UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
TRABAJO DE TOXICOLOGÍA INTEGRANTES:
KATHERINE ZAMBRANO GONZAGA CARLA CORONEL TENEMAZA JAIRO GUERRERO CUERO LAURA MACHUCA BASTIDAS VALERIA ZURITA MORAN
DOCENTE: DR. CARLOS GARCIA Mg. Sc
CURSO: QUINTO AÑO ´´A´´
FECHA DE ENTREGA: 05- Julio-2016
AÑO LECTIVO: 2016-2017 MACHALA – EL ORO – ECUADOR
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 INTRODUCCIÓN El formaldehído es uno de los químicos orgánicos más importantes utilizado hoy en día en una gran cantidad de actividades y aplicaciones. Aunque el formaldehído fue descrito por primera vez en 1859 por el químico ruso Aleksandr Butlerov (1828–86),2donde lo llama «Dioxymethylen» (methylene dioxide) por un error en su fórmula (C4H4O4). No fue hasta 1869 queAugust Wilhelm von Hofmann lo identificó correctamente. (4) La mayor parte de la producción de formaldehído ha sido destinada a la fabricación de resinas las cuales son usadas como adhesivos para la fabricación de elementos de madera unidos que comprenden tablas de aglomerado, tablas de fibras, y madera terciada; además es utilizado como materia prima para fabricar fertilizantes, Colorantes, papel, material fotográfico, productos para embalsamar, perfumes, vitaminas y drogas. El Formaldehído es un producto metabólico importante en plantas y animales y por ello está presente en el medio ambiente de forma natural en bajas concentraciones. También se genera en el medio ambiente por combustión incompleta de material orgánico como combustibles líquidos o gaseosos derivados del petróleo. En estado gaseoso puro el Formaldehído tiende a polimerizar y por ello no se comercializa en forma pura; su almacenamiento y transporte se realiza en forma de soluciones en agua y Metanol. Las formas comerciales de estas soluciones, conocidas como formalinas, corresponden a entre 30% y 40% de Formaldehído y 15% de Metanol como agente estabilizante. Otra presentación comercial del Formaldehído corresponde a su forma sólida en dos tipos de productos, el trioxano [(CH2O)3] y el paraFormaldehído que es la forma polimerizada del Formaldehído de entre 8 y 100 unidades (9, 10). El Formaldehído es uno de los químicos orgánicos más importantes para síntesis en la industria química, donde se pueden encontrar hasta 50 líneas de trabajo diferentes. (3)
´Todo es veneno nada es veneno todo depende de la dosis´´
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 OBJETIVOS: OBJETIVO GENERAL: Conocer las características, usos e importancia del Formaldehido mediante revisiones bibliográficas y artículos científicos para el aprendizaje diario de los estudiantes y su preparación como futuros profesionales.
OBJETIVOS ESPECIFICOS: Especificar sus aplicaciones en la industria y su grado de toxicidad. Indagar sobre casos clínicos sobre intoxicaciones ocasionadas por formaldehído. Conocer la sintomatología que presenta una animal de experimentación (rata) tras la intoxicación por metanol y etanol.
