DEPARTAMENTO DE ENSAYOS BIOTECNOLOGICOS
INFORME DE RECONOCIMIENTO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS DATOS DE IDENTIFICACIÓN Grupo 3 - LACC2
[2013]
[I.E.S A SARDIÑEIRA ]
INFORME DE RECONOCIMIENTO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS DATOS DE IDENTIFICACIÓN Nombre: Lab.de Ensayos Biotecnológicos Centro: IES–A SardiñeiraDirección: Avenida de Sardiñeira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Coruña (A) Provincia: A Coruña Responsables: Pedro Ramón Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanessa Novás Velo, Elías Rivera Triana
PAGINA
1. GLUCIDOS -----------------------------------------------3 2. HIDROLISE DO ALMIDÓN-----------------------------4 3. LÍPIDOS----------------------------------------------------6 4. PROTEÍNAS-----------------------------------------------9 5. SALES MINERALES-------------------------------------11
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GLÚCIDOS RECONOCIMIENTO DEL PODER REDUCTOR DE LOS GLÚCIDOS A. Presencia/ausencia de poder reductor Numeramos tres tubos de ensayo y añadimos en cada uno: tubo 1: 2cm3 de glucosa + 1cm3 de Fehling A + 1cm3 Fehling B tubo 2: 2cm3 de fructosa + 1cm3 de Fehling A + 1cm3 de Fehling B tubo 3: 2cm3 de sacarosa + 1cm3 de Fehling A + 1cm3 de Fehling B ponemos os tres tubos en un baño termostático e observamos o que ocurre. Anotamos os resultados. B. Hidrolisis de la sacarosa a) Cogemos un nuevo tubo que numeramos coma tubo 4 e en el añadimos 2 cm3 de sacarosa e 10 pingas de ácido clorhídrico. Lo ponemos en un baño unos 5 minutos. b) Enfriamos y añadimos 10 pingas de NaOH al 10% para neutralizar o ácido. c) De seguido añadimos 1cm3 de Fehling A e 1cm3 de Fehling B. Calentamos de nuevo no baño y observamos lo que ocurre.
DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Glucosa; Sacarosa; Fructosa Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013 A)
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INFORME DE RECONOCIMIENTO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS DATOS DE IDENTIFICACIÓN Nombre: Lab.de Ensayos Biotecnológicos Centro: IES–A SardiñeiraDirección: Avenida de Sardiñeira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Coruña (A) Provincia: A Coruña Responsables: Pedro Ramón Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanessa Novás Velo, Elías Rivera Triana TUBO 1: (GLUCOSA) Al añadir el Fehiling A y B la solución se vuelve de color azul, debido a la presencia del Cu2+ del Fehiling. Al exponer la solución al calor del baño se vuelve de color rojiza por la oxidación delaldehído a carboxilo, produciéndose así la reducción del Cu2+. TUBO 2:(FRUCTOSA)Al añadir el Fehiling A y B la solución se vuelve de color azul, debido a la presencia del Cu2+ del Fehiling. Al exponer la solución al calor del baño se vuelve de color rojiza por la oxidación de la cetosa a carboxilo, produciéndose así la reducción del Cu2+. TUBO 3:(SACAROSA) Al añadir el Fehiling A y B la solución se vuelve de color azul, debido a la presencia del Cu2+ del Fehiling. Al exponer la solución al calor del baño no se produce ningún cambio aparente, ya que la sacarosa es un disacárido y no posee carácter reductor, por no poseer ningún carbono anomérico libre. B)
TUBO 1: (SACAROSA) Al añadirle las gotas de Ácido Clorhídrico y exponer la solución al calor del baño termostático, conseguimos separar las moléculas que forman el disacárido (glucosa+fructosa). Después de añadirle el Fehiling A y B cambia a color rojizo, pero no es permanente ya que añadimos NaOH para neutralizar el ácido y el poder reductor de los monosacáridos. Dejamos enfriar la solución y volvemos a meterla al baño, no se producen cambios la solución es transparente
HIDROLISE DO ALMIDÓN RECONOCIMIENTO DEL ALMIDÓN O amidón é un polisacárido de reserva en células vexetais. Para recoñecelo utilízase a solución do Lugol, (iodo e ioduro potásico en medio ácido). Ao engadires tal solución o amidón adquire unha coloración escura, azul-violeta. Esta coloración non xurde de ningunha reacción química senón que o Lugol adsórbese á superficie do amidón, de xeito que se o quentamos sepáranse e a coloración desaparece.
