INFORMES DE LABORATORIO MICROBIOLOGÍA ANALISIS DE MOHOS Y LEVADURAS
Presentado por: DIANA CECILIA MUÑOZ BLANCA RIVEROS ANDREA GODOY CRIALES IRMA FRANCO
Ficha: 583801 Instructora: ALEXANDRA CUCAITA
INFORME ANALISIS MOHOS Y LEVADURAS UVAS FRESCAS
ANALISIS DE MOHOS Y LEVADURAS FRUTAS FRESCAS - UVAS
MARCO TEORICO
En esta oportunidad desarrollaremos la práctica de laboratorio, en la cual haremos análisis de Mohos y Levaduras. Para esta ocasión analizaremos una fruta, en este caso uvas maceradas, las cuales se obtuvieron de una tienda de venta de frutas y hortalizas en el barrio paloquemao, cercano al Sena Hotel. La mayoría de los hongos están constituidos por estructuras tabulares llamada hifas, los hongos son heterótrofos por lo tanto dependen de la obtención de compuestos orgánicos. Los hongos tiene una influencia directa sobre el bienestar del hombre; algunos son altamente benéficos y el hombre los utiliza directamente, como en la producción de antibióticos. Otros hongos juegan un papel muy importante en la naturaleza como degradadores de materia orgánica; pero por otra parte, los hongos son la principal causa de enfermedades de los cultivos agrícolas, afectando severamente la economía del hombre Los mohos toxígenicos de géneros distintos de Aspergillus y Penicillus son los contaminantes más corrientes de los alimentos Primera cosa a entender sobre el moho es que hay un poco de moho por todas partes en interiores y exteriores están en el aire y se puede encontrar en plantas, alimentos, hojas secas y otros materiales orgánicos. El clima, (temperatura y humedad- cálido y húmedo es peor). . La infección por insectos y roedores facilita la invasión de los hongos de algunos productos almacenados. Los hongos de almacén especies de Aspergillus y Penicillus causan diversos daños a los granos y semillas almacenadas siendo los más sobresalientes la reducción del poder germinativo de las semillas el ennegrecimiento de los granos y la producción de micotixinas. Hablando un poco del producto analizado (pasas de uva) Se encuentran dos procesos de pasas de uva, se da por desecación por calor natural alrededor de 10 días dependiendo del clima, este no debe ser tan húmedo, otro método es por calor artificial en un horno común dejándolo desde 50º hasta al cansar los 70º alrededor de una 7 a 10 horas, la conservación de las pasas de uva será en un sitio oscuro ventilado y seco, este proceso se debe de monitorear para prevenir la humedad y generar contaminación biológica de mohos y levaduras.
OBJETIVOS
1. Analizar y determinar si hay ausencia o presencia Mohos y Levaduras en la muestra. 2. Establecer si la muestra analizada es apta para el consumo humano. 3. Determinar cuales podr铆an ser las causas de la contaminaci贸n del alimento. 4. Determinar si el alimento cumple o no con la NTC, establecida para este tipo de alimento. 5. Evaluar la cantidad de mohos y levaduras presentes en la muestra.
