UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADÉMICA CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRÁCTICA BF.08-01-02 NOMBRE: Dayana Carolina Ordoñez Caiminagua. DOCENTE: Dr. Carlos García CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes 5 Junio del 2017 FECHA DE ENTREGA DE LA PRACTICA: Lunes 12 Junio del 2017 CURSO: 8vo Semestre “A”
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TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO Animal de experimentación: Vísceras de pollo. Vía de administración: Vía intraperitoneal. Volumen administración: 10 ml cloroformo. TIEMPOS: Inicio de la práctica: 08:30 am Hora de disección: 08:38 am Hora inicio de destilado: 08:52 am Hora de finalización de destilado: 09:00 am Hora finalización de la práctica: 11:30 am 1. OBJETIVOS: Observar la sintomatología que presenta el pollo (vísceras) tras la intoxicación producida por cloroformo. Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de cloroformo en el destilado de las vísceras de pollo.
2. FUNDAMENTO TEORICO: El cloroformo es un compuesto químico también conocido como triclorometano o tricloruro de metilo, es un líquido transparente, incoloro, dulcemente perfumado y sabor dulce, produce ardor en la boca y la garganta, es volátil y no es inflamable
Hoy en día, el cloroformo se usa en una variedad de procesos industriales, refrigerantes y disolventes, como pueden ser en la industria química, para fabricar plásticos o teflón o en la síntesis orgánica también para la limpieza como desengrasante de metales, al ser tóxico debe ser manejado con cuidado. La exposición excesiva a cloroformo puede causar daños a largo plazo para la salud.El principal efecto del cloroformo es la depresión del sistema nervioso. A la larga provoca efectos sobre hígado, riñón y sistema nervioso, incluso cáncer. 3. INSTRUCCIONES:
Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se estén realizando. Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS. MATERIALES
EQUIPOS
SUSTANCIAS
MUESTRA
Vasos de precipitación.
Aparato de destilación
Alcohol 95%
Destilado de vísceras del animal de experimentación
Pipetas.
Balanza
Nitrato de plata
Erlenmeyer
Baño maría
Potasa alcohólica 1:10
Tubos de ensayo
Campana de extracción
Perclorato de hierro
Probeta
Β-naftol
Perlas de vidrio
Piridina
Agitador
Clorhidrato de Piperacina
Embudo
Yodo
Guantes
Reactivo de Benedict
Mascarilla Gorro Mandil Cronometro Estuche de disección Agitador Fosforo
Pinzas Cocineta Espátula Gradilla
5. ACTIVIDADES A REALIZAR: 5.1 Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse. 5.2 Preparar una solución de formaldehido al 4% 5.3 Agarrar al animal de experimentación (pollo) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 8 ml de solución de formaldehido. 5.4 Colocar al animal de experimentación (pollo) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5.5 Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir al animal de experimentación (pollo) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 5.6 Verter las vísceras en un vaso de precipitación y agregar 50 ml acido tartárico al 4% y perlas de vidrio. 5.7 Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 5.8 Con aproximadamente 15 ml de destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimiento en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 6.1 Reacción de dunas: Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. 6.2 Reacción de Lustgarten. Al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo. 6.3 Reacción de fijiwara. En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. 6.4 Reacción de rose boom. Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. 6.5 Reacción de Benedict. Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. 7. GRAFICOS:
8. RESULTADOS OBTENIDOS:
Reacción de Dunas
positivo característico.
Reacción de Lustgartera
Reacción de Fujiwara
Reacción de Rose boom
Reacción de Benedict
positivo característico.
positivo característico.
positivo característico.
positivo característico.
9. CONCLUSIONES: Mediante esta práctica se logró determinar la presencia de cloroformo presente en la vísceras de pollo, para ello realizamos la aplicación de diferentes reacciones de identificación del cloroformo, en las cuales todos sus resultados fueron positivas como son: reacción de Dumas, Lustgartera, Fujiwara, Rose boom y Benedict presentando un cambio de coloración, además pudimos observar la sintomatología del animal en experimentación, cuando le cloroformo ingreso a su cuerpo. 10. RECOMENDACIONES:
Al momento de ingresar al laboratorio, utilizar siempre el equipo de protección (bata, guantes, mandil, gorro) y de esta manera evitar algún accidente. Colocar siempre los bolsos o mochilas fuera del área de trabajo. Al momento de utilizar reactivos, realizarlo en la campana extractora de gases. Aplicar las normas de bioseguridad dentro del laboratorio de Toxicología. Una vez finalizado la práctica, dejar el área de trabajo limpio.
11. CUESTIONARIO. 1. Escriba las principales características del metanol. El cloroformo es un líquido transparente, incoloro, de olor agradable y sabor dulce, es volátil y no es inflamable, fue uno de los primeros analgésicos que se utilizó en cirugías, 2. Cuál es la fórmula del cloroformo. Su fórmula química es CHCl3 3. Escriba los usos del metanol.
Se utiliza en la industria química, para fabricar plásticos o teflón o en la síntesis orgánica.
Empleado en la industria para la limpieza como desengrasante de metales.
En química se utiliza en la separación orgánica.
En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión.
Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente).
12. ANEXOS.
13. BIBLIOGRAFÍA.
CLOROFORMO . (2009 ). Recuperado el 10 de Junio de 2017, de Hoja de Seguridad : http://quimica.webcom.com.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf
CLOROFORMO SUS USOS Y PROPIEDADES. . (2010). Recuperado el 10 de Junio de 2017, de Drogueria El Barco : https://www.drogueriaelbarco.com/blog/cloroformo-usos-y-propiedades-de-este-compuestoquimico/
CLOROFORMO. (6 de Mayo de 2016). Recuperado el 10 de Junio de 2017, de Agencia para Sustancias Toxicas y el Riesgo de Enfermedades. : https://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs6.html
14. FIRMA DE RESPONSABILIDAD.
F. Dayana Carolina Ordoñez C. 2101114169