Tecnicas de Laboratorio nº361 by Publica SL

técnicas de LABORATORIO

ISSN 0371 - 5728 / TOMO XXXIII

Nº 361 / MAYO 2011

ISSN 0371 - 5728 / TOMO XXXIII

Editada desde 1969

www.tecnicasdelaboratorio.com

Nº 361 / MAYO 2011

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SUMARIO

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novedades

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catálogos y documentación

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EAA

Análisis multielemento rápido, simple y económico de metales pesados en muestras de suelo y sedimento con el contrAA® Dr. Katrin Klemm, Dr. Burcu Özmen, Analytik Jena AG.

técnicas de LABORATORIO Revista de información sobre técnicas, métodos y equipos para laboratorios clínicos, industriales, alimentarios, de control de calidad, de investigación y universitarios. www.tecnicasdelaboratorio.com

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método Kjeldahl

Determinación de proteínas mediante el método Kjeldahl

depósito legal B - 18.364-1969

Francisco Santiago. Departamento de Ingeniería. JP Selecta. ISSN (Papel): 0371-5728 ISSN (Internet): 2013-6137 editada por:

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control alimentario

Técnicas aplicadas al control de componentes dirección general JORDI BALAGUÉ · jordi@publica.es JOAN LLUÍS BALAGUÉ · joanlluis@publica.es Ecuador, 75, entlo. - 08029 Barcelona Tel. 933 215 045 / 046 - Fax 933 221 972 E-mail: publica@publica.es www.publica.es director de la publicación JORDI BALAGUÉ · jordi@publica.es

de origen animal en piensos: II. Técnicas genéticas (I) Irene Martín, Teresa García, Isabel González, Rosario Martín. Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid.

redactor jefe MIGUEL ROIG · miguel@publica.es secretaria de redacción CLARA LÓPEZ · claralopez@publica.es

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diseño y maquetación ISABEL FERNÁNDEZ · isabelf@publica.es

Eduardo Urrutia, Director de Exportación de Burdinola

entrevista

publicidad ALEJANDRO VALLEJO · alejandro@publica.es facturación y contabilidad MAR MIGUEL · mar@publica.es

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noticias

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empresas

distribución y suscripciones ISABEL BRILLAS · suscripciones@publica.es suscripción anual (10 números) España: 78 Euros + IVA Europa: 151 Euros Extranjero: 162,20 Euros portal web Registro anual: 36 Euros impresión COMGRAFIC - Barcelona Reservados todos los derechos, se prohíbe la reproducción total o parcial por ningún medio, electrónico o mecánico, de los contenidos de este número sin previa autorización expresa por escrito. técnicas de LABORATORIO no se identifica necesariamente con las opiniones y conceptos expresados por los colaboradores y personas entrevistadas, que son de la exclusiva responsabilidad del autor.

Hazte fan

Genzyme monitoriza 50.000 puntos SCADA con Anybus Communicator

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guía del comprador

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suscripciones

novedades

Novedades

BINDER

Cámaras KBF LQC y KBF P de clima constante con Light Quantum Control e iluminación de conformidad con ICH La ventaja adicional de la serie de cámaras KBF LQC de Binder consiste en que permite la medición de luz patentada para pruebas de estabilidad lumínica. Dos sensores de bola esféricos 3D registran tanto la intensidad lumínica como la intensidad de la luz UV, lo que permite que el equipo se desconecte automáticamente al alcanzar la dosis de luz deseada. Los equipos de la serie Binder KBF P, dotados de iluminación de conformidad con ICH, son los expertos para pruebas de estabilidad lumínica y proporcionan resultados de prueba inequívocos según la directriz ICH Q1B, opción 2. Al mismo tiempo, las bandejas de luz de posicionamiento variable con Binder Q1B Synergy™ Light garantizan unas condiciones de luz homogéneas. Las ventajas que ofrecen los equipos de la Binder KBF P son

unas condiciones de prueba constantes con independencia del suministro de agua. De esta forma, la cámara proporciona la solución completa: simulación de temperatura, humedad y luz en una misma cámara de clima constante. La tecnología APT.line™ de cámara de precalentamiento regulada electrónicamente garantiza una precisión de temperatura elevada con resultados reproducibles. www.binder-world.com

(Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

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novedades

HUBER

Baños termostáticos de bajo coste para control de temperatura en investigación La línea MPC de Huber consta de baños termostáticos fabricados de policarbonato (hasta +100 °C) o baños aislados de acero inoxidable (hasta 200 °C). El volumen de los baños va desde 6 hasta 25 l. Los baños termostáticos MPC alcanzan una estabili-

dad de temperatura de ±0,05 °C y están equipados con una protección contra sobretemperatura y otra contra bajo nivel, cumpliendo con los requerimientos de la clase III/FL (DIN 12876). Una potente bomba de presión y succión permite una

INTEGRA

Pipeta electrónica manual de 96 canales Viaflo 96 de Integra es una nueva pipeta electrónica de 96 canales que permite transferir simultáneamente 96 muestras de forma rápida, precisa y fácil. Por su diseño, puede usarse exactamente igual que una pipeta manual estándar. Por tanto, no se requieren habilidades o formación especiales para utilizarla. Viaflo 96 funciona con la interfaz de usuario de pipeta Touch Wheel™, producto muy popular fabricado por la misma empresa, que permite programar una amplia variedad de modos de pipeteo con sencillez y rapidez. Entre esos modos están la dispensación repetida, la dilución en serie y la dilución de muestras. Los clientes sacarán provecho inmediatamente de la mayor productividad que les brinda Viaflo 96. La replicación o reformateo de 96 y 384 placas de pocillos y la transferencia de reactivos, compuestos y soluciones con alta precisión hacia y desde microplacas puede realizarse ahora con tanta facilidad como el pipeteo con una pipeta electrónica estándar a un tubo individual. Para Viaflo 96 se ofrecen cuatro cabezales de pipeteo con volúmenes de hasta 12,5 µl, 125 µl, 300 µl o 1.250 µl. Estos cabezales de pipeteo pueden intercambiarse en cuestión de se-

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novedades

circulación óptima y una homogeneidad de temperatura dentro del baño. Mediante un adaptador de bomba (disponible como accesorio) también es posible el control de temperatura de aplicaciones externas. La línea MPC se ha optimizado técnicamente. La monitorización de temperatura es visualizada en 4 dígitos con una resolución de temperatura de 0,1 °C, mientras que un indicador LED adicional permite el ajuste digital del valor de sobretemperatura. También es nuevo el indicador del estado que indica el modo de termorregulación puesto (interno o de proceso). Estos modelos también están disponibles en la versión “Advanced” con la interfaz serial RS 232 y conexión para sensor externo Pt100. Como accesorios están disponibles gradillas para tubos de ensayo, tapas de baño, soportes de rodillos y serpentines de refrigeración. Peter Huber Kältemaschinenbau fue fundada en 1968 por Peter Huber como una de las primeras compañías especializadas en la instalación de equipos de refrigeración. Es una sociedad de responsabilidad limitada (GmbH) desde 1984, cuando se hizo completamente propiedad de la familia

gundos, lo que permite utilizar de forma óptima el cabezal disponible que tenga el volumen adecuado para cada aplicación. Viaflo 96 utiliza los acopladores de puntas Viaflo GripTips que proporcionan un sello hermético perfecto en cada ocasión y no se desprenden durante el uso. Estas puntas también pueden usarse para otras pipetas electrónicas Viaflo. La extraordinaria combinación de características que ofrece la Viaflo 96 no solo aumentará su productividad, sino también facilitará la transferencia precisa de líquidos a los recipientes deseados, reducirá la contaminación cruzada, disminuirá la fatiga de uso y permitirá obtener resultados homogéneos.

www.integra-biosciences.com www.viaflo.com

Huber. Huber emplea a 220 personas, 8 de las cuales son especialistas en la instalación de equipos de refrigeración. Más de 120.000 termóstatos de termorregulación Huber se utilizan hoy en día en todo el mundo, en áreas de ingeniería, laboratorio y tecnología. Desde la fundación de la compañía, Huber ha desarrollado su marca en el mercado de control de temperatura para la innovación. La introducción de la tecnología Unistat® en 1989 ha revolucionado el mundo de control de temperatura. En todo este tiempo los Unistat® han marcado un hito en los procesos de termorregulación de gran dinamismo. Esto fue reconocido cuando en 2010 Huber fue galardonada por segunda vez consecutiva con el certificado TOP100 por ser una de las 100 empresas medianas más innovadoras de Alemania.

www.huber-online.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

novedades novedades

NEURTEK

Instrumentación para el registro de datos A medida que la ciencia y la tecnología han avanzado, así ha avanzado la necesidad de registrar datos y su posterior análisis. Esta necesidad se cubre, en parte, por medio de los registradores controlados por microprocesador. Un registrador moderno es habitualmente un equipo portátil, alimentado por batería, con una gran capacidad de memoria y gobernado por un microprocesador de la más avanzada tecnología. Es capaz de adquirir, procesar, almacenar y analizar señales eléctricas a alta velocidad y de una gran variedad de sensores, a intervalos regulares o en respuesta a un evento como el franqueo de un límite fijado previamente o la activación de un interruptor. Los senso-

res pueden comunicarse con el registrador a través de cable o por un enlace inalámbrico. Estos sensores pueden medir temperatura, humedad, presión, caudal, velocidad del aire, intensidad, voltaje, resistencia u otros parámetros físicos que son de vital importancia para el control de procesos o la investigación. Los datos almacenados en el registrador son habitualmente descargados en un ordenador para su tratamiento y análisis detallado. Algunos registradores tienen capacidad de proceso propia y pueden realizar algunas funciones como la activación o desactivación de alarmas o interruptores. La ventaja de utilizar registradores portátiles en contraste con los que están controlados directamente por un ordenador es que han sido diseñados específicamente para ello. Esto quiere decir que están pensados para ser fáciles de utilizar, conectar los sensores y configurarlos; son más resistentes, consumen menos energía (por lo que pueden registrar datos durante largos periodos de tiempo alimentados únicamente por baterías) y habitualmente en ambientes hostiles. Los nuevos registradores que hay en mercado permiten la conexión remota (GSM,

FST - FINE SCIENTIFIC TOOLS

Tijeras Iris - CeramaCut Straight 11,5 cm Estas tijeras con recubrimiento de cerámica son las tijeras de más limpio corte y de mayor duración fabricadas hasta la fecha. Gracias a las propiedades únicas del recubrimiento de cerámica sobre las cuchillas ToughCut y de carburo de wolframio, estas tijeras durarán mucho más que los instrumentos de carburo de wolframio y cortarán mejor incluso que las tijeras ToughCut.

El citado recubrimiento es negro, resistente a la corrosión y dotado de un acabado antideslumbrante. • Tipo: Estándar • Aleación: Cerámica • Característica: CeramaCut • Forma de la punta: aguda/aguda • Diámetro de punta: no declarado. www.finescience.de

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WiFi…) para la descarga de los datos almacenados, lo que los hace adecuados para su utilización desatendida en lugares remotos. Neurtek cuenta con una amplia gama data-loggers para dar una respuesta a las distintas aplicaciones de los usuarios. Neurtek, proveedor de instrumentos para el control de calidad e I+D+i, además es Laboratorio de Calibración ENAC, UNE EN ISO 17025 en Óptica, Temperatura y Humedad. Colabora con centros de investigación y laboratorios y en los proyectos de desarrollo de las principales empresas del país. La amplia gama de su catálogo le permite proporcionar soluciones a cada necesidad planteada por los diversos clientes de sectores que van desde la automoción y la aeronáutica hasta la farmaceútica. www.neurtek.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

novedades

AVERY DENNISON

Solución de impresión y aplicación Avery Dennison Retail Branding and Information Solutions, proveedor global de soluciones de información y marca para el sector del retail y la industria, dio a conocer las ventajas de la innovadora serie ALX 73x, su nueva generación de sistemas de impresión y aplicación, en Interpack, que tuvo lugar en Düsseldorf del 12 al 18 de mayo. Esta flexible y rápida solución modular se integra fácilmente en la cadena de producción existente para mejorar la eficiencia operativa en las líneas de producción de gran volumen. De acuerdo con Avery Dennison, la aceleración del rendimiento proporciona un retorno de la inversión más rápido y una reducción del coste de propiedad (TCO), convirtiendo a la ALX 73x en la solución del mercado con menor coste total aplicado (TAC) (resultados basados en un estudio interno de Avery Dennison destacan el coste por etiqueta de algunas soluciones disponibles actualmente en el mercado). Asimismo, la serie ALX 73x ofrece una amplia variedad de beneficios para numerosos sectores de la industria como el alimentario, el farmacéutico o el químico. Gracias a la tecnología de cabezal de impresión ‘near edge’, la ALX 73x puede alcanzar una velocidad aproximada de 400 mm por segundo, siguiendo el ritmo de las líneas de producción más rápidas y exigentes. El sistema emplea rollos de etiquetas y cinta (ribbon) de transferencia térmica de gran tamaño, lo que reduce el tiempo de inactividad y los costes totales de producción, ya que permite cambiar los rollos con menor frecuencia e invertir, por tanto, menos tiempo. La función de ahorro de papel, además, ayuda a reducir el impacto ambiental, utilizando solo la cantidad de tinta necesaria. Geert Jan Kolkhuis Tanke, Product Manager de soluciones de etiquetado e impresión y aplicación de Avery Dennison Retail Branding and Information Solutions, dice: “Hemos creado esta nueva serie de impresión y aplicación como parte de nuestro

compromiso por acelerar el rendimiento de nuestros clientes y contribuir a reducir los costes globales”. Les Grands Chais-Loire es uno de los mayoristas de vino francés y bebidas alcohólicas líderes a escala mundial y unos de los pioneros en utilizar la ALX 73x. Antes de implementar este nuevo sistema, la compañía utilizaba otras soluciones de Avery Dennison para la producción de vino y de packaging. Olivier Truchot, director Técnico de Les Grands Chais-Loire, señala: “Avery Dennison ha trabajado estrechamente con nosotros para detectar nuestras necesidades y poder proporcionarnos una solución capaz de mejorar nuestras operaciones de etiquetado. La ALX 73x nos ha permitido optimizar nuestra productividad, además de reducir la puesta en marcha y el tiempo de inoperatividad.” La nueva serie ALX 73x presenta tres anchos de impresión (4, 5 y 6 pulgadas). Ha sido fabricada con las más altas especificaciones de Avery Dennison, proporcionando a los clientes un producto fiable y sólido con el firmware probado. Las interfaces estándar y la opción de montaje ofrecen a los usuarios una mayor flexibilidad de integración ya que el sistema se comunica con todos los entornos de red.

novedades

FRITSCH

Molinos de corte invictos en limpieza Mientras el usuario sigue manipulando los tornillos en otros molinos, el molino de corte Fritsch ya está limpio. Esto solo es posible con los molinos de corte de Fritsch la firma alemana: todas las piezas son desmontables en segundos, sin herramientas, para su limpieza: algo increíblemente rápido, simple y eficiente. El expulsor de muestras patentado por Fritsch con un separador “Cyclone”, con su función basada en una presión negativa potente, asegura una alimentación de la muestra simple y de alto caudal, una refrigeración buena e impide efectivamente que el material de la muestra escape durante la alimentación, abriendo nuevas posibilidades en el procesamiento de mezclas heterogéneas de materiales. Esto permite que los molinos de corte Fritsch sean ideales y ahorren tiempo para pulverizar materiales blandos y semi-

duros, así como fibras y materiales duros. Son indispensables en las áreas de plásticos, textiles, agricultura y forestales, ambiente, materiales de construcción, química, alimentos y para preparar muestras analíticas para el ensayo según RoHS. Las principales ventajas de los molinos de corte Fritsch son: • Operación muy simple para un trabajo rápido • Incomparable facilidad de limpieza gracias a la facilidad de apertura rápida patentada • Flujo de aire óptimo para la trituración particularmente rápida y una protección segura contra atascos • Operación más estable y menos desgaste con el rotor sujeto por dos cojinetes cónicos patentados • Excepcional larga vida útil con las cuchillas fijas y reemplazables

• Geometría de la cámara de trituración única con un espacio muerto mínimo y geometría de corte progresiva entre el rotor y las cuchillas fijas – para una operación más rápida y simple. • Piezas de trituración con geometrías de corte diferentes y de materiales diferentes perfectamente ajustables a su aplicación.

INTEGRA

Solución lista para usar para la eliminación de residuos líquidos El nuevo VacuSip de Integra es una solución de aspiración al vacío de sobremesa y lista para su uso en una amplia variedad de tareas de eliminación de residuos líquidos que se realizan en los laboratorios. VacuSip ocupa muy poco espacio en el banco de trabajo, lo que permite eliminar los residuos líquidos de forma cómoda y segura. VacuSip ofrece una solución optimizada para diferentes aplicaciones, entre las que destaca la aspiración de líquidos en pequeños volúmenes como, por ejemplo, los sobrenadantes que son el resultado de la centrifugación, la extracción de soluciones de lavado y la extracción multicanal de muestras tomadas de microplacas multipocillo. VacuSip incluye una fiable bomba de bajo nivel acústico y una batería recargable que le permiten funcionar por completo independientemente de fuentes externas de vacío y alimentación eléctrica. Gracias a esta flexibilidad portátil es posible simplemente trasladar en cualquier momento la unidad VacuSip al lugar donde sea necesario su uso. Para optimizar la autonomía de la batería, la bomba se apaga y se enciende automáticamente según el vacío necesario para la aspiración. El extraordinario dispositivo de control manual de VacuSip per-

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mite regular con precisión el flujo de aspiración de líquidos. Integra ofrece una amplia variedad de adaptadores para el dispositivo de control manual, de este modo VacuSip puede utilizarse en casi cualquier tarea de eliminación de residuos líquidos.

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novedades

Instrumentos granulométricos Los instrumentos granulométricos Fritsch están dotados de la tecnología láser más avanzada, ofreciendo una buena relación de precio/rendimiento en cualquier área de aplicación. Una valiosa prestación adicional de estos instrumentos, ya patentada por Fritsch, es el método de medición especial por difracción láser dentro del haz convergente del láser. Entre las ventajas que aporta al usuario cabe ci-

tar: ajuste simple y continuo del área de medición, así como un número de canales de medición que hasta ahora no estaban disponibles. Analysette 22 MicroTec plus es una nueva generación de instrumentos láser para la medición de partículas. Medidor láser súper compacto que ofrece posibilidades ilimitadas y prestaciones extraordinarias: • Tamaño compacto, precio competitivo • Rango de medición extra-amplio: de 0,08 a 2.000 µm • Tecnología revolucionaria de láser doble • Volumen de suspensión variable • Práctico sistema modular

• Sistema de cambio rápido de la celda de medición • Rango de medición variable con hasta 1.078 canales de medición. Otras ventajas adicionales son los tiempos de análisis cortos, buena reproducibilidad, operación y calibración fáciles, amplios rangos de medición de partículas en una sola medición y alta flexibilidad hablan por ellas mismas. El Analysette 22 MicroTec plus hace de la medición de partículas una tarea de niños, no solo para profesionales, sino también para el personal con poca experiencia y en cualquier campo de aplicación. (http://www.fritsch.de/en/samplepreparation/products/milling/cutting -mills/) www.fritsch-laser.com

Un filtro hidrofóbico protege la unidad de la contaminación y la entrada de líquidos. Todos los componentes que entran en contacto con los líquidos pueden esterilizarse en autoclave. Una vez llena, la botella colectora puede cambiarse de manera fácil y segura, por lo que VacuSip es el sistema preferido para extraer y eliminar residuos líquidos sin problemas. Integra es uno de los más importantes proveedores de instrumentos de laboratorio de alta calidad para el manejo de líquidos, preparación de medios, esterilización y cultivos celulares. Como compañía crea soluciones innovadoras que satisfacen las necesidades de los clientes en los campos de investigación, diagnóstico y control de calidad dentro de los mercados de ciencias de la vida y la industria médica. El grupo Integra, constituido por Integra Biosciences AG e Integra Biosciences US, mantiene una red mundial de más de 90 socios distribuidores independientes que han recibido una exhaustiva formación.

www.integra-biosciences.com

novedades

JULABO

Control dinámico de la temperatura Julabo presenta el Presto®, una nueva generación de sistemas dinámicos de control de temperatura. Estos equipos se utilizan para controlar la temperatura en reactores encamisados, ensayos de materiales o simulaciones de temperaturas. Los Presto® están diseñados para controlar de forma precisa la temperatura y sus cambios rápidos. Con esta serie, Julabo ofrece la última tecnología para el laboratorio moderno. Los primeros modelos, que han sido totalmente rediseñados, cubren un intervalo de temperatura desde –40 °C hasta +250 °C, y ofrecen una potencia refrigeradora de 1,2 kW y una potencia calefactora de 2,8 kW. El uso de componentes muy eficaces, permite la ultra-rápida compensación de temperaturas en reacciones exotérmicas y endotérmicas. Los Presto® son muy robustos y trabajan eficazmente a temperatura ambiente hasta +40 °C. Los acoplamientos magnéticos de las potentes bombas permiten que no se desgasten y garantizan que los Presto® tengan un alto caudal a presiones constantes. Los cambios en la viscosidad del fluido que circula se compensan dinámicamente. La bomba del A30 genera una presión de 0,5 bar y un caudal máximo de 20 l/minuto. Los modelos A40 y W40 trabajan con presiones hasta 1,7 bar, y un caudal máximo de 40 l/minuto. Las bombas están dotadas de cuatro niveles de potencia para poder

seleccionar la necesaria en cada aplicación o se podrá seleccionar mediante un valor de presión. Debido al circuito cerrado de los Presto®, el líquido que circula no entra en contacto con la atmósfera del ambiente, lo cual impide la humectación y además no se liberan vapores del aceite. Una característica especial de los nuevos Presto® es su pantalla táctil industrial, de 5,7” y en color, que ofrece una presentación clara y sinóptica de todas las informaciones importantes y aumenta considerablemente el confort en la operación. Los Presto® se operan simplemente mediante toques de dedo en la pantalla. Para la presentación de todas las informaciones importantes se han preparado tres modos alternativos, que el usuario puede adaptar de acuerdo a sus necesidades y preferencias. El administrador gestiona las claves y hasta dos niveles de usuarios adicionales, lo cual facilita el ciclo de trabajo en el laboratorio. Además puede parametrizar de antemano las tareas diarias más frecuentes para que posteriormente los operadores con derecho de acceso seleccionen la tarea apropiada. Las tareas diarias en el laboratorio serán más fáciles debido a otras ventajas adicionales. Los Presto® trabajan en el rango completo de temperatura con un solo fluido.

