INSTITUTO DE
CIENCIAS FORENSES
Nº1 MARZO 2016
Importancia de la calidad de los laboratorios forenses...4 Fortalecimiento de los laboratorios de servicios periciales estatales...6
Estandarización de un método para la búsqueda de disparos laboratorio de química forense...9 Validación Parámetros de amplificación. Laboratorio de Genética Forense...18
Personas desaparecidas: fenómeno nacional que afecta a miles de familias...36
Observando el lugar de intervención ...41
DIRECTORIO Víctor Antonio Carrancá Bourget Fiscal General del Estado Luz María Reyna Carrillo Fabela Directora General Rosa María Torres García Directora Técnico Operativo Pericial Rogelio Maxil Tirso Director de Calidad Leticia Sánchez Villasana Directora de Laboratorios Florencia Bertoni Directora de Criminalística Luz María Reyna Carrillo Fabela Editora Cristina Ortiz López Directora editorial Sergio Sánchez Calvo Página web
Hablemos de... - Certificación de Peritos y Acreditación de Laboratorios Importancia de la calidad en los laboratorios forenses Luz María Reyna Carrillo Fabela, Rogelio Maxil Tirso.
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Fortalecimiento de los laboratorios de servicios periciales estatales Lic. Claudia Esmeralda Sánchez Porras, Q.F.B. Leticia Guadalupe Sánchez Villasana.
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- Artículos Científicos Estandarización de un método para la búsqueda de disparos. Laboratorio de química forense Q.F.B. Xóchitl Vázquez Solano, Q.F.B. Iván Merino Ojeda. Validación Parámetros de amplificación. Laboratorio de Genética Forense M.C. Florencia Bertoni, M.C. Dolores Bautista España, M.C. Rosario Carreón, I.B. Jorge Medel Sánchez, I.B. Roberto Quintana Vega, Tec. Gabriela Pérez Sánchez, Dra. Valerie Fuller.
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Tel: 2117900 - Ext. 6001 e-mail: revistacienciasforenses@fiscalia.puebla.gob.mx www.fge.puebla.gob.mx
Personas desaparecidas: fenómeno nacional que afecta a miles de familias Ingrid Espinosa Romero.
Rogelio Maxil Tirso, Leticia Sánchez Villasana Consejo editorial
- Casos Forenses
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Observando el lugar de intervención Lic. Erika Castillo Montiel, M.L. Luz María Reyna Carrillo Fabela.
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l cinco de enero de 2016 rindió protesta como Fiscal General del Estado de Puebla, el Lic. Víctor Antonio Carrancá Bourget ante la transformación de la Procuraduría General del Estado de Puebla hacia la Fiscalía General.
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La actual Institución opera como un órgano autónomo, dotado de personalida jurídica y patrimonio propios, con la finalidad de responder a lineamientos basados en principios de eficiencia, imparcialidad, legalidad, objetividad, profesionalismo, responsabilidad y respeto a los derechos humanos, apegándose a las exigencias del Nuevo Sistema de Justicia Penal. Con motivo de esta transformación, el Fiscal General del Estado de Puebla realizó ajustes al organigrama, uno de ellos permitió que la antes Dirección General de Servicios Periciales se fortaleciera para convertirse en el Instituto de Ciencias Forenses.
Víctor Antonio Carrancá Bourget Fiscal General del Estado de Puebla.
IMPORTANCIA DE LA CALIDAD EN LOS LABORATORIOS FORENSES Luz María Reyna Carrillo Fabela & Rogelio Maxil Tirso
nte las exigencias del nuevo sistema de justicia penal en México y la globalización de las normas de calidad existentes en muchos laboratorios forenses de Europa y EEUU, ha surgido la necesidad de que los laboratorios Forenses de México implementen un sistema de gestión de calidad, es decir, deben contar con manuales de calidad, políticas, procedimientos técnicos científicos y evidencia documental de los análisis que realizan; todo bajo los estándares internacionales tales como la Norma ISO/IEC 17020 y Norma ISO/ IEC 17025, así como la formación de auditores internos, metrología básica, estimación de incertidumbre, control de calidad y validación de métodos.
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on la acreditación de las áreas Forenses se da certidumbre de que los laboratorios y unidades de inspección aplican las regulaciones, normas o estándares correspondientes con precisión que les permite
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comprobar y sustentar los resultados obtenidos como medios de prueba en los Juicios Orales. n el Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado se inició el proceso de acreditación de los Laboratorios Forenses a partir del año 2011, con el diseño de los laboratorios que albergarían los servicios periciales, la construcción de los mismos y su inauguración en enero del año 2014, a la par se llevó a cabo la capacitación del personal pericial, entre la que resalta por su importancia el curso de “Análisis y Procesamiento de la Escena del Crimen” efectuado en el año 2013, impartido a los peritos en criminalística por instructores expertos en CSI de ICITAP (International
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Criminal Investigation and Training Assistance Program) del Departamento de Justicia del Gobierno de los Estados Unidos de Norteamérica, así como desde el año de 2011 se dio inicio con la elaboración de Manuales de Procedimientos en las diversas áreas periciales. on el acertado cambio de Procuraduría General de Justicia a Fiscalía General del Estado a partir del cinco de enero del año 2016 y la atinada decisión del primer Fiscal General del Estado de crear el Instituto de Ciencias Forenses desplazando la entonces Dirección General de Servicios Periciales también en enero de 2016, con una nueva estructura orgánica y el fortalecimiento de los laboratorios en infraestructura, equipo y materiales, se consolida firmemente el Instituto de Ciencias Forenses para aspirar a la acreditación de sus laboratorios forenses bajo la Norma ISO/IEC 17020 y Norma ISO/ IEC 17025. El Estado de Puebla al igual que los demás Estados de la República Mexicana se encuentra inmerso en este cambio en la manera de trabajar, y en realidad, es el reto que todo Laboratorio Forense tiene o debe tener, llegar a trabajar con Calidad.
