Los microorganismos se encuentran presentes en todos los ambientes: en el aire, agua, superficie de objetos e incluso sobre nuestra piel. Para asegurar la calidad de los alimentos debe prestarse atención tanto a los microorganismos patógenos como a los alterantes, que pudieran llagar a las materias primas o al alimento terminado, a partir del hombre (manipulador), de los equipos, tuberías, superficies, aire, etc. Cuando se trabaja en la industria de alimentos es importante determinar el grado de contaminación ambiental, ya que de las condiciones higiénicas del lugar de trabajo (utensilios, superficies, etc.) y del propio manipulador van a depender en parte el número y tipo de microorganismos del alimento, lo cual garantiza la efectividad de las buenas prácticas de manufactura – BPM. Los equipos, utensilios y superficies, utilizados en el procesamiento, fabricación o preparación de alimentos, deben estar diseñados, construidos, instalados y mantenidos de tal forma que se evite la contaminación del alimento y se facilite el proceso de limpieza y desinfección de los mismos. Igualmente es importante el estudio microbiológico del aire (ambiente), ya que este se pone en contacto con los alimentos, por eso se debe estar seguro de trabajar en un ambiente adecuado, debidamente desinfectado o esterilizado.
Conocer el procedimiento para realizar pruebas de ambiente en la producción de alimentos. Determinar los tipos de bacterias que crecen en un ambiente para evitar la contaminación en el proceso de alimentos.
Yeast Glucose Cloranphenicol (YGC) Standard Plate Count (SPC) Eosin Methyl Blue (EMB) Cajas Petri Erlenmeyer Tubos de ensayo Agua peptonada 0.1% Hisopos Método de sedimentación Plantilla por hisopo
Agar 1: Agar: El medio de cultivo 18,5g 1000ml encontramos 1 X 80ml colonia que tapo casi todo el X= 1.48g de agar cultivo. Agua Peptonada: Agar 2: Este medio de cultivo tambiĂŠn encontramos 1 colonia.
8,5g de NaCL
1000ml
X
80ml
1
1
X= 0.68g
Agar 3: Este medio de cultivo ya encontramos 3 colonias
1g De Peptona X X= 0,08g
1000ml 3 80ml
Agar 4: En este medio de cultivo encontramos 1 colonia
Agar 1: En este medio cultivo encontramos 2 colonias diferentes unas de color amarillo y las otras color blanco. Agar 2: En este medio de cultivo al igual que el anterior el Agar 1 tambiĂŠn encontramos 2 tipos de colonias una amarilla y la otra blanca. Agar 3: En este medio de cultivo se encuentran 2 colonias
1
Agar: 23,5g X
1000ml 80ml
X= 1,88g Agua peptonada: 8,5g de NaCL
1000ml
X
80ml
X= 0.68g 1g De Peptona X X= 0,08g
1000ml
80ml
4 colonias pequeĂąas de color amarillo y 4 colonias grandes de color blanco 2 Colonias pequeĂąas de color amarillo y 2 colonias de colonias de color blanco. 2 colonias de color blanco
Agar 4: En este medio de cultivo se encuentran varias colonias.
Varias colonias
Agar 1: En este medio de cultivo se encuentran 4 colonias de E. colis.
Agar:
Agar 2: En este medio de cultivo est谩 lleno de colonias de coliformes.
Agua Peptonada:
Agar 3: Medio de cultivo limpio de microorganismo s.
37,5g X
1000ml 80ml
X= 3g
8,5g de NaCL
1000ml
X
80ml
X= 0.68g 1g De Peptona X
Agar 4: En este medio de cultivo se encontr贸 1 colonia de E. coli.
4 colonias
X= 0,08g
1000ml
Medio de Cultivo lleno de colonias
No se encontrar on colonias
80ml 1 colonia
Este cultivo que es para determinar si hay contaminación en el ambiente fue realizado en el sótano junto a las escaleras que conducen a las oficinas de bienestar, los 4 agares estaban contaminados se encontraron colonias lo que quiere decir que ese sitio no es apto para procesar un alimento.
Este medio de cultivo es para determinar si hay contaminación en la superficie, las muestras fueron realizadas en 4 superficies diferentes, una fue en un locker del sótano, la otra se realizó en una caneca de basura, la otra muestra fue en la baranda
de las escaleras del sótano que conduce a la oficina de bienestar y la última muestra fue en un muro, los 4 agares estaban contaminados se encontraron colonias de microorganismos, estas superficies en donde fueron tomadas la muestras son superficie contaminadas.
