Revista num 13

REVISTA DE CALIDAD AMBIENTAL INTERIOR EN HOSPITALES, LABORATORIOS, ANIMALARIOS Y SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X

Núm. 13, Marzo 2013

Sumario 4.

EDITORIAL

CUALIFICACIÓN

MICROBIOLÓGICA

DE

REACTORES TERMOQUÍMICOS (KILLTANKS) H2O2-Q PARA EL TRATAMIENTO DE EFLUENTES ALTAMENTE BIOCONTAMINADOS.MUESTREO Y TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR. G. PASCUAL ALVAREZ. Jefe de Bioseguridad y Biocontención Centro de Investigación Animal-INIA, Ministerio de Economía y Competitividad. M.P. de MIGUEL CASAS. Técnico especialista en Bioseguridad DALKIA Energía y Servicios.

19.

PLANES

DE

MUESTREO

Y

CONTROL

MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS. A. DELGADO FERNANDEZ. Ingeniero Técnico Químico, CIAL, S.L. (Centro de Investigación y Asesoramiento para la Limpieza).

29.

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL

MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR. N. ALBERDI LARRABEITI. Ingeniera Técnica Química, Análisis Biológicos Biotalde.

39. REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS. E. P. DAMIANI MOISÉS. Bioquímica, Farmacéutica, Microbióloga, LA PAZ, BOLIVIA.

56.

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES. J. A.

PINZÓN HERNANDEZ. Bióloga con orientación en Microbiología y Parasitología, Instituto Conmemorativo Gorgas de Estudios de Salud. PANAMÁ.

66. IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS. A. DELGADO FERNANDEZ. Bióloga, Central Hospital Costa del Sol, Málaga.

de

7 de abril, dia Mundial de la Salud New Delhi metallo-B-lactamase 1 (NDM-1), es la denominación científica de la nueva bacteria: su nombre proviene de Nueva Delhi, ya que su aparición está ligada a la capital de India en donde se sospecha tiene su origen.

Se cataloga como una bacteria muy peligrosa por la amplia resistencia que tiene a antimicrobianos, incluidos los de gran calado que constituyen las últimas armas para combatir a estos microorganismos, lo que en definitiva significa que nos quedamos sin alternativas de tratamiento El gran impacto que se está produciendo se debe a que las bacterias que poseen este gen lo están transfiriendo a otras bacterias con gran facilidad y en consecuencia se hacen resistentes a los antimicrobianos.

esterilización,

76. RESISTENCIA ANTIBIÓTICAS “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES (2003-2013) EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR. MIGUEL ENRIQUEZ. M. DELGADO PEREZ. Jefe del Laboratorio de Control de las Infecciones Asociadas a la Asistencia Sanitaria. Hospital Universitario ClínicoQuirúrgico ¨Dr. Miguel Enríquez¨. La Habana, A. U. RODRIGUEZ DELGADO. Jefe del Laboratorio Provincial de Referencia para el Control de las Infecciones Asociadas a la Asistencia Sanitaria de la Capital. Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología de La Habana, O.S. de PAULA ALMEIDA. Facultad de Ciencias Medicas Dr. Miguel Enríquez, La Habana.

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Dra. Gloria Cruceta

Una situación tan preocupante que la Organización Mundial de la Salud (OMS) le ha dedicado este año su Día Mundial de la Salud, que se celebra el 7 de abril.

Directora de la Publicación: Dra. Gloria Cruceta ISSN 2013-746X. Realización: SEGLA s.l. Avda Gaudi, 52 bis, 4º1º Barcelona. 08025 Tel. 934 364 061.

Cualquier forma de reproducción, distribución, o transformación de esta obra sólo puede ser realizada con la autorización de los titulares de la publicación. www.biotecnologiahospitalaria.com

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CUALIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA DE REACTORES TERMOQUÍMICOS (KILLTANKS) H2O2-Q PARA EL TRATAMIENTO DE EFLUENTES ALTAMENTE BIOCONTAMINADOS.

CUALIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA DE REACTORES TERMOQUÍMICOS (KILLTANKS) H2O2-Q PARA EL TRATAMIENTO DE EFLUENTES ALTAMENTE BIOCONTAMINADOS

RESUMEN

“El

tratamiento

altamente

de

efluentes

biocontaminados

con

agentes biológicos patógenos para el hombre, los animales, las plantas y

el

medioambiente,

problema

supone

un

para

el

fundamental

mantenimiento de la Bioseguridad Gonzalo Pascual Alvarez Jefe de Bioseguridad y Biocontención. Centro de Investigación en Sanidad Animal-INIA, Ministerio de Economía y Competitividad.

en Instalaciones de Alta Contención Biológica”.

A pesar de que existen sistemas o equipos de tratamiento térmico o químico garantes de seguridad, están principalmente diseñados para el tratamiento de efluentes que no presentan contenido de materia orgánica.

Las grandes instalaciones que disponen de

Maria Paz de Miguel Casas Técnico especialista en Bioseguridad. DALKIA Energía y Servicios

animalarios o estabularios de experimentación implantados como complemento a las líneas de investigación, generan grandes cantidades de materia orgánica que pueden incorporarse a los efluentes generados bien en suspensión o de forma conformada.

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CUALIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA DE REACTORES TERMOQUÍMICOS (KILLTANKS) H2O2-Q PARA EL TRATAMIENTO DE EFLUENTES ALTAMENTE BIOCONTAMINADOS.

ABSTRACT Un efluente final de estas características, dificulta o invalida los procesos de destrucción

The effluent treatment highly biocontaminated

biológica diseñados e implantados al efecto.

with biological agents pathogenic to man, animals, plants and the environment, is a

“El

presente

demostrar

estudio

y

afirmar

permite

técnica

microbiológicamente

mediante

establecimiento

de

fundamental problem for the maintenance of

y

Biosafety

in

el

facilities.

Although

una

high

biological

containment

there

systems

are

or

equipment to heat or chemical treatment with safety guarantee, are mainly designed for the

cualificación

verificable

reproducible,

que

un

y

tratamiento

treatment of effluents without organic content.

Larger facilities whith experimental animal

mixto de tipo termoquímico supone

facilities

un

research lines, generate large amounts of

avance

técnico

espectacular

para la resolución de este problema

organic

implemented matter

that

to can

supplement

the

incomporate

to

effluents generated either in suspension or y permite generar sobrada confianza

shaped

form.

A

final

effluent

of

these

para el mantenimiento de un nivel

characteristics,

adecuado de bioseguridad exigible

biological destruction processes designed and

en

implemented for this purpose. This study can

virtud

de

la

legislación

y

normativa nacional e internacional establecida,

con

la

consiguiente

prove

and

difficult

or

assert

invalidate

technical

the

and

microbiologically by establishing verifiable and reproducible

qualifications

that

a

mixed

realización de vertidos de efluentes

thermochemical treatment type represents a

estériles y por lo tanto totalmente

spectacular technical advance to solve this

inocuos,

al

sistema

integral

de

problem and to generate more than enough confidence to maintain an adequate level of

saneamiento”.

biosafety enforceable under the national and international laws and regulations established, thereby performing sterile effluent discharges to the common sanitation system and therefore completely safe.

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CUALIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA DE REACTORES TERMOQUÍMICOS (KILLTANKS) H2O2-Q PARA EL TRATAMIENTO DE EFLUENTES ALTAMENTE BIOCONTAMINADOS.

PALABRAS CLAVE Biocontención,

ANTECEDENTES

Bioseguridad,

efluente

En

las

instalaciones

de

Alta

Contención

biocontaminado, Geobacillus

Biológica (NCB3) existentes en el panorama

Stearothermophilus, killtank, NCB3, peróxido

internacional,

de hidrógeno.

diferentes

se

encuentran

sistemas

de

implantados

tratamiento

de

Basados

la

efluentes biocontaminados:

SUMARIO

- Tratamientos

químicos:

en

adición de un descontaminante químico (1) Antecedentes.

al efluente y sometido a agitación y

Objetivos del estudio.

neutralización química antes de su vertido final.

Materiales y método.

-

Características

generales

se

denominan

del - Tratamientos térmicos: Basados en la subida

-

Biocida objeto del estudio.

-

Protocolo de trabajo.

-

Método

de

actividad

de temperatura del efluente a tratar entre los 100ºC y los 151ºC, durante tiempos

valoración

de

desinfectante

la del

Peróxido de Hidrógeno sobre el efluente biocontaminado.

Validación térmica y microbiológica del sistema killtank.

-

sistemas

digestores.

sistema killtank.

-

Estos

Ensayos

de

comprendidos entre 1 horas y 5 minutos respectivamente.

Los tratamientos en ausencia de sólidos son denominados biowaste.

- Tratamientos

mixtos

termoquímicos:

Permiten la adición de un producto químico

penetración

de

de alta eficacia y posterior elevación de la temperatura entre los 121ºC y los 150ºC.

temperatura con carga.

Durante el proceso, existe agitación o

Resultados y discusión

recirculado. Este tipo de tratamiento es -

Valoración

de

biodescontaminate killtank

frente

la

eficacia

del

sistema

a

denominado killtank.

Geobacillus

stearothermophilus.

Conclusiones.

Bibliografía.

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http://www.felasa2013.eu/ www.biotecnologiahospitalaria.com

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OBJETIVOS DEL ESTUDIO

- Bombeo a homogeneización: Se trasiega el efluente desde el tanque de ajuste de pH hasta

Se presente determinar mediante un sistema

tanques

de

almacenamiento

previo.

killtank compuesto de 3 reactores mixtos termoquímicos situados en serie:

los

- Bombeo a esterilización: Mediante bombas centrífugas verticales (en redundancia), se trasiega el efluente a los reactores.

1.- Valoración de la actividad biocida del

- Dosificación

de

Mediante

bombas

peróxido de hidrógeno (2) al 35% en diluciones

químico:

dosificadoras

(en

redundancia) se inyecta en línea el producto

de 1 a 1/40 sobre el efluente biocontaminado

químico descontaminante.

respecto al crecimiento de bacterias aerobias y anaerobias en general.

esterilizante

- Recuperador de energía: El efluente pasa por cambiadores de calor obteniendo un

2.- Determinar la temperatura y el tiempo de

precalentamiento del 50% de la temperatura

residencia óptimos que permitan cualificar el

de vaciado.

proceso con el uso del bioindicador Geobacillus

-

Esterilización: en 3 reactores de 3m3. En el

stearothermophilus, en condiciones reales de

reactor, el efluente alcanza el nivel y

funcionamiento (3).

presión establecidos y en agitación, se procede a la elevación de temperatura durante el tiempo establecido (4).

MATERIALES Y MÉTODO

- Enfriamiento en recuperador de energía.

- Descarga en balsa de enfriamiento exterior

Características generales del sistema killtank.

al NCB3.

La línea de proceso termoquímico killtank consta de:

El sistema completo (foto 1) de operación automática, invierte entre los 60 a 90 min.

- Tamizado y separación de sólidos: Mediante un tamiz de acero inoxidable AISI-316 con un paso de malla de 0,9 mm.

- Ajuste de pH: conseguir un pH del efluente comprendido entre 6 y 9.

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(Foto 1). Instalación killtank. Imagen cedida por el Centro de Investigación en Sanidad Animal.

Es capaz de actuar ya sea como agente

BIOCIDA ESTUDIO

OBJETO

DEL

oxidante o como reductor (5). Posee una capacidad altamente esterilizante frente a bacterias, hongos, virus y esporas (6), incluso en

pequeñas

cantidades

(0,5

mg/L)

(8)

un

consiguiendo una capacidad de esterilización

compuesto químico altamente polar, fuer-

en pocos minutos (1 seg – 12 minutos)

temente enlazado con el hidrógeno, que por lo

dependiendo de la concentración utilizada (0,3

general se presenta como un líquido viscoso

a 12 mg/L) y la temperatura existente (4 a

[10].

55ºC). Se ve menos afectado por el pH que

El

peróxido

de

hidrógeno

(H2O2)

es

otros desinfectantes como cloro, fenoles y ácidos orgánicos (7).

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Provoca la oxidación de los grupos sulfhidrilo y

Los ensayos de suspensión realizados conforme

dobles enlaces de las enzimas bacterianas por

a la Norma UNE EN 1276 (10), se han realizado

acción del oxígeno (8).

en condiciones reales “sucias” es decir en

Los grupos sulfhidrilo libres dan lugar a puentes disulfuro que cambia la conformación de las proteínas (enzimas), con pérdida de su función y como consecuencia la muerte celular. Por

presencia de materia orgánica, haciendo la dilución de los biocidas en agua dura. En este caso, se requiere una reducción logaritmica de 5 log10 en 5 minutos de contacto a 20ºC.

otro lado, en la reacción se producen radicales

Los ensayos han sido de tipo cuantitativo,

hidroxilos que atacan la membrana lipídica,

determinando el número de microorganismos

ADN y otros componentes celulares (9).

supervivientes en referencia al inóculo inicial.

La

descomposición

se

acelera

por

la

temperatura, presencia de catalizadores y presencia de ácidos y bases fuertes.

La

recuperación

de

los

microorganismos

supervivientes se ha realizado por cultivo directo de un medio sólido después de llevar a cabo la neutralización del biocida (5 minutos).

1 uml se transfirió a placas Petri con agar de soja triptosa a 45ºC. Las placas se incubaron a

Protocolo de trabajo

36ºC durante 24 horas.

- Determinar la carga biológica (actividad bacteriana) total en el efluente sin tratar (a

El inóculo inicial tomado del efluente de

temperatura de 20ºC) en un tiempo de 20

estudio, ha contenido al menos 1x106 a 5x106

minutos.

ufc/ml en contacto con los biocidas utilizados.

-

Determinar

la

reducción

logarítmica

alcanzada sobre el total de microorganismos que manifiesten crecimiento, sin distinción de especie cuando el efluente es tratado con H2O2 al 35%, en diluciones del 1 al 1/40.

(suspensiones

superiores

interfieren

en

el

contaje), siendo el medio preparado, triptona 15,0g, peptona de soja 5,0g, NaCl 5,0g, agar 15,0g y agua destilada no desmineralizada.

Como diluyente se utilizó una solución de cloruro de sodico triptona en la siguiente

- Fijada la dosis biocida más efectiva, validar

relación: triptona 1,0g. NaCl 8,5g y agua

el proceso térmicamente y con el uso de un

destilada no desmineralizada ahasta 1.000,0

bioindicador (Geobacillus stearothermophilus).

ml. El pH final fue de 6,9 a 20ºC.

- Determinar la temperatura y tiempo idóneo del tratamiento completo.

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Método

de

valoración

de

la

actividad

desinfectante del Peróxido de Hidrógeno

Validación térmica y microbiológica del sistema killtank.

sobre el efluente biocontaminado Se han utilizado sensores de temperatura (data El peróxido de hidrógeno al 35%, ha sido

loggers) inalámbricos con rango - 45 ºC a +140

proporcionado por la empresa STERIS. Se han

ºC, marca Kaye Instruments Inc y lectura cada

seguido sus indicaciones de uso inyectando en

30 seg. El estudio se realizó éntre los 100ºC y

el efluente 5 litros, dando lugar a una

los 135ºC, colocándose 12 data loggers en el

concentración final de 1,16 gr/L para un

interior del reactor de forma vertical, uniforme

volumen de efluente de 3.000 litros. A partir de

(Fig. 1) y cubriendo el volumen del reactor.

esta solución de uso, se preparon las diluciones

Como Criterios de Aceptación se adoptó que las

1/5, 1/10, 1/20 y 1/40 para la determinación

temperaturas

de la concentración mínima bactericida (CMB).

fluctuasen en más de 1ºC y que estas no

durante

la

exposición

no

defirieran unas de las otras en más de 2 ºC. El neutralizante utilizado para inhibir la acción antiséptica ha sido Tween 80, 3 mL; L-histidina 0.1 g; tiosulfato sódico, 0.5 g; lecitina, 0.3 g;

Para

tampón fosfato 2.5 mM, pH 7 (KH2PO4, 140.5

temperatura

mg/L; Na2HPO4, 219.7 mg/L), 100 mL. La

penetración de temperaturas en el interior de

lecitina se añadió tras la esterilización del

los

resto de los componentes en autoclave a 121 ºC

encuentra

durante 20 minutos. El neutralizante ha sido

ensayados y con la adición del producto

validado frente a peróxido de hidrógeno 35%

químico en una situación de trabajo idéntica a

para cada una de las muestras de efluente, a

las condiciones de trabajo habituales.

los

ensayos con

bioindicadores a

las

de carga, cuando

penetración

de

se

la

el

temperaturas

verificó equipo y

se

tiempos

concentración 1/5 de la de uso de acuerdo con la norma AFNOR. Junto con los 12 termopares, se colocaron 12 Los ensayos se han realizado con suspensiones 6

bacterianas de 1-3 x 10 bacterias/mL. a 20 ºC

bioindicadores distribuidos uniformemente por el interior del reactor.

y tiempo de contacto 5 minutos.

