Выпуск 9
Издание Romer Labs®
Насколько свободным от ГМО является «отсутствие ГМО»? Расшифровываем международные регламенты. Разбираемся с международными регламентами.
4 основных вопроса о выявлении ГМО Новые законы США о маркировке
Содержание
4-7 Насколько свободным от ГМО является «отсутствие ГМО»? Разбираемся с международнымирегламентами, конвенции о маркировке и требования к тестированию генетически модифицированных культур Одновременно с развитием технологий выращивания ГМ растений произошло увеличение количества и адаптация регламентов, регулирующих их выращивание, импорт и экспорт. Донна Гучинз, специалист отдела научных исследований и разработок Romer Labs, анализирует некоторые тренды в таких важных сферах, как, например, маркировка, и объясняет, как производители и трейдеры могут продолжать соответствовать правилам несмотря на постоянно меняющиеся нормы. Донна Гучинз (Donna Houchins), специалист отдела научных исследований и разработок, Romer Labs®
Spot On – это бесплатно распространяемое издание Romer Labs Division Holding GmbH. ISSN: 2414-2042
Редакторы: Джошуа Дейвис (Joshua Davis), Кристиан Илеа (Cristian Ilea)
Законы о маркировке ГМО в Соединенных Штатах
6
Наука ГМО: Некоторые Важные правила
7
Кристина Губер (Christina Huber), менеджер по продукции, Romer Labs®
Кристина Губер (Christina Huber), менеджер по продукции, Romer Labs®
Авторы статей: Павло Футерник (Pavlo Futernyk), Донна Гучинз (Donna Houchins), Кристина Губер (Christina Huber) Иллюстрации: GraphX Erber AG
Сбор информации: Курт Бруннер (Kurt Brunner)
©Copyright 2019, Romer Labs® Все права защищены. Запрещается полное или частичное воспроизведение настоящего издания в любом виде в какихлибо коммерческих целях без письменного разрешения держателя авторского права. Все фотографии, содержащиеся в издании, либо являются собственностью Romer Labs, либо используются на основании лицензии. Romer Labs is part of ERBER Group
2
Photo: hauged
Издатель: Romer Labs Division Holding GmbH Erber Campus 1, 3131 Getzersdorf, Austria Тел: +43 2782 803 0 www.romerlabs.com
8-11
Выявление ГМО: 4 важных вопроса
Что Вы проверяете – белок или ДНК? Чем отличаются методы проверки сырьевых продуктов от методов проверки переработанных продуктов? Это только два вопроса, которыми должны задаться все, кому необходимо провести тестирование на наличие ГМО. Кристина Губер, менеджер по продукции, предлагает несколько практических ответов. Кристина Губер (Christina Huber), менеджер по продукции, Romer Labs®
Spot On, выпуск 9
От редактора ГМО: будьте в курсе новейших регламентов и методов Более 20 лет назад генетически модифицированные организмы стали частью всемирного питания. С того времени население увеличилось с 5,8 до 7,7 миллиардов человек. Увеличение производства продуктов питания стало возможным благодаря эффективной и точной агрономии, развитию биотехнологий и, частично, благодаря созданию и использованию ГМО. Со времени создания первой коммерческой ГМ сои мы достигли потрясающего продвижения научного прогресса. Недавние исследования вывели разработку ГМО с уровня устойчивости к гербицидам или насекомым на уровень изменения содержания питательных веществ и производство лекарственных средств, с добавления отдельных признаков на комплексные модификации и редактирование генома. Продвижение технологии, позволяющей такие модификации, поставило перед нами, сообществом аналитиков, существенные задачи, связанные с удовлетворением еще более сложных требований к тестированию, частично вызванных новыми регламентами. Поучительным примером выступают США: здесь ГМО в основном не были регламентированы, однако в 2020 ожидается введение в действие первых общенациональных законов о маркировке. Однако, изменчивая нормативная среда – это только один элемент сложной картины, выявление ГМО изобилует техническими вопросами. От определения надлежащего метода тестирования для сырьевых и переработанных продуктов, до понимания преимуществ и ограничений разных технологий – перед производителями (а также импортерами и экспортерами) стоит часто устрашающее количество особенностей, которые необходимо учитывать. В этом выпуске Spot On Донна Гучинз, наш специалист отдела научных исследований и разработок, представляет обзор регламентов касательно технологий трансформации растений, включая такие новейшие технологии редактирования генома, как CRISPR-Cas9. Также мы детально рассмотрим новые законы США о маркировке и обсудим существенные различия между проверкой процесса и продукта. Кристина Губер, наш менеджер по продукции, предлагает несколько важных вопросов, которые нужно задать себе в процессе выбора подхода к выявлению ГМО: Что Вы проверяете – белок или ДНК? Чем отличаются методы тестирования сырьевых продуктов от методов тестирования переработанных продуктов? Вы ищете определенные признаки или Вам просто нужно подтвердить отсутствие ГМО в образце? Для нас, в Romer Labs, информировать Вас о последних достижениях в сфере диагностических технологий – это более чем удовольствие, это также часть нашей работы. Учитывая все вышесказанное, надеемся, Вам понравится этот выпуск Spot On.
