INFORMES DE LABORATORIO MICROBIOLOGÍA ANALISIS DE
PSICROFILOS, MESOFILOS Y TERMOFILOS
Presentado por: DIANA CECILIA MUÑOZ BLANCA RIVEROS ANDREA GODOY CRIALES IRMA FRANCO
Ficha: 583801 Instructora: ALEXANDRA CUCAITA
INFORME ANALISIS
PSICROFILOS, MESOFILOS Y TERMOFILOS RECUENTO EN PLACA SIEMBRA EN SUPERFICIE
ANALISIS DE PSICROFILOS, MESOFILOS Y TERMOFILOS EN CARNICOS
MARCO TEORICO
En esta oportunidad desarrollaremos la práctica de laboratorio, en la cual haremos análisis de Psicrófilos, Mesófilos y Termófilos. Para esta ocasión analizaremos un producto cárnico, en este caso un chorizo crudo, el cual se obtuvo de un vendedor ambulante de comidas rápidas que se ubica en la calle lateral a la entrada del Sena Hotel. Son todas aquellas bacterias aerobias o anaerobias facultativas, mesófilas o psicrófilas capaces de crecer en agar nutritivo. Se investigan por el método de recuento en placa con siembra en profundidad. Los microorganismos mesófilos son aquellos que se desarrollan entre 15 y oC y que tienen una temperatura óptima decrecimiento y proliferación en ambiente o medio que tenga una temperatura de 37°C. En este grupo encuentran los microorganismos patógenos es decir los causantes enfermedades.
35 un se de
El intervalo de temperaturas en el que crecen los microorganismos es muy amplio: de – 34o C a > 90o C. En función de esto se encuadra a los microorganismos en tres grupos: a) los que crecen bien a 7o C o por debajo de esta temperatura cuya temperatura: Psicrófilos. b) los que crecen entre 20 – 30o C, con una temperatura óptima de crecimiento está entre 30 – 40oC: Mesófilos c) los que crecen por encima de los 45o C: Termófilos. El hábitat de los organismos mesófilos incluye el suelo, el cuerpo de un animal, etc. Su temperatura óptima de crecimiento se encuentra en los 37 °C, la temperatura normal de un cuerpo humano.
OBJETIVOS
1. Analizar y determinar si hay ausencia o presencia Psicrófilos, Mesófilos y Termófilos en la muestra. 2. Establecer si la muestra analizada es apta para el consumo humano. 3. Determinar cuales podrían ser las causas de la contaminación del alimento. 4. Determinar si el alimento cumple o no con la NTC, establecida para este tipo de alimento. 5. Evaluar la cantidad de Psicrófilos, Mesófilos y Termófilos presentes en la muestra. 6. El objetivo de realizar este análisis por superficie es conocer el número de microorganismos aerobios mesófilos.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
•Conocer el método de los indicadores microbiológicos de calidad mas utilizado •Determinar si las temperaturas aplicadas en el proceso del producto fue la adecuada. •Saber el cual es el comportamiento de los Psicrofilo, Mesofilos y Tremofilosdándoles las temperaturas adecuadas para cada uno. •Se puede saber en cuanto a la vida útil del producto.