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* Especialista en Medicina Legal, Directora General del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla. * Maestro en Ciencias, Director de Calidad del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.
FORTALECIMIENTO DE LOS LABORATORIOS DE
SERVICIOS PERICIALES ESTATALES Lic. Claudia Esmeralda Sánchez Porras, Q.F.B. Leticia Guadalupe Sánchez Villasana.
esde hace varios años el Programa Internacional de Capacitación y Asistencia en Investigación Criminal (ICITAP), por sus siglas en inglés, ha realizado diversas actividades en apoyo al desarrollo forense de los Servicios Periciales bajo la Iniciativa Mérida, firmada entre México y Estados Unidos.
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En Junio del 2015 el Director Interino de ICITAP-México invitó a la entonces Dirección General de Servicios Periciales de la Procuraduría General de Justicia del Estado de Puebla a participar en el PROYECTO DE EVALUACION DE LOS LABORATORIOS FORENSES ESTATALES, en las áreas de Documentos Cuestionados y Química Forense, proyecto que consistió en la visita a diversos Laboratorios Forenses de nuestro País,
con el objeto de evaluar los procedimientos técnicos e identificar sus necesidades de equipamiento para identificar las posibilidades de acreditación de sus Laboratorios de acuerdo a la Norma ISO/IEC 17025 y así facilitar la implementación del Sistema Penal Acusatorio.
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ormando así dos grupos de trabajo, el primero por Peritos de la Procuraduría General de la República, y el segundo, conformado por peritos de las Procuradurías Estatales de los Estados de Baja California, Sinaloa, Guanajuato y Puebla en las disciplinas forenses de Química, Genética, Balística, Dactiloscopia, Documentos Cuestionados, Manejo de la Evidencia y Calidad, guiados por un Coordinador de Grupo de ICITAP, quienes recibimos capacitación especializada por expertos del Departamento de la Defensa de los Estados Unidos y llevando a la práctica los conocimientos, para evaluar a los Laboratorios Forenses en sus diversas áreas dentro del Laboratorio Central de Servicios Periciales de la Procuraduría General de la República.
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l proyecto tuvo una duración de tres meses visitando más de cuarenta y cinco Laboratorios Forenses y sus respectivas Procuradurías Estatales del país y recientemente se agregaron tres Estados a la lista, recibiendo cálidas bienvenidas y compromisos para lograr los objetivos de las mismas, dejando en cada integrante un cúmulo de experiencias al conocer el profesionalismo, objetividad, lealtad, responsabilidad y entrega en las actividades que cada área realiza, culminando las visitas con un reporte final que refleja el estado actual de cada área.
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* Líder Técnico del Laboratorio de Documentos Cuestionados. Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla. * Directora de Laboratorios del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.
on el fin del Proyecto sin duda se tendrán grandes beneficios a nuestro País y a cada Laboratorio Forense de los diversos Estados visitados dignificando la actividad pericial, logrando la homologación de procedimientos técnicos y de equipamiento en apoyo a una adecuada implementación del Sistema Penal Acusatorio en nuestro País.
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a satisfacción de formar parte del primer grupo de Evaluadores de Laboratorios de Servicios Periciales en la República Mexicana, representa una gran responsabilidad y compromiso para los Laboratorios de Documentos Cuestionados y Química Forense del actual Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla, experiencias que compartimos y conocimientos que aplicamos para el beneficio y progreso de las ciencias forenses en estas áreas dentro y fuera de la Institución para la implementación y mejora del Nuevo Sistema de Justicia Penal.
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ESTANDARIZACIÓN DE UN MÉTODO
PARA LA BÚSQUEDA DE DISPAROS Laboratorio de Química Forense Q.F.B. Xóchitl Vázquez Solano. Q.F.B. Iván Merino Ojeda.
INTRODUCCIÓN l Laboratorio de Química Forense dentro del ámbito legal realiza el análisis de muestras mediante técnicas científicas que los respaldan, apoyando de forma importante al organismo penal encargado de brindar justicia ciudadana. Por tal razón la tecnología usada debe proporcionar resultados confiables mediante técnicas normalizadas, con la responsabilidad de garantizar la veracidad de sus resultados.
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Víctor Antonio Carrancá Bourget Fiscal General del Estado de Puebla.
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Artículos Científicos
En los casos donde se involucra un arma de fuego es importante determinar la presencia de residuos de disparo de arma de fuego (partículas GSR), las partículas GSR son formadas por el rápido enfriamiento de Pb, Ba y Sb vaporizado, después de la elevada temperatura de ignición de los componentes del fulminante. Cuando la mezcla del fulminante se funde, éste escapa del arma en forma de vapor o “pluma” a través de las aberturas disponibles del arma. Entonces, se solidifica en partículas finas y se deposita en las manos, ropa
y superficies de la proximidad inmediata de la descarga del arma. El análisis por Microscopía Electrónica de Barrido/ Espectroscopía de Energía Dispersiva (SEM/EDS); a pesar de ser de larga duración, es considerado a nivel internacional la mejor opción debido a que tiene alta sensibilidad, proporciona la composición elemental y la imagen de la partícula que nos permite observar las características morfológicas y de tamaño, con la ventaja de conservar el indicio en comparación con técnicas como la absorción atómica o rodizonato de sodio, entre otras. Lo ideal sería que las Instituciones encargadas de impartir Justicia en la República Mexicana que cuentan con SEM y realizan la búsqueda de residuos de disparo de arma de fuego cuenten con documentos que garanticen la fiabilidad del análisis que están realizando, y se
apeguen a lo señalado por la norma ASTM 1588-10ε1, la cual rige el ensayo ya antes planteado, temática que fue presentada durante los cursos: 1er. Simposio-Taller Internacional “Aplicaciones Forenses en Microscopía Electrónica de Barrido”, llevado a cabo los días 15 y 16 de enero de 2015 y en el Curso
Artículos Científicos
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Internacional Avanzado “Residuos de Armas de Fuego por Microscopía Electrónica de Barrido”. * Perito en Microanálisis, Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla. * Pasantía en el Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.