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El microorganismo utilizado ha sido Geobacillus stearothermophilus, recomendado para este tipo de ensayos por la norma UNE-EN 886-3:1997. (Fabricante 3M Health Care; Nº de lote 1262/1262P; Nº nominal de organismos por indicador biológico 1.0 x 106; Código trazabilidad ATCC 7953; Nº de indicadores 12; Caducidad 2012-13 JL; Valor D 1.7; Valor Z --).

Útil 1

Útil 2

S ó lo p a r a r e f e r e n c ia .

Indicadores biológicos

314,2

2 0°

5 00

2 0°

H728 *

* H726

H600 *

* H606

Q564 *

* Q227

60

200

8

50 0

1500

1850

650

6

N786 *

* H713

J761 *

* J942

J938 *

* H719

8

8 00

150 (tip.)

318

650

87

(Fig.1). Situación de data loggers.

Como Criterios de Aceptación se adoptó que los bioindicadores no presentasen crecimiento, con control positivo conforme. Se determinó la correlación temperatura - F0 acumulada.

Finalizados los ciclos, ninguno de los bioindicadores presentó crecimiento en incubación durante 7 dias.

Los ensayos se consideraron satisfactorios, ya que se cumplieron los criterios de aceptación establecidos por la norma UNE-EN 554 por lo que quedaron habilitados para la realización de los ensayos con carga objeto del presente estudio.

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RESULTADOS Y DISCUSIÓN

De las 5 muestras tomadas del efluente sin tratar se obtuvieron resultados de entre 1-5 1 x 106 ufc/ml a una termperatura de 20ºC. De los 5 ensayos realizados realizados para la valoración del neutralizante, se obtuvo que es adecuado para inactivar el producto a las concentraciones utilizadas. Los ensayos de valoración del biocida se reflejan en la Tabla 1.

REDUCCIÓN LOGARITMICA - ENSAYOS 7 7 7 5,98 5,02

7 7 7

7 7 7

7 7

6,31

5,76 5,12

5,39 5,01 4,2

6,29 5,25 4,35

Diluciones

Reducción logaritmica

7 7 7

7 6 5 4 3 2 1 0

1⁄1 1⁄5

1⁄1

1 7

2 7

3 7

4 7

5 7

1⁄5

7

7

7

7

7

1⁄20

1⁄10

7

7

7

7

6,29

1⁄40

1⁄20

5,98

5,76

6,31

5,39

5,25

1⁄40

5,02

5,12

4,2

5,01

4,35

1⁄10

Ensayos

(Tabla 1)

Valoración de la eficacia stearothermophilus.

biodescontaminante

del

sistema

killtank

frente

a

Geobacillus

La dilución más óptima resultó ser de 1/20 de la solución de uso. La ufc inicial (control del efluente sin tratar) de Geobacillus acillus stearothermophilus fue de 106. (prefijada por el fabricante).

Para la determinación de la temperatura óptima en ºC y tiempo óptimo en minutos donde el bioindicador presentaba una redución logarítmica igual o superior a 5, se realizaron 3 ensayos (Tablas 4, 5 y 6). Los resultados se corresponden con la media aritmética aritmética obtenida a partir del recuento de ufc/mL de los 12 bioindicadores utilizados en los reactores por ciclo realizado y a distintas alturas, temperaturas y tiempos contemplados.

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Ensayo nº 1: N (ufc/mL) = 106 T (ºC)

100 100 100 100 100 121 121

t (´)

1 5 10 15 20 1 5

Recuento efluente tratado (ufc/mL)

Reducción logarítmica

T (ºC)

21 9 3 5 1 2 1

4,68 5,04 5,52 5,30 6,00 5,70 6,00

121 121 121 135 135 135 135 135

t (´)

Recuento efluente tratado (ufc/mL)

10 15 20 1 5 10 15 20

1 0 0 1 0 0 0 0

Reducción logarítmica

6,00 >6,00 >6,00 6,00 >6,00 >6,00 >6,00 >6,00

Ensayo nº 2: N (ufc/mL) = 106 T (ºC)

100 100 100 100 100 121 121

t (´)

1 5 10 15 20 1 5

Recuento efluente tratado (ufc/mL)

Reducción logarítmica

T (ºC)

t (´)

16 7 4 5 3 3 1

4,79 5,15 5,49 5,30 5,52 5,52 6,00

121 121 121 135 135 135 135 135

10 15 20 1 5 10 15 20

Recuento efluente tratado (ufc/mL) 1 0 0 1 0 0 0 0

Reducción logarítmica

6,00 >6,00 >6,00 6,00 >6,00 >6,00 >6,00 >6,00

Ensayo nº3: N (ufc/mL) = 106 T (ºC)

100 100 100 100 100 121 121

t (´)

1 5 10 15 20 1 5

Recuento efluente tratado (ufc/mL)

Reducción logarítmica

T (ºC)

t (´)

21 16 4 2 2 4 1

4,68 4,79 5,49 5,70 5,70 5,49 6,00

121 121 121 135 135 135 135 135

10 15 20 1 5 10 15 20

Recuento efluente tratado (ufc/mL) 1 0 0 0 0 1 0 0

Reducción logarítmica

6,00 >6,00 >6,00 >6,00 >6,00 6,00 >6,00 >6,00

(Tablas 4, 5 y 6)

Se observa que en los tres ensayos realizados, el peróxido de hidrógeno demuestra un comportamiento efectivo a una temperatura de 100ºC / 10 minutos, donde la reducción logarítmica es mayor de 5, por lo que esta situación se corresponde con la más idónea.

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CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFÍA

1.- El tratamiento químico con peróxido de hidrógeno 1,6g/L, presenta efecto bactericida frente a bacterias en general.

La actividad del biocida desaparece cuando se alcanzan diluciones de 1/40. Se presenta reducciones logarítmicas superiores a 5 en dilución a 1/20.

(1) McDonnell, G., Russell, AD. Antiseptics and Disinfectants: activity, action and resistance.

Clin Microbiol Rev. 1999.

(2) Yánez, E. “Acción de los agentes químicos

2.- Tanto la temperatura como el tiempo

sobre las bacterias”. Curso de microbiología

influyen en el comportamiento biocida del

general.

producto químico ensayado. Se observa

<http://fai.unne.edu.ar/biología/microgeneral

una

reducción

de

ufc

de

Geobacillus

/micro-ianez/19-micro.html>.

stearothermophilus cada vez mayor a mayores (3) Russell, AD., Hugo, WB.: Ayliffe GAJ ed.

temperaturas y tiempos.

Principles

and

practice

of

3.- Se obtiene eficacia a baja temperatura

preservation

(100ºC) y en tiempos cortos (5´), circunstancia

Science, 3er ed. Oxford, 1999: 5-94

and

sterilization.

disinfection, Blackwell

que puede ser debida a que la estructura del peróxido de hidrógeno se rompe fácilmente,

(4) Limpieza, desinfecciòn y esterilización.

liberándose el oxígeno con mayor rapidez,

Antisépticos y desinfectantes.

actuando antes sobre las estructuras celulares.

<http://www.udbgtip.uab.es/apuntsmicro/lim

4.- Las temperaturas durante los tiempos de

pieza-desinfección-y-esterilización.pdf>.

exposición no fluctuaron en más de 1 ºC y no

(5) Block, SS.: Peroxygen compounds. SS Block

difirieron unas de las otras en más de 2 ºC.

ed. Disinfection, sterilization and preservation

5.- En los ensayos,

4th ed. Philadelphia, Pa: Lea & Febiger, 1991.

se alcanzó la letalidad

acumulada (Fo) requerida de 15 minutos durante cada tiempo de exposición.

(6)

6.- El sistema de tratamiento termoquímico de

<http://www.lenntech.com/español/biocidas-

efluentes

altamente

htm>.

utilizando

peróxido

biodescontaminante

biocontaminados de

hidrógeno

químico,

supone

Lenntech.

“Biocides”.

como una

garantía de seguridad total en el tratamiento y posterior vertido.

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Página 16

CUALIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA DE REACTORES TERMOQUÍMICOS (KILLTANKS) H2O2-Q PARA EL TRATAMIENTO DE EFLUENTES ALTAMENTE BIOCONTAMINADOS.

(7) Guía institucional para uso de antisépticos y desinfectantes. 2005; <http://www.info.ccss.cr/germed/gestamb/sa mb08d2.htm>.

"Todos conocemos Edificios en los que tenemos buenas sensaciones y Edificios a los que no regresaríamos"

(8) Tamayo, J., Delpón, E.; Antisépticos y desinfectantes. Velásquez. Farmacología. 16º ed. Madrid: Interamericana Mc Graw-Hill. 1992.

(9) Rutala WA. Guidelines for selection and use of disinfectants. Am J Infect Control APIC, 1995.

(10) Norma UNE-EN 1276: fase 2 /etapa 1.

Ensayo cuantitativo de suspensión para la evaluación de la actividad bactericida de los antisépticos

y

desinfectantes

químicos

utilizados en productos alimenticios, en la industria, en el hogar y en colectividad.

(Aprobada por el Comité Técnico CEN/TC 216 (1997-05-28).

EDIFICIOS SALUDABLES JORNADA TÉCNICA Barcelona, 17 de abril 2013 http://www.segla.net/edificios_saludables.htm

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Página 17

PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

INTRODUCCIÓN A LAS LAVANDERIAS HOSPITALARIAS Y DEFINICIÓN DE LAS ZONAS DE TRABAJO

El Antonino Martí Centellas Ingeniero Técnico Químico, CIAL, S.L. (Centro de Investigación y Asesoramiento para la Limpieza).

objetivo

principal

de

las

lavanderías

hospitalarias es la realización de la tarea de limpiar y sanitizar/desinfectar los textiles usados en los centros hospitalarios. Los textiles que hacemos referencia están agrupados en tres grandes categorías.

ASVAMEDIC (Tecnología Hospitalaria) www.asvamedic.com

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PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

1.- Ropa blanca de cama: - Sabanas.

- Fundas de almohadas.

“Las lavanderías hospitalarias están divididas en dos grandes sectores o zonas

bien

diferenciadas

y

- Mantas.

- Colchas.

- Ropa de rizo (Toallas).

separadas físicamente, esta división es arquitectónica y si está bien realizada

2.- Uniformes de trabajo y ropa de pacientes:

podemos

controlar

el

ambiente de forma independiente en cada una de ellas.”

- Uniformes.

- Chaquetas.

- Pantalones.

- Batas.

El paso del personal entre las dos zonas es

- Pijamas.

restringido y se realiza a través de un SAS. Los

- Camisones.

textiles pasan de una zona a otra a través de las máquinas y/o túneles de lavar.

3.- Ropa de quirófano:

A) Zona sucia: En la zona sucia se realizan las tareas de recepción, selección o triaje y carga

- Bata verde/azul de cirujano.

- Chaqueta verde/azul.

de las máquinas de lavar o los túneles de lavado.

- Pantalón verde/azul.

- Paño quirófano.

Estos procesos se realizan de forma manual en

- Sábana camilla verde.

lo que respecta a la recepción, selección o

- Sábana abierta verde.

triaje, el personal encargado de realizarlas

- Sábana cerrada verde.

utiliza los equipos de protección individual adecuados (mascarillas,

para

este

guantes,

tipo

de

calzado,

trabajos uniformes,

etc.), la carga de máquinas se realiza de forma manual, semiautomática o automática.

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PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

ASVAMEDIC (Tecnología Hospitalaria) www.asvamedic.com

En esta zona es habitual trabajar con equipos

B) Zona limpia: En la zona limpia, en función

de impulsión/extracción de aire. En esta zona

de los textiles procesados, tendremos dos zonas

deben existir los desagües de recogida de las

bien diferenciadas, una será la zona general de

aguas de lavado y deben existir registros para

secado, planchado, plegado y envasado de ropa

correspondiente toma de muestras.

blanca de cama, toallas, ropa de pacientes y uniformes. La segunda zona será la zona estéril de preparado, doblado, agrupado, envasado y esterilizado

de

textiles

de

quirófano

y

uniformes del personal de quirófano.

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PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

En la primera parte de la zona limpia

Para mantener el ambiente de esta zona en

tendremos las secadoras, las calandras de

unas

planchado de la ropa plana, túneles de secado

trabajadores, se suele impulsar aire frio por

y planchado de uniformes y ropa de los

conductos de ventilación y se realiza una

pacientes

también

extracción de aire caliente, las sobrepresión

tendremos las máquinas de plegar los textiles

del aire en esta zona debe ser superior al de la

de rizo (toallas), las máquinas de envasar y las

zona sucia.

(pijamas,

estanterías

o

carros

camisones),

de

transporte

condiciones

aceptables

para

los

para

distribuir los textiles acabados.

En esta área tendremos un espacio / taller de

“La zona estéril está separada del

costura para reparar los textiles con pequeños

resto de la zona limpia por un SAS, y

deterioros.

la clasificación de esta zona estéril

Los equipos utilizados para realizar estas

suele ser clase ISO 6. En esta área

tareas, todos tienen salidas de humos y vapores

es donde se realizan los trabajos de

para eliminar el vapor que se produce durante

reacondicionamiento de los paños y

el proceso de secado o planchado de los textiles al eliminarles el agua residual después

las sabanas de los quirófanos, se

de los aclarados del proceso de lavado y

realiza

centrifugado.

correspondiente, el reagrupamiento

Como es de suponer estos equipos están

el

plegado

final

en función de su utilidad / función,

calefactados por distintas fuentes energéticas,

el

envasado

y

el

como gas natural, vapor o aceite térmico. La

esterilización final. ”

proceso

de

electricidad para la fase de calefacción es más costosa que las otras fuentes, y solo se utiliza para el funcionamiento de los mecanismos de las máquinas.

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PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

PLANES DE MUESTREO

En función de la capacidad productiva y del

También debe contemplar las condiciones

tipo

que

ambientales de la zona estéril, en lo que

dispongamos, deberemos establecer un plan de

respecta a sistemas de ventilación (impulsión

muestreo para poder garantizar que la toma de

de

muestras sea la más correcta y fiable en todas

sedimentación o deposición en las mesas de

las áreas de la instalación productiva de la

trabajo,

lavandería.

necesarios en los textiles que allí se procesan

de

maquinaria

e

instalaciones

aire),

calidad

del

aire

así como realizar

ambiental

y

los muestreos

antes de realizar su envasado y posterior esterilización final.