MATERIALES UTILIZADOS
• Agua Peptonada 0.1% • Agua desionizada • Autoclave • Balanza • Cajas Petri de vidrio • Cuchillos y Cucharas • Erlenmeyer • Frascos Shott • Gradillas •Homogenizador • Incubadoras • Mechero de Bunsen • Medio de cultivo Agar Platecount • Micropipeta y puntas plasticas • Nevera • Pipetas de .1 ml a 5 ml • Pipeteador • Probetas • Tipo de muestra solida (Chorizo) • Tubos de Ensayo tapa rosca • Vidrio reloj
METODO PSICROFILOS, MESOFILOS Y TERMOFILOS En esta Práctica de Laboratorio hicimos análisis de Mohos y levaduras, utilizando la técnica de siembra en profundidad Objetivo: Determinar Psicrofilos, Mesofilos y Termofilos en una muestra de Chorizo crudo. Procedimiento: Para iniciar la practica de laboratorio, hicimos el proceso de limpieza y desinfección de áreas, equipos, herramientas e implementos de trabajo. En este caso preparamos 9 cajas petri de 20 ml C/U, por esta razón tomamos en una Probeta 120 ml de agua desionizada, la llevamos a un frasco Shott y le agregamos 2,1g de Agar Platecount. Tómanos 120 ml de agua desionizada en una probeta y la llevamos a un frasco shott y agregamos 1,059 ml de Nacl y 0,143 gr de peptona. Luego de seleccionar los implementos de laboratorio, y de preparar el agar y el agua peptona, autoclavamos junto con las cajas petri, los tubos de ensayo y las puntas de la micropipeta, para esterilizarlos. Después de autoclavar, tomamos las 9 cajas petri y las marcamos en su parte exterior con un marcador no borrable, indicando el tipo de Agar (platecount) y la dilución correspondiente, (10²־10 , ¹ ־y 10³)־. Nos acercamos al mechero y tomamos el Frasco Shott con el agua peptonada y le agregamos 10 g de la muestra de Chorizo crudo, previamente macerado, a analizar, lo volvimos a tapar y agitamos constantemente para que se disuelvan los microorganismo que contiene. Luego tomamos los tubos de ensayo y en el segundo y el tercer tubo hicimos disoluciones de 9 ml C/U, respectivamente, preparando así las disoluciones en base (10²־10 , ¹ ־y 10³ )־con una pipeta. Posteriormente, tomamos las cajas petri ya marcadas y utilizamos las micropipeta para agregas 1 ml de muestra en las cajas petri; Después de este paso procedimos a agregar el agar, tapamos las cajas petri y dejamos gelificar. Para finalizar sellamos las cajas petri con cinta siliconada y las llevamos a incubación a 4º para determinar Psicrófilos, a 37ºC para determinar mesófilos y a 45ºC para determinar Termófilos de 24 a 48 horas.
RESULTADOS
Análisis de Psicrófilos, Mesófilos y Termófilos
Agua Peptona
• 120 ml H20 Desionizada • 2,1 gr de Agar Platecount
•120 ml H20 Desionizada •1,02 g de NaCl •0,12 g de Peptona
Después de pasadas las 48 horas de incubación pudimos notar los siguientes resultados: 10-1: • Psicrófilos: Crecimiento Masivo, puntiformes y pequeños de color blanco. • Mesófilos: Presencia de Actinos, Crecimiento masivo y colonia seca. • Termófilos: Ausencia. 10-2: • Psicrófilos: 1 colonia redonda, cremosa y de color blanco. • Mesófilos: Presencia de Actinos, Crecimiento masivo y colonia seca. • Termófilos: Presencia de Actinos, Crecimiento irregular y colonia seca. 10-3: • Psicrófilos: No hay Crecimiento. • Mesófilos: No hay presencia de colonias pero hay contaminación de un mohos color verde, filamentoso y redondo. • Termófilos: Presencia de Actinos, Crecimiento irregular y colonia seca, olor fétido
RESULTADOS
NÚMERO DE COLONIAS
CAJAS 10-1
CAJAS 10-2
CAJAS 10-3
PSICROFILOS Crecimiento Masivo
PSICROFILOS 1 colonia
PSICROFILOS 0 colonias
MESOFILOS
MESOFILOS
MESOFILOS
Actinos (1 Colonia Seca)
Actinos (1 Colonia Seca)
o colonias (presencia de 1 moho)
TERMOFILOS 0 colonias
TERMOFILOS
TERMOFILOS
Actinos (1 Colonia Seca)
Actinos (1 Colonia Seca)
Cajas 10-1 Psicrófilos
Mesófilos
Termófilos
Cajas 10-2 Psicrófilos
Mesófilos
Termófilos
RESULTADOS Cajas 10-3 Psicr贸filos
Mes贸filos
Term贸filos
