (Reino Unido; www.lstmed.ac.uk) ha preparado una revisión sistemática para evaluar la exactitud de una prueba de orina, que se puede usar en el punto de atención, para el diagnóstico y la detección de la tuberculosis en personas que viven con la infección por VIH. Dicha revisión evaluó la exactitud de un análisis de flujo lateral del lipoarabinomanano en orina (LF-LAM), una prueba disponible en el mercado que detecta el lipoarabinomanano (LAM), un componente de la pared celular de las micobacterias que está presente en algunas perso-

nas con TB activa. La prueba es fácil de realizar, no requiere ningún equipo especial y entrega el resultado en un lapso de 25 minutos. El equipo de revisión examinó toda la información publicada hasta el 5 de febrero de 2015 e incluyó 12 estudios. Seis de esos estudios evaluaron la LF-LAM para el diagnóstico de la tuberculosis, examinando a las personas con VIH y con síntomas de tuberculosis, mientras que los otros seis evaluaron la prueba para la detección de la tuberculosis examinando a las personas con VIH, independientemente de la presencia de síntomas de tuberculosis. El análisis de flujo lateral del lipoarabinomannano en orina, utilizado en los estudios, fue el Determine TB Ag LAM de Alere (Alere Inc., Waltham, MA, EUA; www.alere.com), una prueba disponible comercialmente para el punto de atención, que permite detectar la tuberculosis pulmonar y extra pulmonar activa. En las personas positivas para VIH con síntomas de tuberculosis, la LF-LAM muestra un promedio de sensibilidad y de especificidad del 45 % y el 92 %. Sobre la base de estos resultados, de 1.000 personas positivas para VIH, donde el 30 % (300 personas) en realidad tiene TB, la LF-FAM identificará a 135 personas con TB y pasará por alto el diagnós-

tico de 165 que tienen tuberculosis. Para las 700 personas que no tienen tuberculosis, la prueba identificará correctamente a 644 de esas personas que no tienen tuberculosis, pero clasificará erróneamente a 56 de ellas como si tuvieran TB. Sin embargo, la sensibilidad de la prueba es mayor con las personas positivas para VIH con recuentos bajos de células CD4, quienes están en riesgo de padecer enfermedades que amenazan la vida. El estudio fue publicado el 10 de mayo de 2016 en la revista Cochrane Database of Systematic Reviews. Imagen: La prueba Determine TB LAM Ag, para examinar la orina en el punto de atención, detecta la tuberculosis asociada al VIH, proporcionando los resultados en minutos (Foto cortesía de Alere).

Panel de autoanticuerpos diagnostica Alzheimer en etapa temprana n análisis de sangre, basado en un panel de 50 anticuerpos autoinmunes, mostró que puede detectar a los individuos con enfermedad de deterioro cognitivo leve (MCI) en etapa de enfermedad de Alzheimer (EA) con una tasa de exactitud global, sensibilidad y especificidad, del 100%. Los autoanticuerpos son abundantes y ubicuos en el suero humano y se ha demostrado previamente que son biomarcadores específicos de la enfermedad, capaces de diagnosticar con exactitud las etapas leves-moderadas de la enfermedad de Alzheimer y de

la enfermedad de Parkinson. En el estudio actual, los investigadores de la Universidad de Rowan (Stratford, Nueva Jersey, EUA, www.rowan.edu), intentaron determinar si los autoanticuerpos podrían ser utilizados como biomarcadores para diagnosticar con exactitud a los individuos con deterioro cognitivo leve que son la consecuencia de las primeras etapas de patología de la EA. Con este fin, utilizaron microarrays de proteínas humanas, cada una conteniendo 9,486 proteínas humanas, únicas, para unir autoanticuerpos en el suero. El equipo de investigadores luego utilizó los

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microarrays comprendiendo 50 biomarcadores de autoanticuerpos con la más alta afinidad para analizar las muestras de suero de 236 individuos, incluidos 50 de ellos con deterioro cognitivo leve (MCI) y con niveles bajos, confirmados, de amiloide beta42 (AB42). Los resultados revelaron que un pequeño panel de biomarcadores de autoanticuerpos sanguíneos, podían ser utilizados para diferenciar a los individuos con deterioro cognitivo leve asociado a la EA de los controles correspondientes por edad y sexo con una exactitud global del 100%. Además, los individuos con MCI se pudieron diferenciar con éxito de las personas con EA leve a moderada, con una exactitud global similar, lo que sugiere que este método también podría ser útil para la delimitación de las etapas discretas de la enfermedad a lo largo del continuo-MCI a EA. Por último, el panel de biomarcadores MCI asociados con la EA era altamente específico para el MCI, en que pueden diferenciar a los individuos con MCI asociada a la EA, de los que tienen otras enfermedades neurodegenerativas y no neurodegenerativas, incluyendo la enfermedad de Parkinson temprana y leve a moderada, la esclerosis múltiple y el cáncer de mama, en etapa precoz. “En la actualidad se cree generalmente que los cambios relacionados con el Alzheimer comienzan en el cerebro, al menos, una década antes de la aparición de los síntomas reveladores”, dijo el autor principal, el Dr. Robert Nagele, profesor de medicina osteopática en la Universidad de Rowan. El estudio fue publicado en la edición digital de abril 12 de 2016, de la revista Alzheimer’s & Dementia: Diagnosis, Assessment & Disease Monitoring. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Descubren novedoso gen para cáncer de colon hereditario a formación de un gran número de pólipos en el colon tiene una alta probabilidad de desarrollar cáncer de colon, si no se trata. La aparición a gran escala de los pólipos se debe, a menudo, a una causa hereditaria; en este caso, la enfermedad puede ocurrir en varios miembros de la familia. Los pólipos del colon se forman como crecimientos en forma de hongo en la mucosa y tienen de varios milímetros a varios centímetros de tamaño. Son benignos y generalmente no causan ningún síntoma, sin embargo, se pueden convertir en tumores malignos o cáncer de colon. Los médicos se refieren al desarrollo de un gran número de pólipos en el colon como poliposis. Los científicos de la Universidad de Bonn (Alemania; www.uni-bonn.de) y sus colegas investiga-

ron el material genético (ADN) de los pacientes con poliposis usando muestras de sangre. Los investigadores realizaron la secuenciación del exoma del ADN de leucocitos de 102 individuos no relacionados con poliposis adenomatosa inexplicable. Pudieron identificar dos individuos no relacionados con mutaciones de la línea germinal que producían compuestos heterocigotos de pérdida de función (PdF) en los genes reparadores de desajustes MutS Homólogo 3 (MSH3), en el cromosoma 5. El análisis del tejido tumoral de los individuos enfermos demostró una alta inestabilidad de los microsatélites de los di y tetranucleotidos (EMAST), y la coloración inmunohistoquímica demostró una pérdida completa de MSH3 nuclear en el tejido normal y tumoral. Mediante la investigación del gen

MSH3, se puede hacer un diagnóstico claro, de forma prospectiva, en algunos otros casos de poliposis, no explicados anteriormente. Posteriormente, las personas sanas en situación de riesgo en la familia pueden ser analizadas en busca de las mutaciones. El estudio fue publicado el 4 de agosto de 2016, en la revista American Journal of Human Genetics. Imagen: Una histopatología del colon con múltiples pólipos adenomatosos (Foto cortesía de Grupo 14).

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l diagnóstico de laboratorio es cada vez más importante en la medicina moderna y es comúnmente aceptado que aproximadamente el 70% de todas las decisiones médicas se basan en los resultados de laboratorio y, por lo tanto, los resultados exactos son claves para un diagnóstico apropiado. Uno de los requisitos de un laboratorio clínico es que las interferencias comunes, relacionadas con la integridad de la muestra tales como la hemólisis, la ictericia y la lipemia (HIL) sean evaluadas con cada sistema de reactivos y, debido a los recursos limitados y las limitaciones presupuestarias, el laboratorio clínico se basa en el fabricante para documentar los resultados de la HIL. Los científicos del Hospital Real Hallamshire (Sheffield, Reino Unido; www.sth.nhs.uk) y sus colegas franceses recogieron muestras de sangre para ensayar los análisis de coagulación en plasma y los ensayos moleculares de hemostasia. Los investigadores evaluaron la influencia de HIL sobre el tiempo de protrombina (PT), el tiempo parcial de tromboplastina activada (APTT) y de fibrinógeno utilizando un analizador de detección basada en la viscosidad (VBDS). La interferencia de la hemólisis fue estudiada en dos formas diferentes: hemólisis espontánea in vitro producida durante el transporte, la recogida o el procesamiento de las muestras y la hemólisis espuria. El nivel de hemólisis fue calculado semi-cuantitativamente con base en la medición de la concentración de hemoglobina utilizando un XN-10 (Sysmex Corporation, Kobe, Japón; www.sysmex.com). Todos los ensayos

de coagulación se realizaron utilizando reactivos y un analizador STACompact-Max (Stago, Asnières-sur-Seine, Francia; www.stago.com). Se usó un reactivo STA-Liquid Fib, de Stago y trombina titulada de calcio humana, para la medición de fibrinógeno. Los científicos descubrieron que la hemólisis espontánea que se produjo durante la recogida de la muestra y el procesamiento no tuvo efecto sobre el PT, ya sea con un extracto de factor tisular de conejo o reactivos de factor tisular humano recombinante. En contraste, la adición de células hemolisadas mecánicamente afectó el PT para la concentración más alta de hemoglobina. Para el APTT no hubo diferencia significativa entre los resultados en las muestras hemolizadas y no-hemolisadas. Para los otros dos reactivos estudiados, el APTT era estadísticamente más corto, significativamente, en las muestras hemolisadas, en comparación con las muestras nohemolisadas. Este sesgo fue clínicamente significativo sólo para el reactivo STA-PTT Automate. Los autores concluyeron que sus resultados confirman que el PT y el fibrinógeno no están clínicamente afectados, de manera significativa, por la HIL. Los APTT de algunas muestras hemolizadas eran falsamente normales con un reactivo y más afectadas por los otros dos. Las muestras hemolisadas deben ser rechazadas permanentemente. Por el contrario, desde un punto de vista clínico, la lipemia y la ictericia no afectan de manera considerable el APTT medido con los diferentes reactivos ensayados, en combinación con un analizador VBDS. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Espectrometría de masas MALDI-TOF diferencia especies de Streptococcus línicamente es relevante diferenciar el Streptococcus pneumoniae de otros miembros menos virulentos, del grupo viridans de los Streptococcus (SGV) y la determinación exacta de la especie en el SGV y más específicamente dentro del subgrupo mitis, es tradicionalmente difícil. La espectrometría de masas desionización desorción láser asistida por matriz tiempo-de-vuelo (MALDI-TOF) muestra resultados prometedores para la diferenciación de las especies dentro del grupo mitis pero son necesarias la exploración adicional y la validación. Para complicar los desafíos diagnósticos dentro del SGV, en 2004, se describió y denominó como S. pseudopneumoniae una especie nueva dentro del SGV que se parece estrechamente al S. pneumoniae. Los microbiólogos médicos del Centro Médico Universitario VU (Ámsterdam, Holanda; www.vumc. com) evaluaron la capacidad de dos plataformas de espectrometría de masas MALDI-TOF para la diferenciación de especies dentro del subgrupo mitis. Un panel consistente de 29 aislamientos clínicos y ocho de referencia fueron ensayados. Las cepas de referencia

usadas incluyeron dos S. pneumoniae, dos S. pseudopneumoniae, dos S. mitis y dos S. oralis. Como un estándar de oro, combinaron pruebas de reacción en cadena de polimerasa (PCR) enfocando el Gen Codificador de Autolisina (lytA), la recombinasa A (recA), y Spn9802, que fueron adaptadas de métodos anteriormente descritos. La espectrometría de masas MALDI-TOF fue realizada con la plataforma Microflex (Bruker Daltonics; Bremen, Alemania; www.bruker.com) o la plataforma Vitek MS (bioMérieux; Marcy l’Etiole, Francia; www.biomerieux-diagnostics.com). Los ensayos PCR enfocando los genes lytA y recA son específicos para S. pneumoniae y S. pseudopneumoniae, respectivamente. El ensayo PCR enfocando el fragmento Spn9802 detecta los dos: S. pneumoniae y S. pseudopneumoniae, pero no otros del SGV. Por lo tanto, las cepas que son negativas en los tres ensayos PCR fueron designadas como S. mitis/oralis. El Vitek MS identificó correctamente 10/11 Streptococcus pneumoniae, 13/13 Streptococcus pseudopneumoniae, y 12/13 S. mitis/oralis. El Microflex identificó correctamente 9/11 S. pneu-

moniae, 0/13 S. pseudopneumoniae, y 13/13 S. mitis/oralis. MALDI-TOF es una herramienta ponderosa para la determinación de especie dentro del grupo mitis y la exactitud diagnóstica varía dependiendo de la plataforma y la base de datos usados. El estudio fue publicado en la edición de Mayo de 2016 de la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. Imagen: La espectrometría de masas de desorción ionización láser tiempo de vuelo, Vitek MS para la plataforma de identificación de bacterias (Fotografía cortesía de bioMérieux).

Análisis de sangre mejora diagnóstico del síndrome HELLP n análisis de sangre de laboratorio para el diagnóstico de un trastorno genético, poco común, de los glóbulos rojos, también se muestra prometedor para la identificación de síndrome HELLP, una condición de presión arterial alta, potencialmente mortal, que afecta al 1% de todas las mujeres embarazadas. HELLP es un acrónimo de hemólisis, enzimas hepáticas elevadas y plaquetas bajas, y es una variante grave de la preeclampsia cuya patogénesis sigue siendo poco clara. La evidencia reciente y las similitudes clínicas, sugieren un vínculo con el síndrome urémico hemolítico atípico, una enfermedad de la activación excesiva del complemento alternativo.

Los científicos de la Facultad de Medicina de la Universidad Johns Hopkins (Baltimore, MD, EUA; www.jhmi.edu) utilizaron la prueba de Ham modificada, para estudiar muestras de suero de 14 mujeres con síndrome HELLP, clásico o atípico, siete mujeres con preeclampsia severa, 11 mujeres con embarazos normales y ocho mujeres sanas no embarazadas. Todas las mujeres embarazadas tenían por lo menos 23 semanas de gestación. Los niveles de complemento del suero del Complejo de Ataque de la Membrana, C5b-9, fueron determinados utilizando un kit disponible comercialmente, de un análisis inmunoenzimático ligado a enzimas (ELISA) (Quidel, San Diego, CA, EUA; www.quidel.com). Esta prueba de Ham, modifica-

da, refleja la activación del complemento a través del porcentaje de células muertas, mediadas por el complemento, y es, de este modo, un ensayo funcional. Esta prueba de Ham modificada fue medida en un lector de absorbancias de microplacas iMark (Bio-Rad, Hércules, CA, EUA; www.bio-rad.com) a 490 nm con una longitud de onda de referencia a 595 nm. Los investigadores encontraron una mayor activación del complemento, de acuerdo a la medición por la prueba de Ham modificada, en mujeres con HELLP clásico o atípico, en comparación con las mujeres con embarazos normales o sin embarazo. El estudio fue publicado en la edición de mayo de 2016 de la revista Experimental Hematology. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Evalúan inmunoensayo para medición cuantitativa de α1-antitripsina en materia fecal a medición de la proteasa, α1-antitripsina (A1A), en muestras de heces se puede utilizar para detectar la presencia de proteínas del suero en el tracto gastrointestinal, una señal de enteropatía con pérdida de proteínas (PLE). Las principales causas de PLE se pueden dividir en trastornos gastrointestinales erosivos y no erosivos, así como aumento de la presión venosa central o por la obstrucción linfática mesentérica y entre estos trastornos se encuentran la enteritis, la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa y la enfermedad celíaca. Los científicos de los Laboratorios de Patólogos Universitarios y Regionales Asociados (ARUP) (Salt Lake City, UT, EUA; www.aruplab.com) utilizaron muestras de heces residuales, enviadas a los laboratorios ARUP para la realización de pruebas de A1A fecal, así como sueros y muestras de heces apareadas obtenidas a intervalos determinados de voluntarios sanos. La A1A en las heces se midió con un en-

sayo de inmunoabsorción ligado a enzimas, basado en anticuerpos policlonales (ELISA). Se determinaron la imprecisión del análisis, la sensibilidad analítica, la linealidad, la exactitud, la estabilidad del analito, y los intervalos de referencia. La A1A en heces se midió mediante el uso de un análisis ELISA para la α1-antitripsina humana (ImmuChrom, Heppenheim, Alemania; www.immuchrom.de). Este ensayo es un método inmunométrico policlonal utilizado para cuantificar la A1A extraída de heces. Las señales de las placas ELISA fueron cuantificadas con un lector de placas SPECTRAmax PLUS (Molecular Devices LLC, Sunnyvale, CA, EUA; www.moleculardevices.com). Los intervalos de referencia para la A1A en heces y la depuración de A1A fueron establecidos utilizando muestras de heces a intervalos definidos y sueros recogidos de 124 voluntarios sanos (62 varones, 62 mujeres, edades de 19-61 años). Los autores concluyeron que el ELISA ImmuCh-

rom humano A1A, demuestra características de desempeño aceptables para la cuantificación de A1A en extractos de heces. Más aún, este ELISA en heces puede ser usado en combinación con el análisis para A1A en suero, Tina-Quant (Roche Diagnostics, Basilea, Suiza; www.roche.com) para evaluar la depuración de A1A para el diagnóstico y la monitorización de la PLE. El estudio fue publicado en la edición de julio de 2016 de la revista Journal of Applied Laboratory Medicine. Imagen: El lector de placas SPECTRAmax PLUS (Fotografía cortesía de Molecular Devices).

Inmunoensayo quimioluminiscente detecta toxoplasma en sueros humanos a toxoplasmosis es una enfermedad común en los seres humanos y animales causada por el parásito protozoario, Toxoplasma gondii, y aunque esta enfermedad en las personas sanas suele ser asintomática, en los casos congénitos y los pacientes inmunodeficientes, puede conducir a efectos patológicos graves. Actualmente, el diagnóstico de rutina de la toxoplasmosis se basa principalmente en el uso de diversos ensayos serológicos para detectar anticuerpos específicos en las muestras de suero de los pacientes infectados. El resultado de estas pruebas depende de los tipos de antígenos y los métodos de detección y, con frecuencia, el reconocimiento temprano de la infección o la distinción precisa entre las fases

de la toxoplasmosis es difícil. Científicos de la Universidad Tecnológica de Gdansk (Polonia; www.pg.edu.pl), desarrollaron nuevos reactivos inmunoquímicos en la forma de etiquetas originales para quimioluminiscencia (QL), lo que les permitió realizar pruebas de inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA) para la inmunoglobulina G (IgG), para el diagnóstico de la toxoplasmosis humana. Para evaluar el desempeño de los nuevos reactivos inmunoquímicos, en el ensayo CLIA, utilizaron la proteína quimérica SAG2-GRA1-ROP1L, para la detección de anticuerpos específicos IgG. Este último había sido ensayado anteriormente como antígeno de diagnóstico en los ensayos típicos de inmunoabsorción ligada a enzimas (ELISA). Los perfiles de

emisión se midieron simultáneamente en períodos de 3 a 30 segundos para recoger al menos el 95% de la señal de QL, usando un luminómetro de microplacas, Centro XS3 LB-960 (Berthold Technologies, Bad Wildbad, Alemania; www.berthold.com). Los autores concluyeron que con el desarrollo y aplicación de la tecnología de antígeno recombinante (rAg) y de anticuerpo recombinante (rAb), así como con el uso de etiquetas nuevas para QL de acridinio, el método CLIA puede adquirir una nueva dimensión. Sin embargo, se requiere más trabajo antes de que este tipo de inmunoensayo esté disponible para fines clínicos. El estudio fue publicado, en línea, el 24 de mayo de 2016, en la revista Diagnostic Microbiology and Infectious Diseases.

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Novedosa inmunohistoquímica digital multiplexada en cortes de tejido a heterogeneidad intratumoral se ha convertido en un reto fundamental para la aplicación de terapias e inmunohistoquímica (IHC), dirigidas que se utiliza para evaluar la heterogeneidad espacial de las proteínas; sin embargo, ha sido difícil cuantificar la abundancia de proteínas a intervalos dinámicos amplios y gran multiplexación. Se ha desarrollado un método proteómico, con resolución espacial, basado en anticuerpos, con un “potencial para hacer códigos de barras” con el fin de cuantificar hasta 800 objetivos en una sola lámina de muestra fijada en formol e incluida en parafina (FFPE). Se perfeccionó un ensayo, capaz de cuantificar la abundancia de proteínas en una región espacial predefinida de un corte de tejido, mediante el etiquetado de anticuerpos con oligos fotoescindibles, que son reconocidos por los códigos de barras fluorescentes y posteriormente se los expone a la luz UV enfocada. Los científicos del Centro de Cáncer MD Anderson (Houston, TX, EUA; www.mdanderson.org) trabajaron con un corte de tejido FFPE montado en una lámina, de una empresa comercial, el cual estaba unido a un coctel multiplexado de conjugados anticuerpo-oligo, primarias, y que tiene una celda de flujo de microfluidos unida a la lámina. Mediante el uso de una simple modificación de un microscopio estándar, las regiones de interés fueron identificadas mediante microscopía de luz o fluorescencia y fueron iluminadas secuencialmente con luz UV para liberar los oligos. Después de cada ciclo de ilumina-

ción, se recolectó el eluyente y se analizó, obteniendo recuentos digitales que corresponden a la abundancia de cada proteína específica en las zonas iluminadas de forma secuencial. Los anticuerpos fueron marcados con códigos de barras fluorescentes, nCounter, de la empresa comercial colaboradora (NanoString Technologies, Seattle, WA, EUA; www.nanostring. com). El prototipo incluye componentes de imagen y de fluidos para capturar contexto espacial, y los instrumentos existentes nCounter proporcionan la cuantificación. Usando un dispositivo prototipo junto con un Sistema de Análisis nCounter, la empresa y sus colaboradores demostraron el recuento simultáneo de 30 objetivos proteicos diferentes, a través de una porción fija, montada en la lámina de tejido tumoral. Las técnicas actuales multi-objetivo de IHC implican etapas de procesamiento secuenciales; Por lo tanto, cada adición de un objetivo aumenta el tiempo de manipulación y carga de trabajo, globales. Por el contrario, la tecnología novedosa de NanoString, analiza todos los analitos simultáneamente para acortar y simplificar las pruebas de análisis de datos y, al mismo tiempo, conserva una mayor capacidad de multiplexación y un intervalo de detección más amplio. Se espera que la tecnología sea compatible con los productos actuales y futuros, nCounter Vantage, para el análisis Biología 3D. El estudio fue presentado en el congreso anual de la Asociación Americana para la Investigación del Cáncer (AACR), celebrado del 16-20 de abril de, 2016, en Nueva Orleans, LA, EUA; www.aacr.org. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Desarrollan prueba no invasiva para cáncer de próstata con ARN exosomal l paradigma actual de cribado para el cáncer de próstata se enfrenta a retos que conducen a biopsias innecesarias y, en definitiva, a un tratamiento excesivo. La desventaja de la prueba del antígeno específico de la próstata (PSA) es la falta de especificidad para el cáncer de próstata produciendo tanto resultados positivos falsos como negativos falsos. Por otra parte, el PSA no discrimina entre los cánceres de próstata de alto y bajo grado. La enfermedad de bajo grado podría permanecer indolente durante un largo periodo de tiempo y, por lo general, no requiere tratamiento agresivo. Hay una necesidad de herramientas de diagnóstico pre-biopsia que puedan identificar con exactitud el cáncer de próstata

de alto grado que requiere una intervención más inmediata. Un equipo de urólogos encabezados por los de la Universidad de Columbia (Nueva York, NY, EUA, www.columbia.edu) utilizó la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa (PCR), para comparar el ensayo de la expresión de los genes del exosoma, en la orina, con los resultados de la biopsia en 499 pacientes con niveles de antígeno prostático específico (PSA) entre 2 y 20 ng/mL. A continuación, validaron la puntuación pronóstica, derivada, en 1.064 pacientes, provenientes de 22 prácticas comunitarias y clínicas de urología académicas, en los EUA Los participantes elegibles incluyeron hombres libres de cáncer de

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próstata (PCA), de 50 años o más, que estaban programados para una biopsia inicial o repetida por aguja, de la próstata, debido a hallazgos sospechosos en el examen de tacto rectal (DRE) y/o niveles de PSA (rango límite, 2,0 a 20,0 ng/mL). Los equipos utilizaron la prueba novedosa de biopsia líquida en la orina, para el cáncer de próstata, ExoDx Prostate(IntelliScore) (Exosome Diagnostics, Inc., Cambridge, MA, EUA; www.exosomedx.com) en la primera orina de la mañana, sin que les hubieran practicado un tacto rectal. La prueba luego analiza la orina para tres biomarcadores en el ácido ribonucleico exosomal (exoARN) que están expresados en los hombres con cáncer de próstata de alto grado. En 255 hombres en la población diana de entrenamiento (edad media de 62 años y el nivel de la mediana de PSA 5,0 ng/mL, y biopsia inicial) y cuidados estándar,

(SOC) el ensayo de la expresión génica del exosoma en la orina se asoció con una mejor discriminación entre la puntuación de Gleason (GS7 ) o mayor y GS6 y enfermedad benigna. La validación independiente del ensayo de expresión génica, en 519 análisis a pacientes de la expresión génica en la orina más el SOC, fue superior al SOC solo. Utilizando un punto de corte predefinido, se habrían evitado 138 de 519 (27%) biopsias, pasando por alto sólo el 5% de los pacientes con patrón dominante de enfermedad de alto riesgo, GS7. El estudio fue publicado el 31 de marzo de 2016 en la revista JAMA Oncology. Imagen: Un estudio histopatológico para el cáncer de próstata que muestra varias glándulas mal formados con lumina mal definidos y/o complemento nuclear incompleto, puntuación de Gleason 3+4 = 7 (Foto cortesía de la revista European Urology). LabMedica en Español Noviembre/2016

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El análisis de transferrina en heces por turbidimetría (i-TRA) se ofrece ahora en un kit combinado con i-FOB (sangre oculta en heces). La detección de transferrina fecal, mucho más resistente al metabolismo en intestino que la hemoglobina, es la mejor forma de detección temprana del cáncer colorrectal.

