LABORATORIO DE TOXICOLOGIA UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGIA DOCENTE: BQF. CARLOS ALBERTO GARCIA GONZALES MSC. ESTUDIANTE: GUERRERO CUERO JAIRO STEVEN CURSO: QUINTO AÑO
PARALELO: “A”
FECHA DE REALIZACION DE LA PRACTICA: Martes, 30 de Agosto del 2016 FECHA DE PRESENTACION DE LA PRÁCTICA: Martes, 06 de Septiembre del 2016
PRACTICA Nº BF.5.09-10 TITULO DE LA PRÁCTICA INTOXICACION POR TOXICOS MINERALES (COBRE) ANIMAL DE EXPERIMENTACION: Pollo y Camarón. VIA DE ADMINISTRACION: Vía Intraperitoneal. VOLUMEN ADMINISTRADO: 10g de sulfato cúprico. TIEMPOS: Inicio de la práctica: 8:15 am Hora de disección: 9:00 am Hora inicio de destilado: 9:30 am Hora de finalización de destilado: 9:55 am Hora finalización de la práctica: 10:30 am Sintomatología: pérdida de la actividad motora, hipoxia, presencia de orina, defecación y perdida de actividad motora, vomito, convulsiones y finalmente después de un tiempo prolongado se produjo su muerte.
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis.” (Paracelso)
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Presenciar la acción toxicológica del cobre mediante la observación de la sintomatología que presenta el animal de experimentación (pollo).
Determinar la toxicidad del cobre en muestras biológicas de pollo y camarón a través de reacciones analíticas.
FUNDAMENTO TEORICO: El Cobre es una substancia muy común que ocurre naturalmente y se extiende a través del ambiente a través de fenómenos naturales, la gente que vive en casas que todavía tiene tuberías de cobre están expuestas a más altos niveles de Cobre que la mayoría de la gente, porque el Cobre es liberado en sus aguas a través de la corrosión de las tuberías. Exposiciones de largo periodo al cobre pueden irritar la nariz, la boca y los ojos y causar dolor de cabeza, de estómago, mareos, vómitos y diarreas. Una toma grande de cobre puede causar daño al hígado y los riñones e incluso la muerte. Si el Cobre es cancerígeno no ha sido determinado aún. La EPA (Enviromental Protecion Agency), requiere que el agua potable no contenga más de 1.3 miligramos de cobre por litro de agua (1.3mg/L). El ministerio de agricultura de los EE.UU recomienda (una dosis diaria de 900 microgramos de cobre (900 ug/dia) para personas mayores de 80 años de edad. La administración de Salud y Seguridad Ocupacional (OSHA) ha establecido un límite para vapores de cobre en el aire de 0.1 miligramo por metro cubico (0.1mg/m3) y 1 mg/m3 para polvos de cobre. INSTRUCCIONES: 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis.” (Paracelso)
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA MATERIALES:
Soporte de Hierro Pinza Vasos de precipitación (250 ml) Pipetas Matraz Erlenmeyer (250 ml) Tubos de ensayo
Balón de destilación Mechero de alcohol Tabla de diseccion Agitador Espátula Gradilla
SUSTANCIAS:
NH4(OH) Ferrocianuro de potasio clorato de potasio Ácido acetico NaOH HCl Agua destilada Cupron Yoduro de potasio SH2 Sulfato cuprico
OTROS
Mandil Guantes Mascarilla Gorro Estuche de disección Aguja hipodérmica (10 ml) Cronómetro Panema Fosforo Cocineta Aro de hierro Funda plástica
EQUIPOS: ● ● ● ● ●
Balanza Analítica Equipo de destilación Baño María Campana
MUESTRAS:
Destilado de vísceras del Pollo. Destilado de vísceras de camaron.
Balanza Analítica. ACTIVIDADES A REALIZAR: 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. Preparar una solución disolviendo 10g de Sulfato cuprico. 3. Agarrar al animal de experimentación (pollo y camaron) y mediante una aguja hipodérmica administrar 10g de Sulfato cuprico. 4. Colocar al animal de experimentación (pollo) en la panema y observar los efectos de la intoxicación.