“Los

planes

de

contemplar

muestreo

deben

grado

de

el

contaminación microbacteriana de los

textiles

lavar,

contemplar el grado de limpieza y desinfección

el

medio

a

las

como el grado de limpieza de los útiles y

instalaciones de la lavandería, las

equipos auxiliares a la producción, tanto si

ambiente

a

Los planes de muestreo también deberían

exterior

condiciones ambientales de la zona

de los suelos, máquinas y mesas de trabajo, así

tienen contacto directo con los textiles o no.

sucia, las condiciones o proceso de lavado

y

desinfección

textiles,

las

de

los

condiciones

ambientales de la zona limpia, el almacenaje y el transporte de los textiles

una

vez

lavados

y

desinfectados”.

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PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

1)

Análisis de puntos / zonas críticas de

En la zona sucia, los puntos y/o zonas críticas

control:

de control serían: Las zonas de impulsión del aire del exterior, la zona de recepción y pesaje de los textiles, la zona de selección y/o triaje

En

las

instalaciones

hospitalarias

de

debemos

las

dividir

lavanderías de

manera

independiente el análisis de las zonas críticas, pues cada una de ellas presenta un contexto y unas necesidades distintas.

(área

importante

por

aporte

de

posibles

elementos contaminantes al sacudir los textiles para separarlos por calidades y tipos de suciedades antes de proceder a su lavado y sanitización

/

desinfección),

la

zona

de

almacenaje temporal tanto si se realiza de manera manual como aérea (automática) y la zona de la carga de túneles y/o lavadoras.

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PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

En la zona limpia, los puntos y/o zonas críticas

2)

de control serían: Las zonas de impulsión del aire

exterior,

las

áreas

o

zonas

Métodos de muestreo para instalaciones y tejidos:

donde

descargan las lavadoras o túneles de lavado, las áreas de carga y descarga de secadoras, el entorno de las calandras de planchado, el entorno de los túneles de secado y planchado de uniformes del personal y ropa de los

Para

el

muestreo

instalaciones,

ambiental

utilizaremos

de

las

equipos

de

captación volumétricos por procedimientos de impactación en medio sólido. Tendremos en cuenta la distribución de los microorganismos

pacientes.

en

cada

punto

o

zona

a

controlar,

la

temperatura de trabajo, la humedad relativa En estas zonas o puntos deberíamos realizar un análisis de la contaminación microbacteriana aérea. Además de los controles ambientales deberíamos

realizar

un

control

de

la

contaminación depositada en los textiles que se

del ambiente, la actividad que se desarrolla en el punto y/o zona a controlar, las corrientes de convección del aire en estas zonas, en las zonas sucias realizaremos la toma de muestras durante el proceso productivo y en presencia del personal de producción, pues son los que

procesan en esta área.

sacuden los textiles y facilitan el paso de la En la zona estéril, los puntos y/o zonas críticas

contaminación del textil al ambiente.

de control serían: Las zonas de impulsión del aire

exterior,

las

zonas

de

adecuación,

plegado, agrupación y envasado de los textiles de quirófano. También deberíamos realizar un control de la contaminación depositada en los textiles antes de realizar el proceso de esterilización final.

En las zonas limpias realizaremos la toma de muestras del ambiente en los puntos y/o zonas críticas definidas sin personal presente, con el sistema de ventilación en marcha y con la maquinaria

en

funcionamiento

para

no

distorsionar el entorno.

En las zonas estériles realizaremos la toma de muestras del ambiente en los puntos y/o zonas críticas definidas sin personal presente y con el sistema de ventilación en marcha.

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Página 24

PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

El muestreo de textiles se realizara por contacto con la superficie del textil, para

-

Al azar tomaremos una muestra de los tejidos tratados en esta zona limpia

garantizar que la toma de muestras es fiable y

después de proceder a su envasado,

repetible.

para comprobar la calidad del mismo y

En la zona sucia no realizaremos ninguna toma

garantizar que no hay contaminación en

de muestras, pues los textiles sufrirán un

este proceso, sobre todo después de un

proceso

cierto

de

lavado

y

desinfección

con

tiempo

de

almacenamiento

temporal.

detergentes y productos químicos adecuados.

En la zona limpia realizaremos una toma de

-

muestras sobre los textiles a la salida de las

En la zona estéril realizaremos una toma de

lavadoras

muestras sobre los textiles durante el proceso

comprobar

o

los que

túneles el

de

proceso

lavado de

para

lavado

y

desinfección se ha realizado correctamente.

-

para comprobar

La ropa plana de cama que vamos a planchar con calandra, realizaremos un ensayo

después

del

proceso

de acondicionamiento, plegado o agrupado

de

que no han sufrido re-

contaminación

en

las

Muestrearemos

tanto

fases los

anteriores.

uniformes

de

quirófano, como la ropa plana de quirófano.

planchado.

-

El tejido de rizo (toallas), realizaremos un ensayo después del proceso de secado (a la salida de la secadora).

-

Los

uniformes

de

trabajo

(batas,

camisas, pantalones) y la ropa de los pacientes

(pijamas,

camisones),

realizaremos un ensayo a la salida del túnel de secado y planchado.

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Página 25

PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

3)

4)

Equipos a utilizar:

Para

la

toma

de

aspirométricos)

con

volumétricos

por

muestras equipos

de

Frecuencias de muestreo:

(métodos

Las frecuencias de muestreo en la lavandería

captación

hospitalaria serán:

procedimientos

de

impactación en medio sólido, tendremos en

-

comprobación del buen funcionamiento

cuenta que deberán poder regularse para adaptar el caudal a las distintas zonas de recogida de muestras, es importante que el equipo disponga de mando a distancia para poder

ser

accionado

sin

presencia

de

operadores en la zona de captación, también tendremos de preveer la disponibilidad

de

placas de recogida de muestras de flora bacteriana y flora fúngica, pues el origen es

del conjunto productivo.

-

textiles.

1 vez al año como control preventivo en zonas limpias.

-

Cada

seis

meses

como

control

preventivo en zonas estériles.

-

Cada

seis

meses

como

control

preventivo en zonas sucias.

-

Cada vez que cambiemos el proceso productivo realizaremos un muestreo en

amplio y variado. El tipo de contaminante podrá variar cuando varíe el origen de los

1 vez al año para validación inicial y

el ambiente y en los textiles..

-

Cada vez haya cambio o incorporación de clientes nuevos, realizaremos un

Para la toma de muestras sólidas sobre los

muestreo ambiental en la zona sucia. Si

textiles, utilizaremos placas RODAC adecuadas

la

para la toma de muestras en superficies

realizaremos un muestreo en los textiles

sólidas.

en las zonas limpias.

Para la comprobación rápida del grado de limpieza y desinfección de suelos de las instalaciones utilizaremos un equipo de control

-

variación

Después

de

modificaciones

es

muy

significativa

realizar

obras

en

instalación

la

o

productiva (cambios de maquinaria).

por bioluminiscencia, tomando las muestras correspondientes con la ayuda de hisopos ATP.

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Página 26

PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

5)

Parámetros y valores de referencia:

Como normas de referencia a utilizar en la valoración de la calidad microbiológica del aire y la calidad microbiológica de los textiles tratados en las lavanderías hospitalarias, podemos utilizar las siguientes: −

UNE 171330-2 Calidad ambiental en interiores. Parte 2: Procedimientos de inspección de calidad ambiental interior.

−

UNE 100012:2005 Higienización de sistemas de climatización.

−

UNE 171340:2012 Validación y cualificación de salas de ambiente controlado en hospitales.

−

UNE-EN ISO 14644-1:2000 Salas limpias y locales anexos. Parte 1: Clasificación de la limpieza del aire. (ISO 14644-1:1999).

−

UNE-EN ISO 14698-1:2004 Salas limpias y ambientes controlados asociados. Control de la biocontaminación. Parte 1: Principios y métodos generales (ISO 14698-1:2003).

Zona Sucia:

Calidad aire

Flora aerobia mesófila total

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< 800 ufc/m3

Página 27

PLANES, MÉTODOS DE MUESTREO Y CONTROL MICROBIOLÓGICO EN LAVANDERÍAS HOSPITALARIAS

Zona Limpia: Calidad aire

Flora aerobia mesófila total

Calidad aire después de

< 200 ufc/m3

Flora aerobia mesófila total

< 100 ufc/m3

Flora aerobia mesófila total

≤ 10 ufc/25cm2

Flora aerobia mesófila total

< 200 ufc/25cm2

limpiar la instalación Calidad de las superficies después de la desinfección Calidad de las superficies de los textiles después del lavado y desinfección

Zona estéril: Calidad aire

Flora aerobia mesófila total

< 100 ufc/m3

Calidad de las superficies

Flora aerobia mesófila total

≤ 10 ufc/25cm2

Flora aerobia mesófila total

< 100 ufc/25cm2

Flora aerobia mesófila total

< 10 ufc/25cm2

después de la desinfección Calidad de las superficies de los textiles después del lavado y desinfección de uso en quirófanos convencionales Calidad de las superficies de los textiles después del lavado y desinfección de uso en quirófanos de alto riesgo

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Página 28

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

2. como vehículo transportador de gérmenes, debido a las turbulencias y corrientes de aire provocadas por el continuo trasiego de personal.

Por otra parte, hay que tener en cuenta que en Nahikari Alberdi Larrabeiti

los

Ingeniera Técnica Química. Análisis Biológicos Biotalde.

edificios

donde

hay

instalado

aire

acondicionado, éste puede generar condiciones constantes de humedad y temperatura, tanto en los locales como en interior de algunos componentes de la instalación, y de esta manera conformar condiciones idóneas para el desarrollo de algunos microorganismos.

“La acumulación de polvo y de agua en el interior de los conductos y maquinaria proporcionan el sustrato INTRODUCCIÓN

en

La calidad ambiental en el interior de los

microorganismos”.

el

que

crecen

dichos

edificios es uno de los factores básicos en el confort y la salud de los usuarios de los

Por

mismos.

recomendable, además del mantenimiento y

El ambiente, en lo que se refiere a la contaminación microbiológica, actúa de dos

lo

expuesto,

se

considera

limpieza de todos los circuitos de aire, la aplicación de algún tratamiento desinfectante, que

formas distintas:

todo

nos

garantice

que

los

niveles

de

contaminación microbiana se mantienen en el 1. como depósito de reserva de gérmenes, los cuales se hallan distintas

partículas

absorbidos sobre las que

se

umbral más bajo posible, a fin de evitar el riesgo de contaminación al personal.

encuentran

suspendidas en el aire.

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Página 29

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

“Para ello, en primer lugar se deben establecer los criterios de muestreo y

seleccionar

muestreo edificio

los

puntos

de

concretos

dentro

del

y,

en

segundo

lugar,

establecer los parámetros a medir y los

métodos

específicos

para la

El aire para consumo humano ha de ser analizado de forma periódica y sistemática con el fin de garantizar unos niveles de calidad mínimos necesarios que disminuyan los efectos nocivos de la contaminación existente y de la que se produce en toda actividad.

OBJETIVO Establecer los criterios para el muestreo de aire interior así como definir la metodología para una correcta toma de muestras de aire para su control microbiológico.

ALCANCE El presente procedimiento es aplicable al aire interior de cualquier tipo de instalación, con o

ArcSterile, es el nuevo Quirófano, Plegable y adaptable

sin climatización, que requiera una toma de muestras ambientales para el control de su

http://arcsterile.com

calidad microbiológica.

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Página 30

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

“Por tanto nos sirve para controlar la

higienización

climatización,

de

para

microbiológica

sistemas la

de

de

validación salas

Zonas de riesgo: Espacio definido dentro de una sala de ambiente controlado que presentan

de

una

ambiente controlado (salas limpias,

vulnerabilidad

particular

a

la

contaminación. salas de centros sanitarios) y para Muestreo: Método que consiste en extraer las

el control microbiológico del interior

muestras consideradas como representativa de

de los edificios”.

la población, con el propósito de examinar diversas características definidas.

Muestreador: Aparato utilizado para obtener

DEFINICIONES

una muestra ambiental, con el objetivo de

Sala de ambiente controlado: Sala con las

examinar varias características definidas, en

estructuras e instalaciones especificas para

nuestro caso, los recuentos de bacterias y de

controlar la biocontaminación y los parámetros

Mohos y Levaduras presentes en el aire.

ambientales adecuados.

Toma de muestras: método que consiste en

Sala limpia: Local en el que se controla la

extraer las unidades de muestra en el soporte

concentración de partículas contenidas en el

físico específico que permita su posterior

aire y que además su construcción y utilización

examen o control analítico definidos en el

se realiza de forma que el número de partículas

muestreo.

introducidas o generadas y existentes en el interior del local sea lo menor posible y en la que

además

se

puedan

controlar

otros

parámetros importantes como: temperatura, humedad y presión.

Sistemas

de

climatización:

sistemas

de

ventilación y acondicionamiento de aire (SVAA) Higienización:

procesos

para

eliminar

los

contaminantes (químicos y biológicos) y los depósitos de suciedad que se encuentran presentes, de forma visible o n o, en el sistema. www.biotecnologiahospitalaria.com

Página 31

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

PROCEDIMIENTO En primer lugar hay que definir los criterios del muestreo. Para ello se deberán tener en

También los productos que se utilizan para la limpieza y desinfección de la sala.

cuenta, al menos, los siguientes factores: 1.3.- Uso de la instalación.

MUESTREO 1.1.- El objetivo del control analítico y en su

“Puede ser importante conocer las

caso, si la hubiera, la identificación de

personas / usuarios de la sala, el

peligros existentes en la sala.

tiempo que permanecen en ella, si

Es importante conocer el objetivo del control

pertenecen a grupos de riesgo o no,

por parte del responsable de la instalación a

si existen quejas derivadas de la

examinar. Si se hubiera realizado la evaluación

estancia

en

cualquier

otra

de peligros, se debe conocer para adecuar la

la

instalación,

característica

o que

estrategia de muestreo. pueda tener relación con el objetivo Identificación

de

peligros:

Descripción

de

del control”.

posibles fuentes de contaminación del aire (superficies, textiles, líquidos…)

1.2.- La descripción de las instalaciones: superficie,

distribución,

zonas

existencia

de

de

sistemas

de

riesgo,

climatización,

1.4.-Estrategia de muestreo. La elección de los métodos de muestreo:

equipos, productos utilizados….

Aleatorio: cualquier punto.

Es

importante

conocer

el

estado

de

la

Preventivo:

los

puntos

más

instalación, es decir, la nueva puesta en

desfavorables y de mayor riesgo.

marcha,

vacío,

Rutinario: los puntos establecidos en

funcionamiento en proceso y el funcionamiento

el autocontrol o en una norma de

en tensión de actividad.

referencia.

funcionamiento

en

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Página 32

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

Validación:

los

puntos

representativos establecidos en el

Donde: P= Número de puntos

estudio de validación Correctivo: los puntos donde ha ocurrido una incidencia y se han

S=

Superficie

de

la

sala

a

muestrear

realizado acciones correctivas

1.5.-Número de muestras representativas Debemos saber el número de puntos a muestrear, que depende de la superficie total construida del edificio o del área objeto de estudio y se puede calcular mediante la siguiente fórmula:

P = 0,1xS 0,56

1.6.-Periodicidad de la toma de muestras y el momento: se debe establecer la frecuencia o bien el momento en el que se realiza las tomas de muestras.

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Página 33

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

Hay dos tipos de dispositivos de toma de muestras: “Algunos

momentos

críticos

a

Dispositivo de muestreo pasivo, como

considerar son: previamente a una

las placas de sedimentación: Se basa en

puesta en marcha, tras una reforma,

dejar placas abiertas durante un tiempo y

tras mantenimiento por detección

esperar

que

Solo es útil para calificar un tipo de aire

absolutos, tras limpieza del SVAA,

(muy

en

contaminado).

de

obras

proximidades

en

de

microorganismos

presentes en el aire caigan en ellas.

de anomalías, tras cambio de filtros

caso

los

las

contaminado

o

Las

poco

placas

de

sedimentación son adecuadas para la

áreas

evaluación cuantitativa o cualitativa de

controladas…”.

posibles contaminaciones en superficies por

partículas

viables

ambientales

depositadas del aire.

