UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Zurita Morán Valeria Catalina Curso: 5to Año Paralelo: A Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 12 de julio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: martes 19 de Julio del 2016 GRUPO: 3 PRÁCTICA B.F.5.09-05 TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
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ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Vía intraperitonial VOLUMEN ADMINISTRADO: 10mL de Cloroformo TIEMPOS
SÍNTOMAS
Inicio de la práctica
7:30AM
Hora de administración del toxico al cobayo
7:40AM
Deceso del animal
8:10AM
Hora de disección
8:20AM
Inicio de la destilación
8:40 am
Finalización de la destilación
9:00AM
Final de la práctica
10:30AM
Vómitos Cefaleas Vértigo Náuseas
OBJETIVOS Observar los síntomas De la rata wistar al administrarle cloroformo Reconer mediante Reacciones el cloroformo presente en el organismo de la rata wistar. Conocer las concentraciones de cloroformo en las que se convierte en tóxico. SÍNTOMAS: la rata presento temblores, desorientación, quemazón, desmayo.
TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
FUNDAMENTO TEÓRICO: Las Cetonas son líquidos volátiles, incoloros y no inflamables de olor y sabor dulzón y liposoluble. La inhalación de vapores es la principal vía de exposición industrial. Ocasiona intoxicación por vía respiratoria, digestiva o dérmica. Produce la muerte por ingestión oral de solo 10 ml. Se ha descrito degeneración grasa del hígado, riñón y corazón. Al exponerlo a una llama se forma fosgeno (oxicloruro de carbono), que con el agua en el alveolo forma ácido hidroclorhídrico y CO2 originando edema pulmonar. Poseen el grupo funcional carbonilo, unido a dos radicales alifáticos o aromáticos, esta clase de compuesto se caracterizan por sus reacciones con reactivos del grupo carbonilo, siendo los más utilizados la Fenilhidracina y su 2-4 dinitro derivado. La dinitrofenilhidracina es más reactiva y da derivados menos solubles, siendo por lo tanto, preferida a la fenilhidracina en la investigación de grupos carbonilo. Después de destilar el material de investigación se realizan las reacciones de reconocimiento.
MATERIALES *Jeringuillas: 10cm y 5cm *Panema *Tabla de disección *Cinta * Equipo de disección *Gorro * Soporte Universal * Guantes *Mascarillas *Mandil * Zapatones *Tapones Materiales de vidrio *Vaso de precipitación *Equipo de destilación *Balón aforado *Tubos de ensayo
*Pipetas *Agitador *Probeta * Erlemmeyer
EQUIPOS *Balanza analítica
SUSTANCIAS *Cloroformo *Agua destilada *Ácido clorhídrico *Nitrato de plata *Potasa alcohólica *Piridina * Clorhidrato d piperazina *Reactivo de Benedict * Beta naftanol
PROCEDIMIENTO Limpiar y desinfectar el área de trabajo. Preparar el cloroformo al 10% que se va a administrar. Administrar vía intraperitonial a la rata wistar y colocarlo en panema y observar los síntomas hasta su muerte. Colocar la rata wistar en la tabla de disecciones. Se resura la parte abdominal donde se va a realizar la discección. Con la ayuda de un bisturí, abrimos y sacamos sus víceras en un vaso de precipitación. Mientras tanto preparar una solución de ácido tartárico. Picar las víseras lo más pequeño posible. Añadir 25 mL de ácido Tartárico Se coloca en un balón aforado la mezcla, llevar a destilar.
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El residuo de la destilación se obtiene por arrastre de vapor. Realizar las reacciones. REACCIONES 1. Solución alcohólica: En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata. 2. Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. 3. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo. 4. Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. 5. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
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6. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. GRÁFICOS
Rata wistar.
Administración del cloroformo.
Disección del animal.
Colocarla en la panema.