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA 5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (pollo y camaron) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 20 mL de HCl y perlas de vidrio. 7. Destilar, recoger el destilado en 4g de clorato de potasio. 8. Con aproximadamente 15 ml del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 1. Con el Ferrocianuro de Potasio: En un medio acidificado con ácido acético, el cobre reacciona dando un precipitado rojo oscuro de ferrocianuro cúprico, insoluble en ácidos diluidos, soluble en amoniaco dando color azul. K4Fe(CN)6 + 2Cu(NO3)
Cu2Fe(CN)6 + KNO3
2. Con el Cuprón: En solución alcohólica al 1 % al que se le adiciona gotas de amoniaco, las sales de cobre reaccionan produciendo un precipitado verde insoluble en agua, amoniaco diluido, alcohol, ácido acético, soluble en ácidos diluidos y poco solubles en amoniaco concentrado. C6H5-C=NOH
C6H5-C=N-O
C6H5-CHOH + Cu(NO3)2
+ Cu + 2HNO3 C6H5-C-N-O
3. Con el Yoduro de Potasio: Adicionando a la solución muestra gota a gota, primeramente se forma un precipitado blando que luego se transforma a pardoverdoso o amarillo. Cu(NO3)2 + IK + I34. Con el Hidróxido de Amonio: A la solución muestra, agregarle algunas gotas de NH4OH, con lo cual en caso positivo se forma un precipitado color azul claro de solución NO3 (OH) Cu. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo, produciendo solución color azul intenso que corresponde al complejo [Cu(NH3)4]++. (NO3)2Cu + NH3 (NO3)2Cu +3 NH3
Cu(OH)NO3
2[Cu(NH3)4+++ NO3H + H2O
5. Con el Hidróxido de Sodio: A 1ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de de NaOH, con lo cual en caso de ser positivo se debe formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2.Este precipitado es soluble en ácidos minerales y en álcalis concentrados. Cu++ + 2OH
Cu(OH)2
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA 6. Con el SH2: A la solución muestra, hacerle pasar una buena corriente de SH2, con lo cual en caso de ser positivo se forma un precipitado color negro este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluidos y fríos . (NO3)2Cu + SH2
SCu+ 2NO3H
GRAFICOS: PREPARACION DE LA MUESTRA
1. Animal en experimentación
2. Administramos el toxico
3. Procedemos a la disección y corte de las vísceras del pollo y camaron
5. Destilamos y recoger el destilado en 4g de Clorato de potasio
4. Añadir 20ml de HCl y perlas de vidrio.
REACCIONES DE INDETIFICACION: Reacciones con las vísceras de pollo:
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA Con el Ferrocianuro de Potasio:
ANTES: COLOR ROJO VINO
DESPUES: NEGATIVO
Con el Cuprón:
ANTES: COLOR CELESTE
ANTES: COLOR CELESTE
DESPUES: NEGATIVO
Con el Yoduro de Potasio:
DESPUES: POSITIVO (Precipitado verdoso)
Con el Hidróxido de Amonio:
ANTES: COLOR CELESTE
Con el SH2:
DESPUES: POSITIVO (AZUL INETNSO)
ANTES: COLOR PARDO
DESPUES: POSITIVO (Pardo verdoso)
Con el Hidróxido de Sodio:
ANTES: COLOR CELESTE
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DESPUES: NEGATIVO
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA Reacciones con las vísceras de camaron: Con el Ferrocianuro de Potasio:
ANTES: COLOR CELESTE
DESPUES: NEGATIVO
Con el Cuprón:
ANTES: COLOR CELESTE
ANTES: COLOR LIGERAMENTE NARANJA
DESPUES: NEGATIVO
Con el Yoduro de Potasio:
DESPUES: NEGATIVO
Con el Hidróxido de Amonio:
ANTES: COLOR LIGERAMENTE NARANJA
Con el SH2:
DESPUES: NEGATIVO
ANTES: COLOR CELESTE
DESPUES: POSITIVO (Pardo verdoso)
Con el Hidróxido de Sodio:
ANTES: COLOR LIGERAMENTE NARANJA
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DESPUES: NEGATIVO
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA OBSERVACIONES: Al colocar en el panema al animal de experimentación (pollo) se observó manifestaciones como: pérdida de la actividad motora, hipoxia, presencia de orina, defecación y perdida de actividad motora, vomito, convulsiones y finalmente después de un tiempo prolongado se produjo su muerte. CONCLUSIONES: ●
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Se observó la toxicidad del cobre en el animal de experimentación (pollo), por medio de sus manifestaciones ante la exposición con este tóxico, siendo la hipoxia, convulsiones, perdida de la función motora, las manifestaciones más recurrentes y luego el deceso o muerte al cabo de cierto tiempo. También se evidenció la presencia del cobre mediante reacciones químicas cualitativas, en el destilado obtenido de la materia biológica del animal de experimentación (pollo y camaron).