TOMA DE MUESTRAS

En este caso, no se necesita equipo.

2.1.-Selección del método.

Dispositivo de muestreo activo, como

El método de toma de muestras está en función

los dispositivos por filtración, impacto e

de la técnica analítica y del propósito del

impregnación. Impacto: La recogida de

estudio. Conocer el método analítico para

los gérmenes del aire se realiza por

establecer el método de toma de muestras más

aspiración de un volumen conocido de

adecuado.

aire,

a

través

de

un

cabezal

de

muestreo colocado por encima de la 2.2.-Preparación

de

los

equipos

para

el

muestreo (calibración, verificación…).

placa

con

apropiado.

el Los

medio

de

cultivo

microorganismos

Antes de la utilización de los equipos debemos

presentes en el aire impactan sobre el

verificar los equipos que vayamos a utilizar.

Agar.

En este caso, el flujo de entrada del aire del equipo debe estar calibrado y cumplir con los criterios de la ISO 14698.

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Página 34

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

2.3.-Toma

Procedimiento

Una vez seleccionados los puntos que se

específico de toma de muestras de aire para el

quieren muestrear, procedemos a la toma de

control microbiológico de bacterias, Mohos y

muestras. Para ello hay seguir unas pautas:

de

muestras:

Levaduras.

Nos debemos asegurar que los equipos de

acondicionamiento

de

aire

se

encuentran en funcionamiento.

Evitar que las ventanas, puertas… estén abiertas. Conocer el sentido del flujo del aire Anotar si hay suciedad o cualquier condición anormal.

Realizar

la

toma

de

muestras

sin

presencia humana, pero si la hay sin hablar, sin moverse ni interferir en los flujos de aire.

Comprobar la batería del muestreador Verificar que las placas que vayamos a utilizar no presentan ningún crecimiento previo.

En el momento de la toma de muestras hay que tener Los

medios

de

cultivo

utilizados

deben

contener neutralizantes de posibles residuos de desinfectantes que pueda haber en el aire. Los medios de cultivo mayoritariamente utilizados son:

en

cuenta

algunos

aspectos

para

garantizar una máxima recuperación: Que hay efectos negativos que generan estrés térmico, hídrico, luminoso,… y que influyen en la supervivencia de los microorganismos. Esto puede afectar al

Flora

Total

aerobia

mesófila:

TSA

(Triptona Soja Agar) Mohos y Levaduras: Agar Rosa Bengala, Agar Sabouraud con cloranfenicol.

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volumen de aire a filtrar.

Si se ha realizado una desinfección previa y pueden quedar restos de desinfectante residual

Página 35

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

Además se debe tener en cuenta bien el grado

Los datos de identificación de la muestra

de contaminación “esperado” o bien el grado

contemplaran al menos:

de

exigencia

establecido

(por

norma

de

referencia o por especificaciones internas).

1. Fecha y hora en la que se realiza la toma.

2. Lugar y punto de muestreo

Se determina el volumen a filtrar más

3. Persona responsable de la toma

adecuado entre 50 L y 1000 l

4. Volumen de aire filtrado

Se toman varios volúmenes (distintas

5. Descripción de los datos relevantes que

diluciones) para asegurar un recuento

puedan afectar al resultado: condiciones

con los niveles de exactitud y precisión

ambientales de temperatura y humedad

exigidos.

relativa, tiempo exterior, incidencias, uso

Se toman las muestras por duplicado (de

de la sala en el momento de la toma, obras

acuerdo con la UNE 100012,..)

próximas,……

Una vez contemplados todos estos aspectos se

Después de haber tomado las muestras se

realizará la toma de muestras:

deben colocar en recipientes o envases que

1. Filtración de la muestra: El cabezal del impactador

volumétrico

debe

estar

limpio, desinfectado o esterilizado.

2. Se coloca la placa evitando cualquier tipo

de

contaminación

cruzada.

aseguren su estanqueidad y que no se rompan, ni

contaminen

durante

el

trasporte

al

laboratorio. El trasporte de las muestras se debe realizar en el mínimo plazo de tiempo posible y refrigerado a 4ºC aproximadamente.

Inmediatamente se coloca el cabezal.

3. Se debe verificar que el volumen a muestrear es el elegido 4. Una vez filtrado el aire, se cierra la placa y se identifica correctamente.

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Página 36

TOMA DE MUESTRAS PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO DE AIRE INTERIOR

BIBLIOGRAFÍA

UNE

10012

Higienización

de

sistemas

de

Acceso al CAMPUS VIRTUAL SEGLA, plataforma online de Formación especializada diseñado para promover el intercambio de ideas y conocimientos"

climatización F.E.D.E.C.A.I Programa de Certificación de Calidad Ambiental en Interiores UNE 171340 Validación y cualificación de salas de ambiente controlado en hospitales.

UNE-EN ISO 14644-1 Salas limpias y locales anexos Parte 1: Clasificación de la limpieza del aire.

UNE 171330 Calidad Ambiental en interiores

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Página 37

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Página 38

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

“Estas

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

infección

pacientes

de

afectan

todos

los

a

grupos

etarios sin embargo los dos grupos extremos, mayores

neonatos además

de

y

adultos pacientes

inmunosuprimidos son en general Esther Paula Damiani Moises

los más afectados”.

Bioquímica, Farmacéutica, Microbióloga, LA PAZ (BOLIVIA).

El grupo de pacientes neonatos es un tema

INTRODUCCIÓN

mundialmente importante. En el siglo XX los adelantos de la ciencia, la medicina y la

Las

infecciones

intrahospitalarias

se

asistencia

hospitalaria,

favorecen

la

constituyen en un problema de salud pública de

supervivencia de los recién nacidos pre-término

mayor importancia tanto desde el punto de

(nacidos antes de tiempo), con un sistema

vista de la calidad de atención en salud como

inmune sin desarrollar que,

desde el punto de vista costos directos e

medio aséptico como es el útero, se enfrentan

indirectos para el paciente. Por otro lado, el

a

uso de antimicrobianos ejerce presión selectiva

favoreciéndose

sobre

infecciones hospitalarias.

los

microrganismos

provocando

la

todo

tipo

de un

al salir de un

exposiciones

ambientales

incremento

de

las

prevalencia de patógenos resistentes. Estas infecciones pueden deberse a una diversidad de microrganismos, bacterias, algunos virus y hongos. En este trabajo hacemos una revisión sobre

el

género

Cándida

y

el

género

Aspergilius.

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Página 39

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

DEFINICIONES: Estas infecciones hospitalarias son normales y frecuentes en hospitales de todo el mundo debido al propio ambiente

Infección Intrahospitalaria:

hospitalario en se

Una infección contraída en el hospital por un

introducen, no solo con los pacientes, también

paciente internado por una razón distinta de

con las visitas,

esa infección. Una infección que se presenta en

donde

todo

tipo

de

microorganismos

y encuentran un medio

un paciente internado en un hospital o en otro

favorable para su desarrollo.

establecimiento de atención de salud en quien Las Unidades de Cuidados Intensivos de bebés y

la infección no se había manifestado ni estaba

más

si

son

inmunodeprimidos,

prematuros,

pacientes

en período de incubación en el momento del

Unidades

Cuidados

internado.

de

Comprende

las

infecciones

Intensivos, salas de postoperatorio de cirugía y

contraídas en el hospital, pero manifiestas

zonas de ingreso de ancianos son el lugar

después del alta hospitalaria y también las

preferido, por las características de este tipo

infecciones ocupacionales del personal del

de pacientes que apenas tienen defensas

establecimiento (1)

naturales, para que proliferen a sus anchas los microorganismos.

En cuanto a los neonatos (recién nacidos), se define como infección nosocomial cuando nace

La lucha contra este tipo de infecciones se

un niño, y aparece infectado 48-72 h más

traduce en un aumento de las resistencias a los

tarde, de una madre no infectada al ingreso.

antibióticos, utilizando fármacos de nueva

(1)

generación y cada vez de más amplio espectro.

Las bacterias y otros microorganismos se

ANTECEDENTES

adaptan e intentan sobrevivir. Se trata de una lucha continua que no es posible solventar, sino

“Varios estudios muestran que entre

ir sorteándolo con nuevos agentes en la lucha

las levaduras, el género Cándida es

contra los microrganismos.

el más frecuente y entre los Hongos filamentosos, al parecer Aspergilius también

está

entre

los

más

frecuentes”.

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Página 41

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

REVISIÓN BIBLIOGRAFICA En España, según el estudio multicéntrico Sepsis realizado entre 1994 y 1997 y en el que

1.- ASPERGILLUS

participaron 24 hospitales, las infecciones fúngicas representan el 3,1% de todas las

Todos

sepsis, siendo Candida spp. el octavo agente

momento de nuestras vidas y solo si encuentra

causante de infección sistémica. Según este

condiciones

favorables,

estudio, el 72,1% de los casos de fungemia fue

disminución

de

de

organismo, es capaz de producir enfermedad

origen

nosocomial,

con

una

tasa

de

mortalidad del 33,3%. En Estados Unidos,

inhalamos

Aspergillus

las

en

como

defensas

cualquier una

de

gran

nuestro

en el hombre.

Candida spp. es el cuarto microorganismo más frecuentemente aislado en las sepsis, produce el 8% de las mismas, con una tasa de

En los últimos dos decenios los hongos han

mortalidad del 38% [3]; en este país, el 85,6%

mostrado una participación creciente en las

de las micosis nosocomiales son debidas al

infecciones

género Candida.(2)

guarda

nosocomiales.

relación

con

Su

surgimiento

factores

como

los

adelantos en el tratamiento del cáncer y el Un estudio sobre micosis invasivas en 130

trasplante de órganos, que han llevado a

pacientes de la red de hospitales, de los cuales

poblaciones

12

Aspergillus

aumento del uso de antibióticos de alto

y 118 presentaron Candidiasis por

espectro, lo cual aporta una ventaja selectiva a

presentaron

fumigatus Candida

albicans

micosis

y

por

Candida

parpsilosis

intrahospitalarias

a

un

gran

los hongos oportunistas.

principalmente la mayoría de pacientes se encontraban internados en UCI. (3)

“El género Aspergillus junto con la Cándida, es uno de los más frecuentemente identificados en los casos descritos de infecciones fúngicas que afectan fundamentalmente

a

pacientes

inmunocomprometidos.

En

contraste

los

estudios ambientales indican que el hombre “sano” puede inhalar diariamente cientos de esporas de Aspergillus que son fácilmente eliminadas por el sistema inmune”.

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Página 42

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

Este género y particularmente el Aspergillus

En la actualidad la preocupación general surge

fumigatus es el más frecuentemente implicado

por la existencia de casos de micosis invasoras

en las infecciones nosocomiales provocando la

de origen ambiental, aparecidos en forma de

aspergilosis

brotes

invasora.

Se

define

como

y

ligados

a

contaminación

de

aspergilosis invasora la infiltración e invasión

determinadas zonas del medio hospitalario,

demostrada

como bloques quirúrgicos, a pesar de las

de

tejidos,

ordinariamente

estériles, por microorganismos del género Suelen

Aspergillus.

tener

un

tropismo

particular por los vasos sanguíneos y su

medidas

establecidas

de

mantenimiento,

calidad del aire y control de ventilación en quirófanos.

diagnóstico de certeza es histológico.

En algunos de estos casos la fuente de infección puede proceder de una ruptura de las normas de buena práctica en el control de la “Además

de

invasora,

la

aspergilosis

rápidamente

evolutiva

infección, y en el mantenimiento de los equipos e instalaciones de climatización.

(sobre todo en inmunodeprimidos), pueden existir formas invasoras de evolución

crónica

(generalmente

afectando sólo al pulmón). Existen enfermedades

causadas

por

Aspergillus no caracterizadas por la invasión

general,

colonización pulmonares

y

como

son

la

de

cavidades

la

aspergilosis

Dado

que

los

hongos

se

encuentran

ampliamente distribuidos en el aire y en el suelo, en circunstancias determinadas, las esporas fúngicas pueden ser inhaladas por los pacientes inmuno-comprometidos provocando cuadros de consecuencias fatales, sobre todo Respiratorios.

broncopulmonar alérgica”

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Página 43

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

Importancia del problema: El

proceso

infeccioso

nosocomial

más

frecuente, producido por Aspergillus sp, es la neumonía, requiere

cuyo la

diagnóstico

realización

de

de

certeza

procedimientos

invasivos como la biopsia de pulmón.

•

Su presentación es infrecuente si se compara con otros agentes responsables de la neumonía de origen nosocomial, pero dada la naturaleza necrotizante de esta infección sus índices de mortalidad son elevados, y se suele asociar con una pobre respuesta a los tratamientos antimicóticos específicos.

•

La mortalidad atribuible a la aspergilosis pulmonar invasiva oscila desde el 95% en enfermos con transplante alogénico de médula ósea, anemia aplásica o endocarditis protésica, al 13-80% en enfermos leucémicos.

•

La

mortalidad

de

la

endocarditis

protésica por Aspergillus es del 95%

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Página 44

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

El agente: Los

Factores del agente:

hongos

ambientales

oportunistas

se

encuentran ampliamente distribuidos en la ·

La ubicuidad del Aspergillus

·

El

naturaleza,

variando

la

concentración

de

sus

esporas y conidias fúngicas en el aire exterior

esporas, lo hacen ideal para ser

en función de las condiciones climatológicas y

aspiradas y alcanzar el árbol

ecológicas.

pequeño

tamaño

de

tráqueobronquial y/ los senos paranasales. ·

Su capacidad de crecer a 37ºC, idónea

para

afectar

al

ser

descrito

cerca

de

900

especies

clasificadas en 18 grupos, pero menos de 20 se

Su capacidad de adherencia a

Aspergillus fumigatus (85%). A. flavus (5-10%),

superficies epiteliales y su gran

A. níger (2-3%), A.terreus (2-3%), son los más

tendencia

importantes.

a

invadir

vasos

sanguíneos. ·

han

han demostrado patógenas en el hombre:

humano. ·

Se

Su capacidad para crecer a la temperatura del

La producción de gran número de

productos

extracelulares

tóxicos para las células de los mamíferos.

cuerpo humano le diferencia de muchos otros hongos saprofitos que inhiben su crecimiento a dicha temperatura.

Junto con otros géneros

oportunistas se ha aislado en muestras de aire no filtrado, en sistemas de aire acondicionado, en

superficies,

en

alimentos,

plantas

ornamentales, celulosa de muebles, papel de las paredes y en el polvo doméstico. También se puede encontrar rutinariamente en el aire de los hospitales y en el medio ambiente del interior de edificios. Su concentración aumenta durante la realización de obras, no solo en el hospital, sino en las inmediaciones.

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Página 45

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

“El

medioambiente

“Es menos frecuente pero de igual

hospitalario pone de manifiesto que

importancia una segunda puerta de

la

análisis

presencia

del

Aspergillus

de

es

entrada

del

agente

extremadamente variable y que en

medioambiente

ocasiones

inoculación

sus

esporas

pueden

persistir durante meses”.

través

de

directa,

el su por

traumatismo abierto o cirugía. Este

En este medio las esporas pueden proceder de: -

a

desde

De la realización de actividades de

mecanismo da lugar a una infección primaria

de

la

zona

inoculada,

construcción en o cerca del hospital, ya

pudiendo ocurrir una diseminación

que durante las obras se ponen al

en función del estado inmunitario

descubierto los reservorios del hongo,

del huésped”.

produciéndose elevadas concentraciones en el aire que fácilmente se difunden por el medio ambiente.

