Práctica 5 intoxicacion por cloroformo by Nelly Espinoza

INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRÁCTICA BF.5.09 - 05 TEMA DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO DOCENTE: BQF. Carlos García MSc. CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 11 de Julio del 2016 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 18 de Julio del 2016 CURSO: 5to año. PARALELO: ‘’B’’ GRUPO: 3 NOMBRE: Espinoza Nugra Nelly Estefanía  DATOS DE LA PRÁCTICA Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10 ml de Cloroformo. TIEMPOS: Inicio de la práctica: 7:45 am Hora de disección: 7:52 am (7 minutos) Hora Inicio de Destilado: 8:00 Hora de finalización de Destilado: 8:30 Hora finalización de la práctica: 10:30 am 2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble. El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido

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clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata. 3. OBJETIVOS: a. Observaremos la sintomatología que presenta el animal de experimentación ante la intoxicación por cloroformo. b. Conoceremos cuidadosamente las manifestaciones y contralaremos el tiempo en que hace efecto el cloroformo al animal de experimentación. c. Determinaremos mediante varias reacciones de identificación la presencia de cloroformo en el destilado de las vísceras del animal de experimentación. 4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS: MATERIALES 

VIDRIO:

-Vasos de precipitación -Pipetas -Erlenmeyer -Tubos de ensayo -Probeta -Perlas de vidrio -Agitador -Embudo  OTROS

EQUIPOS -Aparato de destilación -Balanza -Baño maría -Campana

SUSTANCIAS - Alcohol 95% -Nitrato de plata -Potasa alcohólica 1:10 -Percloruro de hierro -β-naftol -Piridina -clorhidrato de piperacina -Yodo -Reactivo de Benedict

MUESTRA -Destilado de vísceras del animal de experimentación.

-Guantes -Mascarilla -Gorro -Mandil -Aguja hipodérmica 10 mL -Cronómetro -Estuche de disección -Panema -Agitador -Fosforo -Pinzas -Cocineta

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-Espátula -Gradilla

5. INSTRUCCIONES: 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 6. PROCEDIMIENTO: 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2 Preparar 10mL de Cloroformo. 3. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10mL de Cloroformo. 4. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. 7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. 7. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 1 REACCIÓN DE DUNAS.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. 2 REACCIÓN DE LUSTGARTEN.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo. 3 REACCIÓN DE FUJIWARA.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se

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convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica. 4 REACCIÓN DE ROSEBOOM.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. 5 REACCIÓN DE BENEDICT.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. 8. GRÁFICOS:

1. Escogemos el animal de experimentación.

2. Aplicamos el toxico

3. Observamos los síntomas que presenta la rata wistar hasta su muerte.

4. Con la ayuda de un bisturí sacamos las vísceras.

5. Trituramos las vísceras completamente para llevarlas a destilación.

6. Después de la destilación obtenemos la solución madre con la que haremos las reacciones de identificación.

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9. RESULTADOS OBTENIDOS

1. Reacción de dunas: positivo

2. Reacción de Lustgarten: positivo

3. Reacción de fujiwara: positivo

4. Reacción de roseboom: positivo

Reacción de Benedict: positivo (gama de colores)

10. CONCLUSIÓNES:  En la realización de esta práctica vamos a reconocer los síntomas provocados luego de la administración de un tóxico (cloroformo) al organismo de un animal

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de experimentación (rata winstar) e identificamos presencia o ausencia del cloroformo al través de reacciones químicas de caracterización.   

Debemos observar si el animal de experimentación convulsionara. Si tiene dificultad al respirar. Cabe recalcar que a través de las pruebas en medios biológicos, observaremos la coloración de las reacciones lo cual corroboraremos para determinar la presencia del toxico (cloroformo) en el animal de experimentación.

