UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Jonathan Carlos Miñan Rengel Grupo: #6 Curso: 5to Año de Bioquímica y Farmacia
Paralelo: A
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Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes, 28 de Junio del 2016 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes, 4 de Julio del 2016 PRÁCTICA N° Título de la Práctica:
INTOXICACIÓN POR ETANOL
Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la Intoxicación por Metanol. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el etanol. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de etanol.
MATERIALES: Jeringuilla de 10 ml Soporte universal Vaso de 500 ml Agitador Equipo de disección Panema Tabla de disección Aro metálico Gillette Erlenmeyer de 200 ml Refrigerante o equipo de destilación
SUSTANCIAS
KMnO4 H2SO4 H2C2O4 Fushina Cloruro de Ferrico Nitroprusiato de Sodio NaOH HCl K3[Fe(CN)6] KOH Ácido Cromatropico Etanol
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Páá giná 1
Corcho Lámpara de alcohol Perlas de vidrio Balanza Probeta Balón volumétrico Cinta
PROCEDIMIENTO 1. 2. 3. 4. 5. 6.
Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo. Administrar 5ml de etanol por vía intraperitoneal. Colocar la rata wistar en la campana. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte. Con la ayuda de una Gillette procedemos abrir a la rata. Observamos órgano por órgano las repercusiones que provoco el etanol en la rata. 7. Colocamos las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación) y trituramos. 8. Una vez ya armado el equipo de destilación los vapores producidos por las vísceras se recogerán en un matraz. 9. Y con esta solución procedemos a realizar las pruebas de caracterización para etanol. REACCIONES: 1. Reacción de Schiff: A uná pequenñ á porcioá n de lá muestrá, se ánñ áde 1ml de permángánáto de potásio ál 1% despueá s de mezclár se ádicioná unás gotás de áá cido sulfuá rico puro, se dejá reposár por tres minutos y ágregán álgunás gotás de solucioá n sáturádá de áá cido oxáá lico (hástá que decolore lá mezclá); lá mezclá ádquiere un color máderá que se decolorá totálmente luego de ágregárle nuevámente álgunás gotás de áá cido sulfuá rico puro. Finálmente se le ánñ áde 1ml de fushiná bisulfátádá (Reáctivo de Schiff), con lo cuál se produce un intenso color violetá en cáso de positivo. 2. Reacción de Rimini A 5 ml de destiládo se ágregán 10 gotás de cloruro de fenilhidráciná ál 4 %, 4 gotás de solucioá n de nitroprusiáto de sodio ál 2.5% recieá n prepárádo y 1ml de solucioá n de hidroá xido de sodio, se produce uná colorácioá n ázul intensá. 3. Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente ácidificádo con áá cido clorhíádrico á uná pequenñ á cántidád de muestrá se ágregá un pedácito de cloruro de fenil hidráciná, 2-4 gotás de solucioá n de ferriciánuro de potásio ál 5 – 10% y álgunás gotás de hidroá xido de potásio ál 12% se obtienen uná colorácioá n rojo grosellá.
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Páá giná 2
4. Reacción de Marquis Se tomá 1ml de destiládo y se ágregán 5ml de áá cido sulfuá rico concentrádo, se ágitá luego con uná solucioá n sulfuá ricá de morfiná (0.2 gr de cloruro de morfiná en 10ml de áá cido sulfuá rico concentrádo), se obtiene enseguidá o despueá s de álguá n tiempo un color violetá. 5. Con el Ácido Cromotrópico Con este áá cido en un medio fuertemente ácidificádo con áá cido sulfuá rico, el formáldehido produce uná colorácioá n rojá despueá s de cálentárlá ligerámente. 6. Reacción de Hehner Se mezclá uná gotá de destiládo con álgunos mililitros de leche, se estrátificá con áá cido sulfuá rico concentrádo ál que se le hán ágregádo trázás de cloruro feá rrico (5 gotás de cloruro feá rrico en 500ml de áá cido sulfuá rico); en cáso positivo, en lá zoná de contácto se produce un color violetá o ázul violetá.
GRÁFICOS:
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Páá giná 3
1.
Animal de experimentación Rata
6. Llevar a destilación.
7. Obtener el filtrado para realizar las reacciones correspondientes.
2. Inyectar 10 ml el toxico (etanol)
3. Observar los síntomas de la rata luego de la administración del toxico hasta la muerte
5. Extraer y Triturar las vísceras, colocar 50 perlas de vidrio, para la destilación.
4. Colocar a la rata en la tabla de disección
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
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REACCIÓN DE SCHIFF: Positivo no característico ANTES
DESPUES
REACCIÓN DE RIMINI: positivo no característico ANTES
DESPUES
CON LA FENILHIDRACINA: positivo no característico ANTES
DESPUES
REACCIÓN DE MARQUIS: positivo no característico “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Páá giná 5
ANTES
DESPUES
CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: Positivo no característico ANTES
REACCIÓN DE HEHNER: Positivo no característico ANTES
DESPUES
DESPUES
OBSERVACIONES
La hora de administración de la dosis fue a las 7:50 am se le administro 5 ml de la solución preparada por vía parenteral, al momento de la aplicación a la rata wistar presento una actitud temblorosa y desconcertante. Pasados 5 minutos presento debilidad, 3 minutos después su sistema nervioso se encontró deprimido, 5 minutos después la debilidad fue aún más visible hasta el punto que se recostó, 20 minutos después de la primera dosis es decir a las 8:55 se le “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Páá giná 6
administro 3 ml más de la solución, dadas las circunstancias que no moría y finalmente a las 09:00 murió. Al realizar la disección de la rata wister observamos que los intestinos fueron los más afectados, tenían un color oscuro y la vesícula se encontraba aumentada de tamaño.