´Todo es veneno nada es veneno todo depende de la dosis´´
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 MARCO TEÓRICO:
GENERALIDADES El formaldehído o metanal es un compuesto químico, más específicamente un aldehído, de fórmula H2C=O. Se obtiene por oxidación catalítica del alcohol metílico, usando plata u óxidos metálicos (hierro y molibdeno) como catalizadores. Además de las emisiones que resultan de su fabricación y uso, el formaldehído es liberado a la atmósfera por combustión incompleta y por la descomposición fotoquímica de sustancias orgánicas. Se trata de un compuesto químico bastante volátil e inflamable, que en condiciones normales se encuentra en estado gaseoso, es incoloro y posee puntos de fusión y ebullición negativos en la escala Celsius, siendo de -92ºC y -21ºC, respectivamente. (3) Posee una alta solubilidad que presenta, tanto en agua como en éter. Así el formol se obtiene cuando se encuentra el formaldehído disuelto en agua en torno a un 40%. El Formaldehído puro a temperatura y presión ambiente es un gas incoloro de olor fuerte e irritante. A temperaturas menores de -20 °C es un líquido transparente e incoloro. Es irritante para los ojos y el tracto respiratorio aun a bajas concentraciones (1ppm) causando sensación de ardor a mayores concentraciones; los vapores de soluciones de Formaldehído son inflamables y explosivos. Debido a su gran solubilidad, alrededor del 99 % de todo el formaldehído que es liberado al medio ambiente se encuentra en el agua. Alrededor del 1% del formaldehído emitido al medio ambiente llega a la atmósfera pero es rápidamente arrastrado a tierra por las precipitaciones. La degradación está a cargo de microorganismos que se encuentran en el suelo y en el agua. A temperaturas superiores a los 150°C, el formaldehído se descompone formando metanol y monóxido de carbono. Debido a su corto tiempo de vida media, su estabilidad en la atmósfera es escasa (BMJFG, 1984). Al entrar en contacto con ácidos y álcalis, el
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 formaldehído se polimeriza espontáneamente. Reacciona con agua formando polimetilenos. Con HCl forma bis (clorometil) éter, que es altamente carcinógeno y cataliza aminas secundarias, formando compuestos N-nitrosos/nitrosaminas que también son carcinógenos. (3)
APLICACIONES Ya desde la antigüedad, venía utilizado como desinfectante la mezcla de agua y formaldehído a una concentración superior a 30%. Hoy en día se usa para la fabricación de numerosos productos de la química industrial, así como medicamentos, etc. Es muy usado para conservar restos, o muestras de origen e interés biológico, así como para mantener los cadáveres en estado fresco. Otro uso, más comercial, es la fabricación de productos textiles, y tejidos carentes de arrugas, llegando a contener altas concentraciones de aldehído; en la actualidad, si dicha cantidad de aldehído en un tejido es superior al 0.15% del peso total de la prenda, esto deberá verse reflejado en la etiqueta del producto, pues es aconsejable proceder a un lavado previo uso de la prenda, ya que puede ser tóxico al combinarse con ciertos aniones libres. Aun hoy en sí se sigue apareciendo metanal en la composición química de algunos productos usuales en el mundo de la cosmética y la higiene personal. (3)
EFECTOS CARACTERÍSTICOS Seres humanos/mamíferos El formaldehído irrita intensamente las mucosas, la conjuntiva, la piel y las vías respiratorias superiores, tanto en su forma gaseosa como de vapor o en aerosol. Disuelto en agua, es un tóxico protoplasmático con efecto cáustico y desnaturalizador de la albúmina. En contacto con la piel produce necrosis de coagulación superficial con formación de costras, piel apergaminada e insensibilidad. Cuando se ingieren o inhalan cantidades mayores, se originan lesiones en el esófago o en la tráquea, dolores en el tracto gastrointestinal, vómitos, pérdida del conocimiento y colapso. 60 ml de líquido o 650 ml de vapor por m3 pueden resultar mortales al cabo de pocos minutos. (2)
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 PROPIEDADES FISICO-QUIMICAS Propiedades Físicas (4)
Fórmula: CH2O Apariencia: Incoloro Densidad: 820 kg/m3; 0,82 g/cm3 Masa molar: 30,026 g/mol Calor de combustión: 4.47 kcal/g Punto de fusión: 181 K (-92 °C) Punto de ebullición: 252 K (-21 °C) Densidad relativa de vapor (aire = 1): 1,08 Punto de inflamación: gas inflamable Temperatura de autoignición: 430°C Límites de explosividad, % en volumen en el aire: 7-73%
Propiedades Químicas
Muy soluble en agua, alcohol Y Otros solventes polares. El formaldehido está presente en soluciones acuosas como hidrato y tiene a polimerizarse. A una concentración del 30% o más tiende a precipitar estos polímeros a temperatura amiente, enturbiando la solución. Se descompone en metanol y monóxido de carbono frente a temperaturas de 150ºC. Bajo condiciones atmosféricas, la luz solar fotooxida con facilidad al formaldehido a bióxido de carbono. Es muy inflamable y forma mezclas explosivas en el aire en el intervalo de 7% a 73% en volumen a 25 °C (4).