Discusión de Resultados Al analizar el resultado de la muestra , que en este caso fue Chorizo, se evaluó el procedimiento realizado en cada grupo de diluciones respectivas. EL Agar Platecount, es un medio de cultivo nutritivo especial para determinar la ausencia o presencia de microorganismos Psicrófilos, Mesófilos y Termófilos en muestras alimentarias. Después de la refrigeración de Psicrófilos a 4ºC por 48 horas, realizamos la lectura y observamos presencia masiva de este microorganismo en la caja 10¹־, la cual fue disminuyendo a medida que se realizaron las diluciones hasta llegar a 10³־, en donde se obtuvo ausencia total de estos microorganismos, con los cual podemos determinar que en el alimento no se presenta amenaza de este tipo de microorganismo, para el consumo humano. Con respecto a los Mesófilos, los cuales fueron incubados a 37ºC, por 48 horas, encontramos presencia de Actinos y un crecimiento irregular de colonias secas en la caja 10¹־, estos tam-
Discusión de Resultados
bién fueron disminuyendo notablemente hasta llegar a la dilución 10³־, en donde no hallamos presencia de colonias, pero se hallo contaminación de mohos, esto presumimos que es debido a la manipulación en laboratorio. Finalmente, a analizar los Termófilos, los cuales fueron incubados a 45ºC, por 48 horas, en la dilución 10¹ ־encontramos ausencia de estos microorganismos, pero en las diluciones 10 ² ־y 10³ ־, al igual que en el análisis de Psicrófilos, encontramos presencia de Actinos y un crecimiento irregular de colonias secas, con esto podemos concluir que el producto puede llegar a ser potencialmente toxico, debido a la mala manipulación y la falta de refrigeración ya que al tenerlo al aire libre y a temperatura ambiente en menos de 12 horas puede llegar a ser perjudicial para la salud del consumidor.
CONCLUSIONES
Los estudios, para determinar el tipo de microorganismos presente en un alimento y sus características para su desarrollo, se siguen realizando con nuevas técnicas, debido a que es difícil mantener las condiciones en las que se encuentran naturalmente estos microorganismos debido a que actúan varios factores en conjunto como pH y temperatura, nutrientes etc., pero se ha podido dar una caracterización general de los mismos pudiendo reconocer las clasificaciones, en este caso en particular, según las diferentes temperaturas lo que posibilita saber qué tipo de adaptaciones se presentan en cada caso. La muestra presento una incubación de 8 días y teniendo en cuenta los resultados en cada una de las temperaturas se analizaron concentraciones masivas, colonias y actinas acompañado de contaminación por mohos y hongos de acuerdo a esto se obtuvieron los siguientes resultados PSICROFILOS: Crecimiento masivo contaminación.
y
presencia
de
un
MESOFILOS: Presencia de actinas y contaminación de un moho. TERMOFILOS: Presencia de actina.
hongo
por
RECOMENDACIONES
Tener presente el manejo y almacenamiento adecuado con los alimentos al igual que su estabilidad de los congelados durante el almacenamiento como los cárnicos y embutidos, para evitar al máximo la presencia de microorganismos teniendo presente, primero es importante analizar si el establecimiento es adecuado, este tipo de alimentos no deben de estar expuestos a luz solar y calor, los que pareciera que estén secos, también es un indicador de mala conservación. Por lo anterior se recomienda evitar el consumo de embutidos de manera excesiva.
BIBLIO Y CIBERGRAFIA
CIBERGRAFÍA: http://books.google.com.co/books?id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA181&lpg=PA181&d =cual+es+el+signiicado+de+nmp+microbiologia&source=bl&ots=z84kuJb0hB&sig ovNwtJcdewV0hKiaw60CJ0UnOU&hl=es&sa=X&ei=LwRfUoulGoza8AST8YCgDQ&v d=0CDsQ6AEwAw#v=onepage&q=cual%20es%20e%20significado%20de%20nmp 20microbiologia&f=false http://www.anmat.gov.ar/alimentos/Guia_de_interpretacion_resultados_microb ologicos.pdf http://www.ecologia.unam.mx/laboratorios/evolucionmolecular/documentos/Cl seProcariontes/Alejandra/Práctica%204%20%20Medios%2
BIBLIOGRAFÍA: Microbiología de los Alimentos – Guía de Laboratorio Mónica María Simanca 2004 Introducción a la Microbiología Torca – Funke – Case 9na Edición