fectuado los días el 29 y 30 de junio de 2015, ambos en las instalaciones de la entonces Procuraduría General de Justicia del Estado de Puebla (ahora Fiscalía General del Estado). Debido a las exigencias internacionales de calidad es crucial contar con un método o técnica estandarizada que sustente la labor del perito al momento de ser considerado como testigo experto dentro del nuevo sistema de justicia penal.
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MATERIALES • SEM marca JEOL modelo JSM-6610LV • Detector de rayos X marca OXFORD mo delo N-MAX50 • Estándar sintético Planotec GSR and Par ticle Analysis Calibration Kit marca Ted pella. • Estándar multielemental de C, Co, Au, Rh marca Ted pella. • Norma ASTM 1588-10 ϵ1
MÉTODO ara estandarizar la búsqueda de partículas GSR en el Laboratorio de Química Forense de la Fiscalía General del Estado de Puebla se realizó el análisis de un estándar de partículas sintéticas GSR (Estándar sintético Planotec GSR and Particle Analysis
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Calibration Kit marca Ted pella), que mide 8mm x 8 mm y consiste en un carbono vítreo; además una almohadilla de referencia con dimensiones 0.1 x 0.1 mm2, la cual contiene las partículas a identificar: - - - - -
3 partículas con un diámetro de alrededor de 10µm, 15 µm, y 20 µm respectivamente 22 partículas con un diámetro alrededor de 0.5µm, 25 partículas con un diámetro alrededor de 0.8µm, 26 partículas con un diámetro alrededor de 1.2µm, y 27 partículas con un diámetro alrededor de 2.4µm
Con una composición de Pb/Sb/Ba, precipitados de forma aleatoria sobre un área de 6mm x 6mm. Ésta área está delimitada por cuatro insignias en cada esquina, asociados por cualquier cuadrado (10x10 µm) o una partícula circular (10 µm de diámetro).
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PARÁMETROS DE ANÁLISIS
• • • • • • • • • •
Alto vacío L.C.: 85 µA KV: 20 SS: 65 WD: 10 DT: 64% PT: 4 Magnificación: 550x Resolución media Umbrales: 45-253
RESULTADOS
Fig. 1. Ubicación de las partículas del estándar PLANO.
Fig. 2. Ubicación de las partículas detectadas.
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DISCUSIÓN DE RESULTADOS on base en los resultados obtenidos, los cuales se muestran en la Tabla 1 se considera que los parámetros utilizados en el método son idóneos para realizar la búsqueda de partículas GSR, ya que se logra detectar el 100% de las partículas con diámetro de 0.8 µm a 20 µm. La detección de partículas GSR con diámetro de 0.5µm se ve disminuida posiblemente por los siguientes factores:
C Tabla 1. Concentrado de las partículas detectadas.
• • •
Pérdida de partículas por manipulación excesiva. Deficiencia en la detección debido al soporte utilizado. Disminución en la detección por efectos de la matriz.
CONCLUSIONES l uso de métodos normalizados para la búsqueda de residuos de disparo de arma de fuego por SEM/EDS en el Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Forense permitirá emitir resultados confiables y de calidad, fortaleciendo la participación del perito en el nuevo sistema de justicia penal.
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as técnicas analíticas no destructivas son de gran importancia en el ámbito forense ya que es posible realizar un re análisis de la muestra siempre que se tenga los cuidados adecuados para preservar el indicio.
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l SEM con el que cuenta el Laboratorio de Química Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla cumple con los requisitos técnicos que exige la norma internacional ASTM 1588-10ε1 para el análisis de residuos de disparo de arma de fuego, ya que se detectaron partículas de 0.5 µm.
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REFERENCIAS • Fluctuaciones en las propiedades magnéticas y de magnetotransporte de superconductores de alta temperatura crítica, Carlos Arturo Parra Vargas, Tesis de doctorado en ciencias físicas, Universidad Nacional de Colombia, Febrero 2010. • Current methods in forensic gunshot residue analysis, A.J. Schwoeble, David L. Exline, CRC Press 2000. Pp 21-22. • Manual práctico del Juicio Oral. Diana Cristal González Obregón. Tercera edición. 2014.
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• El Nuevo Sistema de Justicia Penal Acusatorio, desde la Perspectiva Constitucional. Primera edición, México, 2011 , Consejo de la Judicatura Federal Poder Judicial de la Federación. • INCA Feature Instructions manual. • JEOL instructions manual No. ISM6610/6610LV/6610A/6610LA-11E. Agosto 2012. • Norma Internacional ASTM 1588-10 ϵ1. • Guide for Primer Gunshot Residue Analysis by Scanning Electron Microscopy/Energy Dispersive X-Ray Spectrometry 11-29-11.