MATERIALES UTILIZADOS
• Agua Peptonada 0.1% • Agua desionizada • Autoclave • Balanza • Cajas Petri de vidrio • Cuchillos y Cucharas • Erlenmeyer • Frascos Shott • Gradillas •Homogenizador • Incubadora a una temperatura de 25 ± 1 ºC • Mechero de Bunsen • Medio de cultivo OGY • Micropipeta y puntas plasticas • Pipetas de .1 ml a 5 ml • Pipeteador • Probetas • Tipo de muestra solida (Uvas Maceradas) • Tubos de Ensayo tapa rosca • Vidrio Reloj
METODO MOHOS Y LEVADURAS En esta Práctica de Laboratorio hicimos análisis de Mohos y levaduras, utilizando la técnica de siembra en profundidad Objetivo: Determinar Mohos y Levaduras en una muestra de Chorizo crudo. Procedimiento: Para iniciar la practica de laboratorio, hicimos el proceso de limpieza y desinfección de áreas, equipos, herramientas e implementos de trabajo. En este caso preparamos 6 cajas petri de 20 ml C/U, por esta razón tomamos en una Probeta 120 ml de agua desionizada, la llevamos a un frasco Shott y le agregamos 4,5g de Agar OGY. Tómanos 110 ml de agua desionizada en una probeta y la llevamos a un frasco shott y agregamos 0,935 ml de Nacl y 0,115 gr de peptona. Luego de seleccionar los implementos de laboratorio, y de preparar el agar y el agua peptona, autoclavamos junto con las cajas petri, los tubos de ensayo y las puntas de la micropipeta, para esterilizarlos. Después de autoclavar, tomamos las 6 cajas petri y las marcamos en su parte exterior con un marcador no borrable, indicando el tipo de Agar (OGY) y la dilución correspondiente, (10²־10 , ¹ ־y 10³)־. Nos acercamos al mechero y tomamos el Frasco Shott con el agua peptonada y le agregamos 10 g de la muestra de uvas, previamente maceradas, a analizar, lo volvimos a tapar y agitamos constantemente para que se disuelvan los microorganismo que contiene. Luego tomamos los tubos de ensayo y en el segundo y el tercer tubo hicimos disoluciones de 9 ml C/U, respectivamente, preparando así las disoluciones en base (10²־10 , ¹ ־y 10³ )־con una pipeta. Posteriormente, tomamos las cajas petri ya marcadas y utilizamos las micropipeta para agregas 1 ml de muestra en las cajas petri; Después de este paso procedimos a agregar el agar, tapamos las cajas petri y dejamos gelificar. Para finalizar sellamos las cajas petri con cinta siliconada y las llevamos a incubación a 35º C de 24 a 48 horas.
RESULTADOS
Análisis de Mohos y Levaduras
Agua Peptona
• 120 ml H20 Desionizada • 4,4 gr de Agar OGY
•110 ml H20 Desionizada •0,935 g de NaCl •0,115 g de Peptona
Después de pasadas las 48 horas de incubación pudimos notar los siguientes resultados: 10-1: Crecimiento de mohos Asperjillus de color verde grisaseo, redondo y textura filamentosa y mohos Penisillium de color blanco y testura arenosa, también crecimiento masivo de levaduras y Sacaromices. 10-2: Crecimiento de mohos Asperjillus y Penisillium , también crecimiento masivo de levaduras y Sacaromices. 10-3: en estas no hubo crecimiento de mohos Asperjillus, si hubo crecimiento de mohos penisillius. Tambien hubo crecimiento de levaduras pero no tan masivo y se encontró una levadura rosada redonda.
RESULTADOS
NĂšMERO DE COLONIAS
CAJAS 10-1
CAJAS 10-2
CAJAS 10-3
Mohos Asperjillius 3
Mohos Asperjillius 4
Mohos Asperjillius 0
Mohos Penisillium 10
Mohos Penisillium 7
Mohos Penisillium 3
Crecimiento Masivo de levaduras
Crecimiento Masivo de levaduras
Crecimiento Masivo de levaduras
Sacaromices
Sacaromices
Levaduras Rosadas 1
Cajas 10-1
Cajas 10-2
RESULTADOS
Cajas 10-3
Discusión de Resultados Al analizar el resultado de la muestra de uvas frescas maceradas, se evaluó el procedimiento realizado en cada grupo de diluciones respectivas. EL Agar OGY , es un medio selectivo para la enumeración de levaduras y mohos en muestras alimentarias. Después de la incubación para mohos y levaduras a 22 a 25ºC de 24 a 48 horas, realizamos la lectura y observamos presencia de mohos Aspergillus y mohos Penisillium en las cajas 10 ¹ ־y 10²;־ en las cajas 10³ ־no encontramos presencia de mohos Aspergillus, pero si de mohos penisullium. Adicionalmente, en las 3 diluciones (6 cajas) encontramos presencia de crecimiento masivo de levaduras, teniendo en cuenta que el las cajas 10³ ־disminuye notablemente la cantidad de levaduras y en una de estas dos cajas aparece el crecimiento de una colonia de levadura rosada de forma redonda. Consideramos que a pesar de la presencia de estos microorganismos el producto (uvas) es apto para el consumo humano ya que dichos mohos y levaduras no se encuentran en una cantidad que pueda llegar a afectar la salud humana. Incluso debemos tener en cuenta que en la dilución 10³־, se presenta ausencia de mohos aspegillus, por lo tanto podemos concluir que el producto es considerar apto y se puede consumir confiadamente, en el menor tiempo posible.