-

Directamente

de

los

reservorios,

Factores del Huésped:

fundamentalmente: El o

Sistemas

de

ventilación

contaminados con polvo o

Humedades

en

paredes,

Plantas o flores

o

Conductos de aire contaminados con excrementos de pájaros

condición que predispone a la infección por de

considerado

fundamentalmente un patógeno oportunista suelen afectar a individuos que padecen alguna

entrada

y

La inmunosupresión puede ser: •

Aunque los factores del huésped constituyen la puerta

es

alteración en sus mecanismos de defensa.

o

la

Aspergillus

porque las diferentes especies de Aspergillus

maderas, etc.

Aspergillus,

género

micosis invasoras es el transporte por el aire,

prematuros,

grandes

inmaduros, vejez…

•

Patológica

por

enfermedades

a

tratamientos

subyacentes

el

mecanismo de transmisión habitual en las

Fisiológica:

•

Secundaria farmacológicos.

es decir, la inhalación.

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Página 46

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

“Concretamente el factor de riesgo del huésped más importante para el

Medidas de prevención:

desarrollo de aspergilosis invasiva nosocomial es la granulocitopenia

-

Instalar filtros EPA (de alta eficiencia) para eliminar partículas en el aire.

severa y prolongada” -

Desinfección concurrente de todas las estancias

y

objetos

probablemente

contaminados.

Factores de riesgo: 2.- CANDIDA •

Pacientes sometidos a transplantes de médula ósea, sobre todo si es un trasplante alogénico donde la aparición de rechazo conlleva la utilización de corticosteróides, ciclosporina u otros fármacos inmunosupresores que derivan en granulocitopenia intensa.

•

•

•

•

Pacientes

que

han

Aunque

la

mayoría

de

las

infecciones

nosocomiales sistémicas por levaduras son producidas por las diferentes especies de Candida, en los últimos años se ha observado un

progresivo

incremento

de

infecciones

profundas por otras levaduras.

recibido

un

trasplante de órgano sólido: corazón,

De las más de 100 especies de Candida

riñón, hígado, pulmón…La frecuencia es

conocidas sólo unas pocas se han aislado en

menor

humanos,

entre

granulocitopenia.

albicans,

Candida

Pacientes sometidos a procedimientos

ropicalis, Candida glabrata, Candida krusei y

quirúrgicos como: cirugía cardiovascular

Candida lusitaniae. Todas las especies de

sobre

valvulares.

Candida pueden causar el mismo tipo de

También implantes protésicos como los

enfermedad, desde una candidosis superficial

de cadera.

hasta una enfermedad invasora; sin embargo,

Pacientes con patología pulmonar previa

la gravedad y las opciones terapéuticas difieren

como bronquitis crónica, enfermedad

entre las distintas especies,por ello es tan

pulmonar obstructiva crónica, fibrosis

importante identificar la especie en todos los

quística, tuberculosis.

aislamientos de Candida de infecciones graves.

por

todo

Pacientes

ser

de

menos

prótesis

severa

la

ellas

destacan

Candida

parapsilosis,

Candida

inmunosuprimidos,

inmaduros, recién nacidos pre término.

•

Pacientes en hemodiálisis.

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Página 47

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

Mediante análisis multifactorial teniendo en consideración la enfermedad de base, se han

Factores de riesgo.

identificado

como

independiente

la

factores

de

colonización

riesgo

previa,

la

“La mayoría de los factores de

antibioterapia, la presencia de catéter, la

riesgo

neutropenia y la disfunción renal. En el recién

para

la

adquisición

de

nacido, además de los citados para adultos, se

candidemia son muy comunes en

todos

los

pacientes

han identificado también como factores de riesgo la prematuridad, el bajo peso al nacer y

hospitalizados,

siendo

difícil

la nutrición parenteral.

determinar el grupo de pacientes con mayor riesgo para desarrollar

El agente:

Algunos de estos factores actúan produciendo

C. albicans es un componente habitual de la

inmunosupresión (neutropenia, malnutrición,

microflora cutánea, tracto gastrointestinal y

quimioterapia,

genital.

radioterapia,

etc.);

otros,

Del

2

al

15%

de

los

enfermos

facilitan la ruta de la infección (catéter,

colonizados

quemaduras, colonización previa) pero, lo más

candidosis diseminada casi siempre de origen

frecuente, es que exista una combinación de

endógeno,

varios factores (por ejemplo, la infusión de

procesos infecciosos que no han recibido

antibacterianos de amplio espectro puede

quimioterapia previa.

por sobre

esta todo

especie en

desarrollan

pacientes

con

inducir la proliferación de hongos en el tracto gastrointestinal desde donde pueden colonizar la piel y entrar en el torrente sanguíneo a

La

mortalidad

cruda

de

la

través del catéter o bien, por translocación

candidemia por esta especie es del

intestinal, pasar directamente a la sangre

79% muchas veces motivada por los

desde el tubo digestivo).

diversos factores de virulencia que

C. .

“Las

condiciones

albicans

puede

desarrollar

predisponentes

(adherencia a células epiteliales y

más importantes para desarrollar

endoteliales, síntesis de enzimas

candidemia son la neutropenia, los

hidrolíticos, formación de hifas y

defectos en la inmunidad celular y

pseudohifas,

la alteración de la flora microbiana”

modulación antigénica, etc.).

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cambio

fenotípico,

Página 48

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

C. parapsilosis, comensal habitual de la piel, se aísla

con

mayor

frecuencia

en

pacientes

pediátricos, también desarrolla factores de

Aunque Candida rugosa habitualmente produce

virulencia y se le ha relacionado tanto con la

mastitis bovina, también se han descrito

nutrición

uso

fungemias por esta levadura en enfermos

de

inmunodeprimidos, asociada a la utilización de

transmisión exógena). Es la menos patógena de

catéter , y colonizaciones de heridas asociadas

las

al uso de nistatina tópica en una Unidad de

parenteral

prolongado

del

especies

atribuible

del

como

catéter

con

una

30%,

con

el

(mecanismo mortalidad

mientras

cruda

que

la

mortalidadmedia de las otras especies es del

Quemados por cepas sensibles a anfotericina B y resistentes a nistatina.

78%.

La capacidad invasora de C. tropicalis es mayor que la de C. albicans; se considera que entre el 50-60% de los colonizados por C. tropicalis desarrollan candidosis invasoras. Afecta con más frecuencia a pacientes con enfermedad hematológica o receptores de médula ósea y suele adquirirse, mediante un mecanismo de transmisión endógeno, en los primeros días de hospitalización

en

ausencia

de

profilaxis

krusei

afectan

antifúngica y

C.

predominantemente

a

C.

glabrata

pacientes

con

antecedentes de profilaxis antifúngica con fluconazol no portadores de catéter y sin antibioterapia previa a la fungemia. C. glabrata es la menos virulenta de todas; sin embargo, es la que presenta la segunda mayor tasa de mortalidad detrás de C. krusei; esta última es la especie que se aísla con mayor frecuencia en los pacientes con neoplasia hematológica.

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Página 49

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS

C. lusitaniae forma parte de la flora del tracto gastrointestinal y respiratorio. Se han descrito

Además,

pocos casos de infección nosocomial por esta

sensibilidad antifúngica ayuda a comprender la

especie, algunas por mecanismo de transmisión

contribución de la resistencia a los antifúngicos

exógeno, y en otras por infección cruzada.

al fracaso terapéutico.

la

realización

de

pruebas

de

Algunos autores consideran a esta especie como intrínsecamente resistente a anfotericina B;

La administración de citosinas y factores de

otros,

la

crecimiento puede paliar la intensidad de la

este

neutropenia y acortar la duración de la misma,

sin

embargo,

existencia

de

han

cepas

comunicado

sensibles

a

antifúngico.

aunque no hay evidencia probada que la incidencia de infecciones fúngicas disminuya

Candida conspicua es un infrecuente agente

con el uso de estos fármacos.

causal de candidemia. Hasta la fecha, sólo se ha descrito un brote epidémico por esta

Por otra parte, las medidas de higiene tanto

especie

cáncer

del enfermo como de su habitación y baño

hematológico, no pudiéndose determinar el

ayudan a impedir la transmisión horizontal,

origen de la infección. Las cepas aisladas

siendo también importante disponer de un fácil

fueron resistentes al fluconazol y sensibles a la

acceso al lavado de las manos por parte del

anfotericina B y, en los tres casos, la fungemia

personal sanitario.

en

tres

pacientes

con

remitió fácilmente con el tratamiento por lo que no parece ser una especie muy virulenta.

“Además, a los enfermos de alto riesgo Medidas

Los

preventivas:

métodos

de

prevención de una candidemia tienen como objetivo

reducir

los

actores

de

(receptores

hematológicos, recomendable

de

médula,

etc.)

es

ingresarlos

en

riesgo

identificados. Así, ante una colonización en

habitaciones de

con

los

seguridad

mayores

pacientes de alto riesgo, es aconsejable la

niveles

ambiental

instauración de profilaxis antifúngica, profilaxis

(presión positiva de aire, control de

no exenta de riesgo ya que, a su vez, puede

esterilidad de los alimentos, etc.)”.

seleccionar cepas resistentes a los azoles como son C. glabrata y C. krusei.

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Página 50

REVISIÓN DE FRECUENCIA DE HONGOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS INTRAHOS

En

aquellos

pacientes

susceptibles

de

desarrollar infección nosocomial por Candida spp., es conveniente hacer cultivos periódicos de

vigilancia

para

detectar

posibles

colonizaciones, teniendo en cuenta que tanto

BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA

la candiduria como la bacteriemia iemia pueden ser indicadores útiles de candidosis sistémica.

BIBLIOGRAFIA (1) Prevención

de

nosocomiales,

las

GUÍA

infecciones PRÁCTICA

,

WHO/CDS/CSR/EPH/2002.12 2a edición Organización Panamericana de la Salud, Washington, 2002 (2) Infección

sistémica

nosocom nosocomial

por

levaduras, Rev. Iberoam. Micol.; Cantón E. Viudés A. Pemán J. 2001; 18: 51-55.

51 (3) Publicación de la Universidad de Chile, Pag. Web 2001 (4)

Patógenos

emergentes

en

micosis

cutáneas y sistémicas, Vargas Montiel H., Dermatología Venezolana. Vol. 42, Nº 2,

BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA ha sido reconocida como Web Médica Acreditada (WMA)

2004

www.biotecnologiahospitalaria.com

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Página 51

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Página 52

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES Según la Organización Mundial de la Salud, un 30 % de los edificios nuevos y remodelados de

Jacqueline Arlene Pinzón Hernández.

Lic.

en

Biología

Microbiología

y

con

todo

Orientación

Parasitología.

en

Instituto

el

mundo

contaminantes

en

contienen su

interior

suficientes para

hacer

enfermar a las persona (1).

Conmemorativo Gorgas de Estudios de la Salud.

El aire presente en el interior de cualquier

PANAMÁ.

ambiente (hospitales, escuelas, casa, etc.) contiene una gran carga microbiana que es aportada en gran parte, por las personas que “En los últimos años ha surgido una mayor preocupación por la calidad del ambiente en el interior de los

están presentes en estos sitios, el tipo de actividades que ellas realizan, el grado de capacitación que posean, su actitud y hábitos personales.

inmuebles”.

También influyen, en la contaminación del aire, el programa de aseo y mantención del Se habla de edificios enfermos (los que presentan problemas que afectan a la salud de los individuos que están en su interior), y se intentan establecer recomendaciones sobre determinados aconsejables

niveles en

microbianos hospitales,

máximos industrias,

área y la rigurosidad en su cumplimiento, el aire exterior, el polvo ambiental, el tipo de suelo,

además

de

la

temperatura,

la

ventilación, la humedad y el recambio de aire (3).

Los microorganismos dispersados por el aire

ambientes laborales, empresas farmacéuticas,

tienen

etc. (1).

económica porque producen enfermedades en

El aire, durante siglos, ha sido considerado como el vehículo más importante en la transmisión de determinadas infecciones tales como

la

gripe,

tuberculosis,

difteria,

plantas,

una

gran

animales

importancia y

biológica

humanos,

y

causan

alteraciones en los alimentos y materiales orgánicos y contribuyen al deterioro y corrosión de monumentos y metales.

sarampión, varicela, etc. (2).

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Página 53

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

El transporte de los microorganismos en el aire,

Entre las bacterias que se transmiten por vía

se realiza sobre partículas de polvo, fragmentos

aérea y pueden causar enfermedades al entrar

de hojas secas, piel, fibra de ropa, en gotas de

en contacto con los humanos están: Legionella

agua o en gotas de saliva eliminadas al toser,

pneumophila y Micobacterium tuberculosis

estornudar o hablar (4).

(1).

Los microorganismos aerotransportados pueden

La contaminación del aire es el término usado

ser

para describir la presencia de uno o más

patógenos

humanos,

organismos

no

patógenos, productos microbianos, bacterias

contaminantes

en

aéreas cultivables y no cultivables, hongos

cantidades y características pueden resultar

saprofitos, parásitos de vida libre, virus y algas

perjudiciales o interferir con la salud, el

que causan resultados adversos a la salud;

bienestar

u

también están los fragmentos de agentes

naturales.

Por lo tanto cuando el aire tiene

microbianos que son de mucho interés. (5)

contaminantes en forma de partículas, gases o

otros

la

atmósfera,

procesos

cuyas

ambientales

agentes biológicos, existe un potencial de “El

aire

del

exterior

rara

vez

efectos nocivos a la salud (7).

contiene parásitos, probablemente

La transmisión de microorganismos por vía

a causa del efecto bactericida de la

aérea ha sido documentada desde hace mucho

desecación, el ozono y la radiación

tiempo. En la década del 30, Williams Wills

ultravioleta.

El

aire

de

las

publicó artículos comentando la capacidad infecciosa de las gotas de Pflugge o microgotas

habitaciones puede contener virus

salivares.

patógenos

propiedades de la luz ultravioleta para el

y

bacterias

que

son

esparcidas por los seres humanos desde su piel, manos, vestimenta y

Wills

control del aire.

también

estudió

las

En la década del 60, otros

investigadores reportaron la transmisión aérea de una variedad de infecciones como la

de

manera

especial

del

tracto

tuberculosis, influenza y sarampión (1).

respiratorio superior (6).

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Página 54

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

En 1847 y 1848 cuando sucedió la primera

Un estudio publicado en la AORN Journal en

epidemia de cólera en Europa se descubrieron

junio de 1999 relata una investigación en la

gérmenes

ésta

cual mediante una serie de muestras de aire

Se demostró la presencia en el

tomadas en quirófanos se pudo comprobar la

en

enfermedad. aire

de

el

varias

Staphylococcus

aire

causantes

bacterias aureus,

de

patógenas

como

Streptococcus

pyogenes y Mycobacterium tuberculosis (4).

presencia

de

elementos

como

provenientes

de

microorganismos pelusas, uniformes

y

fibras

de

otros tela

hospitalarios

y

campos quirúrgicos.

Hallazgos posteriores demostraron que muchas esporas

de

hongos,

incluyendo

la

de

“En

el

centro

de

Tratamiento

Aspergillus fumigatus, pueden encontrarse en

Intensivo del Hospital de Paysandú

distintas superficies.

en Uruguay se encontró que la tasa

Estas

esporas pueden

permanecer en el aire en forma indefinida y

de

infección

nosocomial

era

de

millones de ellas pueden ser vehiculizadas a 29.3%.

través del aire desde su punto de origen.

Se han reportado casos de problemas de salud

Los pacientes politraumatizados y

en humanos por exposiciones a hongos como

neurológicos sufrieron las tasa más

irritaciones, infecciones, alergias y efectos

altas 10% y 52% respectivamente.

tóxicos. La guía de campo publicada por la

Los bacilos Gram negativos fueron

Asociación Americana de Higiene Industrial recomienda

que

la

presencia

de

hongos

los

gérmenes

predominantes,

toxigénicos requiere un manejo de riesgo con

siendo la Pseudomonas las especies

carácter de urgencia (8).

más frecuentes (10)”.