TESTO

Analizador para cualquier medición en sistemas de refrigeración y bombas de calor Se acabaron los inconvenientes debido a la necesidad de trabajar con muchos instrumentos y accesorios. No solo la instalación de un sistema de refrigeración representa una tarea laboriosa; también su mantenimiento o la reparación pueden suponer un trabajo largo y complejo. A partir de ahora, el nuevo analizador de refrigeración testo 570 que presenta Instrumentos Testo, S.A., permitirá a los operarios, técnicos y mantenedores de refrigeración unas mediciones mucho más sencillas y rápidas para facilitar dichas tareas. El testo 570 mide y analiza a través de tres conexiones: la presión, la temperatura, el vacío o el consumo de intensidad de forma muy fácil. Para ello, se ha dotado con múltiples ventajas como disponer de 40 refrigerantes en memoria (actualizables por el usuario); poder conectar dos sondas de temperatura para calcular el recalentamiento y el subenfriamiento simultáneamente; aprovechar la memoria interna para almacenar los datos de las mediciones y poderlos imprimir con posterioridad, sin necesidad de transcribirlos manualmente; o el registro de valores en continuo hasta un máximo de 72 horas, en diferentes sistemas, para identificar errores rápidamente.

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novedades

El diseño elegante también incluye aspectos ergonómicos: con un asa extraíble y ruedas integradas, estos equipos pueden ser transportados por una sola persona como un trolley. Gracias a su amplia variedad de interfaces, los Presto® se pueden controlar de manera remota e integrarse en sistemas de mando central de una red. Mediante la interfaz Ethernet es posible controlar plenamente todas las funciones individuales de los Presto®. Mediante la interfaz USB, también novedad en sistemas dinámicos de control de temperatura, los aparatos pueden ser operados y controlados íntegramente de forma inalámbrica, mediante los productos Julabo WirelessTEMP y desde cualquier puesto de trabajo. La obertura para llenar el equipo está situada en la parte superior del equipo y es de fácil acceso. Gracias a su operación muy silenciosa, los Presto® apenas contribuyen a la contaminación acústica en el laboratorio. Como todos los equipos de Julabo, también los nuevos Presto® disponen de paredes laterales sin ranuras de ventilación. Con esto se reduce al mínimo el espacio necesario para su instalación en el laboratorio o incluso junto a otro equipo.

• Seguridad absoluta en cualquier tarea de medición. La posibilidad de conectar varias sondas al mismo tiempo, así como botellas de refrigerantes o bombas de vacío, suponen el fin del inconveniente de tener que manejar un instrumento para cada tarea. El testo 570 dispone también de la posibilidad de efectuar un test de estanquidad con compensación de temperatura. • Para facilitar las mediciones exigidas en el RITE, con el analizador de refrigeración (gracias a la nueva función de “Valor Caract. Eficiencia”), introduciendo las variables necesarias, será posible calcular e imprimir el COP/EER de las enfriadoras de agua (según RITE). Con el nuevo analizador de refrigeración testo 570 las mediciones son más precisas, se evitan posibles errores y se ahorra tiempo y dinero.

www.testo.es (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

www.julabo.de (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

novedades

SOCOREX

Micropipeta Acura® manual XS 826 de alto rendimiento Ya está disponible un nuevo instrumento de Socorex ideal para laboratorios de investigación. La micropipeta Acura® manual XS 826 arroja óptimos rendimientos metrológicos que cumplen los más exigentes requisitos de pipeteado. La relación tamaño/forma optimizada permite una manejabilidad superior, constituyendo una gran ayuda en aplicaciones finas tales como el pipeteado en microtubos. La exclusiva junta de reborde de hermeticidad permite un pipeteado ultrasuave, reduciendo así el cansancio de la mano durante el trabajo. Las fuerzas que necesita suponen un esfuerzo bien limitado en los dedos. No obstante, el tope de rebasamiento ofrece un claro indicador táctil. Situado en la parte frontal, sus dígitos de volumen contrastados permanecen visibles en todo momento durante el pipeteado.

El botón grande y suavemente acolchado de expulsión de punta permite una posición cómoda del pulgar. El sistema de ajuste de altura patentado Justip™ permite la colocación y expulsión de una amplia gama de puntas. La limpieza y esterilización minuciosas del equipo se pueden obtener esterilizando en autoclave el instrumento totalmente montado. El instrumento está dotado de un fácil sistema de calibración por el usuario con tecla integrada. El mecanismo de bloqueo está protegido por un sello de calibración adhesivo. Cada instrumento lleva su propio número de serie y pasa por un estricto control de rendimiento, avalado por un certificado de control de calidad individual. Los equipos son conformes a las normas ISO 8655 y la reglamentación IVD 98/79

EEC, y a las normas nacionales e internacionales como GMP/GLP. Garantía: tres años. En la web se Socorex puede descargarse un folleto explicativo en formato PDF. www.socorex.com

FILTER-LAB

Compleción de la gama de papeles de alta calidad para cromatografía y blotting Características muy importantes de los papeles de blotting Filter-Lab utilizados en diferentes técnicas de transferencia de ADN y ARN son:

Estos papeles están fabricados con celulosa de la más elevada pureza. Sus funciones son:

• Superficie muy lisa: Esta característica es imprescindible para garantizar al contacto homogéneo en toda la superficie del sandwich capilar. • Excelente regularidad en la formación de la hoja: Asegura una absorción similar en todos los puntos de contacto. • Elevada absorción: Garantiza una rápida succión del tampón gracias a su elevada absorción capilar.

• Empapar, transportar y mejorar el transporte del tampón de transferencia según el método de transferencia capilar y de semisecado (semi-dry). • Cubrir el gel y la membrana de transferencia por ambos lados en el depósito de transferencia según el método convencional de electrotransferencia. • Evitar el contacto directo de la membrana de transferencia con la placa de cubierta porosa de la cámara de vacío, según los métodos de vacío y de transferencia (blotting) dot/slot de ADN-ARN. La gama está formada por cinco calidades de papel de cromatografía y tres para técnicas de blotting, de entre 90 y 650 g/m2, las cuales pueden ser suministradas en multitud de formatos y en diferentes medidas. www.fanoia.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

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novedades

COBOS

Serie Amiga TXB de balanzas Balanzas Cobos presenta la serie Amiga TXB, una nueva generación de balanzas con selección de estabilidad mientras se va pesando. Sus principales características son: • pantalla claramente visible incluso en lugares oscuros • comunicación directa con WindowsDirect de serie; solo necesita un cable para enviar datos de pesaje al ordenador • RS 323 de serie • alimentación a red o pilas (no incluidas), modelo TXB • Diferentes funciones y unidades de peso con solo pulsar una tecla • función límites, comparador y cuentapiezas • apagado automático con pilas. • garantía: tres años

• accesorios: impresoras EP-80 y EP-90; cable RS232C; blísters para proteger la balanza y la pantalla. www.balanzascobos.com La serie consta de ocho modelos, con capacidades máximas de 220 a 6.200 g (precisiones de 0,01 g a 1 g, respectivamente).

(Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

novedades

LAUDA

Termorregulación económica, excelente balance energético y tecnología superior Lauda presenta novedades en termostatos de calefacción y de refrigeración, que aportan termorregulación económica en el laboratorio desde –50 hasta 200 °C Con el nuevo ECO, Lauda continúa la historia de éxito de la actual línea de equipos Lauda Ecoline. Hay novedades y perfeccionamientos, sobre todo en relación con la gama de servicios y la facilidad de uso. Los dos cabezales de control con los nombres ECO Silver y ECO Gold disponen de una potente bomba de circulación con una capacidad de bombeo aproximadamente un 30% superior en comparación a los modelos anteriores. La guía por menú en un lenguaje claro facilita un manejo muy fácil de los equipos. Una interfaz mini-USB está incluida de serie en los dos cabezales de control, interfaces adicionales se pueden obtener como módulos. Otra novedad es la práctica distribución del caudal delante en el cabezal de control, con lo cual también es posible una distribución individual del caudal entre la circulación interna y externa incluso durante el funcionamiento. La parte frontal angular es única y reduce al mínimo la superficie de apoyo. Los potentes equipos están equipados con el sistema Lauda SmartCool. Todos los termostatos de refrigeración están disponibles como modelos refrigerados por aire y por agua • ECO Cabezal de control Silver. Los cabezales de control Silver

con 1,3 kW de potencia de calefacción (a 230 V) son ideales para las tareas de termorregulación hasta 150 °C y disponen de una pantalla LCD monocroma. • ECO Cabezal de control Gold. Los cabezales de control Gold alcanzan con 2,6 kW de potencia de calefacción (a 230 V) un rango de temperatura de trabajo de hasta 200 °C. Disponen de una mayor pantalla TFT en color, en la que se puede mostrar gráficamente la variación de la temperatura. El amplio programador con 150 segmentos de temperatura/tiempo, dividido en cinco programas, una función de rampa integrada y un reloj programador son otras características que le diferencian del Silver.

VACUUBRAND

Líquidos con alto punto de ebullición: evaporación con vacío controlado Vacuubrand ha desarrollado una nueva regulación de vacío en procesos de aplicación del vacío medio. Al utilizar solventes con elevado punto de ebullición en la destilación a vacío medio, el vacío es a menudo determinado y se trabaja solo con la temperatura como variable. Al variar estos parámetros puede ser extremadamente difícil mantener esos valores constantes y de obtener resultados reproducibles. El nuevo set de regulación para bombas rotativas permite ahora una evaporación mucho más precisa de las sustancias deseables aumentando al mismo tiempo la automatización y el grado o eficiencia de evaporación. De acuerdo a los parámetros y la histéresis automática, el vacío es mantenido de forma casi constante por medio de la regulación cíclica de apertura/cierre de una válvula. Incluso mezclas complejas de solventes pueden separarse sin problemas. El usuario obtiene muestras de mejor calidad y ahorra tiempo. Vacuubrand ofrece dos nuevos sets de regulación con controlador de vacío para las conexiones con bridas KF DN 16 o DN 25. Bombas rotativas ya sean de una o dos etapas con diferentes capacidades de aspiración en función a las necesidades del usuario, pueden ser usadas de igual manera con estos nue-

técnicas de LABORATORIO

vos controladores. Los paquetes están conformados con todos los componentes necesarios para su instalación. El controlador de vacío CVC 3000 con el sensor de vacío VSP 3000 con resistencia química, válvula electromagnética y accesorios de conexión puede combinarse con una bomba rotativa ya existente o una

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Juego para para la regulación del vacío medio (no incluye la bomba).

novedades

• Entre sus características destacan: - Manejo con teclas de cursor e individuales - Indicación simultánea del valor real y del requerido, guía de menú en lenguaje claro - Exceso de temperatura ajustable por pantalla - Clase de seguridad III, FL para la operación con líquidos inflamables - Calibración de un punto por el usuario - Bomba Vario con seis niveles de capacidad ajustables, distribución de caudal para el ajuste entre la circulación interna/externa - Interfaz mini-USB de serie. • Ejemplos de aplicación: - Termorregulación precisa en garantía de calidad y analítica - Preparación de la muestra en química y farmacia - Control de temperatura en electrónica y ciencias biológicas - Refrigeración en pruebas de material. www.lauda.es (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

nueva. El controlador regula de acuerdo a los parámetros elegidos de vacío desde la presión atmosférica hasta 10–3 mbar. El elemento de medición (principio Pirani) se encuentra protegido por una fina capa cerámica que le confiere una excelente resistencia a muchos compuestos químicos y robustez mecánica, por ejemplo ante entradas o golpes bruscos de aire, que en un sensor Pirani convencional podrían significar el deterioro del alambre metálico. Aquí no hay riesgo alguno. En la entrega del set se incluye el controlador CVC 3000 con soporte o pie para la mesa o su montaje en un trípode, sensor de vacío VSP 3000, también una válvula solenoide VV-B 15C con resistencia química, una unión T conforme a KF de las bridas, anillos tensores, juntas tóricas y una oliva de conexión. www.vacuubrand.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

catálogos

Catálogos y documentación

SERVIQUIMIA

Catálogo 2011 de J. T. Baker - Avantor Serviquimia, que distribuye en exclusiva en España los productos de J.T.Baker - Avantor, ofrece a sus clientes su completo catálogo 2011. La realización de esta edición es una consecuencia de la buena respuesta comercial que los productos de J.T.Baker – Avantor están teniendo en el mercado español. La gestión comercial de Serviquimia y sus distribuidores, unida a la relación calidad/precio de estos productos, están permitiendo consolidar la excelente posición de la marca en el mercado español. Este catálogo incorpora una indexación orientada a facilitar al máximo la localización de cualquier producto. Su amplia gama de productos le convierte en uno de los catálogos más consultados en los laboratorios de nuestro entorno. Algunas características destacables:

Coherentemente con la política ambiental que caracteriza a J.T. Baker - Avantor, el catálogo se ha editado en papel reciclado. El documento también está disponible para su descarga en formato PDF en www.serviquimia.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

• Explicación de las nuevas regulaciones respecto del catálogo anterior, como son el ‘Sistema Globalmente Armonizado’ (de etiquetado) y el REACH (de registro de sustancias químicas). • Nueva estructuración de capítulos según: - Métodos analíticos: para hacer las búsquedas más precisas y rápidas. - Campos de aplicación, para ir directo al campo de interés: Ciencias de la vida, Asistencia sanitaria, Pruebas ambientales, Instituciones académicas, Calibración de instrumento y patrones y Sistemas de dispensación de disolventes y reactivos. • Nuevos formatos detalladamente descritos y adaptados a las exigencias actuales.

técnicas de LABORATORIO

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Nº 361 MAYO 2011

catálogos

SERVIQUIMIA

Nuevo portal, nuevos servicios Serviquimia lanza al mercado su nuevo portal con nuevos servicios y funcionalidades para sus clientes: • Nueva interfaz: navegación más rápida e intuitiva • Tienda on line: un catálogo donde poder consultar y realizar sus pedidos. • Ofertas: un apartado exclusivo con las mejores ofertas para el laboratorio • Artículos: los artículos más relevantes del sector en materia de tecnologías, procedimientos, etc. • Novedades: lo último para estar al día en nuevos productos, lanzamientos, etc. www.serviquimia.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

ACV

Información al día sobre la gama de productos La gama de productos ACV proporciona al instalador diferentes soluciones de instalación para la generación, almacenamiento y distribución de agua caliente y calefacción en el mínimo espacio con equipos con la máxima clasificación energética que aportan al usuario un confort superior que en equipos alternativos. Por este motivo, las nuevas tarifas de ACV constituyen una interesante información para el mercado. Sus más de 600 referencias superan las exigencias más estrictas y ofrecen soluciones para todo tipo de instalaciones; con reducciones de espacio y mano de obra, las nuevas tarifas ha sido editadas una vez más en tres volúmenes.

El primero, dedicado a los equipos de agua caliente y calefacción, incluye los acumuladores de la marca. Todos ellos están dotados de la tecnología "tank in tank" que proporciona una gran cantidad de agua caliente sanitaria, con muy bajo consumo energético, en un espacio mínimo, evitando el diseño de grandes volúmenes en las instalaciones. Otras ventajas son sus propiedades anti-incrustantes y anti-legionela que, además, reducen drásticamente las necesidades de mantenimiento. El segundo volumen se centra en la gama de generadores y calderas de condensación a gas, que engloba la serie Prestige, capaz de suministrar grandes cantidades de agua caliente de la manera más eficiente y ecológica. Su intercambiador de acero inoxidable asegura un rendimiento muy elevado ya que se aprovechan incluso los humos producidos por la combustión. Destaca la nueva caldera bitérmica a condensación Prestige Kombi Kompact y la nueva caldera de gran potencia también a condensación a gas High Power. Por último, en el tercero el profesional encontrará cualquier equipo que necesite para la realización de cualquier tipo de instalación de energía solar térmica: captadores, acumuladores, calderas, equipos de bombeo, accesorios, conjuntos completos de todo tipo, disipadores, soportes, etc. Sus páginas incluyen también las indicaciones para la realización de proyectos conjuntamente entre el instalador y el equipo técnico de ACV. www.acv.com

técnicas de LABORATORIO

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Nº 361 MAYO 2011

catálogos

PANREAC

Reactivos para análisis y productos para química fina Panreac ha publicado recientemente su nuevo Catálogo 2011/2013 con más de 9.000 productos y 80 nuevas referencias. Ha sido actualizado íntegramente para incluir especificaciones que incorporan los pictogramas según la norma GHS (Globally Harmonized System). Esta norma armoniza los numerosos sistemas existentes a escala mundial de clasificación y etiquetado de sustancias químicas según el peligro que entrañan. Este catálogo es una herramienta imprescindible en todos los laboratorios ya que contiene una de las gamas más completas del mercado de reactivos de laboratorio y productos químicos de aplicación industrial, con la garantía de un líder con más de 70 años de experiencia en el sector. Consta de un apartado inicial con completa información sobre la empresa, los productos y todas las gamas disponibles, y el listado de las nuevas referencias incorporadas. Los productos van ordenados alfabéticamente para su fácil localización y además se incluyen al final del catálogo tres índices donde los productos de encuentran ordenados según el nº CAS, el campo de aplicación o el código del producto según la calidad.

Puede descargarse el catálogo en la web www.panreac.com o bien, solicitarlo a Panreac o al distribuidor habitual de productos Panreac. www.panreac.com

EAA

Análisis multielemento rápido, simple y económico de metales pesados en muestras de suelo y sedimento con el contrAA® Dr. Katrin Klemm, Dr. Burcu Özmen, Analytik Jena AG, Jena

Katrin Klemm.

Burcu Özmen

a espectrometría de absorción atómica (EAA) de llama multielemento, secuencial y rápida, no es algo nuevo, pero la introducción de la EAA con fuente continua de alta resolución (HR-CS AAS, por las siglas en inglés) ha entrañado una nueva dimensión para esta técnica. Por primera vez, la EAA se puede utilizar para la realización de verdaderos análisis multielemento secuenciales. La típica determinación rutinaria de unos cuantos elementos en un conjunto de soluciones de muestra similares ya no comprende la determinación del elemento A en todas las muestras, seguida de un cambio de la fuente de radiación, longitud de onda, condiciones de la llama, altura del quemador, etc., y la determinación del elemento B en las mismas muestras, y así sucesivamente, como es práctica común en la EAA clásica de llama con fuente lineal. En la HR-CS AAS de llama, el procedimiento consiste en la calibración del instrumento para todos los elementos de interés, seguido por la determinación de todos los elementos en la muestra 1, todos los elementos en la muestra 2, todos los elementos en la muestra 3, etc. Vale la pena mencionar que por lo menos para un número limitado de 10 elementos, el tiempo de análisis total requerido por la HR-CS AAS de llama es mucho más corto que incluso aquel de la medición de ICP-OES, debido al tiempo de equilibrado mucho más corto requerido para un típico quemador de EAA después del cambio de la solución de muestra si se compara con el requerido para cámaras de pulverización utilizadas en la ICP-OES. Otra desventaja de la técnica de ICP-OES es el espectro lleno de líneas, lo cual da lugar a una mayor posibilidad de interferencias espectrales. Por último, pero no por eso menos decisivo, son los costes de funcionamiento de la HR-CS AAS de llama. Como sigue siendo una técnica de EAA, solo requiere gases de llama que permiten realizar un análisis eficiente en costes. La HR-CS AAS de llama es la mejor solución para todos los laboratorios que no disponen de un presupuesto para cubrir los altos costes de funcionamiento de la ICP-OES, pero que sí tienen gran demanda para análisis rápidos y libres de interferencias.

técnicas de LABORATORIO

Introducción Muchos metales pesados peligrosos se acumulan en el suelo y en sedimentos de ríos, lagos y océanos si son emitidos al ambiente mediante descarga directa por plantas industriales y plantas depuradoras de aguas residuales o si provienen de áreas agrícolas contaminadas o como resultado de una contaminación histórica. Como todos estos metales pesados pueden encontrarse en el agua, en la tierra y en el aire y, por consiguiente, infiltrarse en la cadena alimentaria, la eliminación de desechos apropiada, el reciclado y la regulación del tratamiento de aguas residuales en tierras agrícolas adquieren una gran importancia. Sin embargo, no todas las trazas de metales pesados en suelos, sedimentos y plantas son el resultado de la actividad humana. Algunas trazas se forman a través de procesos de absorción de componentes del suelo que existen allí por naturaleza. Teóricamente, cada 1.000 kg de suelo "normal" contienen, por ejemplo, 80 g de níquel, 16 g de plomo y 0,2 g de cadmio [1]. Por esta razón, no siempre es fácil determinar una causa segura para un contenido elevado de metales pesados. Incluso alimentos producidos en áreas completamente limpias y puras no están totalmente libres de metales pesados. Por ello, la monitorización de suelos y sedimentos especialmente con miras hacia el contenido de metales pesados es de gran interés debido a su influencia en el agua subterránea, las plantas y también sobre los animales y seres humanos. Sin embargo, los metales pesados solo se han convertido en el foco de interés público después de que las técnicas analíticas posibilitaran su detección incluso en trazas muy pequeñas. El manejo relativamente incontrolado de los metales pesados y sus compuestos en el pasado se puede explicar, en cierto modo, por el hecho de que sus efectos eran desconocidos. Hoy en día, sin embargo, la detección analítica es posible a niveles sumamente bajos. En este estudio se discutirá una técnica rápida y simple y con grandes ventajas para la determinación de Cd, Cu, Fe, Pb,

276

Nº 361 MAYO 2011

EAA

Mn, Ni y Zn en diversas muestras de suelo y sedimento tomadas en los alrededores de la zona de Turingia Saale (Alemania). El rendimiento del método fue evaluado con ayuda de material de referencia estándar y puntas de muestra.