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Método basado en análisis de sangre identifica ataque al corazón os nuevos estudios han sugerido que los algoritmos modificados utilizando el análisis de troponina cardíaca de alta sensibilidad (hsCTrop-I), podrían ayudar a identificar o excluir más rápidamente el diagnóstico de un ataque al corazón en los pacientes que acuden a un servicio de urgencias (SU) con dolor de pecho, que se sospecha de origen cardiaco. Las guías actuales de la Asociación Americana del Corazón (AHA) recomiendan mediciones seriadas de la troponina cardiaca en la presentación y 3-6 horas después de la aparición de los síntomas. Este método diagnóstico conduce a un gran número de ingresos hospitalarios costosos, potencialmente evitables. Las estrategias que podrían identificar, con seguridad, una gran proporción de pacientes adecuados para el alta después de tomar una sola muestra de sangre a la llegada al SU, tendrían importantes beneficios para los sistemas de atención de la salud. En un estudio, Edward Carlton, PhD, del Servicio

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Nacional de Salud Trust de Bristol del Norte (Bristol, Inglaterra; www.nbt.nhs.uk), y sus colegas, determinaron el desempeño diagnóstico de las bajas concentraciones de hs-CTrop-I en pacientes con dolor de pecho con sospecha de origen cardiaco y un electrocardiograma que no mostraba la isquemia como un indicador de infarto agudo de miocardio (IAM; ataque al corazón). Los investigadores analizaron 5 estudios internacionales observacionales (Australia, Nueva Zelanda e Inglaterra) de cohortes, con evaluación de los resultados y 30 días de seguimiento. Se presentaron un total de 3.155 pacientes con síntomas sugestivos de isquemia cardiaca los cuales fueron incluidos en el análisis. A los pacientes elegibles se les había practicado un electrocardiograma no isquémico y se midió la hs-CTrop-I al momento de la presentación. Se desarrolló un infarto agudo de miocardio en 291 individuos (9,2%). Las concentraciones de PCR-CTrop-I que estaban por debajo del límite de detección identificaron el 19% de los pacientes co-

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mo potencialmente adecuados para el alta inmediata, con un alto desempeño diagnóstico para la exclusión de un IAM. “Para poner estos resultados en el contexto del número absoluto de pacientes que se presentan, un método de número necesario para diagnosticar, muestra que, para el nivel de corte de 1,2 ng/L, por cada 10.630 pacientes evaluados: en 1.990 se podría decir correctamente que no tienen un IAM, en 10 se tranquilizaría falsamente, y en 8.630 habría que hacer estudios adicionales, de los cuales, en 990 en última instancia, se haría un diagnóstico de IAM. También se demostró que los valores de corte por encima del límite inferior de detección pueden no tener el desempeño diagnóstico necesario para la aplicación clínica”, escribieron los autores. En el segundo estudio, Dirk Westermann, MD, del Hospital Universitario – Centro Médico de Hamburgo-Eppendorf (Hamburgo, Alemania; www. uke.de/english/index.html) y sus colegas, tuvieron como objetivo desarrollar un algoritmo para la exclusión exacta y rápida y el diagnóstico de IAM después de 1 hora. Este estudio investigó la aplicación del ensayo CTrop-I para el diagnóstico de IAM en 1.040 pacientes que acudieron al servicio de urgencias con dolor agudo en el pecho. Los resultados fueron validados en 2 cohortes independientes de 4.009 pacientes. Los investigadores encontraron que con la aplicación de un nuevo valor de corte bajo de hs-CTrop-I, de 6 ng/L, el algoritmo para descartar mostró un valor predictivo negativo del 99,8% después de 1 hora para el IAM, lo que permite la exclusión exacta y rápida de un IAM. Los métodos de l y 3 horas, produjeron resultados que no eran estadísticamente diferentes. Del mismo modo, un algoritmo de reglas en base a los niveles de hsCTrop-I proporciona un alto valor predictivo positivo de 83%. La aplicación del corte de 6 ng/L dio como resultado una menor mortalidad en el seguimiento (1%), en comparación con el percentil 99 que se utiliza de forma rutinaria (3,7%) para este ensayo. Los dos estudios, por Carlton E et al y por Neumann JT et al, fueron publicados en línea el 1 de junio de 2016, en la revista JAMA Cardiology. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Estudio genómico asocia genes relacionados a la migraña con sistema vascular os resultados de 22 estudios de asociación del genoma completo (GWA), llevados a cabo por decenas de investigadores en todo el mundo, sugieren que la migraña está vinculada a loci de genes específicos que están asociados con alguna enfermedad vascular o están involucrados en la regulación del tono vascular. La migraña es un trastorno neurológico debilitante que afecta a aproximadamente a una de cada siete personas en el mundo, pero sus mecanismos moleculares siguen siendo poco conocidos. Existe cierto debate acerca de si la migraña es una enfermedad de la disfunción vascular o el resultado de una disfunción neuronal con cambios vasculares secundarios. Los miembros del Consorcio Internacional de Genética de la Cefalea, que incluye grupos de investigación sobre la migraña de Australia, Dinamarca, Estonia, Finlandia, Alemania, Islandia, Holanda, Noruega, España, Suecia, el Reino Unido y los EUA,

llevaron a cabo un estudio genético importante de la migraña en 59.674 individuos afectados y 316,078 controles, procedentes de 22 estudios de asociación del genoma completo. Los investigadores identificaron 44 polimorfismos de un solo nucleótido (SNP), independientes, asociados significativamente con el riesgo de migraña, que asignaron 38 loci genómicos distintos, incluyendo 28 loci no reportados anteriormente y un locus que puede ser el primero en ser identificado en el cromosoma X. En los análisis computacionales posteriores, los loci identificados mostraron el enriquecimiento de los genes expresados en tejidos vascular y de músculo liso, en consonancia con una teoría predominante de la migraña que resalta la asociación con el sistema vascular. “Nuestro consorcio está dedicado a descubrir las causas genéticas de la migraña y durante los últimos años hemos sido capaces de identificar muchas Visítenos en COMPAMED, Corr. 8a, Stand K09

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variantes de riesgo. Sin embargo, en este último, estudio a gran escala, se descubrieron decenas de nuevos factores de riesgo genético. Debido a que todas estas variantes modifican el riesgo de enfermedad, sólo un poco, el efecto sólo puede ser visto cuando se dispone de esta gran cantidad de muestras”, dijo el autor principal, el Dr. Aarno Palotie, director de investigaciones del Instituto de Medicina Molecular de Finlandia en la Universidad de Helsinki (Finlandia ; www.helsinki.fi) y líder del Consorcio Internacional de Genética de la Cefalea. “Estos hallazgos interesantes que vinculan la migraña con la disfunción vascular se generaron utilizando métodos computacionales novedosos que utilizan y combinan datos de diferentes bases de datos biológicos internacionales. Estos conjuntos de datos son muy valiosos en situaciones como ésta cuando las muestras de tejido de pacientes no están fácilmente disponibles, lo que subraya la importancia del intercambio de datos”, dijo el autor contribuyente, el Dr. Benjamin Neale, profesor de medicina en la Facultad de medicina de la Universidad de Harvard (Boston, MA, EUA; www.med.harvard.edu). El estudio genético de la migraña fue publicado en la edición digital del 20 de junio de 2016, de la revista Nature Genetics. Imagen: Las neuronas en el cerebro. Los investigadores han identificado una variante de ADN que parece regular los niveles de glutamato - una sustancia química, conocida como neurotransmisor, que transporta los mensajes entre las neuronas en el cerebro (Fotografía cortesía del Dr. Jonathan Clarke, Wellcome Images). LabMedica en Español Noviembre/2016

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Método altamente exacto predice la diabetes posparto a diabetes gestacional se define como la intolerancia a la glucosa que se identifica, por primera vez, durante el embarazo y se produce en el 3% al 13% de todas las mujeres embarazadas, y aumenta el riesgo, para la mujer, de desarrollar diabetes tipo 2 en un 20% a un 50% dentro de los cinco años después del embarazo. Se ha descubierto una forma nueva, sencilla, exacta, para predecir cuáles mujeres con diabetes gestacional, desarrollarán diabetes tipo 2, después del parto, la cual les permitirá a los proveedores de atención de salud, identificar a las mujeres con mayor riesgo y ayudar a motivar a las mujeres a hacer cambios de estilo de vida temprana y seguir otras estrategias que podrían evitar que desarrollen la enfermedad más adelante en la vida. Un equipo internacional de científicos quienes trabajaron con los de la Universidad de Toronto (ON, Canadá; www.utoronto.ca) obtuvieron muestras de sangre en ayunas de 1.035 mujeres diagnosticadas con diabetes gestacional y matriculadas en los Estudios de la Mujer, Alimentación Infantil y Diabetes de Tipo 2 de Kaiser Permanente, después de un embarazo con diabetes gestacional, también conocido como el Estudio SWIFT. El estudio SWIFT examinó a las mujeres mediante pruebas de tolerancia oral a la glucosa a los dos meses, después del parto, y luego cada año, con el fin de evaluar el impacto de la lactancia materna y otras El OsmoPRO ® tiene mucho características en el desarrollo de la diabepara emocionar, el último tes tipo 2 después de un embarazo comosmómetro multiuestra de plicado por la diabetes gestacional. Advanced Instruments. El equipo llevó a cabo un estudio metabolómico en plasma basal en ayunas, e identificó 21 metabolitos que diferían de Con OsmoPRO , puede reportar manera significativa debido al estado incilos resultados de análisis más dental de diabetes tipo 2 (DM2). La optimiexactos, agilizar su flujo de zación mediante aprendizaje automático trabajo y hacerlo todo con la dio como resultado un modelo en forma de mayor de las facilidades. árbol de decisión que predijo la incidencia de diabetes tipo 2, con un poder de discriminación del 83,0% en el conjunto de enElija al PRO… trenamiento y del 76,9%, en el conjunto de OsmoPRO ®. pruebas independientes, siendo muy superior a la glucosa plasmática en ayunas, sola. El nuevo método también puede ser capaz de predecir a los individuos que pueden desarrollar diabetes tipo 2 en la población en general lo cual sería un avance importante en un momento en que más de 300 millones de personas sufren de la forma prevenible de esta enfermedad. Un análisis de sanOperación intuitiva con pantalla táctil gre, de próxima generación, que es más sencillo y exacto que las opciones actuales Escáner integrado para códigos de barras en 2D podría ayudar a identificar a las personas Capacidad para 20 muestras que más se beneficiarían de las intervencioUn volumen de muestra pequeño de apenas 20 μL nes más oportunas y eficaces para prevenir la diabetes tipo 2. Interfaz LIS conveniente y capacidades de manejo de datos

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Imagen: El Profesor Michael Wheeler con Ashley St. Pierre del Hospital para Niños Enfermos, realizando pruebas adicionales en las mujeres con diabetes gestacional para evaluar las diferencias raciales y étnicas en la predicción, e investigar a los grupos de alto riesgo, con prediabetes, para aprender si la metabolómica podría predecir la diabetes tipo 2 en la población general (Fotografía cortesía de la Universidad de Toronto).

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Biomarcador para Parkinson en muestras de orina n biomarcador es una sustancia que les ayuda a los médicos a predecir, diagnosticar o controlar la enfermedad, debido a que el biomarcador corresponde a la presencia o el riesgo de la enfermedad, y sus niveles pueden cambiar a medida que la enfermedad progresa. Se ha demostrado que el gen biomarcador, quinasa 2 de repetición ricas en leucina (LRRK2), desempeña un papel clave en el Parkinson hereditario, y la más común de estas mutaciones, llamada G2019S, hace que la LRRK2 quinasa se agregue demasiados fosfatos a sí misma y otras proteínas, pero aún no está claro la razón por cual esto conduce a la enfermedad de Parkinson. Científicos de la Universidad de Alabama en Birmingham (AL, EUA, www.uab.edu) encontraron que la LRRK2 fosforilada elevada predecía el riesgo de aparición de la enfermedad de Parkinson para las personas que llevan una mutación en LRRK2, que es alrededor de 2% a 3% de todos pacientes con enfer-

medad de Parkinson. Esto fue seguido por un estudio de replicación mayor de 72 muestras de orina almacenadas en un biobanco del Consorcio de Cohortes LRRK2de la Fundación Michael J. Fox. Los participantes incluyeron 18 portadores de la mutación con enfermedad de Parkinson (EP), 18 portadores de la mutación sin EP, 18 no portadores con EP, y 18 no portadores sin EP. Se aislaron los exosomas de la orina congelada codificada mediante la rápida descongelación en un baño de agua caliente, en agitación, seguido por ultracentrifugación diferencial. Las proteínas de los exosomas TSG101, LRRK2 total y Ser(P)-1292 LRRK2, fueron medidas mediante Western blot y análisis en el escáner LiCor Odyssey (Lincoln, NE, EUA, www.licor.com). El estudio, fue publicado originalmente en marzo de 2016 en la revista Neurology, y desde entonces ha sido expandido en junio 14, 2016 en la revista Movement Disorders.

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e ha desarrollado un análisis de sangre que predice con precisión, y de forma fiable, si los pacientes con depresión responden a los antidepresivos comunes, un hecho que podría anunciar una nueva era en el tratamiento personalizado para las personas con depresión. Guiados por esta prueba, los pacientes con inflamación en la sangre, por encima de un determinado umbral, podrían ser dirigidos hacia un acceso temprano a las estrategias antidepresivas más asertivas, como una combinación de antidepresivos, antes de que su condición empeore. Los científicos del King College de Londres (Reino Unido; www.kcl.ac.uk) se centraron en dos biomarcadores en la sangre que miden la inflamación, puesto que los estudios previos ya habían demostrado que los niveles elevados de inflamación se asocian con una mala respuesta a los antidepresivos. Los científicos midieron la canti-

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dad de dos biomarcadores: el Factor Inhibitorio de la Migración de los Macrófagos (MIF) y la interleuquina (IL)-1 , en dos muestras clínicas independientes de pacientes deprimidos, antes o después de que tomaran una serie de antidepresivos de prescripción común. Se determinó la cantidad de ácido ribonucleico (ARN) mediante la evaluación de las relaciones de A260/A260 y 280/230, utilizando un espectrómetro Nanodrop (NanoDrop Technologies, Wilmington, DE, Estados Unidos; www.nanodrop.com), y se estableció la calidad del ARN usando un Bioanalizador Agilent (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, EUA; www.agilent.com). Las muestras de ARN fueron almacenadas, posteriormente, a -80°C hasta su procesamiento para los análisis de expresión genética. El estudio fue publicado el 11 de mayo de 2016, en la revista The International Journal of Neuropsychopharmacology.

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Prueba no invasiva detecta cáncer de colon en pacientes no examinados

Imagen: El kit de análisis, Cologuard, para el cáncer colorrectal (Fotografía cortesía de Exact Sciences).

na prueba, no invasiva, para el cribado del cáncer colorrectal, detecta la enfermedad en pacientes que previamente habían evitado los exámenes de detección más invasivos. El cáncer colorrectal es la segunda forma más mortal de cáncer en los EUA, y este año, casi 135.000 estadounidenses serán diagnosticados con la enfermedad y 50.000 estadounidenses morirán debido a ésta. La Dirección de Alimentos y Medicamentos de los EUA (Silver Springs, MD, EUA; www.fda.gov) aprobó una prueba de ADN en heces para objetivos múltiples (mt-sADN) que detecta la presencia de glóbulos rojos y mutaciones del ADN, que pueden estar asociados con el cáncer de colon. En un ensayo clínico realizado de forma prospectiva, con 10.000 pacientes, la prueba arrojó un 92% de sensibilidad para detectar el cáncer colorrectal y un 42% de sensibilidad para las lesiones precancerosas, con una especificidad del 87%. Los médicos de los Servicios Médicos USMD (Dallas, TX, EUA; www.usmdinc. com) realizaron una revisión retrospectiva de las historias clínicas de los pacientes elegibles y se centraron en los pacientes con un riesgo promedio de cáncer colorrectal, aquellos sin síntomas, antecedentes personales o familiares de cáncer colorrectal o pólipos, que no cumplían con anterioridad con las pautas recomendadas para las pruebas de cribado. Durante el período de estudio de 12 meses, desde octubre 2014, hasta septiembre 2015, los proveedores de USMD ordenaron 393 estudios de mt-sADN, y 347 pacientes completaron la prueba, logrando un 88,3% de cumplimiento. Cincuenta y un pacientes, representando un 14,7% del total, dieron resultados positivos a la prueba Cologuard mt-sADN (Exact Sciences Corporation; Madison, WI, EUA; www.cologuardtest.com) y fueron remitidos para colonoscopia diagnóstica. Hubo 46 pacientes, o el 90,2% de los referidos, a quienes les practicaron colonoscopias de seguimiento. Tres pacientes rechazaron el procedimiento y dos pacientes no respondieron a los intentos de los médicos de aceptar el seguimiento. Marcos Prince, MD, MBA, director de gastroenterología en los Servicios Médicos USMD, dijo: “A pesar de la disponibilidad de varias opciones de detección del cáncer de colon, más del 40% de los estadounidenses no se practican pruebas de cribado. Este estudio pone de relieve la oportunidad de ampliar la población de selección al ofrecer nuevos métodos para el paciente. Estábamos interesados en ver si la experiencia ‘vida real’ con Cologuard, en la práctica clínica, sería similar a los resultados observados en el ensayo clínico. ”. El estudio fue presentado en el Congreso Anual de la Asociación Americana para la Investigación del Cáncer (AACR), realizado del 16 de abril al 20 de abril de 2016, en Nueva Orleans (LA, EUA).

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Caracterizan grupos de células en pacientes con cáncer n un estudio de muestras de sangre de pacientes con cáncer colorrectal, los investigadores han descubierto ahora la fuente de estas células y que no son malignas, abriendo potencialmente un nuevo camino para detectar e inhibir la propagación del cáncer. Los grupos de células circulantes (CCCS), que se encuentran comúnmente en la sangre de pacientes con cáncer han sido considerados como células malignas (es decir CTC – células tumorales circulantes) que se han desprendido del tumor primario, difundiendo el cáncer a otras partes del cuerpo. Esta fue la hipótesis de trabajo, pero debido a los problemas técnicos de la separación de estos grupos de células normales de la sangre, se han realizado, hasta ahora, investigaciones limitadas.

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Ahora, un equipo de investigación multiinstitucional, dirigido por el Dr. Min-Han Tan, un científico de investigación principal, en el Instituto de Bioingeniería y Nanotecnología (IBN; Singapur; www.ibn.a-star.edu.sg) de Singapur, ASTAR (Agencia para la Ciencia, la Tecnología y la Investigación), han demostrado que estas CCC provienen de los vasos sanguíneos que recubren el tumor en lugar del propio tumor. El equipo incluye a investigadores de IBN, del Instituto del Genoma de Singapur de ASTAR, del Hospital de Cáncer Concord, de la Universidad Nacional de Singapur, del Centro Nacional del Cáncer de Singapur y del Hospital General de Singapur. Los investigadores estudiaron estas CCC en escala de una sola célula, en 80 pacientes con cáncer colorrectal. Primero separaron las CCC de las muestras de sangre usando un microdispositivo de diseño personalizado, desarrollado por el laboratorio del Prof. Jackie Y. Ying en IBN, que permite la captura y recuperación de las CCC, de manera rápida y eficiente. A continuación utilizaron la secuenciación de alto desempeño de ADN y ARN y el modelado computacional para determinar la identidad de estas células. Los resultados mostraron que en el cáncer colorrectal, estas CCC son las células endoteliales de los vasos sanguíneos que tapizan el tumor y que no eran cancerosas. Inesperadamente, los investigadores también descubrieron que se encontraban más CCC endoteliales en los pacientes que no habían recibido ningún tipo de tratamiento, en comparación con aquellas que habían recibido tratamiento, lo que sugiere que estas CCC podrían ser utilizados para la detección del cáncer en estadío temprano. “El objetivo de la investigación del cáncer es entender cómo el cáncer se propaga a fin de controlar la enfermedad. Nuestro instituto se ha centrado en la evaluación del cáncer de una manera no invasiva a través de pruebas de sangre usando nuestra nueva técnica de microfiltración. Conocer exactamen-

te de donde provienen estas CCC nos conducirá hacia mejores métodos de diagnóstico y tratamientos del cáncer”, dijo el profesor Jackie Y. Ying, director ejecutivo, IBN. El Dr. Poh Koon Koh, del Hospital de Cáncer Concord dijo: “Me alegro de que nuestra colaboración pública-privada haya producido este tipo de información clave en la biología del cáncer. La innovación significativa se produce cuando los equipos focalizados están dispuestas a desafiar y romper dogmas existentes, y las ideas aquí permiten que Singapur desarrolle sus tecnologías clave en el dominio de la biopsia líquida”. La siguiente etapa de esta investigación es determinar si la misma conclusión se aplica a otros tipos de cáncer además del cáncer colorrectal y desarrollar nuevas tecnologías de biopsia líquida para la detección del cáncer y el tratamiento con medicamentos con base en estas CCC. El estudio, realizado por Cima I et al, fue publicado el 29 de junio de 2016, en la revista Science Translational Medicine. Imagen: Grupos de células endoteliales humanas capturadas utilizando el microdispositivo de diseño personalizado de IBN (Fotografía cortesía del Instituto de Bioingeniería y Nanotecnología).

