UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS
SEGUNDO TRIMESTRE NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 05 de Agosto del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 12 El Docente nos comienza explicándonos como vamos a realizar la práctica en el Laboratorio de Control de medicamentos. Antes de empezar la práctica debemos estar bien protegidos es decir colocarnos nuestra respectiva bata de laboratorio, gorro, guantes, mascarilla y zapatones para evitar cualquier contaminación. Limpiamos nuestro lugar de trabajo y procedemos a realizar la práctica con la Técnica dictada por el Docente. TEMA: DOSIFICACIÓN DE DICLOFENACO SÒDICO, ACETATO SÒDICO (2,6-DICLOROANILINO) FENIL NOMBRE COMERCIAL: Diclofenaco. LABORATORIO FABRICANTE: La Santè. PRINCIPIO ACTIVO: Diclofenaco Sódico. FORMA FARMACÉUTICA: Sólida CONCENTRACIÒN DEL PRINCIPIO ACTIVO: 50 mg Realizamos los diferentes Ensayos establecidos en la Farmacopea: 1. PROCEDIMIENTO GRUPO N°1: SOLUBILIDAD
Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. Rotular 3 tubos de ensayo con el nombre de las sustancias que se va a realizar el ensayo: alcohol, agua, formol. Triturar 5 tabletas en un mortero para obtener la muestra en polvo. Colocar aproximadamente 4ml el alcohol, agua y formol respectivamente en los tubos previamente rotulados. Agregar 0.1 g de muestra (diclofenaco) cada sustancia correspondiente Agitar por 5 minutos aproximadamente, observar la solubilidad del fármaco y reportar. GRUPO N°2: pH Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. Triturar 5 tabletas en un mortero para obtener la muestra en polvo. Colocar aproximadamente 30 ml de agua destilada en vaso de precipitación y agregar la muestra de diclofenaco sódico en plovo Disolver con la ayuda de un agitador Introducir el electrodo del pHmetro para determinar si el valor de pH del fármaco se encuentra dentro del rango establecido (7,0 y 8,5, determinado sobre una solución al 1 %.) GRUPO N°3: TRANSPARENCIA Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. Triturar 5 tabletas en un mortero para obtener la muestra en polvo. Rotular los tubos de ensayo en los cuales se va a colocar la solución patrón y la muestra. Agregamos en el primer tubo de ensayo 1ml de la solución patrón (metanol) Posteriormente en otro tubo de ensayo colocamos 1 ml de metanol más 0.5g de muestra y añadimos amoniaco para presenciar el cambio de coloración. GRUPO N°4: PERDIDA DE SECADO Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. Triturar 10 tabletas en un mortero para obtener la muestra en polvo. Pesar 2g de muestra (diclofenaco sódico) y colocar en un crisol o capsula de porcelana Llevar a la estufa a una temperatura de 105 o 110 °C durante 3 horas Determinar la perdida de secado por diferencia de pesos. GRUPO N°5: VALORACIÒN I
Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. Triturar 10 tabletas en un mortero para obtener la muestra en polvo. Pesar 10mg (0.01 g) de principio activo y disolverlo en 1 ml de ácido acético glacial. Agregar 1 gota de cristal violeta y titular con ácido perclórico Tomar nota del punto de viraje para realizar los cálculos correspondientes GRUPO N°6: VALORACIÒN II (titulación no acuosa) Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la realizara y así mismo tener los materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica. Triturar 10 tabletas en un mortero para obtener la muestra en polvo. Pesar una cantidad de polvo equivalente a 25mg (0.5 g) pesados con exactitud. En un vaso de precipitación disolverlo con 25 ml de ácido acético glacial y titular con ácido perclórico 0.1N. Tomar nota del punto de viraje para realizar los cálculos correspondientes
GRÀFICOS
TABLETAS Diclofenaco Sodico
TRITURACION PESAR LA MUESTRA
rotular los tubos para colocar la solucion patron.
resultados transparente.