Este medio de cultivo se realiza a los manipuladores y procesadores de alimentos para determinar contaminación en manos, uñas y fosas nasales, las muestras fueron realizadas a 4 personas de las cuales 3 personas tenían sus manos contaminadas de microorganismos E. coli y una resulto limpia de microorganismos.
 Mantener los ambientes limpios, las superficies mantenerlas limpias, desinfectadas ya que nosotros vivimos pasando las manos por toda superficie y por eso es que las muestras salen contaminadas.  Realizar una higiene correcta lavar a cada rato nuestras manos con jabones antibacteriales, tratar de no estar tocando superficies ni estar cogiendo cosas que pueden estar contaminadas de microorganismos.
Coliformes, describe a estos microorganismos como bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos que fermentan la lactosa con producción de ácido y gas, aunque algunos pueden ser fermentadores tardíos o no fermentadores, como Citrobacter y Serratia, respectivamente. La mayoría de los coliformes pueden encontrarse en la flora normal del tracto digestivo del hombre o animales, por lo cual son expulsados especialmente en las heces, por ejemplo Escherichia coli. Por esta razón, su presencia constante en la materia fecal, los coliformes son el grupo más ampliamente utilizado en la microbiología de alimentos como indicador de prácticas higiénicas inadecuadas. Como los coliformes también pueden vivir en otros ambientes, se distingue entre coliformes totales y coliformes fecales. El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para: La detección de prácticas sanitarias deficientes en el manejo y en la fabricación de los alimentos. La evaluación de la calidad microbiológica de un producto, aunque su presencia no necesariamente implica un riesgo sanitario, cuando los coliformes son de origen no-fecal. Evaluación de la eficiencia de prácticas sanitarias e higiénicas en el equipo. La calidad sanitaria del hielo y los distintos tipos de agua utilizados en las diferentes áreas del procesamiento de alimentos. La demostración y la cuenta de microorganismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios de cultivos líquidos o sólidos con características selectivas o diferenciales.
El recuento de placa es un método muy utilizado cuando se necesita para determinar el tamaño de la población bacteriana de una muestra. El recuento de microorganismos, en este caso, se basa en que cada uno desarrollará una colonia visible. Pero debido a que una muestra no es totalmente homogénea con respecto a su composición microbiológica, es posible que una colonia se origine de un microorganismo o de cientos de ellos, dando en este último caso un recuento menor del real. También es posible que muchas de las bacterias presentes en la muestra no puedan crecer en las condiciones elegidas (pH, temperatura, medio de cultivo, tiempo, etc.). En este caso el recuento también será inferior al real. Lo que si se sabe es que cada colonia observada se formó a partir de por lo menos un microorganismo. Esta es una condición necesaria y suficiente. Entonces la colonia es considera una unidad formadora de colonia (ufc) a los efectos de los cálculos.
Evaluar la calidad sanitaria en las muestras de alimentos, mediante la búsqueda de microorganismos coliformes. Aprender a clasificar tipos de coliformes que puedan crecer en estos medios.
Incubadora con termostato que evite variaciones mayores de ± 1.0ºC. Contador de colonias de campo oscuro, con luz adecuada, placa de cristal cuadriculada y lente amplificador. Registrador mecánico o electrónico Microscopio Baño de agua con termómetro calibrado (temperatura a 45 ± 1.0 °C).
Utensilios estériles (cuchillo, tenedor, cuchara, pinzas) para tomar muestra Propipeta Pipetas bacteriológicas de 10 mL, estériles, con algodón en el extremo superior (las necesarias de acuerdo con el número de diluciones). Pipetas bacteriológicas de 1 mL, estériles, con algodón en el extremo superior. (las necesarias de acuerdo con el número de diluciones) Pipetas Pasteur estériles 4 a 8 cajas Petri estériles, de 15 x 100 mm.
Recuento de placa, técnica por profundidad.
Agares 10-1: En estos medios se pudo observar una gran cantidad de microorganismos coliformes.