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Reciclan pruebas rápidas para serotipificación del dengue a infección por el virus del dengue conlleva importantes problemas de salud pública en las zonas tropicales y subtropicales, pero en muchas zonas endémicas, la falta de acceso a los servicios de laboratorio es un obstáculo importante para la vigilancia y el estudio de la epidemiología del dengue. Las pruebas para el diagnóstico rápido del dengue (PDR), en la cuales se coloca una gota de sangre sobre una tira de papel contenida en un casete de plástico, son fáciles de usar y tienen una buena exactitud diagnóstica. Sin embargo, circulan cuatro tipos de virus del dengue en la mayoría de las áreas tropicales y sus patrones de circulación son de importancia epidemiológica, ya que desempeñan un papel en la gravedad y la propagación de dicha enfermedad. Un equipo internacional de especialistas en medicina tropical, encabezados por los de la Universidad de Mahidol (Salaya, Tailandia; www.mahidol.ac.th), recogieron muestras de sangre de 99 pacientes que consintieron participar y que ingresaron, de agosto a noviembre de 2013, con síntomas que se ajustaban a los criterios internacionales para una infección por dengue. En otro hospital, 362 pacientes que consintieron participar, con fiebre indiferenciada y que dieron resultado negativo a una PDR para malaria, fueron incluidos entre julio y octubre de 2012 y se les recogieron tanto sangre venosa total como sangre capilar total mediante pinchazos en los dedos. Las muestras fueron analizadas con la PDR Bioline Dengue Duo de SD (Standard Diagnostics, Kyonggi-do, Corea; www.standardia.com), la cual es un análisis inmunocromatográfico in vitro para la detección del Ag NS1 del virus del dengue y de los anticuerpos IgM e IgG antidengue en suero, plasma o sangre entera, humanos, obtenidos por pinchazo en el dedo o de sangre venosa. Esta prueba comprende un par de dispositivos de prueba, una prueba para el Ag NS1 del dengue en el lado izquierdo y una prueba para los anticuerpos (Ac) IgM e IgG del dengue en el lado derecho. El ARN del dengue se purificó a partir de la almohadilla de la muestra de la PDR para el NS1, cargada con aislados de virus de los cuatro serotipos y a continuación fue cuantificado mediante una reacción en cadena de polimerasa de transcriptasa inversa (RT-PCR) en tiempo real. Todas las muestras válidas que dieron resultado positivo para dengue en la PDR y el papel de filtro (FP), fueron analizadas con una RT-PCR en tiempo real para hacer la serotipificación. Todos los cuatro serotipos del DENV fueron detectados y en la mayoría de los pacientes se encontraba el DENV-3 (81 %; 42 de 52), seguido del

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DENV-2 (10 %; 5 de 52), luego el DENV-4 (4 %; 2 de 52) y el DENV-1 (4 %; 2 de 52), además de una muestra que no pudo ser tipificada. Se obtuvo una concordancia de 100 % entre la PDR y la RT-PCR en suero, respecto al serotipo del dengue que producía la infección. Los serotipos del dengue presentes en la zona rural de Salavan eran en su mayoría DENV1 (80 %; 113 de 142), seguido del DENV-2 (12 %; 17 de 142) y del DENV-3 (con 4 %; 6 de 142). El estudio fue publicado el 9 de mayo de 2016, en la revista Public Library of Science Neglected Tropical Diseases.

Imagen: La prueba para diagnóstico rápido (PDR) Bioline Dengue Duo de SD (Fotografía cortesía de Standard Diagnostics).

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Kit ELISA para diagnóstico de Alzheimer en orina a enfermedad de Alzheimer es la forma más común de demencia, un término general para la pérdida de memoria y otras capacidades intelectuales lo suficientemente graves como para interferir con la vida diaria; la enfermedad de Alzheimer (EA) representa entre el 60% y el 80%, de los casos de demencia. El diagnóstico exacto, precoz de la EA es beneficioso por varias razones, dado que comenzar el tratamiento temprano en el proceso de la enfermedad puede ayudar a conservar el funcionamiento diario durante algún tiempo, a pesar de que el proceso subyacente del Alzheimer no se puede detener o revertir. Los científicos de la Universidad de la Capital Médica (Beijing, China; www.csc.edu.cn) han desarrollado un método no invasivo y sencillo para la detección precoz de la EA, que será muy importan-

RESULTADOS DE LOS ANÁLISIS RÁPIDOS Y CONFIABLES PARA LOS PUNTOS-DE-ATENCIÓN Y LOS LABORATORIOS

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te para el diagnóstico y pronóstico de la EA. Los científicos recogieron las primeras muestras matutinas de orina de 121 pacientes con EA y 118 controles emparejados por edad y determinaron los niveles de AD7C-NTP en orina mediante el kit ELISA. El equipo sintetizó fragmentos peptídicos inmunogénicos de AD7C-NTP por el método en fase sólida y los utilizaron para inmunizar ratones o conejos para generar anticuerpos anti-AD7C-NTP. Posteriormente, establecieron el kit ELISA-NTP AD7C para orina; el anticuerpo de ratón, anti-AD7C-NTP, generado fue utilizado como un anticuerpo de captura; el anticuerpo anti-AD7C-NTP de conejo, marcado con biotina se utilizó como un anticuerpo de detección, y la avidina marcada con la peroxidasa de rábano picante fue usada como sustrato. Los investigadores informaron que el título de los anticuerpos ELISA, anti-AD7C-NTP, de ratón y

conejo fue de 1:8000 y 1:32000, respectivamente. Se encontró una única banda con una masa molecular relativa de 41 kDa en las muestras de cerebro humano, mediante un ensayo de inmunotransferencia Western, que fue identificada como anticuerpo AD7C-NTP. La concentración en orina de AD7C-NTP, en los pacientes con EA fue mayor que la de los controles con edad correspondiente; la sensibilidad fue del 89,3% y la especificidad fue del 84,7%. Los autores concluyeron que habían demostrado con éxito que su nuevo kit ELISA para detectar AD7C-NTP, desarrollado recientemente, tiene potencial para el diagnóstico de la EA en una población china, lo que sugiere que puede ser un kit de diagnóstico útil para la detección de EA precoz. El estudio fue publicado en la edición de julio de 2016 de la revista Journal of Clinical Laboratory Analysis.

Análisis de aliento reduce recetas innecesarias de antibióticos n número de patógenos multirresistentes, incluyendo Acinetobacter baumannii, colocan una pesada carga sobre los pacientes que padecen neumonía asociada a la ventilación mecánica (NAV) en las unidades de cuidados intensivos (UCI), y es críticamente importante diferenciar entre la infección bacteriana y la colonización con el fin de evitar recetas innecesarias de antibióticos. El cultivo cuantitativo de las muestras del tracto respiratorio inferior (LRT), sin embargo, requiere procedimientos invasivos; sin embargo hoy en día, se han estudiado los compuestos orgánicos volátiles (COV) in vitro e in vivo para identificar biomarcadores derivados de los patógenos. Se ha desarrollado una prueba eficiente, rápida, exacta, sin dolor y asequible que le ayudará a los médicos en la formulación de antibióticos sólo cuando el tratamiento sea absolutamente necesario. Los científicos de la Universidad de Zhejiang (Hangzhou, China; www.zju.edu.cn) reclutaron a

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20 pacientes con A. baumannii VAP (grupo infectado), 20 pacientes ventilados con colonización en el LRT con A. baumannii (grupo colonizado) y 20 pacientes ventilados con trastornos neurológicos, pero sin neumonía o colonización por A. baumannii (grupo control). Se usó un aislado clínico de cepas de A. baumannii para el experimento de cultivo in vitro. Para la recogida de la muestra de aliento y el análisis de cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS), el equipo utilizó un GC-MS, QP2010 Plus, (Shimadzu, Kioto, Japón; www.shimadzu.com). Los autores concluyeron que el estudio ofrece, sobre todo, una prueba de concepto de que la detección directa de los COV exhalados derivados de A. baumannii podría ser adoptada para una alerta temprana de la presencia de bacterias en pacientes ventilados en la UCI con infección en el LRT e incluso diferentes estados parasitarios (es decir, infección y colonización ) de A. baumannii. El estudio fue publicado el 7 de junio de 2016, en la revista Journal of Breath Research.

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Diagnostican malaria en tejido placentario mal procesado e ha considerado a la histopatología placensecuestran en la placenta, pero no circulan, mientras taria como el estándar de oro para el diagque la PCR detecta una parasitemia extremadamente nóstico de la malaria durante el embarazo; baja, la combinación de ambos métodos podría proSin embargo, en las zonas de escasos recursos, con porcionar un medio para detectar el mayor número frecuencia el tejido placentario se fija y se procesa inade infecciones. Por lo tanto la PCR y/o la IHC son decuadamente; el pigmento de formalina resultante diagnósticos adecuados cuando la presencia de piges difícil de diferenciar del pigmento de la malaria. mento de formalina compromete sustancialmente hisA menudo es problemático diagnosticar la malatopatología placentaria. El estudio fue publicado el 10 laria. Las flechas azules indican ejemplos de los ria en las mujeres embarazadas ya que los eritrocide mayo de 2016, en la revista Malaria Journal. glóbulos rojos que contienen pigmento y las puntas tos parasitados han sido secuestrados en la placende flecha negras muestran un ejemplo de un histiota, y no se encuentran en la circulación periférica. Imagen: Una microfotografía de tejido placentario cito que contiene pigmento (Fotografía cortesía de que revela la presencia de los parásitos de la maSe han utilizado la microscopía de la sangre periféDrucilla J Roberts, MD). rica y de la placenta, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y las pruebas de diagnóstico rápido pero éstas varían en NUE DIS VO sensibilidad y especificidad. EÑO Los científicos de la Universidad de Carolina del Norte (Chapel Hill, NC, EUA; www.unc.edu) y sus colegas internacionales realizaron un estudio prospectivo en 182 mujeres adultas, sanas, con embarazos únicos, de menos de 23 semanas de EL MERCADO MUNDIAL DE DISPOSITIVOS MEDICOS edad gestacional. Después del parto, se recogió una biopsia de la placenta con una incisión en una zona pericéntrica saludable de la placenta. Las muestras de sangre fueron recolectadas de los participantes del ¡REGÍSTRESE estudio, de cero a 33 días antes del parto. GRATIS! Se realizó la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qPCR), en ADN extraído de manchas de sangre seca en papel de filtro utilizando una estrategia de mezcla de alto rendimiento. Los cortes de parafina de aproximadamente 5 micras se colorearon con Giemsa de acuerdo con los protocolos histológicos estándar. Se realizó la inmunohistoquímica (IHC) usando un anticuerpo monoclonal contra la proteína 2, rica en histidina, del Plasmodium falciparum (HRP2), en cortes de 5 mm de espesor, fijados con formol e incluidos en parafina, utilizando un equipo de coloración automatizado, Leica IHC (Leica Microsystems, Bannockburn, IL, EUA, www.leicabiosystems.com). La sensibilidad y la especificidad de las pruebas individuales se calcularon utilizando la PCR o la IHC como el estándar de referencia, así como el análisis de clase latente (LCA). La PCR (en el momento más cercano al parto) se utilizó como el estándar de oro. Con la PCR como el patrón de referenConectando a compradores y cia, todas las otras pruebas tenían especificiproveedores de todo el mundo dades altas, pero bajas sensibilidades. La Acérquese a nuevos recursos de suministro otra prueba más sensible era la IHC, pero Identifique los últimos productos y tecnologías pasó por alto el 50% de las infecciones de malaria diagnosticadas con la PCR. La correEnvíe consultas directamente a los proveedores lación entre los dos microscopistas, ciegos, Reciba avisos con novedades de productos fue pobre, ya que había pigmento de formaChatee en vivo con los proveedores lina generalizado. Usando el LCA, todas las TradeMed ofrece una sofisticada aunque sencilla plataforma B2B para el abastecimiento de equipapruebas tenían altas especificidades. La miento médico. TradeMed conecta a compradores y vendedores en el mundo a través de una red seprueba más sensible fue la IHC (67,7%), con la PCR como segunda mejor (56,1%). gura, protegida y dinámica. Dedicada únicamente a productos médicos, TradeMed es la elección de Los autores concluyeron que puesto que preferencia de los proveedores médicos, encargados de decisiones de los hospitales y compradola IHC puede detectar parásitos cuando se res en el mundo, independientemente del volumen o presupuesto.

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Asocian exposición a toxinas en niños con biomarcador de enfermedad renal os investigadores han evaluado la exposición ambiental a múltiples toxinas en los niños que viven en una región de México con una alta incidencia de enfermedad renal crónica, especialmente entre los adultos jóvenes. Los científicos, no sólo detectaron niveles altos de arsénico y cromo en muestras de orina, también detectaron niveles elevados de la Molécula de Daño Renal-1 (KIM-1), un biomarcador, que actualmente se está estudiando como una señal temprana de la lesión renal. La exposición a toxinas ambientales – tales como el arsénico, el cadmio, el cromo, el plomo y otros metales pesados – temprano en la vida, a través del agua contaminada o de otras fuentes, a menudo tiene consecuencias, para la salud a largo plazo, a medida que crecen. Los investigadores del Hospital Brigham y de Mujeres (BWH; Boston, MA,

EUA; www.brighamandwomens.org) y de la Facultad de Medicina de Harvard (Boston, MA, EUA; http://hms.harvard.edu), han encontrado niveles excesivamente altos de arsénico y cromo en las muestras de orina recogidas de 107 niños que viven en la región centro-norte de México – niveles incluso superiores a los límites de exposición establecidos para los adultos. Cuando el equipo midió los biomarcadores tradicionales de la función renal – tales como los que se miden en un examen físico de rutina – no encontraron niveles elevados de estos marcadores. Sin embargo, los biomarcadores más sensibles y específicos de lesión renal, calificados recientemente por la FDA para uso en estudios preclínicos, por ejemplo, KIM-1, estaban elevados en los niños. KIM-1 podría servir como un biomarcador sensible para evaluar a los niños con respecto al daño renal inducido por agentes tóxicos ambientales.

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“Por primera vez, hemos sido capaces de evaluar y valorar una señal temprana de la lesión renal – una que nos puede dar la capacidad de actuar con antelación antes de que haya un daño irreversible”, dijo la primera autora, Mariana Cárdenas-González, PhD, una estudiante postdoctoral en el laboratorio del Dr. Vaidya. “Esto puede ser un problema que se puede resolver mediante la reducción de la exposición, pero primero tenemos que entender cómo sucede que estos altos niveles de toxinas se manifiestan en la orina de estos niños”. El equipo de investigación también analizó muestras del agua del grifo, usada por los niños, identificando el suministro de agua potable contaminada como la fuente probable de arsénico. La fuente de cromo, sin embargo, sigue siendo desconocida, por lo que se necesita más investigación. La exposición a cromo puede provenir de aire contaminado, el suelo, el agua, los alimentos o los productos del tabaco. El estudio fue publicado en línea el 15 de julio de 2016 en la revista Environmental Research. Imagen: Una nueva investigación muestra que los niños que viven en México, y que están expuestos a múltiples toxinas, muestran una mayor incidencia de la enfermedad renal crónica (Fotografía cortesía del BWH). LabMedica en Español Noviembre/2016

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Cáncer de hígado se diagnostica por metabolismo alterado del azúcar a expresión alterada de un gen que hace que las células cancerosas empiecen a metabolizar la fructosa de manera diferente a las células sanas, podría ser un biomarcador nuevo significativo para el diagnóstico del cáncer de hígado. La fructosa de la dieta se metaboliza principal-

Descubren pacientes hospitalizados con diabetes no diagnosticada a hiperglucemia es un hallazgo frecuente que puede estar relacionado con el estrés fisiológico, las enfermedades y los medicamentos, incluyendo esteroides y vasopresores; la hemoglobina glicosilada (HbA1c) se correlaciona con el nivel promedio de glucosa en la sangre durante las últimas ocho a 12 semanas. El estudio de los niveles de HbA1c juega un papel importante en el diagnóstico y tratamiento de la diabetes mellitus, en el ámbito ambulatorio, pero sigue siendo subutilizada, en la evaluación de la hiperglucemia con diabetes no diagnosticada, en el entorno hospitalario. Científicos de la Universidad de California Touro (Vallejo, CA, EUA; www.tu.edu) y la Facultad del Patrimonio de Medicina Osteopática (Athens OH, EUA, www.ohio.edu) revisaron las historias clínicas de 348 pacientes hospitalizados con hiperglicemia descubiertos al momento del ingreso en un hospital universitario de una comunidad rural, a partir del 30 de junio de 2012 hasta el 1 de julio de 2014. De esos pacientes, 50 no tenían antecedentes conocidos de diabetes y en 31 de ellos se practicó la prueba de HbA1C, que mide el nivel promedio de glucosa en la sangre durante los dos a tres meses anteriores. Cincuenta pacientes tratados por hiperglicemia tenían historias clínicas sin antecedentes conocidos de diabetes (NKHD). De los 50 pacientes con NKHD, a 31 (62%) les hicieron una prueba de HbA1c. De los 31 pacientes evaluados, 6 (19%) tenían niveles de HbA1c consistentes con el diagnóstico de prediabetes, y 18 (58%) tenían niveles consistentes con diabetes. Diecisiete (55%) de los 31 pacientes tuvieron un diagnóstico al alta que incluía la diabetes. De los 19 pacientes con NKHD a quienes no les practicaron una prueba de HbA1c, 2 (11%) recibieron un diagnóstico, al alta, que incluía la diabetes. Los 50 pacientes con NKHD tuvieron una estancia promedio 50% más larga en comparación con los 298 pacientes con diabetes conocida. Jay H. Shubrook, DO, el autor principal del estudio, dijo: “El estudio nos muestra que estamos perdiendo oportunidades para detectar la diabetes e iniciar el tratamiento para aquellos pacientes en que podríamos ayudar a controlar esta enfermedad, lo que puede reducir su costo de atención, a largo plazo, y la carga de la enfermedad. Desde la perspectiva osteopática, la detección temprana es igual a mejores resultados; es fácil convencer para que se diseñen protocolos hospitalarios que activen una prueba de HbA1c cuando se detecta hiperglucemia con el fin de diferenciar entre una hiperglucemia transitoria y las enfermedades crónicas”. El estudio fue publicado en la edición de junio de 2016 de la revista The Journal of the American Osteopathic Association.

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mente en el hígado y ahora se ha demostrado que, en comparación con los hepatocitos normales, las células del carcinoma hepatocelular (CHC) reducen notablemente la tasa de metabolismo de la fructosa y el nivel de especies reactivas de oxígeno. Científicos del Centro del Cáncer MD Anderson de la Universidad de Texas (Houston, TX, EUA; www.mdanderson.org) y sus colegas descubrieron que la reducción en el metabolismo de la fructosa en las células tumorales del hígado es causada por un empalme alternativo aberrante del gen Cetohexoquinasa (fructoquinasa, KHK). Esto dio como resultado la expresión de una variedad del producto del gen, llamado KHK-A, que perdió la capacidad de procesar la fructosa. El equipo mostró que la actividad de la proteína quinasa de KHK-A mejoraba la síntesis de ADN en las células tumorales y de ácido ribonucleico (ARN) e identificó recientemente a KHK-A como esencial

para la formación de tumores de hígado. Las quinasas son enzimas que les permiten a las células la transferencia de fosfatos, un proceso que es crucial para la producción de energía y la regulación de las proteínas. El equipo encontró que, KHK-A actúa como una proteína quinasa, que fosforila y activa la fosforribosil pirofosfato sintetasa 1 (PRPS1), para promover la síntesis de novo de ácidos nucleicos dependiente de la vía de los fosfatos de pentosas y la formación del CHC. Además, los niveles de expresión del Homólogo del Oncogén Viral de la Mielocitomatosis Aviar V-Myc (c-Myc), de la Ribonucleína Nuclear HeterogéneaH1/2 (hnRNPH1/2) y de KHK-A y de fosforilación de PRPS1 Yhr225, se correlacionan entre sí en las muestras de CHC y se asocian con un mal pronóstico para el CHC. El estudio fue publicado el 18 de abril de 2016, en la revista Nature Cell Biology.

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Microscopio acoplado a smartphone diagnostica parásitos intestinales os microscopios portátiles, acoplados a teléfonos, pueden ser utilizados en los países en desarrollo después de un mínimo de entrenamiento de los técnicos de laboratorio, para diagnosticar los parásitos intestinales, con rapidez y exactitud. Los parásitos intestinales afectan a casi dos mil millones de personas en todo el mundo, predominantemente en áreas con mala higiene y agua de mala calidad, y en los niños, estos parásitos pueden conducir a la desnutrición, retraso en el crecimiento y el desarrollo y, finalmente, a una discapacidad crónica, con graves consecuencias sanitarias y económicas. Un equipo internacional de científicos dirigidos por los de la Universidad de Toronto (ON, Canadá; www. utoronto.ca), capacitó a técnicos de laboratorio locales para operar los dos microscopios portátiles. En total, los técnicos examinaron muestras de heces y orina de 226 personas para la detección de parásitos. La exactitud de todas las láminas fue evaluada para todos los microscopios: los dos dispositivos portátiles, así como un mi-

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croscopio convencional, que fue considerado el patrón de oro. Los dos microscopios portátiles de mano ensayados fueron: un microscopio comercial, Newton Nm1 (Newton Microscopes, Bedford, RU; http://newtonmicroscopes.com) y un CellScope basado en un teléfono móvil (CellScope Inc., San Francisco, CA, EUA; www.cellscope.com), que es esencialmente un teléfono inteligente con una lente especial, hecha a la medida, que se ajusta sobre la cámara y la fuente de luz, el cual fue desarrollado por los ingenieros, para detectar los parásitos intestinales. Los científicos informaron que los dos microscopios portátiles eran muy buenos para descartar las infecciones, y el microscopio portátil, Newton, fue capaz de detectar incluso infecciones con muy baja carga. El CellScope pasó por alto algunas infecciones de baja carga, sin embargo, se están probando, actualmente, nuevas iteraciones de este dispositivo para aumentar su sensibilidad. El estudio fue publicado el 27 de junio de 2016, en la revista PLoS Neglected Tropical Diseases.