TOXICIDAD La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina) para seres humanos (DL50) se encuentra entre 500 y 5000 mg/kg, que representa una cantidad total de entre 35 y 350 g para una persona de 70 kg de peso. En ratas y conejillos de indias las DL50 son similares que en caso de humanos, siendo éstas de 800 y 260 mg/kg de peso para cada especie respectivamente (5).
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 En el hombre, las concentraciones de 2-3 ppm producen irritación nasal, conjuntival y laríngea. Si las concentraciones se elevan a 4-5ppm se manifiesta un fuerte lagrimeo. A 1012ppm se producen, de manera inmediata, fuertes accesos de tos (6). En exposiciones prolongadas por vía respiratoria a bajas concentraciones de Formaldehído se puede presentar asma y problemas pulmonares crónicos. Es posible desarrollar dolor de cabeza persistente, personalidad depresiva, cambios repentinos de ánimo, insomnio, irritabilidad, dificultad de concentración y pérdida leve de la memoria (5). El Formaldehído se absorbe por la piel y puede causar irritación o dermatitis alérgica en concentraciones bajas de alrededor de 1 o 2% (5).
METODOS DE OBTENCIÓN DE FORMALDEHIDO La obtención del formaldehído se ha realizado siempre, y de hecho, continúa realizándose partiendo de otro compuesto, el metanol. A través de una oxidación de tipo no catalítica de los compuestos propano y butano. Éste método tenía la problemática que producía muchos residuos o productos secundarios, que debían ser separados a través de costosos procedimientos separativos, por lo que en todo momento se prefirió el método de obtención a partir de metanol. Dicho
procedimiento
puede
tener
lugar
de
dos
formas
diferentes:
Proceso con catalizador de plata. El formaldehido se obtiene mediante la oxidación de metanol, empleando un catalizador de plata y temperaturas de 600° a 700° C.
O siguiendo el método que va por debajo del límite inferior, en vez del metanol como en el caso anterior. En éste caso también se hace necesaria la presencia de catalizadores, como los de óxidos metálicos.
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 El procedimiento por el cual se obtiene formaldehído a través de unas reacciones con presencia de catalizadores de óxidos metálicos, se realizó por vez primera con el catalizador de pentóxido de vanadio, pero hoy en día, el catalizador más utilizado es el de acero. Al contrario que el anterior método, en este caso el formaldehído se consigue en todo momento, a través de reacciones que desprenden energía, con igual presión que el proceso de catalizadores de plata, pero a una menor temperatura, en torno a los 400 ºC como máximo. Durante mucho tiempo se han realizado estudios para obtener nuevos métodos de síntesis de formaldehído, como por ejemplo la síntesis de formaldehído a través del metano siguiendo una oxidación parcial, o la obtención del formaldehído por una des hidrogenación de metanol. A pesar de que han sido numerosos los esfuerzos por que estos métodos funcionaran a la perfección, aún no se ha conseguido la tecnología suficiente para que las industrias hagan factibles dichas propuestas de obtención.
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN 1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al 1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3 minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir 1ml de Fushina bisulfatada(Reactivo de Schiff). Produce un color violeta intenso si es positivo. 2. Reacción de Rímini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una coloración azul intensa si es positivo. 3. Con la fenil hidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 3 gotas de solución de ferrocianuro de potasio al 5%, posterior a esto añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo grosella en caso de ser positivo.
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 4. Con el ácido Cromo trópico.- 1 ml de muestra + ácido cromo trópico+ 3 gotas de ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de calentarla a la llama si es positivo. 5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul violeta si es positivo.
