LABORATORIO DE TOXICOLOGIA UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGIA DOCENTE: BQF. CARLOS ALBERTO GARCIA GONZALES MSC. ESTUDIANTE: GUERRERO CUERO JAIRO STEVEN PARALELO: “A”
CURSO: QUINTO AÑO
FECHA DE REALIZACION DE LA PRACTICA: Martes, 02 de Agosto del 2016 FECHA DE PRESENTACION DE LA PRÁCTICA: Martes, 09 de Agosto del 2016
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10 PRACTICA Nº BF.5.09-08 TITULO DE LA PRÁCTICA INTOXICACION POR TOXICOS MINERALES (MERCURIO) ANIMAL DE EXPERIMENTACION: Pescado. VIA DE ADMINISTRACION: Vía Intraperitoneal. VOLUMEN ADMINISTRADO: 20 ml de Solución de Nitrato de Mercurio TIEMPOS: Inicio de la práctica: 8:15 am Hora de disección: 9:00 am Hora inicio de destilado: 9:30 am Hora de finalización de destilado: 9:55 am Hora finalización de la práctica: 10:30 am Sintomatología: Fatiga, Excitabilidad, perdida de la actividad motora, estado de sueño profundo, presencia y expulsión de fluidos necrosados, laceración en la zona de punción, y finalmente después de un tiempo prolongado se produjo su muerte.
“Todo es veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis.” (Paracelso)
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:
Presenciar la acción toxicológica del mercurio mediante la observación de la sintomatología que presenta el animal de experimentación (pescado).
Identificar la presencia del mercurio en las vísceras del pescado, mediante reacciones químicas cualitativas
FUNDAMENTO TEORICO: Es un metal noble, soluble únicamente en solución oxidante. El mercurio solido es tan suave como el plomo. El metal y sus componentes son muy tóxicos. El mercurio forma soluciones llamadas amalgamas con algunos metales (por ejemplo: Au, Ag, Pt, U, Cu, Pb, Na y K). El mercurio es un elemento que puede ser encontrado de forma natural en el medio ambiente. Puede ser encontrada en forma de metal, como sales de mercurio o como mercurio orgánico. La dosis letal de mercurio inorgánico es de 1 gramo aunque hay evidencias de toxicidad con valores de 50 a 100 mg. La dosis letal del mercurio orgánico es dos a tres veces mayor. INSTRUCCIONES: 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. MATERIALES:
SUSTANCIAS:
Ácido Acetico Soporte de Hierro Yoduro de potasio Pinza KOH Vasos de precipitación (250 ml) NaOH Pipetas Cromato de potasio Matraz Erlenmeyer (250 ml) Di fenil tio carbazona Tubos de ensayo Ácido Sulfurico Probeta (50 ml) Balón de destilación Agua destilada Perlas de vidrio Agitador “Todo veneno, nada es veneno, todo depende de la dosis.” (Paracelso) Página 2 es Embudo
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA
Mechero de alcohol Tabla de diseccion Agitador Espátula Gradilla
OTROS
Mandil Guantes Mascarilla Gorro Estuche de disección Aguja hipodérmica (10 ml) Cronómetro Panema Fosforo Cocineta Aro de hierro Funda plástica
EQUIPOS: ● ● ● ● ●
Balanza Analítica Equipo de destilación Baño María Campana
Cloruro Estannoso Nitrato de Cadmio Solucion amoniacal Peroxido de Hidrogeno 3% Bencidina HCl conc. K4CLO Nitrato Mercúrico (solución saturada)
MUESTRA
Destilado de vísceras del pescado.