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 12 de Agosto del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 13 Esta práctica la subimos al drive ya que por motivos que no hubo asistencia ya que fue día feriado no la pudimos elaborar ni presentar físicamente en el laboratorio TEMA: DOSIFICACIÓN DEL CITRATO DE PIPERAZINA NOMBRE COMERCIAL: PIPERAZINA NF LABORATORIO FABRICANTE: KRONOS LAB PRINCIPIO ACTIVO: Citrato de piperazina CONCENTRACIÒN DE PRINCIPIO ACTIVO: 13.2 mg FORMA FARMACÈUTICA: lìquida
REALIZAMOS LOS FARMACOPEA
DIFERENTES
ENSAYOS
ESTABLECIDOS
EN
LA
GRUPO N°1: SOLUBILIDAD Tomar tres tubos de ensayo rotular colocando agua, alcohol y formol Agregar a cada tubo 2ml de disolvente que corresponde. Verter a cada tubo 2 ml de jarabe de citrato de piperazina. Mezclar y valorar la solubilidad (según la tabla de parámetros) GRUPO N°2: VALORACIÒN Disolver la muestra (citrato de piperazina) con 40 ml de ácido acético glacial. Adicionar 3 gotas del indicador cristal violeta Titular con solución de ácido perclórico 0.1 N hasta coloración azul que indica el punto final de titulación, si la muestra es líquida se toma 1 ml se coloca a baño maria en un vaso de precipitación y le agregamos 4 ml de ácido acético glacial y titulamos con ácido perclórico 0.1 N hasta coloración azul que indica el punto
final de titulación, cada 1 ml de ácido perclórico equivale a 10.71 mg de citrato de piperazina. GRUPO N°5: pH Agregamos cierta cantidad de muestra a un vaso de precipitación y luego medimos el pH con el respectivo pHmetro. Verificamos si cumple con los parámetros establecidos. GRUPO N°6: DISOLUCIÒN Disolver 12.5 g de sustancia a examinar en agua y diluir hasta 25 ml con el mismo disolvente.
7.)
GRÀFICOS
1. Calentar la muestra hasta desecacion.
2. Agregamos el acido acetico glacial.
3. Agregamos el indicador de cristal violeta
4.Enceramos la bureta con acido acetico glacial
5. Procedemos a realizar la valoracion de la muestra.
6. Obtenemos punto final titulacion.
el de
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 19 de Agosto del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 14 DATOS DE LA PRÀCTICA TEMA: Evaluación de Calidad del Gluconato de Calcio por Complexometrìa NOMBRE COMERCIAL: Gluconato de Calcio LABORATORIO FABRICANTE: Sandersòn S.A PRINCIPIO ACTIVO: Gluconato de Calcio CONCENTRACIÒN DE PRINCIPIO ACTIVO: (10%) 10 ml FORMA FARMACÈUTICA: líquida El gluconato de calcio es una sal de calcio y ácido glucónico indicado como suplemento mineral.El gluconato de calcio en solución al 10% es la presentación del calcio más utilizado en el tratamiento de la hipocalcemia. Esta forma de calcio es superior al del lactato de calcio, aunque sólo contiene 0,93% (930 mg/100ml) de iones de calcio. OBJETIVOS: Comprobar el Control de Calidad de la Ampolla de Gluconato de Calcio por el método de Permanganometrìa. PROCEDIMIENTO: Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos para la realización de la práctica. Seguidamente medir una cantidad de muestra del medicamento y analizar que contenga aproximadamente 200mg de p.a (gluconato de calcio). Medir 2ml de Gluconato de Calcio. Luego adicionamos 10 ml de agua destilada. Se procede a disolver la cantidad medida de Gluconato de Calcio con los 12 ml de NaOH 2N Adicionar una gota de indicador Murexide. Agitamos la solución
Procedemos a titular con solución de EDTA 0.1N hasta que se produzca una coloración morada o violeta que indica el punto final de la titulación. Finalmente con el viraje obtenido se procede al realizar los cálculos. Indagación: Como datos tenemos que 1ml de EDTA 0.1N equivale a 40,08 mg de Gluconato de Calcio, y que los parámetros referenciales son del 90 – 110%. Realizar los cálculos para establecer el porcentaje real de Gluconato de Calcio. Determinar si la ampolla cumple con las normas de la farmacopea.