El ambiente hospitalario requiere especial atención para asegurar que la calidad de aire interior (IAQ) sea buena y proteger tanto a los pacientes como a los trabajadores de la salud de que no adquieran una infección nosocomial o alguna enfermedad de tipo ocupacional (9).

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Página 55

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

Las

infecciones

nosocomiales

por

hongos

filamentosos no dejan de ser un problema. Más

“Algunos brotes por hongos se han

del 90% de todas las infecciones invasivas por

asociado

hongos

construcción y renovación dentro y

están

causadas

por

especies

pertenecientes a los géneros Cándidas sp (la más frecuente) y Aspergillus sp. Los pacientes con mayor riesgo de una micosis invasiva por

alrededor

con

de

actividades

hospitales

y

de

otros

brotes con mal funcionamiento o

hongos filamentosos capaces de transmitirse

contaminación de los sistemas de

por vía aérea son los pacientes con cáncer

ventilación o filtración del aire (13),

hematológicos, los receptores de trasplante de

(14)”.

órganos, los pacientes con SIDA, diabetes y los que son sometidos a cirugía (11).

El Aspergillus fumigatus y Aspergillus flavus fueron los responsable de las aspergilosis nosocomial invasiva en cinco pacientes en el Hospital Universitario en Rótterdam en los países bajos. Después de la inhalación de las conodias,

las especies de Aspergillus pueden

causar varias enfermedades como las invasivas en pacientes inmunocomprometidos (12).

En

un

estudio

realizado

en

el

Hospital

Universitario Federico II de Naples, en las Salas de Cuidados Intensivos de Neonatología se concluyó que el Staphylococcus epidermidis fue el responsable de 58 casos de infecciones de un total de 184 casos. Al igual el Staphylococcus

aureus,

Klebsiella

pneumoniae y Cándidas albicans también fueron aisladas pero en menor frecuencia. En

Además de las bacterias y hongos, muchos virus

este estudio Villari et al, 2000 concluyeron que

se transmiten por

Ejemplos

el Staphylococcus epidermidis ha emergido

habituales son los Rhinovirus, que causan la

recientemente como un patógeno en muchas

mayoría de los constipados comunes y el virus

infecciones nosocomiales en las salas de

de la influenza, agente causante de la gripe

cuidados intensivos de Neonatología (15).

vía aérea.

(1).

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Página 56

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

Las infecciones nosocomiales son consideradas “La contaminación del aire en el interior de las distintas áreas del

como una problemática moderna de salud a nivel institucional, ellas resultan graves y costosas

hospital, plantea muchos retos para el profesional de la salud.

para

la

atención

del

paciente

hospitalizado.

Los

individuos que presentan síntomas y

Las áreas de alto riesgo como salón de operaciones, quimioterapia, transplante, salas

signos de afecciones relacionadas

de recuperación de anestesia y las unidades de

con

haber

cuidados intensivos y coronarios son fuentes de

estado expuestos a partículas y

las infecciones nosocomiales producidas por

el

ambiente,

micoorganismos través del aire. ambientes carece

de

controlado, mayor

pueden

vehiculizados

Por otra parte, en

cerrados, un la

debido

a

cuando

sistema

de

se aire

contaminación a

una

es

mayor

concentración de partículas (1)”.

microorganismos

oportunistas,

afectando

a

pacientes susceptibles a las infecciones (17).

En

Panamá,

los

casos

por

infecciones

nosocomiales no dejan de ser un problema de salud pública, ya que a pesar de que existe una Norma

Nacional

Epidemiológica

coherente para

las

de

Vigilancia Infecciones

Nosocomiales, esta presenta la gran debilidad de que aunque dentro de su contexto implique

Las Normas de Vigilancia epidemiológica de las

el registro trimestral de los casos por parte de

infecciones nosocomiales de Panamá, describen

todos los hospitales del país no se le ha dado un

a las infecciones nosocomiales como aquellas

seguimiento periódico. Como consecuencia el

que se presentan en una persona hospitalizada,

Departamento de Estadística Epidemiológica

tratada en consulta ambulatoria, o en algún

del Ministerio de Salud cuenta con pocos datos

funcionario de la instalación, que no la padecía

al respecto (16).

ni la estaba incubando en el momento del contacto con el servicio de salud, o que

Los datos estadísticos suministrados por el

estando hospitalizado, aparece durante la

Departamento

hospitalización o después de su egreso dentro

Complejo Hospitalario Dr. Arnulfo Arias Madrid

del período de incubación; siendo el aire uno

señalan en el siguiente cuadro las muertes por

de los modos de transmisión mencionados (16).

neumonía

de

Registros

clasificadas

como

Médicos

del

defunciones

nosocomiales (18).

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Página 57

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

6. Wolfgang J.; Bernard A. y Wilfert C.

AÑO

NÚMERO DE MUERTES

2000

3

1997. Zinsser Microbiology; 20 edición;

1999

4

Editorial Médica Panamericana.

1998

11

1997

27

en los hospitales; El Papel .

1996

22

Nacional de Pediatría.

7. Cerminara, H. R. 2004. Control de aire

8. Shelton

Brian;

Kirklnad

Hospital

Kimberly.;

Flanders Dana y Morris George. 2002.

Profiles of Airborne Fungi in Building and

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Ortíz, Ginés y Catalán Vicente.

Calidad microbiológica

Outdoor Environments in the United 2007.

en ambientes

interiores. Gestión Práctica de Riesgo Laborales, N° 40. Pág. 26, julio-agosto 2007.

States.

Applied

ambiental

en

hospitalario.

Preventiva.

Contaminación

zonas Servicio

de de

riesgo Medicina

Hospital Ramón y Cajal

Madrid.

Enviromental

Microbiology, April 2002, p. 1743-1753, Vol. 68, N° 4.

9. Leung M. y Chan A.H. 2006. Control and management

2. Jodra, V. M. 2001.

and

of

hospital

Indoor

air

quality. Med. Sci Monit. 2006 Mra; 12 (3): SR 17-23. E pub 2006 Feb 23.

10. Rodríguez S.R., Sánchez V.L.D., Cerón D.,

Sierra

U.A.

1998.

Infecciones

Nosocomiales en una unidad de terapia intensiva genearl. Rev. Asoc. Med. Crt Y

3. Caorsi et al, 2011.

Ter. Int.; 11 (3)-64-70.

4. (http://proquinessa.com/Portada/O/calidad

de

Aire

PDF2_Micro_biología del aire.pdf.)

5. Building Air Quality. December 1991. A

11. Espejo G.A., Dic. 2000.

Hospitalario Juan Canalejo. La Coruña.

12. Leenders, A. C.A.P.:

Guide for Buuilding Owners and Facility

Behrendt M.,

Managers.

H. A. junio 1999.

Quality

Factors Affecting Indoor Air

EPA.

U.S.

Protecion Agency.

Environmental Office of Air and

Complejo

Belkum A. V.,

Luijendyk A. y Ver brugh Journal of Clinical

Microbiology. Pág. 1752-1757, vol. 37 N°6.

Radiation. Washington, DC 20402-9328.

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Página 58

CALIDAD DE AIRE EN HOSPITALES

13. Buffington J, Reporter R., Lasker BA.,

17. Arqueches, S. y Velásquez A. E., enero

McNeil NM., Lanson JM., Ross La.,

de

Mascola

1994.

Infecciones Nosocomiales de las vías

Investigation of an epidemic of invasive

respiratorioa en pacientes con tubos

aspergillossis: Utility of molecular typing

endotraqueales

with

amplified

atendidos en cuidados intensivos de

polymorphic DNA probes. Pediatr Infect

cirugía y neurocirugía del Complejo

Dis J. 13:386-393.

Hospitalario Metropolitano Dr. Arnulfo

L.,

the

use

Jarvis

of

W.

random

14. Ruutu P., Valtonen V., Tiitanen L., Elonen E., Violin L., Veijalainen P. 1987.

1993

a

diciembre

y

de

1993.

traqueostomía

Arias Madrid. Universidad de Panamá.

18. Departamento

de

Registros

Médicos,

An outbreak of invasive aspergillosis in a

junio 2004. Complejo Hospitalario Dr.

hematoloffic unity. Scand J. Infect Dis.-

Arnulfo

19-347-351.

Panamá.

Arias

Madrid.

República

de

15. Villari, P.-Sarnataro C., Y Iacuzio, L. 2000.

Molecular

Epidemiology

of

Staphylococcus apidermidis in a Neonatal Intensive Care Unit over a Three-Year Peior-, American Society MicrobiologyJournal Clinical Microbiology; M Vol. 38, pág: 1740-1746.

16. Ministerio de Salud de Panamá. 2000.

Normas de Vigilancia de las Infecciones Nosocomiales.

Dirección General de

Salud, Departamento de Vigilancia de Los Protectores y De Riesgo de la Salud y Enfermedades.

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Página 59

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Evidentemente,

hay

microorganismos

con

requerimientos nutricionales especiales que no crecen en este medio de cultivo o que necesitan

atmósferas

específicas;

la

identificación de estos microorganismos se

Araceli Delgado Fernández Bióloga, Central de esterilización. Hospital Costa del Sol, Málaga.

lleva a cabo por procedimientos concretos y diferentes según de qué microorganismo se trate.

En el caso de que el microorganismo sea GRAM POSITIVO, es imprescindible saber si puede

INTRODUCCIÓN

formar esporas lo que puede conocerse por calentamiento

o

mediante

una

tinción

específica. Si el microorganismo no es capaz de Tradicionalmente se realiza la identificación de

esporular es importante observar su forma,

bacterias en base al esquema que se presenta a

regular o irregular (forma de letras chinas). Si

continuación. Como puede observarse, las

se observan cadenas ramificadas o cabe la

primera prueba que se realiza es la observación

posibilidad de que se trate de una micobacteria

al microscopio del aislado mediante la tinción

se realiza la tinción de Zielh-Neelsen para

de Gram.

saber si la bacteria es Ácido-alcohol resistente (tinción de Zielh-Neelsen positiva).

Si el microorganismo es GRAM NEGATIVO y su forma es bacilar o cocoide lo siguiente es estudiar su metabolismo, una de las formas más sencillas de hacerlo consiste en crecer al microorganismo

en

CALDO

TIOGLICOLATO.

Según el patrón de crecimiento en este caldo podemos

saber

microaerófilo,

si

el

aerobio

microorganismo estricto,

es

anaerobio

estricto o anaerobio facultativo.

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Página 60

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Microorganismos GRAM NEGATIVOS

GRAM NEGATIVOS Forma de sacacorchos (espiroquetas) (ej.

Treponema, Borrelia, Leptospira…)

Forma helicoidal o vibrioide. Metabolismo aerobio o microaerófilo. (ej. Campylobacter…)

Bacilos Aerobios estrictos (ej.: Brucella, Pseudomonas, Aeromonas, Plesiomonas, Acetobacter, Legionella…)

Anaerobios facultativos (ej.: Vibrio, Enterobacterias: Salmonella, Shigella, Escherichia, Yersinia, etc) Anaerobios estrictos (ej.: Bacteroides…)

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Página 61

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Cocos Aerobios (ej.: Neisseria…)

Anaerobios (ej.: Veillonella…)

Para conocer el tipo de metabolismo de los microorganismos que queremos identificar se siembran en el siguiente caldo de cultivo:

Caldo Tioglicolato:

Este medio se usa para determinar el efecto del oxígeno sobre el crecimiento microbiano. Un tubo con medio semisólido contiene tioglicolato para reducir el potencial redox del medio. Así sólo hay oxígeno en la superficie y no en el resto del tubo.

El tubo es inoculado con un asa de siembra de punta y se incuba hasta que se produce crecimiento. Si el microorganismo es aerobio estricto crecerá en la parte de arriba del tubo, si es anaerobio estricto no crecerá en la parte alta del tubo y si es anaerobio facultativo crecerá por todo el medio de cultivo.

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IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Principales Familias y Géneros de bacterias GRAM NEGATIVAS

Forma

Metabolismo Oxidasa Catalasa Movilidad Utilización de azúcares Requerimiento de CO2

Pseudomonas Bacilo

Enterobacteriaceae Bacilo

Brucella Bacilo

Campylobacter Bacilo helicoidal

Anaerobio facultativo

Aerobio

Microaerófilo

+ + +/-

+

+ +

+ +/+

+ -

-

-

-

+

+/-

TABLA I

TABLA II

TABLA III

TABLA IV

TABLA V

Aerobio + + + +

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Vibrio Bacilo ligeramente curvado Anaerobio facultativo +

Página 63

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Microorganismos GRAM POSITIVOS

GRAM POSITIVOS Cocos (ej.: Staphylococcus, Streptococcus, Micrococcus…)

Cocos

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Página 64

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Bacilos esporulados Aerobios o Anaerobios facultativos (Bacillus) Anaerobios estrictos (Clostridium) Bacilos No esporulados Regulares (ej.: Lactobacillus, Listeria…)

Irregulares (ej.: Corynebacterium…)

Esporas Las endosporas son formas de resistencia metabólicamente inactivas, que resisten las altas temperaturas, la desecación y la radiación.

Las endosporas pueden sobrevivir al calentamiento y originar nuevas formas vegetativas en un medio de cultivo.

Bacilos

Se inocula un tubo de caldo con una suspensión sospechosa de contener endosporas. Se calienta a o 80 C durante 10 minutos. Se enfría y se incuba a la temperatura adecuada y en la atmósfera adecuada.

Si se observa crecimiento es porque en la suspensión había esporas (formas de resistencia).

Si no se observa crecimiento se puede concluir que el microorganismo no forma esporas.

Tinción de Esporas

Las esporas pueden apreciarse al microscopio utilizando tinciones específicas. Mediante la tinción de Wirtz las esporas se observan verdes mientras que las células vegetativas aparecen rojas.

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Página 65

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Bacilos Ácido-Alcohol Mycobacterium,

Resistentes (ej.: Nocardia…)

Tinción de Neelsen):

resistencia

ácido-alcohol

(Ziehl-

Reactivos: -Fucsina básica fenicada -Solución de ácido-alcohol (3% de HCl en etanol de 95°).

-Azul de metileno

NEGATIVO

Método: Extensión - Desecación - Fijación con alcohol metílico y enfriar - Fucsina durante 5 min en caliente - Decolorar hasta desaparición del color con ácidoalcohol - Lavar con agua - Azul de metileno durante 1 min - Lavar con agua - Secar - Observación con objetivo de inmersión.

Esta tinción permite diferenciar a los microorganismos que son ácido alcohol resistentes, de color rojo, de los que no lo son, de color azul.

Para conocer el metabolismo de los microorganismos que queremos identificar se siembran en el siguiente caldo de cultivo: Caldo

POSITIVO

Tioglicolato:

Este medio se usa para determinar el efecto del oxígeno sobre el crecimiento microbiano. Un tubo con medio semisólido contiene tioglicolato para reducir el potencial redox del medio. Así sólo hay oxígeno en la superficie y no en el resto del tubo.

El tubo es inoculado con un asa de siembra de punta y se incuba hasta que se produce crecimiento.

Si el microorganismo es aerobio estricto crecerá en la parte de arriba del tubo, si es anaerobio estricto no crecerá en la parte alta del tubo y si es anaerobio facultativo crecerá por todo el medio de cultivo.

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IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS

Principales Géneros de Bacterias GRAM POSITIVAS

Forma Esporas Metabolismo

Oxidasa Catalasa

Micrococcus Coco Aerobio

Staphylococcus Coco Anaerobio Facultativo

Streptococcus Coco Anaerobio Facultativo

+

+

-

Bacillus Bacilo + Anaerob io Facultati vo +

Clostridium Bacilo + Anaerobio

Listeria Bacilo Anaerobio Facultativ o

Lactoabacil Bacilo Anaerobio Facultativo

-

+

-

BIBLIOGRAFÍA:

Biología de los Microorganismos, Brock, 10ª. Ed. Michael T. Madigan, John M. Martinko, Jack Parker, Miguel Sánchez Pérez, 2003.