Павло Футерник (Pavlo Futernyk) Генеральный директор, Romer Labs Ukraine
A зm И да aн ga и zеi nReo m o fe rR oLm a besr ®L a b s ®
3
Насколько свободным от ГМО является «отсутствие ГМО»? Разбираемся с международными регламентами , конвенции о маркировке и требования к тестированию генетически модифицированных культур
4
Spot On, выпуск 9
Одновременно с развитием технологий выращивания ГМ растений произошло увеличение количества и адаптация регламентов, регулирующих их выращивание, импорт и экспорт. По мере развития технологий производства ГМ-растений увеличивалось количество и адаптировались существующие нормативные акты, регулирующие их выращивание, импорт и экспорт. Донна Гучинз, специалист отдела научных исследований и разработок Romer Labs, анализирует некоторые тренды в таких важных сферах, как, например, маркировка, и объясняет, как производители и трейдеры могут сохранять свое соответствие правилам в такой изменчивой нормативной среде. Донна Гучинз (Donna Houchins), специалист отдела научных исследований и разработок, Romer Labs®
G
Генетически модифицированные культуры получили широкое распространение по всему миру. Кукуруза, соевые бобы, хлопок и рапс – самые распространенные коммерциализированные ГМО культуры. В настоящее время 229 различных характеристик или пакетов характеристик кукурузы, 62 характеристики или пакетов характеристик хлопка, и 41 различная характеристика или пакетов характеристик сои и рапса утверждены для продуктов питания, кормов или выращивания хотя бы в одной стране мира. Эти разрешения разные во всех утвердивших их странах. Многие культуры выращивают с целью последующего экспорта, они могут попадать в страны, где разрешения или законы о маркировке отличаются от принятых в стране их происхождения. Имея наибольшую площадь земель, отведенную для выращивания ГМО культур, такие страны, как США, Бразилия, Аргентина, Индия и Канада ввели в действие масштабные подтверждения для продуктов питания, кормов и культивирования многих характеристик и наборов характеристик. В то же время большая часть экспортируемых материалов может попадать в страны с отличными разрешениями или требованиями к маркировке. Например, большинство стран-членов Европейского Союза запретили выращивание ГМ культур. Лишь несколько стран, например, Испания и Португалия, разрешают выращивание генетически модифицированных культур. Однако, Европейский Союз является мировым лидером по импорту ГМ культур. Он импортирует более 30 миллионов тонн генетически модифицированной кукурузы и сои в год для кормов. Производители, выращивающие и экспортирующие ГМО, должны основательно знать регламенты разных стран, чтобы их активная торговля ГМО культурами соответствовала юридическим требованиям. Каждая страна сама принимает решение касательно того, разрешает ли она выращивание, импорт и использование продуктов питания или кормов, и устанавливает ограничения по поводу разрешенных характеристик и наборов характеристик. Кроме того, каждая страна устанавливает свои собственные законы, регулирующие маркировку, когда эти культуры продаются. Некоторые страны разрешают выращивание и импорт
ГМ культур (например, США), некоторые запрещают только выращивание, но разрешают импорт (например, Австрия), а некоторые запрещают и выращивание, и импорт (например, Россия).