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INFORME DE RECONOCIMIENTO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS DATOS DE IDENTIFICACIÓN Nombre: Lab.de Ensayos Biotecnológicos Centro: IES–A SardiñeiraDirección: Avenida de Sardiñeira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Coruña (A) Provincia: A Coruña Responsables: Pedro Ramón Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanessa Novás Velo, Elías Rivera Triana O amidón, cando se hidroliza libera amilosa e amilopeptina, se a hidrólise prosigue vanse ceibando oligosacáridos de glucosa ata que finalmente se ceibarían as propias moléculas de glucosa. A) Reconocimiento del almidón Tomamos no tubo de ensayo #1 2mL de la solución de almidón e añadimos 2 o 3 gotas de Lugol. Observamos e anotamos la coloración. A continuacióncalentamos el tubo en el baño. Observamos lo que ocurre e anotamos os resultados. También podemos reconocer o almidón en muestras vegetales o mismo en alimentos. - Tomamos una patata pelada yel líquido de raspado da su superficie yponemos un poco sobre un portaobjetos. Engadimos un poco de Lugol e observamos no microscopio a forma dos granos de almidón. Cumple haceruna observación antes de añadir o Lugol. Registra a observación. - Toma un poco de mortadela (mejora de calidadmás baja) e deposita 1 o 2 gotas de Lugol sobre a su superficie. Observa e anota os resultados. B) Hidrólisis delalmidón En el organismo la hidrólisis de este polisacárido comienza en la boca debido a la presencia en la saliva de una enzima: a amilasa. Para saber se a hidrólisistuvo lugar cumple tener un método que diferencie o almidón do su hidrolizado. Para eso vamosa comprobar si elalmidón tiene poder reductor utilizando o reactivo de Fehling. - En el tubo #2 engadimos 2 mL de la solución de almidón+1ml de Fehling A+ 1ml de Fehling B. Calentamos en el baño y observamos. - Tomamos o tubo #3 e engadimos 2mL de almidón+saliva; para que la hidrólisis se vea favorecida calentamos o tubo con las manos o bien en el baño y dejamos transcurrir unos 10 minutos. De seguido engadimos 1 mL do reactivo de Fehling A e B, calentamos. Observamos y anotamos os resultados.
DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Patata Referencia de la muestra: HIDROLISI DO ALMIDÓN /LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013
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RECONOCIMIENTO E HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN Mezcla del amidon mas lugo, obtenemos un color oscuro “violeta” y si lo calentamos a blanquecino nos cambia. Posteriormente observamos en el microscopio con dos alternativas: Con lugol Apreciacion de la tinción en los granos dando lugar a una mejor visión y definición de la forma del grano. Sin lugol Especie de granos redondos marrones con mucho liquido alrededor.
LÍPIDOS Los lípidos más abundantes son los que poseen ácidos grasos, es decir, los lípidos saponificables. Entre ellos los triglicéridos (grasa y aceites) son los más característicos. Los lípidos saponificables como los triglicéridos deben ese nombre a que pueden ser sustratos de una reacción de hidrólisis alcalina llamada saponificación, que libera jabón y glicerina, el jabón no es otra cosa que una sal de un ácido graso. La característica común de todos los lípidos es que son insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos, por ejemplo el benceno.
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INFORME DE RECONOCIMIENTO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS DATOS DE IDENTIFICACIÓN Nombre: Lab.de Ensayos Biotecnológicos Centro: IES–A SardiñeiraDirección: Avenida de Sardiñeira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Coruña (A) Provincia: A Coruña Responsables: Pedro Ramón Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanessa Novás Velo, Elías Rivera Triana RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS El reconocimiento de los lípidos se hace con colorante Sudán III que tinta las grasas selectivamente de color rojo -anaranjado. Ponemos en un tubo 6mL de leche entera y añadimos de cuatro a 6 gotas de Sudán III. Agitamos y observamos y anotamos los resultados. Repetimos el proceso pero en este caso utilizando leche desnatada.
DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Leche entera/desnatada Referencia de la muestra: ANÁLISIS LÍPIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013 Observaciones:Después de realizar el análisis la leche entera queda de un rosa claro y la leche desnatada de un rosa aún un poco más oscuro, esto debería de ser al revés debido a que en la leche entera tiene más grasa que la leche desnatada.
REACCIÓN DE SAPONIFICACIÓN Ponemos en un tubo de ensayo 3mL de aceite y 3mL de NaOH al 30%. Tapamos un tapón y agitamos enérgicamente. Se coloca en el baño termostático y esperamos 40 minutos para que se forme el jabón, después de transcurrido este tiempo se quita del baño termostático y se registran los resultados.
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SOLUBILIDAD DE LOS LÍPIDOS Y EMULSIONES En un tubo de ensayo, rotulado como 1, se introducen 1mL de aceite + 1 gota de Sudán III + 10mL de acetona (es específica para los lípidos por lo que los teñirá el aceite y va hacer fácil la observación). Tapamos el tubo de ensayo y agitamos enérgicamente. Esperamos unos segundos y observamos lo ocurrido y registramos los resultados. Para observar las emulsiones tomamos los tubos de ensayo 2 y 3 y añadimos a cada uno 10mL de agua + 1mL de aceite + 1 gota de Sudán. En el tubo 3, además, añadimos un poco de jabón líquido, tapamos y agitamos los dos tubos, dejamos reposar y observamos lo ocurrido y registramos los resultados.
DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Aceite Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013
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Tubo 1: queda de color anaranjado, en el fondo del tubo queda el aceite, viscoso y denso y la acetona queda en la parte superior. Tubo 2: queda el agua en la parte inferior del tubo y en la superior queda una capa de aceite. Emulsión transistoria. Tubo 3: queda de color verde por el fairy en la parte inferior, en la parte central queda una capa de aceite y en la superior queda la espuma del jabón. Emulsión permanente.
PROTEÍNAS IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS -
Ponemos en un tubo de ensayo 3mL da solución de albúmina + 3mL de sosa al 20% + 5 pingas do reactivo de Fehling A (sulfato cúprico).
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En la imagen podemos observar dos casos. En el primer tuvo (color verde) se colocaron 3 ml de una solución de clara y yema de huevo a la que se le añadieron 3 ml de NaOH y 5 gotas de Fehiling A, dada la coloración no podemos estar seguros de que se haya formado la sustancia biuret. Por lo tanto, se prepara otra solución de 3 ml pero en este caso solo la clara del huevo. Después de añadir los reactivos, la solución de albumina en este caso toma una coloración azul violácea manifestándose así la formación del biuret.
DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Solución de albúmina/clara de huevo Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013
DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS -
No tubo de ensayo #1 ponemos 3mL de solución de albúmina. Lo ponemos en el baño y observamos. No tubo #2 añadimos 3mL de solución de albúmina e 12 pingas de ácido nítrico al 20%.
TUBO 1: Se colocan 3 ml de una solución de yema y clara de huevo, sometemos esta solución a calor en el baño termostático. Al sacarla del baño observamos que se forma una especie de gelatina blanca la cual nos indica la desnaturalización de la proteína del huevo. (Contenida en la clara) TUBO 2:Se colocan 3 ml de una solución de yema y clara de huevo, se le añade 12 gotas de una disolución de ácido clorhídrico al 20%. Al exponer la solución a un cambio de pH se produce la desnaturalización de la proteína, la cual apreciamos por la formación de una sustancia compacta (la cual suponemos que es la clara del huevo) sobre la yema.
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DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Solución de albúmina/clara de huevo Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013
IDENTIFICACIÓN DE LA CATALASA POR SU ACTIVIDAD A) Cortamos una zanahoria o un tomate. - Ponemos unas gotas de agua oxigenada en el corte. B) Repetimos a operación pero, en este caso, previamente calentamos en la llama la navaja o el cuchillo durante un tempo. En el caso A) al cortar la zanahoria y echarle las gotas de H2O2 se aprecia como hay una formación de un gas, el cual deducimos que es CO2 por la reacción de la catalasa. En el caso B) también se aprecia como hay una formación de un gas, el cual deducimos que es CO2 por la reacción de la catalasa.
DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Zanahoria Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013
SALES MINERALES IDENTIFICACIÓN DE LA PRESENCIA DE CaCO3 EN UNA CONCHA DE MOLUSCO Tomar un anaco de cuncha de mixilón. 1. Cun contapingas botarlle enriba unhas pingas de ácido clorhídrico concentrado. 2. Apreciarase unha esfervescencia ou burbulleo debido ao desprendemento de dióxido de carbono ao reaccionares o carbonato cálcico da cuncha co ácido segundo a seguinte reacción: CaCO3 + 2HCl → CO2 + H2O + CaCl2
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DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Concha de mejillón Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013 Observaciones: Se produce gas CO2 al añadir el H2O2.
IDENTIFICACIÓN DE SALES MINERALES EN EL SUERO DE LA LECHE O leite contén unha proteína chamada Caseína que o precipitares (por desnaturalización) forma o que se coñece como callado; este procedemento úsase para a producción, por exemplo do iogur. A parte líquida que queda ao precipitares a proteína chámaselle soro. Procedemento Temos que separa o soro do leite previamente antes de anlizalo, para eso mezclamos 3 ml da NAOH,sudan III con 3ml de leite.unha vez obtido os suero seperamolo en dous tubos. Tubo #1: engadese 2mL de oxalato de amonio ao 1%. Se o soro contén calcio aparecerá un precipitado de oxalato de calcio. Tubo #2: engade unhas pingas de solución de nitrato de plata; se hai cloruros aparecerá un precipitado de nitrato de sodio de cor branca. Observa e rexistra os resultados.
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DATOS DE IDENTIFICACIÓN DE LA MUESTRA Naturaleza: Leche Referencia de la muestra: ANÁLISIS GLÚCIDOS/LACC2/M3/001/03.10.13 Fecha de toma de muestra: 03/10/2013 Fecha de Análisis de muestra: 03/10/2013 Observaciones: Al añadir a cada tubo su solución correspondiente se observa un precipitado blanco, uno de ellos sera precipitado de oxalato de calcio y el otro de nitrato de sodio.
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