Experimento Una lámpara de xenón de arco corto utilizada en la HR-CS AAS emite radiación en todo el dominio espectral relevante para la EAA de 185 - 900 nm con una densidad de radiación extremadamente alta. La selectividad del análisis queda garantizada por el uso de un monocromador doble de alta resolución, que consiste en un prisma y una rejilla Echelle. En combinación con un detector semiconductor, la información analítica no solo está disponible directamente en la línea de análisis; el entorno de la línea de análisis también se visualiza simultáneamente. Esto posibilita una corrección de fondo simultánea para cada tiempo de medición directamente en la línea de análisis. Una corrección de fondo potente y simultánea es esencial, especialmente para matrices complejas. Además, un alto grado de información acerca de la señal medida facilita la optimización del método para eliminar interferencias relacionadas con la matriz. La HR-CS AAS ofrece diversas ventajas insuperables en comparación con la EAA de fuente lineal clásica. Primero, debido al uso de una sola fuente de radiación continua, no es necesario cambiar las lámparas y el número de elementos que se puede determinar secuencialmente es ilimitado. Segundo, debido a la alta intensidad de radiación a lo largo de todo el dominio espectral de la EAA, todas las líneas de absorción de todos los analitos están disponibles con la misma intensidad de radiación. Esto es especialmente importante para el análisis multielemento secuencial rápido, en donde se tienen que determinar analitos de concentraciones considerablemente diferentes procedentes de la misma solución. La selección de líneas de absorción secundarias con una sensibilidad apropiada es una solución elegante de este problema. Otra posibilidad para ‘ajustar’ la sensibilidad de una medición según los requisitos de la HR-CS AAS consiste en seleccionar un número apropiado de píxeles para la medición. Para elementos que pueden estar presentes con diferentes concentraciones, como el hierro en muestras de suelo, se deben elegir dos o incluso tres líneas de una sensibilidad considerablemente diferente, ampliando el rango de trabajo por cuatro o cinco órdenes de magnitud en caso necesario. Una clara ventaja de la técnica secuencial rápida, comparada con la técnica multielemento simultánea, es que la primera posibilita la determinación de cada analito en condiciones optimizadas, mientras que la última requiere inevitablemente condiciones comprometidas. La última tiene, desde luego, la ventaja de una mayor velocidad si se tienen que determinar muchos elementos en una muestra, pero este no siempre es el caso. Las ventajas y opciones mencionadas de la HR-CS AAS multielemento secuencial rápida serán demostradas utilizando el análisis de siete elementos en diversas muestras de suelo y sedimento de diferente composición en el contrAA® 300.

Figura 1. El equipo contrAA® 300.

El TOPwave® cumple los requisitos de US EPA La digestión de muestras de suelo se realiza de acuerdo a los métodos EPA 3051A y 3052, utilizando el sistema de digestión por microondas TOPwave® [2,3].

EAA

Objetivo

Reactivos

EPA 3051A

EPA 3052

digestión de sedimentos,

digestión de matrices

lodos, suelos y aceites

basadas en sustancias

- no se pretende lograr

orgánicas y silíceas

una descomposición total

- descomposición

de la muestra.

total de la muestra

10 ml HNO3 o

9 ml HNO3 + 3 ml (HF

9 ml HNO3 + 3 ml HCl

puede variar de 0-5 ml). La adición de HCl, H2O2 o agua está permitida

Condiciones Temp.: 175 °C

Temp.: 180 °C

Total: 10 minutos

Figura 2. Sistema TOPwave®.

La exactitud del análisis depende de replicaciones precisas de las condiciones de reacción. Por ello, los métodos EPA describen claramente los requisitos del dispositivo de digestión por microondas como una química definida y una temperatura de reacción frente al tiempo. Estos requisitos no solo son cumplidos por TOPwave®, sino también por las especificaciones de los recipientes. Los métodos EPA preinstalados y listos para utilizar en la biblioteca de sistema hacen que el trabajo del usuario con el sistema de digestión por microondas sea fácil y seguro. El sistema trabaja con un concepto de sensor innovador. Todas las temperaturas de las muestras, al igual que las presiones internas, son medidas y visualizadas individualmente y en tiempo real. No se utilizan sondas inmersas o sensores mecánicos; el sistema utiliza principios de medición ópticos. No hay que instalar, conectar, limpiar o sustituir sensores: el manejo está aun más simplificado y no se requieren consumibles. Por medio de la tecnología RTM patentada (monitorización remota de temperatura, según las siglas en inglés) es posible realizar una medición de la temperatura por IR sin ningún contacto en todos los recipientes. Además, gracias a la tecnología RPM asimismo patentada, la presión de todos los recipientes se monitorizará en tiempo real. Estas dos funciones importantes están combinadas en un genial algoritmo SMART (monitorización de muestras y adaptación en tiempo real, según las siglas en inglés) que ofrece la ventaja de una monitorización de todos los parámetros de un recipiente individual y la posibilidad de ajustar la potencia de las microondas correspondientemente para garantizar un calentamiento controlado de las muestras. Así permite condiciones de reacción reproducibles para garantizar que la digestión de muestras se realice con una calidad consistentemente alta. Para la digestión, de 250 a 500 mg de material de muestra secado son pesados en un recipiente de microondas PM 60. El PM 60 es adecuado para una amplia gama de aplicaciones y se puede manejar con mucha facilidad, ya que solo consiste en unas cuantas partes individuales. La influencia de los métodos de digestión se comprueba utilizando varias mezclas de ácido mineral como, por ejemplo, solo HNO 3 y una mezcla de HNO3:HCl:HF (9:3:1) basadas en dos métodos EPA diferentes, el EPA 3051 A y el EPA 3052. El método EPA 3051 A no está previs-

técnicas de LABORATORIO

Total: 15 - 20 minutos

Tabla 1. Alcance de métodos de preparación de muestras.

to para lograr una descomposición total de la muestra. Sin embargo, el método EPA 3052 es aplicado para la descomposición total de la muestra con selección cuidadosa de las combinaciones de ácido. Para una mejor comprensión, la diferenciación de las normas de preparación de muestras se especifica en la Tabla 1.

Elemento

Longitud de onda [nm]

Quemador de flujo de gas [l/hora]

Altura del quemador [mm]

228,8018

324,7540

302,0639

279,4817

232,0030

283,3060

213,8570

Tabla 2. Ajustes de los parámetros del instrumento.

Después del período de enfriamiento, los recipientes se abren cuidadosamente y ventilan en una campana extractora de humos. Luego, las muestras se llenan con agua desionizada hasta alcanzar los 50 ml y se analizan directamente en el contrAA® 300.

Resultados del análisis multielemento rápido en el analizador contrAA® El uso de una fuente de radiación continua en combinación con un espectrómetro de alta resolución permite determinar cada elemento en cualquier momento. Una longitud de onda analíti-

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EAA

ca no sensible fue seleccionada para Fe con el fin de ajustar la sensibilidad de medición a la concentración del analito. Se utilizó la corrección de fondo automática y dinámica; los espectros no muestran interferencia alguna. El desarrollo y la optimización de métodos se facilitan y simplifican enormemente en la HR-CS AAS gracias a la visibilidad del entorno espectral de la línea analítica a alta resolución. Todos los píxeles son iluminados y leídos simultáneamente; cualquier

técnicas de LABORATORIO

variación de la intensidad que es independiente de la longitud de onda, como las variaciones en la emisión de la lámpara, se puede detectar y eliminar mediante el uso de píxeles de corrección. Esto resulta en un sistema extremadamente estable con un nivel de ruido bajo y relaciones señal-ruido considerablemente mejoradas. Además, es posible reconocer y evitar interferencias espectrales con más facilidad. Los parámetros del instrumento utilizados durante el análisis están detallados en la Tabla 2. Se utili-

280

Nº 361 MAYO 2011

EAA

za un cabezal de quemador de titanio codificado con una sola ranura de 5 cm para funcionar con aire-acetileno. Una ventaja adicional de esta técnica es la aplicación de la corrección de fondo de mínimos cuadrados (LSBC, según sus siglas en inglés) para eliminar el fondo estructurado. La LSBC es un procedimiento matemático que efectúa un ajuste lineal en cada uno de los espectros de muestra en base a uno o más espectros de referencia pregrabados. El espectro de referencia es aumentado o reducido mediante multiplicación con un factor de magnificación. Las diferencias entre el espectro de referencia y el espectro de la muestra, así como sus cuadrados, se calculan basándose en los píxeles, y la suma de los valores cuadrados de todos los píxeles se añade. Después, el factor de magnificación mencionado se varía para minimizar la suma de los cuadrados o, en otras palabras, para encontrar los ‘mínimos cuadrados’. Finalmente, el espectro de referencia óptimo es sustraído del espectro de muestra para eliminar el fondo estructurado. La necesidad de utilizar la LSBC se puede ver claramente en el ejemplo de análisis de Zn y Ni (Figura 3). Las estructuras marcadas de NO y SiO, respectivamente, causadas por el ácido de digestión y la matriz de la muestra se pueden compensar mediante el uso de la LSBC. Utilizando estos modelos de corrección también es posible corregir adecuada e independientemente, variando las concentra-

PACS-2 (sedimento fluvial) certificado

encontrado con EPA 3051A

encontrado con EPA 3052

Cd [mg/kg]

2,11±0,15

2,20±0,04

2,07±0,23

Cd [mg/kg]

310±12

289±2

294±2

Pb [mg/kg]

183±8

181±2

170±8

Mn [mg/kg]

440±19

240±6

422±5

Ni [mg/kg]

39,5±2,3

30,4±0,3

42,2±0,4

Fe [%]

4,09±0,06

2,63±0,20

3,93±0,27

364±23

334±6

360±4

Zn [mg/kg]

BAM-U110 (suelo) certificado (contenido total)

encontrado con EPA 3052

Cd [mg/kg]

7,30±0,60

7,21±0,25

Cd [mg/kg]

263±12

251±3

Pb [mg/kg]

197±14

185±5

Mn [mg/kg]

621±20

602±6

Ni [mg/kg]

101±5

94,7±0,9

2,8*

2,67±0,10

1.000±50

947±5

Fe [%] Zn [mg/kg]

Tabla 3. Resultados experimentales del contrAA® 300 para el material de referencia estándar. *Contenido total determinado con la técnica de fluorescencia de rayos X.

ciones de las interferencias particulares. Otra ventaja importante es la integración de modelos de corrección en el parámetro del método. Esto permite realizar una corrección automática, así que el usuario recibe el espectro corregido directamente después del análisis. La viabilidad de tal corrección de fondo es única en la EAA y solo ha sido posible gracias a la aplicación de la HR-CS AAS. El estudio experimental se realizó utilizando un material de referencia estándar de suelo y otro de sedimento. El suelo (BAMU110) y el sedimento fluvial (PACS-2) fueron suministrados por el Instituto Federal para la Investigación y el Ensayo de Materiales de Alemania (BAM, según las siglas alemanas) y por el Consejo Nacional de Investigación de Canadá, respectivamente. Los resultados figuran en la Tabla 3. Los resultados analíticos de los materiales de referencia certificados para sedimento (PACS 2) han sido comparados por medio de dos diferentes métodos de digestión por ácido asistidos por microondas que están indicados en la Tabla 1. La mayoría de las recuperaciones elementales observadas al utilizar el método EPA 3051A se encontraban en el mismo rango o ligeramente por debajo de los valores certificados usando el método EPA 3052 esperados para Pb. Las recuperaciones observadas para Pb fueron del 98% y 92% a través del método 3051A y el método 3052, respectivamente. El valor obtenido por el método EPA 3052 es inferior al otro, pero todavía se encuentra dentro de un rango porcentual aceptable. Este fenómeno se puede explicar con una posible precipitación de PbCl2 de la solución tras la adición de HCl. Los

EAA

Suelo 1

Suelo 2

Cd [mg/kg]

n.d.

0,61±0,10

0,39±0,12

n.d.

Cd [mg/kg]

12,3±0,4

26,2±0,3

23,5±0,3

12,4±0,4

Pb [mg/kg]

31,9±1,6

55,8±1,6

44,6±1,5

34,5±1,6

Mn [mg/kg]

318±4

704±6

639±7

291±6

Ni [mg/kg]

20,8±0,8

28,5±0,8

27,1±0,7

20,4±0,8

Fe [%]

1,08±0,06 1,87±0,06

1,77±0,05

1,10±0,06

150±4

118±5

Zn [mg/kg]

107±5

141±5

Sedimento 1 Sedimento 2

Tabla 4. Resultados experimentales de contrAA® 300 para muestras de suelo y sedimento utilizando el método EPA 3052.

resultados encontrados al utilizar tanto el método EPA 3051A como el método EPA 3052 (aquel con la descomposición total) están en conformidad con los valores certificados. Además, las recuperaciones de todos los elementos de interés estaban por encima del 90% y el flujo de muestras del método analítico aplicado se pudo incrementar considerablemente. Se han analizado muestras de suelo y sedimento fluvial tomadas en los alrededores de Turingia Saale. Las muestras se secaron a 160 °C durante 5 horas en una estufa de secado. Posteriormente fueron homogeneizadas mediante molienda en un molino de bolas. Los resultados se especifican en la Tabla 4. La recuperación, repetibilidad y reproducibilidad calculadas confirman el buen rendimiento del método aplicado.

Discusión El objetivo de todos los procesos de digestión es la completa disolución de los materiales que analizar y la completa descomposición de la matriz, pero evitando siempre la pérdida o la contaminación de los materiales analíticos. Además, también es importante que el proceso de digestión sea seguro, reproducible y simple. Respecto a la descomposición total, se ha descubierto que la adición de HF es obligatoria para lograr una digestión completa del material. Se logró una digestión apropiada de suelos y sedimentos utilizando una mezcla de ácidos compuesta por HNO3:HCl:HF. La técnica bastante rápida, económica y exacta usando un contrAA® 300, que presentamos aquí, es un buen ejemplo del rendimiento de la HR-CS AAS, que combina las ventajas de la EAA clásica y de la ICP-OES. Los usuarios de la EAA se benefician de la información espectral que el dispositivo proporciona, la cual se simplifica considerablemente a través del desarrollo del método y el análisis. El número de líneas de absorción comparativamente bajo en combinación con la alta resolución del espectrómetro evitan las numerosas interferencias a las que el usuario ICP se tiene que enfrentar normalmente. Incluso elementos ricos en líneas, tales como hierro o níquel, no muestran ninguna interferencia espectral. La selección de líneas se simplifica considerablemente, ya que las interferencias espectrales solo se han de considerar raras veces. La corrección de fondo automática detecta todas las señales de absorción de la matriz y ayuda así a evitar errores debido a puntos de medición ajustados incorrectamente. Las fuentes potenciales de error se minimizan a través de la combinación de to-

técnicas de LABORATORIO

das estas tecnologías innovadoras. Esto simplifica considerablemente el desarrollo del método y el análisis. Una calibración ajustada a la matriz no es necesaria, evitándose así contaminaciones y errores involucrados. Aparte de unos gastos de funcionamiento más bajos, el análisis en la HR-CS AAS es por lo menos igual de rápido que en la ICP-OES. Se pueden procesar aproximadamente 30 muestras por persona por hora para 7 elementos, dando como resultado un número total de aproximadamente 210 determinaciones de elemento por hora. La velocidad de esta técnica es comparable con la de la EAA clásica, y es más eficiente en costes y más fácil de evaluar si se compara con la ICP-OES. Los dos materiales de referencia certificados han sido analizados y han dado resultados en conformidad con los valores certificados. Se obtuvieron recuperaciones satisfactorias (del 92 al 107%) de ambas muestras (suelo y sedimento) para todos los elementos.

Conclusión Las pruebas de análisis de suelo son cada vez más importantes debido a la creciente contaminación ambiental. Por ello, existe la necesidad de monitorizar la presencia de metales pesados en el suelo y en sedimentos por medio de un análisis rutinario rápido. El uso de una sola fuente de radiación en conexión con un espectrómetro de alta resolución rápido convierte a la EAA en una técnica multielemento perfectamente apropiada para estas aplicaciones tan exigentes. Como se ha mencionado, se trata de una técnica prácticamente libre de interferencias y, por ello, tan fácil de utilizar como los dispositivos de EAA convencionales. Además, los espectros de las muestras se visualizan permitiendo así la aplicación de funciones de corrección espectral que antes estaban reservadas a los usuarios de la ICP-OES. Con la corrección de fondo en la HR-CS AAS se ha alcanzado definitivamente una nueva dimensión en la corrección de fondo. Corrige cualquier deriva de intensidad, emisión, absorción de banda ancha y fondo estructurado automática y simultáneamente, sin retardo alguno en la medición de la muestra y con una resolución espectral muy buena. La HR-CS AAS combina la simplicidad de la EAA con la capacidad multielemento y la información espectral de un detector de arrays. En conclusión, los datos experimentales indican que los análisis de suelos y sedimentos se pueden realizar hoy de una manera muy rápida, económica y además muy simple para una serie de elementos utilizando la digestión por microondas apropiada y aplicando la tecnología HR-CS AAS de llama de última generación.

Bibliografía [1] Heavy metals in soils, 2nd Edition, B.J. Alloway. [2] EPA 3051A: Digestión por ácido asistida por microondas de sedimentos, lodos y suelos. [3] EPA 3052: Digestión por ácido asistida por microondas de matrices basadas en sustancias orgánicas y silíceas. www.analytik-jena.com Printout and further use permitted with a reference to the source. ©2011 Analytik Jena AG.

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Nº 361 MAYO 2011

método Kjeldahl

Determinación de proteínas mediante el método Kjeldahl

Francisco Santiago. Departamento de Ingeniería. JP Selecta.

Introducción l contenido total de proteínas en los alimentos está conformado por una mezcla compleja de proteínas. Estas existen en una combinación con carbohidratos o lípidos, que puede ser física o química. Actualmente todos los métodos para determinar el contenido proteico total de los alimentos son de naturaleza empírica. Un método absoluto es el aislamiento y pesado directo de la proteína pero dicho método se utiliza solo a veces en investigaciones bioquímicas debido a que es dificultoso y poco práctico

En 1883 el investigador danés Johann Kjeldahl desarrolló el método más usado en la actualidad para el análisis de proteínas (método Kjeldahl) mediante la determinación del nitrógeno orgánico. En esta técnica se digieren las proteínas y otros componentes orgánicos de los alimentos en una mezcla con ácido sulfúrico en presencia de catalizadores. El nitrógeno orgánico total se convierte mediante esta digestión en sulfato de amonio. La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se recoge en una solución de ácido bórico. Los aniones del borato así formado se titulan con HCl (o H2SO4) estandarizado para determinar el nitrógeno contenido en la muestra. El resultado del análisis es una buena aproximación del contenido de proteína cruda del alimento ya que el nitrógeno también proviene de componentes no proteicos. El método Kjeldahl ha sufrido varias modificaciones. Originalmente se utilizó permanganato de potasio para llevar a cabo el proceso de oxidación (digestión), sin embargo,

técnicas de LABORATORIO

los resultados no fueron satisfactorios, de manera que este reactivo se descartó. En 1885 Wilforth encontró que se podía acelerar la digestión utilizando ácido sulfúrico y añadiendo un catalizador. En 1889 Gunning propuso añadir sulfato de potasio que eleva el punto de ebullición del ácido sulfúrico utilizado en la digestión para disminuir el tiempo de la reacción. En la actualidad se utiliza principalmente sulfato de cobre pentahidratado CuSO4·5H2O como catalizador.