Разрешенные и неразрешенные культуры
Когда какая-либо культура попадает в страну своего назначения, перед транспортировкой к конечному пункту назначения ее часто проверяют. Эти проверки могут обнаружить ГМ культуры, которые не разрешены в стране-получателе, но могут быть разрешены в стране своего происхождения. Другим распространенным сценарием является прибытие ГМ культур в страну без уведомления или разрешения. Законы, запрещающие импорт ГМ культур, – это первичная преграда для проникновения. В общем, разрешается импорт только утвержденных объектов. Неутвержденным объектам не будет разрешено попасть в страну-получатель, их отправят назад в страну происхождения, что означает большие издержки для экспортера. Также неутвержденные модификации могут вызвать большие издержки из-за отзыва внутри страны своего происхождения, если они попадают на непредназначенные для этого рынки (например, в продуктах питания находят культуру, утвержденную только для кормов). Примером может послужить инструкция, действующая в Европейском Союзе: в Реестре ГМО, утвержденных в ЕС, можно найти перечень всех утвержденных, отозванных и ожидающих рассмотрения культур. Экспортерам следует учитывать этот перечень во время поставок в Европейский Союз. Если какую-либо культуру доставили в Европу и в ней было обнаружено присутствие неутвержденной модификации, ее необходимо отправить назад, в страну происхождения. В других странах существуют похожие перечни и правила импорта.
Производители, выращивающие и экспортирующие ГМО, должны основательно знать регламенты разных стран, чтобы их активная торговля ГМО культурами соответствовала юридическим требованиям.
Краткий анализ: чем отличаются требования к маркировке ГМО в ЕС и США
Разные законы о маркировке в разных странах являются второй преградой для импорта ГМО. Они существенно отличаются в каждой стране. Один из
https://gmo.geneticliteracyproject.org/FAQ/where-are-gmos-grown-and-banned/ View the EU Register of Authorised GMOs at http://ec.europa.eu/food/dyna/gm_register/index_en_new.cfm.
1 2
И з д а н и е R o m e r L a b s ®
5
Новый закон США гласит, что каждый ингредиент может содержать до 5% ГМО, если это является технически неизбежным и ненамеренным. Любое намеренное использование ГМО ингредиентов подлежит маркировке независимо от
самых строгих законов в отношении ГМ культур был принят в Европейском Союзе. В ЕС необходимо маркировать каждую поставку продуктов питания или кормов, содержащих ГМО, независимо от легкости выявления: известно, что ГМО признаки тяжело обнаружить в масле высокой степени очистки. Порог непреднамеренного или технически неизбежного заражения ГМО может быть до 0,9% на ингредиент. Это чрезвычайно важное ограничение, означающее, что поставка продуктов питания практически может содержать 0,6% ГМ кукурузы и 0,7% ГМ сои, и все же не будет попадать под действие регламента о маркировке, поскольку разрешено 0,9% на ингредиент. Однако, если используются два разных признака ГМ кукурузы, один из которых содержит 0,5%, а другой 0,6%, маркировка является обязательной, поскольку сумма ГМ кукурузы составит 1,1%. В то же время, недавно в США был принят новый закон о маркировке, введение в действие которого ожидается в январе 2020 г. для крупных производителей и в январе 2021 для мелких производителей. До этого в Соединенных Штатах не было общенационального закона о маркировке. Новый закон гласит, что каждый ингредиент может содержать до 5% ГМО, если это технически неизбежно и ненамеренно (для получения более подробной информации о новом законе о маркировке см. вставку внизу). Однако, любое намерен-
ное использование ГМО ингредиентов подлежит маркировке независимо от уровня содержания. Таким образом, производителям из США, планирующим поставки в ЕС, следует убедиться в том, что ни одна из их поставок не содержит более чем 0,9% на ингредиент, чтобы не требовалась маркировка продуктов в ЕС, хотя регламент в их стране позволил бы до 5% неизбежных или ненамеренно добавленных ГМО. В Бразилии этот порог установлен на уровне 1%. Япония также использует 5%-ный порог. Аргентина и Канада не имеют никаких законов о маркировке в отношении ГМО. Экспортеры обязаны заботиться о том, чтобы их поставки отвечали требованиям к маркировке в странах назначения, а не только в их странах, так как страна-получатель может иметь более строгие требования к маркировке. В таких ситуациях отзыв или отклонение поставки может приводить к трудностям и дополнительным издержкам.
