REVISTA DE CALIDAD AMBIENTAL INTERIOR EN HOSPITALES, LABORATORIOS, ANIMALARIOS Y SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X
Núm. 19, septiembre 2014
GESTIÓN DE LA COMUNICACIÓN EN ALERTAS DE RIESGOS PARA LA SALUD PÚBLICA
Sumario EDITORIAL
4.
DISEÑO
DE
BIOSEGURIDAD RODRIGUEZ
UN
LABORATORIO
NIVEL
3
PADILLA.
(BSL-3). L.
G.
DE C.
RIVERA
MORALES, Universidad Autónoma de Nuevo León; J.
Dra. Gloria Cruceta
VALDEZ SANDOVAL. Universidad Autónoma de Sinaloa.
26. BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF- . M. I. GUTIERREZ CABEZÓN; J.
CANTERO JIMÉNEZ, Universidad de Jaén.
50.
150 DÍAS DESPUÉS DEL BROTE DE ÉBOLA: ¿DONDE ESTÁ LA RESPUESTA? “Temo por mi vida”, reconoció en una entrevista el virólogo Sheik Umar Khan, responsable de uno de los mejores centros de África Occidental para la lucha contra el Ébola. Poco después de decirlo, Khan, considerado un héroe nacional en Sierra Leona, contraía la enfermedad, que finalmente acabó con su vida.
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE
INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS). V. MOLEIRO SAN
EMETERIO, Ciemat; M. PEÑA ABAD, Universidad de León.
65.
LABORATORIO BSL3 Y LAS BARRERAS
DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS. CONSIDERACIONES DE DISEÑO, A.A. MIRANDA
ESCAMILLA. Sicapharma, México.
76.
PROCEDIMIENTO
DE
USO
Y
MANTENIMIENTO DE EQUIPOS DE BARRERA DE BIOCONTENCIÓN EN UN LABORATORIO BL3, J.E.
BERMUDEZ RUIZ; M.A. MOCHALES LARA. Instalaciones Hernández.
104.
PROYECTO
Más del 8% de las víctimas mortales de la actual epidemia son profesionales de la salud, en total, más de 100 miembros de personal médico se han contagiado. Hay trabajadores sanitarios locales que tratan de atender a los pacientes de ébola sin formación, entrenamiento y equipo adecuado y, evidentemente, enferman. El brote está afectando a un gran número de médicos, enfermeras y otros trabajadores de la salud, uno de los recursos más esenciales para contener un brote. Estas trágicas infecciones y muertes erosionan significativamente la capacidad de respuesta. Las cifras actuales de personal contagiado es lamentablemente inadecuado Sentimos no tener una vacuna y por no ser, de momento, capaces de detener la epidemia. Sabemos que deberíamos estar haciendo más, pero ¿existen recursos, capacidad, formación y personal suficiente?.
CONSTRUCCIÓN
LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3). P. SANDOVAL,
Directora de la Publicación: Dra. Gloria Cruceta
Agrocalidad, (QUITO, ECUADOR).
ISSN 2013-746X. Realización: SEGLA s.l. Avda Gaudi, 52 bis, 4º1º Barcelona. 08025 Tel. 934 364 061.
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BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA Reconocida como Web Médica Acreditada (WMA), en el programa de certificación de calidad de webs médicas (Colegio Colegio Oficial de Médicos de Barcelona). International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X 2013
Subscripción n gratuita
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3
DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (bsl-3) (bsl
DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL
INTRODUCCIÓN
3 (BSL-3).
Las
enfermedades infecciosas no se
consideran un problema reciente, ya que no sólo se presentan de manera cotidiana Dra Cristina Rodríguez Padilla
en la población en general, sino que han
Jefe del Laboratorio de Inmunología y
estado presentes a lo largo de la historia de
Virología.
la humanidad.
Facultad
de
Ciencias
Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, México. A pesar de los avances en el Dra.
Lydia
Gpe.
Rivera
Morales
campo de la medicina durante el
Laboratorio de Inmunología y Virología de la Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Autónoma de Nuevo León.
último
siglo
diagnóstico, . tratamiento,
en
cuanto
prevención las
al y
enfermedades
MC. José Johanatan Valdez Sandoval. Sandoval Hospital General de Culiacan, Servicios de
infecciosas siguen siendo una
Salud de Sinaloa. Unidad Academica
causa importante de morbilidad y
Escuela
mortalidad alrededor del mundo,
de
Biologia,
Universidad
Autonoma de Sinaloa. sobre
todo
en
los
países
subdesarrollados
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4
DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (bsl-3)
stos laboratorios, también llamados de Una de las principales razones de esto es biocontención, se caracterizan porque la aparición de infecciones ocasionadas además de requerir personal con una por
nuevos
microrganismos capacitación especializada, es necesario
potencialmente patógenos y por la reutilizar ciertas prácticas microbiológicas emergencia de enfermedades infecciosas seguras, equipo especial y medidas de que se creían controladas, pero que seguridad
rigurosas para generar un
rápidamente incrementan su incidencia y ambiente seguro para el investigador y el adquieren un carácter epidémico o aún personal que labora en estos laboratorios, pandémico. para el medio ambiente y su entorno. Todo esto con la finalidad de llegar a una rápida detección e identificación del agente La investigación con este tipo de infeccioso enfermedades,
llamadas
y
desarrollar
preventivas y terapéuticas a la mayor
emergentes y re-emergentes y
brevedad posible
que
OBJETIVO
tienen
en
elevada
general
una
medidas
morbimortalidad, Diseñar
requiere
de
la
remodelación
y
la
instalaciones construcción de un laboratorio de
especializadas para el manejo Bioseguridad seguro
de
estos como
3
en
el
agentes Laboratorio
infecciosos,
nivel
son
de
Inmunología
y
los Virología (LIV) de la Facultad de
laboratorios
de
bioseguridad Ciencias
Biológicas
en
la
nivel 3 y 4 (BSL-3 y BSL-4). Universidad Autónoma de Nuevo León, ubicado en Monterrey, Nuevo León, México.
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5
DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
MÉTODOS Se elaboró un proyecto para llevar a cabo el diseño de la remodelación y la construcción del laboratorio de bioseguridad nivel 3 en el LIV. Para realizarlo se buscó la asesoría de la compañía SMITH-CARTER, SMITH que cuenta ta con personal calificado y con experiencia en la construcción de este tipo de laboratorios.
RESULTADOS Como parte del ambicioso proyecto de la Universidad Autónoma de Nuevo León para la investigación dentro de la Facultad de Ciencias Biológicas se llevo a cabo la remodelación y modernización del laboratorio con nivel de Bioseguridad BSL3, ubicado en el último nivel del edificio que alberga laboratorios BSL2 y oficinas administrativas, el acceso al laboratorio es a través del corredor publico estando restringido solo a personal autorizado.
Fig. 1 Planta Arquitectónica del BSL-3
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
ÁREA DE FUERA DE LA
ÁREA DE LABORATORIOS.
CONTENCIÓN. Puesto que este laboratorio tiene el Después
de
acceder
al
espacio
restringido, se encuentra el área que funcionará como administrativa, donde se podrá llevar el monitoreo del laboratorio,
realizar
reportes
y
seguimiento al trabajo que se realice en el interior del espacio contenido. Así mismo está el cuarto de lavado, donde se recibe material después de ser esterilizado por el autoclave.
Nivel
de
Bioseguridad
BSL3,
es
necesario dotarlo con un ambiente de trabajo seguro que además cumpla con los
requerimientos
en
materia
de
Bioseguridad, por esta razón cuenta con flujo de aire direccional y diferencial de presión en cascada, desde los espacios de menor riesgo a los que requieren mayor seguridad, controlado por un sistema de automatización que permite su monitoreo permanente.
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
Se cuenta también con sistema de alarma contra incendio, control de acceso y alarma de intrusión, así como monitoreo a través de circuito cerrado de televisión. En el sistema de extracción de los cuartos al interior del área contenida se cuenta con filtros HEPA para garantizar la eliminación de cualquier riesgo hacia el exterior.
Fig. 3 Se aprecia las computadoras y los controles de presión, humedad y temperatura del laboratorio
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
VESTÍBULO. El acceso al área de contención se realiza a través del Vestíbulo, cuarto donde el personal se colocará la ropa de laboratorio y cualquier otra protección adicional que requiera para realizar su trabajo con seguridad. Las puertas de este cuarto se encuentran “exclusadas” lo que garantiza que no sea posible abrirlas simultáneamente, a menos que se trate de una emergencia.
Fig. 4 Se aprecia en el área no contenida las puertas de acceso al cuarto de lavado y al vestíbulo
Fig. 5 En el cuarto de Pre-cultivo se encuentra la autoclave de doble puerta
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
CUARTO DE PRE-CULTIVO. Este cuarto es el mayor con que cuenta el laboratorio y funciona como espacio de trabajo y corredor de acceso a las dos suites del laboratorio, así como al cuarto de equipos. En él se llevaran a cabo labores de preparación y descontaminación de algunos elementos así como albergar equipos de refrigeración.
Fig. 6 Cuarto de Pre-Cultivo
SEGLA, EMPRESA ACREDITADA PARA LA VALIDACIÓN DE QUIRÓFANOS, SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO Y LABORATORIOS.
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
CUARTO DE EQUIPOS. En el podrán ser colocados ultracongeladores y/o refrigeradores para el uso del laboratorio.