ACTIVIDADES Balanza Analítica.A REALIZAR: 1. Desinfectar el área de trabajo. 2. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 3. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de Nitrato Mercúrico (solución saturada) y se toma de manera segura al animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras. 4. Se administra la cantidad de 10 ml de Nitrato Mercúrico (solución saturada) y se coloca el animal en la panema. Se observan las reacciones y conducta postadministración. 5. Transcurrido el tiempo de la muerte del animal se procede a colocarlo en mesa de disección. 6. Con ayuda de una tijera o una hoja Gillette se rasura el pelaje del abdomen del animal para facilitar el corte. 7. Con un bisturí se disecciona todo el dorso del animal evitando perforar las vísceras luego se recogen las vísceras en un vaso de precipitación
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA 8. Agregamos las 50 perlas de vidrio más 4g Clorato de Potasio y 20ml de HCl conc. 9. Llevamos a baño maría por 30 minutos (8:43am – 9:13am) con agitación regular. 10. Luego 5 minutos antes de que se cumpla el tiempo establecido añadir 2g más KClO3. 11. Una vez finalizado el baño maría dejar enfriar, filtrar y con el filtrado realizar las reacciones de identificación. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 1. Con el Cloruro Estañoso: al agregar una pequeña cantidad del reactivo a una porción de la muestra, en caso positivo se debe producir un precipitado blanco de cloruro mercurioso o calomel o un precipitado negro de Hg metálico. 2HgCl2 + SnCl2 Hg2Cl2 + SnCl2
Hg2Cl2 + SnCl4 2Hg + SnCl4
2. Con el Yoduro de Potasio: al reaccionar una muestra que contenga Hg, frente al Ki, se produce un precipitado rojo, anaranjado o amarillo (de acuerdo a la concentración del toxico) de yoduro mercúrico. HgCl2 + 2IK
HgI2 + 2KCl
3. Con la Difenil Tio Carbazona: es una reacción muy sencilla para reconocer el Hg; (el reactivo se prepara con 0.012 gr de ditizona disuelta en 1000 ml de Cl4C) se mide un poco demuestra y se añaden algunas gotas de reactivo con el cual debe producir un color anaranjado en caso (+), si es necesario se puede calentar ligeramente la mezcla. 4. Con la Difenil Carbazida: en medio alcohólico, la difenil carbazida produce con el Hg un color violeta o rojo violeta. 5. Con el Sulfuro de Hidrogeno: produce un precipitado negro mercúrico. HgCl2 + H2S
SHg + 2HCl
6. Con Amoniaco: si al añadir la solución de NH3 sobre el precipitado este se ennegrece, es señal suficiente para la existencia del mercurio. Hg2Cl2 + 2NH3
Hgo + Hg (NH2)Cl + NH4+ + ClNegro
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA GRAFICOS: PREPARACION DE LA MUESTRA
1. Animal en experimentación
3. Procedemos a la disección del pez
5. Añadir 4g de clorato de potasio y HCl y llevamos a baño maria
2. Administramos el toxico
4. Con la ayuda de las tijeras cortamos las vísceras en trozos pequeños
6. Destilamos colocando 50 perlas de vidrio
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA REACCIONES DE INDETIFICACION: Con el Cloruro Estañoso:
ANTES: LIGERAMENTE TURBIO
DESPUES: PRECIPITADO BLANCO (POSITIVO)
Con la Difenil tío carbazona:
ANTES: LIGERAMENTE TURBIO
Con el yoduro de potasio:
DESPUES: PRECIPITADO ANARANJADO (+)
ANTES: LIGERAMENTE TURBIO
Con la Difenil Carbazida:
DESPUES: COLOR ANARANJADO (POSITIVO)
ANTES: LIGERAMENTE TURBIO
DESPUES: COLOR VIOLETA (POSITIVO)
Con el Sulfuro de Hidrogeno:
DESPUES: PRECIPITADO NEGRO (POSITIVO)
ANTES: LIGERAMENTE TURBIO
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA Con Amoniaco:
ANTES DE REALIZAR LA REACCION
ANTES: LIGERAMENTE TURBIO
DESPUES: TRASLUCIDO (NEGATIVO)
OBSERVACIONES: Al colocar en el panema al animal de experimentación (pescado) se observó manifestaciones como: pérdida de la actividad motora, estado de sueño profundo, presencia y expulsión de fluidos necrosados, laceración en la zona de punción, y finalmente después de un tiempo prolongado se produjo su muerte. CONCLUSIONES: ●
Se observó la toxicidad del mercurio en el animal de experimentación (pescado), por medio de sus manifestaciones ante la exposición con este tóxico, siendo la expulsión de fluidos necrosados, perdida de la función motora, las manifestaciones más recurrentes y luego el deceso o muerte al cabo de cierto tiempo. ● También se evidenció la presencia del mercurio mediante reacciones químicas cualitativas, en el destilado obtenido de la materia biológica del animal de experimentación (pescado). RECOMENDACIONES:
Utilizar guante, gorro, zapatones y fundamentalmente mascarilla como medida de bioseguridad. Aplicar las normas de Bioseguridad en el Laboratorio de toxicología. Si se evidencia una fuerte exposición al toxico, procurar utilizar la campana extractora de gases. Al ser el amoniaco un reactivo muy fuerte se recomienda usar siempre mascarilla. Asegurarse que el equipo esté correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilación, evitando así una intoxicación.