ГМО на основании продукта или процесса
В разных странах возможны разные требования к продуктам, произведенным с помощью новых технологий генного редактирования, например, CRISPR-Cas9. CRISPR расшифровывается как “clustered regularly interspaced short palindromic repeats” – короткие палиндромные повторы, регулярно расположенные группами. Cas9 относится к
уровня содержания.
Законы о маркировке ГМО в Соединенных Штатах Кристина Губер (Christina Huber), менеджер по продукции, Romer Labs® Министерство сельского хозяйства США (USDA) подало заявку на новый стандарт маркировки в отношении ГМО. До этого времени не было стандарта для продуктов питания, полученных биотехническими методами. Этот новый стандарт будет введет в действие, начиная с января 2020 года, кроме небольших производителей продуктов питания, дата введения закона в действие для которых отложена на год. В США продукты питания, полученные биотехническими методами, определяют как что-либо, содержащее обнаруживаемый генетический материал, измененный с помощью лабораторных технологий, модификацию которого невозможно найти в природе, при этом она не является результатом традиционной селекции. Производителям продуктов питания придется маркировать все продукты, которые были получены биотехническими методами или содержат ГМ ингредиенты. Есть несколько исключений из маркировки: (А) если продукт питания модифицирован, но его нельзя обнаружить, например, масла и сахара, (Б) для нескольких продуктов питания, таких как мясо, сомообразные, одомашненные птицы или яичные продукты, (В) для продуктов, полученных от животных, например, яйца и молоко. Каждый ингредиент может состоять из ГМО не более чем на 5%, если заражение было ненамеренным; обычным примером служит транспортирование
6
не ГМ культур грузовым автомобилем после выгрузки ГМ культур. Однако, необходимо маркировать каждый ингредиент, который намеренно содержит ГМО, независимо от их содержания. У производителей продуктов питания есть четыре варианта маркировки: • Использование символа «полученный с помощью биотехнических методов»; • Использование печатного текста с указанием «продукт, полученный с помощью биотехнических методов» или «содержит генетически модифицированные пищевые ингредиенты»; • Использование электронной или цифровой ссылки, сопровожденной заявлением, например, «для получения более подробной информации о продукте питания сканируйте здесь» с указанием номера телефона; • Отправление текстового сообщения с указанием информации о генетически модифицированном продукте питания непосредственно на мобильное устройство потребителя. Для получения более подробной информации см. https:// www.ams.usda.gov/rules-regulations/be/regulated-entities Spot On, выпуск 9
ферменту, использующему CRISPR последовательности в качестве руководства для распознавания и расщепления отдельных нитей ДНК. Эта новая технология дала исследователям возможность редактировать геном любого организма с высокой степенью точности. Разница между стандартными инструментами разработки ГМО и CRISPR-Cas9, используемыми в селекции растений, состоит в том, что стандартные технологии используют биолистику («генную пушку») или чужеродные бактерии (обычно Agrobacterium) для инкорпорации гена, тогда как в случае CRISPR-Cas9 осуществляют точное редактирование генома без использования чужеродных организмов. Результаты CRISPR-Cas9 могут быть неотличимы от результатов традиционных технологий селекции растений, мутагенеза или естественных рандомных мутаций. В свою очередь, это вызвало споры по поводу того, считать ли, что культуры, измененные с помощью CRISPR-Cas9, – это ГМО. Определение термина «ГМО», запускающее выполнение требований законов о маркировке, отличается в разных странах, поэтому некоторые юрисдикционные территории полагают, что CRISPR-Cas9 признаки – это ГМО, а другие так не считают. Например, юридическое определение термина «полученный биотехническими методами» в Соединенных Штатах является «основанным на продукте», и гласит, что продукты питания, полученные биотехническими методами, – это что-либо, содержащее обнаруживаемый генетический материал, измененный с помощью лабораторных технологий, модификацию которого невозможно найти в природе, при этом она не является результатом традиционной селекции. Это определение включено в новый закон о маркировке, который будет введен в действие в 2020 году. Определение, принятое в Европейском Союзе, «основано на процессе». Оно определяет генетически модифицированный организм как «организм, за исключением человеческих существ, генетический материал которого был изменен способом, не происходящим в природе путем спаривания и/ или естественной рекомбинации».Согласно этим определениям, в отличие от Европейского Союза, Соединенные Штаты не рассматривают признаки, возникающие благодаря CRISPR-Cas9, в качестве ГМО.