Descubren asociación bacteriana no sospechada con cáncer hepático as bacterias en el conducto biliar han sido identificadas como un factor de riesgo potencial en el desarrollo del cáncer de las vías biliares o colangiocarcinoma, una forma rara, pero agresiva de cáncer, con síntomas que no se presenten en las primeras etapas. El colangiocarcinoma (CCA) está asociado con múltiples factores de riesgo que están geográficamente definidos; los quistes del colédoco y la colangitis esclerosante primaria han sido implicado en el desarrollo del CCA en la población occidental, mientras que las infecciones por el parásito, fasciola hepática, han generado una mayor incidencia de CCA en el sudeste asiático. Un equipo internacional de científicos que trabajan con la Agencia para la Ciencia, Tecnología e Investigación (Singapur; www.a-star.edu.sg) analizó 60 tumores primarios de CCA y normales emparejados, de cáncer tanto asociados con la fasciola hepática (Opistorchis viverrini) (Ova) (28 casos) y 32 no asociados con O. viverrini (no-OVA), usando secuenciación de alto rendimiento del ARNr 16S. Se usó Agencourt AMPure XP

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(Beckman Coulter, Brea, CA, EUA; www.beckmancoulter.com) para purificar los productos amplificados y los productos purificados fueron visualizados utilizando el Bioanalizador Agilent, preparado con el kit de ADN de alta sensibilidad, Agilent (Agilent Technologies, Waldbronn, Alemania; www.agilent.com). Como controles para la especificidad del análisis, se realizó una reacción en cadena de la polimerasa 16S rARN (PCR) con los controles de extracción y la ausencia de productos de amplificación fue confirmada usando el Bioanalizador Agilent. El equipo descubrió que los tejidos de las vías biliares albergaban una comunidad de diversas especies de bacterias. Se encontró que las especies de Stenotrophomonas, previamente implicadas en las infecciones de las vías biliares, se alojaban preferentemente en el tejido tumoral, en comparación con el tejido normal, de los pacientes con CCA no infectados por la fasciola, destacando su papel potencial en el desarrollo del CCA. El estudio fue publicado en la edición de junio de 2016 de la revista EbioMedicine. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Estudio mejora comprensión de epidemiología de E. coli cepa H30 os investigadores han identificado a las poblaciones más vulnerables a la infección por E. coli cepa H30 pandémico; sin embargo, se necesitan mejores pruebas para realizar el seguimiento a los pacientes debido a la alta tasa de fracaso del tratamiento. La resistencia a los antibióticos y la inmunidad debilitada sólo explican parcialmente la infección persistente. La infección por E. coli H30 (Secuencia Tipo 131), comienza de manera sutil, difícil de detectar. Sin embargo, incluso con el diagnóstico y el tratamiento con el antibiótico adecuado, los médicos a menudo tienen problemas para la erradicación de la infección, y pueden haber complicaciones. La dificultad en controlar la E. coli H30, resistente a los fármacos, también puede ser debido a una capacidad intrínseca que causa infecciones persistentes, perjudiciales, incluso, mortales. “Ningún otro tipo de E. coli está causando este daño tan generalizado”, dijo el coautor, Evgeni Sokurenko, profesor de la Universidad de Washington (Seattle, WA, EUA; http://uw.edu). “Tenemos que prestarle tanta atención como lo hacemos con la superbacteria, SARM, la infección por estafilococos, resistente al tratamiento”. Se ha supuesto que la cepa H30 causa infecciones oportunistas en la población, rápidamente creciente, de ancianos y otras personas con sistemas inmunes debilitados. El uso de antibióticos de amplio espectro puede haber dado lugar a la resistencia a los medicamentos. Además, la posible presencia de rasgos en los patógenos que aún desconocemos, podría haber contribuido al surgimiento de H30 como un problema de salud pública. Un equipo de investigadores de cinco centros médicos en los Estados Unidos, la Universidad de Washington, el Sistema de Atención de Salud de Asuntos Veteranos de Minneapolis, la Universidad de Minnesota, el Hospital de Niños de Seattle, y el Grupo Cooperativo de Salud – evaluaron la naturaleza de las infecciones por H30 mediante el análisis de los datos epidemiológicos y médicos para explorar posibles asociaciones de H30 con las características de los pacientes, las manifestaciones clínicas, el tratamiento y el resultado en los pacientes. Los investigadores encontraron que los individuos con mayor riesgo de infección por E. coli H30, tendían a ser personas de edad avanzada que habían estado en un centro de salud, incluyendo las residencias de atención a largo plazo u hospitales, que habían recibido antibióticos, y que tenía condiciones subyacentes que debilitaban su capacidad para evitar las infecciones. Los investigadores también observaron que los pacientes que más tarde mostraron tener H30 tenían, en su primera consulta al médico, significativamente menos probabilidad de que se les sospechara una infección y menos probabilidades de recibir antibióticos adecuados. Al cabo de un mes, los pacientes cuya cepa inicial fue H30, tenían más probabilidades de experimentar complicaciones graves. Es decir, la cepa H30 está fuertemente asociada con terapias iniciales ineficaces y efectos adversos diversos, de ocurrencia posterior. “Es posible que H30 se pueda haber estado es-

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condiendo de las defensas naturales de los pacientes contra la infección, perjudicando de este modo el intento del cuerpo para eliminar el patógeno durante el tratamiento”, dijo el profesor Sokurenko. “Las propiedades distintivas que quizás permitan que H30 actúe como un patógeno evasor de las defensas también pueden estar asociadas con las complicaciones tardías”. Se necesitan mejores métodos para anticipar, detectar, diagnosticar H30 en los pacientes vulnerables que no tienen los síntomas habituales de infección urinaria o de infección del torrente sanguíneo. Además de la mejora en la vigilancia, al Prof. Sokurenko le gustaría que estuviesen disponibles pruebas rápidas para determinar qué antibióticos pueden o no pueden funcionar en un paciente individual, para ayudar a evitar que haya desajustes en las

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parejas bacterias-antibióticos y se presente una respuesta retrasada al tratamiento. El estudio se publicó el 29 de marzo de 2016, en la revista Clinical Infectious Diseases. Imagen: Una micrografía electrónica de barrido (SEM) de la bacteria E. coli, correspondiente a la cepa pandémica H30 (Fotografía cortesía de la Universidad de Washington).

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Biopsias líquidas como esperanza para tratamiento del cáncer ovárico

os investigadores están desarrollando un nuevo método que podría permitir la detección temprana, el seguimiento y el tratamiento del cáncer de ovario (CO) que vuelve a aparecer en las pacientes en remisión: los científicos encontraron que las biopsias líquidas a partir de los análisis de sangre y la secuenciación del ADN, pueden detectar la recurrencia del CO mucho antes de que vuelva a aparecer un tumor. El CO, a menudo, no se puede detectar sino hasta las últimas etapas. La mayoría de las pacientes entran en remisión después del tratamiento inicial, pero el tumor regresa el 75% de las veces y estos tumores recurrentes, generalmente no responden a la quimioterapia. La investigación fue realizada por un equipo de la Clínica Mayo (Rochester, MN, EUA; www. mayoclinic.org) dirigido por George Vasmatzis, PhD, del Departamento de Medicina de Laboratorio y Patología. “Con las biopsias líquidas, no tenemos que esperar al crecimiento del tumor para obtener una muestra de ADN”, dijo el Dr. Vasmatzis, “Este importante descubrimiento hace posible que podamos detectar la recurrencia de la enfermedad antes que con otros métodos de diagnóstico. Podemos repetir las biopsias líquidas para monitorizar la progresión del cáncer”. El estudio fue realizado en 10 pacientes en etapas avanzadas de CO, comparando el ADN de las biopsias líquidas de sangre al ADN de las muestras de tejido tumoral. Se usó la secuenciación de compañeros correspondientes, una secuenciación eco-

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nómica de todo el exoma, que puede revelar cambios genéticos que contribuyen al crecimiento del tumor. “En este estudio, se utilizó la extracción de sangre antes y después de la cirugía y el tejido quirúrgico para identificar fragmentos de ADN con uniones anormales [cromosómicas] que sólo se pueden ver en el ADN del tumor de las pacientes”, explicó el Dr. Vasmatzis. “Se utilizó la secuenciación de próxima generación, de compañeros correspondientes, para identificar los cambios específicos de ADN del tumor con el fin de crear un grupo de seguimiento individualizado para la biopsia líquida. Esto nos permite dar forma a un tratamiento para cada paciente en lugar de utilizar un tratamiento estándar que puede no funcionar para todas. Se identificaron paneles de cebadores específicos de tumores individualizados, de uniones cromosómicas aberrantes, para cada caso y se detectaron por qPCR en el ADN libre de células (cfADN). El estudio, realizado por Harris FR et al, fue publicado el 20 de julio de 2016, en la revista Scientific Reports. Imagen: Los investigadores han encontrado que el análisis de la secuencia de ADN de las muestras de sangre de un conjunto inicial de pacientes con cáncer de ovario permitió la detección de la recurrencia del cáncer, mucho antes de que un tumor volviera a aparecer en el análisis de biopsias de tejido, sugiriendo que el uso de biopsias líquidas puede superar los obstáculos para la detección y el seguimiento temprano planteado por las pruebas actuales basadas en el tejido tumoral (Fotografía cortesía de la Clínica Mayo). LabMedica en Español Noviembre/2016

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Detectan mutación genética asociada con cáncer de pulmón l cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) es el tipo más común de cáncer de pulmón y los tumores NSCLC pueden arrojar ADN tumoral en la sangre de un paciente, por lo que es posible la detección de mutaciones específicas en muestras de sangre. Las pruebas para ADN tumoral mediante una muestra de sangre también son conocidas como biopsias líquidas y se recibió la aprobación para la prueba genética en sangre que puede detectar las mutaciones del gen del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) en pacientes con NSCLC. Tales mutaciones están presentes en aproximadamente el 10% a 20% de los cánceres de células no pequeñas de pulmón. El cáncer de pulmón es la principal causa de muerte por cáncer entre los hombres y las mujeres

en los EUA, y aunque más común en los hombres, el número de muertes por cáncer de pulmón en las mujeres va en aumento. Según el Instituto Nacional de Cáncer de los Estados Unidos (Bethesda, MD, EUA, www.cancer.gov), se calcula que 221.200 estadounidenses serán diagnosticados con cáncer de pulmón y 158.040 morirán de la enfermedad este año. La Administración de Alimentos y Medicamentos (Silver Springs MD, EUA; www.fda.gov) ha aprobado un diagnóstico acompañante, en sangre, para el medicamento contra el cáncer, Tarceva (erlotinib). La Prueba para la Mutación de EGFR cobas v2 (Roche Molecular Systems, Pleasanton, CA, EUA; http://molecular.roche.com) detecta la presencia de mutaciones específicas de deleción en el exón 19 o mutaciones de sustitución en el exón 21 (L858R) del NSCLC, en las muestras de sangre de

pacientes seleccionando aquellos que pueden beneficiarse del tratamiento con Tarceva. Imagen: La prueba para la mutación del receptor del factor de crecimiento epidérmico, EGFR, cobas v2 (Foto cortesía de Roche Molecular Systems).

Prueba permite diagnóstico rápido de infección por VHC l estándar actual para el diagnóstico de la infección por el virus de la hepatitis C (VHC), requiere dos pasos secuenciales que lo convierten en subóptimo, costoso, inconveniente, requiriendo mucho tiempo y en el mundo, no está ampliamente disponible o accesible. La infección crónica por el VHC afecta a aproximadamente 170 millones de personas en todo el mundo y se asocia con riesgo de progresión a cirrosis y carcinoma hepatocelular. A pesar de que las guías de práctica profesional de la salud abogan por la detección de la infección por el VHC, los estudios recientes indican un déficit significativo en la detección y el diagnóstico de la infección por el VHC. Científicos de la Facultad de Medicina de la Universidad de California, Irvine, (Orange, CA, EUA; www.ucirvinehealth.org) desarrollaron un inmunoensayo enzimático nuevo del VHC para el antígeno nuclear del VHC (VHC-Ags EIA) y evaluaron su sensibilidad, especificidad y utilidad para el diagnóstico, en un solo paso, de la infección virémica del VHC (V-VHC), utilizando 365 muestras de suero, incluyendo 176 sin, y 189 con la infección por el V-HCV. Se confirmó la presencia de las proteínas no estructurales del VHC, proteína 3 (NS3), NS4b y NS5a, además del VHCcAg durante la infección por el VHC, y desarrollaron un novedoso VHC-Ags EIA que permite la detección simultánea de todas estas 4 proteínas del VHC. El estudio demostró que la desnaturalización de la muestra de suero disminuye la especificidad de la prueba, debido a la liberación de VHC-Ags secuestrados en complejos VHC-inmune, y no debe ser utilizada en ningún tipo de HCV-Ags, incluyendo todos los ensayos actuales para el VHCcAg. Usando la dilución del suero de la muestra, y la no desnaturalización, los límites de detección más bajos de la prueba VHC-Ags EIA fueron equivalentes a los niveles de ARN del VHC en suero, de aproximadamente 150 a 250 UI/mL. El estudio fue publicado el 6 de junio de 2016, en la revista Hepatology (www.wiley.com).

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as infecciones por el virus del papiloma humano (VPH) son las infecciones de transmisión sexual más comunes en los EUA, y los genotipos 16 y 18 del VPH causan aproximadamente el 70% de los cánceres de cuello uterino en todo el mundo. De acuerdo con el Instituto Nacional del Cáncer, habrá un estimado de 12.990 nuevos casos y 4.120 muertes por cáncer de cuello uterino, en los EUA, durante el 2016. Antes de la aprobación, algunos laboratorios utilizaban muestras de células de cuello uterino, recogidas en fluido conservante, SureRath, para procesar las pruebas de VPH, en lugar de recoger una muestra adicional en un fluido de recogida separado que había sido aprobado para uso con dichas pruebas. Los pacientes que reciben resultados falsos negativos de la prueba del VPH pueden no recibir la atención de seguimiento apropiada, lo que podría conducir a la progresión a cáncer de cuello uterino. La Dirección de Alimentos y Medicamentos de los EUA (FDA, Silver Springs, MD, EUA; www.fda.gov) aprobó que se podía usar un fluido de recolección específico, para las pruebas del VPH, , el cual podía almacenar y conservar las muestras de células de cuello uterino para las pruebas en el laboratorio. La FDA basó su aprobación de la Prueba Roche cobas HPV (Roche Molecular Systems, Basilea, Suiza; www.roche.com) con Fluido de Conservación SureRath (Becton Dickinson and Company, Franklin Lakes, Nueva Jersey, EUA, www. bd.com) en un estudio clínico de 952 mujeres elegibles, mayores de 21 años, con resultados anormales en las pruebas de Papanicolaou (Pap). La Prueba Roche cobas HPV con Fluido Conservante SureRath demostró un desempeño clínico similar cuando se comparó con un tipo de muestra de cuello uterino, previamente aprobada. De las muestras que dieron resultados positivos para el VPH utilizando la Prueba Roche cobas HPV con SurePath, el 95,4% obtuvo el mismo resultado que la mues-

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tra de referencia. De las muestras que dieron resultados negativos para el VPH utilizando la Prueba Roche cobas HPV con SurePath, el 93,2% obtuvo el mismo resultado que con la muestra de referencia. La Prueba Roche cobas HPV Test con Fluido Conservante SureRath está aprobada para su uso con muestras de células de cuello uterino, obtenidas para una prueba de Papanicolaou con el fin de examinar a las mujeres mayores de 30 años para el VPH y determinar si son necesarios seguimientos y procedimientos adicionales de diagnóstico. La FDA también aprobó la Prueba Roche cobas HPV con SureRath en mujeres, mayores de 21 años, que ya habían tenido un resultado anormal en la prueba de Papanicolaou (citología celular limítrofe) con el fin de determinar si eran necesarios seguimientos adicionales y de diagnóstico. La prueba con SurePath también es capaz de detectar los genotipos de VPH de alto riesgo, 16 y 18, en las mismas poblaciones de mujeres. La Prueba Roche cobas HPV con SureRath no está aprobado como una prueba de detección primaria, de primera línea, para el VPH. Además, los profesionales sanitarios deben utilizar los resultados de la Prueba cobas VPH, junto con otra información, tales como la historia de cribado de las pacientes y los factores de riesgo de las pacientes. Imagen: El kit de fluido conservante SurePath (Foto cortesía de Becton Dickinson and Company). LabMedica en Español Noviembre/2016

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Prueba de metilación determina riesgo de cáncer de cuello uterino na novedosa prueba de clasificación diagnóstica estará disponible en Europa, Oriente Medio y África con la marca CE-IVD, para uso en la diferenciación del riesgo de desarrollar cáncer de cuello uterino (CC) para su uso en muestras tomadas por los médicos o auto-tomadas. El auto-muestreo puede agilizar los procesos y ayudar a evitar intervenciones médicas, adicionales, innecesarias. Como un ensayo de seguimiento, el examen ayuda a estratificar el riesgo de los pacientes con infecciones por virus del papiloma humano (VPH), que se pueden transformar en cáncer. El Ensayo de Metilación, QIAsure, de QIAGEN N.V. (Venlo, Holanda, y Hilden, Alemania; www. qiagen.com), es una valiosa adición al portafolio de QIAGEN de herramientas de diagnóstico, líderes, para uso en la salud de la mujer y el cribado primario. La prueba es altamente complementaria a las pruebas de detección del VPH y sigue bien un resultado positivo de la prueba de VPH de alto riesgo o el hallazgo de células anormales en una prueba de Papanicolaou. La prueba fue presentada al público por primera vez en la conferencia internacional de la Organización Europea de Investigación sobre Infección Genital y Neoplasia, EUROGIN 2016 (1518 de junio, Salzburgo, Austria). QIAGEN ha colaborado con Self-screen BV (Ámsterdam, Holanda; www.self-screen.nl), una empresa de biotecnológica creada por el Centro Médico de la Universidad VU, en el desarrollo de esta prueba. La prueba del VPH es generalmente más sensible pero menos específica que la citología para la detección del cáncer de cuello uterino. Sin embargo, el beneficio de aumento de la detección de la enfermedad usando el HPV, como una prueba primaria, también da como resultado muchas pruebas positivas para el VPH en pacientes sin enfermedad cervical subyacente. Un resultado positivo para la prueba de VPH exige pruebas de seguimiento para diferenciar el riesgo de cada paciente en función de los efectos celulares de la infección. Con un amento en el interés y la aceptación de las pruebas de VPH como una prueba primaria, la necesidad de una prueba de la clasificación adecuada tras una prueba de VPH positiva, es cada vez mayor. Actualmente las opciones disponibles de clasificación como la genotipificación del VPH o los ensayos basados en tejidos, a menudo han limitado su valor clínico. La genotipificación del HPV16/18 carece de especificidad, dando lugar a resultados falsos positivos; la citología carece de sensibilidad, con la consecuencia de pasar por alto la enfermedad cervical. El método de clasificación, favorecido actualmente, para un resultado positivo de VPH, es la citología. La citología carece de sensibilidad, es subjetiva y depende de la habilidad del operador. A medida que se implementan los métodos de análisis del VPH y la prevención con la vacunación primaria, el número de pacientes con células anormales va a disminuir, y por lo tanto la citología será cada vez más difícil de realizar. En algunos países, la falta de infraestructura requerida para la clasificación mediante citología es una barrera para la adopción del cribado primario del VPH. Esto hace que una solución molecular completa sea altamente deseable.

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Y, también, la necesidad de una prueba molecular exacta después de un resultado positivo para la prueba de VPH es claramente una necesidad médica no satisfecha. La prueba, QIAsure, estratifica con exactitud el riesgo de cáncer de cuello uterino mediante la detección de cambios epigenéticos en dos genes específicos implicados en el cáncer de cuello uterino. En concreto, mide la metilación del ADN en las regiones promotoras de FAM19A4 de la célula huésped y los genes mir124-2, que están hipermetilados en el cáncer de cuello uterino. En estudios a gran escala, los marcadores de ADN, utilizados en este ensayo, han demostrado conocimientos adicionales fiables sobre el riesgo individual de cada paciente y han contribuido a las decisiones relativas a la vigilancia y el tratamiento.

Mediante la identificación de la híper-metilación de estos genes de la célula huésped, la prueba QIAsure proporciona resultados altamente sensibles y específicos. Imagen: Una micrografía electrónica de barrido a color (SEM) de una célula de cáncer de cuello uterino en división (Fotografía cortesía de Wellcome Images).

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Niveles de troponina de donantes no afectan receptores de trasplante cardiaco uchos centros de trasplante rechazan corazones para trasplante si la sangre de los donantes revela niveles elevados de troponina I, una proteína que se encuentra en el músculo cardíaco que entra en el torrente sanguíneo cuan-

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do ocurre un ataque al corazón u otro daño del músculo cardíaco. Los donantes con antecedentes de enfermedad cardíaca se excluyen automáticamente. El trasplante de corazón es uno de los mayores logros de la medicina

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moderna y a los pacientes con insuficiencia cardíaca avanzada en los que la supervivencia se mide en semanas y meses, se les ofrece la posibilidad de supervivencia igual o mayor de 10 años, con excelente calidad de vida. Un cardiólogo en la Faculta de Medicina Albert Einstein (Bronx, Nueva York, EUA, www.einstein.yu. edu) analizó todos los receptores de trasplante de corazón adultos, mayores de 18 años de edad, quienes recibieron su trasplante, entre el 1 de enero de 2007 y el 30 de septiembre de 2014. El período de estudio coincide con el reporte periódico de los niveles de troponina de los donantes por la Red Unida para Compartir Órganos (UNOS). De los 15,247 trasplantes de corazón adulto, realizados en los EUA, desde enero de 2007 hasta septiembre 10 de 2014, 10.943 (71,8%) cumplían con todos los criterios de inclusión/exclusión y formaban la cohorte de estudio final. Había tres grupos clínicamente significativos de troponina I entre los donantes; menos de 1 ng/mL, de 1 a 10 ng/mL, y más de 10 ng/mL y se comparó la mortalidad a los 30 días, un año, tres años, y cinco años de seguimiento; además la disfunción primaria del injerto (PGF) a los 30 días, y la vasculopatía del injerto cardíaco (CAV) de más de cinco años de seguimiento. El equipo se propuso determinar si existían diferencias en los resultados para los pacientes que recibieron

un corazón de un donante con niveles altos de troponina I, a los 30 días, un año, tres años, y cinco años después del trasplante de corazón, los científicos no encontraron diferencias significativas en la supervivencia entre los receptores cuyos donantes tenían niveles elevados de troponina I y aquellos cuyos niveles eran normales. Tampoco hubo asociación entre los niveles de troponina I del donante y el riesgo de muerte del receptor al año del trasplante. Además, los niveles de troponina I del donante no hicieron ninguna diferencia en la incidencia de falla primario del injerto, la pérdida de la acción de bombeo que se puede producir dentro de los 30 días del trasplante, y la vasculopatía del injerto cardíaco, una forma de enfermedad del corazón que puede limitar, a largo plazo, la supervivencia después de un trasplante de corazón. El estudio fue publicado el 21 de junio de 2016, en la revista Circulation: Heart Failure. Imagen: Según una nueva investigación, un análisis de sangre que hace que los corazones de los donantes sean rechazados no puede predecir de forma eficaz si un trasplante de corazón tendrá éxito o no (Fotografía cortesía de la AMA). LabMedica en Español Noviembre/2016

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Métodos moleculares detectan patógenos pulmonares más rápidamente l género Mycobacterium se separa en la especie patógena, complejo Mycobacterium tuberculosis (MTB), Mycobacterium leprae y Mycobacterium ulcerans, y varias micobacterias no tuberculosas (MNT). Se están desarrollando nuevos métodos moleculares para detectar las micobacterias patógenas que causan infecciones pulmonares o tuberculosis, en menos tiempo que antes. Los cultivos de las bacterias, que consumen mucho tiempo, ya no necesitan ser tomados de las muestras de los pacientes, lo que significa que se puede iniciar rápidamente una terapia adecuada. Los científicos de la Universidad de Zúrich (Suiza; www.uzh.ch) utilizaron un estudio a gran escala con más de 6.800 muestras de pacientes para examinar los métodos moleculares usados para la detección de micobacterias patógenas. Debido a que muchas micobacterias sólo crecen a un ritmo muy lento, la detección de rutina utilizando cultivos de bacterias en los laboratorios altamente especializados y costosos de alta seguridad se demora

varias semanas hasta obtener el resultado. La prueba de susceptibilidad posterior para determinar el medicamento apropiado también toma de una a dos semanas. Todas las muestras fueron analizadas en paralelo usando procedimientos basados en cultivos y una prueba COBAS TaqMan MTB, modificada (Roche, Basilea, Suiza; www.roche.com) para la detección directa de MTB y NTM. Las muestras MTB positivas usando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) fueron estudiadas en busca de mutaciones asociadas con la resistencia a la isoniazida (INH) y la rifampicina (RIF) utilizando el módulo 1 de análisis con sondas lineales de resistencia TB AID (AID Diagnostika GmbH, Strassberg, Alemania; www. aid-diagnostika.com). Los resultados positivos usando microscopía con auramina-rodamina, fueron confirmados mediante coloración de Ziehl-Neelsen. La detección molecular de MTB y el cultivo die-

ron resultados concordantes para 97,7% de las muestras. La detección y el cultivo de NTM usando la PCR, dieron resultados concordantes para 97,0% de las muestras. La definición de las muestras con base en los datos combinados de laboratorio como verdaderos positivos o negativos con resultados discrepantes se resolvieron mediante revisión de las historias clínicas; los científicos calcularon la sensibilidad, la especificidad, el valor predictivo positivo (VPP) y el valor predictivo negativo (VPN) para la detección de MTB, usando la PCR, como 84.7%, 100%, 100% y 98,7%. Los valores correspondientes para la detección de MTB, usando el cultivo, fueron 86.3%, 100%, 100% y 98,8%. La detección con PCR de las NTM tuvo una sensibilidad del 84,7% en comparación con el 78,0% cuando se usó el cultivo para identificar las NTM. El estudio fue publicado el 16 de junio de 2016 en la revista EbioMedicine.