Beishir, L. “Microbiology in practice. A self-instructional laboratory course”. 5ª Ed. Harper Collins Pub. Inc., 1991.

Collins, C.H. y P.M. Lyne. “Microbiological methods”. Butterworth &Co. (Pub) Ltd, 1985.

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Página 67

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES DURANTE 2003-2012 EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR. MIGUEL ENRIQUEZ

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES DURANTE 2003-2012 EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR MIGUEL ENRIQUEZ (LA HABANA, CUBA).

RESUMEN

“El

aumento

de

la

resistencia

bacteriana frente a determinados antibióticos

ha

sido

motivo

de

preocupación y análisis de muchos investigadores,

casi

desde

el

momento mismo del descubrimiento éstos productos, ya sean de origen

Miriam Lazara Delgado Perez

natural,

Jefe del Laboratorio de Control de las Infecciones Asociadas a la Asistencia Sanitaria.

Hospital Universitario Clínico-Quirúrgico ¨Dr. Miguel Enríquez¨. La Habana

sintéticos”.

sintéticos

o

semi-

Los antibióticos conocidos como Cefalosporinas desde su aparición han sido muy utilizados en

Abilio Ubaldo Rodriguez Delgado Perez

los centros hospitalarios, ya sean como terapia Jefe del Laboratorio Provincial de Referencia para el Control de las Infecciones Asociadas a la Asistencia Sanitaria de la Capital. Centro Provincial de Higiene, Epidemiología y Microbiología de La Habana.

profiláctica o ante la aparición de infecciones tanto de microorganismos Gram positivos como Gram negativos, lo cual es posible por su amplio espectro de acción.

Olga Susana de Paula Almeida Facultad de Ciencias Enríquez, La Habana.

Medicas

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Dr.

Miguel

Página 68

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES DURANTE 2003-2012 EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR. MIGUEL ENRIQUEZ

En el presente trabajo se muestra un estudio

Se recomienda analizar el uso de Ceftriaxona,

retrospectivo que abarca 10 años (2003-2012) y

Cefuroxima y Cefotaxima en la Sala de Terapia

en el que se recoge el comportamiento de la

Intermedia de Medicina; de Cefuroxima en

resistencia antimicrobiana ¨in vitro¨ de los

Terapia Intermedia de Cirugía y de Ceftriaxona,

microorganismos aislados y caracterizados en el

Cefotaxima y Cefazolina en el Servicio de

Laboratorio de Microbiología a partir de las

Nefrología,

infecciones nosocomiales notificadas en áreas

aumentando la resistencia bacteriana a dichos

de riesgo del Hospital Universitario Clínico-

antimicrobianos.

para

evitar

que

continúe

Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”, frente a las cefalosporinas: Cefotazima, Pseudomonas spp.,

Ceftriaxona, Cefuroxima aeruginosa,

Escherichia

coli,

Ceftazidima, y

Cefazolina.

Staphylococcus Acinetobacter

baumanii y Citrobacter freundii, fueron los hallazgos más frecuentes.

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Página 69

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES DURANTE 2003-2012 EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR. MIGUEL ENRIQUEZ

Palabras claves: Resistencia a Cefalosporinas, Infecciones

nosocomiales,

Infecciones

A principios de la década de 1980, se conocen

Asociadas a la Asistencia Sanitaria en áreas de

las Cefalosporinas de 3ra. Generación cuyo

riesgo.

primer

componente

fue

Cefotaxime

y

finalmente en un momento en que se estaba obteniendo un incremento cada vez mayor de

INTRODUCCIÓN

cepas

resistentes

aparecen El aumento de la resistencia bacteriana frente a determinados antibióticos, ha sido motivo de preocupación

y

análisis

de

muchos

investigadores, casi desde el momento mismo del descubrimiento éstos productos, ya sean de origen natural, sintéticos o semi - sintéticos.

(1)

las

a

los

antimicrobianos,

Cefalosporinas

de

4ta.

Generación, encabezados por el Cefepime y Cefpirome.

(2)

Todos estos medicamentos son

ampliamente

utilizados

en

los

centros

hospitalarios, ya sea como terapia profiláctica o ante la aparición de infecciones tanto de microorganismos Gram positivos como Gram negativos, lo cual es posible por su amplio espectro de acción. (3,4,5,6)

Desde el año 1960 en que fue identificado el principio activo de las cefalosporinas: el ácido 7- aminocefalosporánico,

se favoreció el

desarrollo de las diferentes Cefalosporinas semi-sintéticas, apareciendo más tarde el primer representante del grupo: la Cefalotina; y posteriormente las demás Cefalosporinas denominadas Generación.

Cefalosporinas (2)

de

1ra.

Ya en la década del 70 surgen

las Cefalosporinas de 2da. Generación:

Sin embargo no siempre podemos acertar en su uso, pues como es conocido los agentes bacterianos

responsables

nosocomiales,

son

de

infecciones

generalmente

muy

resistentes a varios grupos de antibióticos, por lo que es necesario implementar terapias combinadas para lo cual es imprescindible la información del Laboratorio de Microbiología con relación a la resistencia ¨in vitro¨ de los microorganismos aislados en cada tipo de

Cefoxitina, Ceftametazol, Cefocetán, obtenidas

infección. (3,4,5,6)

a partir de 8 especies de Streptomyces y que se diferencian por presentar un grupo alfametoxi en posición 7.

(2)

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Página 70

RESISTENCIA ANTIBIÓTICA “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES DURANTE 2003-2012 EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR. MIGUEL ENRIQUEZ

En el presente trabajo se muestra un estudio

Objetivos:

retrospectivo que abarca 10 años (2003-2012) y en el que se recoge el comportamiento de la

1. Relacionar las especies microbianas más

resistencia antimicrobiana ¨in vitro¨ de los

frecuentemente aisladas en las áreas de

microorganismos aislados y caracterizados en el

riesgo del Hospital Universitario Clínico-

Laboratorio de Microbiología a partir de las

Quirúrgico

infecciones nosocomiales notificadas en áreas

durante el período 2003-2012.

“Dr.

Miguel

Enríquez”,

de riesgo del Hospital Universitario ClínicoQuirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

2. Analizar

el

comportamiento

de

la

resistencia bacteriana ¨in vitro¨ de los hallazgos más frecuentes obtenidos en dichas áreas, frente a las Cefalosporinas siguientes:

Ceftriaxone,

Cefotaxima,

Ceftazidima, Cefuroxina y Cefazolina.

¿¿QUIERES ASOCIARTE?

3.

Aportar información que pueda ser utilizada en la confección de protocolos y Políticas de Uso de Antibióticos en los Servicios estudiados.

ACESEM es una asociación pluridisciplinar especializada en diagnóstico y tratamiento del Síndrome del Edificio Enfermo y de Calidad Ambiental en el interior de los Edificios. http://www.acesem.org www.biotecnologiahospitalaria.com

Página 71

JORNADA TECNICA: EDIFICIOS SALUDABLES

JORNADA TÉCNICA

EDIFICIOS SALUDABLES martes, 9 de abril 2013

Sala de actos PIMEC, c/ Viladomat, 174 - 08015 Barcelona

"Todos conocemos Edificios en los que tenemos buenas sensaciones y Edificios a los que no regresaríamos" www.biotecnologiahospitalaria.com

Página 72

JORNADA TECNICA: EDIFICIOS SALUDABLES

PROGRAMA

09.30 - 09.45 h. PRESENTACIÓN DE LA JORNADA.

D. CARLES PEIDRO. Presidente de ACESEM (Associació Catalana d´Empreses Especialistes en Sindrome de l´Edifici Malalt).

_____________________________________________________________________________________ 09.45 - 10.30 h. Conferencia: DIAGNÓSTICO DE CALIDAD AMBIENTAL EN INTERIORES. Norma UNE AENOR 171330-1.

D. JOAN DE MONSERRAT, Biólogo. Técnico Superior en Prevención de Riesgos Laborales. Técnico Superior en Calidad Ambiental en Interiores. Coordinador del Grupo de Trabajo Amianto (GT 7), dentro del CTN 171 de AENOR. Secretario de ACESEM (Associació Catalana

d´Empreses

Especialistes

en

Sindrome

de

l´Edifici

Malalt). Laboratorio

Echevarne(Área Industria). _______________________________________________________________________________________ 11.00 - 11.45 h. Conferencia: PROCEDIMIENTOS DE INSPECCIÓN DE CALIDAD AMBIENTAL INTERIOR. Norma UNE AENOR 171330-2. ra GLORIA CRUCETA, Médico, Presidenta del Comité CTN 171 de Calidad Ambiental en Interiores de AENOR, Técnico Superior en Prevención de Riesgos Laborales, especialidad en Higiene Industrial. Experto técnico de ENAC para Calidad Ambiental en Interiores. Directora de SEGLA, empresa acreditada por TÜV Rheinland con la certificación ISO 9001:2008 para la verificación de la Calidad Ambiental en Interior de Edificios. _______________________________________________________________________________________

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JORNADA TECNICA: EDIFICIOS SALUDABLES

_______________________________________________________________________________________ 11.45 - 12.30 h. Conferencia: ARQUITECTURA Y SÍNDROME DEL EDIFICIO ENFERMO D. FRANCISCO MONFORTE, Arquitecto, Escuela Superior de Arquitectura de Barcelona , Técnico de arquitectura para el desarrollo de proyectos de vialidad, urbanización y equipamientos en los Juegos Olímpicos de Barcelona, Arquitecto director de la oficina técnica para la ejecución de los proyectos de IMPUSA Y VILA OLÍMPICA. Arquitecto colaborador con el Ajuntament de Barcelona y la AGÈNCIA PAISATGE URBÀ DE BARCELONA, Redacción y desarrollo de Proyectos inmobiliarios de VERTIX, S.A. Socio de M&P Arquitectes Associats. Socio

Fundador

(1997) de

ACESEM

“AssociacióCatalana d'Empreses especialistes en Síndrome d'Edifici Malalt". ______________________________________________________________________________________ 12.30- 13.30 h. Conferencia: CALIDAD DE AIRE Y EFICIENCIA ENERGÉTICA.

D. PAULINO PASTOR, Ingeniero Técnico Industrial, Presidente del Comité Técnico de Normalización AEN/CTN 100 de AENOR (Climatización), Presidente de la Federación Española de Empresas de Calidad Ambiental Interior, Vocal del Comité Científico-Técnico de Atecyr, Director General de AMBISALUD. _______________________________________________________________________________________

MAS INFORMACION http://www.segla.net/edificios_saludables.htm

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RESISTENCIA ANTIBIÓTICA “IN VITRO” EN AISLAMIENTOS NOSOCOMIALES DURANTE 2003-2012 EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO CLÍNICO QUIRÚRGICO DR. MIGUEL ENRIQUEZ

DESARROLLO La capacidad de las Cefalosporinas de inhibir el desarrollo microbiano es muy alta - espectro de acción, pudiendo enfocarse de manera general según los diferentes tipos de Generaciones lo cual se muestra a continuación:

(2)

Tipos de Generaciones

Cefalosporinas de 1ra. Generación

Cefalosporinas de 2da.

Generación

Cefalosporinas de 3ra. Generación

Cefalosporinas de 4ta.

Generación

Activas frente a: Cocos Gram positivos: Streptococus α y β hemolíticos, Staphylococus spp. penicilina resistente.

Cocos Gram negativos: Gonococos Bacilos Gram positivos: Corynebacterium diphtheriae, Bacillus ántrax Bacilos Gram negativos: Klebsiella spp., Haemophylus spp., Pasteurella spp., Escherichia coli, Proteus mirabilis, Shigella spp., Salmonella spp.

Además de cubrir el espectro de las de 1ra. Generación, lo amplían sobre Enterobacterias: Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Serratia marcescens, Haemophylus influenzae, M. catarralis y bacterias anaerobias como Bactyeroides fragilis

Activas frente a una gama inmensa de bacterias tanto Gram negativas como Gram positivas y muchas de las que desarrollan resistencia a las de 1ra. Generación; además se encuentran las antipseudomónicas: Ceftazidima, Cefsuodina y Cefoperazona.

No amplían de forma importante el espectro de las de 3ra. Generación, pero sobresalen por su alta resistencia a la hidrólisis de betalactamasas, incluso aquellas que inactivan las de 3ra. Generación.

De forma general no son efectivas frente a Enterococos, bacterias anaerobias (excepto las Cefamicinas) Clostridium difficile, Listeria monocytogenes, estafilococos meticilina resistentes (MRSA) y Pseudomonas spp. (excepto las Cefalospirinas

antipseudomónicas).

(2)

No obstante,

conjuntamente con el aumento de su uso en el tratamiento de las diferentes infecciones en humanos y animales, se ha desarrollado la resistencia a las mismas por diferentes especies - efecto que ha ido aumentando con el de cursar de los años - resultando cada vez menos seguro guiarse solamente por el espectro de acción planteada para cada generación de Cefalosporinas y por ende, la importancia del conocimiento particularizado de la resistencia de los microorganismos aislados y sobre todo haciendo énfasis en las diferentes áreas de riesgo en las que tienen mayor uso. (2,3,4)

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Mucho se ha estudiado sobre los mecanismos de resistencia de las bacterias a los diferentes antibióticos. En la actualidad se puede plantear que

el

mecanismo

de

resistencia

más

frecuente ante ésta familia de antibióticos es la producción por parte de las bacterias de enzimas cefalosporinasas que hidrolizan éstos compuestos, incluso algunos de ellos resisten la hidrólisis pero su unión irreversible a la enzima los

(2)

inactiva.

Las

betalactamasas

cromosómicas tienen un efecto más potente que

las

plasmídicas,

sobre

todo

en

las

Cefalosporinas más antiguas (1ra. y 2da.

Generación).

Por otra parte, el uso repetitivo de

éstas

Cefalosporinas provoca la desinhibición del gen para producción de la enzima AmpC inducible, presente en Enterobacter spp., Pseudomonas spp.,

Escherichia

pneumoniae.

(2)

coli Otros

y

Klebsiella

mecanismos

de

resistencia frente a las Cefalosporinas son la disminución de la permeabilidad En los últimos años se ha visto un incremento de

betalactamasas de espectro extendido

(BLEE)

que

provocan

la

resistencia

Oximinocefalosporinas Ceftazidima, Klebsiella

como

spp.,

ocasionada por mutaciones en los genes que codifican las porinas (OMP) y las alteraciones en las proteínas de la pared celular. (2)

(Ceftriaxona,

Cefotaxima)

Enterobacterias

a

bacteriana,

en

múltiples

Escherichia

Providencia

spp.

coli, y

Enterobacter spp. (2)

Recientemente se ha reportado un tipo de plásmido

de

estas

betalactamasas

preferencia por el Cefotaxime.

con

(2)

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A pesar del conocimiento de estas aplicaciones

Aplicaciones clínicas:

clínicas generales, se debe tener en cuenta el microorganismo que esta involucrado en cada

Respaldada en su baja toxicidad, su amplio espectro y efectividad, es la familia de antibióticos mas utilizada

en la práctica

tipo de infección, pues son muchos los reportes de

resistencia

a

microorganismos

Cefalosporinas

supuestamente

de

sensibles.

(7,8,9,)

médica. Son medicamentos de elección en patologías como: En un artículo publicado en la revista PloS •

Medicine 2011, se destaca que cada día Infecciones del Sistema Nervioso Central (Ceftriaxona, Cefotaxime, Ceftazidima)

•

Infecciones gonocócicas (Ceftriaxona)

•

Disenterías

por

spp.