Прослеживаемость
В Европейском Союзе каждая партия ГМ продуктов питания или кормов должна отслеживаться на каждом этапе цепи поставок. Если возникают обоснованные подозрения в том, что продукты питания или корма были заражены ГМ культурой, меры по отслеживанию обеспечивают способность уполномоченных лиц отследить культуру и, в случае необходимости, отозвать ее с рынка. Операторы обязаны информировать потребителей, указывая, был ли продукт генетически модифицирован или содержит ГМ ингредиенты. Это указание должно содержать информацию об уникальном И з д а н и е R o m e r L a b s ®
идентификаторе или идентификаторах для этих ГМО, и операторы должны обеспечить передачу этой информации тем, кто будет следующим в цепи поставок. Каждому оператору следует хранить документацию обо всех транзакциях в цепи поставок в течение пяти лет. В этой информации необходимо указывать, кто был предыдущим и будет следующим в каждой цепи поставок. Европейский Союз – это единственная юрисдикционная территория с такими требованиями к отслеживанию.
Обеспечение соответствия требованиям действующего законодательства в тестировании ГМО
Из-за чрезвычайно высокой степени различий среди законов о маркировке и утверждений по всему миру, выявление наличия ГМО служит ключом к упрощению перемещения зерна из одной страны в другую. Также его можно использовать для соблюдения специальных критериев к контролю качества, установленных для производителей и экспортеров зерна, или для выполнения договорных требований со стороны покупателей. К типичным тестам, выполняемым экспортерами и лицами, занимающимися обработкой/транспортированием зерна, относятся анализы с использованием тест-полосок и тест-наборов ИФА. Оба метода проверяют на наличие специфических белков, производимых исследуемым ГМ растением. Методы могут быть как количественными, так и качественными. Это экспресс-тесты, которые обычно проводят в помещениях для работы с зерном. Также может проводиться ПЦР-тестирование на специфическую целевую модификацию ДНК. Это лабораторный тест, который может обнаружить промотера и терминатора в ДНК, внедренной в ГМ растение, или, возможно, специфической для определенного объекта.
Из-за чрезвычайно высокой степени различий среди законов о маркировке и утверждений по всему миру, проверка наличия ГМО служит ключом к упрощению перемещения зерна из одной страны в другую.
Определение и маркировка ГМО: Комплексная работа
Помимо отличий в юридических требованиях в разных странах, существенно отличается и само определение того, что такое ГМО. Разные законы требуют необходимость проверки на наличие ГМО, поскольку в противном случае они могут привести к неожиданно высоким затратам, если, например, экспортер попытается продать урожай в страну, в которой он не одобрен; обычно в таком случае экспортер должен будет нести расходы по возврату. В настоящее время новые законы о маркировке, вводимые в действие в США и других странах, затрагивают вопрос того, как будут регулироваться новые технологии редактирования растений. Широкий спектр вариантов тестирования может внести ясность и снизить риск, чтобы помочь участникам всемирной зерновой торговли адаптироваться к сложностям регулирования ГМО. Следующая статья детально рассматривает распространенные технологии выявления ГМО.
