UNIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Docente: Bioq.Farm. García González Carlos Alberto Mg.Sc. Alumna: Macas Paltin Katherine Lisbeth Curso: Quinto año de Bioquímica y Farmacia Paralelo: “A” Grupo N°: 4 Fecha de elaboración de la práctica: Martes, 21 de Junio del 2016 Fecha de presentación de la práctica: Martes, 28 de Junio del 2016
PRÁCTICA N°4 10 TÍTULO DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR ETANOL. Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal Volumen administrado: 10ml de solución de alcohol etílico 1. OBJETIVOS. Observar la sintomatología que presenta el animal de experimentación (rata wistar) tras la administración de alcohol etílico y su intoxicación. Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de alcohol etílico en el destilado de las vísceras del animal de experimentación (rata wistar). 2. FUNDAMENTO TEORICO El etanol es un líquido incoloro, volátil, con un olor característico y sabor picante. También se conoce como alcohol etílico. Sus vapores son más pesados que el aire. Se obtiene, principalmente, al tratar etileno con ácido sulfúrico concentrado y posterior hidrólisis. Algunas alternativas de síntesis son: hidratación directa de etileno en presencia de ácido fosfórico a temperaturas y presiones altas y por el método FischerTropsch, el cual consiste en la hidrogenación catalítica de monóxido de carbono, también a temperaturas y presiones altas. De manera natural, se obtiene a través de fermentación, por medio de levaduras a partir de frutas, caña de azúcar, maíz, cebada, sorgo, papas y arroz entre otros, generando las variadas bebidas alcohólicas que existen en el mundo. Después de la fermentación puede llevarse a cabo una destilación para obtener un producto con una mayor cantidad de alcohol. El etanol se utiliza industrialmente para la obtención de acetaldehido, vinagre, butadieno, cloruro de etilo y nitrocelulosa, entre otros. Es muy utilizado como disolvente en síntesis de fármacos, plásticos, lacas, perfumes, cosméticos, etc. También se utiliza en mezclas anticongelantes, como combustible, como antiséptico en cirugía, como materia prima en síntesis y en la preservación de especímenes fisiológicos y patológicos.
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3. INSTRUCIONES 1. Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 2. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3. Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 4. MATERIALES MATERIALES VIDRIO Vaso de precipitación Pipeta Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Perlas de vidrio Agitador Embudo OTROS Mandil Gorro Mascarilla Guantes Aguja hipodérmica de 10 ml Cronometro Estuche de disección Panema Agitador Fosforo Pinzas Cocineta Espátula Gradilla
EQUIPOS Aparato de destilación Balanza Baño de maria Campana
SUSTANCIAS Cloruro de fenilhidracina al 4% Nitroprusiato sódico al 2.5% Hidróxido de sodio Ácido clorhídrico Cloruro de fenilhidracina Ferricianuro de potasio Ácido sulfúrico Cloruro férrico Sulfato ferroso
MUESTRA Destilado de vísceras del animal de experimentación
5. PROCEDIMIENTO 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. Preparar una solución de formaldehido al 4% 3. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 10 mL de alcohol metílico. TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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4. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación. 5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 ml de ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. 7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. 6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN -
Reacción de Schiff.- A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1%, después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y se agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que se decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (reactivo de Shiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso positivo.
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Reacción de Rímini.- A 5ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4%, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
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Con la Fenilhidracina.- En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
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Reacción de Marquis.- Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.
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Con el Ácido Cromotrópico.- Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
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Reacción de Hehner.- Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta
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7. GRÁFICOS
1. Preparación del alohol metilico.
2. Poner la inyección intraperitonial a la rata wistar.
5. Hacer una incisión en el abdomen.
6.Se trituran las vísceras en un vaso de precipitación .
8. Preparar el equipo de destilación.
3. Colocarlo panema observación
en
la para
7. Se transvasa a un balón para la destilación.
9. Efectuar las reconocimiento.
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pruebas
de
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1. RESULTADOS DE RECONOCIMIENTO.