Fig. 7 Cuarto de Equipos
CUARTO DE CULTIVO 1 Estos espacios están diseñados para poder llevar a cabo los trabajos que requiera la Facultad, dentro de las condiciones más altas de seguridad para un laboratorio de este tipo. Cuentan cada uno con una Cabina de Bioseguridad Clase II A/B3 y alimentación de CO2, mesa de trabajo y tarja con agua fría y caliente y lavaojos en caso de emergencia.
Fig. 8 Se observa cuarto de cultivo 1 y cuarto de equipos y dentro del cuarto se observa la cabina de Bioseguridad Clase II A/B3
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
CUARTO DE CULTIVO 2.
BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA
Fig. 9 Cabina de Bioseguridad Clase II A/B3
BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA ha sido reconocida como Web Médica Acreditada (WMA) www.biotecnologiahospitalaria.com
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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
ESPACIO PARA MECÁNICOS
EQUIPOS En este espacio se encuentran los equipos
Puesto que el laboratorio se encuentra en el último nivel del edificio, fue necesaria
la
construcción
de
una
estructura metálica en la azotea para proteger los equipos mecánicos que dan servicio
al
laboratorio
y que no
de
inyección
de
aire
acondicionado, válvulas de control de flujo
de
aire,
compuertas
de
bioseguridad, así como el sistema de extracción, filtros HEPA, válvulas de control de ductos y extractores, servicio de agua y eléctrico.
quedarán a merced de los cambios atmosféricos.
Fig. 10 Espacio para equipos mecánicos
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13
DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)
CONCLUSIONES La construcción de este tipo de laboratorios será de gran utilidad debido a que contribuirán a establecer un punto estratégico para una mejor vigilancia epidemiológica,
diagnóstico,
tipificación
y
microorganismos reemergentes,
estudio
de
emergentes
y
llevar
a
cabo
una
respuesta rápida en caso de brotes y así como sentar las bases para incrementar la
coordinación
y
la
cooperación
internacional, además de colaborar con laboratorios del país para el desarrollo de trabajos conjuntos de investigación.
3. Fauci AS. New and reemerging diseases:
the
biomedical
importance
research.
of
Emerg
Infect Dis 1998; 4:374-8. 4. Racaniello,
V.
Emerging
infectious Diseases. Journal of Clinical
Investigation.
2004.
113: 796-798. 5. Emerging Infectious NIAID
and
Re-emerging
Diseases. Emerging
List and
of Re-
emerging Diseases.http://www.niaid.nih.g ov/topics/emerging/pages/list.as px 6. Centro
de
Control
de
Enfermedades y Prevención del Instituto Nacional de Salud. BIBLIOGRAFÍA 1. World
Biosafety
Health
Organization.
Laboratory biosafety manual.
in
andBiomedical
Microbiological Laboratories
Manual. 5th edition. 2009
3rd ed. Geneva; 2004. 2. Morens,D.M., Folkers, G.K. & Fauci, A. The challenge of emerging
and
re-emerging
infectious diseases Nature. 2004. 430: 242-249.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
INTRODUCCIÓN
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA
Las barreras se consideran todas las medidas técnicas, mecánicas, teóricas y sanitarias que tienen como fin evitar la
ZONA SPF (Specific Pathogen Free)
contaminación en cualquier sentido dentro de un área de producción, mantenimiento,
experimentación
o
sistema mixto, para poder tener como resultado animales con un estatus de calidad en dichas zonas.
Mª Isabel Gutierrez Cabezón Veterinaria
Cuanto mayor sea el número de
UNIVERSIDAD DE JAÉN
barreras implantadas mayor será el
Jacinto Cantero Jiménez
estatus
sanitario
podremos
alcanzar
bioseguridad.
animales.
Queremos
UNIVERSIDAD DE JAÉN
animales S.P.F.
Técnico
Servicio
Prevención
–
al
investigador
que
en
los
obtener
porque ofrecen garantías
de
ensayos experimentales fiables y reproducibles. Con las barreras conseguimos mantengan
animales en
un
se
ambiente
sanitario adecuado.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Las barreras se clasifican, de máxima a
3) Teóricas;
mínima seguridad, tipo I, tipo II, tipo
organizar
el
III, y tipo IV. El tipo tendrá la
interior
del
importancia para poder saber qué tipo
protocolos
de animales (sanitariamente) podemos
mantenimiento de aparatos y
tener en nuestro animalario.
equipos,
Hay cuatro medidas que hay que tener en cuenta;
Destinadas
a
funcionamiento
de
animalario: trabajo;
de
de
accesos,
autorizaciones de utilización del área
experimental,
de
reproducción y cría de animales,
1) Técnicas; Destinada a proyectar
cuarentena, etc. Profesionales
el animalario de tal forma que
que pueden aconsejar: Técnicos,
permita tener al animal, en el
investigadores, y expertos en
estatus sanitario referido. Los
animales de laboratorio.
profesionales con quienes debe
4) Sanitarias; Destinadas a crear
contarse para este fin serán:
un ambiente eficaz y seguro para
Arquitectos,
evitar
expertos
en
ingenieros
y
animales
de
laboratorios
contaminaciones
y
indeseadas.
Pueden aconsejar: expertos en
2) Mecánicas: Destinadas a cubrir las
zoonosis
necesidades
funcionamiento
que
de permita
cubrir los parámetros generales,
seguridad
biológica,
investigadores, veterinarios
y
médicos, expertos
en
animales de laboratorio.
de ventilación, climatización, sobrepresión, ruidos,
iluminación,
filtración,
esterilización, profesionales
limpieza,
etc. que
Los puedan
aconsejar serán ingenieros y expertos
en
animales
de
laboratorio.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
SITEMAS
Y
TÉCNICAS
FILTRACIÓN
DE
PARA
CLIMATIZACIÓN
Y
OTROS
Existen diferentes características que definen un filtro:
ENSAYOS Eficacia: equivale al rendimiento de un filtro. Es la proporción entre el número Quizás
la
en
el
es
la
respecto del número de partículas que
filtración tendente a garantizar la
chocan sobre él. Debemos conocer
ausencia de contaminación por
previamente la calidad de aire necesaria
concepto
medio
de
pieza de
clave
barrera
aerosoles
o
por
de partículas retenidas por el filtro
para seleccionar la eficiencia.
partículas transportadas por el aire.
Hay filtros de baja y de alta eficiencia,
dependiendo
En general la mayoría de los “habitáculos y
tamaño
equipos de barrera” utilizan como principio
retenidas. Su eficiencia se mide
la filtración del aire.
de
las
del
partículas
gravimétricamente, valorando el
Filtros: son barreras que retienen partículas
porcentaje
de tamaño inferior a los intersticios o huecos
partículas de polvo retenidas.
en
peso
de
las
por donde pasa el aire. Dado el tamaño tan variable de las partículas suspendidas en el aire se utilizan diferentes técnicas de filtración o combinación de ellas. Los materiales utilizados como filtro suelen ser fibra de vidrio (el más común por sus muchas ventajas elasticidad, resistencia al fuego y a la abrasión no se deforma y es fácil obtener fibras de diversos tamaños), tejidos metálicos y fibras sintéticas.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Los de alta eficiencia llamados
En el caso de filtros absolutos, están identificados por el modelo, dimensiones,
filtros
absolutos
retienen
partículas pequeñas, incluso de 0,1
µm
(ULPA),
pero
los
caudal (m3/h), peso, pérdida de carga inicial y pérdida de carga final.
más
frecuentes en las instalaciones para animales con zonas limpias
Pérdida
de
carga:
es
la
energía
requerida para hacer pasar el aire a través del filtro. El filtro va sufriendo una
retienen de 0,5-5 µm e incluso menores
(0.3-0.5
µm,
filtros
HEPA).
colmatación por las partículas que son atrapadas por este. Debido a ello, cada vez
será
necesario
vencer
mayor
resistencia para que pueda pasar el aire. La eficacia de los filtros aumenta al disminuir el tamaño de las partículas, ya que tendrán mayor movimiento molecular y la adhesión molecular al filtro es mayor.
La pérdida de carga del filtro nos indica su duración, se mide en milímetros de columna de agua (mm.c.a). Dependiendo del tipo de filtro a elegir, éste vendrá con
Otros factores que optimizan la filtración son una mayor densidad de fibra de vidrio (mayor obstáculo que atrapa las partículas) y la velocidad del aire (a menor velocidad mayor
una información de pérdida de carga inicial y otra final. Cuando llegue la resistencia del filtro a la indicada por el fabricante, éste será sustituido.
tiempo de contacto con las particulas).
Penetración: es la proporción entre la concentración de partículas que atraviesan un filtro respecto a una concentración conocida de estas partículas que llegan al mismo.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Generalmente
la
pérdida
de
carga
Orientaciones prácticas: el flujo de
aumenta con la eficiencia de un filtro. Por
aire tiene que ser lo más uniforme
ejemplo, un filtro de eficacia 99,95%
posible en toda la superficie del filtro.
para partículas de 0,3 µm (Clase H-13)
Actualmente todas las instalaciones
puede tener una pérdida de carga inicial
disponen de pre-filtros antes de los
entre 12 a 30 mm.c.a dependiendo de
filtros de alta eficacia (protegen a éste,
dimensiones, caudal, etc. y una pérdida
alargando su vida).
de carga final recomendada por el fabricante
entre
50
a
60
mm.c.a.