11. RECOMENDACIONES    

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida. Acatar las sugerencias y guías expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realización de la práctica. GLOSARIO

CLOROFORMO Triclorometano. También llamado cloroformo o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no inflamable, incoloro, de olor dulzón. BETA NAFTOL 2-Naftol, o β-naftol, es un sólido cristalino incoloro de fórmula C10H7OH, es un isómero de 1-naftol, que difieren según la ubicación el hidroxilo de naftaleno. Los naftoles son los homólogos del naftaleno de fenol, con el grupo hidroxilo más reactivo que en los fenoles. Ambos isómeros son solubles en alcohol, éter y cloroformo. Se pueden utilizar en la producción de tinta s en la síntesis orgánica. Por ejemplo, 2-naftol se hace reaccionar para formar 1,1'-Binaftaleno-2,2'-diol. Es uno de los derivados de la naftalina más importantes, se parecen a los fenoles en sus propiedades químicas y tiene distintas aplicaciones en la industria química. TIMOL El timol (2-isopropil-5-metilfenol) es una sustancia cristalina incolora con un olor característico que está presente en la naturaleza en los aceites esenciales del tomillo o del orégano, que se encuentra a la vez el cimeno y el timeno. El timol se caracteriza por su poder desinfectante y fungicida. Por su sabor agradable está presente en la formulación de diversos enjuagues bucales, pastas de dientes etc. <TODO ES VENENO, NADA ES VENENO. TODO DEPENDE DE LA DOSIS. PARACELSO >

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Una disolución de 5 % timol en etanol se utiliza para la desinfección dermal y contra infecciones con hongos. REACCION BENEDICT La reacción benedict o prueba de benedict identifica azucares reductores como lactosa, glucosa, maltosa. Se utiliza el reactivo de benedict el mismo que consta de sulfato cúprico, citrato e sodio, carbonato anhidro de sodio. PIRIDINA Piridina. Es un líquido incoloro de olor característico desagradable. Pertenece a la familia de los compuestos aromáticos heterocíclicos, y está estructuralmente relacionada al benceno, siendo la única diferencia entre ellos el reemplazo de un grupo CH del anillo bencénico por un átomo de nitrógeno 12. CUESTIONARIO 1. ¿CUALES SON LOS USOS MAS COMUNES DEL CLOROFORMO? Fue utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por esta razón las personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores. Hoy en día el cloroformo tiene un importante número de usos tales como:     

En química se utiliza en la separación orgánica. En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión. Se utiliza en síntesis orgánica. Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente). En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química. 2. ¿DESCRIBA EL PROCESO DE METABOLIZACION DEL CLOROFORMO?

El cloroformo es metabolizado por vías oxidativas y reductoras. En condiciones normales, el metabolismo oxidativo es la vía principal, y el metabolismo reductivo no juega un papel significativo. El cloroformo también se conjuga con ácido glucurónico (conjugación mercaptúrica).6

El metabolismo del cloroformo es más rápido en ratones que en ratas, mientras que en los tejidos humanos (hígado y riñón), porque tienen un déficit en la actividad del isoenzima CYP2E1, que es la responsable del metabolismo del cloroformo 3. ¿INDIQUE EL TRATATMIENTO PARA CLOROFORMO?

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En vista de que el cloroformo sufre conjugación mercaptúrica en su paso por el organismo, algunos autores proponen a la N-acetilcisteína como un posible tratamiento de las intoxicaciones con cloroformo. La N-acetilcisteína, por su capacidad de inhibir la formación de radicales libres generados por el cloroformo y sus metabolitos, ha presentado efectividad en algunos casos en el tratamiento de intoxicaciones por cloroformo, incluso combinado con otros antioxidantes naturales, como la vitamina E. 13. BIBLIOGRAFIA:

 Julian, I. (2003). Quimica. En I. Julian, Diccionario de Quimica. Madrid: Editorial Complutense.  Torres, L. M. (2002). Metanol. En L. M. Torres, Cuidados Criticos y Emergencias. Madrid: Aran Ediciones.