Shigellas

(Ceftriaxona) •

disminuye la respuesta eficaz de la Meticilina y las Cefalosporinas de 3ra. Generación contra Staphylococcus aureus y Escherichia coli, agregando que la resistencia de tales bacterias podrían duplicar los riesgos de muerte por esta

Neumonías nosocomiales (Cefalosporinas

causa en 2015. (3)

de 3ra. Generación) •

Neumonías de UTI (Ceftazidima)

•

Neumonías comunitarias en pacientes

Igualmente los investigadores del Centro de

mayores

Control

60

años

y

con

enfermedades

otras

asociadas

(Cefalosporinas

de

2da.

y

3ra.

Generación) • • •

•

•

Neumonías

de

Enfermedades

adultos

jóvenes

de

Holanda, que forma parte de la Red Europea de Vigilancia

de

plantean que en

Infecciosas

agentes

la

Resistencia

Bacteriana,

las infecciones por dichos

son cada vez más frecuentes en el

(Cefalosporinas de 2da. Generación)

medio hospitalario tras datos recopilados en

Infecciones de la piel o partes blandas

1293

(Cefalosporinas de 1ra. Generación)

centrando

Infecciones óseas, colecistitis aguda,

infecciones

sepsis

bacteriemias - lo cual deja un amplio margen

intrabdominal

y

pélvica

hospitales sus

de

31

análisis

sanguíneas

países

europeos,

solamente -

las

en

las

denominadas

(Cefamicinas)

de incertidumbre respecto al resto de las

Neutropenia febril, infecciones urinarias

especies

complicadas (Ceftazidima + Amikacina -

desarrollando mecanismos de resistencia a

Aminoglucósido)

cefalosporinas. (9)

microbianas

que

también

están

Profilaxis quirúrgica (Cefazolina).

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En el Hospital “Faustino Pérez” (Cuba) se

El Hospital Universitario Clínico-Quirúrgico “Dr.

realizó un estudio de los microorganismos

Miguel Enríquez” no escapa a esta tendencia,

responsables

por

de

bacteriemia

nosocomial

lo

que

las

Cefalosporinas

de

1ra.

durante el año 2004, en el que se obtuvo un 55

Generación se incluyen en los tratamientos

% de resistencia bacteriana ¨in vitro¨ frente a

empíricos (hasta el resultado del antibiograma)

Cefalosporinas de 1ra. y 2da. Generación.

(10)

y

en

sentido

general

este

grupo

de

antimicrobianos es muy utilizado en múltiples eventos de origen infeccioso como monoterapia Las infecciones nosocomiales constituyen un

o terapia combinada.

problema al que se enfrentan diariamente el personal de asistencia, sobre todo en áreas de alto riesgo como son las Unidades de Terapia Intensiva

e

Nefrología.

(1)

Intermedia

y

el

Servicio

de

Muchas han sido las prácticas que

se han desarrollado para minimizar el impacto que sobre los pacientes, la familia y la sociedad tienen éstas infecciones sin que se hayan logrado eliminar aún en instituciones en las que existen Programas de Vigilancia y Control muy eficientes,

RESULTADOS Y DISCUSION

por

lo

que

el

tratamiento

y

A continuación se muestran los hallazgos microbiológicos obtenidos en la Unidad de Terapia Intensiva a partir de infecciones nosocomiales

en

el

Hospital

Universitario

Clínico-Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez” en el período 2003 - 2012.

erradicación de las mismas es una necesidad diaria que pone en mayor riesgo la salud y calidad de vida de los pacientes. (1) Gráfico 1. Microorganismos aislados en la El desarrollo de los antibióticos conocidos como

Unidad de Terapia Intensiva a parir de

“Cefalosporinas¨ fue de alto impacto en el

infecciones nosocomiales durante el período

tratamiento de disímiles infecciones dado su

2003 - 2012. Hospital Universitario Clínico-

amplio

Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

espectro,

tolerancia

y

baja fácil

toxicidad,

buena

administración,

desarrollándose en las instituciones de salud protocolos para el uso de los mismos, que evitaran su abuso y la aparición de cepas resistentes. (2,5,6,8)

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cantidad de aislamientos

25

22

21

20 15 15

14

10 6

6

6 4

5

3

3

3

3

3 1

0 m icroorganism os aislados Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter baumanii Enterobacter cloacae Hafnia alvei Enterobacter aerogenes Morganella morganii Serratia marcescens

Staphylococcus aureus Staphylococcus sp coag negat.

Citrobacter freundii Escherichia coli Proteus mirabilis Flavobacterium sp Providencia rettgerii En

ésta sala durante el período estudiado predominaron los aislamientos de Pseudomonas aeruginosa (22), Staphylococcus aureus (21), seguidos de Acinetobacter baumanii (15) y Staphylococcus spp. coagulasa negativa con 14 aislamientos, siendo todos éstos estadísticamente significativos mediante la realización del test de Duncan, con una probabilidad p≤ 0,05. La presencia de estas especies en el medio hospitalario responsables de infecciones nosocomiales, han sido ampliamente reportadas a nivel internacional, siendo reconocida también su alta resistencia frente a diversos grupos de antibióticos.

(2,3,7,8,10,11)

El comportamiento de la resistencia “in vitro” de los aislamientos más frecuentes frente a las 5 Cefalosporinas probadas, se ofrecen en el Gráfico 2.

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Gráfico 2. Resistencia bacteriana “in vitro” frente a las Cefalosporinas probadas en los aislamientos más frecuentes de la Sala de Unidad de Terapia Intensiva. Hospital Universitario Clínico-Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

25

% de aislam. resistentes

20

15

10

5

0

Pseudomonas aeruginosa

Staphylococcus aureus

Acinetobacter baumanii

Staphylococcus sp coag negat.

Ceftriax

Ceftaz

Cefotaz

Cefurox

Cefazol

Antibióticos probados

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Se puede plantear que en ningún caso se obtuvo mas del 25% de resistencia “in vitro” en los antibióticos probados durante el período de estudio, siendo un resultado muy favorable que refleja - entre otros - un adecuado manejo de éstos antibióticos.

Un análisis similar se realizó con los aislamientos nosocomiales obtenidos en la Unidad de Terapia Intermedia de Medicina y cuyos resultados se muestran en el Gráfico 3.

Gráfico 3. Microorganismos aislados de infecciones nosocomiales en la Unidad de Terapia Intermedia de Medicina durante el período 2003 - 2012. Hospital Universitario Clínico-Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

cantidad de aislamientos

14

12

12 10 8

7

6

7 5

5 4

4

2

2 1

2

1

0 m icroorganism os aislados Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli Staphylococcus sp coag negat.

Serratia marcescens Alcaligenes faecalis

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Citrobacter freundii Staphylococcus aureus Acinetobacter baumanii Enterobacter cloacae Morganella morganii

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Como se puede apreciar, la mayoría de los hallazgos microbiológicos estuvieron a expensas de Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundii y Escherichia coli (12, 7 y 7 respectivamente) Se debe señalar que aunque éstos resultados no fueron estadísticamente significativos no dejan de ser muy válidos, pues

la frecuencia de aislamientos en dicho Servicio

muestran un predominio de

infecciones por de bacterias Gram negativas lo cual coincide con lo señalado por varios autores. (12,13) Sólo se notificaron en dicho período 5 aislamientos de Staphylococcus aureus e iguales cifras de Staphylococcus spp. coagulasa negativa, lo cual no consideramos relevante y totalmente opuesto al resultado obtenido en la Unidad de Terapia Intensiva, y que sugiere continuar la vigilancia sobre éste aspecto a fin de eliminar subregistros que pudieran estar afectando la visión real del problema en dicha sala. Este resultado también resulta no coincidente con la tendencia internacional sobre la frecuencia de bacterias Gram positivas en las infecciones nosocomiales. (3,4,5) El comportamiento de la resistencia bacteriana “in vitro” de las especies más frecuentemente aisladas frente a las Cefalosporinas ensayadas se muestra en el Gráfico 4.

Gráfico 4. Resistencia bacteriana “in vitro” frente a las Cefalosporinas probadas en los aislamientos más frecuentes de la Unidad de Terapia Intermedia de Medicina.

45

% aislam. resistentes

40 35 30 25 20 15 10 5 0 Ceftriax

ceftaz

cefotaz

cefurox

antibióticos probados Pseudomonas aeruginosa

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Citrobacter freundii

Escherichia coli

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Se observa un marcado patrón de resistencia de manera general frente a Ceftriaxone, Cefotaxima y Cefuroxima - todas de amplio espectro - por lo que es necesario que se tengan en cuenta éstos resultados y se tracen estrategias de restricción para el adecuado uso de las mismas..

En cuanto a la Sala de Terapia Intermedia de Cirugía, se puede observar en el Gráfico 5 que la mayoría de los aislamientos en éste período fueron de Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli y Staphylococcus spp. coagulasas negativa.

cantidad de aislamientos

Gráfico 5. Microorganismos aislados en la Unidad de Terapia Intermedia de Cirugía a partir de infecciones nosocomiales durante el período 2003 - 2012. Hospital Universitario ClínicoQuirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

10 9 8

9

9 8

7 6 5 4 3

6

6 5

5 3

3

2 1 0 m icroorganism os aislados Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus sp coag negat.

Enterobacter aerogenes Acinetobacter baumanii Citrobacter freundii

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Escherichia coli Proteus mirabilis Hafnia alvei Enterobacter cloacae

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Se destaca que en el período de estudio en la sala de Terapia Intensiva de Cirugía no hubo aislamientos de Staphylococcus aureus, siendo éstos tan frecuentes según se reporta a nivel internacional causando infecciones tanto del torrente circulatorio, como de heridas quirúrgicas. (3,4,5,8)

Fueron las especies aisladas más frecuentes en el período: Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli y Staphylococcus spp. coagulasa negativa (9, 9 y 8 respectivamente). Estos hallazgos tampoco resultaron ser estadísticamente significativos, aunque no por eso son de gran valor en el análisis de la resistencia.

Se muestra en el gráfico que aparece a continuación el comportamiento de la resistencia bacteriana “in vitro” frente a las Cefalosporinas ensayadas.

Grafico 6. Resistencia “in vitro” de los aislamientos bacterianos más frecuentes frente a las Cefalosporinas ensayadas en la Terapia Intermedia de Cirugía durante el período 2003 - 2012.

Hospital Universitario Clínico-Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

% de aislam. resistentes

40 35 30 25 20 15 10 5 0 Ceftriax

ceftaz

cefotaz

cefurox

cefazol

antibióticos probados Pseudomonas aeruginosa

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Escherichia coli

Staphylococcus sp coag negat.

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Se puede observar que se obtuvieron los porcentajes más altos de resistencia “in vitro” para el caso de Cefuroxima, pensamos que éste es un resultado muy importante ya que aunque no se sobrepasa del 50% se debe seguir muy de cerca a fin de reevaluar la Política de Uso del mismo.

Cerca del 35 % de los aislamientos de Pseudomonas aeruginosa fueron resistentes a Ceftriaxona, siendo éste un antibiótico muy utilizado en dicha sala de forma empírica en las infecciones hasta el resultado del antibiograma y uno de los microorganismos más frecuentes durante el período. Es nuestro criterio que también se debe continuar la observación de éste comportamiento para evitar la aparición de brotes de origen nosocomial en cepas bacterianas resistentes a dicho antibiótico.

Las infecciones nosocomiales en el Servicio de Nefrología están muy relacionadas con las infecciones del torrente circulatorio, el catéter centro venoso y los líquidos peritoneales, por lo que son una gran preocupación para pacientes y personal de asistencia que se enfrenta cada día al tratamiento de las mismas. (4,5,9,10,11,12) A continuación se muestran las especies microbianas más frecuentemente aisladas en el período que nos ocupa en el Servicio de Nefrología.

Gráfico 7. Microorganismos aislados en el Servicio de Nefrología a partir de infecciones nosocomiales durante el período 2003 - 2012. Hospital Universitario Clínico-Quirúrgico “Dr. Miguel Enríquez”.

cantidad de aislamientos

40

36

35 30 25 20

20

18

15 10 5

10 10 10

8 5

6

6

6 3

3

3

2

0

microorganismos aislados Staphylococcus sp coag negat.

Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Hafnia alvei Escherichia coli Proteus mirabilis Alcaligenes faecalis Acinetobacter baumanii Citrobacter freundii Enterobacter aerogenes Proteus vulgaris Enterobacter cloacae Flavobacterium sp Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca

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Quedó demostrada la alta incidencia de infecciones causadas por Staphylococcus spp. coagulasa negativa (36 aislamientos) y Staphylococcus aureus (20 aislamientos), también el predominio de Pseudomonas aeruginosa con 18 aislamientos siendo todos estadísticamente significativos, por lo que su frecuencia es de gran importancia, lo cual coincide con reportes encontrados en la literatura internacional consultada. (2,3,4,5)

En cuanto a las infecciones causadas por Pseudomonas aeruginosa, se pude plantear que dicho microorganismo se puede localizar en las aguas de diálisis, dializadores, riñones, líquidos para diálisis peritoneal y otros, siendo un problema que hay que enfrentar diariamente.

En el gráfico siguiente se muestra el comportamiento de la resistencia bacteriana “in vitro” de los microorganismos aislados frente a las Cefalosporinas probadas.

% aislam. resistentes

Grafico 8. Resistencia “in vitro” de los aislamientos bacterianos más frecuentes en el Servicio de Nefrología frente a las Cefalosporinas ensayadas.

50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Ceftriax

ceftaz

cefotaz

cefurox

cefazol

antibióticos probados Staphylococcus sp coag negat.

Staphylococcus aureus

Pseudomonas aeruginosa

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Se observan elevados porcentajes de resistencia de Pseudomonas aeruginosa frente a Ceftriaxone y Cefotaxima antibióticos a los cuales debían ser más sensibles de acuerdo a su espectro de acción - Consideramos que éste resultado puede ser de gran ayuda al personal médico de dicho Servicio, sobre todo ante la necesidad de aplicar tratamientos empíricos en los pacientes hasta tener el resultado del antibiograma y para trazar estrategias de uso de los mismos.

Llama también la atención la resistencia de las cepas analizadas de Staphylococcus aureus a la mayoría de las Cefalosporinas probadas, siendo éste un microorganismo que con mayor frecuencia se aísla en dicho Servicio, por tal motivo sugerimos evaluar la real necesidad de su uso en todos los casos y/o su combinación con otros tipos de antibióticos.

En particular queremos señalar los elevados porcentajes de resistencia frente a la Cefazolina que es una Cefalosporina que se usa como parte del tratamiento empírico en éste tipo de paciente, Se debe insistir además en la adecuada realización de los procedimientos de desinfección y antisepsia previos a la colocación de los catéteres venosos, peritoneales, punción de fístula arteriovenosa central y desinfección de los dializadores, para evitar infecciones asociadas a esta terapéutica y que son tan difíciles de manejar. (2,3,4,5)

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CONCLUSIONES

1. Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus spp., Escherichia coli, Acinetobacter baumanii y Citrobacter freundii, fueron las especies microbianas más frecuentemente aisladas de infecciones nosocomiales en las áreas de riesgo estudiadas.

2. Se debe analizar el uso de Ceftriaxona, Cefuroxima y Cefotaxima en la Unidad de Terapia Intermedia de Medicina; de Cefuroxima en la Terapia Intermedia de Cirugía y de Ceftriaxona, Cefotaxima y Cefazolina en el Servicio de Nefrología, para evitar que continúe aumentando la resistencia bacteriana a los antimicrobianos ensayados frente a los microorganismos responsables de infecciones asociadas a la asistencia sanitaria más frecuentes.

3. Se debe continuar insistiendo en el cumplimiento adecuado de las técnicas de desinfección y antisepsia vigentes para evitar las infecciones nosocomiales.

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Cir

Trias

Pujol.

Barcelona,

Pujol; 2000

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