Paneles de proteínas en orina identifican cáncer de próstata na prueba de diagnóstico no invasiva para el cáncer de próstata se basa en firmas de proteínas que pueden diferenciar a los pacientes de los individuos sanos y aquellos con tumores agresivos de los que tienen crecimientos menos peligrosos. Los investigadores en el Instituto de Ontario para la Investigación del Cáncer (Toronto, Canadá; www.oicr.on.ca) y sus colegas, de la Universidad Red de Salud (Toronto, Canadá; www.uhn.ca) y la Facultad de Medicina de Virginia (Norfolk, VA, EUA, www.evms.edu), utilizaron técnicas avanzadas de proteómica para generar información de la expresión para 624 proteínas obtenidas en las muestras de orina. Los análisis computacionales redujeron este número mediante la identificación de proteínas significativamente expresadas, diferencialmente, y finalmente caracterizaron un conjunto de seis biomarcadores de proteínas para el diagnóstico y un conjunto de siete biomarcadores de proteínas para el pronóstico del cáncer de próstata. “Lo sorprendente de estas firmas es que su tasa de precisión es tan bueno o mejor que las pruebas invasivas que se utilizan hoy en día, con muchos menos inconvenientes”, dijo el autor contribuyente, el Dr. Paul Boutros, un investigador principal en el Instituto para la Investigación del Cáncer de Ontario. “Este tipo de prueba, barata, no invasiva, podría permitirles a los pacientes ser cribados con mucha más frecuencia, lo que permite un control más exacto del cáncer no agresivo de los pacientes con el tiempo, evitándoles biopsias a los paciente, pruebas de imagenología e incluso cirugías innecesarias”. La prueba fue descrita en detalle en un artículo publicado en la edición digital del 28 de junio de 2016, de la revista Nature Communications.

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El DH56 tiene un desempeño de hasta 60 muestras por hora utilizando volúmenes de muestra de tan sólo 20 µL. Ofrece modos de análisis de sangre total, sangre capilar y modos de recuento pre-diluidos con la capacidad de señalar las muestras anormales y almacenar hasta 100.000 resultados.

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Biochip electrónico detecta mutaciones en ADN causadas por SNP n equipo de bioingenieros ha diseñado un biochip electrónico con aplicaciones potenciales para la medicina personalizada que puede detectar, en tiempo real, mutaciones en el ADN causadas por los polimorfismos de nucleótido único (SNP). Los SNP, que son variaciones de una sola base en los nucleótidos en una secuencia de genes, son marcadores para una variedad de enfermedades humanas. La detección de SNP con una alta especificidad y sensibilidad es esencial para la puesta en práctica eficaz de la medicina personalizada. Sin embargo, la secuenciación actual de ADN, incluyendo la detección de SNPs, utiliza principalmente métodos basados en enzimas o ensayos marcados con fluoróforo que consumen mucho tiempo, requieren laboratorios y son caros. Ya se había reportado que los detectores de SNP basados en carga eléctrica, no tienen la suficiente especificidad y exactitud, lo que limita su eficacia. En un esfuerzo por mejorar la exactitud y la especificidad para la detección de SNPs, los investigadores de la Universidad de California en San Diego (EUA; www.ucsd.edu), combinaron nanotecnología dinámica de ADN con la detección electrónica de alta resolución en la forma de una sonda de ADN de doble cadena incrustada en un transistor de grafeno con efecto de campo (FET).

El método de detección se basa en el desplazamiento de una cadena de ADN de doble hebra débilmente unida por uno que contiene un SNP específico. El único desajuste es detectado midiendo el cambio de resistencia al desplazamiento inducido por cadena (y por lo tanto la corriente) en el transistor de grafeno. El uso de grandes cadenas de ADN de doble hélice (hasta 47 bases) mejoró la exactitud de la detección de SNP minimizando los resultados falsos positivos. “Una sonda de ADN de cadena sencilla no proporciona esta selectividad – incluso una cadena de ADN que contiene una base de nucleótido desajustada puede unirse a la sonda y generar resultados falsos positivos”, dijo el autor principal, el Dr. Ratnesh Lal, profesor de bioingeniería, ingeniería mecánica, y ciencia de los materiales, en la Universidad de California, San Diego. “Esperábamos que con una sonda más larga, podemos desarrollar un chip de detección de SNP específico de secuencia, fiable. De hecho, hemos logrado un alto nivel de sensibilidad y especificidad con la tecnología que hemos desarrollado”. “Estamos en la vanguardia del desarrollo de un

método digital rápido y de bajo costo para detectar mutaciones genéticas en alta resolución, en la escala de un único cambio de nucleótido en una secuencia de ácido nucleico”, dijo el Dr. Lal. La sonda biosensora de SNP se describe en detalle en la edición digital del 13 de junio de 2016 de la revista Proceedings of the [U.S.] National Academy of Sciences. Imagen: El chip biosensor – que consiste en una sonda de ADN de doble cadena incrustada en un transistor de grafeno – detecta electrónicamente los SNP de ADN (Fotografía cortesía de la Universidad de California, San Diego).

Detector de coagulación ayudar a controlar riesgo de apoplejía n analizador para medir lo coagulabilidad de la sangre tiene la sensibilidad para detectar la hipercoagulabilidad asociada con el riesgo de accidente cerebrovascular en los individuos que no tienen fibrilación auricular. La fibrilación auricular (FA) provoca un ritmo cardíaco irregular y a veces rápido, y es un factor de riesgo común para el accidente cerebrovascular. Se ha inventado una coagulometría dieléctrica novedosa en sangre (DBCM) para la evaluación de la coagulabilidad; la DBCM mide el cambio temporal en toda la permisividad dieléctrica de la

sangre, lo que representa la agregación de los glóbulos rojos. La puntuación CHADS2 o la puntuación predictiva CHA2DS2-Vasc son ampliamente utilizados para la estratificación del riesgo de los accidentes cerebrovasculares y son utilizados para guiar la terapia de anticoagulación en los pacientes con FA. Los científicos de la Universidad Médica y Dental de Tokio (Tokio, Japón; www.tmd.ac.jp) y sus colegas analizaron 133 muestras de sangre que fueron extraídas de individuos con o sin la administración de heparina. Se realizó un análisis DBCM para

encontrar el índice de coagulación adecuado, y para delinear su intervalo de medición mediante la adición del factor recombinante tisular humano (FT) o heparina. A continuación, se evaluó la coagulabilidad mediante ensayos DBCM y de coagulación convencional, en 84 individuos sin FA, que fueron divididos en tres grupos según su puntuación CHADS2. Otros 17 pacientes que recibieron warfarina también fueron evaluados por DBCM para evaluar el efecto de los anticoagulantes. El estudio fue publicado el 8 de junio de 2016 en la revista Public Library of Sciences ONE. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Pruebas de fosfolipasa A2 asociada a lipoproteína diagnostican enfermedades cardiacas a medición del colesterol de lipoproteínas de baja densidad (LDL-C) o colesterol de lipoproteínas de no alta densidad (colesterol no HDLC) es actualmente el pilar para evaluar el riesgo de la aterosclerosis que conduce a la enfermedad cardiovascular. Existe una necesidad de otros biomarcadores de riesgo porque no todo el mundo con enfermedad cardiovascular (ECV) tiene elevado de LDL-C o el colesterol no HDL-C, e incluso si estos marcadores están elevados y el tratamiento es agresivo, todavía puede haber riesgo residual que no se puede explicar. Una científica senior de medicina del laboratorio de la Clínica Mayo (Rochester, MN, EUA; www.mayo.edu) ha examinado un componente importante de la atero-trombogénesis, que es la inflamación, y los biomarcadores circulantes elevados de inflamación que se pueden utilizar para identificar a los individuos con mayor riesgo de enfermedades cardiovasculares. Uno de esos marcadores es la fosfolipasa A2 asociada a lipoproteína (Lp-PLA2), una enzima expresada por los macrófagos en el interior de las placas ateroscleróticas que circula unida a las lipoproteínas. A diferencia de otros marca- Imagen: El kit de análisis de actividad PLAC para medir la fosfolipasa A2 asociadores biológicos de la inflamación, la Lp-PLA2 no es un reactante de fase da a lipoproteína (Fotografía cortesía de diaDexus). aguda, algo que lo hace que sea más específico de la inflamación vascular, asociada a la enfermedad cardiovascular. La Dirección de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA, Silver Springs, MD, EUA; www.fda.gov) ha aprobado dos ensayos para la LpPLA2 que llevan la marca comercial de prueba PLAC (diaDexus, Sur de San Francisco, CA, EUA; www.diadexus.com). Uno mide la concentración de la proteína y el otro mide la actividad enzimática de la proteína. El ensayo de la concentración es un método de ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA), mientras que el ensayo de actividad es un análisis espectrofotométrico que se procesa en los analizadores de química automatizada. Mientras que los dos ensayos miden la misma proteína, los coeficientes de correlación entre ellos, de manera algo sorprendente, tienen un intervalo de 0,3 a 0,6. Los técnicos de laboratorio y los médicos también deben ser conscientes de varias otras diferencias entre los ensayos. El primero es evidente a partir de sus respectivas poblaciones de pacientes aprobadas: el ensayo de concentración está aprobado para la enfermedad coronaria del corazón y accidente cerebrovascular, mientras que el ensayo de actividad está aprobado sólo para la enfermedad cardíaca coronaria. El último y quizás lo más importante, los resultados de la prueba de ELISA pueden ser dramáticamente inexactos como resultado de las condiciones de manipulación pre-analíticas de la muestra. Leslie J. Donato, PhD, DABCC, co-directora de medicina de laboratorio cardiovascular y co-directora del laboratorio clínico del hospital y del laboratorio de puntos de atención en la Clínica Mayo y autora de la revisión, señaló que el ensayo de actividad no muestra ningún efecto pre-analítico, por el almacenamiento. La única vulnerabilidad analítica del ensayo de actividad es una disminución pequeña pero progresiva de la actividad que se presenta durante la vida de cada lote. El director del laboratorio puede controlar fácilmente esta pérdida de señal utilizando métricas de control de calidad de laTan pequeño, boratorio. Dada la variabilidad preanalítica que existe con el ensayo de concentración, su grupo ha optan inteligente, tan rápido… tado por utilizar el ensayo de actividad en la medición de la Lp-PLA2. El estudio fue publicado en la edición de julio 2016 de la revista Clinical LaboraEl Sistema de Tecnología Dual tory News.

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El i15 procesa un panel flexible de pruebas a partir de una única plataforma con aspiración de muestras y medición a temperatura constante. Proporciona resultados en 1 minuto después de la aspiración de muestra, y es adecuado para una amplia gama de aplicaciones.

El Proxima permite el muestreo de sangre cerrado mediante el uso de sensores desechables en los cuales la sangre del paciente se mide en un panel de analitos. Se opera mediante una interfaz de pantalla táctil, que permite obtener mediciones sin abandonar la cama del paciente.

El Rapidlab 1200 ofrece un menú integral de pruebas para hacer frente a las necesidades de pruebas de cuidado crítico. Su capacidad de micromuestra permite realizar el análisis de muestras pequeñas sin comprometer la exactitud, por lo que es ideal para la monitorización en la UCIN.

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Validan método para determinación de fructosa en plasma seminal humano l semen humano es la secreción de los órganos reproductores masculinos, que contiene los espermatozoides y el plasma seminal (SP), una mezcla compleja de secreciones testiculares, prostáticas y de las glándulas accesorias que proporciona soporte bioquímico para la función del eyaculado. La evaluación de la calidad del semen humano y su capacidad de fertilización, por tanto, no sólo requiere un análisis cualitativo y cuantitativo de los espermatozoides, sino también los análisis bioquímicos del plasma seminal. Se ha desarrollado una determinación fotométrica rápida, simple, específica y cuantitativa de la fructosa seminal mediante la hexoquinasa y la fosfoglucosa-isomerasa usando un analizador semi-automatizado bicromático. Los bioquímicos médicos en el Hospital Universitario Merkur (Zagreb, Croacia; www.mse.mef. unizg.hr) utilizaron muestras de semen sobrantes

de los hombres a quienes les habían practicado una evaluación de rutina de la fertilidad con edades comprendidas entre 28 a 41 años, con los parámetros seminales normales en su estudio. Ningún material de control de calidad comercial estaba disponible, por lo que se usaron dos acumulados de plasma seminal, para el control de calidad interno, obteniéndose coeficientes de variación de 0,85% y 1,06% para los valores normales y patológicos, respectivamente. El objetivo de este estudio fue validar el desempeño del método enzimático para la fructosa en plasma seminal en un analizador AU400 (BC) (Olympus Mishima, Sunto-gun, Japón; www. olympus-global.com), así como para desafiar el desempeño del método en cuanto a calidad. La determinación de la fructosa en el plasma seminal por el método enzimático se lleva a cabo in-

Hacemos multiplex en una plataforma automática para pruebas moleculares más rápidas y más fáciles Trombofilia Genotipifica el 99% de todos los tipos de VPH

Identifica factores de alto riesgo para la trombosis venosa y el aborto recurrente

Cribado del VPH de alto riesgo

MTB Resistente a los medicamentos

Hace el cribado de los 15 tipos de alto riesgo

Genotipifica la resistencia a la RIF/NIH para evitar tratamientos ineficientes

Genotipificación del VPH

Cribado para las ETS

Genotipificación del VHC

Examina 11 ETS comunes

Genotipos 1a, 1b 2-6 y la mutación Q80K para optimizar el tratamiento

directamente a través de la glucosa. Después de la fosforilación de la fructosa con hexoquinasa, la fructosa 6-fosfato resultante se convierte en glucosa 6fosfato a través de la fosfoglucosa isomerasa. La glucosa 6-fosfato se oxida adicionalmente por la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, obteniéndose 6-fosfogluconato y nicotinamida adenina dinucleótido (NADH). La cantidad de NADH formado es estequiométrica con respecto a la cantidad de D-fructosa y D-glucosa, por lo que la velocidad medida de la formación de NADH refleja cuantitativamente la cantidad de glucosa y es equivalente a la cantidad de fructosa en el plasma seminal. Los investigadores inicialmente compararon 43 muestras de plasma seminal en toda la gama de linealidad de 0,37 a 24,7 mmol/L. La fructosa también se midió en 20 muestras de plasma seminal obtenidas de voluntarios sanos sin problemas de fertilidad, para confirmar los intervalos de referencia, previamente establecidos, de 8,3 a 27,8 mmol/L. Todas las muestras dieron mediciones dentro del intervalo de referencia y los resultados fueron de 8,8 a la 23,6 mmol/L. El estudio fue publicado en la edición de julio de 2016 de la revista Journal of Applied Laboratory Medicine. Imagen: El analizador de química clínica, totalmente automatizado, de acceso directo, UA 400 (Fotografía cortesía de Olympus).

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Evalúan detección molecular de infección del torrente sanguíneo l hemocultivo es el estándar de oro actual para la detección de bacterias en la sangre, pero requiere, por lo menos, 24 a 48 horas y ha obtenido una sensibilidad limitada, si se toma durante el tratamiento antibiótico de los pacientes. La sepsis grave es la sepsis asociada con la disfunción orgánica, la hipoperfusión o la hipotensión. El diagnóstico rápido y el tratamiento antimicrobiano apropiado son de gran importancia para disminuir la morbilidad y la mortalidad en los pacientes con infecciones del torrente sanguíneo (BSI). La sepsis, la sepsis severa y el shock séptico, se asocian con una alta mortalidad, que van desde 20% a 60%, dependiendo de la gravedad y de la enfermedad subyacente. El shock séptico es la persistencia de hipotensión y anomalías en la perfusión pesar de la terapia de reanimación adecuada. Los científicos dirigidos por los que están en el Centro Médico de la Universidad VU (Ámsterdam, Holanda; www.vumc.com) realizaron un estudio multicéntrico prospectivo para evaluar clínicamente la aplicación de una prueba molecular universal, comercial, directamente en sangre total. En total 236 muestras de 166 pacientes con sospecha de sepsis fueron incluidos en el estudio. Los resultados de las pruebas moleculares fueron comparados con el hemocultivo, el actual estándar de oro para la detección de las BSI. Debido a que los hemocultivos pueden dar resultados falsos negativos, el equipo realizó un análisis adicional para interpretar la probabilidad de infección del torrente sanguíneo mediante el uso de una evaluación basada en el diagnóstico clínico, otras pruebas de diagnóstico y los parámetros de laboratorio. La sangre fresca con EDTA fue dividida en dos alícuotas de 1 mL y procesada de acuerdo con el protocolo SepsiTest (PCR-ST, Molzym, Bremen, Alemania; www.molzym.com). El ensayo SepsiTest degrada selectivamente el ADN humano, antes del aislamiento del ADN microbiano. SepsiTest puede proporcionar un resultado positivo o negativo en un tiempo de cuatro horas y necesita la secuenciación adicional para identificar el microorganismo, lo cual se demora otras dos o tres horas, si la secuenciación está disponible en el laboratorio. La interpretación clínica de los resultados definió que el organismo detectado resultó ser un contaminante en 22/43 (51,2%) de los cultivos positivos de sangre y en 21/47 de los resultados positivos de la PCR-ST (44,7%). La exclusión de estos contaminantes resultó en una sensibilidad y la especificidad para la PCR-ST de 66,7% y 94,4%, respectivamente. De las 36 muestras clínicamente relevantes, se deAÑOS tectaron 11 BSI con ambas técnicas, 15 BSI fueron detectadas con PCR-ST solamente y 10 con hemocultivo, solamente. Por lo tanto, en este estudio, SepsiTest detectó un 71% adicional de BSI en comparación con los hemocultivos únicamente. La maSu dominio en volumetría de precisión de líquidos durante más de 50 años yoría de los microorganismos detectados fueron esle ha permitido a Socorex contribuir con el éxito de muchos científicos, tafilococos, tanto en el hemocultivo como en la generación tras generación. PCR-ST. Los autores concluyeron que, en general, los reElija entre una amplia gama de instrumentos manuales y electrónicos altamente sultados de PCR-ST pueden influir en la administraconfiables, tales como micropipetas, dispensadores y dispensadores repetitivos ción de la terapia antimicrobiana adecuada y dismipara todas las aplicaciones de dosificación. nuir la morbilidad y mortalidad de los pacientes. Una línea de productos que tiene más para ofrecer. Aunque la PCR SepsiTest, directamente en la sangre, es una técnica prometedora, se debe aumentar el volumen de entrada de la sangre para reducir el error en el muestreo, y tener un procedimiento más rápido para identificar el microorganismo es de importancia. El estudio fue publicado el 30 de junio de 2016, en la revista BMC Infectious Diseases.

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Imagen: La prueba SepsiTest permite el análisis molecular confiable de muestras de sangre total para detectar la bacteriemia y la fungemia (Fotografía cortesía de Molzym)

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Métodos de actividad de fosfatasa alcalina ósea en suero a fosfatasa alcalina ósea en suero es un marcador de la formación ósea y del metabolismo; sin embargo, los métodos existentes para su medición tienen sus limitaciones y no se ha determinado su exactitud. Se han utilizado las isoenzimas de la fosfatasa alcalina (ALP) como biomarcadores para la enfermedad hepática y ósea en la clínica y la medición de la actividad de las isoenzimas de la ALP, en el suero, tiene un alto valor clínico para el diagnóstico diferencial y el análisis de algunas enfermedades. Los científicos de la Facultad de Medicina de la Universidad de Hamamatsu (Japón; www.hamamed.ac.jp), midieron la actividad de la ALP sérica ósea en 127 pacientes con enfermedad hepática utilizando dos métodos: la electroforesis y el inmunoensayo enzimático quimioluminiscente (CLEIA). De estos, 52 pacientes tenían cirrosis biliar primaria, ocho sufrían de cirrosis colestásica, 13 tenían enfermedad hepática colestásica, y el resto fueron diagnosticados con otras enfermedades del hígado. El equipo utilizado para el análisis de isoenzimas de fosfatasa alcalina, fue la electroforesis en geles de agarosa Quick Gel ALP con el reactivo Quick ALP (Helena Labs, Beaumont, TX, EUA; www.helena. com). Con el fin de separar las ALP hepáticas y de tipo óseo, completamente, las muestras fueron tra-

tadas previamente con neuraminidasa. Además, las muestras fueron pre-tratados con proteasa para separar el tipo óseo y el intestinal. Las bandas fueron examinadas por densitometría a una longitud de onda de 570 nm. La actividad de las isoenzimas de ALP se expresó en U/L y como un porcentaje de la actividad total de la ALP. Se usó un ensayo inmunoenzimático de un solo paso en este estudio. Se utilizó, un dispositivo de inmunoensayo enzimático de quimioluminiscencia, conocido como un Inmunoanalizador Access (Beckman Coulter, Brea, CA, EUA; www.beckman coulter.com), y un kit especial para la ALP de tipo óseo (BAP) (también de Beckman Coulter). Se realizaron los exámenes bioquímicos básicos de las muestras de suero, utilizando un analizador de química (Labospect 008; Hitachi Ltd., Tokio, Japón; www.hitachi.com). Los investigadores encontraron que cuando los valores de la isoenzimas ALP3 estaban altos (% de la actividad de la isoenzima de tipo óseo, como un porcentaje de la actividad total de la ALP), los dos métodos tenían una buena correlación Sin embargo, con una disminución en los niveles porcentuales de la ALP3, el coeficiente de correlación (R) también disminuyó. A partir de la ALP3 (%) de menos de 23%, los valores de R disminuían mar-

cadamente a menos de 0,5. Cinco valores atípicos mostraron niveles bajos de actividad de ALP3 (%). Además, en lo que respecta al género, hubo diferencias significativas en el colesterol total (TC), la γ-glutamiltransferasa (γ-GTP), y los niveles de ALP y de ALP3(%). El estudio fue publicado el 9 de junio de 2016, en la revista Clinica Chimica Acta. Imagen: El sistema de inmunoensayo Access 2 (Fotografía cortesía de Beckman Coulter).