WEBGRAFÍA     

Cloroformo.2014 EcuRed de: http://www.ecured.cu/index.php/Triclorometano Piridina.2014 EcuRed De: http://www.ecured.cu/index.php/Piridina 2- naftol. Wikipedia de: http://es.wikipedia.org/wiki/2-naftol Timol. Wikipedia http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003040.htm Perez Jorge Benedict de: http://www.slideshare.net/JorgePerez24/biologia-reacciones-quimicas

AUTORIA: BQF. Carlos García

Firma De Responsabilidad Nelly Estefanía Espinoza Nugra 070556285-8

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14. ANEXO MI INVESTIGACIÓN INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO CLOROFORMO El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no inflamable, incoloro, de olor penetrante,2 3 4 dulzón y cítrico, descrito por Samuel Guthrie como "de delicioso sabor".5 Se descompone lentamente por acción combinada del oxígeno y la luz solar, transformándose en fosgeno (COCl2) y cloruro de hidrógeno (HCl) según la siguiente ecuación: 2 CHCl3 + O2 -> 2 COCl2 + 2 HCl Por lo cual se aconseja conservarlo en botellas de vidrio color ámbar y lejos de la luz. APLICACIONES El cloroformo es empleado habitualmente en tintorerías como disolvente de grasas en la limpieza en seco, extintores de incendios, fabricación de colorantes, fumigantes, insecticidas. El cloroformo se emplea como materia prima en la industria química. Por ejemplo, para la fabricación de carburos fluorados (que se utilizan como propelentes de aerosoles, refrigerantes y agentes de soplado), que se utilizan como refrigerantes, resinas, plásticos, etc. El cloroformo es un reactivo químico útil debido a la polarización de sus enlaces C-Cl, por lo que es una herramienta apreciada en síntesis orgánica, al proporcionar el grupo CCl2. Se utiliza habitualmente como disolvente y desengrasante en muchos procesos industriales y en diversos laboratorios, siendo especialmente común el empleo de su derivado deuterado en los laboratorios de química orgánica y farmacéutica. No obstante, debido a la toxicidad del cloroformo, actualmente la tendencia es sustituir su uso en la medida de lo posible por cloruro de metileno (un haloalcano similar al cloroformo) y otros disolventes menos tóxicos.

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Otras aplicaciones del cloroformo radican en su utilidad para la extracción y purificación de la penicilina y otros antibióticos. También para la purificación de diversos alcaloides, como disolvente de extracción de vitaminas y sabores. EFECTOS TÓXICOS AGUDOS El cloroformo es un agente altamente irritante en estado líquido, produce efectos irritantes en nariz, garganta, ojos, piel.15 No obstante, no se han descrito efectos irritantes en estado gaseoso En estudios de exposición a cloroformo por vía inhalatoria a corto plazo en animales de experimentación se han descrito depresión del SNC, dilatación de pupilas de los ojos (midriasis), reducción a la reacción a la luz, y reducción de la presión intraocular CRÓNICOS El cloroformo presenta una toxicidad de leve a moderada. La exposición crónica (a largo plazo) tiene efectos sobre el hígado (incluyendo hepatitis e ictericia), sobre el sistema nervioso central (como la depresión y la irritabilidad), y sobre los riñones.17 18 Se ha probado la toxicidad del cloroformo durante el desarrollo de ratones y ratas mediante su administración por sonda nasogástrica y mediante inhalación. En varios estudios se ha observado la toxicidad fetal (acaudía, ano sin perforar, fisura palatina, costillas onduladas), retraso del crecimiento, concurrente con la evidencia de la toxicidad materna. En otro estudio se observaron efectos sobre la reproducción TRATAMIENTO DE LA INTOXICACIÓN En vista de que el cloroformo sufre conjugación mercaptúrica en su paso por el organismo, algunos autores proponen a la N-acetilcisteína como un posible tratamiento de las intoxicaciones con cloroformo. La N-acetilcisteína, por su capacidad de inhibir la formación de radicales libres generados por el cloroformo y sus metabolitos, ha presentado efectividad en algunos casos en el tratamiento de intoxicaciones por cloroformo, incluso combinado con otros antioxidantes naturales, como la vitamina E. BIBLIOGRAFÍA Vilela, M. (22 de junio de 2015). Cloroformo. Obtenido de https://es.wikipedia.org/wiki/Cloroformo

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