RECOMENDACIONES:
Utilizar guante, gorro, zapatones y fundamentalmente mascarilla como medida de bioseguridad. Aplicar las normas de Bioseguridad en el Laboratorio de toxicología. Si se evidencia una fuerte exposición al toxico, procurar utilizar la campana extractora de gases. Al ser el sulfuro de hidrogeno un reactivo muy volátil toxico se recomienda usar siempre mascarilla. Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación.
CUESTIONARIO: 1. Que es el cobre (Cu)? El cobre es uno de los metales de transición e importante metal no ferroso. Su utilidad se debe a la combinación de sus propiedades químicas, físicas y mecánicas, así como a sus propiedades eléctricas y su abundancia. El cobre fue uno de los primeros metales usados por los humanos.
2. Cuáles son las aplicaciones del cobre? Electricidad y telecomunicaciones Medios de transporte. Construcción y ornamentación Monedas 3. Cuál es la dosis letal del cobre? DOSIS LETAL: 50-500 mg / kg de peso corporal
GLOSARIO:
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA ORNAMENTACIÓN: Es el proceso y el resultado de ornamentar. Este verbo, por su parte, refiere a embellecer algo a través de la inclusión de adornos y detalles decorativos. HEMÓLISIS INTRAVASCULAR: Si la hemólisis es intravascular, la destrucción de los eritrocitos ocurre principalmente dentro de los vasos sanguíneos DEGENERACIÓN MIXOMATOSA: Es un debilitamiento del tejido de la válvula ocasionado por cambios energéticos en el organismo PROPENSIÓN: Es un término que se trata del proceso y de las consecuencias de propender. Este verbo, por su parte, refiere a una tendencia o una inclinación hacia alguna cosa. WEBGRAFIA:
MÉNDEZ Á., Quimica, El cobre y su toxicidad, (en línea), 16 de mayo de 2012. Revisado el: 18 de Agosto del 2016. Disponible en: http://quimica.laguia2000.com/elementos-quimicos/el-cobre-y-su-toxicidad
ICSC, Fichas Internacionales de Seguridad Química, (en línea), 1994. Revisado el: 06 de Agosto del 2016. Disponible en: https://noharm.org/sites/default/files/lib/downloads/espanol/ficha-seguridadquimica-mercurio.pdf
P. Higueras y R. Oyarzun, Minerales, metales, gases y la salud humana y ambiental, Cobre,(en línea). Revisado el: 18 de Agosto del 2016. Disponible en: http://www.uclm.es/users/higueras/MGA/Tema08/Minerales_salud_4_4.htm
MARCOVECCHIO, J.E.; MORENO, V.J. & A. PEREZ. 1991. Metal accumulation in tissues of sharks from the Bahía Blanca Estuary, Argentina. Marine Environmental Research vol. 31: 263-274.
Pérez García, Perla Esmeralda; Azcona Cruz, M. Isabel, Revista de Especialidades Médico-Quirúrgicas, Los efectos del cadmio en la salud, (en línea), 3 de septiembre del 2012. Revisado el: 06 de Agosto del 2016. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/473/47324564010.pdf
Machala, 06 de Septiembre del 2016
FIRMA DE RESPONSABILIDAD JAIRO STEVEN GUERRERO CUERO CI: 0705851368 ANEXOS
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA ANEXO 1: Datos obtenidos de los análisis colorimétricos cualitativos realizados al material biológico.
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