EL MICROSCOPIO El microscopio proviene de los griegos: Micrós
pequeño
Scopéo
mirar
Es un instrumento que permite observar elementos que son demasiado pequeños a simple vista del ojo ocular, el microscopio más utilizado es el de tipo óptico, con el cual podemos observar desde una estructura de una célula hasta pequeños microorganismos, uno de los pioneros en observaciones de estructuras celulares es Roberth Hooke (1635 – 1703) científico inglés que fue reconocido y muy recordado por que observo finísimos cortes de corcho.
¿QUIEN Y EN QUE AÑO LO DESCUBRIÓ? El invento del microscopio se atribuye a Zacharias Janssen, un holandés que, posiblemente con la colaboración de su hermano padre, desarrolló el microscopio compuesto (con dos lentes) en 1590. Otras fuentes señalan que el inventor fueGalileo, en 1610, que incluso ya en la antigua Romahubo avances al respecto.
fabricante y de su el año y se sabe
PARTES DEL MICROSCOPIO
El sistema mecánico lo conforman: BRAZO.- Es la parte de donde se debe sujetar, las pinzas el carro el tubo del microscopio y el revólver. Además sirve para trasladar el microscopio de un lugar a otro.
BASE O PIE.- Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a todas las partes del microscopio. PLATINA.- Es una pieza metálica, cuadrada, que tiene en su centro una abertura circular por la que pasará la luz del sistema de iluminación. Aquí se coloca el portaobjetos con la muestra a observar. PINZAS DE SUJECIÓN.- Parte mecánica que sirve para sujetar la preparación. La mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance longitudinal y transversal de la preparación. TORNILLO MICROMÉTRICO.- Permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a observar. TORNILLO MICROMÉTRICO.- Parte mecánica de movimiento giratorio que nos permite colocar en posición cualquiera de los objetivos que se encuentran en él. TUBO.- Parte mecánica que proporciona sostén a los oculares y objetivos. CREMALLERA.- Permite que el movimiento de los tornillos macro y micrométrico sea de mayor o de menor amplitud. El sistema óptico: OCULAR.- Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que Capta y amplía la imagen formada en los objetivos. Los primeros microscopios eran monoculares, es decir, poseían una sola lente. Los microscopios actuales poseen dos oculares, uno para cada ojo
y
se
les
llama
binoculares.
OBJETIVOS.- Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeños cilindros colocados en el revolver que proporciona el poder de resolución del microscopio y determinan la cantidad total de aumento. El sistema iluminación: La fuente luminosa consiste en un espejo o una fuente de luz eléctrica que dirige un haz de luz hacia el condensador.
CONDENSADOR.- Es una lente de gran abertura que permite dirigir o condensar la mayor parte de los rayos luminosos en la preparación. En nuestro microscopio está integrado en la platina
y
tiene
un
diafragma
unido
en
la
parte
inferior.
DIAFRAGMA.- Existe un diafragma en el condensador, que elimina el exceso de luminosidad para tener una buena iluminación del objeto a observar. FUENTE DE LUZ.- Para observar la muestra microscópica es necesario que ésta se ilumine con algún tipo de luz y nuestros microscopios cuentan con un foco que da energía eléctrica que dirige sus rayos luminosos hacia el sistema condensador.
TIPOS DE MICROSCOPIO MICROSCOPIO ÓPTICO Un microscopio óptico es un microscopio basado en
lentes
ópticas.
MICROSCOPIO SIMPLE
Un microscopio simple es aquel que solo utiliza una lenta de aumento. El ejemplo más clásico es la lupa.
MICROSCOPIO COMPUESTO Un microscopio compuesto es un microscopio óptico que tiene más de un lente. Se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes y se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple
MICROSCOPIO DE LUZ ULTRAVIOLETA
vista.
La imagen en el microscopio de luz ultravioleta depende de la absorción de esa luz por las moléculas de la muestra. El microscopio de luz ultravioleta se utiliza en la investigación científica.
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA El microscopio de fluorescencia es una variación del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda.
Se
usa
para
detectar
sustancias
con
autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas
con
fluorocromos. MICROSCOPIO DE LUZ POLARIZADA Los microscopios de luz polarizada son microscopios a
los que se
les han añadido dos polarizadores (uno entre el
condensador
y la muestra y el otro entre la muestra y el observador),el material que se usa para ello es un cristal de cuarzo y un cristal de Nicol dejando pasar únicamente la luz que vibra en un único plano (luz polarizada).