Discusión de Resultados RECOMENDACIONES •Mantener los alimentos en ambientes secos. Los mohos crecen a temperatura ambiente y hasta -5°C siempre y cuando existe un elevado grado de humedad en el medio. •Deshacerse del alimento que presente una superficie enmohecida. No solo del pedazo dañado, sino del alimento en su totalidad ya que en áreas cercanas a lo dañado puede haber micotoxinas que no pueden verse a simple vista. •Prevenir la presencia de patógenos es primordial para asegurar la calidad y la seguridad de los alimentos. En la gran mayoría de ocasiones, el motivo de una infección alimentaria es una mala praxis en la manipulación de los alimentos. Vegetales que no se lavan de forma adecuada.
Conclusión
Al realizar el análisis de mohos y levaduras en la muestra escogida (uvas), se logro comprobar la presencia de estos hongos, encontrando colonias de aspergillus y penicilium. Los cuales estos mohos patógenos de cítricos y frutas en la mayoría de los casos son causantes de infecciones en los humanos. Obtuvimos crecimiento masivo de levaduras Saccharomyces, en las cajas 10¯¹, y 10¯² esto posiblemente porque en muchas ocasiones están presentes de forma natural provenientes desde los mismos viñedos. Algunos hongos y levaduras pueden causar malos olores y sabores y la decoloración de las superficies de alimento. Teniendo en cuenta que uno de los mayores problemas originados por los mohos se refiere a la gran capacidad de elaboración de micotoxinas. Los mohos y levaduras pueden ser un problema potencial en alimentos lácteos fermentados, frutas, bebidas de frutas, especias y alimentos de humedad intermedia. Para tener un mayor control en el momento de utilizarla ya sea en el hogar o en en fábricas o restaurantes debe tener en cuenta: • Utilizar sólo productos como frutas y verduras de primera calidad, sin signos de deterioro, tales como golpes, manchas, mohos o restos de parásitos. • Lavar bien las frutas y verduras con agua potable, eliminando todo resto de suciedad, tierra o partes deterioradas. • Utilizar superficies e instrumentos de corte debidamente limpios y desinfectados. • Mantener un alto grado de higiene personal. • En caso de consumirse en crudo (ensaladas), desinfectar las frutas y verduras sumergiéndolos en agua potable a la que se habrá añadido unas gotas de desinfectantes o hipoclorito de uso alimentario y aclararlos posteriormente con abundante agua potable.
BIBLIO Y CIBERGRAFIA
CIBERGRAFÍA: http://books.google.com.co/books?id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA181&lpg=PA181&d =cual+es+el+signiicado+de+nmp+microbiologia&source=bl&ots=z84kuJb0hB&sig ovNwtJcdewV0hKiaw60CJ0UnOU&hl=es&sa=X&ei=LwRfUoulGoza8AST8YCgDQ&v d=0CDsQ6AEwAw#v=onepage&q=cual%20es%20e%20significado%20de%20nmp 20microbiologia&f=false http://www.anmat.gov.ar/alimentos/Guia_de_interpretacion_resultados_microb ologicos.pdf http://www.ecologia.unam.mx/laboratorios/evolucionmolecular/documentos/Cl seProcariontes/Alejandra/Práctica%204%20%20Medios%2
BIBLIOGRAFÍA: Microbiología de los Alimentos – Guía de Laboratorio Mónica María Simanca 2004 Introducción a la Microbiología Torca – Funke – Case 9na Edición