VALIDACIÓN PARÁMETROS DE AMPLIFICACIÓN Laboratorio de Genética Forense
M.C. Florencia Bertoni, M.C. Dolores Bautista España, M.C. Rosario Carreón, I.B. Jorge Medel Sánchez, I.B. Roberto Quintana Vega, Tec. Gabriela Pérez Sánchez, Dra. Valerie Fuller.
INTRODUCCIÓN a presente investigación fue presentada por la M.C. Florencia Bertoni en la 7ª Conferencia de la Academia de Ciencias Forenses celebrada en la ciudad de Praga, República Checa el día 07 de septiembre de 2015, así como también la Doctora en Ciencias Dolores Bautista España presentó la misma investigación en el 26 Simposio Internacional de Identificación Humana llevada a cabo en la ciudad de Grapevine, Texas el días 11 de octubre de 2015, ambas profesionales son Peritos en Genética Forense del Laboratorio de Genética Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla.
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La determinación de un perfil génetico a través de ADN en especial mediante la técnica de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) constituye un procedimiento óptimo cuando necesitamos analizar muestras biológicas y realizar pruebas de identidad humana. La identificación individual es deseable
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en una serie de situaciones, incluyendo la determinación de los autores de delitos violentos como el asesinato y la violación, resolver la paternidad no establecida, y la identificación de restos de personas desaparecidas o víctimas de desastres masivos. lgunas muestras forenses que se remiten a los laboratorios de genética forense con el fin de realizar el análisis, no son óptimas debido a la baja concentración de ADN y/o la fragmentación del mismo, debido a las condiciones ambientales adversas a que son sometidas. La implementación de técnicas más sensibles que logren obtener perfiles genéticos en muestras degradadas es fundamental en los laboratorios modernos.
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n la ciencia forense, el análisis por PCR también ha revolucionado la biología molecular por la capacidad de hacer millones de copias de una secuencia específica de ADN, lo cual ha permitido estudiar material poco abundante y aun degradado. Actualmente se han desarrollado nuevos sistemas de PCR múltiple altamente sensibles y específicos sin embargo,
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presentan un alto costo y requieren de una validación interna de acuerdo a las necesidades específicas de cada laboratorio. Los métodos más comunes para la evaluación de los Kits implican el aumento en el número de ciclos en la reacción de PCR y la reducción en el volumen de la reacción (RV-PCR) La estrategia de reducción de volumen implica la reducción proporcional del volumen de la reacción de PCR, siendo el beneficio potencial, una reducción en el costo de los análisis. Peritos en Genética Forense del Laboratorio de Genética Forense del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla. Asesora de ICITAP (International Criminal Investigation and Training A sistance Program), U.S. Department of Justice, Criminal Division.
l objetivo de este estudio fue determinar el grado en que los volúmenes de reacción de PCR pueden reducirse sin comprometer la calidad de los resultados y si la reducción en el volumen puede satisfacer una morfología y proporciones en altura de los picos mientras se consume la menor cantidad de ADN molde. Abordando los efectos estocásticos, la reproducibilidad y los niveles de sensibilidad de los kits, observando cómo influye el aumento en el número de ciclos y las ventajas y desventajas de usar ambas estrategias.
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MATERIALES Kit Globalfiler® PCR Amplification. Número de lote: 131100, Polímero Número de lote: 1311062, Buffer ánodo. Número de lote: 1311145, Buffer cátodo. Número de lote: 1312170, Arreglo capilar. Serie 07, Escalera alélica. Número de lote:1312019, Formamida. Número de lote: 1312045, ADN Control 007. Concentración 0.10 ng/ μl, Termociclador Geneamp® Pcr System 9700, Analizador genético ABI Prism 3500, GeneMapper ID-X v1.4 Software, Pipetas de 0.5-10 μl, Puntas con filtro,Tubos eppendorf.
porcionalmente al volumen de reacción de amplificación. El volumen de reacción completa ( 25μl ) se incluyó a fin de establecer una línea base de rendimiento. Serie de diluciones de 60 pg/μl a 0.40625 pg/μl, por quintuplicado para dar un total de 40 muestras por volumen ensayado (Tabla 1).
MÉTODO e examinaron tres volúmenes de reacción de PCR : Full ( 25μl ) , V1 ( 10μL ) y V2 ( 5μL ), en cada volumen se redujo la cantidad de ADN molde pro-
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Tabla 1. Serie de diluciones y consentraciones de ADN utilizadas durante el ensayo.
Volumen de Amplificación: Para las muestras fue utilizado el volumen de reacción, siguiendo las cantidades y el protocolo designados en el manual de usuario del Kit GlobalfilerTM PCR, utilizando como volumen final 25µl, así como también se realizó una modificación al volumen final a 10µl y 5µl.
PARÁMETROS DE AMPLIFICACIÓN Los ciclos utilizados en el termociclador utilizando GeneAmp System 9700 fueron de 28 y 29 ciclos (Tabla 2).
Tabla 2. Parámetros de Amplificación del Kit Globalfiler de Applied Biosystems
Todos los análisis para esta validación fueron realizados en condiciones ambientales del laboratorio. Artículos Científicos
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ANALIZADOR GENÉTICO odas las muestras se procesaron realizando corridas electroforéticas en el Analizador Genético 3500 y analizadas con GeneMapper ID-X Software Versión 1.4.
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CONSENSO PARA MUESTRAS CON BAJO NIVEL DE AWDN Se realizó un consenso de las diluciones que tienen la concentración de 7.5pg/ul a 15pg/ul de ADN.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN Los resultados obtenidos por ensayo se muestran en la siguiente gráfica, cada color cuenta con un significado el cual se precisa al pie de la misma.