EFECTOS SOBRE LA SALUD La toxicidad del Formaldehído se debe principalmente a sus propiedades altamente irritantes para los tejidos vivos que entran en contacto con él. Los síntomas más comunes de la exposición a Formaldehído son la irritación en los ojos, nariz y garganta. Estos síntomas se perciben a partir de concentraciones de entre 0,4 y 3 ppm. La variabilidad en la concentración de aparición de los efectos depende de cada exposición específica La toxicidad del Formaldehído está enfocada a la ruta de exposición por la cual tenga acceso al organismo.
CONCENTRACIÓN 1–5%
5-25 %
Mayor al 25 %
EFECTO
Efecto cancerígenos y posible sensibilidad al contacto con la piel Nocivo por inhalación, ingestión y contacto con la piel. Irrita los ojos, piel y vías respiratorias Efecto cancerígeno Sensibilización al contacto con la piel Quemaduras Toxico por inhalación, ingestión y contacto con la piel. Quemaduras Efectos cancerígenos Sensibilización al contacto con la piel
La irritación por contacto se ve en las rutas por inhalación, por ingestión y por la piel. Concentraciones altas son tóxicas para las células y resultan en degeneración y necrosis de las capas mucosas y epiteliales de las células (7) Los efectos de la ingestión de grandes cantidades de Formaldehído conducen a dolor intenso en el abdomen, vómito, estado de coma y, dependiendo de la dosis ingerida, se puede producir la muerte de la persona expuesta. Si la sustancia que se ingiere es formalina (solución acuosa de Formaldehído) con Metanol como agente de estabilización, se pueden
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 presentar efectos nocivos debidos al Metanol; estos incluyen visión borrosa o su posible pérdida en forma permanente. El contacto de la piel con Formaldehído en altas concentraciones, ya sea en el aire o en soluciones, genera principalmente irritación local. Otro peligro que presenta el Formaldehído lo constituye su alta inflamabilidad y explosividad en mezclas con aire.
VIAS DE INGRESO DEL TOXICO INHALACIÓN Esta es la vía de contacto más común del Formaldehído con el tejido animal, vegetal o humano. Normalmente todo tipo de población está expuesta a niveles bajos de Formaldehído en el aire que ocurren de forma natural o por fuentes humanas. Los mayores niveles de exposición a Formaldehído están presentes en personas que viven cerca o trabajan en plantas de fabricación o transformación de esta sustancia. Personas que trabajan en laboratorios del área de la salud también pueden estar expuestas por causa de la utilización del Formaldehído con fines de preservación de especímenes, tejidos, órganos, etc. A nivel doméstico, el Formaldehído puede alcanzar el aire por liberación directa a partir de productos como pinturas de látex, endurecedores de uñas, artí culos de fibra de vidrio y otros varios El Formaldehído disperso en el aire se absorbe rápidamente a través de los pulmones; una vez se absorbe por un organismo, se transforma y destruye rápidamente por acción metabólica. Casi todos los tejidos del organismo son capaces de degradar el Formaldehído transformándolo en formato, que se elimina por vía urinaria. También se puede convertir en Dióxido de Carbono y de esta forma se elimina en la respiración. Otra vía de transformación metabólica del Formaldehído en el organismo implica su acondicionamiento para la generación de moléculas más grandes asimilables por los tejidos Los casos de exposición por tiempos prolongados en concentraciones consideradas como agudas traen consigo el riesgo de muerte para cualquier individuo presente en el área de peligro (6).
