MÉTODOS DE ANÁLISIS para IDENTIFICAR MICOTOXINAS MÉTODOS INMUNOQUÍMICOS
Las micotoxinas son metabolitos secundarios, de bajo peso molecular y
Las micotoxinas no son antigénicas
desafortunadamente los ensayos para
por lo que los primeros estudios
micotoxinas encierran diferentes problemas
que se desarrollaron se enfocaron
que abarcan desde contar con un laboratorio
en cómo lograr la conjugación
perfectamente bien equipado, en cuanto a instrumentación y capacidad analítica y personal con la suficiente experiencia en el manejo de muestras y estándares de referencia.
Las micotoxinas se detectan y cuantifican comúnmente en el alimento utilizando ensayos basados en anticuerpos y técnicas de cromatografía.
con proteínas o polipeptidos que pudieran servir como transportadores en las condiciones óptimas de producción de anticuerpos en conejos y en otros animales. Se han desarrollado diferentes tipos de inmunoensayos entre los que destacan los sistemas: ELISA (ensayos inmunologicos de enzimas ligadas)
TEST DE ELISA El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) es un ensayo basado en anticuerpos que se usa comúnmente para detectar micotoxinas. Se encuentran disponibles varios kits ELISA comerciales para
RIA (radioinmunoensayos)
Aflatoxinas, desoxinivalenol,
Columnas de inmunoafinidad
Zearalenona.
Fumonisinas, Ocratoxinas y
ELISA es uno de los métodos La mayoría de estos métodos
más asequibles para detectar
son muy sensibles, específicos
micotoxinas, pero el límite de
y fáciles de operar. Con lo que
detección a menudo supera
ha surgido una dimensión en
las 0.2 ppm para muchas
cuanto a la metodología para
micotoxinas.
análisis de micotoxinas.
MÉTODOS INSTRUMENTALES Cromatografías y espectometrías
ESPECTOMETRÍA DE MASAS
El empleo de las técnicas
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN
CROMATOGRAFÍA DE GASES
TÉCNICAS ESPECTOMÉTRICAS DE ABSORCIÓN Y EMISIÓN
cromatográficas requiere de
La espectrometría de masas (MS) es una técnica de análisis que permite determinar la distribución de
una preparación previa de
La cromatografía líquida de alta
La cromatografía de gases (GC)
Las técnicas espectrométricas de
las moléculas de una sustancia en
la muestra, empleándose
resolución (HPLC) constituye la
se emplea con menos frecuencia
absorción y emisión más empleadas
función de su masa
diferentes métodos de
técnica de elección para el análisis
debido a que la mayoría de las
son la detección ultravioleta (UV)
extracción y purificación
de micotoxinas, o para confirmación
micotoxinas no son suficientemente
y la fluorescencia (FL), siendo
HPLC y GC/MS requieren de un
dependiendo de las micotoxinas
de resultados positivos por ELISA,
volátiles y, por lo tanto, tienen que
preferible esta última cuando las
equipo costoso y soporte técnico,
a analizar y de la matriz
ya que son sensibles, reproducibles,
ser derivatizadas, incrementando el
micotoxinas presentan fluorescencia
además de que tienen un límite
alimentaria, como por ejemplo
exactos y presentan un mayor grado
tiempo de análisis.
natural.
de detección de < 0.05 ppm
las columnas de inmunoafinidad
de automatización.
u otros procedimientos basados en la extracción sólido-líquido (Quechers, DMFS, etc.) o
para muchas micotoxinas.
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA ACOPL ADA A UN DETECTOR DE ESPECTOMETRÍA DE MASAS EN TÁNDEM
líquido-líquido (DLLME). La cromatografía líquida acoplada
La cromatografía líquida combinada
a un detector de espectrometría
con espectrometría de masas en
de masas en tándem (LC-MS/
tándem (LC-MS/ MS) es hoy en
MS) permite el desarrollo de
día, el “estándar de oro”para la
métodos altamente sensibles y
evaluación de micotoxinas y la forma
La cromatografía de líquidos
selectivos, factibles de ser aplicados
más confiable para su cuantificación.
de alto rendimiento (HPLC)
en el análisis de metabolitos a
y la cromatografía de gases /
concentraciones muy bajas y en
espectrometría de masas (GC
muestras biológicas complejas.
/ MS) son dos de los métodos
Este sistema para cubrir todas las
más utilizados para la detección y
micotoxinas de interés y detectarlas
cuantificación de micotoxinas.
con la mayor sensibilidad, precisión y reproducibilidad .