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Tabla. Zona verde: Ambos alelos están presentes, Zona blanca: Representa perdida alélica, el valor de las unidades de fluorescencia relativas se representan en cada cuadro. Zona roja: No amplificación. Zona azul: Se etiquetaron más de dos alelos en el marcador. Zona amarilla: Ambos alelos presentes pero hay desbalance de picos.
OBSERVACIÓN DE EVENTOS partir de los datos observados en la tabla de los ensayos realizados a 29 y 28 ciclos con distintos volúmenes y concentraciones se graficó:
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a) La frecuencia de eventos tales como perdida alélica (blanco), desbalance de picos (amarillo), presencia de los dos alelos (verde), presencia de más de dos alelos (azul), ausencia de resultados (rojo). b) Los eventos estocásticos:
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RESULTADOS LINEALIDAD Se obtuvo a partir del marcador TH01 las gráficas de linealidad para cada ensayo:
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RESULTADOS EVENTOS ESTOCASTICOS Se observó la frecuencia de eventos estocásticos como se muestra en las siguientes gráficas: a)
28 CICLOS
b)
29 CICLOS
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RESULTADOS CONSENSO A partir de las concentraciones de 15pg/μL y 7.5pg/μL (con muy baja cantidad de ADN) a 29 ciclos y volumen de 5μL se obtuvo el siguiente perfil de consenso.
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RESULTADOS COEFICIENTE DE VARIACION Se realizó el Coeficiente de variación del analizador genético automatizado ABI PRISM 3500 life technology. Obteniéndose el siguiente gráfico:
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS a. Se observaron los mismos eventos en los dos ensayos a 28 y 29 ciclos con los distintos volúmenes y concentraciones: perdida alélica, desbalance de picos heterocigotos, presencia de más de dos picos, ausencia de resultados y balance de picos heterocigotos. b. El umbral estocástico (Promedio estocástico RFU + 3 desviaciones estándar) en condiciones de 29 ciclos aumentó en el volumen de 5ul variando alrededor de 128RFU con relación al
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volumen total a 25ul, y disminuyó alrededor de 17RFU en el volumen de 10ul. c. La linealidad que se observa en el marcador TH01 en cada uno de los experimentos a 29 ciclos nos indica que hay proporcionalidad entre los RFU´s y concentraciones observados. d. No hay diferencias significativas en los resultados a 29 ciclos entre las condiciones recomendadas por el fabricante de Global filer (25uL), y las condiciones experimentales (10 y 5uL). e. En volumen de 5 uL se observaron resultados, aun en concentraciones por debajo de 7.5 pg/uL. Sin embargo la mayoría de estos presentaron perdida alélica. f. Lo anterior lleva a una mayor cantidad de eventos estocásticos a volumen de 5 uL.
g. En concentraciones bajas (15 - 7.5 pg/uL) se recomienda realizar un consenso de tres o más repeticiones por muestra para obtener mayor confiabilidad en el perfil genético obtenido. h. Se observó un Coeficiente de Variación de 44 % en el arreglo capilar utilizado en la validación del kit Global filer.
CONCLUSIONES e observó mayor sensibilidad a 29 ciclos. Por lo tanto este sería el protocolo recomendable para el trabajo cotidiano de muestras en el laboratorio de genética.
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Siempre y cuando se reduzca proporcionalmente la concentración de ADN, los volúmenes de 5 ó 10ul se podrán usar obteniendo resultados similares a los obtenidos con las condiciones recomendadas por el fabricante 25ul. Una de las ventajas de reducir el volumen, es el uso de menor cantidad de ADN molde ya que en las condiciones recomendadas por el fabricante utilizaríamos 15ul de este ADN molArtículos Científicos
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de, mientras que en volumen de 10ul usaríamos 6ul de ADN molde y en volumen de 5ul únicamente 3ul de ADN molde, lo cual nos permite realizar un mayor número de ensayos con la misma muestra sin agotarla. tra ventaja de la reducción de volumen es la disminución del costo por reacción, ya que si consideramos las condiciones del fabricante con 25ul, una reducción a 5ul nos permite obtener 5 reacciones por el mismo costo. Aun realizando un consenso de tres reacciones no se utiliza la misma cantidad de recursos (mix ADN) en comparación con las condiciones del fabricante para una reacción. Los resultados obtenidos en la reducción de volumen no se ven afectados en cuanto a los parámetros analizados; obteniendo resultados similares en los tres volúmenes ensayados.
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Realizar estos experimentos con diluciones tan bajas como 3.25pg/ul-0.40625pg/ul no es recomendable en virtud de que no se aporta mayor información, en cambio arroja más datos estocásticos. Sobre todo en volumen de 5ul.