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA CUESTIONARIO: 1. Que es el mercurio (Hg)? El mercurio (Hg) es un metal blanco-plateado muy tóxico, el único en estado líquido a 0ºC, muy denso y poco compresible; de tensión superficial muy alta y débil reacción calorífica, posee gran capacidad de amalgamar a casi todos los metales. Se evapora a 13°C y encontramos trazas de él en cualquier producto que se analice. 2.
En que especie acuática se acumula el mercurio en mayor proporción?
La sustancia es muy tóxica para los organismos acuáticos. En la cadena alimentaria referida a los seres humanos tiene lugar bioacumulación, concretamente en los peces
3. Cuáles son los efectos toxicológicos tras una exposición de corta duracion con mercurio? La inhalación del vapor puede originar neumonitis. La sustancia puede causar efectos en el riñón y en el sistema nervioso central. Los efectos pueden aparecer de forma no inmediata. Se recomienda vigilancia médica. GLOSARIO: BIOACUMULACIÓN: Proceso de acumulación de ciertos productos dentro de los organismos. Algunos metales pesados e hidrocarburos clorados son acumulados por los organismos acuáticos. Es por eso que pueden encontrarse concentraciones muy altas de estos elementos químicos en tejidos biológicos, aun cuando se hallen extremadamente diluidos en el medio acuático circundante. ESTOMATITIS: La estomatitis es una inflamación de la membrana mucosa de cualquiera de las estructuras de la boca, como de: Las mejillas, encías, lengua, labios, garganta, base de la boca. MERCURIALISMO O HIDRARGIRISMO: Es el conjunto de los trastornos patológicos debidos a una intoxicación aguda o crónica producida por el mercurio. PATOGNOMÓNICO: El adjetivo patognomónico sirve para calificar un síntoma que aparece únicamente en el marco de una enfermedad específica. Cuando se detecta un signo patognomónico automáticamente se puede establecer un diagnóstico médico de certeza.
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LABORATORIO DE TOXICOLOGIA WEBGRAFIA:
MARCOVECCHIO, J.E.; MORENO, V.J. & A. PEREZ. 1991. Metal accumulation in tissues of sharks from the Bahía Blanca Estuary, Argentina. Marine Environmental Research vol. 31: 263-274.
D. JIMÉNEZ A., seguridad y salud para todos, Mercurialismo o Hidrargirismo, (en línea), 13 de abril de 2011. Revisado el: 06 de Agosto del 2016. Disponible en: http://seguridadysaludparatodos.blogspot.com/2011/04/hidrargirismo-omercurialismo.html
ICSC, Fichas Internacionales de Seguridad Química, (en línea), 1994. Revisado el: 06 de Agosto del 2016. Disponible en: https://noharm.org/sites/default/files/lib/downloads/espanol/ficha-seguridadquimica-mercurio.pdf
RAMIREZ, Augusto V. Intoxicación ocupacional por mercurio. An. Fac. med. (online). 2008, vol.69, n.1 [citado 2016-08-08], pp. 46-51 . Disponible enhttp://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S102555832008000100010&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1025-5583.
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FIRMA DE RESPONSABILIDAD JAIRO STEVEN GUERRERO CUERO CI: 0705851368 ANEXOS ANEXO 1: Datos obtenidos de los análisis colorimétricos cualitativos realizados al pescado.
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