Deben
ubicarse
manómetros
Aumentando la superficie de filtrado
diferenciales en cada área de filtración
disminuye su pérdida de carga de tal
para conocer el ritmo de colmatación de
forma que si aumentamos el área de
los filtros y sondas que registran el
filtración en un 50% duplicamos la
caudal o flujo diferencial de aire,
duración del filtro.
indicando mediante un sistema de alarma su colmatación o perdida de
Capacidad de retención del polvo: es
eficiencia. El punto de entrada del aire
el peso en gramos del contaminante que
del exterior estará protegido con mallas
retiene, cuando la pérdida de carga del
que impidan la entrada de animales
filtro llega al nivel de carga final
(incluidos insectos) a los conductos.
indicado (en el filtro), habiéndose
Hay que evitar prolongar el uso de los
mantenido constante el caudal de aire.
filtros cuando han sobrepasado la
El
pérdida de carga final indicada por el
99,9%
de
las
partículas
en
suspensión en el aire, tienen un tamaño
fabricante.
inferior a 1 µm. Se considera que por cada 10.000 partículas en el aire hay un patógeno
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
La secuencia normal de filtración en una instalación para animales SPF se
Estos
basa en la disposición de prefiltros
armarios ventilados donde se disponen
(90% de eficacia) en la rejilla de
cubetas con animales en condiciones
impulsión de aire desde el exterior; a
estériles (ya que el aire entra filtrado)
continuación, el aire pasa por una
hasta cubículos con capacidad para
bateria de lámparas de rayos UV
varias estanterías de jaulas. Todos ellos
(acción bactericida inmediata) a un flujo
tienen aire filtrado de alta eficiencia y
constante; seguidamente, humedece o
pueden incorporar equipos de aire
deshumedece y pasa por un segundo
climatizado.
filtro
de
bolsas
del
95%,
equipos
pueden
ser
desde
para
finalmente salir a la zona de animales por medio de filtros HEPA del 99.9% de eficacia, con capacidad de retención, en condiciones óptimas, del 99.9% de las partículas que tranporta el aire
Las más comunes son • Armarios ventilados. • Estanterías con jaulas ventiladas. • Paneles móviles con flujo de aire horizontal. • Aisladores.
inferiores a 0,3).
• Habitáculos fijos. • Unidades móviles.
Habitáculo y equipos barrera En la actualidad, el desarrollo de equipamientos
de
filtración
y
aislamiento hacen bastante fácil la instalación
de
áreas
limpias
Sobrepresión
que
permiten mantener y experimentar con animales protegidos del medio exterior.
Es una de las barreras prioritarias para proteger de contaminación por via aérea las instalaciones. Su eficacia se consigue equilibrando correctamente la impulsión y la aspiración o extración del aire al exterior.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
El orden de sobrepresión será:
OZONIZAIÓN
mayor grado de presión de aire en el pasillo limpio, menor grado en las
El
ozono
es
un
excelente
celdas de animales e inferior en el
desodorante, aunque es inodoro. El olor
pasillo sucio.
con el que se lo suele identificar es una combinación de ozono y nitrógeno
De esta forma, la circulación del
denominado
siempre en dirección pasillo limpio al
compuesto por tres átomos de oxígeno
pasillo sucio, y nunca al revés. En
03, y su punto de ebullición es -112ºC.
óxido
nítrico.
Está
aquellas zonas experimentales en que se trabaje
con
agentes
o
Artificialmente se puede producir por
en
lámparas; pero sólo a unos centímetros
depresión para impedir que salga al
de distancia, por lo que es necesario que
exterior,
circule el aire cerca de las mismas para
contaminantes,
el
patógenos
aire
generando
estará
infecciones
indeseadas por aerosoles.
trasladarlo hacia todos los puntos.
Para identificar los diferentes niveles de presión,
se
diferenciales
utilizan o
bien
manómetros sistemas
electrónicos que al detectar algún cambio en la diferencia de presión hacen sonar una alarma.
El ion activo de oxígeno se combina químicamente
con
sustancias
ambientales cambiando su carácter, siendo uno de los efectos de la oxidación, por lo cual una sustancia olorosa se transforma en otra inodora.
Como mínimo existirá una diferencia de
También se puede generar activando el
presión de 1 mm.c.a de nivel de
oxígeno del aire mediante descargas de
columna de agua entre las zonas que
alto voltaje rompiéndose la molécula de
necesitemos diferenciar, ejemplo: 1 mm
oxígeno y recombinándose sus átomos
entre zona limpia y las celdas, y 1 mm
para formar ozono.
entre las celdas y la zona sucia. Por tanto entre el pasillo limpio y sucio la diferencia de presión será 2 mm.c.a. www.biotecnologiahospitalkaria.com
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Esto se consigue haciendo pasar aire
Los equipos de humidificación también
atmosférico lentamente a través de unos
pueden
electrodos conductores que tienen una
inyectándolo
lámina dieléctrica entre los mismos; es
concentración de 0.8-1 mg/l, luego el
la inestabilidad del ozono la que hace
agua se pasa a un tanque de reacción
que tenga una actuación rápida sobre
durante cierto tiempo para asegurar la
cantidad de microorganismos.
eliminación de los microorganismos y
ser
tratados en
con
el
agua
ozono, a
una
materia orgánica. A la salida del tanque Una aplicación interesante del ozono es
la concentración de ozono residual en
introducirlo en los conductos del aire
agua no debe ser superior a 0.1 mg/l.
para
desinfectar
los
equipos
de
climatización, ya que es una de las tareas más difíciles de realizar en las instalaciones.
Si existe evidencia de contaminaciones
SISTEMAS
DE
LIMPIEZA,
DESINFECCIÓN
Y
ESTERILIZACIÓN
a través de los conductos y equipos de climatización del aire, la concentración de
ozono
se
incrementa
teniendo
presente que en los locales por donde salga el aire no debe haber animales ni personas, pues es irritante cuando pasa de
una
determinada
especialmente
en
concentración,
ojos
y
aparato
respiratorio (110 a 175 µg/m3) (véase directiva 91/C192/05 de la UE).
Limpieza: Es el conjunto de operaciones que eliminan
la
materia
orgánica
e
inorgánica del material o superficies. La materia
suele
estar
fijada
a
las
superficies a limpiar con mayor o menor fuerza de adherencia, por lo que hay que emplear medios químicos y mecánicos para superar las fuerzas que se oponen al desprendimiento de dicha materia.
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23
B
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24
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Entre los detergentes aniónicos se Los medios químicos utilizados con este
incluyen los jabones, como grupo más
propósito se denominan detergentes. En
importante. En disolución con el agua
su aplicación tendremos en cuenta
se
factores tales como la temperatura del
normalmente de sodio (Na+), e iones de
agua y el detergente disuelto en ella,
ácidos
concentración del detergente y tiempo
esquemática:
disocian
grasos
para
formar
según
la
iones,
fórmula
de contacto con la superficie a limpiar Poseen efecto antibacteriano contra organismos gram positivos y ácido-
Detergentes: que
resistentes. Los detergentes catiónicos
disminuyen la tensión superficial de las
incluyen a los compuestos de amonio
soluciones acuosas y emulsionan los
cuaternario
compuestos lipídicos permitiendo su
representantes.
Son
compuestos
suspensión
en
químicos
el
agua.
como
principales
Estos
compuestos no sólo se usan en limpieza,
El ion hidrófobo de la molécula que se
sino también como agentes humectantes
disocia tiene una carga positiva en su
y emulsionantes.
extremo polar. Por su parte, los detergentes noiónicos carecen de carga
Hay
tres
grupos
de
detergentes
dependiendo de la carga que presente el extremo
polar
de
la
neta en el extremo polar de su sección hidrofóbica.
molécula:
aniónicos, catiónicos y noiónicos.
Cuando
se utilicen
dos
tipos
de
detergentes para el lavado, uno puede neutralizar al otro, lo que exige hacer un enjuague o aclarado intermedio.
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25
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
A igual concentración básica, los
b) Desprendiendo la suciedad de las
detergentes catiónicos son más eficaces
superficies a limpiar : las moléculas de
que los detergentes aniónicos porque,
detergente se disgregan en dos partes,
además de su acción emulsionante, se
una con carga negativa y otra con carga
combinan parcialmente con proteínas,
positiva, creando fuerzas eléctricas de
grasas y algunos fosfatos mejorando su
repulsión que arrancan las partículas de
“arrastre” durante el lavado.
suciedad que flotarán en el agua formando micelas. Las colas hidrófobas
El detergente en contacto con el agua
del detergente se unen a la grasa
funciona
mientras las hidrófilas lo hacen al agua.
rebajando
la
tensión
superficial del agua. Las gotas de agua tienen forma esférica porque las fuerzas
c) Impidiendo que la suciedad se
de atracción entre sus moléculas no
deposite de nuevo en las superficies a
están compensadas en su superficie (La
limpiar: las micelas así formadas tienen
gota está en estado de tensión).
la
misma
carga
eléctrica
que
la
superficie limpiada, por lo cual no se a) Las moléculas del detergente tienen
depositan
de
nuevo
un extremo hidrófilo que atrae al agua y
superficie.
una cadena hidrófoba que atrae a la
envuelven la suciedad serán expulsadas
grasa. Al entrar en contacto detergente y
con los enjuagues o aclarados.