Desarrollan ensayo LAMP para detectar lombrices en heces y orina l Strongyloides stercoralis, comúnmente conocido como lombriz, es un nematodo distribuido por todo el mundo, pero sobre todo endémico en las regiones tropicales y subtropicales y es el agente causal, principal, de la estrongiloidiasis humana. El diagnóstico de estrongiloidiasis se sospecha cuando se observan los signos y síntomas clínicos, y los hallazgos como eosinofilia o serológicos, pero el diagnóstico definitivo se lleva a cabo mediante el examen parasitológico de muestras de heces que permiten la identificación morfo-

lógica de S. stercoralis, incluyendo el examen directo en solución salina, el método de sedimentación espontánea y la centrifugación. Científicos de la Universidad de Salamanca (Salamanca, España; www.usal.es) y sus colegas, desarrollaron un ensayo molecular usando la metodología de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) como un método simple, sensible y robusto para la detección del ADN de S. venezuelensis en un modelo de infección en roedores, establecida, en muestras de heces y de orina. El ensayo LAMP también fue

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evaluado con éxito en muestras de heces de pacientes. El ensayo LAMP (Strong-LAMP) es una herramienta molecular útil en un modelo de infección de estrongiloidiasis y podría ser una prueba de diagnóstico potencial de campo, amigable, en un entorno clínico, después de una validación adicional. Las muestras de heces fueron obtenidas de 12 pacientes que mostraron niveles significativos de inmunoglobulina E (IgE), eosinofilia u otros síntomas sugestivos de enfermedad. Las muestras de heces fueron examinadas, después de la llegada, por técnicos calificados de laboratorio. Once de estas 12 muestras de heces fueron examinadas por diferentes métodos parasitológicos como pruebas de cribado para estrongiloidiasis, incluyendo el examen microscópico (MOE) para detectar la presencia de larvas rabditiformes en frotis fecales directos, cultivo en placa de agar (APC) o método de cultivo en papel de filtro de Harada-Mori (HMM). El ADN se extrajo de las muestras de heces humanas y fue analizado por una reacción en cadena de polimerasa en tiempo real optimizada. Para evaluar la capacidad del ensayo LAMP, diseñado para amplificar el ADN de S. venezuelensis en muestras reales, el equipo utilizó el ADN extraído de las heces agrupadas y de las muestras de orina tomadas, todos los días, de cada grupo de ratas infectadas experimentalmente con diferentes dosis. Para comprobar si el ensayo LAMP diseñado, también fue capaz de amplificar el ADN de S. stercoralis, en muestras clínicas, utilizaron las muestras de heces de los pacientes incluidos en el estudio. El estudio fue publicado el 14 de julio de 2016, en la revista Public Library of Science Neglected Tropical Diseases. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Desarrollan análisis micro LC-MS/MS de alta sensibilidad para estradiol en suero xisten fuertes demandas para medir con exactitud el estradiol (E2) a bajas concentraciones, de menos de 20 pg/mL, en las mujeres posmenopáusicas, hombres, pacientes pediátricos y pacientes que reciben tratamiento contra el cáncer de mama. Los inmunoensayos automatizados son las técnicas más utilizadas para la medición de E2 en los laboratorios clínicos; sin embargo, sufren de una mala exactitud y precisión a bajas concentraciones fisiológicas de E2. Se ha desarrollado un método de alta sensibilidad, sin derivar, utilizando la cromatografía micro líquida – espectrometría de masas líquida micro (LCMS/MS), para medir de forma fiable las concentraciones de E2 por debajo de 5 pg/mL mediante el uso de un volumen de muestra bajo. Los científicos de la Universidad de

Chicago (Illinois, EUA, www. uchicago.edu) utilizaron muestras para la comparación de método usando muestras sobrantes recuperadas del laboratorio de química clínica. Se mezcló un total de 290 L de muestra con estándar interno (EI), E2-d4, y se extrajo con una mezcla de hexano/ acetato de etilo (90/10) (v/v). Después de la extracción, la muestra se separó mediante un sistema de micro LC 200 de Eksigent Ekspert, con una velocidad de flujo de 35 L/min en un tiempo total de procesamiento de 3,5 minutos y se detectó a través de un espectrómetro de masas QTRAP 6500 (Sciex, Framingham, MA, EUA; www.sciex.com) en un modo negativo usando transiciones: 271/145 (cuantificador) y 271/143 (calificador). En este método, era crucial usar columnas de HPLC con estabilidad a un pH> 10.

Secuenciación de próxima generación diagnostica infecciones cerebrales e ha investigado la viabilidad de los métodos de secuenciación del microbioma de próxima generación (NGS) para el diagnóstico de los trastornos infecciosos en el cerebro o en las biopsias de médula espinal en pacientes con sospecha de infecciones del sistema nervioso central (SNC). Esta tecnología NGS puede proporcionar una vista del transcriptoma del tejido del huésped, así como genomas de captura microbianos tales como bacterias, hongos y virus que residen en el nicho de tejido. La secuenciación profunda del ADN total o del ácido ribonucleico (ARN) ofrece un método imparcial que puede detectar incluso los componentes raros del microbioma. Un equipo de científicos de la Universidad Johns Hopkins (Baltimore, MD, EUA; www.jhu.edu) realizó un estudio piloto prospectivo, y aplicó la NGS en combinación con una nueva línea de desarrollo de análisis computacional para detectar la presencia de microbios patógenos en biopsias del cerebro o de la médula espinal, de 10 pacientes con problemas neurológicos que indican una posible infección, pero para los cuales los estudios clínicos y microbiológicos convencionales dieron resultados negativos o no concluyentes. El equipo encontró que la secuenciación directa del ADN y el ARN de las biopsias de tejido cerebral generó

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entre 8,3 millones a 29.1 millones de secuencias de lecturas por muestra, lo que identificó exitosamente, con alto grado de confianza, el agente infeccioso en tres pacientes en los que las técnicas de validación confirmaron los patógenos identificados por la NGS. Aunque la NGS no fue capaz de identificar con precisión los agentes infecciosos en los casos restantes, contribuyó a la comprensión de los procesos neuropatológicos en otros cinco, lo que demuestra el poder de la secuenciación imparcial a gran escala como una herramienta diagnóstica. Los resultados clínicos fueron consistentes con los hallazgos producidos por la NGS sobre la presencia o ausencia de un proceso patógeno infeccioso en ocho de los 10 casos, y no contribuyeron en los dos restantes. Carlos Pardo-Villamizar, MD, profesor asociado de neurología, autor principal del estudio, dijo: “Mediante la incorporación de técnicas de secuenciación genética moderna en el diagnóstico de patología, hemos sido capaces de investigar la posible presencia de la infección en 10 individuos y encontramos explicaciones adecuadas de problemas clínicos en ocho de cada 10 casos de pacientes examinados en este estudio”. El estudio fue publicado el 13 de junio de 2016, en la revista Neurology: Neuroimmunology & Neuroinflammation.

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Imagen: El sistema de cromatografía micro líquida (LC) Eksigent Ekspert 200 (Foto cortesía de Sciex).

Las mediciones de E2 por LCMS / MS se compararon con el inmunoensayo automatizado Cobas 8000 E2 II (Roche Diagnostics, Basilea, Suiza; www.roche. com) utilizando 42 muestras de plasma recogidas en tubos de heparina de litio y con un radioinmunoensayo indirecto desarrollada en el laboratorio usando 38 muestras de suero recogidas en tubos de suero sin aditivo. El método LC-MS/MS mostró una buena correlación con la prueba E2 RIA y una modesta correlación con el inmunoensayo automatizado E2 Roche Cobas. El estudio de validación demostró intervalos lineales amplios que os-

cilaban desde 3,0 hasta 820 pg/mL. La precisión total fue inferior al 15% en todos los niveles de control de calidad (QC), y el límite de cuantificación (LC) fue de 3,0 pg/mL. El estudio fue publicado en la edición de julio 2016 de la revista Journal of Applied Laboratory Medicine.

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Exactitud de prueba rápida para TB comprometida por diversidad de micobacterias n todo el mundo, la Mycobacterium tuberculosis (Mtb) es responsable de la gran mayoría de los casos de tuberculosis (TB); Sin embargo, hay varias otras especies de micobacterias estrechamente relacionadas que causan la tuberculosis, todas parte del complejo de Mycobacterium tuberculosis (MTBC). El diagnóstico para una rápida confirmación de los cultivos líquidos presuntamente positivos para la bacteria M. tuberculosis, se basa en la detección del antígeno MPT64 y se usan en muchos laboratorios de diagnóstico de la tuberculosis en todo el mundo. No se ha evaluado adecuadamente el desempeño diagnóstico de estas pruebas en África Occidental, en regiones geográficamente restringidas, donde la tuberculosis es causada únicamente por el Mycobacterium africanum (Maf 1 y 2) y por linajes de M. tuberculosis. Un equipo internacional de científicos dirigidos por aquellos de la Unidad de Consejo de Investigación Médica (MRC), (Serrekunda, Gambia; www.mrc.gm), recogieron muestras de esputo prospectivamente a partir de individuos con sospecha de TB, entre abril y octubre de 2014 y todas fueron examinadas inicialmente para detectar la presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes (BA-

AR) mediante microscopía con auramina. Los investigadores compararon la abundancia de producto genético, mpt64, en muestras de esputo de los pacientes con tuberculosis pulmonar, sin tratar, causadas por Maf 2, la cepa de Mtb, común en Gambia. Los científicos luego analizaron prospectivamente los aislados de 173 pacientes con una de las pruebas de diagnóstico rápido, el kit de análisis para identificación BD MGIT TBc (Becton Dickinson Microbiology Systems, Sparks, MD EUA; www. bd.com). Repitieron el mismo análisis con todas las muestras que habían dado un resultado negativo en el día cero y un conjunto aleatorio de aquellas que habían dado un resultado positivo utilizando la prueba Rápida SD Bioline Ag MPT64 (Standard Diagnostics, Yongin, República de Corea; www. standardia.com). Los científicos observaron diferencias significativas entre las dos pruebas. La expresión génica del gen mpt64 se realizó utilizando la reacción en cadena de la polimerasa, multiplex, en tiempo real (qPCR). Los autores indicaron que las pruebas MPT64 deben ser utilizadas con precaución en los entornos donde Maf 2 es común. Sin embargo, también reconocen que, dado el costo relativamente bajo, los conocimientos técnicos limitados y los tiempos de

respuesta más cortos, asociados con el uso de pruebas rápidas de especiación en comparación con los métodos de especiación alternativos, las pruebas rápidas MPT64 seguirán siendo probablemente una de las opciones preferidas para el diagnóstico oportuno de la sospecha de TB a pesar de la posibilidad de resultados falsos negativos, y sugieren que un resultado negativo MPT64, requeriría la confirmación mediante un método alternativo. El estudio fue publicado el 7 de julio de 2016, en la revista PLoS Neglected Tropical Diseases. Imagen: La prueba de identificación, rápida, inmunocromatográfica, Bioline TBAg MPT64 para el complejo M. tuberculosis (Fotografía cortesía de Standard Diagnostics).

Sistema de análisis para monitorización indolora de medicamentos n sistema de toma de muestras y análisis con microagujas demostró medir con exactitud los niveles de la droga vancomicina en el fluido intersticial, produciendo resultados comparables a los obtenidos mediante un simple análisis de sangre. La monitorización de medicamentos terapéuticos requiere típicamente la extracción de sangre, de los pacientes, de una manera incómoda y, a menudo, dolorosa. Un ejemplo excelente es la monitorización de la droga, vancomicina, que, debido a la posibilidad de efectos secundarios tóxicos, potencialmente mortales, puede reque-

rir tres a cuatro extracciones de sangre por día. Como alternativa, los investigadores de la Universidad de la Columbia Británica (Vancouver, BC, Canadá; www.ubc.ca) y sus colegas, en el Instituto Paul Scherrer (Villigen, Suiza; www.psi.ch), desarrollaron un método indoloro y mínimamente invasivo, utilizando microagujas huecas, para extraer volúmenes extremadamente pequeños (menos de un nanolitro) de fluido intersticial con el fin medir las concentraciones del fármaco. Este método se justifica por el hecho de que el plasma y el líquido intersticial son muy similares. Esta similitud existe porque el

Minimice los errores preanalíticos… Optimice el tiempo de respuesta…

• Operación libre de errores en la estación de flebotomía preanalítica • Etiquetado auxiliar para muestras de orina y heces • Modo de bypass para tubos precargados • Permite el uso de los formatos de códigos de barras comúnmente disponibles • Un tiempo de respuesta más rápido

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agua, iones y los solutos pequeños se intercambian continuamente entre el plasma y los fluidos intersticiales, a través de las paredes de los capilares. El nuevo sistema consistió en un pequeño parche, delgado, que fue presionado contra el brazo de un paciente durante el tratamiento médico y midió el nivel del medicamento sin dolor sin necesidad de extraer la sangre. La pequeña proyección, similar a una aguja, tenía un largo de menos de la mitad de un milímetro, parecía un cono hueco, y no perforaba la piel como una aguja hipodérmica estándar. El lumen interno de la microaguja se funcionalizó para ser utilizado como un micro-reactor durante la recogida de la muestras para atrapar y unir el medicamento objetivo durante la extracción, sin requisitos de transferencia de muestra. Un dispositivo optofluídico fue integrado con esta microaguja para cuantificar rápidamente los medicamentos con alta sensibilidad utilizando un esquema de absorbancia sencillo. La vancomicina se detecta actualmente mediante el uso de volúmenes que oscilan entre 50-100 microlitros con un límite de detección de 1,35 micromoles. El sistema de biosensor de microagujasoptofluídico demostró ser capaz de detectar la vancomicina con un volumen de muestra de 0,6 nanolitros y un límite de detección de menos de 100 nanomoles. “Este es probablemente uno de los volúmenes de extracción, más pequeño, jamás registrados para un análisis médicamente relevante”, dijo el autor contribuyente, el Dr. Urs Häfeli, profesor asociado de ciencias farmacéuticas en la Universidad de la Columbia Británica. Los detalles del sistema de toma de muestras y análisis de vancomicina fueron publicados en la edición en línea de julio 6, 2016, de la revista Scientific Reports. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Consultas de atención primaria son útiles para detección temprana cáncer de piel egún una nueva investigación, la detección de cáncer de piel realizadas por los médicos de atención primaria (PCP) durante las consultas de rutina en el consultorio, mejora la detección de melanomas potencialmente mortales y los encuentran en las primeras etapas. Los resultados fueron presentados en la 52° congreso anual de la Sociedad Americana de Oncología Clínica (ASCO) (3-7 de junio de 2016, Chicago, IL, EUA; http://am.asco.org). “Nuestros hallazgos sugieren que la detección a través de los PCP es una manera eficaz de mejorar la detección precoz del melanoma, lo que potencialmente podría salvar vidas”, dijo la autora principal del estudio, Laura Ferris, MD, PhD, profesora asociada de la Facultad de Medicina de la Universidad de Pittsburgh (Pittsburgh, PA , EUA, www.medschool.pitt.edu) de las Facultades de Ciencias de la Salud de la Universidad de Pittsburgh (UPMC; Pittsburgh, PA, EUA; www.upmc.com/pages/default.aspx). La detección del cáncer de piel es uno de los pasos más importantes para la detección y el tratamiento precoces. Por lo general, a los pacientes les hacen exámenes de la piel cuando consultan a un

dermatólogo. El objetivo de la nueva iniciativa de cribado de la UPMC, que siguió el modelo de un programa alemán prometedor, era mejorar la detección, haciendo que sea más fácil para los pacientes hacerse la prueba, durante las consultas rutinarias con sus médicos de cabecera. Los médicos primarios han completado la formación sobre cómo reconocer los melanomas y se les pidió que ofrecieran el cribado anual durante las consultas a todos los pacientes de 35 años o más. En 2014, durante el primer año del programa, el 15% de los 333,788 pacientes UPMC elegibles, fueron seleccionados. En promedio, los melanomas detectados en el grupo a quienes se les hizo la detección durante una consulta al PCP eran casi dos veces más delgados que los detectados en el grupo que no fue examinado por un PCP. Los melanomas delgados tienen un mejor pronóstico que los más gruesos, más avanzados, por lo que los nuevos hallazgos sugieren que el cribado por los PCP puede encontrar melanomas en una etapa temprana y más tratable. Además, sólo el 5% de las personas en el grupo de cribado frente al 20% del grupo sin cribar, tuvo melanomas de un espesor superior a 1 mm, que son

más propensos a hacer metástasis y requieren una biopsia de un ganglio linfático cercano. Otro hallazgo importante fue que casi la mitad de los pacientes examinados eran hombres. Los hombres son más propensos a enfermarse y morir de melanoma que las mujeres, pero han sido insuficientemente representados en otros exámenes de cáncer de piel publicados hasta la fecha. “Es emocionante que nuestro método mejora la detección en esta población, especialmente vulnerable”, dijo la doctora Ferris. Imagen: La capacidad de las células cancerosas para moverse y propagarse depende de las estructuras básicas ricas en actina tales como los podosomas (amarillo) que se muestran aquí en las células de melanoma. También se muestran los núcleos celulares (azul), la actina (rojo), y un regulador de actina (verde) (Fotografía cortesía de Julio C. Valencia y Daniel Mietchken, vía Wikimedia).

Prueba de secuenciación de nueva generación para microorganismos en heridas a tecnología de secuenciación de ADN es la base de un nuevo servicio de diagnóstico que pretende identificar todas las bacterias, hongos y parásitos, así como seleccionar los virus en una herida o un área infectada. La prueba “Wound~ Seq”, que se realiza en muestras de frotis, tomadas de la zona afectada, está disponible a través de Granger Diagnostics (Richmond, VA, EUA; www.grangerdiagnostics.com). Las muestras recogidas por el médico se envían al laboratorio de Granger, y los resultados se devuel-

ven normalmente en un plazo de 48 horas. El análisis Wound~ Seq utiliza una tecnología de secuenciación de ADN de vanguardia para identificar todos los microorganismos presentes en la herida y no se basa en los métodos de cultivo. Es la segunda prueba de Atención de Próxima-Generación, en la línea de producción de Granger Diagnostics, después del ensayo Gynecologene, una prueba para la vaginosis bacteriana que incorpora esta tecnología de secuenciación de ADN. El Dr. David G. Bostwick, director médico de

Granger Diagnostics, dijo: “Estamos muy contentos de poner a disposición, por primera vez, nuestra prueba clínicamente significativa, la prueba Wound~ Seq, que utiliza secuenciación de próxima generación del microbioma de la piel. Los estudios previos han demostrado que los cierres de heridas que se basan en pruebas con asistencia genética, son mucho más rápidas, disminuyen el dolor y el sufrimiento, y da como resultado un ahorro de costos. Es la promesa de la medicina personalizada que se cumple ahora”.

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Prueba de campo para Zika combina componentes de PCR en una sola unidad na prueba prototipo de campo, basada en la PCR, para la detección del virus Zika (ZIKV) incorpora todos los componentes necesarios y proporciona resultados exactos en sólo 40 minutos. Los diagnósticos rápidos y confiables para el ZIKV son vitales porque los individuos, infectados por el ZIKV, no muestran síntomas o muestran síntomas inespecíficos, similares a otras infecciones virales. Puesto que los inmunoensayos carecen de sensibilidad y selectividad adecuada y no son capaces de identificar el estado activo de la

infección, el diagnóstico molecular es un medio eficaz para detectar el ZIKV, poco después de la infección y durante todo el embarazo. Investigadores de la Universidad de Pensilvania (Filadelfia, EUA, www.upenn.edu) describieron recientemente un análisis muy sensible, de amplificación isotérmica, mediada por bucle (RTLAMP), de transcripción inversa, para la detección rápida de ZIKV. La ventaja de usar el procedimiento de RT-LAMP es que, si bien, requiere que la muestra se mantenga a una temperatura específica, no exige que se hagan ciclos a través de múltiples cambios de temperatura precisos, como en la RT-PCR. Por otro lado, la RTLAMP requiere cebadores de ADN más altamente especializados que los requeridos por la RT-PCR. Para tratar el problema de los cebadores, los investigadores identificaron regiones altamente conservadas del genoma del virus Zika que eran divergentes de otros patógenos conocidos. Entonces diseñaron cebadores apropiados para reconocer esta secuencia. El equipo de investigadores diseñó un sistema de bajo costo, para los puntos de atención, que consistía en un casete de diagnóstico y un procesador. El casete aísla, concentra y purifica los ácidos nucleicos a partir de muestras de saliva de un paciente y después lleva a cabo la amplificación enzimática. Los resultados del análisis se indican mediante el cambio en el color de un colorante, que fue inspeccionado visualmente. Para el control térmico del casete, utilizaron una taza calentada químicamente - adaptada de los kits de raciones militares - sin necesidad de energía eléctrica. Los investigadores demostraron la utilidad de este nuevo sistema de diagnóstico POC mediante la detección del ZIKV en muestras orales con sensibilidad de cinco unidades formadoras de placas (UFP), en menos de 40 minutos. Esta tecnología, de bajo costo (se calcula que cuesta alrededor de dos dólares por dispositivo de prueba) es particularmente adecuada para entornos de escasos recursos, donde los laboratorios centralizados, los fondos y el personal capacitado son escasos, y para el uso en consultorios médicos, clínicas y en la casa. La prueba de campo ZIKV se describe en detalle en la edición digital, de junio 16 de 2016, de la revista Analytical Chemistry. Imagen: El prototipo de una prueba genética, de bajo costo, rápida, para el virus Zika. El paciente proporciona una muestra de saliva, y la aparición de un color azul en la tapa del dispositivo indica la presencia del virus (Fotografía cortesía de la Universidad de Pensilvania).

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Editado por Tahir Pillay MBChB, PhD, FRCPath(Lon), FCPath(SA) Enviar noticias a: Tahir Pillay MBChB, PhD, Head, Dept of Chemical Pathology, Faculty of Health Sciences, University of Pretoria, Private Bag Bag x323, Arcadia, 0007, South Africa Tel: (27) 012-319-2114; Fax: (27) 012-328-3600; Email: enews@ifcc.org

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Prof. Howard Morris de Australia, elegido Presidente de IFCC para 2018-2020 Se desempeñará como Presidente-Electo en 2017 a IFCC tiene el placer de anunciar que el Prof. Howard Morris (Adelaida - Australia) ha sido elegido como el próximo Presidente de la IFCC. El período para el Presidente electo de la IFCC, comenzará el 1 de enero de 2017 y será confirmado como Presidente de la IFCC, para el periodo comprendido entre enero de, 2018 hasta el 31 de diciembre de 2020. Felicitamos al Prof. Howard Morris, y le deseamos una fructífera cooperación para la promoción de la química clínica y la medicina de laboratorio en todo el mundo. El Prof. Howard Morris se desempeña actualmente como profesor de Ciencias Médicas, en la Universidad de Australia del Sur, realizando investigaciones y enseñando medicina de laboratorio y es científico clínico de Patología SA, el proveedor público de patología para el estado de Australia del Sur. Como Científico Clínico, proporciona asesoramiento a médicos y pacientes. Sus calificaciones incluyen un BSc (con Honores), PhD, Miembro de la Asociación Australasiana de Bioquímicos Clínicos (FAACB) y Miembro de la Facultad de Ciencias del Colegio Real de Patólogos de Australasia (FFSc) (RCPA); cuenta además con 40 años de experiencia en medicina de laboratorio. Su experiencia de trabajo incluye la provisión de servicios de rutina, la administración de un laboratorio endocrino, la administración de la investigación con 6 años como director de un instituto de investigación médica. Sus intereses de investigación incluyen la fisiopatología de la enfermedad ósea metabólica, y los marcadores biológicos de la enfermedad, incluyendo el recambio óseo a partir de los cuales ha producido 280 publicaciones revisadas por pares, logrando unas 10.000 menciones bibliográficas, con más de 4.000 menciones bibliográficas desde 2011. Le fueron adjudicados 9 millones de dólares australianos para financiar su investigación. Las actividades profesionales del Prof. Morris, incluyen ser vicepresidente (20122014) de la IFCC, contribuir al desarrollo de políticas para nuestra profesión y para la IFCC, con el fin de satisfacer las exigencias del siglo 21. Anteriormente se desempeñó en el Comité Ejecutivo de la División Científica de la IFCC, incluido el puesto de secretario; ha tenido membresías en dos grupos de trabajo de la IFCC, como fueron la Estrategia Mundial para la Diabetes Mellitus y las Asociaciones clínicos, además de haber participado en el Comité Científico Internacional, para el WorldLab XXI, Berlín, 2011. Un aspecto clave de su trabajo en la IFCC ha sido mejorar la interacción entre la medicina de laboratorio y las disciplinas clínicas y los grupos de pacientes. Dentro de la Federación de Asia y el Pacífico de Bioquímica Clínica y Medicina de Laboratorio (APFCB), el Prof. Morris se desempeñó como Presidente del Comité Científico (2002 a 2005) y fue miembro del Comité Organizador del 10° Congreso de

Oficina de la IFCC Via Carlo Farini 81, 20159 Milan, ITALY Tel: (39) 02-6680-9912 • Fax: (39) 02-6078-1846 E-mail: ifcc@ifcc.org • Web: www.ifcc.org Horario de oficina: 8.30-13.00 and 13.30-17.30 Miembros del personal: Paola Bramati, Silvia Cardinale, Silvia Colli-Lanzi

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Asia y el Pacífico de Bioquímica Clínica. A nivel nacional ha servido a la AACB, por más de 30 años, como Presidente de la Rama y Representante de Educación, Presidente o miembro del Comité Científico para los congresos científicos nacionales de la AACB y Coordinador de Talleres, Cursos de Patología Química y Simposios. Entre 1998 y 2004, el profesor Morris sirvió en el Consejo Federal de la AACB como Representante Nacional ante la IFCC y la APFCB y el editor de la revista Clinical Biochemist Reviews publicada por la AACB en conjunto con la APFCB (1994 a 2002). En 1993 fue un Conferencista de Conceptos Accontinua en pág. 58

Prof. Howard Morris

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Prof. Howard Morris de Australia, elegido presidente de IFCC para 2018-2020 viene de pág. 57 tuales de la AACB; en 2003 recibió la Medalla de Servicio Excepcional de la AACB, en 2004, la Conferencia AACB de Viajero AACB W Roman, 2009, Premio Líder de la Industria de Biociencias, Bio Innovation SA, Conferencista Plenario en Memoria de Louis Avioli de la Sociedad Americana de Huesos y Minerales, Finalista en el Premio de Excelencia en la Investigación para el Bien Público, del Premio de Australia del Sur de Excelencia en Ciencias, 2012, Conferencista Internacional de la Asociación de Bioquímicos Clínicos (Reino Unido); 2015, Premio al Logro de la Carrera de la Sociedad del Huerso y los Minerales de Australia y Nueva Zelanda.