Destilación de las víseras del animal y el tóxico.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Reconocimiento en medios Biológicos. Reacción
Resultado
SOLUCIÓN ALCOHÓLICA (Llama verde y precipitado)
Positivo no característic o. (precipitado)
Gráfico ANTES
Gráfico DESPUÉS
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DE DUMAS (precipitado y coloración rojiza)
DE LUSTGARTE R (color azul)
DE FUJIWARA (Coloración roja)
Positivo Característic o
Positivo no característic o (se observó coloración amarilla oscura)
Positivo. No característic o. (Precipitó)
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DE ROSEBOOM (Coloración amarillo rojiza)
Positivo característic o
Positivo no característic o. (coloración café)
DE BENEDICT (Verde, amarillo, rojizo)
OBSERVACIONES El cloroformo en los animales de experimentación tiene un efecto sedante. Las reacciones que son positivas no características, se refiere a que existe algún cambio como puede ser de coloración o precipitación; aunque estas características no estén estipuladas o la variación de color sea distinta al resultado. CONCLUSIONES Se cumplió con los objetivos planeados al inicio de la práctica, es decir, se observó los síntomas del animal en experimentación y se comprobó que el cloroformo estaba presente en el organismo de dicho animal. RECOMENDACIONES Utilizar toda la instrumentación de bioseguridad, ya que este tóxico es muy volátil que puede irritar los ojos, la nariz y la piel si se entra en contacto. Desechar los residuos de la práctica en lugares específicos de desechos.
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CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles pueden ser los efectos del cloroformo en la salud? Los científicos utilizan muchas pruebas de laboratorio proteger al público de los efectos perjudiciales de las sustancias químicas tóxicas y para encontrar formas de brindar tratamiento a las personas que han sido afectadas.
para
Una manera de establecer si un agente químico puede dañar a una persona es determinar cómo es absorbido, utilizado y liberado por el cuerpo. En el caso de ciertas sustancias químicas puede ser necesario experimentar con animales. Las pruebas en animales pueden servir también para identificar efectos adversos en la salud tales como el cáncer o los defectos congénitos. Sin la experimentación en animales, los científicos perderían un método básico para obtener la información necesaria para tomar decisiones acertadas que protejan la salud pública. Los científicos tienen la responsabilidad de manejar a los animales de la investigación con cuidado y compasión. Las leyes actuales protegen el bienestar de los animales de investigación y los científicos deben cumplir con reglas muy estrictas para el manejo de estos animales. En los seres humanos, el cloroformo afecta el sistema nervioso central (el cerebro), el hígado y los riñones si las personas inhalan aire o beben líquidos que contienen grandes cantidades de cloroformo. El cloroformo era utilizado como un anestésico durante las cirugías muchos años antes de que se conocieran sus efectos perjudiciales en el hígado y los riñones. La inhalación de 900 partes de cloroformo en un millón de partes de aire (900 ppm) durante un breve lapso de tiempo causa fatiga, mareos y dolor de cabeza. Si usted inhala aire, come alimentos o bebe agua que contienen niveles elevados de cloroformo por un periodo largo de tiempo, el cloroformo puede dañar su hígado y sus riñones. Si su piel entra en contacto con una concentración grande de cloroformo le pueden salir llagas. No sabemos si el cloroformo perjudica la capacidad de reproducción de las personas o si causa defectos congénitos. Las ratas y ratones que respiraron aire con niveles elevados de cloroformo (30 a 300 ppm) presentaron abortos espontáneos; lo mismo les ocurrió a las ratas que comieron cloroformo durante el embarazo. Los ratones que respiraron aire con niveles elevados de cloroformo (400 ppm) durante unos cuantos días mostraron un esperma anormal. Las crías de las ratas y ratones que inhalaron cloroformo durante el embarazo nacieron con defectos congénitos.