MICROSCOPIO DE EFECTO TÚNEL El microscopio de efecto túnel es un poderoso instrumento que permite visualizar superficies a escala del átomo.
MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO El microscopio de campo oscuro utiliza un haz enfocado
de
intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el
espécimen. El
objeto iluminado dispersa la luz y se hace así visible
contra el fondo
oscuro que tiene detrás, como las partículas de polvo
iluminadas por
un rayo de sol que se cuela en una habitación cerrada.
luz
muy
MICROSCOPIO DE FASE La micróscopia de contraste de fases es útil para poner de manifiesto diferentes recorridos ópticos debidos a zonas de distinto índice de refracción o grosor, cuando estas diferencias son demasiados
pequeñas
para
ser
vistas
con
el
microscopio
normal. Además, resulta muy útil para el examen de
células
tejidos
emulsiones,
transparentes
vivos,
cristales,
plásticos,
y
etc. MICROSCOPIO ELECTRÓNICO Un microscopio electrónico es aquél que utiliza
electrones
lugar de fotones o luz visible para formar imágenes de
objetos
en
diminutos. Permiten alcanzar una capacidad de aumento muy superior a los microscopios convencionales, debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE BARRIDO El Microscopio electrónico de barrido, es aquel que usa electrones en lugar de luz para formar una imagen. Tiene una gran profundidad de campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la muestra.
MICROSCOPIO DE IONES EN CAMPO La microscopía de iones en campo (FIM) es una
técnica
analítica empleada en ciencia de materiales. Puede
ser usado para
visualizar la ordenación de los átomos que forman la
superficie de la
punta afilada de una aguja de metal.
MICROSCOPIO DE FUERZA ATÓMICA El Microscopio de fuerza atómica es un instrumento
mecano-
óptico capaz de detectar fuerzas del orden de los piconewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de
registrar
continuamente su topografía mediante una sonda o
punta
afilada de forma piramidal o cónica. MICROSCOPIO VIRTUAL
El
proyecto
Microscopio
Virtual
es
una
iniciativa
supervisada
por la Universidad Rutgers
MICROSCOPIO CONFOCAL Un microscopio confocal es un microscopio capaz de obtener imágenes tridimensionales de la célula.
MICROSCOPIO DE SONDA DE BARRIDO Un microscopio de sonda de barrido es aquel que tiene el
transmisor en la
parte exequimal del lente (Objetivo 4x). Este microscopio
utiliza una sonda
que recorre la superficie del objeto a estudiar. MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN Un
microscopio
electrónico
de
transmisión
es
un
microscopio que
utiliza un haz de electrones para visualizar un objeto, debido a que la potencia amplificadora de un microscopio óptico está limitada por la longitud de onda de la luz visible.
EL MICROSCOPIO Y SU CORRECTA MANIPULACIÓN El microscopio es un instrumento mecánico que permite la observación de elementos que no son visibles al ojo humano. El microscopio óptico compuesto binocular es el más usado en el campo médico, industrial, agropecuario y de acuacultura.
ESTRUCTURA DEL MICROSCOPIO Todo microscopio posee componentes que se agrupan en cuatro estructuras: 1. Estructura de soporte 1.1. Base 1.2. Brazo 1.3. Revolver 1.4. Platina 1.5. Platina metálica 2. Estructura de aumento 2.1. Oculares.- los oculares en el área externa tienen grabado la medida que puede ser:
de 10x o de 25x. para obtener el poder de aumento se multiplica la medida del ocular por la medida del objetivo que se está utilizando. 2.2. Objetivos.- estos generan una imagen real, invertida y amentada. Los más frecuentes
son los de 4x, 10x, 40x, y 100x aumentos. Este último se llama de inmersión, ya que para su empleo se utiliza aceite de cedro sobre la preparación. En la superficie de cada objetivo se apertura numérica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el número de aumentos (rojo 4x, amarillo 10x, azul 40x y blanco 100x). La distancia de operación del objetivo es la que existe entre la lente frontal del objetivo y el portaobjetos cuando la imagen se halla enfocada. A medida que el poder de aumento del objetivo es mayor, disminuye la distancia de operación.