Estas
sobre
partículas
dicha que
agua, los extremos hidrófilos de las moléculas de detergente se unen a las moléculas de agua, debilitando las fuerzas de atracción de éstas. Como consecuencia, la tensión superficial disminuye, la gota se aplasta y el agua “moja” el material, introduciéndose en todas partes y facilitando a su vez a las partículas
detergentes
ocupar
esos
mismos espacios.
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26
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
El
detergente
finalmente
“comercial”
acabemos
que
utilizando
Las
esporas
bacterianas
tienen
características de resistencia que las convierten en los agentes más difíciles
contendrá normalmente:
de a)El detergente propiamente dicho, los
eliminar
mediante
estos
procedimientos.
agentes tenso activos llamados también surfactantes, que modifican la tensión
Podemos considerar que la desinfección
superficial e interaccionan con las
es el paso intermedio entre la limpieza y
grasas (emulsionantes).
la esterilidad. El mejor medio de eliminar cualquier organismo es la que
aplicación de calor, pero no siempre
colaboran con el surfactante en su
resulta posible hacerlo con la intensidad
acción limpiadora. Suelen ser en su
suficiente (si el calor aplicado está por
mayoría alcalinizantes y ablandadoras
debajo de los 100º tiene una acción
del agua.
restringida) por la naturaleza de los
b)Sustancias
coadyuvantes
materiales a desinfectar. c)Auxiliares
que
no
considerar
agentes
se
(antiapelmazantes, fluorescentes,
pueden
limpiadores
Por tal motivo recurrimos a sustancias
substancias
desinfectantes que podemos definir
blanqueantes,
entre
como agentes químicos que destruyen
otros.). Existen además detergentes que
las
formas
vegetativas
de
los
incorporan algún desinfectante
microorganismos patógenos y que son menos eficaces frente a las esporas.
Desinfección: Este
concepto
procedimientos empleados
físicos para
agrupa o
los
químicos
destruir
los
microorganismos que tienen capacidad patógena.
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27
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
A pesar de ello, a nivel general actúan La
acción
específica
desinfectantes
de
sobre
los
de la siguiente forma:
los
•Coagulan las proteínas o provocan la
microorganismos los clasifica en:
precipitación
•Biocidas
haciéndolas a funcionales.
(bactericidas,
fungicidas,
de
membrana
mismas,
virucidas), matan las formas vegetativas
•Rompen
de los microorganismos.
provocando su muerte.
•Bioestáticos
•Inducen la unión de los grupos
(bacterioestáticos,
la
las
celular,
la
sulfhidrilo libres; las células cuyas
reproducción o la multiplicación de los
proteínas enzimáticas contienen cisteína
microorganismos
y cadenas laterales terminadas en SH,
fungistáticos),
interfieren
sin
en
matarlos
realmente.
no pueden funcionar sin que los grupos
•Esporicidas, consiguen matar esporas
SH estén libres y reducidos. Si los
bacterianas o fúngicas.
grupos sulfhidrilo se fijan la célula queda dañada.
Los Mecanismos de acción de los
•Antagonismo químico; la afinidad de
desinfectantes son complejos y algunos
las enzimas por sus substratos naturales
pocos entendidos, ya que un mismo
es lo que permite realizar la acción
desinfectante, variando parámetros de
catalítica. Si un compuesto se asemeja
tiempo y concentración, tiene acción
mucho a un substrato en sus aspectos
diferente.
esenciales, la enzima mostrará afinidad por ese compuesto. Si la afinidad es muy fuerte el compuesto sustituye al substrato natural de la enzima, evitando la reacción normal e inhibiendo el metabolismo celular.
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20/24 octubre 2014, Barcelona
Curso de Técnico de Calidad Ambiental en Interiores (TSCAI/TMCAI), acreditación necesaria para, en aplicación de la norma UNE 171330-2 171330 2 “Calidad de Ambiente en Interiores”, Interiores”, realizar inspecciones. _________________________________________ MAS INFORMACION
información@acesem.org
Tel 93 496 45 07 www.biotecnologiahospitalkaria.com
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Al plantearnos la elección de un desinfectante debemos realizar una
•Tiempo de recuperación (p. ej., en el
cuidadosa
evaluación
integrando
caso de fumigación, sería el periodo que
criterios
científicos,
técnicos,
es necesario esperar, para que el acceso
económicos y de seguridad con grandes
al área fumigada no sea tóxico para las
dosis de pragmatismo.
personas).
Evidentemente, escoger el desinfectante
Por otra parte, tanto para garantizar la
más potente nos podría garantizar la
correcta acción del desinfectante como
eliminación de la contaminación, pero
la seguridad del personal que deba
puede ser un absurdo desde el punto de
utilizarlo, adoptaremos las siguientes
vista operativo, poseer una relación
precauciones:
coste-beneficio desfavorable o generar
•Utilizar siempre equipo limpio para su
altos niveles de riesgo para el personal.
aplicación.
Hay que conocer en primer lugar sobre
•Limpiar la materia orgánica de la
qué microorganismos queremos actuar
superficie a desinfectar.
y en qué proporción se encuentran.
•Diluir
el
producto
según
las
recomendaciones del fabricante. A partir de aquí, es imprescindible
•Dejar
tomar en consideración:
permanezca humedecida con la solución
•Composición
química
del
que
la
superficie
tratada
desinfectante al menos
desinfectante, siempre compatible con
durante 5 minutos.
los materiales a tratar.
•Cambiar
•Temperatura de actuación el producto.
inmediatamente si se observa alguna
•Tiempo de contacto del desinfectante
suciedad.
con los microorganismos a eliminar.
•Renovar
•Concentración de los principios activos
cuando se cambie de sala o zona.
del producto y forma de preparación.
•Respetar el tiempo de recuperación
•Forma de aplicación (vaporizado, en
definido por el fabricante.
la
la
solución
solución
desinfectante
desinfectante
forma de spray , etc.).
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Clasificación de los desinfectantes
Según su nivel de actividad
Según composición química
Se clasifican en desinfectantes de
•Alcoholes: etanol, isopropanol.
niveles alto, intermedio o bajo, en
•Aldehídos:
función de su capacidad microbicida.
glutaraldehído,
Los desinfectantes de alto nivel son
formaldehído. cetrimida,
eficaces frente a formas vegetativas de
cloruro de benzalconio, cloruro de
bacterias y hongos y virus. En tiempos
benzetonio y cloruro de cetilpiridina
largos de contacto (3 a 10 horas) son
•Anilidas: triclocarban.
esporicidas. Algunos ejemplos son el
•Biguanidas: clorhexidina, alexidina.
glutaraldehído
•Diamidinas:
23glutaraldehído
•Amonios
cuaternarios:
propamidina,
alcalino, fenolato,
dibromopropamidina.
duopropenida
(yoduros
•Fenol y compuestos fenólicos: cresol,
cuater-nario),
ácido
amilfenol,
peróxido
bitionol,
bisfenoles
cloro
y
amonio
peracético
hidrógeno.
y Los
desinfectantes de nivel intermedio son
(triclosan, hexaclorofeno). •Halogenados:
de
de
N-
compuestos
activos frente a formas vegetativas de
clorados, yodo y yodóforos.
bacterias y hongos siendo inactivos
•Compuestos de metales pesados (sales
frente a esporas y Mycobacterium
de plata y minerales, Mercromina,
tuberculosis..
Mercresol o Tiomersol)
El
•Oxidantes: peróxido de hidrógeno,
compuestos yodados (povidona yodada)
ácido peracético
y los alcoholes (alcohol etílico, alcohol
•Otros: amidas, ureas, óxido de etileno
isopropílico) son algunos ejemplos. Por
y derivados del ácido carbónico
su parte, los desinfectantes de bajo nivel
hipoclorito
sódico,
algunos
no son activos frente a virus pequeños no lipídicos, ni frente a Mycobacterium tuberculosis ni a esporas bacterianas y poseen baja actividad frente a hongos.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Su actividad se circunscribe a formas vegetativas bacterianas y algunos virus
Los más habituales son: alcoholes
encapsulados. Suelen utilizarse como
(etílicos e 24 isopropílicos), ácidos
antisépticos.
(acético, salicílico, láctico, bórico), agentes
oxidantes
(peróxido
de
Según su área de aplicación
hidrógeno), compuestos halogenados
•Atmosféricos: pueden ser convertidos
(yodo,
en
clorhexidina.
vapor
(por
calentamiento
–
povidona
yodada)
y
termonebulización-) y se usan para la desinfección de locales y aisladores,
Desinfección por radiación ultravioleta
como el formaldehído, peróxido de
Las bacterias, virus y la mayoría de
hidrógeno.
hongos son vulnerables a los rayos
•Para instrumental: poco corrosivos,
ultravioletas con longitud de onda
fácilmente eliminables por lavado o
menor de 3.000 Å. Son producidos por
evaporación (glutaraldehído).
lámparas de vapor de mercurio con una
•De superficie: para suelos y paredes,
emisión de 2.400 a 2.800 Å. La
mobiliario, cabinas de bioseguridad, etc.
intensidad de las lámparas se expresa en
Se utilizan casi todas las familias
microvatios por cm 2 y para obtener la
químicas y niveles de actividad en
dosis de radiación UV que se está
función del grado de desinfección
aplicando basta con multiplicar dicha
deseado.
intensidad por el tiempo de exposición.