GRÁFICOS: Adicionamos 10ml de agua destilada
Medir 2ml de muestra
Adicionar Muraxide
Titular
Adicionamos 12 ml de NaOH 2N
Punto final de titulación cambio de coloración
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Muestra inicial Antes de la titulación
Reacción con solución de EDTA 0.1N
Reacción
Positivo
Antes
coloración morada o violeta
Después
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 26 de Agosto del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 15 TEMA: Evaluación de Calidad del Gluconato de Calcio por Permanganometrìa NOMBRE COMERCIAL: Gluconato de Calcio LABORATORIO FABRICANTE: Sandersòn S.A PRINCIPIO ACTIVO: Gluconato de Calcio CONCENTRACIÒN DE PRINCIPIO ACTIVO: (10%) 10 ml FORMA FARMACÈUTICA: líquida El gluconato de calcio es una sal de calcio y ácido glucónico indicado como suplemento mineral. El gluconato de calcio en solución al 10% es la presentación del calcio más utilizado en el tratamiento de la hipocalcemia. Esta forma de calcio es superior al del lactato de calcio, aunque sólo contiene 0,93% (930 mg/100ml) de iones de calcio. REALIZAMOS LOS DIFERENTES ENSAYOS QUE SE ENCUENTRAN EN LA FARMACOPEA pH (Farmacopea Argentina) 1.
Con la ayuda de una pipeta tomar 5mL de muestra (Ampolla de Gluconato de Calcio) 2. Colocarla en un vaso de precipitación y agregar 5 mL de agua destilada 3. Introducimos el peachímetro en la muestra y así obtendremos el resultado. 4. RESULTADOS:
El pH de la muestra fue de 6.47, resultado favorable ya que se encuentra entre el rango establecido de 6.0 -8.2
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 02 de Septiembre del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 16 TEMA: Evaluación de Calidad de Metionina NOMBRE COMERCIAL: Hidagan LABORATORIO FABRICANTE: Dr. A. Bjarner C.A PRINCIPIO ACTIVO: Metionina CONCENTRACIÒN DE PRINCIPIO ACTIVO: 100 mg FORMA FARMACÈUTICA: Sólida En su forma natural la L-metionina es un aminoácido proteinogenico. Es uno de los aminoácidos esenciales y no puede ser sintetizados por el propio organismo. Por lo tanto, su ingesta adecuada a través de la dieta o mediante los suplementos alimenticios es de crucial importancia.Compuestos de azufre están presentes en todos los seres vivos y tienen una variedad de funciones. Junto a la cisteína, la metionina es el único aminoácido con contenido de azufre, por ello la metionina juega un papel importante en la síntesis de muchas proteínas importantes, como la carnitina o la melatonina, igualmente interviene en la disoluciónde grasa y limita la acumulación de grasa en el hígado. OBJETIVOS: Determinar la cantidad de Metionina (Principio Activo) contenida en una forma farmacéutica sólida Realizar el control de calidad de Metionina para verificar si se encuentra dentro de los parámetros de Referencia 98-101,5 % como indica la técnica. REALIZAR LOS DIFERENTES ENSAYOS QUE SE ENCUENTRAN EN LA FARMACOPEA DETERMINACIÓN DEL PH
PROCEDIMIENTO: Determinado sobre una solución de 1g. de Metionina DL en 50 mL. de agua libre de CO2.
GRÀFICOS:
2. Preparamos solución 1g/50 mL. Metionina.
1. Trituramos la muestra.
3. Observamos las condiciones del peachímetro, lavamos el electrodo y medimos.
4. Obtenemos los resultados de la medición.
5. Limpiamos el electrodo y guardamos el equipo.
RESULTADOS:
El pH de la muestra fue de 4.46; el rango establecido de 5.4 - 6.1. ENSAYO # 2 ENSAYO DE CARACTERES GENERALES 1. Triturar el P.A para observar los caracteres generales. 2. Colocar 15 ml de NaOH en vaso de precipitación y 15 ml de H 2SO4 2M en otro vaso. 3. Agregar 10 ml de agua destilada. 4. Agregar el comprimido en cada vaso y observar si es soluble. 5. En otro vaso agregar agua destilada y el comprimido, observar si es soluble. 6. Colocamos un P.A en un crisol y observamos si se funde aproximadamente a 270 °C. GRÀFICOS
muestra metionina
medir 5ml de agua destilada
observamos si se disuelve
coloca mos el p.a en un crisol
llevamos a la mufl a
a gregamos
observamos si se funde a 270 ° C.