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 La exposición aguda al Formaldehído se da en: CONCENTRACION 50 – 100 ppm 10 – 20 ppm
4 – 5 ppm 1 ppm
EFECTO Quemaduras e irritación muy fuerte de nariz, tráquea, esófago bronquios y pulmones dificultad en la respiración debida a la inflamación de vías respiratorias, tos, y quemaduras severas de nariz y garganta irritación leve da las mucosas nasales y bucales solo se siente su olor
CONTACTO PIEL / OJOS Industrialmente el contacto ocular o cutáneo con vapores o soluciones de Formaldehído se puede generar en ambientes con pobre control de emisiones y de operaciones en donde se requiera la manipulación de esta sustancia en recipientes no herméticos. El empleo de Formaldehído como aditivo en cosméticos genera algún grado de exposición para personas ajenas a los ambientes industriales; no obstante los niveles empleados siempre se controlan para no exceder el umbral de irritabilidad en la piel (7) El uso del Formaldehído en forma directa en soluciones acuosas como desinfectante y medio de conservación de muestras en laboratorios, hospitales y centros de investigación hace que personas como médicos, enfermeras, auxiliares de laboratorio y personal de limpieza estén en riesgo de contacto mayor con esta sustancia que el común de las personas. El contacto ocular con vapores de Formaldehído produce irritación y lagrimeo desde concentraciones tan bajas como 0,4% para algunas personas. Dependiendo de la concentración, las soluciones de Formaldehído pueden causar incomodidad temporal e irritación o efectos más severos, incluyendo opacidad y ulceraciones en la córnea, muerte de las células en la superficie del ojo, perforaciones de los lentes oculares y pérdida permanente de la visión; estos efectos son retardados en algunos casos y se pueden presentar en el lapso de hasta 12 horas. INGESTIÓN La ingestión de Formaldehído por seres humanos tiene lugar por el consumo de alimentos que incluyen esta sustancia dentro de su formulación como agente conservante; no obstante las dosis son lo suficientemente pequeñas como para no tener efectos en la salud. En forma aguda, la ingestión se puede presentar en intentos de suicidio o en incidentes accidentales con soluciones de Formaldehído destinadas para la limpieza o desinfección (7) La absorción de Formaldehído en el organismo a través del tracto gastrointestinal es rápida luego de una exposición por vía oral, pero los efectos que se puedan presentar son retardados por la ingestión de alimentos. Una vez se absorbe, el Formaldehído se transforma
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 en ácido fórmico por la acción de una serie de reacciones metabólicas; el ácido fórmico causa desequilibrios de pH así como otros efectos en el organismo que pueden ir en contra del buen funcionamiento corporal (8)
La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina) para seres humanos (DL50) se encuentra entre 500 y 5000 mg/kg, que representa una cantidad total de entre 35 y 350 g para una persona de 70 kg de peso. En ratas y conejillos de indias las DL50 son similares que en caso de humanos, siendo éstas de 800 y 260 mg/kg de peso,para cada especie respectivamente
La ingestión de formalina causa lesiones severas en el tracto gastrointestinal. El mecanismo de acción exacto, para la toxicidad del Formaldehído no se ha entendido con claridad pero se sabe que puede interactuar con moléculas en las membranas celulares en los tejidos y fluidos corporales y puede obstaculizar las funciones celulares. El consumo de altas concentraciones de Formaldehído provoca precipitación de proteínas celulares generando la muerte celular y en general la necrosis del área afectada (8) Las soluciones de Formaldehído provocan lesiones corrosivas severas en la boca, el esófago y el estómago. Por acción de la ingestión se pueden presentar efectos como nauseas, vómito, diarrea, dolor abdominal, inflamación estomacal, ulceraciones y perforaciones de la faringe, epiglotis, esófago y estómago. Estos efectos en casos graves pueden causar hemorragias internas, necrosis masiva de los tejidos y finalmente la muerte del individuo al cabo de un periodo comprendido entre 5 y 24 horas después de la ingestión.
EFECTOS CRÓNICOS En exposiciones prolongadas por vía respiratoria a bajas concentraciones de Formaldehído se puede presentar asma y problemas pulmonares crónicos. Es posible desarrollar dolor de cabeza persistente, personalidad depresiva, cambios repentinos de ánimo, insomnio, irritabilidad, dificultad de concentración y pérdida leve de la memoria (8) EFECTOS SISTÉMICOS Efectos Cardiovasculares (7) En pacientes que ingieren Formaldehído se ha reportado la muerte como consecuencia de fallos del sistema cardiaco que dan inicio con una caída notoria de la presión sanguínea. Otras víctimas muestran alteraciones como taquicardia antes del colapso circulatorio. Efectos Musculares (7) Los efectos descritos en estudios realizados con personas expuestas a vapores de Formaldehído en sus lugares de trabajo muestran rigidez muscular luego de exposición crónica.