Reacciones llevadas a cabo en el método de Kjeldahl Digestión (1)

n - C -NH2 + mH2SO4

catalizadores

proteína

calor

CO2 + (NH4)2 SO4 + SO2

Neutralización y destilación (2)

(NH2)SO4 + 2 NaOH

2NH3 + Na2SO4+ 2H2O

(3)

NH3 + H3BO3 (ácido bórico)

NH4 + H2BO3- (ion borato)

Titulación El anión borato (proporcional a la cantidad de nitrógeno) es titulado con HCl (o H2SO4) estandarizado: (4)

H2BO3- + H+

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H3BO3

método Kjeldahl

Material J.P. Selecta suministra los equipos necesarios para la realización del procedimiento por el método Kjeldahl: - una bureta electrónica “Digitrate-Pro 50” resolución 0,01 ml. Código 0182026 - una balanza analítica de precisión “FA-2204B” resolución 0,1 mg. Código 5830039 - una unidad de digestión (Bloc Digest) para 6, 12 y 20 plazas. Códigos 4000629, 4000630, 4000631 - una unidad Scrubber. Código 4001611 - una bomba de circulación de agua. Código 4001612

Balanza analítica de precisión.

Bureta electrónica.

Aparato destilador Kjeldahl (modelos

- 1 aparato destilador Kjeldahl (Pro Nitro M, S o A). Códigos 4002627, 4002851, 4002430 - material diverso de laboratorio.

automático y semiautomático).

Unidad de digestión. Unidad Scrubber. Bomba de circulación de agua.

método Kjeldahl Reactivos

Digestión

Reactivos preparados:

• Añadir entre 10 y 15 ml (tubo macro) de H2SO4 96-98% y 1 tableta (8 g) de catalizador (para el tubo micro, el máximo de H2SO4 es 5 ml). • Montar un sistema para la extracción de humos o scrubber con Na2CO3. • Realizar la digestión en tres pasos:

Es aconsejable utilizar reactivos ya preparados, especialmente el HCl (o H2SO4) de valoración. Cualquier error en su preparación puede afectar directamente al resultado de la determinación. Se recomienda utilizar los siguientes, o sus equivalentes en otras marcas: • Ácido bórico (en polvo) 99,5% • Indicador mixto 4,8 (o 5) RV (rojo metilo + verde de bromocresol) • Indicador mixto 4,4 RV (rojo metilo + azul de metileno) • • • •

HCl 0,1 N HCl 0,25 N H2SO4 0,1 N H2SO4 0,2 N

SV SV SV SV

• Hidróxido sódico 40% RE (para determinación de N) • Acetanilida 99% (patrón para validación) • Amonio sulfato (patrón para validación) • Catalizador Kjeldahl 6,25% Cu tabl. 8 g

1. En función del contenido de agua de la muestra, empezar la digestión evaporando agua a 150 °C entre 15 y 30 minutos. 2. Realizar un segundo paso entre 270 y 300 °C durante entre 15 y 30 minutos para reducir la producción de humos blancos. 3. Continuar la digestión a 400 °C entre 60 y 90 minutos.

Panreac 141015 Panreac 283303 Panreac 282430

Panreac 171023 Panreac 182318 Panreac 181061 Panreac 182011 Panreac 171220 Panreac 151005 Panreac 131140 Panreac 174428

Algunos ejemplos: Queso o carne: Paso 1º: 150 °C / 30 minutos Paso 2: 270 °C / 30 minutos Paso 3: 400 °C / 90 minutos. Cereales: Paso 1º: 150 °C / 15 minutos Paso 2: 300 °C / 15 minutos Paso 3: 400 °C / 60 minutos.

Preparación de la solución fijadora de amoníaco 1. Con indicador mixto 4,8 (o 5) Preparar la solución de la siguiente fórmula para 1 litro de solución fijadora:

Control visual: El resultado es un líquido transparente nítido con coloración azul claro, verde o amarillo dependiendo del catalizador utilizado. No deben quedar restos negros adheridos a la pared de tubo.

• Pesar 10 g de ácido bórico (en polvo) • Disolverlo en 1 litro de agua destilada. • Añadir 15 ml de indicador mixto 5

Nota: Durante la digestión debe controlarse la producción de espuma en las muestras. Si esta es excesiva, debe alargarse el paso nº 1.

Panreac 141015 Panreac 283303

2. Con indicador mixto 4.4 Preparar la solución de la siguiente fórmula para 1 litro de solución fijadora: • Pesar 10 g de ácido bórico (en polvo) Panreac 141015 • Disolverlo en 1 litro de agua destilada. • Añadir 10 ml de indicador mixto 4,4. Panreac 282430.

Procedimiento Preparación de la muestra • Triturar, homogeneizar y mezclar la muestra. • Pesar entre 1 y 2 g de muestra. • En muestras con contenidos de nitrógeno muy pequeño, tomar la cantidad de muestra suficiente para que contenga, como mínimo, 5 mg de nitrógeno.

técnicas de LABORATORIO

Dilución • Sacar los tubos muestra del bloque digestor y dejar enfriar a temperatura ambiente (puede forzarse sumergiendo los tubos, con precaución, en un poco de agua) • Añadir unos 25 ml de agua destilada en cada tubo • Añadir el agua despacio y moviendo el tubo sin dejar solidificar la muestra; si es necesario calentar ligeramente el tubo (por ejemplo introduciéndolo en el bloque digestor todavía caliente) • Dejar enfriar de nuevo hasta temperatura ambiente • Para evitar pérdidas de nitrógeno y reacciones violentas no introducir el tubo todavía caliente al destilador. Destilación • Situar un Erlenmeyer de 250 ml a la salida del refrigerante con 50 ml de ácido bórico y unas gotas de indicador

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método Kjeldahl

• Programar una dosificación de 50 a 75 ml de NaOH • Introducir el tubo con la muestra en el destilador • Destilar hasta recoger 250 ml en el Erlenmeyer (50 ml de bórico + 200 ml de destilado). Control visual: una vez añadido el NaOH, la muestra debe tomar una coloración azulada; de no ser así, añadir más NaOH. Valoración y cálculo • Valorar el destilado con HCl o H2SO4 hasta el cambio de color (punto final: pH 4.65).

Verificación de la recuperación con amonio sulfato Esta verificación es ampliamente utilizada para certificar el funcionamiento del destilador. Se trata de preparar una muestra cuyo contenido de nitrógeno es conocido. Esta se destila, se valora con HCl 0,25 N y se calcula el nitrógeno detectado. El porcentaje de nitrógeno detectado sobre el de la muestra se denomina recuperación de nitrógeno. Preparar la muestra:

Moles de HCl = Moles de NH3 = Moles de N en la muestra Moles de H2SO4 = 2 Moles de NH3 = 2 Moles de N en la muestra

• Realizar el cálculo: mg N = N x V x 14

Contenido de nitrógeno de una muestra de amonio sulfato: Formula: (NH4)2 SO4 Peso molecular: 132,14 Factor: 14 * 2 / 132,14 = 0,212 mg de nitrógeno = 0,212 * mg de amonio sulfato

• Pesar unos 100 mg de amonio sulfato. El peso exacto será P0

donde: N = normalidad del ácido de valoración V = volumen de ácido consumido 14 = peso atómico del nitrógeno.

• Para pasar a contenido de proteínas corregir por el factor adecuado según la naturaleza de la muestra (6,25 por defecto) • Realizar periódicamente un ensayo en blanco y restarlo del resultado. % proteínas =

x 100 x F

Donde: P2: nitrógeno (mg) P0: Peso de la muestra (mg) F: Factor proteínico (6,25 por defecto) Factor proteico de algunos alimentos: Almendras Nueces Nueces - cacahuetes Gelatina Soja Cebada, avena, centeno Trigo, harina entera Harinas (no entera) Arroz Maíz Resto de alimentos alimentos Salvado Leche y lácteos

5,18 5,30 5,41 5,55 5,71 5,83 5,83 5,70 5,95 6,25 6,25 6,31 6,38

• La cantidad exacta de nitrógeno es: P1 (mg) = P0 x 0,212

método Kjeldahl

• Destilar añadiendo 25 ml de NaOH • Una vez destilado y valorado obtenemos el nitrógeno (mg) detectado: P2

Factor: 14 / 135,17 = 0,1035 mg de nitrógeno = 0,1035 * mg de acetanilida

2. La pérdida de nitrógeno durante la digestión.

• Pesar alrededor de 250 mg de acetanilida. El peso exacto será P0

El exceso de sulfato de sodio o potasio que se añade al ácido para elevar el punto de ebullición puede producir una descomposición por calor y, por lo tanto, pérdida de nitrógeno.

P2 = N x V x 14

• La cantidad exacta de nitrógeno es: Donde: P1 (mg) = P0 x 0,1035

N = Normalidad del ácido de valoración (HCl 0,25) V = Volumen de ácido consumido 14 = Peso atómico del nitrógeno. • Calculamos la recuperación: R(%) = P2 / P1 *100

• La recuperación aceptable es de entre 99,5 y 100,5%. Si se utiliza HCl de normalidad diferente preparar muestras: Normalidad

Muestra de amonio sulfato.

0,05 0,1 0,25 0,5

20 ... 40 mg 40... 90 mg 100 … 200 mg 200 … 400 mg

Verificación de la recuperación con acetanilida

Por otro lado, el exceso de catalizador (de cobre generalmente) también puede producir pérdidas de nitrógeno

Digestión de la muestra: • Colocar la acetanilida en un tubo, añadir 10 ml de ácido sulfúrico 98% y una tableta de catalizador Kjeldahl. • Digerir a 400 °C durante 1 hora (el resultado debe ser un líquido transparente con coloración azul) • Dejar enfriar y añadir 25 ml de agua destilada en cada tubo. Tomar precauciones para evitar salpicaduras. La reacción del agua sobre el ácido sulfúrico es violenta.

3. La digestión incompleta de la muestra, generalmente debida a falta de tiempo de reacción o falta de ácido sulfúrico. Durante la destilación:

Destilar:

1. Neutralización incompleta de la mezcla digerida. Es necesario añadir suficiente NaOH para neutralizar el exceso de ácido sulfúrico resultante de la digestión así como transformar todo el amonio formado en la digestión en amoníaco.

• Destilar añadiendo 75 ml de NaOH. Utilizar HCI 0,25 N para la valoración.

2. Pérdida de amoníaco por fugas en el circuito de destilación.

• Una vez destilado y valorado, obtenemos el nitrógeno (mg) detectado: P2

3. Pérdida de amoniaco por refrigeración insuficiente en el condensador.

P2 = N x V x 14

Esta verificación es ampliamente utilizada para certificar el funcionamiento del proceso completo del análisis del nitrógeno Kjeldahl que incluye las etapas de digestión, destilación y valoración. Se trata de preparar una muestra cuyo contenido de nitrógeno es conocido. Esta se digiere, se destila, se valora y se calcula el nitrógeno detectado.

Donde:

Bibliografía

N = Normalidad del ácido de valoración (HCl 0,25) V = Volumen de ácido consumido 14 = Peso atómico del nitrógeno. • Calculamos la recuperación:

El porcentaje de nitrógeno detectado sobre el de la muestra se denomina recuperación de nitrógeno.

• La recuperación aceptable es entre 99,5 y 100,5 %.

Para realizar esta verificación se utiliza la acetanilida.

Fuentes de error

• A.O.A.C. 1980. Association of Official Agricultural Chemists. Official Methods of Analysis. Washington, D.C. • Nielsen, S.S. 1994. Introduction to the Chemical Analysis of Foods. Ed. Jones and Bartlett Publishers. U.S.A. pp 209-212. • Ranganna, S. 1977. Manual of Analysis of Fruit and Vegetable Products. Ed. McGraw-Hill Publishing Co. Ltd. New Delhi. • Yeshajahu P. y Meloan C.E. 1987. Food Analysis. Theory and Practice. 2ª. Ed. AVI U.S.A. pp 753-758.

R(%) = P2/P1 *100

Las principales fuentes de error son: Preparar la muestra: En el proceso de digestión: Contenido de nitrógeno de una muestra de acetanilida: Formula: C8H9NO Peso molecular: 135,17

1. La inclusión de nitrógeno no proteico (aunque la cantidad de este nitrógeno suele ser despreciable comparada con la del nitrógeno proteico)

técnicas de LABORATORIO

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control alimentario

Técnicas aplicadas al control de componentes de origen animal en piensos: II. Técnicas genéticas (I)

Irene Martín*, Teresa García, Isabel González, Rosario Martín. Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos, Facultad de Veterinaria, Universidad Complutense de Madrid. 28040 Madrid (España).

En este trabajo, las autoras presentan las distintas técnicas basadas en el análisis del ADN que se pueden emplear para determinar el origen animal de las materias primas que integran los piensos. Dentro de las técnicas genéticas, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), es uno de los ensayos más utilizados, ya que permite el análisis de matices complejas como son los piensos, que contienen varias especies y tejidos animales diferentes, y donde el ADN puede estar degradado por los tratamientos de procesado aplicados.

as técnicas genéticas se basan en el reconocimiento específico de fragmentos de ácidos nucleicos presentes en los seres vivos. A pesar de resultar más costosas y exigir un mayor soporte técnico que las basadas en el análisis de proteínas, presentan entre otras las siguientes ventajas: el mayor grado de variabilidad genética examinado, la pequeña cantidad de muestra requerida para el análisis y la posibilidad de analizar muestras sometidas a tratamientos térmicos intensos debido a la elevada estabilidad del ADN en dichos procesos (1, 2)**. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha sido, con diferencia, la herramienta que ha permitido la mayor expansión de las técnicas genéticas. Hasta su descubrimiento en la década de los 80, si se quería obtener un determinado fragmento de ADN en cantidad suficiente para su análisis, el único camino viable era seguir laboriosos y lentos procedimientos de clonación. La reacción de PCR, sin embargo, permite obtener millones de copias de una secuencia específica de ADN mediante una simple reacción enzimática. Por ello, esta técnica ha tenido un profundo impacto en todas las áreas de investigación biológica y se emplea en multitud de aplicaciones: diagnóstico de enfermedades genéticas y hereditarias, estudios de evolución molecular, medicina forense, identificación del origen de componentes pre-

Methods for the detection of animal material in feedstuffs: II. Genetic techniques This research work shows the analytical approaches based on DNA molecules to identify different animal species in feedstuffs. Among genetic techniques currently applied to feedstuffs authentication, polymerase chain reaction (PCR) is the most common approach because it allows the analysis of processed or severe heat-treated samples.

sentes en los alimentos y detección de microorganismos (3-11). Los ensayos de PCR se han utilizado ampliamente para la identificación de especies animales y vegetales en alimentos (12-14), desplazando a otras metodologías utilizadas anteriormente. Aunque existen varios trabajos publicados en que se emplea la reacción de PCR sin combinar con ninguna otra técnica, es más frecuente su uso conjuntamente con técnicas complementarias como la secuenciación (PCR-secuenciación) (3, 15-22), el análisis del polimorfismo del ADN amplificado con cebadores arbitrarios

(*) Autora a quien debe dirigirse la correspondencia (imartint@vet.ucm.es) (**) La bibliografía se publicará en la segunda parte del artículo.

técnicas de LABORATORIO

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control alimentario

(RAPD) (23-28), el análisis del polimorfismo en la conformación de las cadenas sencillas de ADN amplificado por PCR (PCR-SSCP) (29-32) o el análisis del polimorfismo en la longitud de fragmentos de restricción de regiones amplificadas por PCR (PCR-RFLP) (33-54). Sin embargo, es importante señalar que el número de trabajos publicados hasta el momento, en los que se emplean estas técnicas para la identificación de especies animales y vegetales en piensos es, comparativamente, mucho más escaso.

Bellagamba y col. (57) emplearon la técnica de PCR-RFLP en un fragmento de 359 pb del gen citocromo b para identificar el origen animal (vaca, búfalo, oveja, cabra, cerdo, caballo, pollo o pavo) de las harinas de carne y hueso presentes en los piensos. Para ello, analizaron muestras de harinas vegetales (maíz, girasol y soja), así como muestras de piensos que contenían del 0,5 al 1% de harinas animales comerciales utilizando las enzimas de restricción Rsa I, Taq I, BstU I y BsaJ I.

A continuación se detallan las principales técnicas genéticas aplicadas a la identificación del origen animal de las materias primas que integran los piensos.

Lahiff y col. (58) utilizaron las enzimas Hph I, Mnl I, Hind III y Ssp I para verificar el origen animal (pollo, vaca, oveja o cerdo) de los fragmentos específicos comprendidos entre 212 y 271 pb amplificados por PCR con cebadores diseñados en los genes mitocondriales ARNt Lys y las subunidades 6 y 8 de la ATPasa, a partir de muestras que contenían diferentes porcentajes de harinas de carne y hueso. De forma similar, Cheng y col. (59) emplearon estas enzimas de restricción (Hph I, Mnl I, Hind III y Ssp I) para comprobar la especificidad de los fragmentos de PCR amplificados con los cebadores para vaca, cerdo, oveja y pollo diseñados por Tartaglia y col. (56) y Lahiff y col. (58) a partir de muestras de piensos comerciales producidos en Taiwán.

1. Análisis del polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción de regiones amplificadas por PCR (PCR-RFLP) La técnica de PCR-RFLP se basa en la amplificación de fragmentos de ADN específicos mediante PCR y su posterior tratamiento con enzimas de restricción, que los cortan en trozos más pequeños. Las diferencias existentes en la secuencia nucleotídica entre las distintas especies estudiadas, darán lugar a fragmentos de diferentes tamaños que se examinan mediante electroforesis (41, 42). En la técnica de PCR-RFLP, la elección de las endonucleasas de restricción puede hacerse al azar, o estar basada en el conocimiento y comparación previos de las secuencias del fragmento analizado (empleando por ejemplo, las secuencias disponibles en las bases de datos). En cualquier caso, es imprescindible seleccionar enzimas que no generen variaciones intraespecíficas, lo cual se comprueba mediante el análisis de un número adecuado de muestras. Además, la eficacia de la técnica de PCR-RFLP va a depender del grado de variabilidad genética de la secuencia elegida, así como de su tamaño. Ambos parámetros han de permitir la detección de variaciones interespecíficas, pero no intraespecíficas. Para la identificación de especies mediante PCR-RFLP, con frecuencia se seleccionan zonas conservadas y fragmentos pequeños. Los genes mitocondriales, y principalmente el gen que codifica el citocromo b, han sido ampliamente utilizados para la identificación de numerosas especies animales, debido a que contienen suficiente variabilidad interespecífica para producir perfiles de restricción específicos de especie (34, 55). Tartaglia y col. (56) emplearon la técnica de PCR-RFLP para verificar el origen bovino de los fragmentos de 271 pb amplificados a partir de piensos compuestos que contenían entre un 0,125-2% de harinas animales (cerdo, vaca y aves), utilizando para ello cebadores específicos de vaca diseñados en el gen que codifica la subunidad 8 de la ATPasa y la región amino-terminal de la subunidad 6 de la ATPasa. Los fragmentos amplificados por PCR se analizaron posteriormente con las enzimas de restricción Dnp II y Ssp I originando dos fragmentos de 214 y 57 pb y tres fragmentos de 118, 84 y 69 pb, respectivamente, solo en aquellas muestras que contenían harinas de vaca.

técnicas de LABORATORIO

Myers y col. (60) llevaron a cabo la diferenciación entre harinas de rumiantes (vaca, oveja, cabra, ciervo y alce) y no rumiantes (cerdo y caballo), mediante la digestión con las enzimas Hinf I y HypCH4 III de un fragmento conservado de ADN mitocondrial de 271 pb situado entre la subunidad citocromo oxidasa II y la ARNtLys. El análisis de muestras de piensos comerciales para perro que contenían harinas de vaca, pollo, pescado y sangre de cerdo, así como de muestras de piensos para ganado bovino que contenían harinas de carne y hueso de vaca y sangre de cerdo, demostró la capacidad de la técnica para la diferenciación e identificación de las harinas animales. Colombo y col. (61) publicaron los resultados obtenidos en un estudio comparativo que evaluaba la aplicabilidad de la técnica de PCR múltiple (62) y del análisis por PCR-RFLP (33) para detectar la presencia de tejidos animales en piensos. En este trabajo se analizaron muestras de harinas de carne tratadas a 130 °C durante 20 minutos, harinas de pescado y muestras de piensos compuestos. Ambas técnicas permitieron la detección y diferenciación de las harinas analizadas. Sin embargo, la detección de componentes de origen animal en piensos compuestos mediante la técnica de PCR-RFLP no siempre resultó posible. Wang y col. (63) realizaron un estudio de mercado para detectar la presencia de tejido muscular de vaca, cabra, cerdo y pollo en muestras de piensos comerciales para perro y gato procedentes de Taiwán. Para ello, emplearon la técnica de PCR-RFLP en un fragmento de 359 pb del gen citocromo b. Los resultados obtenidos utilizando las enzimas de restricción Alu I y Mbo I demostraron que los piensos para perro contenían carne de vaca, cerdo, cabra y pollo, mientras que los piensos para gato contenían carne de pollo.