•Antisépticos: preparaciones aplicadas a
Como ejemplo, para poder matar el
tejidos vivos (en la piel, para eliminar
99,9% de un inóculo de Escherichia coli
en lo posible todos los microorganismos
son necesarios 12.000 µw/seg. y cm2.
que
residen
habitualmente
o
transitoriamente en la misma; en los tejidos en general que son asiento de infección o pueden serlo).
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Esterilización
Los hornos suelen contar también con
Se define como un proceso físico o
filtros HEPA para introducir aire que
químico que produce la eliminación
enfríe el interior una vez terminada la
total de la carga microbiana de un
esterilización. El aire es mal conductor
objeto,
formas
del calor, por lo cual éste penetra
esporuladas. Existen tres métodos de
lentamente en los objetos, necesitándose
esterilización físicos (por calor seco,
un “tiempo de penetración del calor”
vapor de agua y radiaciones) y dos
cuidadosamente establecido en función
métodos químicos (óxido de etileno y
de los materiales a esterilizar. Se define
formaldehído).
así mismo el “tiempo de retención”
incluyendo
las
como el tiempo necesario que asegura Esterilización por calor seco (hornos):
que
todas
las
esporas
consiste en exponer los objetos a
resistentes han muerto.
bacterianas
temperaturas elevadas (160 a 200ºC) durante periodos de tiempo de 1 a 2
Esterilización
horas.
se
(autoclave de vapor): se considera la
consigue por conductividad, pasando el
más adecuada dado su alto poder de
calor desde las superficies de los
penetración, elevada acción microbicida
objetos hacia el interior de los mismos.
en cortos periodos de tiempo, ausencia
Normalmente el esterilizador es una
de residuos tóxicos, bajo costo y fácil
cámara con un cuerpo calefactor y con
control de los procesos. El principio
la ayuda de un ventilador se distribuye
físico de la esterilización con vapor se
el calor por la cámara homogéneamente.
basa en el hecho que el agua hierve
La
acción
esterilizante
con
vapor
de
agua
cuando su presión de va por iguala a la atmosférica que la rodea.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Si aumenta la presión en el autoclave, también aumenta la temperatura de
Antes de usar por primera vez un
ebullición del agua, situándose por
autoclave y al menos una vez al año
encima de 100ºC. Al entrar el vapor en
durante la vida del equipo, debe
contacto con superficies más frías cede
efectuarse una validación de todos los
su calor y se condensa en agua. La caída
programas del mismo para confirmar
de presión resultará en más vapor
que realiza correctamente su función
aplicado a dicha área hasta que la
esterilizadora.
temperatura de la superficie sea igual a Esterilización
la del vapor.
mediante
radiaciones
ionizantes: las radiaciones de alta Gracias a este efecto se consigue la
energía, particularmente la radiación γ ,
penetración del vapor a través de toda la
se utilizan para la esterilización de
carga a esterilizar, liberándose calor
materiales que no toleran las altas
latente
temperaturas y que pueden ser atacados
que
destruye
los
microorganismos.
por
los
desinfectantes
químicos.
Múltiples elementos plásticos de uso Para una correcta esterilización no debe
frecuente
quedar aire dentro del autoclave ya que
esterilizan mediante este procedimiento,
el vapor al mezclarse con el aire no
así como algunos piensos para la
podrá llegar a todos los puntos de la
alimentación de los animales.
en
los
laboratorios
se
carga a esterilizar. Suele resolverse este problema realizando el vacío en la
Óxido de etileno: es un gas muy
cámara del autoclave antes de comenzar
penetrante y altamente explosivo a
la esterilización.
concentraciones en el aire mayores del 3% (la concentración máxima segura en
El vapor debe ser puro y saturado, sin
aire es de unas 10 ppm. en volumen).
partículas, y estar en equilibrio con el agua a una determinada temperatura. Se pueden programar diferentes ciclos para cada tipo de material a esterilizar.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
La acción esterilizante del óxido de
Esterilización
etileno está en función del tiempo,
normalmente se utiliza para aquellos
temperatura, humedad relativa y presión
materiales que no pueden esterilizarse
del gas.
en autoclave de vapor, bien por su tamaño
con
o
formaldehído:
porque
no
La acción del oxido de etileno se
temperaturas
atribuye a su poder alquilante de los
esterilizante del formaldehído se debe a
grupos sulfhidrilo, amino, carboxilo e
su propiedad de reaccionar con los
hidroxilo de las moléculas proteicas. Es
grupos amino de las moléculas proteicas
efectivo
produciendo un efecto letal sobre los
contra
todo
tipo
de
elevadas.
microorganismos, incluyendo virus y
microorganismos,
esporas bacterianas.
vegetativo
como
tanto
La
resisten
en
acción
estado
esporulados.
La
concentración debe ser del orden de 2 En los autoclaves basados en este
mg/L.
compuesto, el óxido de etileno se utiliza mezclado con otros gases de soporte
Esterilizacion con peróxido: el peróxido
(clásicamente clorofluorocarbonos, en
de hidrógeno es un potente agente
la
carbono
oxidante que, en forma gaseosa o de
principalmente) sometido a diferentes
vapor y al contrario de lo que ocurre en
temperaturas según qué se quiera
fase
esterilizar
espectro de actividad microbicida y es
actualidad
dióxido
(hasta
de
60ºC
y
en
líquida,
presenta
un
amplio
concentraciones de 1.2 a 1.4 mg/litro).
rápidamente esporicida.
Los ciclos pueden durar desde 1 hasta
Es
18 horas para aquellos materiales que
esterilización a baja temperatura que
permitan una menor penetración del
permite la biodescontaminación de salas
gas.
o pequeños habitáculos cerrados (en
una
aplicaciones
tecnología
que
rápida
de
denominábamos
aplicaciones a presión atmosférica).
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Es virucida, esporicida , fungicida y
b) Las cubetas vacías son depositadas
bactericida. Fácil de usar, no deja
en la cinta del túnel de lavado
residuos y bueno en presencia de
lavaracks y a medida que las cubetas
materia orgánica.
salen
limpias,
se
encarga
de
recogerlas y apilarlas en carretillas o en bandas de transporte que las
Sistema de limpieza por aspiración
conduce a la zona de llenado de Aunque no es muy extensa la implantación de aspiración centralizada para deshacerse de todos los residuos generados en los animalarios, sí que merece una especial mención, ya que evitan
contaminaciones
de
diversa
índole al eliminar los circuitos de residuos por áreas. Este sistema se hace en tres pasos
viruta. Este sistema es muy flexible, permitiendo tratar otros materiales transportados en cestas codificadas (botellas de agua, tapaderas de jaulas, cobertores, etc.). c) El llenado de viruta se realiza automáticamente por medio de un dosificador que aporta la cantidad de viruta que necesita cada tipo de
a) Una vez que han llegado las cubetas sucias al área de lavado se vacía su contenido en un recipiente especial que aspira la cama sucia y la conduce a un contenedor donde se almacena hasta su recogida por los servicios de limpieza e inclusive
cubeta, el cual consta de un equipo de aspiración que transporta los lechos
desde
donde
están
almacenados hasta un dispensador, que lleva a cabo su distribución. El sistema extrae el polvo de los lechos limpios.
puede pasar directamente a un incinerador.
El
recipiente
de
aspiración evita la acumulación de polvo
en
el
disminuyendo
área
de
lavado
igualmente
la
proporción de alérgenos.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Uno de los problemas más frecuentes que
puede
observarse
en
los
animalarios, afecta a los cubos de basura
que
son
sacados
con
los
Sus principales características son las siguientes:
desechos procedentes de las jaulas de
a) Las puertas no se pueden abrir al
animales, y dejados en la calle para su
mismo tiempo, debido a un
recogida por los servicios de limpieza,
anclaje eléctrico que permite
pues bien, son un auténtico reclamo
abrir una puerta cuando la otra
para los roedores salvajes que atraídos
esta cerrada.
por el olor de los restos de los roedores
b) El mismo sistema impide que la
de laboratorio, tocan, lamen o manchan
presión de aire del interior de la
los
son
cabina no sea inferior al del área
introducidos de nuevo vacíos en las
limpia no podrá abrirse la otra
instalaciones,
puerta.
cubos
que
más
creando
tarde
un
puente
c) Generalmente estos habitáculos
perfecto a la contaminación.
disponen en su interior de luces U.V. que mantienen controlado el
crecimiento
de
Sistemas de doble puerta (SAS o
microorganismos.
AIR-LOCK)
puede emplearse algún sistema de
Con frecuencia es necesario pasar
También
desinfección
rápido
(formolización o peróxido de
de una zona contaminada a otra limpia,
hidrógeno),
o hacer entregas de material o animales
breve espacio de tiempo el
de una zona limpia a otra menos
habitáculo
protegida. Para ello se dispone de
nuevamente.
diferentes
tipos
de
que
recupere
para ser
en
utilizado
habitáculos
adaptados al paso de personal y material grande, para la salida de material sucio o para el paso de animales.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Hay que evitar tener las puertas de las
Pasillos y accesos
celdas abiertas, ya que las presiones no En la actualidad es encontrar
instalaciones
frecuente
con
doble
pasillo, por donde circula todo el material necesario . Supone una gran ventaja contar con esta doble vía que permite
recibir
por
un
pasillo
(denominado sucio) todos los materiales procedentes de las celdas de animales
se podrán mantener debido al flujo de aire que escapará hacia donde hay menos presión, tendiendo a igualarse ésta entre los dos pasillo. No se abrirán nunca ambas puertas de una celda al mismo tiempo. El anclaje eléctrico permite
resolver
este
problema
automáticamente.