7
Выявление ГМО: 4 важных вопроса Что Вы проверяете – белок или ДНК? Чем отличаются методы тестирования сырьевых материалов от методов тестирования обработанных материалов? Это только два вопроса, о которых должны помнить все желающие проверить что-либо на наличие ГМО. Кристина Губер, менеджер по продукции, предлагает несколько практических ответов. Кристина Губер (Christina Huber), менеджер по продукции, Romer Labs®
8
Spot On, выпуск 9
Photo: hauged
К
ак уже говорилось в предыдущей статье, в разных странах есть разные нормативные положения касательно утверждений на торговлю генетически модифицированными растениями или их выращивание в пределах юрисдикции отдельной страны. Следовательно, критерии тестирования существенно различаются в разных странах. Эта статья излагает несколько основных особенностей, которые необходимо учитывать в процессе выбора надлежащего формата теста с целью определения того, получен ли образец из генетически модифицированного растения. Генетическая модификация – это любое искусственное изменение ДНК в растении путем редактирования генома или внедрения чужеродных фрагментов ДНК. Модифицированный ген переносит новый признак, например, устойчивость к насекомым или гербицидам, или другие характеристики, важные для сельского хозяйства. Один из первых вопросов, предстающих перед Вами, является то, что Вы хотите проверять – ДНК или белок. Вместе с этим решением Вам необходимо решить, что Вы будете проверять – сырьевой или обработанный материал. Третий целевой вопрос: Вы ищете специфический ГМО признак или просто хотите знать, является ли Ваша культура свободной от ГМО? И наконец, огромную роль также играют такие факторы, как чувствительность, И з д а н и е R o m e r L a b s ®
скорость и простота выполнения. Все эти решения помогут Вам выбрать надлежащий формат из широкого спектра самых распространенных вариантов тестирования: полимеразная цепная реакция (ПЦР), иммуноферментный анализ (ИФА) или анализы с использованием тест-полосок (LFD).
1) ДНК или белок?
Модификация растения предусматривает изменение его ДНК последовательности. Можно определить изменение путем обнаружения непосредственно искусственного изменения ДНК или выявления экспрессированного белка, которого не бывает в целевой культуре в естественном виде. Такие подходы к тестированию, основанные на нуклеиновой кислоте, как, например, ПЦР, амплифицируют целевую область генома растения с целью получения миллиардов копий небольших фрагментов ДНК с помощью так называемых праймеров и ДНК-полимеразы в качестве фермента. Раньше эти фрагменты ДНК можно было разделить и визуализировать на агарозном геле, а современные, более совершенные инструменты позволяют проводить непосредственные измерения реакции амплификации с помощью флуоресцентных технологий. ПЦР – это не только качественный подход,
9
Чтобы обнаружить, является ли Ваш образец полностью свободным от ГМО, достаточно просто проверить на наличие одного объекта в каждой культуре.
она также позволяет проводить количественный анализ ГМ материала в образце. Иммуноанализы используются для выявления белков. Эти иммунологические тесты используют специфические антитела, которые могут связывать белок. Доступны два разных формата тестирования – использование тест-полосок (LFD) и иммуноферментный анализ (ИФА). Обе системы работают в сэндвич-формате, т.е. одно антитело иммобилизуют на поверхности, которая специально связывает целевой белок. Как только белок связывается с иммобилизованным антителом, может связываться и маркированное вторичное антитело, формируя сэндвич и давая цветной сигнал. Если этот целевой белок не доступен, сэндвич не может образоваться, поэтому не видно никакого цвета, что указывает на отсутствие ГМО в проверяемом растении. В большинстве случаев для ИФА используется 96-луночный планшет, покрытый специфическим антителом, что позволяет проводить анализ многих образцов одновременно. LFD – это полоски, на которых есть тестовая и контрольная линия, покрытые специфическим антителом для улавливания целевого белка. Если проявляется тестовая линия, результат является положительным, указывая на присутствие целевого белка. Эти тесты существуют в количественном или качественном формате, необходим LFD-ридер для количественного определения результата. В общем, тестирование ДНК прочитает измененную последовательность ДНК, в то время как тестирование белка обнаружит новый белок, полученный из этой специфической последовательности ДНК. Специфические качества образца, подлежащие анализу, также играют свою роль в определении того, какой метод лучше удовлетворит Ваши потребности – основанный на ДНК или белках. Далее мы рассмотрим разные требования к тестированию сырьевого материала или обработанных материалов.
