LABORATORIO DE TOXICOLOGIA UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGIA DOCENTE: BQF. CARLOS ALBERTO GARCIA GONZALES MSC. ESTUDIANTE: GUERRERO CUERO JAIRO STEVEN PARALELO: “A”
CURSO: QUINTO AÑO
FECHA DE REALIZACION DE LA PRACTICA: Martes, 19 de Julio del 2016 FECHA DE PRESENTACION DE LA PRÁCTICA: Martes, 26 de Julio del 2016
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10 PRACTICA Nº BF.5.09-07 TITULO DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACION POR PLOMO
ANIMAL DE EXPERIMENTACION: Rata wistar. VIA DE ADMINISTRACION: Vía Parenteral. VOLUMEN ADMINISTRADO: 10 ml de Solución de Nitrato de Plomo TIEMPOS: Inicio de la práctica: 8:15 am Hora de disección: 9:00 am Hora inicio de destilado: 9:30 am Hora de finalización de destilado: 9:55 am Hora finalización de la práctica: 10:30 am OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Presenciar la acción toxicológica del plomo mediante la observación de la sintomatología que presenta el animal de experimentación (rata wistar.).
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis.” (Paracelso)
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Identificar la presencia del plomo en las vísceras de la rata wistar, mediante reacciones químicas cualitativas
FUNDAMENTO TEORICO: Las comidas como frutas, vegetales, carnes, granos, mariscos, refrescos y vino pueden contener grandes cantidades significantes de plomo. El humo de los cigarros también contiene pequeñas cantidades de plomo. El plomo es uno de los 4 metales que tienen un mayor efecto dañino sobre la salud humana. Este puede entrar en el cuerpo humano a través de la comida (65%), agua (20%), y aire (15%). El plomo ocurre de forma natural en el ambiente, pero las mayores concentraciones que son encontradas en el ambiente son el resultado de las actividades humanas. El líquido proveniente de la destrucción de la materia orgánica, es tratado con amoniaco para disminuir la acidez y luego se realizaran las reacciones de identificación que a continuación se detallan. INSTRUCCIONES: 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. MATERIALES:
Soporte de Hierro Pinza Vasos de precipitación (250 ml) Pipetas Matraz Erlenmeyer (250 ml) Tubos de ensayo Probeta (50 ml) Perlas de vidrio Agitador Embudo
SUSTANCIAS:
Ácido Acetico Yoduro de potasio KOH NaOH Cromato de potasio Di fenil tio carbazona Ácido Sulfurico Agua destilada
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis.” (Paracelso)
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Balón de destilación Mechero de alcohol Tabla de diseccion Agitador Espátula Gradilla
OTROS
Mandil Guantes Mascarilla Gorro Estuche de disección Aguja hipodérmica (10 ml) Cronómetro Panema Fosforo Cocineta Piola Aro de hierro Funda plástica
EQUIPOS: ● ● ● ● ●
Cloruro Estannoso Nitrato de Cadmio Solucion amoniacal Peroxido de Hidrogeno 3% Bencidina HCl K4CLO
Balanza Analítica Equipo de destilación Baño María Campana
MUESTRA
Destilado de vísceras de rata wistar.
ACTIVIDADES Balanza Analítica.A REALIZAR: 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener listo los materiales a utilizarse. 2. Pesar y diluir 10g de Nitrato de plomo. 3. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10 g de Nitrato de plomo previamente diluidos. 4. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5. Luego del deceso, proceder con la disección del al animal de experimentación y recolectar sus fluidos y vísceras, picarlas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 6. Verter las vísceras en un balón de destilación, luego agregar 20 ml de ácido clorhídrico y perlas de vidrio. 7. Destilar y recoger el destilado en Clorato de potasio. 8. Con aproximadamente 15 ml del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 1. Con el cromato de potasio: se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o en una capsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un precipitado amarillo de cromato de potasio. Pb(NO3)2 + K2CrO
CrO4Pb + 2KNO3
2. Con el yoduro de potasio: con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo cristalino de I2Pb soluble en caliente con agua y precipitable en frio como agujillas amarillas. Pb(NO3)2 + 2IK
PbI2 + 2KNO3
3. Con la Difenil tío carbazona: esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono, al reaccionar con el plomo produce un color rojo. 4. Con el ácido sulfúrico: en una solución diluida, produce un precipitado blanco de sulfato de plomo, este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se disuelva el precipitado produce un color anaranjado. 5. Con el tetrametildiaminodifenilmetano: Es una solución acética. Para realizar esta reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de peróxido de hidrogeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gotas de la solución muestra; el papel filtro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta en baño, maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar el plomo como oxido de plomo. Se hace caer sobre el papel una gota de reactivo. En caso positivo, en el punto de contacto aparece un color azul por la formación de hidrosol respectivo. 6. Con la bencidina: a 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta la que mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade ½ ml de peróxido de hidrogeno al 3% se hierve cuando momento, se separa y lava el precipitado con agua y finalmente se añaden gotas de bencidina sobre el precipitado. Un color azul nos indica la presencia de plomo. GRAFICOS: PREPARACION DE LA MUESTRA
1. Pesar y diluir 10g de Nitrato de plomo.
2. Inyección del toxico (Nitrato de plomo) por vía intraperitoneal.
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3. Colocar el cobayo en el panema. Página 4
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5. Colocar las vísceras (picadas lo más finas posibles) en un balon de destilacion.