Declaración de principios del Prof. Howard Morris La medicina de laboratorio se enfrenta a retos importantes y la IFCC requiere un Consejo Ejecutivo dinámico para proveer liderazgo para nuestra profesión. Estos retos son enfrentados por todos los actores en la prestación de asistencia sanitaria. Sin embargo, la medicina de laboratorio enfrenta problemas particulares que surgen de su percepción como un mero proveedor de servicio en lugar de un controlador para una óptima salud. A los laboratorios clínicos se les exige que asuman mayores responsabilidades para la prestación del servicio y la seguridad del paciente con presupuestos cada vez menores. Las limitaciones financieras también afectan a nuestros miembros corporativos, moderando su capacidad para colaborar en el desarrollo profesional y, al mismo tiempo, nuestra base académica está disminuyendo. Por lo tanto, nunca ha sido más vital que la IFCC ofrezca liderazgo profesional para proporcionar estrategias con el fin de mejorar el papel

crucial de la medicina de laboratorio en la atención de los pacientes. Para construir sobre la base de 60 años de liderazgo de la IFCC en la medicina de laboratorio, creo que las siguientes áreas son críticas. (1) Mejorar el desempeño de los laboratorios clínicos mediante la normalización y trazabilidad ya que tiene repercusiones sobre el uso racional de los recursos de laboratorio clínico. Las actividades de armonización internacional contribuirán aún más a este campo durante el próximo trienio y se requiere a la IFCC como un socio líder. Un reto importante es extender estas actividades a las regiones en las que los miembros actuales de la industria de diagnóstico in vitro multinacionales, no son el principal proveedor de instrumentos y reactivos de laboratorio clínico, en particular en la región de Asia Pacífico y las regiones América del Sur y Central. (2) Continuar las actividades educativas y de formación entre nuestros miembros, capaz de satisfacer las necesidades tanto de las comunidades en desarrollo como desarrolladas, a través de servicios generales y especializados, incluyendo la promoción de las oportunidades de aprendizaje en línea. (3) Garantizar la sostenibilidad financiera de la IFCC. (4) Promover una interacción más estrecha entre las organizaciones internacionales que representan diversas disciplinas de la medicina de laboratorio, para proporcionar un acoplamiento común por parte de nuestra profesión con los profesionales clínicos y sus organizaciones internacionales, así como las organizaciones gubernamentales y otras partes interesadas en la asistencia sanitaria. (5) Mejorar la comunicación entre nuestros miembros a través de plataformas electrónicas y el aumentar

la disponibilidad en idiomas distintos del inglés. (6) Extender nuestras sociedades a las organizaciones de pacientes pertinentes.. La IFCC es una federación de sociedades nacionales y miembros corporativos. El principal recurso de la IFCC son las contribuciones voluntarias de los profesionales individuales que surgen de nuestra membresía. De este modo, la eficacia de la IFCC depende de este apoyo comprometido de los miembros para cumplir con nuestros objetivos y compromisos. El siguiente Comité Ejecutivo (EB) debe mejorar y fortalecer las relaciones sobre las que se funda nuestra organización. Como presidente voy a trabajar dentro del EB para dirigir las divisiones de la IFCC, los grupos de trabajo especial, los comités y los grupos de trabajo, para alcanzar los objetivos estratégicos que garanticen la consulta más amplia y discusión entre los representantes de las Sociedades Nacionales, las federaciones regionales y nuestros miembros, a medida que trazamos nuestro progreso para el desarrollo futuro de la medicina de laboratorio. Mis empleadores actuales apoyan totalmente mis actividades profesionales y, de ser elegido, podré dedicar hasta el 75% de mi tiempo a las responsabilidades de la IFCC. Como profesor visitante de la IFCC He discutido los problemas que enfrenta nuestra profesión con los representantes nacionales de 24 miembros de la IFCC y, también, he dictado conferencias en 23 congresos internacionales o regionales. Tengo ganas de continuar con estas discusiones, deseo que usted proporcione sus sugerencias en cuanto a cuál es la mejor forma en que la IFCC puede ayudar a mejorar la práctica de la medicina de laboratorio en su país.. Howard Morris PhD FAACB FFSc(RCPA)

Sociedad jordaniana lanza revista nacional por Lina Mashhour Assaf, BSc., MSc., Profesional del Laboratorio Médico Jefa de Redacción, revista Pulso del Laboratorio

Foto: Junta Ejecutiva de la Sociedad con el patrocinador oficial, el Viceministro de Salud.

l 23 de julio de 2016, La Sociedad de Tecnología Médica y de Laboratorio de Jordania (MTLS), lanzó el primer número de su revista periódica Nabd AlMukhtabar (Pulso del Laboratorio) durante una celebración y cena, llevada a cabo bajo el patrocinio de su Excelencia el Ministro de Salud. La revista será publicada tres veces al año y se especializará en las áreas de salud, en particular en el campo de la tecnología médica y la medicina de laboratorio, de ahí el nombre de Pulso del Laboratorio. Será de utilidad para la industria del laboratorio médico y de las personas interesadas, de otras disciplinas de la salud, en esta área, además del público en general. El objetivo principal de crear esta revista era servir al personal de laboratorio, a través de la transferencia y el intercambio de experiencias y proporcionando actualizaciones de los nuevos avances en las diferentes áreas de especialización; también tiene como objetivo aumentar la conciencia de la importancia del trabajo que realizan en el laboratorio. Además,

pretende reforzar los lazos sociales y profesionales entre ellos. Otros objetivos, de la creación de esta revista, fueron contribuir en la difusión del conocimiento de la salud entre el público en general, para educarlos sobre el papel del sector de los laboratorios médicos y arrojar luz sobre la importancia de este sector en el proceso general de salud. La revista también tiene el objetivo de comunicar al personal médico y de laboratorio sobre aspectos en que personal médico pueda aprender, como las muchas técnicas de análisis de laboratorio modernas y sofisticadas, y sobre la magnitud de los esfuerzos realizados por los profesionales del laboratorio para obtener resultados con altos niveles de exactitud y precisión, lo que lleva a una comprensión más profunda y un mayor respeto de la función del personal de laboratorio médico, y así colocar a la profesión en el sitio que le corresponde entre las otras especialidades médicas. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Sociedad Finlandesa celebra sus 70 años por Heidi Nousiainen; miembro de la junta directiva de la FSCC a Sociedad de Química Clínica Finlandesa celebró su 70° aniversario en abril de 2016. Los festejos se llevaron a cabo en el hotel, de diseño de estilo Jugend, Hotel Arte GLO en Helsinki, Finlandia, en conjunción con el congreso bianual nacional. La Sociedad Finlandesa de Química Clínica (FSCC) fue fundada en 1946 y fue la primera sociedad nacional en Europa en incorporar las palabras “Química Clínica” en su nombre. El propósito de FSCC es actuar como un enlace entre los médicos y los químicos con un interés en la química clínica y promover el desarrollo teórico y práctico de la química clínica en Finlandia. El congreso de celebración, de dos días, cubrió algunos de los temas de actualidad más calientes en la industria, incluyendo una introducción en el diseño de servicios por la empresa finlandesa Hellon, y un taller LEAN, de un día de duración, donde los participantes

pudieron experimentar el poder práctico de Lean pasando pelotas de tenis entre sí. El congreso también incluyó una visita al nuevo edificio de laboratorio de la Universidad de Helsinki con su nuevo laboratorio completamente nuevo HUSLAB que aloja la pista de automatización más larga de Europa, así como instalaciones de última generación, diseñadas específicamente para satisfacer las necesidades de la tecnología moderna de los laboratorios. Las festividades culminaron con una cena de celebración, con los ex presidentes de la FSCC presentes como invitados de honor. Casi un centenar de miembros de la sociedad disfrutaron de una buena comida, excelente compañía, y el entretenimiento proporcionado por el comediante standup-Mikko Vaismaa. La noche terminó con música en vivo proporcionada por los talentosos músicos de orquesta Flipper. La FSCC continúa promoviendo activamente la quí-

Grupo de Trabajo de la IFCC-EMD en Citometría de Flujo: Un Informe por Prof. Ulrich Sack l grupo de trabajo sobre citometría de flujo está dedicado a la promoción de los desarrollos recientes de la citometría de flujo clínica. Esto se realiza en cooperación con organizaciones científicas, nacionales e internacionales. La actividad principal es la organización de cursos. El organizador científico es T Sack (Leipzig, Alemania), con el apoyo de C Lambert (St. Etienne, Francia), A Spittler (Viena, Austria), K Psarra (Atenas, Grecia), C Rodríguez (Córdoba, Argentina), y AM Ivanov (San Petersburgo, Rusia). El apoyo técnico, la organización y el equipo técnico son proporcionadas generosamente por Beckman Coulter. Los cursos tienen una larga tradición. Después de una interrupción intermedia en 2007, el primer curso nuevo de citometría de flujo se llevó a cabo en 2012 en Leipzig, Sajonia, Alemania. El enfoque principal fue la citometría de flujo en inmunología y la investigación con células madre. Este curso fue impartido por especialistas en citometría analítica por fuera de la hematología pero incluyendo la clasificación. El apoyador científico local fue el Centro de Medicina Regenerativa Traslacional de Leipzig (http://www.trm.uni-leipzig.de). La retroalimentación de los participantes indicó una fuerte apreciación con el alto porcentaje de ejercicios prácticos. El segundo curso fue organizado en 2013 en cooperación con la ESCCA en Saint-Etienne, Francia. La atención se centró en el sistema de monocitos y macrófagos. Partes de este curso han sido publicadas (Monocitos y Macrófagos en el flujo, Lambert et al., Citometría B). Una vez más, la parte práctica y el nivel científico fueron calificados como excelentes por parte de los participantes. El tercer curso en el año 2014 fue organizado localmente por Andreas Spittler en Viena, Austria, de nuevo en cooperación con la ESCCA. Los participantes disfrutaron del contacto cercano con citometristas de flujo experimentados y un entrenamiento práctico intenso.

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En 2015, un taller adicional fue ofrecido bajo los auspicios de la IFCC en Krems, Austria. “Las Vesículas Extracelulares en la Inflamación” fue el tema del encuentro. Además de presentaciones de vanguardia que cubrían este tema, se ofrecieron ejercicios prácticos a los asistentes. Por otra parte, un taller de citometría de flujo se realizó en Atenas, Grecia. Se continuó con el principio establecido. El primer curso latinoamericano fue ofrecido en Córdoba/Argentina, en 2016. El apoyo local fue dado por el Club Rotario de Sierras Chicas y por la Universidad de Córdoba. Los participantes del curso recibieron carpetas de información personal con todas las presentaciones y material adicional. Otra taller de citometría de flujo se llevará a cabo del 26 al 28 de octubre en San Petersburgo (Rusia). El principio establecido se mantendrá: una intensa interacción entre los participantes y los capacitadores; 3 temas al día con una breve introducción y extensos ejercicios prácticos; duración 3 días; y temas emergentes y científicos pertinentes y con importancia para la práctica diaria. Para 2017, se están preparando otros cursos en América Latina y Europa. En febrero, se ofrecerá un curso de invierno de citometría de flujo, en SaintEtienne, Francia. Vamos a seguir el principio exitoso de nuestros cursos: Intensa interacción entre los participantes y los capacitadores; 3 temas al día con una breve introducción y extensos ejercicios prácticos; Duración de 3 días; Carpetas de información personalizadas con todas las presentaciones y materiales para la práctica en el hogar; Temas científicos emergentes y pertinentes y con importancia para la práctica diaria. Finalmente, la edición 2009 de Diagnósticos Celulares por Sack, Tarnok, y Rothe (Karger editores) sigue siendo el más reciente libro en citometría de flujo clínica y ha sido apoyado por la IFCC.

mica clínica en Finlandia. El próximo gran evento organizado por la FSCC es el 36º Congreso Nórdico de Química Clínica que tendrá lugar en Helsinki el 12-15 de junio de 2018. ¡Esperamos contar con su presencia allí!

Nueva Fase con CONTRASTE Analizador automatizado del sedimento urinario Eficiencia: hasta 120 pruebas/hora Imágenes con zoom, similares a las de bajo aumento Visualización revolucionaria de partículas, tanto con microscopía de campo brillante como de contraste de fase UriSed 3 y LabUMat 2 conforman un sistema completo de laboratorio de orina

Nueva categoría en análisis de sedimento urinario Analizador semi automatizado de microscopía urinaria Basado en la tecnología UriSed patentada Inyección manual de la muestra y proceso de medición totalmente automático en 1 minuto Herramienta altamente efectiva para los laboratorios pequeños, departamentos de urgencias o como sistema de soporte para los analizadores automatizados de sedimento

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Desarrollo de la competencia de calidad en laboratorios médicos: Una perspectiva histórica por Dr Michael Thomas, Proyecto Especial de Desarrollo de Competencias de Calidad en los laboratorios médicos uesto que mi mandato como Presidente del Proyecto Especial de Desarrollo de Competencias de Calidad en los laboratorios médicos (DQCML) llega a su fin a finales de este año, tal vez sea apropiado resumir su origen, ambiciones y logros desde que se estableció, hace una década. Fue en la reunión del Comité Ejecutivo de la IFCC en Asunción, Paraguay en 2006, bajo la presidencia de la Profesora Hicks, que se reconoció que el alcance y la calidad de las pruebas de laboratorio en muchos países en desarrollo se quedaron atrás en lo que comúnmente es aceptado como necesario en los países avanzados. En muchos países desarrollados se dice a menudo, aunque con una prueba científica limitada, que hasta el 80% de las decisiones médicas se basan en los resultados de las pruebas de laboratorio. Esta importancia subyacente de las pruebas de laboratorio es una razón principal por la que la IFCC, dentro de los límites de sus recursos, resolvió ayudar en la evolución progresiva de las pruebas de laboratorio en los países en desarrollo. El Consejo Ejecutivo le encomendó a la División de Educación y Administración (EMD), en ese momento, bajo el liderazgo de Janet Smith, que desarrollara formas en las que podría prestar apoyo para mejorar el proceso de calidad en los laboratorios médicos. La respuesta de la EMD fue proponer establecer un proyecto especial destinado a informar a los servicios de los laboratorio emergentes a través de sus Sociedades Nacionales, de las oportunidades ofrecidas por la IFCC para desarrollar la competencia de calidad

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local que se centraría en todos los aspectos de la calidad, pero que se concentraría sobre todo en el control de calidad interno, la evaluación de la calidad externa y trabajar hacia la acreditación de los laboratorios con el objetivo de adoptar un sistema de calidad conforme a la norma internacional, ISO 15189. El EB aprobó estas recomendaciones y esto condujo a la creación de una Junta de Supervisión bajo la dirección del EMD, que posteriormente se conoció como el Grupo del Proyecto Especial de Desarrollo de la Competencia en la Calidad en los Laboratorios Médicos (DQCML), en marzo de 2007. La reunión inaugural del Grupo del Proyecto Especial, se realizó en Amsterdam, en junio de 2007, donde se reconoció inmediatamente que, muchos de los fines y objetivos del proyecto, tal como se proponían en una Escalera de Calidad a partir del Control de Calidad Interno y culminando después de una serie de pasos en la Acreditación, según la norma ISO 15189, tomaría mucho tiempo para lograr y parecía sensato considerar la adopción de un enfoque modular. Se acordó que el objetivo básico para el Proyecto debía ser ayudar en la mejora de la calidad de un servicio de medicina de laboratorio, ya que esto se vió como un requisito esencial para una mejor atención al paciente y mejores resultados clínicos. Por supuesto, se reconoció que esto no era tarea fácil y que para lograrla serían necesarios muchos años. Los miembros que probablemente solicitarían la opinión con respecto al Proyecto Especial estarían probablemente en diferentes etapas de su desarrollo en la

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implementación de un Sistema de Calidad. Por lo tanto, se considera conveniente el proceso como una serie de pasos en una escalera de la calidad con la posibilidad de montarse en la escalera en cualquier punto. Se reconoció que la escalera de la calidad se podía dividir convenientemente en dos componentes. En primer lugar para aquellos países que se beneficiarían del asesoramiento sobre la introducción del control de calidad y los sistemas externos de control de calidad Y en segundo lugar, para los países que tenían una comprensión más madura de calidad y se beneficiarían de una ayuda más avanzada en el trabajo hacia la acreditación. Se obtuvo la financiación para prestar asesoramiento y asistencia más que cualquier compromiso en curso para mantener los sistemas ya existentes. Desde el principio, la profesora Hicks había obtenido financiación adicional de Abbott Diagnostics para el Programa de Profesor Visitante y el DQCML tendría acceso a esa fuente de financiación. El Proyecto DQCML ha usado enormemente la experiencia y conocimientos de los comités de calidad analítica y de Administración del Laboratorio Clínico y, más recientemente, del Comité de Educación a Distancia. Ha sido a través de los colegas de los tres comités que se han podido ofrecer talleres de apoyo, conferencias y seminarios digitales dirigidos a los peldaños particulares de la plantilla de la Escalera de la Calidad. La primera iniciativa entregada conjuntamente por el DQCML y la APFCB, fue un taller de 5 días en la primavera de 2009 en Sri Lanka sobre, “El papel de la acreditación para asegurar la calidad analítica”. El taller fue impartido de manera experta por Sam Vasikaran, en nombre de la APFCB y por Janet Smith, en nombre del EMD y el DQCML y, de acuerdo con los objetivos del DQCML, de desarrollar módulos educativos transferibles, se repitió más tarde en Macedonia. La segunda se convirtió en un proyecto en Vietnam que fue realizando por la AACB, bajo Renze Bais, y que apoyó a los vietnamitas en el desarrollo de un programa de EQA interno. Posteriormente, las actividades del DQCML han impactado en muchos países miembros en todo el mundo, como Indonesia, Túnez, Filipinas, Uruguay, Nepal, Rumania y Rusia. Más recientemente, el proyecto ha apoyado la presentación de dos talleres en Ecuador. Estos talleres fueron presentados en español lo que limitó que fueran compartidos más ampliamente entre los miembros de la IFCC pero reconoce la representación significativa del habla española, dentro de la IFCC. Durante los diez años de su existencia, el proyecto se ha beneficiado de la enorme experiencia de sus colegas dentro de la EMD. Los logros del DQCML ha dependido y finalmente ha

La Escalera de la Calidad ISO 15189 Sistema de Administración de Calidad Esquema de Acreditación Enlace Internacional Enlace Local Aseguramiento Externo de la Calidad Control de Calidad Interno tenido éxito a través de la colaboración, la ayuda y la experiencia de los colegas en otros comités, en particular, los del de C-AQ, C-CLM y C-DL. Los programas educativos que el DQCML ha organizado han sido hechos a la medida para los miembros solicitantes. Por lo tanto, a pesar de que podrían ser útiles para otros miembros no hay, hasta ahora, ningún recurso consolidado al que se pueda acceder. Sin embargo, todavía sigue siendo la ambición y el objetivo último de este proyecto especial, poder publicar un Manual de Calidad a medida que reúna las diversas iniciativas y que refleje las etapas en el desarrollo de los sistemas de calidad como una progresión a través de cada peldaño de la escalera de la calidad. Más recientemente, el DQCML ha sido alentado a considerar una extensión de su papel en el África subsahariana, donde se tendrá que considerar el Proceso de Mejora de la Calidad de los Laboratorios hacia la Acreditación o la manera SLIPTA de lograr la acreditación. Nuestros primeros pasos en esa área estarán en la entrega a través de un simposio de un día y un taller en octubre de 2016 a la 6ª Conferencia Científica de la Asociación de Químicos Clínicos de Nigeria titulado: “Mantenimiento de Prácticas y de los Procesos de Calidad en los países en desarrollo”. Esto abre una puerta nueva y emocionante sobre las actividades del DQCML. Esto ha significado que, con el apoyo de los Presidentes pasados y presentes de la IFCC, el Proyecto Especial DQCML continúa y se expande con oportunidades, prioridades y retos renovados y ve la escalera de la calidad evolucionando con retos significativamente mayores y responsabilidades de los que se pudieron imaginar en un principio. Durante los últimos diez años, yo creo que el DQCML ha tenido un impacto significativo y útil para ayudarles a los miembros de la IFCC a mejorar la calidad de sus servicios de medicina de laboratorio. Le deseo mi sucesor, el profesor Egon Amman, el mayor de los éxitos en la conducción del DQCML hacia la mejora de la calidad de los servicios de medicina de laboratorio en todo el mundo.

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Chip de microfluidos caracteriza células cancerosas n un estudio de prueba de concepto, un equipo de ingenieros electrónicos y de sistemas demostró la capacidad de un chip de microfluidos, mejorado con electrónica, para caracterizar y contar células cancerosas ováricas. Si bien se han desarrollado numerosos ensayos biofísicos y bioquímicos que se basan en la manipulación espacial de partículas o células cuando son procesadas en dispositivos de lab-en-unchip, el análisis de partículas distribuidas espacialmente en esos dispositivos generalmente requiere microscopía, lo que niega las ventajas del costo y el tamaño de los ensayos de micro fluidos. Investigadores del Instituto Tecnológico de Georgia (Atlanta, EUA; www. gatech.edu) han combinado microfluidos con tecnología de sensor electrónico para producir un dispositivo lab-en-un-chip que puede determinar la localización, tamaño, y velocidad de las células que se mueven a través de los canales de microfluidos. La información para cada célula individual es almacenada y luego usada como la base para el recuento y el análisis ce-

lular automatizado. El principio subyacente que permite la identificación celular es la división de código de acceso múltiple (CDMA, por sus siglas en inglés), que se usa por medio de redes de telefonía celular para separar las señales de cada usuario. La versión novedosa en-chip se llama CODES de microfluido. El método CODES se apoya en una red de circuito eléctrico a escala micrométrica localizada en una capa por debajo del chip de microfluidos de cuatro canales. La corriente que fluye a través del circuito crea un campo eléctrico en los canales de microfluidos por encima de la red. Cuando una célula pasa a través de uno de los canales de microfluido, crea un cambio de impedancia en el circuito que señala el paso de la célula y suministra información acerca de la localización, tamaño, de la célula, y la velocidad a la cual se está moviendo a través del canal. El paquete de información generado para cada célula es asignado a un número identificador único de siete bits que se almacena para el análisis. Como una prueba de principio, los

investigadores usan esta tecnología para detectar células cancerosas ováricas humanas en cuatro diferentes canales de microfluido fabricados usando litografía suave. En este ejercicio se pudieron rastrear más de mil células cancerosas ováricas con una tasa de exactitud de más de 90%. “Hemos creado un sensor electrónico sin ningún componente activo”, dijo la Dr. Sarioglu. “Es solo una capa de metal, hábilmente modelada. Las células y la capa metálica trabajan juntas para generar señales digitales de la misma manera que las redes de telefonía celular hacen el seguimiento de la identidad de quien llama. Estamos creando el equivalente de una

red de teléfono celular en un chip de microfluidos. Nuestra técnica puede convertir todas las manipulaciones de microfluidos que están sucediendo en el chip en datos cuantitativos relacionados con mediciones diagnósticas”. El laboratorio-en-un-chip, basado en CODES fue descrito en la edición digital del 29 de Marzo de 2016, en la revista Lab on a Chip. Imagen: Un chip de microfluido híbrido (sostenido por la Dr. Fatih Sarioglu) usa un patrón de circuito simple para asignar un número de identificación digital de siete-bits a cada célula que pasa a través de los canales (Fotografía cortesía del Instituto Tecnológico de Georgia).