REFERENCIAS • Applied Biosystems - AmpFlSTRR Globalfiler TM PCR Amplification Kit User’s Guide, 2014 - Life Technologies Corporation. • Butler JM, 2005, Forensic ADN Typing, Biology, Technology, and Genetics of STR Markers, Elsevier Academic Press, USA, Segunda Edición, 660 Páginas. • Budowle Bruce, Eisenberg A.J., and van Daal A. - Validity of Low Copy Number Typing and Applications to Forensic Science - Croatian Medical Journal 2009 June; 50(3): 207–217. • Fregeau C.J., Aubin R.A., Elliott J.C., Gill S.S., Fourney R.M. - Characterization of human lymphoid cell lines GM9947 and GM9948 as intra- and interlaboratory reference standards for ADN typing. Genomics 1995;28: 184–97. • Fregeau CJ, Bowen KL, Leclair B, Trudel I, Bishop L, Fourney RM. AmpFlSTR® Profiler PlusTM Short Tandem Repeat ADN analysis of casework
samples, mixture samples and non-human ADN samples amplified under Reduced PCR Volume conditions (25 μL). Journal of Forensic Science 2003; 48(5):1–13. • Gaines, M.L., Wojtkiewicz, P. W., Valentine, J.A., & Brown, C.L. - Reduced Volume PCR Amplification Reactions Using the AmpFlSTR® Profiler PlusTM Kit. - Journal of Forensic Science 2002, 47, 1224-1237. • Gill P, Whitaker J, Flaxman C, Brown N, Buckleton J. - An investigation of the rigor of interpretation rules for STR’s derived from less than 100pg of ADN. - Forensic Science International 2000;112:17–40. • M.W.Bessekri1, H. Cherbiti1, R Bucht2, V Fuller.2 1Department of Biology, Institute Nationale de Criminalistique et Criminologie, Gendarmerie Nationale of Algeria. 2US Department of Justice International Criminal Investigative Training Assistance Program, Algeria. “Consensus profiling: building confidence in low-template ADN casework specimens”. 2014 ISHI Conference, Phoenix, AZ. Sept 29-Oct 3, 2014. • MW Bessekria, F Agsousa, S Lazreg,a , R Buchtb, V Fuller Department of Biology, Institute Nationale de Criminalistique et Criminologie, Gendarmerie Nationale of Algeria. US Department of Justice International Criminal Investigative Training Assistance Program, Algeria. “Comparative study on the effects of reduced PCR reaction volumes and increased cycle number, on the sensitivity and the stochastic threshold of the AmpFlSTR Identifiler® Plus kit.” Forensic Science International :Genetics Supplement Series 4(2013)306e-307e.
• Valerie Mattimore Fuller. “Accessibility and the Backlog: Rethinking ADN Capability and Capacity” in Forensic Magazine. Vicon Publishing: Amherst, New Hampshire. April / May 2011. • A. Abdeli 1, S. Lazreg 1, K. Daho 1, M. Bessekri 1, H. Cherbiti 1, R. Bucht 2, V. Fuller 2 (Department of Biology, Institute Nationale de Criminalistique et Criminologie, Gendarmerie Nationale of Algeria and the 2US Department of Justice International Criminal Investigative Training Assistance Program, Algeria). A Simple Double-Study to Simultaneously Determine Six Major Validation Parameters within STR-based Criminal Forensic ADN Rrofiling. Presented at the 6th European Academy of Forensic Science Conference - EAFS 2012. The Hague University of Applied Sciences’ Gravenhage, Zuid-Holland, Netherlands. August 2024, 2012. • A. Abdeli, S. Lazreg, K. Daho, M. Bessekri, H. Cherbiti, R. Bucht, V. Fuller. Concurrent Internal Validation of Four Forensic STR ADN Profiling Kits Using a Single Genetic Analyzer. Co-presented by the Department of Biology - Institute Artículos Científicos
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Nationale de Criminalistique et Criminologie - Gendarmerie Nationale – Algeria, and the US Department of Justice - International Criminal Investigative Training Assistance Program – Algeria. AAFS 2012 Annual Meeting, Atlanta, GA. February 23rd, 2012. • V. Fuller. An Untracked Quality Issue in Forensic ADN Profiling: Consequences of Unmonitored Measurement Uncertainty in Electrokinetic Injection Performance in Capillary-Based Genetic Analyzers. 9th Annual Mid-America Forensic ADN Conference, Columbia, MO. April 5-7, 2011.
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Artículos Científicos
PERSONAS DESAPARECIDAS
FENÓMENO NACIONAL QUE AFECTA A MILES DE FAMILIAS Ingrid Espinosa Romero.
INTRODUCCIÓN a desaparición de personas es un fenómeno considerado como “La Ausencia de un individuo que integra un núcleo familiar del cual se desconoce su paradero”, este cometido ha estado presente durante muchas generaciones y continua ocurriendo a nivel mundial, causando un gran sufrimiento a las familias, a las comunidades, sociedades y a toda la humanidad.
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Actualmente en México se tienen estadísticas de las personas desaparecidas de diversas fuentes institucionales, arrojando por ejemplo: las cifras de la SEGOB Secretaria de Gobernación. SECRETARIADO EJECUTIVO DEL SISTEMA NACIONAL DE SEGURIDAD PÚBLICA, con registro a partir de las fechas Enero 2014- octubre 2015, con un total de 26,670 personas que no se sabe de su paradero, siendo 19,407 hombres y 7,263 mujeres, y ubicando al Estado de Puebla en el décimo tercer lugar con 835 ochocientas treinta y cinco personas desaparecidas.
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as cifras presentan el total de registros de personas relacionadas con averiguaciones previas del fuero común que permanecen sin localizar al corte del 31 de octubre del 2015 (ver nota metodológica), distribuidas por entidad federativa. FUENTE: SEGOB Secretaria de Gobernación. SECRETARIADO EJECUTIVO DEL SISTEMA NACIONAL DE SEGURIDAD PÚBLICA. http://secretariadoejecutivo.gob.mx/rnped/estadisticas-fuerocomun.php.
• Privación de la libertad.- Se presenta en los casos de secuestro, la privación de la vida (homicidio-feminicidio) con ausencia del cuerpo y la desaparición forzada.3, 4.
CAUSAS MÁS FRECUENTES DE DESAPARICIÓN
el estudio Científico-DescriptivoComparativo, realizado en el departamento de personas desaparecidas del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado, del total de personas desaparecidas para la zona centro del Estado de Puebla 55% correspondieron al sexo femenino y al masculino 45%.