REACCION DE SCHIFF: POSITIVO(+)
REACCIÓN DE RIMINI: POSITIVO (+)
REACCION CON FENILHIDRACINA POSITIVO (+)
REACCIÓN CON EL ACIDO CROMOTROPICO: POSITIVO (+)
REACCION DE HENNER POSITIVO(+)
2.
OBSERVACIONES
Se logró observar e interpretar la sintomatología que presento el animal de experimentación (rata wistar) tras la intoxicación por etanol entre ellos movimientos discontinuos y acelerados, ceguera, convulsiones lo cual conllevo a la muerte del animal. En las pruebas de identificación en los medios biológicos, se observó la coloración de las reacciones lo cual evidencio la presencia del toxico en el animal de experimentación. 3. RECOMENDACIONES Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida Utilizar el bisturí ideal para la disección Asegurar al animal correctamente en la tabla para evitar autocontaminarnos. 4. CONCLUSION Mediante la observación de la práctica realizada se evidencio la sintomatología que presento el animal de experimentación (rata wistar) tras la administración de 10 ml de alcohol etílico, afectando así rápidamente sus órganos los mismos que sirvieron para realizar la destilación y proceder a ejecutar las reacciones de reconocimiento en las cuales se identificó la presencia del toxico (etanol o alcohol etílico) 5. CUESTIONARIO 1. ¿Cuáles son los efectos de exposición de corta duración que causa el etanol? La sustancia irrita los ojos. La inhalación de altas concentraciones del vapor puede originar irritación de los ojos y del tracto respiratorio. La sustancia puede afectar al sistema nervioso central. 2. ¿Cuáles son los efectos de exposición prolongada o repetida que provoca el etanol? El líquido desengrasa la piel. La sustancia puede afectar al tracto respiratorio superior y al sistema nervioso central, dando lugar a irritación. 3. ¿Qué usos presenta el alcohol etílico? El etanol es muy utilizado en la preparación de bebidas alcohólicas, en los sectores farmacéuticos e industriales, la industria química lo utiliza como compuesto de partida en la síntesis de diversos productos, como el acetato de etilo, el éter dietílico también se utiliza en la elaboración de perfumes y ambientadores. Se emplea como combustible industrial y doméstico. 6. GLOSARIO INANICIÓN.-es un estado de extrema debilidad y desnutrición que puede afectar al organismo humano como consecuencia de la ausencia de ingesta de alimentos. ADRENALECTOMÍA.- Extirpación quirúrgica de una o de ambas glándulas suprarrenales, o resección parcial de las mismas, que se lleva a cabo para reducir la secreción excesiva de hormonas suprarrenales cuando existe un tumor suprarrenal o una neoplasia maligna de mama o de próstata. SÍNDROME DE MEI-TEI-SHO.- se presenta en las personas que producen un nivel elevado de etanol endógeno y que puede conllevarle a una intoxicación alcohólica ENZIMA ALCOHOL DESHIDROGENASA.- son un grupo de siete enzimas que están frecuentemente presentes en muchos organismos y facilitan la interconversión entre alcoholes y aldehídos o cetonas con la reducción de NAD+ a NADH. TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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7. BIBLIOGRAFIAS -
Piazza M, Rodriguez L. ETANOL ENDÓGENO SIN INGERIR ALCOHOL : NIVELES DE. 2015;21:187–9.
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Quezada P, Fichas de Seguridad. 2015; Consultada: 03–02 – 2015. Available from: http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ /Ficheros/0a100/nspn0044.pdf
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Alavarez S, Evelson P, Boveris A. Etanol: El combustible del futuro. Encrucijadas [Internet]. 2008;(45). Available from: http://www.olade.org/sites/default/files/CIDA/IICA/Atlas de Bioenergia y Combustibles 1.pdf
8. FIRMA DE RESPONSABILIDAD
KATHERINE LISBETH MACAS PALTIN 0705839835
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