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control alimentario

Pascoal y col. (64) utilizaron las enzimas de restricción Sca I y TspE I para verificar el origen bovino de los fragmento de 115 pb del gen citocromo b amplificados por PCR con cebadores específicos de vaca, a partir de subproductos animales sometidos a un tratamiento térmico de 133 °C y 3 bar durante 20 minutos. Santaclara y col. (65) emplearon la enzima de restricción Tsp509 I para verificar el origen animal de los fragmentos amplificados con cebadores específicos del gen citocromo b, a partir de muestras de harinas de pescado que contenían harinas de vaca, pollo, cerdo, caballo, oveja y cabra tratadas a 133 °C y 3 bar durante 20 minutos. El límite de detección alcanzado tras el análisis de 20 muestras comerciales fue del 0,05%. Natonek-Wisniewska y Slota (66) llevaron a cabo la identificación y diferenciación de sangre procedente de vaca, oveja y cerdo, mediante la digestión con la enzima Aci I de un fragmento de 531 pb amplificado en el gen citocromo b. La técnica de PCR-RFLP, a diferencia de otras metodologías como la secuenciación de fragmentos amplificados por PCR (PCR-secuenciación), es sencilla, rápida, y no requiere el uso de instrumental complejo. Por ello, resulta muy apropiada para análisis rutinarios en programas de control de calidad de la industria cárnica (33, 36). En el caso concreto del análisis de los piensos, la técnica

de PCR-RFLP se ha utilizado para verificar el origen animal de los fragmentos de PCR amplificados con cebadores específicos. Sin embargo, no permite la detección e identificación de mezclas de harinas animales en piensos, debido fundamentalmente a la dificultad de aplicar este procedimiento al análisis de muestras donde el ADN pueda estar degradado y de productos que contengan dos o más especies en su composición, ya que la coexistencia de patrones de restricción característicos de cada una de ellas dificultaría la interpretación de los resultados obtenidos (38, 41). La Tabla 1 recoge algunos de los principales investigadores y laboratorios implicados en la detección e identificación de componentes de origen animal en piensos mediante técnicas genéticas de PCR-RFLP.

2. PCR con cebadores específicos Una de las estrategias más comúnmente utilizadas en las técnicas de PCR aplicadas a la identificación de especies, consiste en el diseño de cebadores específicos para la amplificación selectiva de fragmentos de ADN a partir de diferentes organismos. Así, la técnica de PCR con cebadores específicos se ha utilizado para la autentificación de productos de origen animal como leche y productos lácteos (67-71), pescado (72-76) y carne y productos cárnicos (77-86).

control alimentario

Tabla 1. Principales investigadores y laboratorios implicados en la detección e identificación de componentes de origen animal en piensos mediante técnicas genéticas de PCR-RFLP.

INVESTIGADORES

LABORATORIO/ORGANIZACIÓN

CIUDAD

PAÍS

Santaclara, F.J. y col.

Laboratorio de Biología Molecular y Biotecnología. Asociación Nacional de Fabricantes de Conservas de Pescados y Mariscos de España-Centro Técnico Nacional de Conservación de Productos de la Pesca (ANFACO-CECOPESCA)

Vigo

España

Lyng, J. y col.

Department of Agricultural and Food Engineering. University College Dublin

Dublín

Irlanda

Lahiff, S. y col.

National Diagnostics Centre. BioResearch Ireland. National University of Ireland

Galway

Irlanda

Colombo, F. y col.

Dipartimento di Scienze e Tecnologie Veterinarie per la Sicurezza Alimentare. Facoltà di Medicina Veterinaria. Università degli Studi di Milano

Milán

Italia

Bellagamba, F. y col.

Istituto di Zootecnica. Facoltà di Medicina Veterinaria. Università degli Studi di Milano

Milán

Italia

Comincini, S. y col.

Dipartimento di Genetica e Microbiologia. Università di Pavia

Pavía

Italia

Bove, D. y col.

Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Mezzogiorno

Portici

Italia

Tartaglia, M. y col.

Laboratorio di Biologia Cellulare e Medicina Veterinaria. Istituto Superiore di Sanità (ISS)

Roma

Italia

Natonek, M. y col.

Department of Animal Immuno- and Cytogenetics. National Research Institute of Animal Production

Cracovia

Polonia

Wang, H.-C. y col.

Department of Veterinary Medicine. College of Veterinary Medicine. National Chung-Hsing University

Taichung

Taiwán

Lee, S.-H. y col.

National Veterinary Research Institute. Council of Agriculture

Tamsui

Taiwán

Myers, M.J. y col.

Division of Animal Research (DAR). Office of Research. Center for Veterinary Medicine. U.S. Food and Drug Administration

Laurel

EE.UU.

Para el análisis de matrices complejas como son los piensos, que contienen varias especies animales, y donde el ADN está fragmentado por los tratamientos de procesado aplicados, es recomendable emplear cebadores específicos diseñados para amplificar fragmentos de ADN de pequeño tamaño (87-89). La primera aplicación de esta técnica para la detección de harinas animales en los piensos corresponde a Tartaglia y col. (56). En este trabajo se analizaron muestras de harinas de pescado, así como piensos comerciales que contenían entre un 0,1252% de harinas de carne y hueso de vaca, cerdo y pollo, mediante una técnica de PCR con cebadores específicos de vaca diseñados en el gen que codifica la subunidad 8 de la ATPasa y la región amino-terminal de la subunidad 6 de la ATPasa. Los resultados obtenidos mostraron la capacidad del ensayo para detectar hasta un 0,125% de harinas de vaca incluso en las muestras tratadas a 133 °C durante 33 minutos. De forma similar, Wang y col. (90) diseñaron un método de PCR para la detección de material bovino en piensos animales utilizando los cebadores diseñados por Tartaglia y col. (56). En este ensayo las muestras se sometían a un tratamiento con Chelex-100 (Bio-Rad laboratorios, Hercules, California, EE.UU.) para eliminar posibles inhibidores de la reacción de PCR. Para evaluar la aplicabilidad de la

técnicas de LABORATORIO

técnica se analizaron muestras de piensos para roedores que contenían entre un 0,04-2% de carne de vaca, así como muestras de piensos comerciales que contenían entre un 0,125-2% de harinas de carne y hueso de vaca. Los resultados de este estudio demostraron la capacidad de los cebadores específicos para detectar hasta un 0,04% de carne de vaca y un 0,125% de harinas de vaca en los piensos analizados. Krcmar y Rencova (91) evaluaron la aplicabilidad de una técnica de PCR que utilizaba los cebadores diseñados por Tartaglia y col. (56) para detectar la presencia de harinas de carne y hueso de vaca en piensos y harinas de pescado. Para ello analizaron 44 muestras de harinas de pescado producidas en Perú y 30 muestras de piensos para vacas producidas en Chequia. Los resultados de este estudio, similares a los obtenidos por Tartaglia y col. (56), demostraron la capacidad de la técnica de PCR para detectar hasta un 0,125% de harinas de carne y hueso de vaca en las muestras analizadas. De forma similar, Myers y col. (92) publicaron los resultados obtenidos en un estudio desarrollado por cuatro laboratorios de la Unión Europea (UE) para validar la técnica de PCR desarrollada por Tartaglia y col. (56). Para ello, se analizaron 90 muestras de piensos vegetales que contenían entre un 0,125-2% de harinas de vaca. Los resultados de este trabajo demostraron que la técnica de PCR desarrollada por Tartaglia y col.

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control alimentario

(56) era una herramienta eficaz para la detección de hasta un 0,125% de harinas de vaca en piensos. Colgan y col. (1) detectaron la presencia de ADN de vaca, oveja, cerdo y pollo en harinas de carne y hueso comerciales obtenidas de siete industrias irlandesas. Para ello, utilizaron los cebadores específicos de vaca diseñados por Tartaglia y col. (56) y diseñaron tres parejas de cebadores específicos de especie (oveja, cerdo y pollo) en el gen que codifica la subunidad 8 de la ATPasa. El límite de detección del ensayo fue del 0,3% para las muestras que contenían ADN de oveja y vaca y del 1% para las muestras con ADN de cerdo. De forma similar, Lahiff y col. (58) utilizaron cebadores específicos para oveja, cerdo y pollo junto con los cebadores específicos para vaca diseñados por Tartaglia y col. (56) en una técnica de PCR para detectar la presencia de estas especies en harinas animales tratadas a 133 °C durante 20 minutos, con un límite de detección del 1% para vaca y cerdo y del 5% para oveja y pollo. Además, estos autores compararon la calidad y cantidad del ADN extraído a partir de las harinas animales utilizando dos métodos de extracción: el kit comercial QIAamp Blood kit (Qiagen, Hilden, Alemania) y el protocolo de extracción desarrollado por Boom y col. (93). El kit comercial demostró ser el más adecuado al proporcionar mayor cantidad de ADN y de mejor calidad que el método de Boom y col. (93).

Kingombe y col. (94) compararon la técnica de PCR con cebadores específicos de vaca diseñados por Matsunaga y col. (62) y la amplificación de un fragmento de 464 pb del gen citocromo b mediante la pareja de cebadores diseñada por Wolf y col. (95), con el método inmunoenzimático recomendado por la UE (Cortecs Diagnostics Ltd., Flintshire, Inglaterra), para controlar y evaluar la eficacia del tratamiento térmico aplicado a las harinas animales. Para ello, se analizaron 204 muestras de harinas de carne y hueso, carne y pescado, así como piensos compuestos. Los dos métodos de análisis permitieron diferenciar entre los distintos tratamientos térmicos aplicados a las harinas, dado que la degradación de las proteínas y del ADN de las muestras tratadas a mayor temperatura dieron siempre resultados negativos. Los resultados de este estudio también demostraron la capacidad de las técnicas de PCR para detectar hasta un 0,5% de harinas animales sometidas a tratamientos térmicos inferiores a los 133 °C en los piensos compuestos y en las harinas de pescado analizadas. Calvo y col. (96) evaluaron la capacidad de la PCR para detectar e identificar la presencia de harinas de carne y hueso de vaca en piensos. En este estudio se utilizó una pareja de cebadores que amplifica un fragmento de 84 pb en el satélite bovino 1709, para analizar muestras de piensos compuestos que contenían entre un 0,001-75% de harinas de carne y hueso de vaca tratadas a 133 °C durante 30 minutos. Los resultados de este estudio demostraron la capacidad de la técnica para detectar un 1% de harinas de vaca.

control alimentario

Tajima y col. (97) diseñaron tres parejas de cebadores específicos de rumiantes (vaca, oveja y cabra), suidos (cerdo y jabalí) y aves (pollo y codorniz) en los elementos nucleares dispersos cortos (SINE, Short Interspersed Nuclear Elements) Art2 y PRE-1, así como en el elemento nuclear disperso largo (LINE, Long Interspersed Nuclear Element) CR1, respectivamente, para detectar la presencia de harinas de carne y hueso en piensos. El límite de detección del ensayo tras el análisis de muestras de piensos para ganado bovino que contenían entre un 0,001-1% de harinas de carne y hueso fue del 0,01%. Bellagamba y col. (98) emplearon el gen 12S ARNr para la amplificación mediante PCR de fragmentos de ADN específicos de rumiantes (231 pb), cerdo (186 pb) y aves de corral (256 pb) con el fin de detectar la adición de entre un 0,125 y un 1% de harinas de carne y hueso de estas especies (vaca, cabra, oveja, cerdo y pollo) tratadas a 130 °C y 2 bar durante 40 minutos, en harinas de pescado. El límite de detección del ensayo fue del 0,125% para las muestras que contenían harinas de vaca, oveja, cerdo y pollo y del 0,5% para las harinas de cabra. Asimismo, desarrollaron una técnica de PCR múltiple para la detección simultánea de tejidos de rumiantes y cerdo en harinas de pescado, con un límite de detección del 0,25%.

a) 133 °C y 3 bar durante 20 minutos, b) 130 °C y 2,7 bar durante 20 minutos, c) 122 °C y 2 bar durante 20 minutos y d) calentamiento progresivo de 90-140 °C durante 105 minutos. El empleo de la pareja de cebadores que amplificaba el fragmento de 147 pb permitió detectar la presencia de vaca incluso en las muestras sometidas al tratamiento térmico más intenso (133 °C y 3 bar durante 20 minutos), mientras que con los cebadores diseñados para amplificar fragmentos de 271 y 240 pb solo fue posible el análisis de las muestras sometidas a las condiciones de procesado menos intensas (tratamientos b, c y d). Gao y col. (102) desarrollaron una técnica de PCR múltiple para la detección de harinas de carne y hueso de vaca en piensos, utilizando cebadores específicos de vaca que amplificaban un fragmento de 110 pb del gen que codifica para la lactoferrina y una pareja de cebadores universales que amplificaba un fragmento de 137 pb del gen ribosomal 18S ARN a partir del ADN de todos los organismos eucariotas. El análisis de muestras de harinas de pescado que contenían entre un 0,005-50% de harinas de carne y hueso de vaca tratadas a 133 °C durante 33 minutos, mostró la capacidad de la técnica para detectar hasta un 0,02% de harinas bovinas.

Bottero y col. (99, 100) diseñaron cebadores específicos de vertebrados en el gen mitocondrial 16S ARNr para detectar e identificar en piensos la presencia de tejidos de rumiantes (vaca, oveja y cabra), así como de cerdo, caballo, conejo, pollo, trucha y anchoa. Estos cebadores permitieron la amplificación de regiones de longitud específica cuando se analizaron harinas de carne y hueso sometidas a tratamientos térmicos entre 134,4141,9 °C y 3,03-4,03 bar durante 24 minutos. El límite de detección del ensayo al analizar harinas vegetales que contenían harinas de pescado fue del 0,06%.

Krcmar y Rencova (103) amplificaron fragmentos comprendidos entre 145 y 313 pb de los genes mitocondriales ARNtLys y las subunidades 6 y 8 de la ATPasa para detectar ADN de vaca, oveja, cerdo y pollo en piensos. Los cebadores diseñados permitieron la detección de hasta un 0,01% de harinas de estas especies animales tratadas a 133 °C y 3 bar durante 30 minutos. Estos autores también desarrollaron un ensayo de PCR múltiple que permitía la detección simultánea de un 5% de harinas de oveja y un 0,01% de harinas de pollo, o de un 5% de harinas de vaca y un 0,01% de harinas de cerdo en piensos compuestos.

Cheng y col. (59) utilizaron los cebadores diseñados por Tartaglia y col. (56) y Lahiff y col. (58) en una técnica de PCR para detectar e identificar la presencia de hasta un 1% de harinas de carne y hueso animales (vaca, oveja, pollo y cerdo) en piensos para rumiantes. Además, desarrollaron una técnica de PCR múltiple para la detección simultánea de harinas de cerdo y vaca en los piensos. La aplicabilidad de estas técnicas al control rutinario de los piensos se evaluó mediante el análisis de 277 muestras de piensos para rumiantes producidos en Taiwán durante 2001 y 2002. Los resultados de este estudio mostraron que entre un 6,9-8,7% de las muestras analizadas contenían harinas de carne y hueso.

Myers y col. (60) detectaron la presencia de vaca, oveja, cabra, ciervo, alce, caballo y cerdo en piensos animales mediante la amplificación por PCR de un fragmento conservado de ADN mitocondrial de 271 pb situado entre la subunidad citocromo oxidasa II y la ARNtLys. La pareja de cebadores diseñada permitió la detección de harinas animales en piensos que contenían un 2% de harinas de carne y hueso de vaca y un 10% de harinas de sangre de cerdo.

Frezza y col. (101) evaluaron la influencia del tratamiento térmico aplicado a las harinas animales en la capacidad de una técnica de PCR competitiva para detectar la presencia de componentes de origen bovino. Para ello, recurrieron a la amplificación específica de tres fragmentos de 271, 240 y 147 pb en el gen que codifica la subunidad 8 de la ATPasa y la región amino-terminal de la subunidad 6 de la ATPasa, a partir de muestras de harinas animales sometidas a cuatro tratamientos térmicos diferentes:

técnicas de LABORATORIO

Colombo y col. (61) llevaron a cabo un estudio para evaluar la capacidad de la técnica de PCR múltiple (62) y del análisis por PCR-RFLP (33) para detectar la presencia de vaca, oveja, cabra, cerdo y pollo en piensos. Ambas técnicas permitieron la detección y diferenciación de las harinas de carne. Sin embargo, cuando se analizaron muestras de piensos compuestos, la técnica de PCR múltiple demostró ser la más adecuada para la detección de componentes de origen animal al no originar falsos negativos. Dalmasso y col. (2) aplicaron una técnica de PCR múltiple para detectar la presencia de ADN de cerdo, rumiantes, peces y aves en piensos, utilizando cebadores específicos que amplificaban fragmentos comprendidos entre 104 y 290 pb de los genes mitocondriales 12S ARNr y 16S ARNr. La sensibilidad de la técnica

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control alimentario

se evaluó mediante el análisis de harinas vegetales (maíz y soja) que contenían entre un 0,1-1% de harinas de sangre de vaca, obteniéndose un límite de detección del 0,1%. Gao y col. (88) emplearon con éxito la técnica de PCR para la detección e identificación de sangre y tejido muscular de perro en piensos. Para ello, diseñaron cebadores específicos que amplificaban un fragmento de 213 pb en la región D-loop a partir del ADN de perro. La sensibilidad de la técnica se evaluó mediante el análisis de muestras de harinas de carne y hueso de vaca que contenían entre un 0,01-10% de harinas de carne de perro tratadas a 133 °C durante 33 minutos, obteniéndose un límite de detección del 0,05%. Gizzi y col. (104) llevaron a cabo un estudio comparativo sobre la determinación de proteínas animales transformadas en piensos. En este trabajo se analizaron ocho tipos de piensos vegetales que contenían diferentes porcentajes de harinas de pescado, aves y harinas de carne y hueso de mamíferos tratadas a 127 y 134 °C, con el fin de evaluar la capacidad de la técnica de PCR, el análisis microscópico, el inmunoensayo y la cromatografía líquida para detectar la presencia en los piensos de proteínas totales (harinas de animales terrestres y pescado), así como para diferenciar entre las harinas de carne y hueso de mamíferos, rumiantes y cerdo. En lo referente a las técnicas de PCR, en este estudio se evaluó el empleo de un ensayo de PCR convencional con visualización de los fragmentos am-

plificados por electroforesis en gel de agarosa, una técnica de PCRELISA y un ensayo de PCR en tiempo real con SYBR® Green. Los resultados obtenidos mostraron la capacidad de las técnicas analizadas para detectar e identificar la presencia de proteínas de aves y pescado. Sin embargo, la diferenciación entre harinas de mamíferos, rumiantes y cerdo, así como la detección de bajos porcentajes de proteínas animales totales no siempre resultó posible al producirse un elevado número de falsos positivos y negativos. Posteriormente, Hormisch (105) también comparó la técnica de PCR con el análisis microscópico para la detección de un 0,1-2% de harinas animales (vaca, cerdo, oveja, pollo y arenque) en piensos destinados a la alimentación animal. La PCR permitió detectar bajos porcentajes de harinas de vaca, cerdo, oveja y pollo en las muestras estudiadas. Sin embargo, cuando se analizaron piensos que contenían harinas de pescado se obtuvieron resultados negativos. Los resultados de este estudio demostraron la conveniencia del empleo simultáneo de ambas técnicas en el análisis rutinario de los piensos. Kusama y col. (106) desarrollaron una técnica de PCR para detectar la presencia de harinas animales en piensos para rumiantes y determinar su origen animal. Para ello, diseñaron cebadores específicos de mamíferos que amplificaban vaca, oveja, cabra, ciervo, cerdo, caballo, conejo y ballena, cebadores específicos de rumiantes para amplificar vaca, oveja, cabra y ciervo, así como cebadores especie-específicos para vaca, oveja y cabra

control alimentario

en el gen que codifica la subunidad 8 de la ATPasa. El límite de detección de la técnica al analizar muestras de piensos compuestos que contenían entre un 0,01-10% de harinas de carne y hueso de vaca fue del 0,01% para los cebadores de vaca y mamíferos y del 0,1% para los cebadores de rumiantes. Posteriormente, Toyoda y col. (107) utilizaron los cebadores específicos de vaca diseñados por Kusama y col. (106) para desarrollar un método de PCR que permitiera la detección específica de harinas de carne y hueso de vaca y la diferenciación entre estas harinas y otros componentes de origen bovino presentes en los piensos. El tratamiento de las muestras con una solución de hipoclorito sódico y de EDTA-proteinasa K, permitió detectar hasta un 0,1% de harinas de carne y hueso de vaca sin que las posibles contaminaciones con saliva, leche u otros materiales bovinos afectaran a la especificidad del método. Natonek y col. (108) emplearon una técnica de ELISA con anticuerpos monoclonales y policlonales, además de una técnica de PCR que utilizaba cebadores específicos de vaca (56), así como de oveja y cerdo (58) para detectar la presencia de harinas de carne y hueso en piensos. El análisis de las muestras que contenían un 0, 2, y 4% de harinas de vaca, cerdo y oveja, demostró la capacidad de ambos ensayos para detectar pequeños porcentajes de harinas animales. Sin embargo, con la técnica de ELISA la identificación del origen animal de las harinas detectadas no fue posible. Prado y col. (109) aplicaron la técnica de PCR y el análisis microscópico para detectar la presencia de harinas de hueso, plumas, carne, hígado, grasa y sangre en harinas vegetales (maíz y trigo). Los resultados obtenidos demostraron la capacidad del ensayo de PCR para detectar entre un 0,5-1% de harinas animales en muestras tratadas a 115 °C durante 20 minutos. Sin embargo, cuando se analizaron harinas sometidas a un tratamiento más intenso (133 °C durante 20 minutos) la técnica de PCR solo permitió la detección de harinas de hueso e hígado. Margry y col. (110) utilizaron tres kits comerciales de ELISA y dos de PCR: FoodExpert ID, DNA chip technique (BioMérieux, Marcyl’Etoile, Francia); SureFood Animal-ID, PCR-ELISA (Congen Biotechnologie GmbH, Berlín, Alemania); MELlSA-TEK, ELISA (ELISA Technologies Inc., Gainesville, Florida, EE.UU.); AgriScreen, dipstick immunoassay (Neogen Corporation, Lansing, Michigan, EE.UU.) y FeedChek, lateral flow test (Strategic Diagnostics, Inc., Newark, Delaware, EE.UU.), para detectar e identificar subproductos de vaca, oveja, cerdo y aves tratados a 133, 137, 141, 145 y 159 °C en piensos. En lo referente a los kits de PCR, el FoodExpert ID permitió detectar hasta un 2% de harinas animales, independientemente del tratamiento térmico aplicado a los piensos, mientras que al analizar las muestras tratada a más de 133 °C con el kit SureFood Animal-ID se obtuvieron resultados negativos. Pascoal y col. (64) diseñaron una pareja de cebadores específicos de vaca en el gen citocromo b para detectar ADN bovino en subproductos animales. Los cebadores diseñados permitieron la amplificación de un fragmento de 115 pb a partir de muestras