Agar: 26.1g X
Varias colonias 1000ml 120ml
X= 3.13 g Agua peptona:
NaCl Agares 10-2: En 8.5g 1000 ml este medio X 108 ml podemos observar una gran X = 0.918g NaCl cantidad de microorganismos. 1g 1000 ml X 108 ml Agares 10-3: En un agar hubo contaminaciĂłn cruzada por eso el color azul.
X = 0.10g de peptona
55 – 18 colonias
Peptona
13- 11 colonias
La información anticipada de cada laboratorio es fundamental para la buena realización de este Luego de hacer estos laboratorio saber la clasificación de tipos de microorganismos que puedan crecer en los diferentes cultivos..
Para este laboratorio utilizamos MPC agar para realizar el recuento de placa del Clostridium perfringens en la muestra de durazno, lo cual el alimento estaba contaminado por que los agares estaban llenos de colonias.
Para realización de este laboratorio debemos tener mejor orden en el sitio de realización de este Para un mejor rendimiento del grupo debe de haber más organización La falta de agar EMB dificulto la realización de este laboratorio
http://www.diversidadmicrobi ana.com/index.php?option=c om_content&view=article&id =467&Itemid=523 http://www.javeriana.edu.co/ biblos/tesis/ciencias/tesis15. pdf http://datateca.unad.edu.co/c ontenidos/201504/contLinea/ leccin_30_tcnicas_de_recue nto_bacteriano.html 1.
Este método se basa en la presunción de que las bacterias se hallan uniformemente distribuidas en un medio líquido, o sea que las muestras del mismo tamaño de un mismo producto tendrían el mismo número de microorganismos. Naturalmente las muestras contienen algunos gérmenes más o menos. Entonces la cifra media es el número más probable. Las bacterias rara vez están separadas de sus vecinas. Ellas se agrupan en racimos, en especial cuando se reproducen activamente. Además la agitación puede deshacer o inducir a la formación de racimos. Por lo tanto carecen de valor las pruebas que se obtienen de una prueba aislada. Si el número de gérmenes es grande, la diferencia entre las muestras será pequeña, pero si es pequeño las diferencias relativamente serán mayores. Esta técnica se usa principalmente para la estimación de bacilos coliformes en caldo Mac Conkey, pero puede ser empleada para casi toda clase de gérmenes en muestras líquidas. Es posible calcular el número de gérmenes por cada 100 ml. con cualquier combinación de resultados obtenidos de tales muestras. Existen tablas para muestras de 10ml., 1ml. y 0,1 ml. utilizando cinco o tres tubos para cada tamaño de la muestra.
Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua o alimentos mediante la búsqueda de microorganismos coliformes totales, coliformes fecales y E.coli. Familiarizarse con el método de recuento de número más probable. Identificar los microorganismos que se puedan desarrollar en este método.
Estufa de incubación, 35+/- 1 grado centígrado Pro pipeta
Pipetas bacteriológicas de 1 ml, estériles, con algodón en el extremo superior. (las necesarias de acuerdo con el número de diluciones). Caldo lactosa bilis (2%) verde brillante, volúmenes 10 ml. En tubos de 150 por 15 mm; conteniendo tubos de fermentación de Durham (75 por 10 mm).
Método de número más probables
En el momento que íbamos a revisar los caldos para hacer número más probable nos dimos de cuenta de que nuestras muestras las habían sacado de la nevera y las habían botado por este motivo no obtuvimos ningún tipo de resultado. Agua peptona 8.5 NaCl + 1 g de peptona/ 1 litro de agua deshionizada NaCl 8.5g 1000 ml X 108 ml X = 0.918g NaCl 1g 1000 ml X 108 ml X = 0.10g de peptona Caldo brilla 40g 1000ml X 90ml X= 3.6g de caldo
Tener más organizado el sitio donde se desarrollan las muestras ya que pueden ocasionar problemas en el resultado de los laboratorios. Debemos resaltar las fechas de inicio y terminación para así tener un orden ya que las muestras nuevas se pueden ver afectadas por las que llevan bastante tiempo y no se tiene los cuidados necesario. Organización en el laboratorio para la preparación de muestras. Después de la realización del laboratorio dar argumentos de cuales fueron los resultados de este laboratorio y como se puede utilizar. Información anticipada de todo lo que vamos a ver en el laboratorio para mejor control del grupo..
