UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Jonathan Carlos Miñan Rengel Grupo: #6 Curso: 5to Año de Bioquímica y Farmacia
Paralelo: A
10
Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes, 28 de Junio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes, 4 de Julio del 2016 PRÁCTICA N° Título de la Práctica:
INTOXICACIÓN POR METANOL
Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la Intoxicación por Metanol. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el Metanol. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Metanol.
MATERIALES: Jeringuilla de 10 ml Soporte universal Vaso de 500 ml Agitador Equipo de disección Panema Tabla de disección Aro metálico Gillette Erlenmeyer de 200 ml Refrigerante o equipo de destilación
SUSTANCIAS
KMnO4 H2SO4 H2C2O4 Fushina Cloruro de Fenilhidracina 4% Nitroprusiato de Sodio NaOH HCl K3[Fe(CN)6] KOH Ácido Cromatropico Ácido Tartárico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 1
Corcho Lámpara de alcohol Perlas de vidrio Balanza Probeta Balón volumétrico Cinta
PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4. 5. 6.
Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo. Administrar 5ml de Metanol por vía intraperitoneal. Colocar la rata wistar en la panema. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte. Con la ayuda de una Gillette procedemos abrir a la rata. Observamos órgano por órgano las repercusiones que provoco el Metanol en la rata. 7. Colocamos las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación) y trituramos. 8. Una vez ya armado el equipo de destilación los vapores producidos por las vísceras se recogerán en un matraz. 9. Y con esta solución procedemos a realizar las pruebas de caracterización para Metanol. REACCIONES: 1. Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 2. Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 3. Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 2
fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. 4. Reacción de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. 5. Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6. Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 3
GRÁFICOS:
1.
Animal de experimentación Rata
6. Llevar a destilación.
7. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes.
2. Inyectar 10 ml el toxico (metanol)
3. Observar los síntomas de la rata luego de la administración del toxico hasta la muerte
5. Extraer y Triturar las vísceras, colocar 50 perlas de vidrio, para la destilación.
4. Colocar a la rata en la tabla de disección
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 4
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
REACCIÓN DE SCHIFF: Positivo no característico ANTES
DESPUES
REACCIÓN DE RIMINI: positivo no característico ANTES
DESPUES
CON LA FENILHIDRACINA: positivo no característico ANTES
DESPUES
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 5
REACCIÓN DE MARQUIS: positivo no característico ANTES
DESPUES
CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: Positivo no característico ANTES
REACCIÓN DE HEHNER: Positivo no característico ANTES
DESPUES
DESPUES
OBSERVACIONES
La hora de administración de la dosis fue a las 7:50 am se le administro 5 ml de la solución preparada por vía parenteral, al momento de la aplicación a la rata wistar presento una actitud temblorosa y desconcertante. Pasados 5 minutos presento debilidad, 3 minutos después su sistema nervioso se encontró deprimido, 5 minutos después la debilidad fue aún más visible hasta el punto “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 6
que se recostó, 20 minutos después de la primera dosis es decir a las 8:55 se le administro 3 ml más de la solución, dadas las circunstancias que no moría y finalmente a las 09:00 murió. Al realizar la disección del cobayo observamos que los intestinos fueron los más afectados, tenían un color oscuro y la vesícula se encontraba aumentada de tamaño.
CONCLUSIONES
Al culmino de esta práctica las reacciones que presento el cobayo ante la intoxicación por Metanol fueron varias entre las cuales cito las siguientes: Pérdida de equilibrio, ceguera, hipoxia, convulsiones, perdida de movilidad motora La muerte se produjo tras la administración de un total de 20 ml de Metanol en un tiempo de 1:23 horas con lo que concluimos que el Metanol es muy tóxico debido a las reacciones a las quemaduras en conjunto con el aumento de los órganos que provoco internamente. Dentro de las 6 reacciones de reconocimiento que existen para Metanol trabajamos las 5 posteriores, obteniendo los siguientes resultados: Reacción de Schiff: Positivo No característico Reacción de Rimini: Positivo No característico Con la Fenilhidracina: Positivo Característico Con el Ácido Cromotrópico: Negativo Reacción de Hehner: Negativo El conjunto de pruebas nos da la pauta como Bioquímicos Farmacéuticos para la comprobación si existió o no una intoxicación por Metanol.
