2 minute read
Hình 2.13: Một số dụng cụ và kỹ thuật cấy giữ giống trên thạch nghiêng
- Trộn vi sinh vật với glycerol, tỉ lệ 1:20 và giữ ở nhiệt độ -200C.
- Phương pháp đông khô vi sinh vật . - Giữ giống vi sinh vật trong môi trường đất, cát và trên hạt [12].
Advertisement
Hình 2.13: Một số dụng cụ và kỹ thuật cấy giữ giống trên thạch nghiêng.
a. Que cấy vòng b. que cấy hình kim b. Pipet Pasteur d, g, h. Một số kiểu cấy
2.2.7.2. Phương pháp giữ giống trên môi trường thạch có lớp dầu khoáng
Để khắc phục nhược điểm của phương pháp cấy chuyền nhiều lần cụ thể là hạn chế sự phát triển của vi sinh vật trong thời gian bảo quản, tránh cho lớp thạch môi trường bị khô dần và giống có thể bị chết, thì phủ lên môi trường thạch có vi sinh vật phát triển một lớp dầu khoáng parafin dày khoảng 10mm. Lớp parafin này sẽ hạn chế sự tiếp xúc của vi sinh vật với oxygen không khí và hạn chế sự thoát hơi nước của môi trường thạch nên nồng độ, các chất hoà tan không bị thay đổi, do đó áp lực thẩm thấu cũng không bị thay đổi nên không gây hại đến đời sống của vi sinh vật. Những chủng đã được xử lý ở trên, sau đó được giữ trong tủ lạnh ở nhiệt độ 4÷50C và có thể bảo quản nhiều năm [2]. - Yêu cầu của phương pháp này là sử dụng dầu khoáng như parafin lỏng hay vazơlin phải trung tính, có độ nhớt cao, không chứa các sản phẩm độc với vi sinh vật và vô trùng.
- Cách bảo quản: + Khử trùng dầu khoáng bằng cách hấp ở 1210C trong 2h. Sau đó sấy khô ở tủ sấy (1700C) trong 1÷ 2h; để nguội.
+ Đun sôi môi trường một thời gian để loại hết O2. Để nguội 45oC. Dùng ống hút cấy vi sinh vật vào đáy ống nghiệm. Làm nguội thật nhanh rồi đổ vazơlin lên bề mặt để hạn chế sự tiếp xúc với O2. + Sau đó giống được giữ trong tủ lạnh ở nhiệt độ 4÷50C [2]. - Ưu điểm: Phương pháp này đơn giản nhưng hiệu quả cao nhờ khả năng làm chậm quá trình biến dưỡng và hô hấp nên vi sinh vật phát triển chậm lại. Môi trường không bị mất nước và khô. Giống bảo quản dưới lớp dầu khoáng sau 12 tháng vẫn giữ được hình dáng bề ngoài bình thường.