técnicas de LABORATORIO

tratadas a 133 °C y 3 bar durante 20 minutos. El límite de detección del ensayo al analizar harinas vegetales (trigo) que contenían tejido muscular de vaca fue del 0,025%. Yancy y col. (111) evaluaron la aplicabilidad del método de extracción de ADN silica-GSCN validado por Myers y col. (92) y de un método de extracción que utiliza el kit forense comercial DNA forensic kit (Invitek GmbH, Berlín, Alemania), para el análisis de piensos mediante una técnica de PCR con los cebadores específicos diseñados por Myers y col. (112). Para ello, se analizaron muestras de piensos para vacas lecheras que contenían entre un 0,006-2% de harinas de carne y hueso de vaca, oveja y cerdo sometidas a tratamientos térmicos entre 125-131 °C a presión atmosférica durante 30 minutos. Los resultados obtenidos demostraron la capacidad de los dos métodos de extracción para detectar hasta un 0,06% de harinas animales en las muestras sometidas a una incubación previa a la extracción de 2 horas. Además, el kit comercial permitió detectar hasta un 0,03% de harinas de carne y hueso de vaca en menos de 8 horas, aumentando este límite de detección al 0,007% cuando las muestras se sometieron a una incubación previa de 16 horas. Posteriormente, Myers y col. (113) llevaron a cabo la validación de este método de extracción, así como de tres parejas de cebadores específicos de vaca (56), cerdo y oveja (58) y de la pareja de cebadores universales que amplificaban un fragmento conservado de ADN mitocondrial de 271 pb en vaca, oveja, cabra, cerdo, caballo, ciervo y alce (60), en un estudio interlaboratorio desarrollado por diez centros de la UE. En este trabajo se analizaron 30 muestras de piensos compuestos sin harinas animales, 30 muestras de piensos que contenían un 0,1% de harinas de oveja, así como 60 muestras que contenían un 0,1% de harinas de carne y hueso de vaca y cerdo sometidas a tratamientos térmicos comprendidos entre 125-131 °C durante 30 minutos. Los resultados obtenidos demostraron la capacidad del método de extracción y de los cebadores universales y específicos de cerdo y vaca para detectar hasta un 0,1% de harinas animales en piensos. Sin embargo, la detección de harinas de oveja con los cebadores específicos para esta especie no resultó posible. Ha y col. (114) emplearon con éxito la técnica de PCR para la detección de harinas de carne y hueso de rumiantes en piensos. Para ello diseñaron cebadores específicos de vaca, oveja, cabra y ciervo que amplificaban fragmentos de pequeño tamaño (menos de 110 pb) en los genes mitocondriales 12S ARNr, ARNtval y 16S ARNr. La sensibilidad de la técnica se evaluó mediante el análisis de muestras de piensos vegetales que contenían entre un 0,05 y un 10% de harinas de carne y hueso de estas especies de rumiantes, obteniéndose un límite de detección del 0,05%. Nomura y col. (115) desarrollaron una técnica de PCR para detectar la presencia de harinas de pescado en piensos mediante el empleo de una pareja de cebadores específicos para sardina, atún barrilete, atún de aleta amarilla, caballa, salmón, paparda del pacífico, trucha arcoíris, anchoa, bacalao y jurel. Los resultados obtenidos demostraron la capacidad del ensayo para detectar entre el 0,01 y el 0,001% de tejido de estas especies en piensos para rumiantes.

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control alimentario

Corona y col. (116) desarrollaron una técnica de PCR para detectar la presencia de harinas de hueso en piensos. Para ello, combinaron un método de extracción de ADN que utiliza tiocianato de guanidinio, con el diseño de cebadores específicos de vaca y el empleo de los cebadores de oveja, cabra y cerdo diseñados por Lahiff y col. (58). El límite de detección del ensayo fue del 1% para los cebadores de vaca y del 1,5% para los cebadores de oveja, cabra y cerdo. Frezza y col. (117) detectaron la presencia de harinas de carne y hueso de vaca, oveja, cerdo y pollo en piensos animales mediante la amplificación específica de fragmentos de 112, 104, 114 y 99 pb, respectivamente de los genes de la subunidad 8 de la ATPasa, 16S ARNr, y citocromo b. El límite de detección del ensayo fue del 0,2%. Natonek-Wisniewska (118) llevó a cabo la validación de un ensayo de PCR para la detección de harinas animales en piensos mediante la amplificación de un fragmento específico de 271 pb de los genes de las subunidades 6 y 8 de la ATPasa, en un estudio en el que se analizaron 30 muestras de piensos compuestos que contenían entre un 0-2% de harinas animales. Los resultados demostraron la capacidad de la técnica para detectar hasta un 0,125% de harinas animales en los piensos analizados.

Weiner y Kwiatek (119) compararon la capacidad del análisis microscópico y de una técnica de PCR con cebadores específicos de vaca, pollo y cerdo diseñados por Tartaglia y col. (56 y Colgan y col. (1) para detectar la presencia de harinas animales en piensos. Para ello, analizaron 43 muestras de harinas vegetales (girasol, soja, maíz, trigo, cebada y colza) y 84 muestras de piensos para animales rumiantes y no rumiantes que contenían entre un 0,1 y un 2% de harinas de carne y hueso, sangre de cerdo, despojos de aves, cuernos, plumas y harinas de pescado. Los resultados de este estudio demostraron la capacidad del ensayo de PCR para detectar e identificar hasta un 0,2% de harinas de vaca y cerdo, así como un 0,1% de harinas de aves en las muestras analizadas. Shinoda y col. (120) publicaron los resultados obtenidos en un estudio que utilizaba el sistema informático GSPRIMER (http://www.famic.go.jp/ffis/feed/gsprimer/) para el diseño de cebadores capaces de detectar la presencia de harinas animales en piensos. Las parejas de cebadores específicos de oveja, cabra y cerdo, así como de rumiantes, diseñados con ayuda de este programa informático en los genes mitocondriales 16S ARNr, ARNtLys, ARNtAla, ARNtAsn, NADH5 y las subunidades 6 y 8 de la ATPasa se utilizaron para analizar muestras de piensos comerciales, así como harinas de pescado, pollo, cerdo y plumas. Los resultados obtenidos demostraron la capacidad del programa GSPRIMER para diseñar cebadores que amplifican fragmentos

control alimentario

específicos de pequeño tamaño a partir de las harinas animales. Cuando se analizaron piensos vegetales que contenían entre un 0,001 y un1% de harinas de vaca, los cebadores específicos de rumiantes permitieron detectar hasta un 0,01% de harinas de carne y hueso. En otro trabajo posterior, estos autores utilizaron el sistema informático GSPRIMER para diseñar cebadores específicos de las principales especies de cetáceos, capaces de detectar la presencia de harinas de carne de ballena en harinas de carne y hueso de cerdo. Los resultados del estudio mostraron la capacidad del ensayo de PCR para detectar hasta un 0,1% de harinas de ballena tratadas a 133 °C durante 20 minutos (121).

nas de pescado, utilizando cebadores diseñados en el gen mitocondrial 12S ARNr. Los resultados obtenidos demostraron la capacidad del ensayo para detectar entre un 0,1-3% de ADN diana en las muestras analizadas. Debido a su sencillez, especificidad y sensibilidad la técnica de PCR con cebadores especie-específicos diseñados para la amplificación selectiva de fragmentos de pequeño tamaño, es un método eficaz para identificar la presencia de harinas animales en piensos, incluso a niveles bajos de sustitución. Además, la interpretación inequívoca de los resultados se puede realizar visualmente, sin necesidad de emplear instrumentos complejos. Si lo comparamos con otras técnicas genéticas alternativas, la reacción de PCR ofrece las ventajas de ser más rápida, barata y útil para el análisis de un gran número de muestras. Su principal inconveniente es la necesidad de conocer previamente las secuencias de las especies que se pretenden diferenciar, a fin de poder diseñar oligonucleótidos específicos para cada una de ellas. En la actualidad, este proceso es más sencillo debido a que las bases de datos disponibles son cada vez más completas. No obstante, en ocasiones la identificación es difícil de llevar a cabo porque hay algunas especies animales de las que no se conoce ninguna secuencia y también, por la dificultad que conlleva el diseño de cebadores que sean específicos para una sola especie (64, 124).

Yoshida y col. (122) desarrollaron un ensayo de PCR para detectar harinas de carne y hueso de cerdo en piensos animales. Para ello, diseñaron dos parejas de cebadores específicos en los genes de las subunidades 6 y 8 de la ATPasa que amplificaban fragmentos de 83 y 126 pb, respectivamente. El límite de detección de la técnica al analizar muestras de harinas de carne y hueso de cerdo, pollo y pescado, así como de piensos para ganado bovino fue del 0,01% para los cebadores diseñados en la subunidades 8 de la ATPasa y de 0,001% para los cebadores diseñados en la subunidad 6. Farajollahi y col. (123) aplicaron una técnica de PCR competitivo para detectar ADN de aves en 30 muestras comerciales de hari-

Tabla 2. Principales investigadores y laboratorios implicados en la detección e identificación de componentes de origen animal en piensos mediante técnicas de PCR con cebadores específicos

INVESTIGADORES

LABORATORIO/ORGANIZACIÓN

CIUDAD

PAÍS

Gizzi, G. y col.

Food and Feed Unit. Institute for Reference Materials and Measurements (IRMM) European Commission Joint Research Centre (EC-JRC)

Geel

Bélgica

Baeten, V. y col.

Department Quality of Agricultural Products. Walloon Agricultural Research Centre (CRA-W)

Gembloux

Bélgica

Armour, J. y col.

Canadian Food Inspection Agency (CFIA)

Ottawa

Canadá

Xu, B.-L. y col.

China Import and Export Commodity Inspection Technology Institute

Beijing

China

Gao, H.-W. y col.

Division of Food Administration. Qingdao Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau

Qingdao

China

Zhang, D.-B. y col.

Shanghai Key Laboratory of Agricultural Genetics and Breeding. Shanghai Academy of Agricultural Sciences. Agro-Biotech Research Center

Shanghai

China

Nam, Y.S. y col.

Kogenebioteck

Chuksun-dong

Corea

Jung, W.T. y col.

National Livestock Research Institute. Rural Development Administration

Omokchun-dong

Corea

Ha, J.C. y col.

School of Agricultural Biotechnology and Center for Agricultural Biomaterials. Seoul National University

Sillim-dong

Corea

Lleonard, R. y col.

Center of Genetic Engineering and Biotechnology

La Habana

Cuba

Corona, B. y col.

National Centre for Animal and Plant Health (CENSA)

S. José de las Lajas

Cuba

Martín, R. y col.

Departamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos. Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense de Madrid

Madrid

España

Pascoal, A. y col.

Departamento de Química Analítica, Nutrición y Bromatología. Facultad de Veterinaria. Universidad de Santiago de Compostela

Santiago de Compostela España

Calvo, J.H. y col.

Laboratorio de Genética Bioquímica (LAGENBIO). Facultad de Veterinaria. Universidad de Zaragoza

Zaragoza

España

Colgan, S. y col.

Department of Agricultural and Food Engineering. University College Dublin

Dublín

Irlanda (pasa a la página siguiente)

técnicas de LABORATORIO

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control alimentario TABLA 2 (continuación) O'Brien, L. y col.

National Diagnostics Centre. BioResearch Ireland. National University of Ireland

Galway

Irlanda

Bellagamba, F. y col.

Dipartimento di Scienze e Tecnologie Veterinarie per la Sicurezza Alimentare. Facoltà di Medicina Veterinaria. Università degli Studi di Milano

Milán

Italia

Ajmone-Marsan, P. y col. Laboratorio di Genetica. Istituto di Zootecnia dell'Universitá Cattolica del Sacro Cuore

Plasencia

Italia

Bove, D. y col.

Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Mezzogiorno

Portici

Italia

Frezza, D. y col.

Dipartimento di Biologia. Universitá degli Studi di Roma Tor-Vergata

Roma

Italia

Tartaglia, M. y col.

Laboratorio di Metabolismo e Biochimica Patologica, Biologia Cellulare e Medicina Veterinaria. Istituto Superiore di Sanità (ISS)

Roma

Italia

Bottero, M.T. y col.

Dipartimento di Patologia Animale e Dipartimento di Produzioni Animali, Epidemiologia ed Ecologia. Università degli Studi di Torino

Turín

Italia

Squadrone, S. y col.

Istituto Zooprofilattico Sperimentale di Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta

Turín

Italia

Fontanella, E. y col.

Laboratorio Chimico Camera Commercio di Torino

Turín

Italia

Onodera, T. y col.

Department of Molecular Immunology. School of Agricultural and Life Science. University of Tokyo

Bunkyo-ku

Japón

Kusama, T. y col.

Fertilizer and Feed Inspection Services

Chuo-Ku

Japón

Toyoda, A. y col.

College of Agriculture. Ibaraki University

Ibaraki

Japón

Kawachi, H. y col.

Division of Applied Biosciences. Graduate School of Agriculture. Kyoto University

Kyoto

Japón

Tajima, K. y col.

National Institute of Livestock and Grassland Science

Tsukuba

Japón

Yanai, S. y col.

Society for Techno-Innovation of Agriculture, Forestry and Fisheries (STAFF)

Tsukuba

Japón

Yasue, H. y col.

National Institute of Agrobiological Science

Tsukuba

Japón

van Raamsdonk, L. y col. Institute of Food Safety (RIKILT). Wageningen University and Research Centre (WUR)

Wageningen

Países Bajos

Natonek, M. y col.

Department of Animal Immuno- and Cytogenetics. National Research Institute of Animal Production

Cracovia

Polonia

Krcmar, P. y col.

Veterinary Research Institute of Brno

Brno

Chequia

Kingombe, C.I.B. y col.

Swiss Federal Veterinary Office (SFVO)

Bern-Liebefeld Suiza

Cheng, Y.H. y col.

Department of Applied Animal Science. National I-Lan University

I-Lan

Taiwán

Wen, C.M. y col.

Department of Life Science. National Kao-Hsiung University

Kao-Hsiung

Taiwán

Ding, S.T. y col.

Department of Animal Science and Technology. National Taiwan University

Taipei

Taiwán

Younkins, R. y col.

Southeast Regional Laboratory. Office of Regulatory Affairs. U.S. Food and Drug Administration. Atlanta

EE.UU.

Mowlds, G. y col.

Pacific Region Laboratory-Northwest. Office of Regulatory Affairs. U.S. Food and Drug Administration

Bothell

EE.UU.

Madzo, S. y col.

Office of Regulatory Affairs, Food and Drug Administration. Denver District Office. Denver Federal Center

Denver

EE.UU.

Pinero, D. y col.

Eurofins Scientific Inc.

Des Moines

EE.UU.

Araneta, M. y col.

Pacific Region Laboratory-Southwest. Office of Regulatory Affairs. U.S. Food and Drug Administration

Irvine

EE.UU.

Koch, H. y col.

Northeast Regional Laboratory. Office of Regulatory Affairs. U.S. Food and Drug Administration Jamaica

EE.UU.

Wang, R.-F. y col.

Division of Microbiology. National Center for Toxicological Research. U.S. Food and Drug Administration

Jefferson

EE.UU.

Myers, M.J. y col.

Division of Animal Research (DAR). Office of Research. Center for Veterinary Medicine. U.S. Food and Drug Administration

Laurel

EE.UU.

Dove-Pettit, D.A. y col.

Department of General Services. Division of Consolidated Laboratory Services. Commonwealth of Virginia

Richmond

EE.UU.

Hoostelaere, L.A.D. y col. Division of Field Science. Office of Regulatory Affairs. U.S. Food and Drug Administration

Rockville

EE.UU.

Liu, Y. y col.

Tallahassee

EE.UU.

Department of Agriculture. Florida State University

técnicas de LABORATORIO

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Además, cuenta con oficinas o filiales propias en: • Italia. Burdinola Italia. • Francia. Burdinola France • Portugal. Burdinola Portugal • Alemania. Burdinola Deutschland • Reino Unido. Burdinola UK

fica ocupa un lugar especial. Entre las iniciativas sociales que impulsan destaca el “Premio de Investigación Burdinola”, que se encuentra en su XVI edición. Tiene una dotación económica de 24.000 euros y goza de gran prestigio en el ámbito científico.

¿Colaboran con otras empresas?

Dispone también de agentes específicos tanto en España como en el extranjero, perfectamente formados e integrados en la cadena de valor de Burdinola. En cuanto al equipo humano, Burdinola cuenta con una plantilla de 120 personas; son profesionales con un alto grado de especialización en el sector y comprometidos con el desarrollo de la organización en torno a sus distintos objetivos.

¿Puede resumir la aparición, actividad, ámbito de actuación y desarrollo de las diferentes áreas de la compañía? Es una empresa constituida en 1978 que comienza produciendo mobiliario escolar y pronto da un giro en su actividad hacia la fabricación de equipamiento de laboratorios. Partiendo de su conocimiento y experiencia va evolucionando en producto y servicio hasta convertirse en una de las empresas destacadas del sector a escala nacional y situarse internacionalmente dentro del pequeño grupo de empresas capaz de aportar soluciones tecnológicas al nivel de los laboratorios de investigación científica de última generación. Su perfil viene determinado por el compromiso de la organización con la calidad, la innovación y la participación en su entorno profesional y social. Se parte de la innovación constante en la oferta de productos y servicios y del respeto ambiental traducido en la búsqueda de soluciones para una mejor integración de las actividades del laboratorio con su entorno. Burdinola cuenta con una estructura dinámica de dirección y gestión que permite movilizar, integrar y promocionar a todo el equipo humano en torno a los objetivos de la empresa, y con un equipo multidisciplinar, en formación permanente, que investiga y busca las soluciones tecnológicamente mas avanzadas. Dentro de su compromiso, el fomento de la investigación cientí-

Burdinola ha mantenido y mantiene una colaboración abierta y estrecha con distintas empresas, así como con entes públicos y privados que nos ayudan a desarrollar nuestros grandes ejes de crecimiento futuro. Estas actividades contemplan toda la cadena de valor de la empresa. Me gustaría destacar como uno de los ejemplos más gráficos y recientes nuestra integración en el clúster del Hábitat, Oficina y Contract del País Vasco, Habic, donde desarrollamos acciones conjuntas con el resto de asociados, encaminadas a nuestra mejora en el ámbito de la internacionalización y de la innovación. Se trata de una red de colaboración que cuenta con 70 empresas del sector, además de diferentes instituciones asociadas. A su vez, pertenecemos también a la Agencia Vasca de la Innovación –Innobasque–, la Asociación de fabricantes de aparatos científicos –Grufac– y la Red Europea de Laboratorios Sostenibles –Egnaton–.

¿Cómo valora la situación del sector del laboratorio, tanto en su vertiente privada como pública? La actividad que desempeñamos no escapa a la crisis existente en el mundo. Esto se evidencia no sólo en el volumen de proyectos previstos y que en mayor o menor medida están sufriendo demoras en su ejecución, sino también en los ya existentes donde el cliente ajusta sus necesidades a un presupuesto cada vez más limitado y a lo que realmente le resulta imprescindible. Desde este punto de vista los sectores público y privado se comportan de manera similar. En cuanto a los mercados, nos encontramos con situaciones diferenciadas. Por un lado, países maduros como España, Italia, Portugal y Reino Unido han recortado fuertemente sus inversiones públicas, y esto mismo ocurre en las grandes empresas del sector farmacéutico, químico, alimentario o petroleoquímico, por citar algunos. Por otro, existen países y áreas que están teniendo un fuerte crecimiento en términos de PIB, y que son a su vez, los que más demandan actividades de desarrollo en campos como la Educación o la Sanidad, representando al mismo tiempo áreas donde empresas multinacionales o locales de los sectores mencionados están incrementando su actividad inversora.

¿Cómo se desenvuelve su firma en estas circunstancias?