observamos si s e disuelve
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 09 de Septiembre del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 17 TEMA: Evaluación de Calidad de la Vitamina C NOMBRE COMERCIAL: Redoxòn LABORATORIO FABRICANTE: Bayer PRINCIPIO ACTIVO: Vitamina C CONCENTRACIÒN DE PRINCIPIO ACTIVO: 1 g FORMA FARMACÈUTICA: Sólida (comprimido) La vitamina C, conocida como ácido ascórbico, es un nutriente hidrosoluble que se encuentra en ciertos alimentos. En el cuerpo, actúa como antioxidante, al ayudar a proteger las células contra los daños causados por los radicales libres. Los radicales libres son compuestos que se forman cuando el cuerpo convierte los alimentos que consumimos en energía.
Titulación Pesar aproximadamente, una cantidad de polvo equivalente a 100 mg de p.a, disolver con 50 ml de agua libre de Co2 y fría y 10 ml de ácido sulfúrico 6 molar, titular con solución indicadora de almidón en la proximidad del punto final hasta formación de una coloración azul oscuro dado por el yodo y persistente por más de 10 seg. Cada ml de yodo 0.1 N equivalen con 8.806 mg de vitamina c y los parámetros de referencia son 90-110 %. GRÀFICOS:
Pesar 0,1 g de Vitamina C
Disolver con 50 ml de agua libre de CO2
Disolver con 10 ml de ácido sulfúrico
Añadir 1 ml de indicador almidón y Titular
Antes
Después
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 16 de Septiembre del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 18 TEMA: Evaluación de Calidad de la Vitamina C Método 2 NOMBRE COMERCIAL: Redoxòn LABORATORIO FABRICANTE: Bayer PRINCIPIO ACTIVO: Vitamina C CONCENTRACIÒN DE PRINCIPIO ACTIVO: 1 g FORMA FARMACÈUTICA: Sólida (comprimido) La vitamina C, conocida como ácido ascórbico, es un nutriente hidrosoluble que se encuentra en ciertos alimentos. En el cuerpo, actúa como antioxidante, al ayudar a proteger las células contra los daños causados por los radicales libres. Los radicales libres son compuestos que se forman cuando el cuerpo convierte los alimentos que consumimos en energía. PROCEDIMIENTO: Desinfectar el área de trabajo y tener todos los materiales listos para la realización de la práctica. Pesar o medir aproximadamente una cantidad de polvo equivalente a 180 mg de principio activo (Vitamina C) y transferir a un Erlenmeyer de 250 ml. A cada muestra le agregamos 100 ml de agua desionizada Se agrega 25 ml de H2SO4 2 N, agitar mecánicamente durante 15 min Agregar 3 ml de solución de almidón TS y se agita. Se titula de inmediato con una solución de Yodo SV hasta un cambio de coloración a azul intenso o violeta. Se realizaran los respectivos cálculos.
