UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad, pertinencia y calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE TOXICOLOGIA
PRACTICA Nº BF.8.01-1
TEMA: SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS INTOXICACIONES, SINDROME TOXICOS, TOXICOS VOLATILES Y MINERALES. NOMBRE DE LA PRÁCTICA: INTOXICACION POR CLOROFORMO DATOS INFORMATIVOS: ALUMNA: Vanessa Gabriela Coello Jaén CARRERA: Bioquímica y farmacia
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CICLO/NIVEL: Octavo Semestre “B” DOCENTE RESPONSABLE: Dr. Carlos García
Animal de experimentación: Vísceras de pollo FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 7 de junio del 2017. FECHA DE ENTREGA DE LA PRÁCTICA: 14 de Junio del 2017 1. OBJETIVOS:
Observar la sintomatología que presenta las vísceras de pollo tras la intoxicación producida por cloroformo. Conocer las pruebas de identificación del cloroformo en el destilado en las vísceras de pollo.
2. FUNDAMENTO TEORICO El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, peropoco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble. El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de.identificación. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se
inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.
2442 mg/m3 (500 ppm) Peligroso para la vida. Respirar cerca de 900 ppm puede causar mareo Es un veneno por ingestion o inhalacion INTOXICACION POR CLROFORMO
3. RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS SUSTANCIAS E INSUMOS MATERIALES
EQUIPOS
SUSTANCIAS
MUESTRA
DE VIDRIO -Embudo -Tubos de ensayo -Pipetas -Vaso de precipitación -Agitador OTROS -Guantes -Mascarilla -Gorro -Mandil -Agitador -pinzas -Espátula -gradilla -Recipientes de aluminio -Papel filtro -Pinzas
-Soporte universal -Campana
-Formol - Alcohol 95% -Nitrato de plata -Potasa alcohólica 1:10 -Percloruro de hierro -β-naftol -Piridina -clorhidrato de piperacina -Yodo -Reactivo de Benedict
-Vísceras de animal de experimentación (pollo)
4. INSTRUCCIONES 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 5. 1. 2. 3. 4. 5.
6. 7.
8.
PROCEDIMIENTO Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Preparar 10mL de Cloroformo. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10mL de Cloroformo. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACION
Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de
piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. 7. GRAFICOS 1. Desmenuzar las vísceras de pollo
2. Aplicar el cloroformo en el tubo de ensayo
3. Aplicar las
vísceras de pollo en un tubo de ensayo
4.Filtración de las vísceras de pollo
5. Obtención de la que se realizaran identificación
solución madre con la las reacciones de
8. RESULTADOS
OBTENIDOS
Reacción de dunas ANTES Positivo característico (rojizo)
DESPUES Positivo no característico (negruzco)
Reacción de Lustgarten ANTES DESPUES Positivo característico (azul)
Reacción de fujiwara ANTES DESPUES Positivo característico (rosa rojizo)
Reacción de roseboom ANTES DESPUES Positivo característico (amarillo rojizo)
Reacción de Benedict ANTES DESPUES Positivo característico (gama de colores)
9. CONCLUSIONES Con la ayuda de la guía de la práctica y la realización de la práctica hemos conocido que el cloroformo es un toxico tan perjudicial para la vida que en casos extremos puede causar la muerte de quien lo inhale o lo ingiera. Con la
ayuda de las reacciones de identificación pudimos identificar la presencia del cloroformo. 10. RECOMENDACIONES Realizar la limpieza de la mesa de trabajo antes y después de la práctica. Aplicar las normas de bioseguridad en el laboratorio. Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de accidente que ponga en riesgo nuestra salud. Utilizar la campana de gases para evitar intoxicaciones. 11. CUESTIONARIO 1) ¿Cómo entra y sale el cloroformo del cuerpo? El cloroformo puede entrar a su cuerpo al inhalar aire, ingerir alimentos o beber agua que contenga esta sustancia química, además se introduce fácilmente a través de la piel. Por lo tanto, el cloroformo también puede entrar a su organismo si usted se baña con agua que contiene cloroformo. Además, usted puede inhalar cloroformo si el agua de la ducha es lo suficientemente caliente como para evaporar el cloroformo. Los estudios realizados en personas y animales muestran que si usted inhala aire o ingiere alimentos con cloroformo, esta sustancia química puede entrar rápidamente a su torrente sanguíneo desde los pulmones o los intestinos.[ CITATION Age16 \l 3082 ] 2) ¿Hay algún examen médico que determine si he estado expuesto al cloroformo? La medición del cloroformo en los líquidos y los tejidos del organismo puede ayudar a determinar si usted ha estado en contacto con grandes cantidades de cloroformo. Sin embargo, estas pruebas solo son de utilidad si se realizan poco después de que ha habido exposición, debido a que el cloroformo sale rápidamente del cuerpo. Pequeñas cantidades de cloroformo en el cuerpo pueden indicar que hubo una exposición a estas sustancias químicas y pueden no ser una señal de la presencia de niveles bajos de cloroformo en el medio ambiente. Las pruebas de sangre para medir la cantidad de enzimas del hígado pueden ayudar a saber si el hígado presenta daños, pero no se puede determinar si éstos fueron causados por el cloroformo.[ CITATION Age16 \l 3082 ] 3) ¿El agua clorada contiene cloroformo? Los resultados de los estudios en personas que bebieron agua clorada mostraron un vínculo posible entre el cloroformo del agua clorada y los casos de cáncer de colon y de la vejiga. Según estudios realizados se registró cáncer de hígado y de los riñones en las ratas y ratones que comieron o bebieron agua con cloroformo en grandes cantidades durante períodos prolongados de tiempo. No sabemos si las personas que beben agua con cloroformo durante mucho tiempo desarrollarán cáncer de hígado y riñones.[ CITATION Age16 \l 3082 ]
12. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Agencia para Sustancias Tóxicas y el Registro de Enfermedades. (6 de mayo de 2016). ATSDR. Recuperado el 13 de junio de 2017, de ATSDR: https://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs6.html Diaz, M. (8 de febrero de 1980). Recuperado el 13 de junio de 2017, de http://scihub.io/http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0304383580900890
13. ANEXOS
ARTICULO ACERCA DE: COVALENT BINDING OF CHLOROFORM METABOLITES TO NUCLEAR PROTEINS - NO EVIDENCE FOR BINDING TO NUCLEIC ACIDS [ CITATION Dia80 \l 3082 ]
REACCIÓN DE LUSTGARTEN
GLOSARIO Reacción de Benedict: Esta prueba sirve para el reconocimiento de azúcares reductores. Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Cloroformo: es un compuesto químico al que también se le conoce bajo nombres como triclorometano o tricloruro de metilo. Su fórmula química es CHCl3, y se presenta en estado líquido cuando lo tratamos a temperatura ambiente.
_________________ Vanessa Coello 0706367513