Así, la distancia de operación del: Objetivo 10x es de 5 a 6 mm. Objetivo 40x es de 0,5 a 1,5 mm. Objetivo 100x es de 0,15 a 0,20 mm PODER DE RESOLUCIÓN Es la capacidad de poner de manifiesto detalles muy cercanos, separándolos y aclarándolos. Si la resolución es muy clara su imagen también lo será y el poder de resolución aumentara. 3. Estructura de iluminación 3.1. Fuente luminosa 3.2. Espejo 3.3. Condensador 3.4. Diafragma 3.5. Filtros 4. Estructura de ajuste 4.1. Tornillo macrométrico 4.2. Tornillo micrométrico 4.3. Tornillos de ajuste del condensador 4.4. Tornillos para centrar el condensador 4.5. Regulador del diafragma o iris 4.6. Reguladores de la platina mecánica
MANEJO DEL MICROSCOPIO
No solo es importante conocer las partes del microscopio, sino más aun, el saber manejarlo, de ahí, que es aconsejable tomar en cuenta las siguientes recomendaciones: Colocarlo en una superficie plana, encima de una tela gruesa, lejos de las ventanas y en
la sombra. Centra el condensador hasta que el circulo luminoso se encuentre exactamente en el
centro del campo microscópico. Ajusta el diafragma, para ello, ábrelo por completo, retira el ocular y observa directamente
a través del tubo del microscopio; la lente superior del objetivo aparecerá llena por el circulo luminoso. Cierra el diafragma poco a poco hasta que el circulo luminoso ocupe 2/3 de la superficie. Regula los oculares a tu conveniencia, para ello, debes ajustar la distancia entre las dos
pupilas. Enfoca los objetivos, para ello, desciende el condensador completamente y el objetivo
hasta por arriba de la preparación del portaobjeto. Con el macrométrico eleva el objetivo hasta observar una imagen clara a través del ocular. Si es necesario usa el micrométrico para obtener la imagen clara. Si la iluminación es insuficiente sube el condensador ligeramente. Para cuando requieras usar el objetivo de inmersión 100x Aplica aceite de inmersión sobre la preparación seca. Eleva el condensador y abre todo el diafragma. Baja el objetivo de 100x hasta que se ponga en contacto con el aceite Acerca el objetivo hacia el portaobjetos hasta donde sea posible, pero no lo presiones
sobre la preparación. Observa por el ocular y ayúdate con el micrométrico para mejorar la imagen.
Ten presente que el aceite de inmersión aumenta el poder de resolución de un microscopio al hacer que se conserven muchos rayos luminosos que se perderían por refracción al usar un objetivo seco.
¿Cómo se lee el campo microscópico? Se lo lee siguiendo la dirección de las manecillas del reloj. ¿Qué pasa con las imágenes? Las imágenes son invertidas por los lentes. Los objetos que se ven al fondo del campo se encuentran realmente en la parte más alta. Los objetos que se ven a lado izquierdo realmente se hallan en el derecho. Desplazamiento del objeto Si se mueve el portaobjeto hacia la derecha, el objeto examinado se desplaza hacia la izquierda. Si se mueve el portaobjeto hacia ti, el objeto examinado se alejara. Cambio de objetivos Si deseas cambiar de objetivo de menor a mayor poder de aumento, antes de cambiar los objetivos ve que el objeto examinado se encuentre en medio del campo microscópico, a fin de no perderlo después del cambio.
COMO CONSERVAR EL MICROSCOPIO Desconéctalo después de haberlo utilizado. Secar el objetivo de 100x si has utilizado aceite de inmersión. Mantenlo cubierto para evitar que el polvo lo dañe. Tápalo luego de usarlo. Terminado el trabajo del día, límpialo con aplicaciones de aire de la pera. Limpia los lentes con el papel adecuado, con papel higiénico (absorbente) o con gamuza
que no desprenda pelusa.
LO QUE NO DEBES HACER NUNCA Limpiar las lentes del objetivo y ocular con etanol.
Introducir los objetivos en xilol o etanol, se aflojaran los lentes. Usar papel ordinario o algodón para limpiar las lentes. Tocar con los dedos las lentes. Limpiar las partes del soporte o la platina con xilol. Limpiar las partes internas de las lentes con trapo o papel, usa un pincel o una brocha
fina. Sacar los oculares de su sitio y si lo haces coloca en los respectivos orificios. Coger al microscopio con una sola mano (coge con una mano el pie o base y con la otra
el brazo o bastidor).
TIPOS DE MICROSCOPIO Microscopio de campo oscuro Microscopio de contraste de fase Microscopio de luz ultravioleta Microscopio de transferencia Microscopio electrónico (microscopio de transmisión, microscopio electrónico de barrido) Microscopio invertido Microscopio estereoscópico