(cubetas, jaulas, viruta, botellas, etc.) que son conducidos a una zona de lavado en donde se procesará dicho
Zonas de seguridad biológica
material y se someterá a lavados e Estas zonas se diseñan para trabajar
incluso a esterilizado. con El material una vez tratado pasará a otra zona
(almacén
limpio)
para
ser
distribuido a las celdas a través del pasillo denominado limpio. El pasillo limpio estará en sobrepresión con respecto a la zona de lavado y pasillo sucio (el aire circula del pasillo limpio hacia las celdas y de las celdas hacia el pasillo sucio).
agentes
patógenos,
radiactivos,
isótopos animales
inmunodeprimidos, etc. En ellas el aire está en depresión para evitar que salga al
exterior
Suelen
cualquier
disponer
de
contaminante. equipos
de
esterilización para el material que tenga que salir al exterior (cubetas, jaulas, equipos de manipulación, etc.) y el acceso está siempre controlado y sólo para personas autorizadas. Disponen de vestuarios para el cambio de ropa antes de acceder a manipular los animales.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Por
tanto,
el
material
sucio
se
Equipos de lavado de jaulas y
introducirá por la zona de lavado y se
material
extraerá por la zona de almacenamiento de material limpio.
Es otra de las piezas importantes de una instalación
de
producción
y/o
experimentación animal.
Filtración y tratamiento del agua
Se considera como una auténtica barrera
Es prioritario someterla a un tratamiento
debido a que generalmente permite
que garantice la ausencia de carga
programas de lavado con uno o más
microbiológica,
tipos de detergente (ácido, alcalino), el
Pseudomonas
agua
diferentes
Clostridium. Su disponibilidad para los
temperaturas (hasta 80ºC) para que la
animales será en todos los casos ad
limpieza sea lo más eficaz posible. Los
libitum. El agua se somete a diferentes
equipos actuales disponen de diferentes
tipos de tratamientos:
se
utilizad
a
programas para alargar o acortar los
especialmente spp.,
Coliformes
y
Cloración: con una concentración
igualmente
de cloro libre residual de 0.5 mg/l se
someter el material a ciclos de vapor o
mejora considerablemente la calidad del
desinfectantes.
agua, ya que tiene un gran poder
tiempos
de
lavado,
e
oxidante
tanto
sobre
sustancias
orgánicas como inorgánicas (al margen Otra de las ventajas es que nos permite comunicar por medio de las puertas
o
bocas
de
la
de su bajo coste). Acidificación: se trata de añadir
lavadora
ácido clorhídrico al agua hasta un pH de
(dependiendo si el modelo es de túnel o
2.5 aproximadamente: este medio ácido
de armario) la zona de lavado con la
impide que los microorganismos se
zona de almacenamiento de material
multipliquen.
limpio.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Estos
dos
sistemas
son
bastantes
Esterilización
con
rayos
eficaces, ya que permiten tener el agua
ultravioletas: consiste en el paso del
en los biberones durante períodos de 2 ó
agua a través de uno o varios tubos de
3 días en buenas condiciones sanitarias.
cierta longitud (1 metro o más) que
Si el agua contenida en los biberones no
disponen de lamparas de rayos UV
tuviese
se
protegida herméticamente, con emisión
contaminaría con bastante rapidez, pues
de radiaciones una longitud de onda de
los animales (sobre todo roedores)
254 nm de alta eficacia bactericida. La
suelen dejar residuos de comida, saliva,
destrucción de microorganismos suele
viruta, etc., que se introducen dentro de
ser instantánea.
tratamiento
alguno
la botella. Esto hace necesario sutituir con frecuencia la botella entera (mínimo dos veces en semana).
Esterilización en autoclave: es otro de los sistemas aplicados al agua. En centros, donde se alojen animales en
Filtración: previo a la cloración o acidificación se puede someter al agua a filtración. Se hace 2 ó 3 filtros de carbono activo, de diferente grado de filtración para que los residuos que transporta el agua se depositen de acuerdo a su tamaño. El grado de filtración oscila entre 40 - 10 y 5 µm, dependiendo de la calidad del agua de la red.
condiciones SPF, inmunodeprimidos o similar es el método más seguro. Siempre y cuando el colectivo animal sea reducido. Ozonización:
el
ozono
es
un
oxidante puro que reacciona muy bien con el agua sin dejar subproductos pudiéndose emplear en exceso sin contraindicaciones, al descomponerse espontánea y rápidamente en el agua (para una concentración de O3 en agua de 3 g/m3 es necesario inyectarlo en una concentración de 10 g/m3).
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40
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
La desventaja del ozono, es su
En la pared que divide las dos
acción corrosiva sobre las conducciones
zonas, baja una placa transparente que
y tuberias (hierro, plomo y en menor
cubre todo el ancho del tanque hasta
medida
introducirse unos centímetros dentro del
al
plástico).
Como
características destacan:
liquido. Este sistema permite pasar productos o incluso animales metidos
•
Eliminación
de
olores
y
sabores.
en una bolsa herméticamente cerrada, sumergiéndola debajo de la placa, podrá
• Decoloración del agua.
ser recogida al instante por el operario
• Oxidación de las sales ferrosas,
que está en la otra zona. Se emplea para
manganésicas y sulfurosas. • Eliminación de fenoles.
introducir en la barrera material no esterilizable.
• Reducción de las proporciones de detergentes. Barreras
antiroedores
y
atrapa-
insectos Tanque de inmersión (dunk-tank o dip-tank)
Los roedores salvajes suponen un riesgo latente si hacen aparición en el
Permiten el paso de material de una
animalario es por ello que suele
zona a otra atravesando un medio
emplearse un sistema bastante simple y
liquido. Consta de un depósito situado
que consiste en colocar una chapa de
estratégicamente entre una zona limpia
unos 30-40 cm. (terminada en forma
y otra sucia, este tanque está cubierto de
curva por arriba) en las bases de los
un desinfectante de amplio espectro,
marcos de todas aquellas puertas que
hasta un determinado nivel.
dan al exterior.
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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
Estas chapas se deslizan sobre unas
Por ello, es importante la elección del
guías, por lo cual son bastante fáciles de
equipamiento
quitar y poner.
función que en general se compone de batas,
Los equipos para atrapar insectos, constan
de
una
luz
ultravioleta
denominada luz negra (no es peligrosa, ya que es de 330-380 nm), tiene la particularidad de atraer a los insectos,
adecuado
guantes,
protectores
para
mascarillas,
de
cada
gorros,
zapatos,
etc.
Dependiendo de las diferentes áreas que tenga el centro (zona sucia, limpia, experimental, etc.) se distribuirá la ropa adecuada para cada una de ellas.
razón por la cual se coloca cerca de un campo eléctrico de alta tensión que electrocuta al insecto al rozar sus alas
Equipos
en estos circuitos. Este método es muy
(generador eléctrico)
de
corriente
autónoma
eficaz para todos los insectos voladores. Estos equipos son de suma importancia debido, entre otras razones, a la garantía de recepción de energía eléctrica en Utilización de ropa específica
caso de fallos en la red general.
El hombre es portador de un elevado número de microorganismos que emite
En este tipo de instalaciones no hay otro
constantemente a su entorno por medio
sistema de ventilación auxiliar, dada la
de partículas que desprende al hablar,
ausencia de ventanas u otras vías que
respirar, toser, por descamación cutánea
podrían aportar aire fresco, y por lo
y
tanto hay que garantizar mediante un
principalmente
ejercitando
movimientos.
generador
cualquier
deficiencia
de
energía eléctrica, que impidiese el funcionamiento de los equipos de ventilación,
climatización
u
otros
equipos.
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42
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
En la actualidad muchos de estos equipos o parte de ellos (plantas
Cuando proceda debe instalarse un
enfriadoras, fancoils, humedificadores,
grupo electrógeno auxiliar, con el fin de
etc.) están duplicados, para garantizar,
asegurar el funcionamiento de los
en
sistemas
caso
de
averías,
la
correcta
ventilación.
esenciales
para
la
supervivencia de los animales y de la iluminación en caso de avería e
Sistemas de alarma
interrupción en el suministro. Se recomienda que esté protegido mediante la instalación de dispositivos que detecten los incendios y la entrada
Se
colocarán
instrucciones
en
lugar
claras
sobre
visible los
procedimientos a seguir en caso de
de personas no autorizadas.
emergencia. Se recomienda instalar Los defectos técnicos o las averías del
alarmas en los viveros de peces por si
sistema de ventilación son otro riesgo
fallara el suministro de agua.
que puede causar molestias e incluso la muerte de los animales por asfixia o exceso de calor o en los casos menos graves, tener efectos negativos sobre un procedimiento hasta el punto de hacerlo
Se procurará que el funcionamiento de un sistema de alarma produzca los menores
trastornos
posibles
a los
animales.
fracasar y obligar a repetirlo. En consecuencia,
conviene instalar
dispositivos de detección adecuados en conexión con el sistema de calefacción y ventilación con el fin de que el personal
pueda
supervisar
su
funcionamiento en general.