2) Чем тестирование сырьевых материалов отличается от тестирования обработанных материалов?
Когда речь идет об определении надлежащей технологии тестирования, возникает следующий вопрос, выходящий за пределы целевого объекта (ДНК или белка): из чего состоит матрица – из сырьевого или обработанного материала? Это особенно важно для тестирования белка. Сырьевые материалы экспрессируют немодифицированный белок, что означает возможное использование и ПЦР, и иммунологических тестов. Однако, как только сырьевой материал был обработан, его белки денатурируют, при этом меняя свою естественную структуру, и в большинстве случаев не могут быть обнаружены иммунологическими тестами. Например, термическая обработка – это процесс, который может приводить к денатурации белков. Однако, этот процесс не меняет последовательность ДНК, таким образом, можно использовать ПЦР для выявления внедренного гена даже в некоторых обработанных материалах.
10
Если Ваш образец – сырьевой материал, у Вас есть больше вариантов тестирования: выявление генетической модификации возможно с помощью технологий, основанных и на ДНК, и на белках. Однако, если Ваш образец – глубоко переработанный материал, в котором белок мог денатурировать, Ваши варианты ограничены тестированием ДНК.
3) Есть ли в моем образце специфический признак? Свободен ли он от ГМО? Что именно Вам нужно знать?
Иногда необходимо проверить образец на наличие специфических признаков, чтобы определить, содержит ли он растения, не разрешенные в определенных регионах. Также может понадобиться определить, является ли образец полностью свободным от ГМО, независимо от какого-либо определенного признака. Чтобы проверить на наличие специфического ГМО, важно знать, какие белки экспрессируются в целевом ГМО. Эту информацию можно получить у производителя или из таких источников, как веб-страница ISAAA (http://www.isaaa.org/), где перечислены все утвержденные ГМО. Следующий этап – определение желаемого формата тестирования (ПЦР, ИФА или LFD) на основании желаемой специфичности, времени ожидания, типа материала и доступного лабораторного оборудования. Здесь аналитикам необходимо быть осторожными, поскольку есть много ГМО продуктов, которые содержат не просто один внедренный ген, а несколько (так называемые объекты с пакетированными генами), поэтому, если Вы желаете проверить на наличие специфического ГМО, Вам нужно проверить на все внедренные гены (или экспрессированные белки), связанные именно с этим растением. Другая стратегия выявления ГМО состоит в определении того, содержит ли растение какие-либо ГМО материалы. Этот вид тестирования не является специфическим ни для какого определенного объекта. Чтобы определить, является ли образец полностью свободным от ГМО, достаточно проверить всего один объект для каждого растения. Это эффективно даже с учетом ГМО культур с пакетированными генами, поскольку подтверждение присутствия всего одного объекта достаточно для доказательства присутствия ГМО. Для такого тестирования подходят все три технологии. ПЦР обеспечит самый широкий спектр, поскольку, например, очень часто вводят NOS-терминатор или 35S промотер. Во время тестирования с использоваSpot On, выпуск 9
В конечном итоге
Таблица 1. Характеристики технологий выявления ГМО Технология
ПЦР
ИФА LFD Источник: Romer Labs
Преимущества
Недостатки
Ваш выбор метода
Raw and processed materials can be tested
Необходимо лабораторное оборудование
тестирования –
Времязатратный
желаемого Вами
Наивысшая чувствительность Можно обнаружить все ГМО Референтный метод
Можно проверять много образцов одновременно
Можно использовать в любом месте Высокая скорость
нием тест-полосок комбинационная полоска может обнаружить несколько белков одновременно. Эти две технологии полностью зависят от потребностей заказчика, так как для некоторых может быть более важно знать, является ли культура свободной от ГМО (например, в стране, где выращивание запрещено, но возможны нелегальные насаждения). Другие могут желать точно знать, какое растение они высаживали.