El Banc de Sang i Teixits (ubicado en Barcelona) es un proyecto

Hemos reforzado nuestra actividad y presencia comercial en prácticamente todos los mercados, sabedores de que el esfuerzo colecti-

reciente de Burdinola.

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vo de la compañía debe ir orientado a la búsqueda de un mayor número de oportunidades, así como de nuevos canales de venta. Al mismo tiempo contamos con un equipo humano y una base de clientes sólida que nos permite pensar que nuestras posibilidades de alcanzar los objetivos comerciales para este año se cumplirán.

Hablemos ahora de tendencias futuras tanto en lo técnico como en lo comercial, del uso de nuevos materiales, nuevas demandas del mercado... Nuestros clientes son cada día más profesionales, conocen mejor lo que realmente quieren y están mejor informados de las distintas posibilidades y de lo que necesitan para el desarrollo de su trabajo. Por otro lado, el momento que nos está tocando vivir implica, por parte de todos, la búsqueda de soluciones utilizando alternativas eficaces y que al mismo tiempo representen un menor coste.

Sede central de Burdinola.

Creemos que hay que aprovechar esa corriente de conocimiento para desarrollar productos a nivel técnico y tecnológico, que al mismo tiempo nos permita ganar en competitividad aportando un alto valor añadido al cliente.

• Ahorro de energía. La regulación de caudal de las vitrinas u otros elementos de alto consumo energético mediante sistemas integrados diseñados por nuestra ingeniería, unido a una ergonomía perfectamente estudiada, hace de nuestro producto uno de los más eficientes y económicos del mercado.

Dentro de la amplia gama de acciones emprendidas en este sentido, destacaría aspectos como: • Seguridad: Creación de normativas que permita a los usuarios poder trabajar cada día en un ambiente más seguro en sus centros de trabajo. Burdinola es representante español del Comité Europeo de Normativa a nivel de laboratorio desde 1995, encabezando el grupo de trabajo que corresponde a la seguridad de las vitrinas de gases, producto éste que en el laboratorio se cataloga como el más sensible en cuanto a la seguridad.

• Desarrollo sostenible. La sostenibilidad como integración en un proyecto de laboratorio y edificio sostenible. En este apartado Burdinola es pionera y fundadora de la Asociación Europea EGNATON para el desarrollo de laboratorios sostenibles, donde se encuentra liderando el grupo de trabajo de investigación de materiales. • Materiales de nueva generación. Estamos implantado el sistema Cradle to Cradle en nuestros procesos de suministro de materiales y fabricación.

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Estas mejoras técnicas lo son también en el plano comercial gracias, como decía, a la difusión, conocimiento y cada vez mayor profesionalización de nuestros usuarios. Por otro lado, y aunque los canales tradicionales de comunicación con los clientes representan todavía el mayor peso en nuestras oportunidades de captación, se observa una tendencia creciente a utilizar nuevas formas que generen oportunidades de negocio. Por ello, el uso de redes sociales es un campo a explotar.

¿Qué medidas han adoptado recientemente para mejorar el servicio al cliente? A partir de los procesos clave de la empresa hemos implantado nuevos indicadores de gestión que en muchos casos están orientados a la mejora de nuestros servicios y soluciones al cliente y a nuestros mercados, implicando mejoras en la calidad de la información recibida, en las vías de entrada de la misma y en la reducción de los tiempos de respuesta.

¿Cuáles son los próximos objetivos generales de la empresa? De los objetivos de primer nivel para este año y los siguientes destacaría dos: por un lado, el mayor grado de internacionalización de la empresa ampliando nuestra presencia e incrementando el peso de los mercados internacionales en nuestros resultados. Por otro, la innovación no sólo en producto, sino también en el acercamiento al cliente, como citaba en la pregunta anterior.

Defina la situación de Burdinola en el mundo: principales zonas de influencia, mercados emergentes... Me gustaría subrayar que nuestra actividad internacional no es nueva. En este sentido cabe destacar nuestra sólida presencia en mercados europeos, especialmente donde contamos con nuestros propios recursos, como son Francia, Alemania, Italia, Reino Unido y Portugal además, claro está, del mercado nacional, donde Burdinola es un referente.

de penetración en nuevos sectores, bien a través de un reforzamiento de nuestra presencia geográfica. Estos países, que en algunos casos se pueden tildar de maduros, ofrecen todavía importantes oportunidades de crecimiento. En segundo lugar, ampliar nuestra presencia a nuevos mercados con alto potencial. Esto lo estamos llevando a cabo de manera selectiva, entendiendo que nuestra presencia debe tener carácter de permanencia y para ello nuestra política pasa por fidelizar a nuestros clientes y colaboradores desarrollando planes concretos de actuación que nos impulsen a crecimientos sostenidos, tal es el caso de mercados de áreas mencionadas anteriormente, así como los países BRIC.

¿Qué capacidades se requiere para realizar proyectos como los que Burdinola realiza a escala internacional? Sobre todo nos exige una capacidad muy alta de adaptación y una flexibilidad permanente a las necesidades de los clientes, que no en todos los casos resulta fácil de traccionar. Hay que tener en cuenta que en nuestro caso las dificultades comunes de todas las empresas exportadoras adquieren una nueva dimensión al tratarse de proyectos de larga duración y muy tecnológicos. En muchos casos estamos hablando de mercados no solo con idiomas distintos sino también con culturas y formas distintas de entender los negocios. Esto se suma a la dificultad de acceso al cliente final o al “decision maker”, siendo este acceso, en la mayoría de los casos, muy limitado. Teniendo en cuenta lo mencionado, diría que esa adaptación nos implica un intenso trabajo de selección de nuestros colaboradores externos para conseguir los más adecuados, que compartan el modelo de negocio y vean en la empresa no solo un buen producto, sino un equipo capaz de transmitir confianza y apoyo a su trabajo. En definitiva estaríamos hablando de la capacidad de integración de los distintos intervinientes de la cadena de valor de la venta, de modo que el cliente perciba una voz única. www.burdinola.com

En los últimos años, estamos recogiendo los frutos de políticas activas realizadas en otras áreas del mundo como son el área MENA (Middle East & North Africa) y Latinoamérica, donde contamos con proyectos cada vez más relevantes, tanto en número como en volumen, al mismo tiempo que una red de distribuidores y agentes cada vez más consolidada.

¿Tienen planes de ampliar su radio de acción en otras zonas del país o el extranjero? Nuestra estrategia comercial va claramente encaminada a dos grandes ejes de actuación. En primer lugar, consolidar y reforzar aún más nuestra presencia en los mercados donde actualmente estamos presentes y nuestra marca se reconoce, bien a través

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(Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

Los datos La sede central de la empresa se encuentra en la localidad de Amoroto, Bizkaia (Ctra. Lekeitio, km. 53,5 48289 Amoroto). Tel.: 34 94 684 07 66 Fax: 34 94 684 20 05 E-mail: burdinola@burdinola.com Internet: www.burdinola.com

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Noticias

BURDINOLA

Avance en la eficiencia de los laboratorios Burdinola sigue contribuyendo con su actividad a dar avances en la sostenibilidad de los laboratorios, una estrategia en la que se trabaja a escala internacional desde el conjunto del sector. La firma está implicada en impulsar la normalización, la seguridad y la calidad de los laboratorios desde hace más de 30 años, a través de su pertenencia a diversos organismos reguladores de ámbito estatal e internacional. En estos ámbitos se ha detectado la necesidad y se ha forjado la tendencia de incorporar a los criterios tradicionales otros conceptos relacionados con el ecodiseño, la eficiencia energética y, en general, la sostenibilidad de los laboratorios, como la principal estrategia de futuro. En esta línea, Burdinola está dando pasos en diversos frentes. Por un lado en su actividad enmarcada en la Asociación Europea para la Sostenibilidad de los Laboratorios (EGNATON), surgida de la colaboración de diversas empresas de referencia en el sector entre las que se encuentra Burdinola. La firma, de la mano de Iñaki Aldamiz (en la foto), encabeza uno de los 8 grupos de trabajo de investigación que se han puesto en marcha, en concreto el WG6, dedicado a la investigación de materiales. Este grupo de expertos es el encargado de definir y esta-

blecer criterios para evaluar los materiales utilizados en los laboratorios desde la perspectiva del diseño ecológico, evaluando su huella de carbono, tanto de los materiales como de los procesos. El equipo que encabeza Burdinola espera obtener como resultado un conocimiento profundo de los materiales utilizados en estas instalaciones, avanzando en el desarrollo de una nueva generación de materiales sin componentes tóxicos, "supracyclables" y con otras propiedades añadidas. Burdinola ha incorporado estos mismos criterios a la hora de abordar sus proyectos, diseñando y planificando desde la sostenibilidad nuevos espacios para la investigación científica. Entre estos proyectos se encuentra el nuevo Centro de Innovación del Grupo Italcementi, que ha obtenido el premio europeo Green Building 2010, un reconocimiento al edificio no residencial mejor diseñado y construido desde el punto de vista del entorno, la eficiencia energética y el uso de materiales de alto rendimiento. El nuevo centro es un edificio diseñado por el arquitecto estadounidense Richard Meier en las afueras de Bérgamo, en Italia. El edificio está planteado para reducir sus niveles de consumo de energía hasta un 60% por debajo

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de la exigencia normativa en vigor, gracias a los métodos y materiales utilizados y al uso de fuentes de energía renovables. Cuenta con 11.000 m2, de los cuales 7.500 m2 están destinados a los laboratorios equipados por Burdinola de acuerdo a los requisitos más exigentes en términos de ahorro de energía, calidad arquitectónica e innovación. En estas instalaciones trabajan más de 100 investigadores en el desarrollo de nuevos materiales de construcción. El premio Green Building se enmarca en el programa del mismo nombre iniciado en el año 2004 por la Comisión Europea en el marco del Programa de Energía Inteligente para Europa. Tiene por objeto fomentar la eficiencia energética y ampliar la integración de las energías renovables en edificios no residenciales.

www.burdinola.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

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ENAC

ENAC acredita un laboratorio para ensayos de alérgenos ENAC, Entidad Nacional de Acreditación, ha concedido al laboratorio de Tortosa (Tarragona), perteneciente a la Agència de Protecció de la Salut (Servicio Regional de las Tierras del Ebro), la acreditación para la detección y cuantificación de cacahuete y caseína en alimentos. El procedimiento analítico acreditado es un método ELISA, validado en el laboratorio siguiendo las recomendaciones de la AOAC (Association of Official Analytical Chemists), que consiste en la extracción de la fracción proteica de la muestra para, posteriormente, proceder al enzimoinmunoensayo, la detección y

la cuantificación de la proteína alergénica. La gran ventaja de este método es su capacidad de detectar directamente la proteína alergénica en el producto analizado en el plazo de unas horas. Las reacciones adversas a los alimentos, alergias e intolerancias alimentarias, constituyen un problema de salud emergente. La incidencia de estas patologías presenta un aumento en los últimos años: la prevalencia de las alergias alimentarias se sitúa aproximadamente en el 1-3% de la población adulta y el 46% de la infantil. Como es sabido, la manera más eficaz de prevenir las reacciones por alergias e

intolerancias alimentarias es eliminar de la dieta de las personas sensibles los componentes que desencadenan el efecto adverso. En este contexto, el etiquetado de los alimentos es clave y se convierte en un elemento imprescindible de seguridad alimentaria. Por ello, el Real Decreto 1245/2008 establece una lista de ingredientes que se deben indicar obligatoriamente en la etiqueta de los alimentos. Estos ingredientes dan lugar a la mayoría de las reacciones adversas a los alimentos en la Unión Europea.

www.enac.es

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INYCOM

Ochenta y cuatro asistentes al ciclo de seminarios TOC El ciclo de seminarios TOC (Carbono Orgánico Total) organizado por Inycom ha constituido un éxito, contando con 84

asistentes. Durante marzo y abril Inycom presentó la nueva línea de analizadores TOC de Analytik Jena y sus aplicaciones en Badajoz, Madrid, Zaragoza, Sevilla, Castellón, Valencia, Barcelona y Bilbao. Los asistentes a estos actos fueron, en su mayoría, jefes y técnicos de laboratorio que desempeñan su labor en empresas públicas o universidades. En menor medida participaron también profesores universitarios, doctorandos y técnicos de laboratorio del sector privado. La nueva serie multi N/C de Analytik Jena es una potente familia de analizadores con excelentes prestaciones para el análisis simultáneo, y totalmente automático, de carbono (TC, TOC, TIC, NPOC, POC) y nitrógeno total. Entre las características más destacables de estos equipos se encuentran las siguientes: • Exclusivo sistema de control de flujo

•

(VITA), que permite obtener extraordinaria precisión y exactitud en el análisis Innovador detector multicanal NDIR con tecnología mejorada de radiación focalizada Gran capacidad de oxidación, bien sea mediante combustión catalítica a alta temperatura, o mediante oxidación UV Está disponible también en la versión “pharma” indicado para determinar TOC en agua ultra pura, cumpliendo requerimientos USP 25 para la industria farmacéutica Los seis modelos diferentes, junto con numerosos accesorios y muestreadores automáticos diferentes, configuran la gama más amplia del mercado.

www.inycom.es

EMPRESAS

Inycom acuerda con Till Photonics la distribución en España de equipos de microscopia de fluorescencia Inycom ha firmado un contrato de alcance nacional con la alemana T ill Photonics, por el que comercializará su equipamiento y accesorios para microscopia de fluorescencia. Asimismo, ofrecerá el servicio técnico de los equipos comercializados. Con una dilatada experiencia como fabricante, Till Photonics es hoy uno de los más destacados proveedores del mundo de equipamiento de microscopia de fluorescencia y de soluciones completas llave en mano en el ámbito de los sistemas de imágenes y la fotometría. Sus equipos se dirigen a sectores como la neurobiología, biología celular, biomedicina y farmacología. Con este contrato de distribución y su alcance, Inycom se convierte en un referente a nacional en este tipo de equipamiento, a la vez que aprovecha su experiencia

de casi 30 años como proveedor de soluciones integrales para laboratorios. Inycom comercializa equipamiento de análisis para laboratorios, posicionándose en laboratorios de control de calidad, de investigación, laboratorios clínicos y laboratorios de docencia. Además de esta nueva línea de microscopia de fluorescencia, Inycom ofrece a sus clientes equipos para análisis alimentario, aparatos de uso general, biotecnología, caracterización de partículas, instrumentación analítica, equipos para investigación celular, manejo de líquidos, análisis de materiales, mobiliario de laboratorio, preparación de muestras, purificación de agua, refractometría y polarimetría. A través de su departamento de asistencia posventa, Inycom ofrece cobertura integral, ágil y personalizada en todo el territorio nacional para todo el equipa-

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miento que distribuye en exclusiva. Por otro lado, a través de la Unidad de Negocio de TIC, la empresa ofrece soluciones comerciales y de negocio, integración de aplicaciones, infraestructura de sistemas y comunicaciones, mantenimiento microinformático, Call Center, soluciones de inteligencia en el negocio y desarrollo de aplicaciones a medida, entre otros servicios. Además, Inycom comercializa equipos para entornos hospitalarios y el mundo de la salud, destacando su acuerdo con Siemens para la distribución en prácticamente todo el territorio nacional de su gama de ultrasonidos, mamógrafos digitales, arcos quirúrgicos y equipos de rayos X portátiles. www.inycom.es www.till-photonics.com

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CLARANOR

La esterilización de los envases mediante luz pulsada s e afianza en el sector lácteo Las soluciones para la esterilización de envases de Claranor ya son bien conocidas entre los productores de bebidas, sobre todo porque entre sus clientes se encuentra Nestlé Waters. Bien posicionada en este mercado desde 2004, Claranor propone ahora al sector lácteo una amplia y fiable gama de máquinas para la esterilización en línea de envases. Basados en la tecnología de luz pulsada, que destruye los microorganismos a base de flashes de luz intensa generados por lámparas de xenón, los equipos Claranor están formados por: • un módulo electrónico que está destinado a generar y controlar los flashes. Un sistema de enfriamiento integrado permite la regulación de la temperatura del agua en el circuito de las lámparas • una cavidad óptica que alberga las lámparas y reflectores de aluminio asociados. Su funcionamiento es muy sencillo. La energía se acumula en un condensador, y una señal de alta tensión inicia la formación del arco eléctrico (gas ionizado sometido a altas temperaturas) que propaga un flash de luminosidad intensa. Claranor prefiere utilizar el xenón por su capacidad

para convertir la energía eléctrica en energía luminosa. La potencia máxima de un flash es de alrededor de 1 megavatio (o de 1 kW por cm2 tratado). Los flashes presentan un espectro continuo, rico en UV. Su duración es de tan solo unos cientos de microsegundos, dado que la energía intensa liberada en un tiempo muy corto acentúa este primer efecto. La acción de esterilización se produce cuando los rayos UV modifican el ADN de las células que constituyen los microorganismos. Su metabolismo se altera y esto entraña su muerte. La esterilización mediante luz pulsada no consume agua, ni utiliza producto químico alguno, y puede ser integrada fácilmente en cualquier línea de envasado nueva o en proceso de reconversión. Estas ventajas son importantes en comparación con las tecnologías químicas (peróxido, ácido peracético) que suelen usarse para lograr unos índices equivalentes en términos de descontaminación: entre 3 y 5 log de reducción de bacterias y mohos sobre envases como tapas y botes. Gracias a estas prestaciones, las soluciones de esterilización de Claranor permiten responder a las necesidades industriales más exigentes para el envasado de productos refrigerados, postres a ba-

se de frutas, lácteos, zumos, platos cocinados llenados en frío, agua, etc. En 2009 Claranor llevó a cabo las primeras instalaciones en líneas de producción de leche fresca, yogur líquido y postres a base de leche de grandes grupos lácteos europeos. En 2010 implantó otra decena de máquinas, que hoy están en funcionamiento o en fase de calificación. Serac, entidad destacada en el sector de llenado/taponado de envases, es uno de los usuarios industriales de las soluciones Claranor y testigo de los resultados eficaces de esta tecnología en pleno auge. Claranor y Serac expusieron sus soluciones para la industria láctea y de bebidas a los visitantes del salón Interpack, celebrado en Düsseldorf (Alemania) del 12 al 18 de mayo.

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BINDER

Christian Behl, Premio Binder a la innovación de la Sociedad Alemana de Biología Celular El catedrático Dr. Christian Behl, director del Instituto de bioquímica patológica de la Universidad Johannes Gutenberg de Maguncia, recibirá este año el premio Binder a la innovación de la Sociedad Alemana de Biología Celular. El galardón lo dona la empresa Binder GmbH, con sede en Tuttlingen, y lo otorga la Sociedad Alemana de Biología Celular (DGZ). La distinción, dotada con 4.000 euros, se concede desde 1998 por proyectos de investigación destacados en el campo de la biología celular que utiliza células cultivadas como herramienta científica. El galardón no premia una única publicación, sino un enfoque de investigación innovador, en este caso la investigación de la bioquímica de células envejecidas en conexión con el desarrollo de procesos neurodegenerativos. Con la edad se produce un aumento de enfermedades neurodegenerativas, como Alzheimer, Parkinson, infartos o esclerosis lateral amiotrófica. Con el fin de comprender cómo y por qué se manifiestan estas enfermedades a una edad avanzada, el Dr. Behl (en la foto) opina que, en primer lugar, es preciso analizar el proceso de envejecimiento celular propiamente dicho, así como los cambios en procesos básicos celulares con él relacionados. En sus trabajos de investigación, ha podido mostrar que la bioquímica de células jóvenes y viejas difiere de un modo decisivo. Esto es aplicable, especialmente, al trabajo con proteínas relacionadas de forma causal con las enfermedades neurodegenerativas. El equipo de trabajo de Behl estudia en el Instituto de bioquímica patológica de la

Universidad de Maguncia los aspectos moleculares y celulares del proceso de envejecimiento con ayuda de diferentes principios celulares y moleculares.

www.binder-world.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

TELSTAR LIFE SCIENCE VALUE SERVICES

Nuevas oficinas en Argentina El centro de Telstar Life Science Value Services en Argentina ha cambiado de dirección, que ahora es la siguiente: Av. Bartolomé Mitre, 1249 1º A Florida Oeste, 81804 AKE Buenos Aires (Argentina) Tel. y Fax: (+54 11) 6091-2444 E-mail: comercial.argentina@telstar.eu

Telstar Life Science Value Services es la división de Telstar que ofrece servicios de ingeniería, consultoría, construcción y proyectos llave en mano para el mercado de ciencias de la vida (industria farmacéutica, biotecnológica, veterinaria y centros de investigación) en modelo de construcción tradicional o concepción modular. Operativa desde enero de 2011, esta división integra la actividad y experiencia de las empresas del Grupo Telstar que hasta ese momento operaban bajo las marcas SVS y TPRO, entre otras.

www.telstar-lifesciences.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

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TESTO

Las cámaras termográficas bajan de precio A partir del 16 de mayo, el fabricante alemán Instrumentos Testo baja sensiblemente el precio de toda su gama de cámaras termográficas, llegando hasta un descenso del 25%, según el modelo. Con los nuevos precios, Testo ofrece una mejor relación cali-

dad/precio en todas sus cámaras, lo que permite una amortización más rápida frente al ahorro en tareas de mantenimiento. En este momento, el acceso a la termografía Testo se inicia con la testo 875-1, con matriz de 160x120 sensores y resolución térmica de 80 mK. Para las aplicaciones más exigentes, la testo 882 con matriz de 320x240 sensores y resolución térmica de 60 mK, muestra un alto nivel de detalle y contraste a cualquier distancia. Las aplicaciones típicas de la termografía son el mantenimiento preventivo de sistemas eléctricos y mecánicos, la localización de fugas de agua, la energía solar fotovoltaica, la eficiencia energética en edificación, etc. Actualmente, Testo tiene en marcha una promoción especial para la realización de auditorías energéticas en edificación, en la cual, al adquirir una testo 882 o una testo 876 PRO, el cliente obtiene gratuitamente un instrumento multifunción para la medición de la transmitancia térmica. www.testo.es (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

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ICFO

Investigadores del centro consiguen superar el límite último de las medidas sensibles ¿Qué le ocurre al cerebro cuando hablamos en un idioma distinto al cotidiano? ¿Se puede saber con exactitud dónde hallar yacimientos de petróleo en la Tierra? La respuesta a estas y otras cuestiones se obtendría si pudieran detectarse y analizarse los más pequeños y sensibles valores de campo magnético. Un grupo de investigadores del Instituto de Ciencias Fotónicas (ICFO), adscrito a la Universitat Politècnica de Catalunya (UPC), ha podido detectar, por vez primera, señales magnéticas ultradébiles, superando un límite que antes se consideraba fundamental e insuperable. Hasta ahora, se creía que la precisión de cualquier medida estaba limitada por el llamado "límite de Heisenberg", una consecuencia del famoso "principio de incertidumbre" del alemán Werner Heisenberg. Dicho principio es la base de todos los fenómenos sorprendentes que ocurren en el mundo microscópico, en el mundo cuántico, y postula que si se conoce exactamente dónde se encuentra un objeto muy pequeño como puede ser un átomo, no se puede saber hacia dónde se dirige. Esta investigación, realizada por el grupo dirigido por el doctor Morgan Mitchell, del ICFO, se publicó el 24 de marzo en la revista Nature. Constituye un avance en la comprensión de los mecanismos que limitan todas las medidas de gran precisión en general y, en el caso del laboratorio del ICFO, se ha centrado en los campos magnéticos. Este avance, entre otras aplicaciones, puede obtener grandes resultados en la diagnosis de desórdenes del corazón o ser de gran ayuda para desvelar el comportamiento del cerebro. ¿Cuán precisa puede llegar a ser una medida? Supongamos, por ejemplo, que queremos medir la temperatura del agua caliente introduciendo un termómetro en ella. Dicho termómetro está frío y, al entrar en contacto con el agua, la enfría ligeramente. El dato obtenido sigue siendo una buena aproximación de la temperatura, pero su exactitud no llega hasta la billonésima de grado. El termómetro ha modificado casi imperceptiblemente la temperatura que estábamos midiendo.