4. Disección del cobayo
REACCIONES DE INDETIFICACION: Con el cromato de potasio:
ANTES: TRASLUCIDO
DESPUES: PRECIPITADO AMARILLO (POSITIVO)
Con la Difenil tío carbazona:
ANTES: TRASLUCIDO
6. Destilar y recoger el destilado en 20ml de HCl.
Con el yoduro de potasio:
DESPUES: PRECIPITADO AMARILLO (+)
ANTES: TRASLUCIDO
Con el ácido sulfúrico
DESPUES: COLOR ROJO (POSITIVO)
ANTES: TRASLUCIDO
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DESPUES: COLOR ANARANJADO (POSITIVO)
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA Con el tetrametildiaminodifenilmetano:
ANTES: TRASLUCIDO
DESPUES: COLOR AZUL (POSITIVO)
Con la bencidina:
ANTES: TRASLUCIDO
DESPUES: COLOR AZUL (POSITIVO)
OBSERVACIONES: No se pudo realizar la práctica experimentalmente, pero mediante presentaciones virtuales se tuvo una idea de la misma. Mediante la investigación se evidencio lo siguiente: Se le administró al cobayo 10g de Nitrato de plomo previamente diluidos, al colocar en el panema al animal de experimentación “Wistar” se observó manifestaciones como: perdida del equilibrio, pérdida de la actividad motora, ceguera, convulsiones, hipoxia y finalmente después de un tiempo prolongado se produjo su muerte. CONCLUSIONES: ●
Se observó la toxicidad del plomo en el animal de experimentación (rata “Wistar”), por medio de sus manifestaciones ante la exposición con este tóxico, siendo las convulsiones, perdida de la función motora, ceguera e hipoxia las manifestaciones más recurrentes y luego el deceso o muerte al cabo de cierto tiempo. ● También se evidenció la presencia del plomo mediante reacciones químicas cualitativas, en el destilado obtenido de la materia biológica del animal de experimentación rata “Wistar”. RECOMENDACIONES:
Utilizar guante, gorro, zapatones y fundamentalmente mascarilla como medida de bioseguridad. Aplicar las normas de Bioseguridad en el Laboratorio de toxicología. Preparar los reactivos a la concentración adecuada, para evitar errores en la práctica o agonía en el caso de la solución de plomo aplicada a la rata “Wistar”. Al ser el etanol un toxico muy volátil se recomienda usar siempre mascarilla y protectores de la vista.
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Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación.
CUESTIONARIO: 1. Que es el plomo? El plomo es un metal gris, blando y maleable que se obtiene por fundición ó refinamiento de las minas ó secundariamente por el reciclamiento de los materiales de deshecho que contengan plomo, como por ejemplo de las baterías de los automóviles. 2. Cuáles son los pictogramas que se usan para denominar al plomo?
3. Cuáles son los efectos toxicológicos del plomo? El plomo almacenado en los huesos puede volver a circular por la sangre durante el embarazo, con el consiguiente riesgo para el feto. La exposición al plomo también puede causar anemia, hipertensión, disfunción renal, inmunotoxicidad y toxicidad reproductiva. Se cree que los efectos neurológicos y conductuales asociados al plomo son irreversibles. GLOSARIO: MALEABILIDAD: La maleabilidad es la propiedad que presentan algunos materiales de poder ser descompuestos en: láminas sin que el material en cuestión se rompa, o en su defecto, extendidos, sin que tampoco se dañen. CALMODULINA: La calmodulina (CaM) es una proteína acídica intracelular, de bajo peso molecular y termoestable que se localiza principalmente en el cerebro y el corazón, y que se expresa en todas las células eucariotas, siendo uno de los reguladores en la transducción de la señal de calcio en la célula. CÓLICO SATURNINO: Síndrome caracterizado por un dolor abdominal muy vivo, irradiado desde el ombligo hacia los lomos, los muslos y las bolsas, por estreñimiento rebelde y vómitos; con frecuencia existe, al propio tiempo, retracción del abdomen (vientre en barca) y de los órganos abdominales, así como modificaciones del pulso (dicrotismo). Es uno de los síntomas más frecuentes del saturnismo.
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA ATRESIA ANAL: Es un defecto que está presente al nacer (congénito), en el cual la abertura hacia el ano falta o está obstruida. El ano es la abertura hacia el recto a través de la cual las heces salen del cuerpo. WEBGRAFIA:
M. Melinda V., Rev. Soc. Per. Med. Inter, Intoxicación por plomo, (en línea 2005. Revisado el: 24 de Julio del 2016. Disponible en:
http://medicinainterna.org.pe/revista/revista_18_1_2005/Intoxicacion.pdf
Alvarez J., Diccionario de Fisiología, Calmodulina, (en línea), 2 de Mayo del 2009. Revisado el: 24 de Julio del 2016. Disponible en:
http://diccionariofisiologia.blogspot.com/2009/05/calmodulina.html
M. García G., MEDICOPEDIA, Cólico, (en línea), 28 de Diciembre del 2011. Revisado el: 24 de Julio del 2016. Disponible en: http://www.portalesmedicos.com/diccionario_medico/index.php/Colico
OMS, Intoxicacion por polo y salud, (en línea), Agosto del 2015. Revisado el: 24 de Julio del 2016. Disponible en:
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs379/es/
Chung DH. Pediatric surgery. In: Townsend CM Jr, Beauchamp RD, Evers BM, Mattox KL, eds. Sabiston Textbook of Surgery. 19th ed. Philadelphia, PA: Elsevier Saunders; 2012:chap 67.
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FIRMA DE RESPONSABILIDAD JAIRO STEVEN GUERRERO CUERO CI: 0705851368
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