GRÀFICOS:
1. Pesar las tabletas para obtener el peso promedio
2. Pulverizar y pesar una cantidad equivalente a 100
3. Disolver con 50 ml de agua destilada
4. Agregar 10 ml de ácido sulfúrico 6 N
5. Titular con una soluc. de yodo 0.1N y añadir 1ml de almidón
CÀLCULOS JUGO DE NARANJA (CIFRUT) 1. CÀLCULO DE LA CANTIDAD A TRABAJAR 30 g Vitamina C 100 ml 0,18 g Vitamina C X X = 0.6 ml de cifrut 2. CONSUMO TEORICO 1ml Sol. Yodo 0.1N 8.806mg P.A X 180 mg p.a. X = 20.44 ml Sol. Yodo 0.1 N 3. % TEORICO 1ml Sol. Yodo 0.1N 8.806 mg Vitamina C 20.44 ml Sol. Yodo 0.1 N X mg Vitamina C X = 179.99 mg Vitamina C 180.mg Vitamina C 179.99 mg Vitamina C X = 99.99 %
100% X
4. CONSUMO REAL (CR) CR= 0.5 ml sol. Yodo 0.1 N x 1.001 CR= 0.50 ml sol. Yodo 0.1 N
5. % REAL (%R) 1 ml de sol Yodo 0.1N 8.806 mg Vitamina C 0.50 ml sol Yodod 0.1N X X = 4.403 mg Vitamina C 180 mg Vitamina C 4.403 mg Vitamina C X = 2.446 %
100% X
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 23 de Septiembre del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 19 REALIZAMOS UN ENSAYO DE UN PRINCIPIO ACTIVO CARBAMAZEPINA Este ensayo fue realizado mediante la investigación en las diferentes farmacopeas y artículos científicos.
CARBAMAZEPINA
C15H12N2O La carbamazepina es un fármaco anticonvulsivo y estabilizador del estado de ánimo utilizado, principalmente, para controlar las crisis epilépticas y el trastorno bipolar. Este fármaco es un anticonvulsivante, relacionado químicamente con los antidepresivos tricíclicos. En algunas ocasiones se utiliza para tratar la esquizofrenia y la neuralgia del trigémino, aunque también se ha mostrado efectivo en el tratamiento del Trastorno explosivo intermitente (TEI) y de los dolores provocados por las disfunciones de la glándula tiroides. La carbamazepina fue descubierta por el químico helvético Walter Schindler de J.R. Geigy AG (en la actualidad parte de Novartis) en Basilea, Suiza, en 1953. Schindler logró sintetizar la droga en 1960 antes de que sus efectos antiepilépticos fuesen descubiertos.
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 30 de Septiembre del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 20 NOMBRE DE LA PRÁCTICA: PATRONES DE CALIDAD, NORMALIZACIÒN, CAMPOS DE NORMALIZACIÒN DATOS DE LA PRÀCTICA TEMA: Evaluación de Calidad de la Vitamina C por el método de Yodimetrìa Fruta de Experimentación: Sandia Ecuatoriana y Peruana Vegetal de Experimentación: Pimientos verdes El pimiento destaca por su alto contenido en vitamina C y vitamina B6, la cual es fundamental tanto para la parte cerebral como para el sistema nervioso central en sí. Destaca también por su alto contenido en betacaroteno (que al entrar en el organismo se transforma en vitamina A) y vitaminas del grupo B2 (además de vitamina E). Por ello, es ideal para prevenir la aparición de enfermedades degenerativas y crónicas. PROCEDIMIENTO: 1. 2. 3. 4. 5.
Pesar 100 gramos de cada fruta (pimiento). Obtener zumo de los frutos y disolver con 50 ml de agua destilada. Añadir 25 ml de ácido sulfúrico 2N, agitar durante algunos minutos. Añadir 3 ml de solución de almidón como indicador. Titular con una solución de yodo 0.1N hasta punto final de titulación color (azulvioleta). 6. Realizar respectivos cálculos.VALOR DE REFERENCIA: 1ml de yodo 0.1N = 8.806 mg de vitamina C.