RECOMENDACIONES Correcta aplicación de la dosis y por la vía adecuada de una manera profesional para así evitar inconvenientes posteriores Utilizar el equipo de Bioseguridad necesario para evitar cualquier contacto con los tóxicos que estamos utilizando. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. CUESTIONARIO
¿Qué es el metanol? El metanol es fácilmente confundible con el etanol, otro tipo de combustible alternativo, cuyo nombre sólo difiere en una letra del que nos ocupa. Realmente se diferencian mucho el uno del otro siendo el etanol actualmente más práctico que el metanol, por razones que veremos. La composición química del metanol, también llamado alcohol de madera, es un alcohol obtenido de la fermentación de la madera, siendo más simple que la del etanol. Se usa como anticongelante, disolvente y combustible alternativo.
¿El metanol como combustible?
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 7
El aprovechamiento del metanol como combustible conlleva la combinación con gasolina o algún derivado de ésta. Su producción se da sin mucha dificultad, siendo su mayor componente el metano que se puede obtener del gas natural. El problema del metanol es que es esencialmente inflamable por lo que actualmente, para su uso como combustible, no se recurre a éste de forma pura. Lo que se está haciendo es una especie de mezcla de metanol con etanol, en una proporción del 90% 10% respectivamente. ¿Cómo se produce el metanol? El metanol se puede producir de cualquier fuente basada en el carbón. Éstos incluirían: gas natural, carbón, basuras municipales, basuras del gas del terraplén, maderas, y algas marinas. El método más usado para su obtención es, sobre todo, a través del gas natural empleado para crear un gas de síntesis en un tanque (la combinación de monóxido de hidrógeno y de carbono) que se alimenta con un catalizador del níquel para producir el vapor de agua y el metanol. Luego se destila como último paso para eliminar el agua del metanol acabado. ¿Ventajas del metanol? Las siguientes son algunas ventajas del metanol como combustible alternativo:
Produce menos contaminación ambiental que los combustibles fósiles.
Se pueden obtener a partir de materias y residuos renovables tales como pasto, bagazo de caña de azúcar, hojarasca, etc.
Su utilización no requiere una gran modificación de los vehículos de combustible fósil. Simplemente basta con cambiar las piezas plásticas del circuito de combustible. ¿Desventajas del metanol? El metanol tiene algunas desventajas que se intentan solucionar con la búsqueda de nuevas tecnologías. Pero, no obstante, éstas aún son muchas y le hacen perder puestos ante otros combustibles alternativos, a saber:
El metanol es muy tóxico y la exposición intensa puede producir graves problemas a la salud (esto repercute en los trabajadores de las fábricas de este combustible)
El metanol es corrosivo incluso para algunos metales como el aluminio. De ahí que haya que sustituir las piezas de plástico en los coches. Y, por supuesto, hay que evitar el contacto con la piel.
Al ser tan tóxico su manejo en surtidores deben llevar más precaución y preparación por parte de los trabajadores.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 8
GLOSARIO HIPOXIA._ Es un estado del cuerpo donde se caracteriza por la falta de Oxígeno, es muy común en las montañas. INTRAPERITONEAL._ Que está localizado en el interior de la cavidad peritoneal. Se dice de la vía de administración de fármacos por la cual estos son introducidos directamente dentro de la cavidad peritoneal. TÓXICO._ La toxicidad es la capacidad de cualquier sustancia química de producir efectos perjudiciales sobre un ser vivo, al entrar en contacto con él. Tóxico es cualquier sustancia que provoque daño. METANOL._ El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol metílico es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero, incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CH3OH (CH4O) CONVULSIONES._ un síntoma transitorio caracterizado por actividad neuronal en el cerebro que conlleva a hallazgos físicos peculiares como la contracción y distensión repetida y temblorosa de uno o varios músculos de forma brusca y generalmente violenta(Clínica, Galega, & Interna, 2010). CARBÓN ACTIVADO._ Carbón activado es un término genérico que describe una familia de adsorbentes carbonáceos altamente cristalinos y una porosidad interna altamente desarrollada. BIBLIOGRAFIA Clínica, G., Galega, S., & Interna, D. M. (2010). Lesiones cerebrales secundarias a intoxicación por metanol, 71(2), 59–60. Indice de Guias Seminarios. Metanol [Citado: 24 de junio del 2011]Disponible en:Metanol
FIRMA
_________________________ Jonathan Carlos Miñan Rengel
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 9
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Página 10