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DE PERSONAS omando como base las declaraciones de los denunciantes ante el Ministerio Público, dentro de las causas de desaparición de personas que con mayor frecuencia se presentan se encuentran: • Abandono del hogar de manera voluntaria.- Se presenta en casos en que no se desea continuar viviendo en familia por malos tratos, incomprensión, abuso sexual por integrantes de la familia, problemas escolares, la independencia deseada por el individuo, entre otras.
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Artículos Científicos
ESTADÍSTICAS PARA EL ESTADO DE PUEBLA
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MÉTODO DE BÚSQUEDA DE PERSONAS DESAPARECIDAS EN EL INSTITUTO DE CIENCIAS FORENSES
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on los datos aportados por los familiares de los desaparecidos se conforma el cuestionario antemortem (AM) para recolectar datos de personas desaparecidas y se realiza la búsqueda con la ayuda de las siguientes herramientas: • Expedientes postmortem.- que es la recopilación de la información fisonómica, antropológica, dental y particularidades de un cadáver. • Software Metamorfho.- que es un medio electrónico que permite ingresar el nombre de la persona desaparecida rastreando exclusivamente la identidad de personas civiles, personas delincuentes y decesos sin identidad.
RESULTADOS De las personas desaparecidas de Enero a Diciembre del año 2015 para la zona centro, se ingresaron los nombres al sistema methamorfho (programa computarizado), logrando localizar a 91 personas, de las cuales con identidad de civiles correspondieron a 31 del sexo masculino y 9 del sexo femenino, entendiendo por personas con identidad de civiles aquellos que se encuentran vivos, no están involucrados en algun hecho delictuoso, y no están desaparecidos pues se sabe que están dentro de nuestra entidad o país; toda vez que con fechas actuales han hecho uso de documentos que solo este sistema expide y de acuerdo a las fechas que proporciona el familiar del desaparecido (a), en cuyos casos se le informa al familiar que su desaparecido (a) solo está alejado de su núcleo familiar. Por lo que respecta a las personas con detenciones recientes, el sistema arrojó el reporte de 6 personas detenidas de sexo masculino y ninguna del sexo femenino
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CONCLUSIONES on el presente trabajo se llega a la conclusión de crear un Centro Nacional de Información y Atención de Personas en Calidad de Desaparecidas, que dentro de sus atribuciones se encuentre: • Concentrar los datos estadísticos de todos y cada uno de los Estados • Emitir estadísticas oficiales a nivel nacional • Recibir las peticiones de búsqueda de los familiares de las personas desaparecidas de forma directa o por conducto del Centro Estatal de Información de Personas en Calidad de Desaparecidas. • Dar respuesta a las peticiones de colaboración de las diferentes Instituciones (CNDH, FEVIMTRA, CAPEA, Fiscalías y Procuradurías de los Estados, entre otras)
GRÁFICA DE PORCENTAJE SEGÚN GÉNERO
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Masculimo Femenino
45% 55%
Gráfica 1. Porcentaje de desaperecidos en la zona centro de Puebla según su género.
• Concentrar la base de datos de cada Estado de la República Mexicana y dado el caso, de otros países, mediante la utilización de un software en el que se almacene la información recabada mediante los cuestionarios AM y PM. • Recibir información de Instituciones en las que se sos-
peche que la persona se encuentra en calidad de desconocida tales como Albergues, Hospitales, Asociaciones de Alcohólicos y Drogadictos Anónimos, Casas de Asistencia, Asilos Públicos, Asociaciones de Neuróticos Anónimos, Centros de Protección a Víctimas, Centros de Reclusión, entre otros. • Recibir información de Instituciones en las que se encuentren cadáveres en calidad de desconocidos tales como: SEMEFO, Procuradurías, Fiscalías, Hospitales, entre otros. on lo anterior, se espera dar respuesta en menor tiempo a los familiares que buscan a personas desaparecidas, así como evitarles mayores costos en su localización al no tener que andar peregrinando de Institución a Institución, ni viajando de un Estado a otro. Lo que evitará no solo la revictimización sino que a la vez, permitirá localizar a las personas y reintegrarlas a su núcleo familiar en los casos que estén vivas, y en los casos de fallecimiento terminar lo más pronto posible con la angustia e incertidumbre de los familiares mediante la identificación del cadáver, para lo cual es necesario contar con servidores públicos comprometidos, capacitados y sensibilizados ante este problema social que lamentablemente va en aumento.
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REFERENCIAS • SEGOB Secretaria de Gobernación. SECRETARIADO EJECUTIVO DEL SISTEMA NACIONAL DE SEGURIDAD PÚBLICA. http://secretariadoejecutivo.gob.mx/rnped/estadisticas-fuerocomun.php. Última Modificación 30/Noviembre/2015. • CICR COMITÉ INTERNACIONAL GENEVE. PERSONAS DESAPARECIDAS, ANÁLISIS FORENSE DE ADN E IDENTIFICACIÓN DE RESTOS HUMANOS. 2009. • MORGAN, OLIVER. TIDBALL-BINZ, MORRIS. VAN ALPHEN, DANA. La Gestión de cadáveres en situaciones de desastre: Guía práctica para equipos de respuesta. Organización Panamericana de la Salud, 2006, 2009. 4. CICR. LAS PERSONAS DESAPARECIDAS Y SUS FAMILIAS documentos de referencia. Febrero 2004.