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Los resultados de los estudios en personas que bebieron agua clorada mostraron un vínculo posible entre el cloroformo del agua clorada y los casos de cáncer de colon y de la vejiga. Se registró cáncer de hígado y de los riñones en las ratas y ratones que comieron o bebieron agua con cloroformo en grandes cantidades durante períodos prolongados de tiempo. No sabemos si las personas que beben agua con cloroformo durante mucho tiempo desarrollarán cáncer de hígado y riñones. El Departamento de Salud y Servicios Humanos (DHHS, por sus siglas en inglés) ha determinado que puede anticiparse razonablemente que el cloroformo es un carcinógeno (una sustancia que causa cáncer). La Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer (IARC, por sus siglas en inglés) ha determinado que el cloroformo es posiblemente carcinogénico para los seres humanos. La EPA ha determinado que el cloroformo es probablemente un carcinógeno humano. 2. ¿Cómo entra y sale el cloroformo del cuerpo?
El cloroformo puede entrar a su cuerpo al inhalar aire, ingerir alimentos o beber agua que contenga esta sustancia química, además se introduce fácilmente a través de la piel. Por lo tanto, el cloroformo también puede entrar a su organismo si usted se baña con agua que contiene cloroformo. Además, usted puede inhalar cloroformo si el agua de la ducha es lo suficientemente caliente como para evaporar el cloroformo. Los estudios realizados en personas y animales muestran que si usted inhala aire o ingiere alimentos con cloroformo, esta sustancia química puede entrar rápidamente a su torrente sanguíneo desde los pulmones o los intestinos. Una vez en el cuerpo, el cloroformo es transportado por la sangre a todas las partes del organismo como la grasa, el hígado y los riñones. El cloroformo generalmente se acumula en la grasa corporal, sin embargo, por su condición volátil saldrá del cuerpo cuando haya cesado la exposición. Una parte del cloroformo que entra a su cuerpo sale intacta a través de la exhalación y otra parte se descompone en el cuerpo para formar otros elementos químicos. A estos elementos se les llama productos de degradación o metabolitos y algunos pueden adherirse a otros elementos químicos de las células del organismo, con la posibilidad de causar efectos perjudiciales si se aglomeran en cantidades suficientemente altas. Algunos de los metabolitos también salen del cuerpo mediante la exhalación. Solo una pequeña cantidad de productos de degradación sale del cuerpo en la orina y las heces.
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3. ¿Cuáles son los usos del cloroformo?
Fue utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por esta razón las personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores. Hoy en día el cloroformo tiene un importante número de usos tales como:
En química se utiliza en la separación orgánica. En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión. Se utiliza en síntesis orgánica. Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente). En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química.
GLOSARIO
Cloroformo: El cloroformo es un líquido incoloro, dulcemente perfumado, que es más conocido por su uso histórico como anestésico, aunque desde entonces ha sido abandonado debido a preocupaciones sobre su seguridad. Hoy en día, el cloroformo se usa en una variedad de procesos industriales, incluyendo la fabricación de productos químicos, refrigerantes y disolventes. Se produce mediante la reacción de cloro con etanol y si bien es relativamente estable, también es tóxico y debe ser manejado con cuidado. La exposición excesiva a cloroformo puede causar daños a largo plazo para la salud de varios órganos importantes. Carcinógenos: Cualquier sustancia o agente capaz de desencadenar un cáncer en las células sanas; no necesariamente tiene que ser un agente que provoque mutación en el material genético de las células. Metabolito: El metabolito es cualquier sustancia producida o utilizada durante el metabolismo (digestión). En el uso de medicamentos, el metabolito generalmente se refiere al producto final (lo que queda después del metabolismo).
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AUTORÍA Bioq. Farmacéutico Carlos García Msc.
FIRMA DE RESPONSABILIDAD
WEBGRAFÍA
Agencia para sustancias tóxicas y el registro de enfermedades. Cloroformo. [Internet]. 9 de Diciembre del 2014. [citado el 27 de junio del 2015]. Disponible en: http://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs6.html
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