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 Efectos Renales (7) Fallas renales previas a la muerte se reportan en ingestiones agudas de soluciones de Formaldehído para víctimas de suicidio. De forma crónica en estudios efectuados sobre ratas se reporta aumento en necrosis de tejido renal luego de exposición a 82 mg/kg/día por 2 años. Efectos Inmunológicos (7) El Formaldehído se considera como un agente alergeno1 para los seres humanos, pero sus efectos se notan a partir de concentraciones entre 0,025 y 0,05%. La vía cutánea es la ruta de mayor incidencia para la aparición de los síntomas de alergia al Formaldehído. Las reacciones alérgicas solo se presentan en individuos sensibles a esta sustancia por cuanto no todas las personas están expuestas a estos efectos. Los síntomas que presentan las personas alérgicas incluyen dermatitis local en el área de contacto y edema laríngeo y bronco espasmo para el caso de inhalación en pequeñas cantidades. Efectos Neurológicos (7) El consumo de Formaldehído en exposiciones agudas puede generar letargo, ataques parecidos a los generados por la epilepsia y pérdida de la conciencia. Las personas expuestas a Formaldehído en la atmósfera muestran disminución en el desempeño de sus labores, pérdida de la concentración, disminución en el desempeño de la memoria, variaciones en el estado de ánimo e irritabilidad. Los síntomas se pueden presentar en concentraciones tan bajas como 5 ppm
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3
PRÁCTICA N ° 5 TITULO DE LA PRÁCTICA:
ANIMAL EN EXPERIMENTACIÓN: Rata Wistar VIA DE ADMINISTRACION: Vía Intraperitoneal VOLUMEN ADMINISTRADO: 8 ml de Formaldehído SINTOMATOLOGIA DEL ANIMAL DESPUES DE LA INTOXICACION: Disminución de la respiración Convulsión Muerte OBJETIVOS: Observar la sintomatología que presenta el animal de experimentación (Rata wistar) tras la intoxicación producida por Formaldehido. Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de Formaldehído en el destilado de las vísceras del animal de experimentación FUNDAMENTO TEÓRICO: El formaldehido es un gas incoloro de olor penetrante que se utiliza mucho en la fabricación de materiales para la construcción y en la elaboración de productos para el hogar, principalmente resinas adhesivas para tableros de madera aglomerada. La combustión incompleta, el humo de cigarrillo, la quema de madera, el kerosén, y el gas natural también son fuentes de emisión de Formaldehido. El formaldehido ha demostrado ser cancerígeno en animales de laboratorio y también pude serlo en el hombre, no se conoce el umbral por debajo del cual no exista riesgo de contraer cáncer. Dicho riesgo depende de la concentración y del tiempo de exposición.