Niveles elevados de quitotriosidasa permiten diagnóstico de trastornos del almacenamiento en lisosomas a quitotriosidasa aparece en el plasma a partir de los macrófagos activados y se ha comunicado que sus niveles están elevados en muchos trastornos del almacenamiento en los lisosomas. La medición de la actividad de esta enzima ha sido una herramienta que está disponible para controlar el tratamiento de la enfermedad de Gaucher. El grado de elevación de la quitotriosidasa es útil para el diagnóstico diferencial de la enfermedad de Gaucher y de la de Niemann-Pick A/B. Sin embargo, la utilidad potencial de este análisis de quitotriosidasa depende de la frecuencia con la cual la actividad de la quitotriosidasa resulte deficiente en una población particular. Unos científicos de Sandor Life Sciences (Hyderabad, India; www. sandorlifesciences.co.in), estudiaron la utilidad clínica de este análisis para las enfermedades de Gaucher y de Niemann-Pick A/B, en el contexto de la deficiencia de quitotriosidasa en una población local. El estudio incluyó a 173 pacientes, 108 de ellos con sospecha clínica de tener la enfermedad de Gaucher, 65 con sospecha clínica de tener la enfermedad de Nie-

mann-Pick A/B y 92 controles sanos. Los científicos descubrieron que las muestras de plasma de los controles, de los pacientes con la enfermedad de Gaucher y de los pacientes con la enfermedad de Niemann-Pick A/B, mostraron deficiencia de quitotriosidasa del 12 %, 25 % y 27 %, respectivamente. El grado de elevación de la quitotriosidasa en la enfermedad de Gaucher fue de 40 a 326 veces (11.325,7 ± 6.395,4 nmol/h/ml) y en los pacientes de Niemann-Pick A/B, fue de siete a 22 veces (1.192,5 ± 463,0 nmol/h/ml). La deficiencia de quitotriosidasa se observa en el 22 % de la población de la India. Los autores llegaron a la conclusión de que sus hallazgos, de marcada elevación de varias veces de los niveles de la quitotriosidasa en la enfermedad de Gaucher y en la de Niemann-Pick A/B, pueden ser una opción de un marcador potencial para el diagnóstico diferencial de estos grupos de enfermedades, excepto para los pacientes en los cuales esta enzima es deficiente. El estudio fue publicado en la edición del 1º de junio de 2016, de la revista Clinica Chimica Acta. LabMedica en Español Noviembre/2016

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Sangre del cordón umbilical en trasplantes de médula ósea n tratamiento común para los cánceres hematológicos es borrar el sistema sanguíneo leucémico de un paciente y luego volver a hacer crecer un nuevo sistema sanguíneo utilizando células madre de la sangre de un donante. Cuanto más cercana es la correspondencia entre las células del donante y el sistema sanguíneo de un paciente, existen menos posibilidades de que el nuevo sistema sanguíneo ataque los tejidos del paciente, reduciendo las posibilidades de la enfermedad injerto – contra – huésped. Hay cuatro posibles fuentes de células donantes: un donante compatible emparentado, comúnmente

un familiar cercano; un donante compatible, no emparentado, de una base de datos de 25 millones de personas que han accedido a donar; la sangre del cordón umbilical de un banco de muestras almacenadas y el trasplante haploidéntico que es una técnica prometedora que requiere sólo una compatibilidad media con un donante relacionado. Científicos de la Universidad de Colorado en Denver (Denver, CO, EUA; www.ucdenver.edu) compararon a 51 pacientes consecutivos que recibieron trasplantes de sangre de cordón umbilical (TSC) con 57 pacientes consecutivos que recibieron sangre de donantes coincidentes, no

Guías de práctica para diagnóstico y manejo de la aspergilosis a actualización de las directrices, se centra en el diagnóstico precoz y en nuevos tratamientos para los pacientes con las principales formas de aspergilosis: alérgica, crónica, e invasiva, la última de las cuales mata a un 40-80% de los pacientes con infección generalizada. El diagnóstico temprano de la aspergilosis invasiva, sigue siendo crítica para un tratamiento más eficaz. Como un moho aéreo, Aspergillus se encuentra a menudo en los aparatos de aire acondicionado, las pilas de compost y las casas o edificios húmedos o dañados por las inundaciones. Aunque generalmente es inofensivo, puede causar una reacción alérgica o problemas pulmonares crónicos en algunas personas y una enfermedad invasiva grave en los pacientes vulnerables. Los pacientes inmunosuprimidos corren el mayor riesgo de aspergilosis invasiva. Aunque requieren tratamiento, las formas alérgicas y crónicas de la aspergilosis, normalmente no son mortales. Las directrices 2016 (actualizadas con respecto a las de 2008) fueron liberadas por la Sociedad de Enfermedades Infecciosas de América (IDSA, Arlington, VA, EUA; www.idsociety.org). “La aspergilosis invasiva a menudo se pasa por alto, pero el diagnóstico y el tratamiento tempranos son claves”, dijo el autor principal, Thomas Patterson, MD, profesor del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Texas en San Antonio (Texas, EUA) y del Sistema de Salud de Veteranos del Sur de Texas (San Antonio, TX, EUA). “Estas son infecciones complicadas con una serie de opciones de tratamiento. Los pacientes se benefician realmente de

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un enfoque multidisciplinario, incluyendo la experiencia de un especialista en enfermedades infecciosas”. Las medicaciones antimicóticas nuevas, más eficaces, y mejor toleradas o las versiones de los medicamentos existentes (por ejemplo, de liberación prolongada) han mejorado el cuidado, incluyendo el isavuconazol y el posaconazol. En algunos casos, se recomienda la terapia combinada con voriconazol y una equinocandina para ciertos pacientes de alto riesgo. Debido a que la aspergilosis invasiva es tan mortal, las directrices recomiendan que algunos pacientes de alto riesgo, inclusive, sean tratados con antimicóticos para prevenir la infección, incluyendo aquellos con neutropenia y enfermedad de injerto contra huésped (EICH). Otra estrategia de prevención es el uso de sistemas especiales de filtración para pacientes hospitalizados inmunodeprimidos. Al igual que con otras directrices de la IDSA, las directrices para la aspergilosis estarán disponibles en un formato para teléfono inteligente y una edición de referencia rápida de bolsillo. Las directrices completas están disponibles gratuitamente en el sitio web de la IDSA. Puesto que las directrices no siempre pueden dar cuenta de la variación individual entre los pacientes, la IDSA considera que la adhesión a estas pautas puede ser voluntaria, con la determinación final, con respecto a su aplicación, realizada por el médico con el juicio a la luz de las circunstancias individuales de cada paciente. El estudio fue publicado el 29 de junio de 2016 en la revista Clinical Infectious Diseases.

relacionados (MUD). La incidencia de la enfermedad grave de injerto contra huésped crónica, fue de 44% en los pacientes que habían recibido trasplantes de MUD y 8% en los pacientes que habían recibido los TSC. El estudio fue publicado el 11 de julio de 2016, en la revista Bone Marrow Transplantation. Imagen: El uso de la sangre de cordón umbilical redujo la enfermedad crónica de injerto contra huésped, en comparación con la sangre de donante compatible no relacionado, tres años después del trasplante de médula ósea (Fotografía cortesía del Centro de Cáncer de la Universidad de Colorado).

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MicroARN predice progresión de tumores cerebrales e ha desarrollado un nuevo método para predecir la progresión de la enfermedad en los pacientes con glioblastoma, que han sido sometidos a tratamiento estándar y terapia multimodal de glioblastoma (GBM), el cual revela variabilidad interindividual en términos de los resultados del tratamiento. Durante los últimos años, los micro ácidos ribonucleicos (miARN) han recibido una atención creciente; con un alto grado de promiscuidad, los miARNs atacan y regulan varias especies de ARN mensajero (ARNm) que codifican las proteínas implicadas en diversas vías de señalización. La acumu-

lación de pruebas indica que la expresión de las firmas de miARN, pueden servir como biomarcadores para el diagnóstico y la evaluación de riesgos de diversas enfermedades malignas, incluyendo el GBM. Los científicos del Centro Helmholtz de Múnich (Neuherberg, Alemania; www.helmholtz-muenchen.de) y sus colegas, examinaron cortes de muestras fijadas en formol e incluidas en parafina (FFPE) de 36 pacientes con GBM, junto con su supervivencia global de seguimiento a posteriori y a quienes les practicaron identificación de la firma de

miARN a partir de datos de microarrays. Para la validación independiente, utilizaron el conjunto de datos de la expresión de los genes miARN a partir de un subconjunto correspondiente por edad y género de 58 individuos y de los 357 en la cohorte de GBM en el Atlas del Genoma del Cáncer (TCGA). Los genes potencialmente regulados por los miARNs firma fueron identificados mediante un método de correlación seguido por un análisis de la vía. El análisis de los miARN se llevó a cabo utilizando los biochips de Geniom Biochip MPEA homo sapiens, que contienen 1.223 sondas de miARN (Comprehensive Biomarker Center, Heidelberg, Alemania; www.cbioc.com). Los ensayos de cebadores MiScript (Qiagen Sciences, Germantown, MD, EUA; www.qiagen.com) para los cuatro miARNs de la firma, fueron utilizados para la cuantificación relativa, junto con un ensayo de referencia para el ARN pequeño, SNORD6. Los científicos identificaron una firma pronóstica de 4-miARN, independiente de la metilación del promotor de la O6-metilguanina-ADN metiltransferasa (MGMT), la edad y el género y asignaron una puntuación de riesgo a cada paciente lo cual permitió definir dos grupos significativamente diferentes en el pronóstico. La firma fue técnicamente validada usando la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (QRT-PCR) y validada de forma independiente en un subgrupo correspondiente de edad y género de pacientes tratados con el estándar de atención de la cohorte TCGA GBM. Kristian Unger, PhD, investigador principal del estudio, dijo: “Hasta la fecha se han identificado sólo unos pocos factores pronósticos y predictivos para el glioblastoma. Nuestro método podría ser utilizado para identificar a los candidatos para las opciones de tratamiento alternativo o intensificado, ya que es muy poco probable que los pacientes con una puntuación de alto riesgo se puedan beneficiar de la terapia estándar”. El estudio fue publicado el 11 de junio de 2016, en la revista Oncotarget. Imagen: Los ensayos con cebadores miScript y los kits de PCR (Foto cortesía de Qiagen). LabMedica en Español Noviembre/2016

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Empreza matriz de Beckman comprará fabricante de insumos de laboratorio a Corporación Danaher (Washington, DC, EUA, www. danaher.com) adquirirá Phenomenex Inc., (Torrance, CA, EUA; www.phenomenex.com), un fabricante y distribuidor privado de consumibles, de alto valor, para las ciencias de separación, incluidos los consumibles patentados para el mercado de cromatografía líquida y de gases. Phenomenex cuenta con más de 7.000 productos para uso en diversas aplicaciones en el descubrimiento de medicamentos y el desarrollo, la in-

vestigación clínica, la toxicología forense, la petroquímica, el análisis ambiental y la seguridad alimentaria. Tras la adquisición, funcionará como una compañía independiente, conservando la marca Phenomenex, su personal y las ubicaciones de sitios. “Phenomenex es una marca ampliamente reconocible que tenemos el orgullo de decir que es muy respetada y bien establecida, que proporciona consumibles de alta calidad a la comunidad científica, a nivel mundial”, dijo Fasha Mahjoor, director ejecutivo de Phenomenex.

Mercado de IVD en Medio Oriente superará USD 3 mil millones en 2021 l mercado del Medio Oriente, para el diagnóstico in vitro, tendrá un valor de 3.400 millones de dólares en el año 2021 y registrará un crecimiento que es una y media veces el doble que el del resto del mercado de IVD del mundo. El crecimiento será impulsado por la expansión de las poblaciones y un compromiso de gasto sanitario en esta región, que alberga oficinas de la mayoría de los sitios en que se localizan las preocupaciones generales, como Arabia Saudita, Egipto, Dubái u otros locales, para atender a esta población con productos y suministros para análisis. Estos son los últimos hallazgos de

Kalorama Information, (Nueva York, NY, EUA, www.kaloramainformation. com), una firma independiente de investigación del mercado médico. En la década de 1970, varios países de Oriente Medio y del Golfo comenzaron a proporcionar asistencia sanitaria pública a sus ciudadanos. Actualmente, Omán, Arabia Saudita, Qatar, Siria y Turquía, tienen programas de atención sanitaria universales. Los cambios en el estilo de vida en el Medio Oriente, como un estilo de vida más sedentario han provocado el aumento de las tasas de obesidad y la aparición de enfermedades “occidentales” como la diabetes.

Fundador de Quantimetrix muere a los 89 años l Dr. Robert William Ban, fundador de Quantimetrix Corporation (Redondo Beach, CA, EUA; www.quantimetrix.com), hace más de 40 años, y quien condujo el crecimiento de la compañía para que se convirtiera en una potencia en sistemas líquidos de control para el laboratorio, murió plácidamente, en California, a la edad de 89 años. El Dr. Ban, un PhD. en Bioquímica, comenzó Quantimetrix en 1974, como resultado de una serie de experimentos exitosos que realizó en su garaje. La compañía es una pionera en tecnología de estabilización de líquidos, lo cual simplificó los métodos de control de calidad en el laboratorio. Con la Ley de Mejoramiento de los Laboratorios Clínicos (CLIA), de 1988, que obligó a la utilización de controles en los laboratorios clínicos, Quantimetrix suministró los productos a una comunidad de diagnóstico deseosa de cumplir con los nuevos requisitos. La demanda de productos de Quantimetrix se elevó

mucho y estableció la compañía como líder mundial en el campo. Anteriormente, en 1972, el Dr. Ban también fundó Diagnostic Products Corporation (DPC), un desarrollador de kits de pruebas de diagnóstico de radioinmunoensayo (RIA). La prueba, considerada como un gran avance en el tiempo, permite la medición de las concentraciones infinitamente bajas de sustancias en los fluidos corporales, tales como medicamentos y hormonas. El Dr. Ban dejó DPC en 1973 y posteriormente comenzó Quantimetrix. El Dr. Ban fue un innovador apreciado y un líder incansable que estaba activo en todo el mundo. Su hijo, Monty Scott Ban, continúa con su visión como el actual presidente y director ejecutivo de la compañía. Además de su activa vida de los negocios, el Dr. Ban fue también un autor publicado, un artista, un poeta y un músico. Le sobreviven su hijo, su nuera y tres nietas.

Para un listado gratuíto de eventos y congresos o para saber como anunciarse en esta sección contácte;

Calendario Internacional LabMedica en Español P.O.Box 802214, Miami, FL 33280-2214, USA Fax: 1-954-893-0038 • E-mail: info@globetech.net

NOVIEMBRE 2016 EFLM Course on Test Evaluation, Developing medical tests that improve patient outcomes. Nov 9-11; Leiden, The Netherlands; Web: www.eflm-test-evaluation-course.eu Association for Molecular Pathology (AMP) Annual Meeting 2016. Nov 10-12; Charlotte, NC, USA; Web: www.amp.org MEDICA 2016. Nov 16-19; Dusseldorf, Germany; Web: www.medica.de 10th International Scientific Meeting of the Centre of Metrological Traceability in Laboratory Medicine (CIRME) “Ten Years After”. Nov 17-18; Milan, Italy; Web: http:// users.unimi.it/cirme/home WASPaLM 2016- 29th World Congress of Pathology. Nov 18-21; Las Vegas, NV, USA; Web: www.waspalm.org 14th Asia-Pacific Federation for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine Congress. Nov 26-29; Web: www. apfcbcongress2016.org

DICIEMBRE 2016 50e Journées de Biologie Praticienne. Dec 2-3; Paris, France; Web: http://eflm.eu

ENERO 2017 The British Fertility Society (BFS) Annual Meeting. Jan 5-7; Edinburgh, UK; Web: http://fertilityconference.org CBRD 2017 - 4th Caribbean Biomedical Research Days. Jan 16-18; Gros Islet, Saint Lucia; Web: www.stress-and-behavior.com

FEBRERO 2017 SLAS 2017 - Society of Laboratory Automation and Screening. Feb 4-8; Washington, DC, USA; Web: www.slas.org Labquality Days2017. Feb 9-10; Helsinki, Finland; Web: www.labquality.fi

MARZO 2017 Pittcon Conference and Expo 2017. Mar 59; Atlanta, GA, USA; Web: http://pittcon.org KIMES 2017. Mar 16-19; Seoul, Korea; Web: www.kimes.kr ARABLAB 2017. Mar 20-23; Dubai, UAE; Web: www.arablab.com MEDLAB Asia Pacific 2017. Mar 29-31; Singapore; Web: www.medlabasia.com

ABRIL 2017 ENDO 2017 – Endocrine Society Annual Meeting. Apr 1-4; Orlando, FL, USA; Web: www.endocrine.org MEDICAL FAIR INDIA. Apr 6-8; New Delhi, India; Web: http://medicalfair-india.com ECCMID 2017. Apr 22-25; Vienna, Austria; Web: www.eccmid.org/eccmid_2017

MAYO 2017 Biomarkers & Diagnostics World Congress 2017. May 2-4; Philadelphia, PA, USA; www.biomarkerworldcongress.com ISLH 2017 – International Society of Laboratory Hematology. May 4-6; Honolulu, HI, USA; Web: www.islh.org LABVOLUTION 2017. May 16-18; Hanover, Germany; Web: www.biotechnica.de Diagnostica / Hospitalar 2017. May 16-19; Sao Paulo, Brazil; Web: www.hospitalar.com 19th European Congress of Endocrinolo-

gy. May 20-23; Munich, Germany; Web: www.ese-hormones.org/meetings ESPID 2017- European Society for Paediatric Infectious Diseases. May 23-27; Madrid, Spain; Web: www.kenes.com/ espid_2017_lp ESHG 2017 - European Human Genetics Conference. May 27-30; Copenhagen, Denmark, Web: www.eshg.org

JUNIO 2017 EuroMedLab 2017. June 11-15; Athens, Greece; Web: www.ifcc.org FOCIS 2017 - Federation of Clinical Immunology Societies. June 14-17; Boston, MA, USA; Web: www.focisnet.org EAACI 2017 - European Academy of Allergy and Clinical Immunology . June 1721; Helsinki, Finland; Web: www.eaaci.org 2017 BIO International Convention. June 19-22; San Diego, CA, USA; Web: http:// convention.bio.org

JULIO 2017 FEMS 2017- 7th Cong. of European Microbiologists. July 9-13; Valencia, Spain; Web: www.fems-microbiology2017.kenes.com AACC 2017 – 68th Annual Meeting of American Association for Clinical Chemistry. July 30-Aug 1; San Diego, CA, USA; www.aacc.org

AGOSTO 2017 FIME 2017 - Florida International Medical Exhibition. Aug 1-3; Miami, FL, USA; Web: www.fimeshow.com

SEPTIEMBRE 2017 ESP 2017 - 29th European Congress of Pathology. Sep 2-6; Amsterdam, Netherlands; www.esp-congress.org Eurotox 2017 – 53rd Congress of the European Societies of Toxicology. Sep 1013; Bratislava, Slovakia; Web: www. eurotox2017.com 10th International Meeting of Pediatric Endocrinology. Sep 14-17; Paris, France; Web: http://internationalmeeting2017.org COLABLIOCLI 2017. Sep 17-20; Punta del Este, Uruguay; Web: http://colabiocli2017uy. com/punta_este.html 13th EFLM Symposium for Balkan Region. Sep 21-22; Belgrade, Serbia.

OCTUBRE 2017 41st European Congress of Cytology. Oct 1-4; Graz, Austria; Web: www.efcs.eu 8th International Conference and Exhibition on Analytical & Bioanalytical Techniques. Oct 16-18; Milan, Italy; Web: http://analytical-bioanalytical.pharmaceuticalconferences.com ASHG 2017 - The American Society of Human Genetics. Oct 17-21; Orlando, FL, USA; Web: www.ashg.org IFCC WorldLab 2017. Oct 22-25; Durban, South Africa; www.ifcc.org

NOVIEMBRE 2017 MEDICA 2017. Nov 13-16; Dusseldorf, Germany; Web: www.medica.de AMP 2017 - Annual Meeting for Association for Molecular Pathology. Nov 16-18; Salt Lake City, UT; USA; Web: www.amp.org LabMedica en Español Noviembre/2016

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13th Symp. for Balkan Region . .58 4th EFLM-BD European Conf. . .62 77 Elektronika . . . . . . . . . . . . . .59 AACC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .57 Adam Equipment . . . . . . . . . . . .32 Advanced Instruments . . . . . . . .10 Advanced Instruments . . . . . . . .31 Agappe . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12 Alcor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 Brand . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .65 BIO-RAD . . . . . . . . . . . . . . . . . .61 Bioer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .44 Biohit . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .34 Biokit . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .35 Bioron . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .60 Caretium . . . . . . . . . . . . . . . . . .36 Cellavision . . . . . . . . . . . . . . . . .68 Coris BioConcept . . . . . . . . . . . .52 CPC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .54 DiagCor . . . . . . . . . . . . . . . . . . .50 Diagnostica Stago . . . . . . . . . . .47 Diagnostica Stago . . . . . . . . . . .49 DiaSource . . . . . . . . . . . . . . . . .14 Diasys . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6

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Vol. 33 No.7 • 11/ 2016

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DRG . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .28 DxGen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .18 EKF . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 ELITech Group . . . . . . . . . . . . . . .2 Erba . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9 Erba . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11 Euroimmun . . . . . . . . . . . . . . . . .8 Focus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13 Genrui . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .53 GBC . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .39 Hecht, Karl . . . . . . . . . . . . . . . . .55 HiMedia . . . . . . . . . . . . . . . . . . .15 KIMES 2017 . . . . . . . . . . . . . . . .65 Labex . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22 LabMedica.com . . . . . . . . . . . . . .4 Lee Co., The . . . . . . . . . . . . . . .30 Linear . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41 Mast Group . . . . . . . . . . . . . . . .26 Mayo Clinic . . . . . . . . . . . . . . . .21 Medica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23 Medix Biochemica . . . . . . . . . . .44 MEDLAB 2017 . . . . . . . . . . . . . .56 Mindray . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27 Monlab . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .40

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I. TIPO DE LABORATORIO (a) (i) (c) (d) (f) (g) (l) (h) (t)

❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏

Laboratorio de Hospital Independiente/Laboratorio de Referencia Laboratorio de Banco de Sangre Laboratorio de Salud Pública Industrial/Laboratorio de Bioquímica Autoridad Gubernamental/Agencia de Salud Investigación/Laboratorio Educacional Distribuidor/Comerciante/Fabricante Otro Por favor especifíque: ...................................

VI. SEÑALE CON UN CIRCULO EL NUMERO CORRESPONDIENTE AL AVISO O ARTICULO SOBRE EL CUAL LE GUSTARIA RECIBIR INFORMACION. NO HAY LIMIT

II. SU TITULO O CARGO (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7)

❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏

Director de Laboratorio (s) Jefe de Depto./Supervisor Jefe Técnico Técnico Gerente/Administrador Practicante de Medicina Otro Por favor especifíque: ..............................

III. ¿Es usted Ph.D. o M.D?

❏ SI

IV. SU DEPARTAMENTO O ESPECIALIDAD (h) (b) (c) (d) (e) (p) (a) (o) (q) (r) (g) (k) (l) (m) (j) (t)

❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏ ❏

Diagnóstico en Laboratorio General Química Clínica/Bioquímica Microbiología Hematología Banco de Sangre Inmunología Anat. Patología Serología Histología Citología Toxicología Virología Oncología Endocrinología Administración/Depto.Compras Otro Por favor especifíque: ............................

V. ¿Cuántos otros lectores además de usted leeran este número de LME? ........................

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