GRÁFICOS:
UNIVERSIDAD TÈCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÈMICA DE CIENCIAS QUÌMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÌMICA Y FARMACIA CONTROL DE MEDICAMENTOS NOMBRE: Ana Marcela Orellana Jaramillo CURSO: 5 to Año “B” FECHA: 07 de Octubre del 2016 PROFESOR: B.F Carlos García Msc
DIARIO DE CAMPO 21 REALIZAMOS UN ENSAYO DE UN PRINCIPIO ACTIVO ÀCIDO FOSFÒRICO Definición Ácido Fólico es ÁcidoN -[4[[(2-amino-1,4-dihidro-6pteridinil)metil]amino]benzoil]-L -glutámico. Debe contener no menos de97,0 por ciento y no más de 102,0 por ciento deC19H19N7O6, calculado sobre la sustancia anhidra ydebe cumplir con las siguientes especificaciones. Caracteres generales - Polvo cristalino amari-llo, amarillo pardo o amarillo anaranjado, inodoro.Soluble en ácido clorhídrico 3 N caliente, en ácidosulfúrico 2 N caliente y en ácido clorhídrico dasoluciones de color amarillo pálido. Fácilmentesoluble en soluciones diluidas de hidróxidos y car-bonatos alcalinos; muy poco soluble en agua; inso-luble en acetona, alcohol, cloroformo y éter. Sustancia de referencia -Ácido Fóli-co SR-FA.CONSERVACIÓN En envases inactínicos bien cerrados. ENSAYOS Identificación A - Absorción ultravioleta <470>Solvente : solución de hidróxido de sodio 1 en 250. Concentración : 10 µg por ml. Relación de absorbancias : A 256 / A 365 entre 2,80 y 3,00. B - Disolver 250 mg de Ácido Fólico en hidróxido de sodio 0,1 N y diluir a 25 ml con el mismo solvente. La rotación específica (ver 170. Determinación de la rotación óptica ) debe ser aproximadamente + 20°, calculada con respecto a la sustancia anhidra. Determinación de agua <120> Titulación volumétrica directa. Agitar el meta- nol antes, durante el agregado de la muestra y en la determinación. No más de 8,5 %. Determinación del residuo de ignición <270> No más de 0,3 %. Pureza cromatográfica [NOTA: emplear materiales de vidrio inactíni- co]. Sistema cromatográfico, Solución de ácido fosfórico 3 N , Solución de hidróxido de amonio 6 N , Fase móvil, Solución del estándar interno , Solución madre del estándar ,
Preparación estándar y Aptitud del sistema - Proceder según se indica en Valoración. Solución muestra - Emplear la Solución madre de la muestra preparada según se indica en Valora- ción. Procedimiento - Inyectar en el cromatógrafo aproximadamente 10 µl de la Solución muestra. Desarrollar los cromatogramas durante al menos dos veces el tiempo de retención del ácido fólico. Registrar los cromatogramas y medir las respuestas de todos los picos. La suma de las respuestas de todos los picos, excepto el correspondiente al ácido fólico, no debe ser mayor de 2,0 %. Impurezas orgánicas volátiles <520> Método II . VALORACIÓN: emplear materiales de vidrio inactínico. Sistema cromatográfico - Emplear un equipo para cromatografía de líquidos con un detector ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de 25 cm × 4,0 mm con fase estacionaria constituida por octadecilsilano químicamente unido a partículas porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. El caudal debe ser aproximadamente 1,2 ml por minu- to. Solución de ácido fosfórico 3 N - Disolver 9,8 g de ácido fosfórico en 100 ml de agua. Solución de hidróxido de amonio 6 N - Diluir 40 ml de hidróxido de amonio a 100 ml con agua. Fase móvil - Transferir 2,0 g de fosfato mono- básico de potasio a un matraz aforado de 1 litro y disolver en aproximadamente 650 ml de agua. Agregar 15,0 ml de solución de hidróxido de tetra- butilamonio 0,5 M en metanol, 7,0 ml de Solución de ácido fosfórico 3 N y 270 ml de metanol. Enfriar a temperatura ambiente y ajustar a pH 5,0 con Solución de ácido fosfórico 3 N o Solución de hidróxido de amonio 6 N . Completar a volumen con agua, mezclar y filtrar. [NOTA: controlar el pH antes de usar.] Solución del estándar interno - Disolver aproximadamente 50 mg de metilparabeno en 1,0 ml de metanol, diluir a 25,0 ml con Fase móvil y mezclar. Solución madre del estándar - Preparar una so- lución de Ácido Fólico SR-FA en Fase móvil de aproximadamente 1 mg por ml. [NOTA: para di- solver el Ácido Fólico emplear 1 ml de hidróxido de amonio al 10 % por cada 100 ml de la Solución madre del estándar.