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS
MATERIALES Vaso de precipitación Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Perlas de vidrio Agitador Embudo OTROS Guantes Mascarilla Gorro Mandil Aguja hipodérmica 10 ml Cronómetro Estuche de disección Panema Agitador Fosforo Pinzas Cocineta Espátula Gradilla
EQUIPOS REACTIVOS MUESTRA Aparato de Cloruro de fenilhidracina Destilado de vísceras destilación Nitroprusiato sódico al del animal de Balanza 2.5 % experimentación Baño María NaOH Campana HCl Cloruro de fenil hidracina al 4 % Ferricianuro de potasio 5-10 % Ácido sulfúrico Leche Cloruro férrico Sulfato ferroso Acido permanganato de potasio al 1 % Ácido Oxálico Reactivo de Schiff KOH 12 % Cloruro de morfina
PROCEDIMIENTO: 1. Limpiar el área de trabajo, y tener todos los materiales a utilizarse listos 2. Preparar una solución de formaldehído al 4% 3. Agarrar el animal de experimentación ( rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 8 ml de la solución de formaldehido 4. Colocar al animal de experimentación en la panema y observar los efectos de la intoxicación 5. Luego del deceso, con ayuda del estudio de disección, abrir el animal de experimentación y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 ml de ácido tartárico al 4 % y perlas de vidrio 7. Destilar , recoger el destilado en NaOH 0.1 N
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 8. Con aproximadamente 15 ml de destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimiento en medios biológicos. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN:
Reacción de Schiff
A una pequeña porción de la muestra, se añade 1 ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por 3 minutos y agregar algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1 ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo
Reacción de Rímini
A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4%, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5 % recién preparado y 1 ml de solución de NaOH, se produce una coloración azul intensa
Reacción con la fenilhidracina
En un medio fuertemente acidificado con HCl a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2- 4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5-10 % y algunas gotas de KOH al 12% se obtienen una coloración rojo grosella
Reacción de Marquis
Se toma 1 ml de destilado y se agregan 5 ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 g de morfina en 10 ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta
Reacción con el Ácido cromotropico
Con este acido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente
Reacción de Hehner
Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico ( 5 gotas de cloruro férrico en 500 ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 GRÁFICOS:
Escogemos el experimentación
animal
de
Observamos los síntomas que presenta el animal hasta su muerte
Trituramos las vísceras completamente para llevarlas a destilación
Aplicamos el toxico
Con un bisturí sacamos las vísceras
Solución madre con la que se realizaran las pruebas de identificación
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 RESULTADOS OBTENIDOS:
Reacción de Schiff
POSITIVO
Reacción con fenilhidracina
POSITIVO
Reacción con cromotropico
el
Reacción de Rímini
POSITIVO la Reacción de Marquis
POSITIVO Ácido Reacción de Hehner
POSITIVO POSITIVO
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Quinto año de Bioquímica y Farmacia ´´A´´ Grupo N ° 3 CONCLUSIONES: Se llevó a cabo la administración del formaldehido en la rata wister, la misma que luego de su aplicación resulto ser letal provocando así la muerte inmediata del animal, esto nos sugiere ser cautelosos y trabajar con cuidado con este tipo de sustancia. Mediante las reacciones de identificación cualitativas de las vísceras del animal de experimentación se logró identificar la presencia d formaldehido RECOMENDACIONES: Es importante asegurarse de que hallan los reactivos necesarios para la realización de las prácticas Cumplir con las normas de bioseguridad debido que es una sustancia altamente toxica
BIBLIOGRAFIA: 1. Proceso de formaldehído, 2016, recuperado el 04 de julio de 2016, en línea de, https://procesodeformaldehido.wordpress.com/introduccion-2/ 2. Formaldehído, 2016, recuperado el 04 de julio de 2016, en línea de, http://ces.iisc.ernet.in/energy/HC270799/HDL/ENV/envsp/Vol328.htm 3. La Guía Química, Formaldehído, 2016, recuperado el 04 de julio de 2016, en línea de, http://quimica.laguia2000.com/compuestos-quimicos/formaldehido 4. ICSC, Fichas Internacionales de Seguridad Química, FORMALDEHÍDO, (en línea), Octubre 2000.Revisado el: 04 de Julio del 2016. Disponible en: http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Fi cheros/201a300/nspn0275.pdf 5. Elvers B, Hawkins S y otros; Ullman´s Encyclopedia of Industrial Chemistry; Volumen 11; Quinta edición completamente revisada; Editorial VCH; New York, U.S.A.; 1989. 6. CUNICULTURA, Revista de Coniglicoltura, La toxicidad del formaldehido, (en línea), junio 1990. Revisado el: 04 de Julio del 2016. Disponible en: http://ddd.uab.cat/pub/cunicultura/cunicultura_a1990m6v15n85/cunicultura_a199 0m6v15n85p119.pdf 7. Química (2014). Recuperado el 04 de junio del 2016, de Obtención de formaldehído. Disponible:http://quimica.laguia2000.com/compuestos-quimicos/obtencion-deformaldehido
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