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43
BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE
BIBLIOGRAFÍA; Alonso RM, Martí MC, Constans A: Trabajo Sistemas de intercomunicación
personal
entre las
distintas zonas, conviene definir y establecer un completo sistema de intercomunicación de las distintas zonas entre sí y con el exterior. Las señales sonoras
de
aviso
de
estos
intercomunicadores serán de intensidad moderada y trabajar a frecuencias no audibles o molestas para los animales. Se puede utilizar telefonía movil y sistemas de ”buscas” para localización del personal, además del envío de mensajes
o
instruciones
por
informática.
animales
de
experimentación, INHST, Nota técnica
Con el fin de evitar la circulación innecesaria del
con
red
de prevención 468-1997 Booth
NH,
McDonald
LE:
Farmacología y terapéutica veterinaria, Vol II. Editorial Acribia, S.A. 1987. CDC-NIH:
Biosafety
Microbiological
and
in
Biomedical
Laboratories, 3ª ed, CDC-NIH, 1993. Constans A: Exposición a agentes biológicos: seguridad y buenas prácticas de laboratorio, INHST, Nota técnica de prevención 376-1995. García García-Saavedra MJ, Vicente García
JC:
Técnicas
de
descontaminación. Limpieza.Desinfección.Esterilización. Editorial Paraninfo, 1997 Kahrs RF: Principios generales de desinfección.
RevueScientifique
et
Technique de l’Office International des Epizooties. 14(1), 143-163, 1995 Kruse RH, Puckett WH, Richardson JH: Biological safety cabinetry, Clinical Microbiology Reviews , 4:207-241, 1991.
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44
CURSO eLEARNING DE ESPECIALIZACIÓN (Ed. a distancia): Inicio: 04 noviembre / Finalización: 04 diciembre 2014 (1 mes)
NUEVAS DIRECTRICES EN EL DISEÑO DE SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO EN HOSPITALES: Tema 1: Proyecto de Revisión de Norma UNE 100713 AENOR. Tema 2: Diseño de Salas de aislamiento para pacientes infectados o sospechosos de estarlo con Ébola. Tema 3: Diseño de Unidades con Presión Positiva.
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45
VIDEOCONFERENCIAS
:
Les presentamos un innovador Curso online, asista a nuestras videoconferencias y clases virtuales con nuestros Profesores desde cualquier lugar del mundo.
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PLATAFORMA TECNOLÓGICA
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46
PROGRAMA
:
Módulo I: Actual fase de revisión de la Norma UNE 100713 de AENOR "Instalaciones de aire acondicionado en Hospitales", en base a los standares europeos CEN/TC 156/WG. •
Contenido Temático: Las normas técnicas se elaboran en el seno de AENOR a través de los Comités Técnicos de Normalización. El proceso de elaboración de una Norma UNE está sometido a una serie de fases, antes de su aprobación. En este Módulo se explicará la actual fase de revisión de la Norma UNE 100713 "Instalaciones de acondicionamiento de aire en Hospitales", basada en stándares europeos (CEN/TC 156/WG).
Módulo II: Diseño de salas de aislamiento para pacientes infectados con virus de naturaleza severa (OMS): Síndrome respiratorio de oriente medio (MERS-CoV), virus H5N1 y H7N9 de gripe aviar y Ëbola. •
Contenido Temático: Se explicará de manera práctica las características de las salas de aislamiento para pacientes con infecciones por virus de naturaleza severa (Síndrome respiratorio de oriente medio (MERS-CoV), virus H5N1 y H7N9 de gripe aviar y Ëbola). Asimismo el alumno aprenderá la aplicación de medidas estructurales con el fin de aislar a este tipo de pacientes y prevenir el paso de contaminantes desde las habitaciones al entorno inmediato y a otras áreas del Hospital.
Módulo III: Diseño de salas de ambiente controlado con Presión positiva (salas inmunodeprimidos, fecundación in vitro, farmacia ...). •
Contenido Temático: Las condiciones ambientales y estructurales para salas de ambiente controlado son de vital importancia para los estrictos requerimientos que necesitan, tanto este tipo de pacientes, fármacos y/o cultivos "in vitro".
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47
PROFESORADO
:
Dra. GLORIA CRUCETA, Médico, Directora de SEGLA, Presidenta del Comité CTN 171 de Calidad Ambiental en Interiores de AENOR, Coordinadora del GT1 "Validación y diseño de Laboratorios de Bioseguridad y Animalarios de AENOR, Técnico Superior en Prevención de Riesgos Laborales, especialidad en Higiene Industrial. Experto técnico de ENAC para Calidad Ambiental en Interiores.
D. JAIRO BETANCOURT, Biólogo por la University of Miami (EEUU), desempeña actualmente el cargo de Biosafety Officer, Laboratory Safety Specialist en el LABORATORY SAFETY OF THE UNIVERSITY OF MIAMI, es miembro activo de ABSA (American Biological Safety Association), además es promotor de Bioseguridad de ABSA en Sudamérica y Asesor en Bioseguridad y en Diseño de Laboratorios de contención en Venezuela, Colombia, México, Argentina y Panamá.
D. JAUME CERA. Ingeniero Técnico Industrial, Director departamento climatización en JG INGENIEROS S.A. JG Ingenieros es miembro fundador de ASINCE (Asociación Española de Consultores en Ingeniería) y de First Q Consulting Engineers, (Sociedad de ingenierías europeas de instalaciones), que tiene como objetivo desarrollar proyectos comunes a nivel europeo. Grupo JG Ingenieros ha llevado a cabo numerosos proyectos y direcciones de Obra civil e instalaciones de salas de ambiente controlado en Hospitales.
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48
INSCRIPCIONES
:
SECRETARÍA TÉCNICA E INFORMACIÓN Las inscripciones se deben realizar a través de nuestro Campus virtual www.segla.net Tel. 0034 934 364 061, email oficina.tecnica@segla.net
ORGANIZA
:
PARTNER DEL CONOCIMIENTO
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BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
RESUMEN
El objetivo de este trabajo ha sido prever el diseño de un laboratorio BSL-3 para el estudio y manejo de Hantavirus,
Victoria Moleiro San Emeterio Lic. Biotecnología. Estudiante de Doctorado y Técnico de Gestión del Proyecto CellCam Div. de Terapias Innovadoras en el Sistema Hematopoyético. CIEMAT Marina Peña Abad Veterinaria. UNIVERSIDAD DE LEÓN.
incluyendo
una
zona
ABSL-3 de alojamiento de animales para estudios de cepas vacunales creadas por modificación genética y productos antivirales. En este trabajo se especifican los las
condiciones
técnicas
y
requerimientos particulares para el diseño, construcción y puesta en .funcionamiento instalaciones características,
de de basados
unas estas en
el
análisis de riesgo e incluyendo la normativa a seguir para llevar a cabo el proyecto
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50
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
INTRODUCCIÓN Los
Hantavirus
son
virus
de
la
familia
Bunyaviridae. Son virus esféricos y envueltos de
Muchos de los roedores mantienen el virus de una manera asintomática.
90-100 nm de diámetro cuyo genoma está formado El primer miembro de la familia de los
por RNA.
Hantavirus fue descubierto en 1970. Desde entonces se han identificado más de 20 hantavirus, de los que aproximadamente la mitad Los
Hantavirus
pueden
ser
encontrados por todo el mundo y causan
dos
humanas
graves
enfermedades
El serotipo más extendido en Europa es el virus Puumala, causante de una variedad más leve de
hemorrágica
HFRS que se ha dado en denominar nefropatía
con síndrome renal (HFRS) y el
epidémica, con un 90% de casos leves y cuyo
la
síndrome
fiebre
a
serotipos tiene un hospedador natural distinto.
menudo
fatales,
y
causan HFRS o HPS. Cada uno de los distintos
pulmonar
por
reservorio es el ratón Clethrionomys glareolus. El estudio de las enfermedades causadas por
Hantavirus (HPS).
Hantavirus en modelos animales se ha visto entorpecido por la ausencia de un modelo animal adecuado. Los Hantavirus, a diferencia de lo que ocurre con el resto de los miembros de la familia Bunyaviridae, no se mantienen en artrópodos, sino que se transmiten
cíclicamente
entre
roedores
persistentemente infectados, pudiendo darse la infección humana de una manera incidental. La transmisión se produce de forma primaria por inhalación de aerosoles de roedores infectados, heces o saliva.
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51
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
Recientemente se ha publicado la
validez
de
un
modelo
hámsteres
en
infectados ANÁLISIS
experimentalmente con el virus Andes
que
podría
DE
RIESGO
Y
RECOMENDACIONES EN EL TRABAJO
reflejar
CON HANTAVIRUS
fielmente las características de Las enfermedades causadas por Hantavirus son
la HPS humana.
endémicas en Europa. Los principales serotipos de Hantavirus asociados con la enfermedad en Europa son: Sin nombre, Puumala, Seoul y
Para la prevención de las enfermedades causadas
Hantaan.
por Hantavirus se han diseñado diferentes
presentar serología positiva para estos serotipos.
vacunas con distinto grado de eficacia. Debido a
Los agentes exóticos requerirían un mayor nivel
la
de biocontención.
presencia
de
diferentes
serotipos
de
La población
es
susceptible de
Hantavirus el mayor reto consiste en el desarrollo de una vacuna polivalente para todos
Los aerosoles de saliva o excreciones infectadas están claramente implicados en la transmisión de
ellos.
los Hantavirus en humanos. La transmisión de Los Hantavirus son clasificados en el RD 664/97
Hantavirus de roedores a humanos en el
como agentes biológicos incluidos en el grupo
laboratorio
III, pero se hará necesario un análisis detallado
documentada. Los operarios pueden resultar
de los distintos serotipos a utilizar para
infectados al exponerse a las excreciones de los
establecer
roedores, material de necropsia fresco y las
las
medidas
de
biocontención
necesarias en cada caso a la luz de los datos
vía
aerosoles
camas de los animales.
disponibles sobre la persistencia y mecanismos de transmisión de los serotipos implicados.