4) Как Вы можете выбрать правильный метод тестирования, принимая во внимание такие другие факторы, как среда тестирования?
Другим фактором, играющим свою роль в выборе правильного формата тестирования, является среда тестирования. У Вас будет лаборатория и обученный персонал или Вам бы хотелось провести быстрый тест, который не требует никакого лабораторного оборудования? Таблица 1 обобщает доступные форматы тестирования, а также их преимущества и недостатки. Давайте пройдем по таблице и рассмотрим все этапы. Будучи референтным методом для тестирования ГМО, ПЦР является самым подходящим методом, если Вы желаете проверить какой-либо обработанный материал. Эта технология также обеспечивает наивысшую степень чувствительности и обнаруживает практически любой ГМО. Однако, существенным недостатком является то, что нужны лабораторное оборудование и обученный персонал. Чтобы провести ПЦР, особенно если желателен количественный анализ, необходимы навыки точного отмеривания пипеткой, поскольку неточное отмеривание может привести к ложным или неубедительным результатам. Основным преимуществом ИФА является способность одновременно проверять много образцов. Это важно, если Вы желаете проводить тестирование отдельных зерен. Однако, поскольку это тест, основанный на белке, его можно использовать только для сырьевых материалов. Если Вы сравните все три технологии в разрезе времени ожидания, тест-полоски – это самый быИ з д а н и е R o m e r L a b s ®
Нужен обученный персонал
это отображение
Нужно лабораторное оборудование
времени ожидания
Только для сырьевых материалов
оборудования и
Только для сырьевого материала
стрый метод. Тест-полоски (LFD) можно использовать в любом месте, они не требуют использования сложного инструментария. Итак, если Вы желаете проверить входящую поставку и получить быстрые результаты, было бы целесообразно выбрать тест-полоски, поскольку результаты готовы в течение 10 минут, не нужно никакого персонала лаборатории, необходимо очень мало оборудования. Также эта технология не требует никаких навыков лабораторной работы, поскольку процедура разработана для простоты использования. Так какой же метод работает наилучшим образом? В конечном итоге Ваше решение – это отображение желаемого Вами времени ожидания и помещений, оборудования и персонала в Вашем распоряжении.
и помещений, персонала в Вашем распоряжении.
Вывод: ценность специально разработанных технологий для тестирования ГМО.
В конечном счете Вам нужно принять во внимание несколько факторов, чтобы найти надлежащую стратегию тестирования. Она зависит от материала, который Вы желаете тестировать (сырой или обработанный), нужны ли Вам быстрые результаты, есть ли у Вас возможность иметь лабораторию с оборудованием и персоналом, и желаете ли Вы точно знать, какие именно ГМО признаки у Вас есть, или хотите знать, является ли Ваша культура свободной от ГМО. Нет правильной или лучшей технологии, поскольку Ваше решение зависит от Ваших ответов на все эти вопросы. Некоторые могут выбрать тест-полоски, чтобы вложиться в плотные временные рамки, тогда как другие могут быть нацелены на более специфические и детальные результаты с использованием ПЦР. А другие, например, исследовательские учреждения, могут пожелать проверить свою научно-исследовательскую и опытно-экспериментальную базу и проводить тестирования многих образцов отдельных семян с помощью ИФА. Рассмотрение всех этих составляющих поможет Вам сделать правильный выбор, когда придет время проверить Вашу культуру.
11
Ваш экземпляр Spot On
Инновационные решения в проведении анализов.
Свяжитесь с нами для получения более подробной информации: www.romerlabs.com | solutions@romerlabs.com