http://www.uprm.edu/biology/profs/massol/manual/p4-nmpenumeracion.pdf . http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan/013761/013761-03.pdf . http://avdiaz.files.wordpress.com/2010/02/presentacion-clase-4.pdf
Primero debemos tener bien en claro que tanto las levaduras como los mohos son un tipo de hongos de la clase eucariotas, que básicamente son organismos que poseen un núcleo celular y organelos que se encuentran rodeadas por una membrana. En ambos casos se trata de organismos oportunistas, los cuales de alguna manera actúan como parásitos en fuentes de materia orgánica, es decir se pueden reproducir en los alimentos, sin embargo, estas dos formas de vida son distintas en su estructura, así como en su crecimiento y sus modos de reproducción. En el caso de los mohos, estos son filamentosos, lo que significa que poseen un micelio vegetativo aéreo y otro profundo, los cuales suelen aparecer generalmente en los alimentos. Este micelio posee ciertas estructuras denominadas "hifas" las cuales pueden o no ser divididas, dando una apariencia de filamentosos, entre los cuales tenemos la Penicillium sp., Aspergillus flavus, etc. Por otro lado las levaduras son mucho menos complejas y no poseen micelios, por lo que se encuentran en colonias típicas, las cuales son como las de las bacterias, y además se usan mucho en los procesos de fermentación de bebidas alcohólicas, tales como la Saccharomyces Cerevisiae, la cual es empleada en la industria cervecera. Asimismo se puede decir que ambos suelen crecer en ambientes ácidos y además son organismos psicrótrofos, lo que quiere decir que crecen a temperaturas bajas entre -5 ºC a 5 ºC, a pesar que su temperatura de crecimiento óptimo es alrededor de los 18 ºC. Por otro lado existen hongos macroscópicos, los mismos que son heterótrofos, es decir que no son capaces de sintetizar sus propios alimentos, por lo que lo obtienen de otros organismos, y además el principal componente de su pared celular es la quitina, tratándose de organismos que cuentan con célula y núcleos definidos (eucariotas) a diferencia de las levaduras.
También se puede decir que las levaduras son organismos que están formado por una sola célula, que en general es redonda u ovalada, mientras que los mohos tienen una estructura completamente multicelular que, vistos al microscopio, parecen hebras con muchas ramificaciones o hifas. Es aspecto de los mohos vistos a simple vista es completamente diferente al de las levaduras. Los mohos tienden a ser mucho más coloridos y pueden tener una textura lanosa o velluda mientras que una colonia de levaduras es incolora y generalmente lisa, por lo que la diferencia entre estos tipos de hongos es clara a simple vista.
Realizar adecuadamente mediante el método de cuenta en placa, el número de mohos y levaduras viables presentes en productos alimenticios destinados al consumo humano. Evaluar la calidad microbiológica de un alimento, que sea factible de estar contaminado con estos microorganismos. Comprender el fundamento de todas las etapas del método de detección y cuantificación de mohos y levaduras en alimentos. Interpretar los resultados obtenidos, de acuerdo con las normas aplicables.
Pipetas graduadas estériles de 1 ml con tapón de algodón Pipetas graduadas estériles de 10 ml con tapón de algodón Pipetas Pasteur estériles Pro pipeta Cajas de Petri estériles (una se utiliza para pesar la muestra) Utensilios estériles para la manipulación de muestras: cuchillos, cucharas, tenedores etc. Incubadora con termostato que pueda ser mantenido a 25+1 Baño de agua con control de temperatura y circulación mecánica mantenida a45+1
Recuento de placa, técnica profundidad.
Agares 10-1: En Agar: los 2 medios de cultivo 39g encontramos en X cada uno 1 moho X= 4,6g
1-1 colonias 1000ml 120ml
Agua peptonada: 1g X
)
X: 0,324g peptona
-2
Agares 10 : En estos 2 agares en uno encontramos 1 moho y el otro estĂĄ limpio sin ningĂşn microorganismo.
Agares 10-3: En estos 2 medios encontramos 1 moho en cada agar.
