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Medios Según el Microorganismo a Cultivar 37
from Manual de Medios de Cultivo
by D_RTZ
INDICACIONES PARA LA PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo en general, y en particular los elaborados por BioCen, deben ser restituidos en agua destilada o desionizada, tal como se indica en la etiqueta del producto. El agua de esta calidad debe ser recién obtenida, libre de metales tóxicos y su pH debe ser de 5.5 a 7. Si el pH del agua es inferior a 5.5, la misma se debe ebullir para eliminar el CO2 y comprobar nuevamente el pH.
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Toda la cristalería a emplear debe ser de vidrio neutro y ser procesada de la siguiente manera:
· Lavar con detergentes apropiados, evitar el empleo de mezcla crómica cuyos residuos pueden resultar inhibitorios para los microorganismos.
· Enjuagar al menos 2 veces con agua corriente y posteriormente con agua destilada o desionizada, escurrir y secar.
El recipiente donde se prepara el medio (generalmente matraces de Erlenmeyer) deberá tener una capacidad que duplique el volumen del medio a preparar y deberá garantizar una adecuada agitación. No deben prepararse, como regla, volúmenes de medio superiores a 1 L.
El medio en polvo se deberá pesar en una balanza con una adecuada precisión, empleando preferiblemente “potes para pesadas” de materiales inertes al medio o pesando directamente en el recipiente.
Las espátulas deberán estar completamente secas y se deben emplear sólo una vez. El material de las mismas debe ser el acero inoxidable u otro material inerte al medio.
El frasco debe ser abierto y manipulado en un local que no presente una humedad relativa y temperatura elevadas.
La manipulación deberá ser rápida y precisa, exponiendo el producto al ambiente lo menos posible. Asegurarse al tapar el frasco, que no hayan quedado residuos del medio en los bordes de su boca. Para eliminarlos, utilice un paño limpio y seco.
Una vez pesado el medio, éste se debe restituir inmediatamente añadiéndole el agua, inicialmente en una cantidad no mayor de aproximadamente la mitad del volumen requerido. Agitar bien hasta cerciorarse que todos los componentes se encuentren formando una suspensión homogénea para el caso de los medios sólidos y semisólidos o una solución para los medios líquidos. Añadir el resto del agua, arrastrando los residuos de polvo que hayan podido quedar adheridos a la superficie interna del recipiente. Los medios que contienen agar dejar en remojo por un período de 10 a 15 min.