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OBSERVANDO EL LUGAR DE INTERVENCIÓN Lic. Erika Castillo Montiel, M.L. Luz María Reyna Carrillo Fabela.
l lugar de intervención o también llamado escena del crimen entre sus múltiples denominaciones (lugar de los hechos, lugar del hallazgo, lugar de enlace, escena del delito, entre otros) se ha transformado a través del tiempo, adecuándose a la realidad social imperante, pero en síntesis, contiene un sinnúmero de información indiciaria de gran valor dentro de la investigación misma, que debe ser preservada, localizada, documentada por cualquiera de sus formas, embalada y analizada, para que permita la obtención de un resultado que aporte un valor significativo dentro de la investigación que se esté realizando. Como lo menciona la conocida frase “Los ojos no ven lo que el cerebro no conoce”, en la intervención a un lugar, si el investigador no observa y analiza la relación que tienen los indicios con el hecho, independientemente de la cantidad y variedad de indicios, nunca podrá considerarlos y los ignorará, aún se encuentren frente a sus ojos. Todo lo contrario, cuando el experto forense observa el lugar de intervención, puede ubicar, documentar e interpretar dichos indicios, aumentando la posibilidad de que el trabajo de investigación sea exitoso, por eso resulta tan importante la Observación.
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o son pocas las ocasiones en que los sujetos activos han recurrido a innumerables recursos con tal de eludir su responsabilidad en la comisión de un hecho delictivo, alterando el lugar de intervención, ya sea colocando indicios en otro lugar; generando mayor cantidad de supuestos indicios; colocando a las víctimas en una posición diferente a la original de la muerte; entre otras circunstancias, no obstante, cuando el perito investigador ha realizado un proceso efectivo de observación es capaz de detectar las inconsistencias.
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ANÁLISIS DE CASO FORENSE Fecha de intervención: 15 de Septiembre de 2010. Lugar: Domicilio conocido. Tipo de hecho: Homicidio doloso. ntecedentes del caso: Sujeto probable responsable de los hechos declara que se encontraba en compañía de la víctima cuando ésta cae súbitamente a nivel del piso, desconociendo las razones, aludiendo algún problema de salud derivado de su edad, posteriormente, y debido a que la complexión física de la víctima superaba a la del sujeto activo, este último lo arrastra hasta la cama para tratar de brindarle los primeros auxilios. Testigos de los hechos.- Ninguno.
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*Licenciada en Criminología, Criminalística y Técnicas Periciales, Supervisora del Departamento de Criminalística, Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla. **Especialista en Medicina Legal, Directora General del Instituto de Ciencias Forenses de la Fiscalía General del Estado de Puebla
Figura 1. Posición final del sujeto.
1.- El lugar donde el sujeto refiere suceden los hechos y posición final tras el arrastre según declaración (Figura 1).
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INDICIOS LOCALIZADOS ·
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Esquirlas óseas sobre tórax del cadáver y sarape. Manchas hemáticas por retrosalpicadura, y proyecciones de la herida en la pared.
DICTAMENES SOLICITADOS · · · · ·
Criminalística Fotografía Genética Forense Dactiloscopia Química Forense
1.- Se advierte que en la zona donde supuestamente la víctima cayó, la presencia de manchas por transferencia, mismas que no guardan correspondencia con un mecanismo de producción por caída, en donde se espera encontrar manchas por salpicadura incluso lago hemático, además se observa fue producida de manera manual y por tanto intencional.
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Figura 1. Manchas de sangre en Zig Zag de la víctima.
l patrón de las manchas hemáticas en zigzag y en forma semicircular, permite advertir inconsistencias en la declaración del probable responsable, debido a que en el lugar donde se menciona sucede la caída y posterior arrastre, el patrón de las manchas hemáticas no es unidireccional y uniforme, sino multidireccional, de menor amplitud que el tamaño del cuerpo y que fueron realizados con un textil de características diferentes al de las prendas en posesión de la víctima, lo que permite descartar un patrón de arrastre de un cuerpo.
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n la zona de afectación (recámara) se observa patrón de manchas hemáticas producidas a gran velocidad por retrosalpicadura en la pared como las producidas por un mecanismo de contusión activa con un objeto romo y duro sobre la región anatómica involucrada (cráneo). Es importante saber que si se comprueba la hipótesis de caída, la manera de la muerte seria accidental pero de corroborarse la hipótesis de contusión directa en cráneo la manera de la muerte sería homicidio doloso.
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CONCLUSION observación constituye un paso fundamental dentro del análisis y procesamiento del lugar de intervención, que permitirá la elaboración de las hipótesis de la investigación de un probable hecho delictuoso sobre sólidos cimientos y preparará el terreno para continuar el procesamiento con éxito, como por ejemplo, buscar el objeto productor de la lesión o lesiones; del textil utilizado; tomar mediciones antropométricas del cuerpo (tórax y pelvis) para correlacionar con las mediciones del ancho de las manchas hemáticas producidas por el supuesto arrastre; realizar el análisis de los patrones de manchas hemáticas, entre otros, que a la postre permita corroborar los principios criminalísticos (correspondencia, reconstrucción de hechos, de probabilidad, de producción).
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a observación es el primer paso del método científico aplicado a la criminalística de campo y dentro del procesamiento del lugar de intervención ocupa el segundo paso, de ahí la importancia de hacer énfasis en este paso porque de él se desprende todo el análisis y todas las operaciones que se realicen en el lugar de intervención.
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al y como ya se ha mostrado anteriormente cuando un perito procesador del lugar de intervención realiza una buena observación del lugar se reduce la posibilidad de pasar desapercibidos los indicios que tiene al frente, como apuntaba el Dr. Rafael Moreno González, el éxito de la investigación es resultado de la apreciación inteligente del lugar bajo el escrutinio mental activo.
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MÉTODO CIENTÍFICO
PROTECCIÓN Y PRESERVACIÓN
Nota: Caso verídico, se omitieron todos los datos personales.
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