CONCLUSIONES
Al culmino de esta práctica las reacciones que presento la rata wister ante la intoxicación por etanol fueron fueron provocadas por el toxico (etanol), así como también hemos identificado la presencia de etanol en la sangre del animal mediante pruebas específicas para el reconocimiento de este compuesto, en la cual este ocasionar el coma o la muerte. Dentro de las 6 reacciones de reconocimiento que existen para Metanol trabajamos las 5 posteriores, obteniendo los siguientes resultados: Reacción de Schiff: Positivo No característico Reacción de Rimini: Positivo No característico Con la Fenilhidracina: Positivo Característico Con el Ácido Cromotrópico: Negativo Reacción de Hehner: Negativo El conjunto de pruebas nos da la pauta como Bioquímicos Farmacéuticos para la comprobación si existió o no una intoxicación por Etanol.
RECOMENDACIONES Correcta aplicación de la dosis y por la vía adecuada de una manera profesional para así evitar inconvenientes posteriores Utilizar el equipo de Bioseguridad necesario para evitar cualquier contacto con los tóxicos que estamos utilizando. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. CUESTIONARIO
¿Qué es el etanol? El compuesto quíámico etánol, conocido como álcohol etíálico, es un álcohol que se presentá en condiciones normáles depresioá n y temperáturá como un líáquido incoloro e inflámáble con un punto de ebullicioá n de 78,4 °C. Miscible en águá en cuálquier proporcioá n; á lá concentrácioá n de 95 % en peso se formá uná mezclá ázeotroá picá. Su foá rmulá quíámicá es CH3-CH2-OH (C2H6O o, conservándo el OH, C2H5OH), principál producto de
lás bebidás
álcohoá licáscomo
el vino (álrededor
de
un
13 %),
los licores (hástá un 50 %) o los águárdientes (hástá un 70 %).
¿El etanol como combustible?
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lá cervezá (5 %),
El etánol támbieá n se utilizá cádá vez máá s como ánñ ádido párá oxigenár lá gásoliná normál, reemplázándo ál eá ter metil tert-butíálico (MTBE). Este uá ltimo es responsáble de uná consideráble contáminácioá n del suelo y del águá subterráá neá. Támbieá n puede utilizárse como combustible en lás celdás de combustible. Como fuente párá lá produccioá n de etánol en el mundo se utilizá fundámentálmente biomásá. Este etánol es denominádo, por su origen, bioetánol. ¿Cómo se produce el etanol? El etánol es un álcohol líáquido compuesto de cárbono, hidroá geno y oxíágeno que resultá de lá fermentácioá n de ázuá cár o de álmidoá n convertido en ázuá cár, extráíádos ámbos de lá biomásá. Támbieá n puede producirse á pártir de lá celulosá contenidá principálmente en los desechos ágríácolás, urbános o forestáles. Desde lá ántiguü edád se obteníáá el etánol por fermentácioá n ánáeroá bicá de uná disolucioá n con contenido en ázuá cáres con levádurá y posterior destilácioá n Se usá párá lás bebidás álcohoá licás, áunque támbieá n puede que seá el combustible del futuro (!) Por ser un cárburánte renováble, puede que reemplázá á lá gásoliná GLOSARIO HIPOXIA._ Es un estado del cuerpo donde se caracteriza por la falta de Oxígeno, es muy común en las montañas. INTRAPERITONEAL._ Que está localizado en el interior de la cavidad peritoneal. Se dice de la vía de administración de fármacos por la cual estos son introducidos directamente dentro de la cavidad peritoneal. TÓXICO._ La toxicidad es la capacidad de cualquier sustancia química de producir efectos perjudiciales sobre un ser vivo, al entrar en contacto con él. Tóxico es cualquier sustancia que provoque daño. METANOL._ El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol metílico es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero, incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CH3OH (CH4O) CONVULSIONES._ un síntoma transitorio caracterizado por actividad neuronal en el cerebro que conlleva a hallazgos físicos peculiares como la contracción y distensión repetida y temblorosa de uno o varios músculos de forma brusca y generalmente violenta(Clínica, Galega, & Interna, 2010). CARBÓN ACTIVADO._ Carbón activado es un término genérico que describe una familia de adsorbentes carbonáceos altamente cristalinos y una porosidad interna altamente desarrollada. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO) Páá giná 8
BIBLIOGRAFIA XMonsalve G., J. F., Medina de Perez, V. I., & Ruiz Colorado, A. A. (2006). Ethanol production of banana shell and cassava starch. Dyna, 150, 21–27. Liebig, Justus (1834) "Ueber die Constitution des Aethers und seiner Verbindungen" (On the constitution of ether and its compounds), Annalen der Pharmacie, 9 : 1–39. From page 18
FIRMA
_________________________ Jonathan Carlos Miñan Rengel
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