1000ml 324ml
8,5g
1-0
Sal NaCl 1000ml X 324ml
X: 2,75g NaCl
1-1
Nuestra muestra fue de una fruta “manzana” que aparentemente se encontraba optimo, pues bien se utilizó un agar de papa dextrosa son medios comunes de cultivo microbiológico que se preparan a partir de infusión de papa y dextrosa. El agar de papa y dextrosa es el medio más utilizado para el crecimiento de hongos y levaduras que atacan a las plantas vivas o materia vegetal muerta en descomposición. El agar de patata y dextrosa puede ser suplementado con antibióticos o ácidos para inhibir el crecimiento bacteriano. Este medio es recomendado para realizar el recuento colonial. Se debe profundizar más en el tema y leer lo materiales que se envían.
Buscar materiales de apoyo que ayuden al entendimiento de lo que vamos a hacer y lo que queremos lograr. Aprender como clasificar e identificar cada uno de los microorganismos que obtenemos y cuáles son sus características. Tener más orden a la hora de empezar a trabajar. Participación constante de todos los que asisten a los laboratorios.
http://es.wikipedia.org/wiki /Agar_papa_dextrosa
: La cuantificación de este grupo microbiano permite estimar de forma general la carga microbiana presente en una muestra, si bien no aporta datos concretos sobre el tipo de especies predominantes. No obstante, su conocimiento siempre es interesante, ya que su valor es reflejo de la calidad sanitaria y, adicionalmente, suele proporcionar información con respecto a la existencia de prácticas incorrectas, tales como vertidos o manipulación inadecuada. Sin embargo, los datos derivados del recuento de la microbiota aerobia mesófila no deben ser considerados como parámetros absolutos en cuanto a su valor indicador, ya que un resultado elevado no ha de ir necesariamente unido a la presencia de microorganismos patógenos o toxinas ni, por el contrario, un bajo recuento en el número de colonias de estas características se relaciona siempre con la ausencia de microbiota patógena. La determinación de los gérmenes aerobios mesófilos viables a través del método del recuento en placa, es utilizada para indicar la carga bacteriana de un producto. Es de utilidad en productos fresco-enfriados, congelados, pre cocidos o alimentos preparados.
Las bacterias, habitan en lugares insospechados como es el caso de las bacterias termófilas, estas bacterias se desarrollan a gusto soportando temperaturas superiores a 45ºC e incluso sobreviven y se multiplican a más de 100ºC. Los termófilos son organismos especializados para sobrevivir a temperaturas tan altas como 140ºC. Teniendo en cuenta que el agua hierve a 100ºC son estos seres verdaderos amantes del calor.
Psicrófilos obligados. Su temperatura óptima está en torno a los 15-18 º C, aunque viven perfectamente a cero grados e incluso a temperaturas más bajas. Un ejemplo es "Flavobacterium". Hay algunos cuya temperatura óptima todavía es más baja, los llamamos Psicrófilos
extremos, un ejemplo es "Polaromonas vacuolata", que vive en las aguas de la Antártida. Su temperatura óptima es de 4ºC y la máxima que resiste es de 14º C. A más temperatura se muere de calor. Psicrófilos facultativos. Como su nombre indica tienen la facultad de resistir el frío, pero su temperatura óptima es más alta, en torno a los 20-30º. Estos organismos son los culpables de que los alimentos se estropeen en los frigoríficos.
Por medio de este método identificar la carga microbiana expuesta en una muestra. Obtener resultados que nos permitan reflejar una calidad sanitaria por medio del método. Aprender a detectar ausencia de microbiota patógena bajo el recuento de colonias.
Tubos de ensayo Pipetas estériles de 1ml. Pro pipeta Utensilios estériles para la manipulación de muestras: cuchillos, cucharas, tenedores etc. Estufa de cultivo. Placas petri.
Método de recuento en placa a profundidad y superficie.
Agares Mesofilos Agar 10-1: Estos 2 agares se 23,5g - 1000ml encuentran con X - 360 diminutas colonias. X=8,4g
Agares Mesofilos 10-2: Estos 2 agares al igual que los de 10-1 tienen peque単as colonias de diferentes colores .
Diminutas colonias
1-20
Agares Mesofilos 10-3: En estos 2 agares se encuentra una pequeĂąa colonia de microorganismos de color rojo.
Agares Termofilos 10-1: Estos 2 agares estĂĄn llenos de colonia de microorganismos de color blanco.
1-0
Varias colonias en juntas colonias.
Agares Termofilos 10-2: Estos 2 agares igual que los agares 10-1 estรก lleno de colonias de microorganismos que se ven de color blanco.