Si queremos realizar medidas con una precisión extrema, las herramientas utilizadas tienen que ser cada vez más pequeñas, hasta alcanzar el mundo cuántico de los átomos o los fotones. Hoy en día, dichas herramientas se utilizan en instrumentos ultraprecisos, como los relojes atómicos de los satélites GPS. En el principio de Heisenberg se encuentra la explicación fundamental de lo que ocurre en este ejemplo: una consecuencia de este principio es que nada se puede medir sin cambiarlo, ya que cuando una herramienta de medida interacciona con el objeto que se está midiendo le está transmitiendo su "incertidumbre" intrínseca. Según cómo sumen todas las incertidumbres entre herramientas y partículas se llega a un límite último en la sensibilidad. Este límite, denominado "límite de Heisenberg", a diferencia del principio de incertidumbre, está mucho menos estudiado y hace unos pocos años los físicos teóricos empezaron a cuestionarlo. En 2005, el investigador Alfredo Luis, de la Universidad Complutense de Madrid, trabajó en este ámbito. En 2007, un equipo de EE.UU. teorizó sobre lo que podría considerarse la superación del límite de Heisenberg. En la actualidad, el equipo del ICFO ha puesto a prueba la teoría del grupo americano. Ha utilizado un interferómetro con luz láser polarizada y átomos de rubidio para detectar, a tiempo real, los campos magnéticos que se producen en el corazón y el cerebro. El equipo ha conseguido demostrar, experimentalmente, la superación del límite de Heisenberg. • Aplicaciones. Hay infinidad de acciones, como leer, ver, escuchar, hablar en otro idioma, en las que la interacción del cerebro tiene un peso importante. Si se analiza el funcionamiento del cerebro se puede observar cómo trabaja cada una de sus partes y cómo se interrelacionan. Con las técnicas estándares de diagnosis por imágenes (resonancia, PET, etc.) que revelan los flujos de sangre, se puede estudiar cómo trabaja el cerebro con bastante precisión, pero estas actividades se evidencian con un retraso que puede ir de los segundos a los minutos. Cuando una persona, por ejemplo, es-

ENAC

Primera acreditación a un laboratorio para la identificación y filiación equina ENAC, Entidad Nacional de Acreditación, ha concedido al laboratorio Newbiotechnic la primera acreditación para la obtención de perfiles genéticos de microsatélites para la identificación y filiación equina. Dichos análisis, siguiendo las recomendaciones de la International Society for Animal Genetics, permiten la identificación genética de individuos (équidos) para establecer relaciones de parentesco. ENAC es la entidad designada por el R.D. 1715/2010 como único Organismo Nacional de Acreditación, dotado de potestad

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pública para otorgar acreditaciones, de acuerdo con lo establecido en el Reglamento (CE) nº 765/2008 del Parlamento Europeo y el Consejo, de 9 de julio de 2008. ENAC desarrolla su actividad en el ámbito estatal evaluando, a través de un sistema conforme a normas internacionales, la competencia técnica de las organizaciones que ofrecen servicios de Evaluación de la Conformidad (laboratorios, entidades de certificación e inspección, verificadores, etc.) que operen en cualquier sector, sea en el ámbito voluntario o en el obligatorio

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tá hablando en un idioma extranjero, no se constata una mayor concentración de sangre en una zona particular del cerebro hasta al cabo de media hora. Por este motivo, las imágenes obtenidas no son a tiempo real. Un indicador más rápido de esta actividad cerebral es el campo magnético, que genera las corrientes eléctricas entre las neuronas. Actualmente existen instrumentos, como los magnetoencefalogramas (MEG), capaces de obtener imágenes del campo magnético cerebral en milésimas de segundo. Sin embargo, solo ofrecen suficiente sensibilidad cuando se analizan casos patológicos, como la epilepsia, pero no cuando se quieren observar los efectos neuronales derivados de cualquier actividad cotidiana. Mediante un tipo de sensores ópticos, basados en átomos de rubidio, se pueden construir MEG más compactos y sencillos. Sin embargo la aplicación de estos sensores en medicina, que es incipiente, también se ha visto limitada por el límite de Heisenberg. Lo que ha hecho el grupo del ICFO ha sido mejorar la sensibilidad de estos sensores ópticos (o magnetómetros atómicos), superando el límite dado hasta ahora, ya que, en vez de utilizar cada uno de los fotones del láser de forma independiente, los hacen trabajar conjuntamente, con lo que han conseguido una mejora que incrementa 10 veces más la sensibilidad de la medida del campo magnético, demostrando que el límite puede ser superado. Otras aplicaciones en las que podrían utilizarse estos instrumentos mucho más sensibles sería la observación de la Tierra, para detectar, por ejemplo, los cambios causados por la presencia, en el subsuelo, de yacimientos minerales o de petróleo. El resultado obtenido por el grupo del ICFO posee una importancia fundamental no solo para medir campos magnéticos, sino también para obtener las medidas sensibles que utilizan los interferómetros. Ello incluiría la detección de ondas gravitacionales, la diagnosis por imagen en el campo de la medicina y los relojes atómicos para la navegación. www.upc.edu

cuando reglamentariamente así se establezca. ENAC es el miembro español de la Infraestructura Europea de Acreditación creada por el mismo Reglamento CE nº 765/2008 y, como tal, miembro de EA (European co-operation for Accreditation), y firmante de los Acuerdos Multilaterales de Reconocimiento en materia de acreditación, suscritos por las entidades de acreditación de 50 países. www.enac.es

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J.P. SELECTA

Seminarios para presentar novedades J.P. Selecta ha impartido a lo largo de estos últimos meses diversos seminarios destacando las novedades incluidas en el nuevo catálogo 2011/13, así como los aspectos técnicos de varios de sus aparatos con las características más notables y métodos y sistemas para la puesta en práctica de los mismos. Relación equipos presentados: • Agitador magnético placa cerámica ED-C y Rev-ED-C • Mezcladores y molinos VS-5 y TR-20 • Evaporador rotativo RS-3000-V • Autoclave MED-12 • Autoclave Autester ST-DRY PV II • Autoclave sobremesa 25 l • Baño con agitación interna Agibat-20 • Baños ultrasonidos HD • Centrífugas de alta velocidad Centronic y Centrofiger • Centrífuga Mixtasel BL • Estufa Peltier Prebatem • Ph digital PH-2005 y PH-2006 • Digestor Kjeldahl

• Destilador Kjeldahl semi-automático Pro-Nitro S • Extractor de grasa y aceite Det-Gras-N • Extractor para celulosas y fibras Dosi-Fiber • Viscosímetros ST-2020 • Espectrofotómetros UV-3100 • Termostatos de inmersión. www.grupo-selecta.com (Véase anuncio en la sección Guía del Comprador.)

ENAC

Control de la contaminación ambiental por olor En los últimos años, la contaminación por olor está adquiriendo gran relevancia, no solo por el riesgo que puede generar en la salud, sino también por la disminución en la calidad de vida que puede provocar en las personas afectadas. Esta situación ha generado una mayor sensibilización con este tema y, a la postre, un incremento de la regulación por parte de las Administraciones. En esta materia, ENAC, la Entidad Nacional de Acreditación, garantiza la competencia técnica de los laboratorios encargados de la determinación del olor por olfatometría. Las actividades industriales emiten sustancias que producen malos olores, lo cual ha llevado a que en los últimos años la contaminación por olor esté adquiriendo una gran relevancia, ya que se caracteriza por un tipo de contaminación que no solo puede producir un riesgo sobre la salud de las personas y los animales (emisiones de productos tóxicos), sino que también genera molestias a los afectados. Todo esto ha producido un aumento de la sensibilidad en la sociedad sobre este problema ambiental y, con ello, un incremento en la regulación. La percepción de un olor, y su clasificación como agradable o desagradable, es muy subjetiva y es difícil determinar cuándo se traspasa el umbral de lo tolerable y, por lo tanto, es un asunto difícil de regular. En este sentido la aprobación en 2004 de la Norma UNE-EN

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13725 "Calidad del aire. Determinación de la concentración de olor por olfatometría dinámica", ha permitido abordar de una forma más objetiva el problema de la contaminación ambiental por olores. La norma define un método para la toma de muestras de sustancias olorosas, así como para la determinación objetiva de la concentración de olor de una muestra gaseosa (incluyendo sustancias puras, mezclas definidas y mezclas indefinidas de sustancias olorosas gaseosas), usando la técnica de olfatometría dinámica con un panel de evaluadores humanos que son el sensor. La olfatometría dinámica es una técnica analítica para determinar la concentración de olor, basada en determinar el factor de dilución con un gas neutro de un gas oloroso para producir una respuesta positiva de detección odorífera por parte del 50% de los panelistas. ENAC tiene actualmente acreditados tres laboratorios para la determinación del olor por olfatometría dinámica según la UNEEN 13725:2004 en emisiones atmosféricas de superficies activas, pasivas y fuentes fijas, incluyendo la toma de muestras, y un laboratorio para la determinación de olor, según la misma norma, en soportes de muestreo. (Fuente: ENAC) www.enac.es

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noticias

IKA

Inauguración del Laboratorio Europeo de Aplicaciones El fabricante alemán de equipos de laboratorio refuerza su posición como líder mundial en agitación, mezcla, dispersión/homogeneización y calorimetría estrenando un nuevo laboratorio de investigación y aplicaciones, de 400 m2, en Staufen. Para esta empresa familiar independiente que cuenta con una plantilla de unos 650 empleados altamente cualificados, el "IKA Application Center" ha representado una inversión total de aproximadamente 1,5 millones de euros.

Dedicado principalmente al servicio al cliente y futuros usuarios de equipos de laboratorio IKA, estos tendrán ahora la oportunidad de verificar en el laboratorio cualquier material de esta marca antes de tomar cualquier decisión de inversión. Así, el usuario estará completamente seguro de su elección sabiendo, antes de realizar el pedido, qué modelo de la gama de IKA responderá mejor a sus necesidades específicas. Otra ventaja: Ocho técnicos de laboratorio están a disposición de los visitantes.

Así pueden beneficiarse de la larga experiencia de estos especialistas, y tal vez podrán mejorar la eficacia de sus manipulaciones. Cualquier persona interesada podrá, mediante cita previa, ir personalmente a Staufen o enviar sus muestras con su lista de encargos. IKA se compromete a tratar las muestras y emitir un informe detallado en un plazo de 48 horas. El desplazamiento a IKA en Staufen se recomienda vivamente, ya que la firma garantiza una cálida acogida. Cabe recordar que Staufen se encuentra en el corazón de Europa. El aeropuerto de Basilea/Mulhouse está cerca con vuelos diarios desde Madrid y Barcelona. En las fotos, una imagen de las nuevas instalaciones y el vicepresidente de IKA, Georg Kiefer, durante su intervención en el acto celebrado el 5 de mayo. www.ika.de

empresas

Genzyme monitoriza 50.000 puntos SCADA con Anybus Communicator

Genzyme, firma con reputación mundial en biotecnología, está creando una nueva sede de producción de anticuerpos policlonales. Se trata de una innovadora instalación de producción; el proceso ha sido automatizado lo máximo posible a fin de reducir el error humano en las etapas del proceso (separación, purificación, filtración, ultrafiltración, hemadsorción, etc.). Esto requiere la capacidad de interactuar con una cantidad de equipamiento de laboratorio muy diverso, no diseñado originalmente para comunicarse con buses de campo. Genzyme utilizó cerca de 30 puertos de HMS Anybus Communicator, para permitir un consistente manejo SCADA entre todos los dispositivos en uso. Los beneficios se hacen ver tanto en la calidad como en los costes de producción.

l espacio de bioproducción de Lyon se extiende en un área de 22.000 m2, y produce un inmunosupresor selectivo que se utiliza para prevenir y tratar el rechazo al nuevo órgano en los transplantes (Thymoglobulin®). Este medicamento también se utiliza en hematología en los casos en que las células transplantadas reaccionan en contra de su huésped en los transplantes de médula ósea. Los agentes activos de esta droga son las inmunoglobulinas anti-timocitos humanos, obtenidas de la purificación de un suero, que se utiliza como materia prima. La base inmunogénica consiste en timocitos (células Thymus), una fuente natural de células T. El desarrollo de este espacio implicó una inversión de 115 millones de euros. “Actualmente, Genzyme utiliza métodos de producción de mano de obra in-

tensiva en la locación de Sanofi Pasteur, Marcy. Con el nuevo lugar, esperamos optimizar el proceso para reducir el error humano al mínimo. El proceso, con muchas etapas secuenciales, incluye más de 780 etapas de producción. Hay muchas posibilidades de error. Automatizar un proceso como este ha requerido un trabajo muy cercano con el equipo involucrado a la hora de decidir cómo se debería comportar el sistema. Esto ha posibilitado evitar tener que repensar la completa ergonomía del edificio y del equipamiento de producción, sin dejar de ser una verdadera revolución por la forma en la que opera el proceso de producción. Para lograr esto, especificamos más de 4.000 parámetros y 13.000 alarmas, lo cual nos permite manejar cada etapa de producción”, explica Alexis Ducancel, oficial de sistemas automatizados de Genzyme.

técnicas de LABORATORIO

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El nuevo espacio de Genzyme para la producción de anticuerpos policlonales para transplantes y hematología ocupa 22.000 m2. La inversión fue de 115 millones de euros.

empresas

Bioproducción: serie de procesos complejos A diferencia de lo que sucede en la química tradicional, la producción basada en células vivas envuelve muchas etapas costosas, diferentes entre sí y complejas. El ciclo de producción de una proteína para recombinar requiere una infraestructura industrial que se sitúa a gran escala incluyendo etapas de producción durante muchos meses. Cada etapa está sujeta numerosos controles de calidad. Durante el ciclo de producción se llevan a cabo también evaluaciones para asegurar la ausencia de virus y contaminantes. Al final del proceso, además, se evalúa la pureza y la acción de la proteína. La producción de esta droga implica muchas etapas complejas sumadas a una sucesión de tests técnicos y de calidad. El proceso de producción puede dividirse en cuatro etapas principales:

La gama Anybus Communicator permite a los datos seriales retroalimentarse en un sistema de control central.

• La recolección de inmunoglobulinas, la cual se realiza inyectando tejido humano en conejos. • La purificación de las inmunoglobulinas para remover las proteínas no deseadas (particularmente, anticuerpos antieritrocitos), por hemadsorción. • La etapa de hematografía consiste en un intercambio de aniones a través del uso de un intercambio iónico de resina. Se capturan las impurezas con la resina, si bien las in-

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una red serial. El Anybus Communicator puede conectar la mayoría de los productos con interfaz serial RS-232/422/485 a Ethernet o fieldbus industrial. Realiza una conversión inteligente entre el protocolo de serie y la red de destino. Esta conversión se configura utilizando la herramienta software “ABC Config Tool”. La configuración de la red, una vez completada, puede ser reutilizada por todas las redes soportadas por Communicator. “Más allá de la calidad del producto, vimos que el soporte técnico estaba ahí cada vez que lo necesitábamos”, concluye Ducancel.

munoglobulinas, que no poseen carga negativa, se eluyen. Esta etapa se verifica utilizando espectrofotometría y electroforesis. • La etapa de precipitación intenta eliminar las impurezas restantes. Las inmunoglobulinas purificadas son pasteurizadas (60 °C durante 10 horas). Esta solución se congela en seco antes de sellarse en viales. “En este proceso podemos, por ejemplo, programar los seteos de las centrifugadoras (velocidad, temperatura, tiempo de trabajo, etc.). Estos valores pueden cambiar en el SCADA para atender requerimientos específicos del momento de producción. Las lecturas se toman en todas las etapas y se envían al SCADA. Esto nos permite colocar procesos de trazabilidad muy precisos en el lugar. En particular, esto significa que la carga de trabajo para los equipos de control de calidad se reduce significativamente, lo cual es una ventaja en cuanto a costes”, agrega Ducancel. La sede de Lyon, como la de Marcy, recibirá la aprobación de FDA y de AFFAPS. “Lógicamente, elegimos HMS, porque sentimos que ninguna otra compañía tenía disponibles soluciones estándares para enviar información desde una cantidad de equipamientos diferentes que no necesariamente habían sido diseñados para conectarse con buses de campo. Tenemos 28 centrifugadoras, medidores de pH, balanzas, y demás. Los protocolos de interfaz varían: serial o ASCII, por ejemplo. Los 30 Anybus Communicator envían la data sobre Ethernet o Profibus a la central SCADA.”

Anybus Communicator: la solución para integrar equipamiento serial en una red de comunicación industrial La serie de puertos Anybus Communicator para conectar con Fieldbus/Ethernet industrial hacen posible comunicar dispositivos en red que fueron desarrollados para ser utilizados en

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Alrededor de 50 empleados se encuentran trabajando ahora en el lugar de producción de Genzyme, donde se llevan a cabo etapas iniciales de producción para validar el proceso completo. La producción completa debería comenzar a fines de 2011, una vez obtenidas las certificaciones AFSSAPS. El número total de staff de producción alcanzará entonces los 270 empleados.

Genzyme Genzyme nació en Cambridge, Massachusetts (EE.UU.), en 1981, cuando sus fundadores apostaron por dar soluciones a pacientes afectados con graves enfermedades para las que no existía tratamiento alguno. Un acercamiento personalizado a la salud, sumado al deber de innovar, hizo una compañía de biotecnología de vanguardia reconocida en todo el mundo. Si bien la ayuda a pacientes afectados por raras enfermedades genéticas es aún una prioridad, Genzyme también provee tratamientos innovadores para ayudar a pacientes con problemas renales, cáncer o artritis, o a aquellos que requieran transplante o cirugía, además de su trabajo en campos tales como el diagnóstico. Genzyme, compañía pionera de biotecnología, es ahora una compañía diversificada que da empleo a 11.000 personas en todo el mundo.

HMS Industrial Networks HMS Industrial Networks es el líder entre proveedores independientes de tecnología para redes embebidas en dispositivos de automatización. HMS desarrolla y fabrica soluciones para la conexión de dispositivos de automatización a redes industriales. El desarrollo y la fabricación tienen lugar en su sede central de Halmstad (Suecia). Las ventas y el soporte a escala local se ofrecen por medio de las sedes de HMS en Chicago, Beijing, Karlsruhe, Milán, Mulhouse y Tokio. HMS emplea a más de 150 personas y sus ventas fueron de 33 millones de euros en 2008. HMS se constituyó en 1988 y cotiza en el NASDAQ OMX Nordic Exchange de Estocolmo.

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ISSN 0371 - 5728 / TOMO XXXIII

Nº 361 / MAYO 2011

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