Varias colonias en juntos agares.
Agares Termofilos 10-3: Estos 2 agares ya contienen menos colonias que los agares 10-1 y 10-2 igual son de colo blanco.
Contiene menos colonias que las 10-1 y las 10-2
Agares Psicrofilos 10-1: En estos 2 agares gelificaron pero al sacarlos para ver los resultado, los agares parecía como si no hubieran gelificado.
Agares Psicrofilos 10-2: Estos agares tenía pequeñas colonias de microorganismo sin identificar.
Agares Psicrófilos 10-3: Igual que los agares 10-2 tienen colonias pero microorganismos sin identificar.
En el análisis de mesofilos se usó de muestra una manzana, la cual los agares tuvieron pocos colonias de microorganismos eso quiere decir q la manzana no estaba tan contaminada, en el análisis de termófilos se tuvo una muestra de leche la cual los agares estaban con demasiadas colonias de microorganismos, la leche está muy contaminada y en el análisis de Psicrófilos se usó de muestra para este análisis carne de pollo congelada, agares que no se encontraron tan contaminados de microorganismos, estos tres alimentos que se usaron para el muestreo estuvieron contaminados esto es para darnos cuenta q hay q tener buena manipulación con los alimentos.
Tener una buena manipulación en los alimentos. Mantener una adecuada higiene para evitar contaminar los alimentos de microorganismos.
El género Clostridium está formado por más de cien especies con limitada relación genética y propiedades bioquímicas diversas. Comprende a bacilos gram positivos, anaerobios, esporulados. Son ubicuos pudiendo ser encontrados en el suelo y aguas residuales así como también en la flora intestinal de hombres y animales. En su mayoría son saprofitos, pero los patógenos pueden causar graves enfermedades como gangrena gaseosa, botulismo, tétanos, infecciones de piel y partes blandas, colitis asociada a antibióticos e intoxicaciones alimentarias. La capacidad para provocar enfermedad está vinculada a la posibilidad de sobrevivir en condiciones ambientales adversas mediante la formación de esporas, crecer rápidamente y producir toxinas histolíticas, enterotoxinas y neurotóxicas.
•
Por medio de este método identificar la carga microbiana expuesta en una muestra. • Obtener resultados que nos permitan reflejar una calidad sanitaria por medio del método. • Aprender a detectar ausencia de micro biota patógena bajo el recuento de colonias.
Agua Peptonada 450ml para 5 grupos 45 tubos 16x100 esterilizar 5 morteros Medio SPS 300ml Agua peptonada 10-1, 10-2, 10-3(1 ml 80°c x 10 minutos) 10-12ml agar 45°c esteril 24-48 horas
Despues de pasar las 24 horas aun no se muestra ninguna presencia en la muestra y despues de las 48 horas igual saliero negativo.
Agar sps 22,8gr 500ml X 300ml X= 13,68gr Sal NaCl 8,5gr 1000ml X 450ml X=3,82g Peptona 1gr 1000ml X 450ml X=0,45 pep Suplemento o Perfringens o Opsp o Selectivo suplemento A o Para 500ml de medio 2ml X X= 1,2ml
500ml 300ml
En este tipo de muestra reconocemos el Clostridium es un género de bacterias anaerobias, bacilos grampositivas, parásitas y saprófitas algun as de ellas se representan en este tipo de muestra hasta el momento no se ha desarrollado ningún tipo de micro organismo pero se presentan como puntos negros .
Para este tipo de trabajos hay que tener en cuenta el tiempo ya que por tiempo no alcanzamos a esterilizar el material para todos. El tamaño de las autoclaves no fue el óptimo ya que para cantidad de alumnos en la fiche era imposible la realización individual del laboratorio y se tuvo que trabajar para todos un solo proceso. El tamaño del laboratorio no es el óptimo para la cantidad de personas que hay en la fiche. Detallar cada proceso para que al final del laboratorio todo se informen de el porqué de cada proceso del laboratorio. Tomar el tema a fondo antes de iniciar un laboratorio para la mejor realización de un laboratorio.
. http://www.bvsops.org.uy/pdf/clostridium.pdf . http://es.slideshare.net/ESTEFI1691/diapositivas-clostridium . http://es.slideshare.net/antares2000a/genero-clostridium-micro2012