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52
ha
sido
bien
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 BSL Y ABSL-3 3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
En los lugares de alojamiento de los animales, el periodo de exposición al material infeccioso requerido para la transmisión puede ser corto. corto
c)
Otras rutas potenciales de infección en el
infectadas experimentalmente que no excretan el
laboratorio pueden ser ingestión, contacto con
virus se recomienda que el trabajo se desarrolle
material infeccioso, membranas mucosas o piel
en animalarios ABSL-22 con prácticas del mismo
lacerada y, en particular, las mordeduras. El
nivel. Las prácticas susceptibles de generar
trabajo con cultivos celulares infectados también
aerosoles se llevarán a cabo en cabinas de
es un mecanismo de transmisión.
bioseguridad. El suero y las muestras de tejido
No se ha demostrado transmisión a partir de muestras humanas ni de persona a persona salvo en el caso del virus Andes en Argentina.
Para el trabajo con especies hospedadoras
de roedores infectados deben manejarse de acuerdo a prácticas BSL-3, BSL aunque el laboratorio sea BSL-2.
Debido a la naturaleza virulenta viru de los agentes A la vista de estos datos y siguiendo las
causantes de la HPS y a que puede ocurrir
recomendaciones del CDC, podemos establecer
transmisión de animales a humanos, las personas
los siguientes niveles de biocontención en el
que trabajen con especies hospedadoras naturales
trabajo con estos virus:
deben tomar precauciones especiales.
a)
De
Para el manejo de muestras de humanos
este
modo,
el
trabajo
que
implique
sería suficiente con un BSL-2.
inoculación de muestras muest del virus debería
b)
llevarse a cabo en animalarios ABSL-4 ABSL o
Para el manejo de muestras de tejido y
cultivos virales se recomiendan instalaciones
condiciones similares.
BSL-2, incluyendo prácticas BSL--3. El cultivo de virus a gran escala requiere un nivel de biocontención 4.
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BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
DISEÑO DE UN LABORATORIO BSL-3 Y UNA
ZONA
DE
ALOJAMIENTO
DE
ANIMALES.
Este sistema estará compuesto por un vestuario sucio en el que deberá dejarse todo lo que se lleve de fuera. Habrá que ducharse con agua y
La definición de las necesidades de espacio,
ponerse ropa interior y traje especial cerrado y
tipología de los locales necesarios para el
con puños cerrados. Además, deberá emplearse
desarrollo de las actividades, será coordinada
protección de ojos y mascarilla.
directamente por los responsables que utilizarán las instalaciones, contando en todo momento con el asesoramiento de un comité especializado en bioseguridad.
Posteriormente se pasará por un sistema de esterilización por aire a través del cual se accederá al vestuario limpio que permitirá el
1. Diseño zona BSL-3. Área de cultivos celulares y manejo de Hantavirus.
acceso al laboratorio. Entre la primera esclusa y el laboratorio
El acceso a la zona BSL-3 estará restringido a
existirá también un SAS para el
usuarios con formación y autorización necesarios
paso
para trabajar en estos niveles de bioseguridad.
de
materiales
con
autoclave de doble puerta al que
Por ello, se accederá al laboratorio mediante el
se
podrá
acceder,
previa
empleo de la tarjeta con banda magnética que da
esterilización, a través de un
acceso al resto de áreas confinadas BSL-1 y BL2 del edificio, con el reconocimiento adicional de retina que asegurará el acceso únicamente a los usuarios autorizados. Se realizará un histórico de acceso a la zona.
Este cuarto se utilizará como almacén de material para los laboratorios y dispondrá de frigoríficos
para
almacenar
requieran refrigeración. Esta zona dará acceso tanto a los laboratorios BSL-3 como al animalario ABSL-3 y se accederá mediante un sistema de tres esclusas con sistema SAS para personal. www.biotecnologiahospitalkaria.com
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productos
que
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Una vez en la zona BSL-3 en laboratorio constará de:
Sala microscopios fluorescencia y confocal: Para estudio de muestras biológicas con acceso desde la esclusa. Esta sala tendrá requerimiento
Tres laboratorios de cultivos celulares:
de oscuridad total, sistema de extracción de aire
Acceso a través del un distribuidor-esclusa
caliente, control de temperatura estricto, en torno
común. Toda la manipulación en estas salas se
a 20-22ºC, sistema de alta presión y mesas
hará en cabinas de flujo laminar tipo II y III, en
antivibratorias.
función de qué se esté manejando. Laboratorio de citometría de flujo: Este Cada uno de ellos alojará de 3 a 6 cabinas de
laboratorio estará en la zona BSL-3 porque la
flujo laminar, de 6 a 8 incubadores de cultivos
manipulación de muestras para su análisis será
celulares,
de riesgo para los usuarios debido a la dispersión
4
microscopios,
3
neveras,
4
centrífugas con tapas de seguridad en los
de aerosoles.
cestillos y otros pequeños aparatos necesarios para estas actividades.
Albergará dos equipos analizadores dos equipos separadores. Toda la manipulación de las
Habrá una ultracentrífuga, para la concentración
muestras previa al análisis se hará en cabinas de
de sobrenadantes virales que requerirá el empleo
bioseguridad tipo III. Necesitará un sistema de
de rotores en los que el material biológico estará
refrigeración y extracción de aire caliente.
confinado, puesto que su apertura y cerrado se
Deberá disponer además de un circuito cerrado
realizará exclusivamente dentro de cabinas de
de refrigeración de agua, para refrigeración de
bioseguridad tipo III.
equipos y sistema de alta presión.
En estos laboratorios el material de desecho
Sala
de
congeladores
y
criogenización:
saldrá de la cabina de bioseguridad cerrado en
Albergará 5 ultracongeladores (-80ºC) con
bolsas de autoclave o recipientes especiales para
sistema de seguridad de CO2 líquido y 3
su inactivación y eliminación y en determinados
criogenizadores de almacenaje de muestras en
casos deberá inactivarse previamente dentro de
nitrógeno
la cabina y nunca se empleará vidrio u objetos
monitorización continua, buena ventilación y un
punzantes ni existirán pipeteros fuera de las
detector-alarma de concentración de oxígeno.
cabinas.
Necesitará sistema de refrigeración y conexión
líquido.
Este
cuarto
directa con el exterior. www.biotecnologiahospitalkaria.com
55
requiere
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
Almacén material sucio: Servirá de paso intermedio de los residuos biológicos antes de ser inactivados o autoclavados. En esta sala se instalará un autoclave de doble puerta que comunicará con el distribuidor, por donde saldrá el material-residuos autoclavados.
Las puertas deben ser resistentes al fuego, homologadas con certificado de garantía. El mobiliario
debe
ser
robusto
con
espacio
suficiente entre mesas, armarios, estanterías, cabinas y otros equipos.
Todos los laboratorios de cultivo cumplirán las
a)
Electricidad:
El
desarrollo
de
la
normas establecidas en el Real Decreto 664/1997
instalación eléctrica se regirá por los criterios
de 12 de Mayo, para un laboratorio de nivel III y
indicados en los Reglamentos Oficiales. Se
Real Decreto 951/1997, de 20 de Junio y de la
dispondrá sobre bandejas y falsos techos, no
Ley 9/2003, de 25 de Abril.
deberá ser empotrada.
Deberá tener un sistema de alimentación
INSTALACIÓN
ininterrumpida con circuito independiente y cobertura para equipos informáticos, cabinas de bioseguridad, neveras, congeladores, citómetros
En las diferentes estancias de la zona BSL-3
de flujo, etc.
deberá haber suelos resistentes a ácidos, sin juntas y con aristas redondeadas, recubiertos con
Se sectorizará al máximo toda la instalación para
resinas epoxi, antideslizantes y de fácil limpieza.
evitar posibles fallos que repercutan en procesos
Falsos techos registrables de material, fácil montaje y desmontaje. Puertas de paso a laboratorio amplias y en algún caso de hojas pivotantes con zócalo de protección inferior con cierre automático que permita el enclavamiento
en marcha, de manera que en cada laboratorio y en las distintas dependencias se instalará un cuadro eléctrico independiente para no verse afectados
por
cortes
o
averías
laboratorios.
para establecer presiones diferenciales.
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56
de otros
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
La instalación eléctrica se encontrará protegida
c)
Sistemas de alarma: Al margen del
frente a riesgo de incendio y explosión.
sistema contra incendios se instalará un sistema
Luminarias fluorescentes empotrables, estancas
de presencia/ausencia de personal que permita la
y antideflagrantes.
localización del personal en todo momento y provea de sistemas de seguridad contra intrusos.
b)
Climatización: Las áreas de laboratorios
tipo
BSL-3
programación
tendrán
una
independiente
instalación del
resto
y del
edificio.
d)
Gases: Se instalarán tomas CO2 y de N2,
para regular la concentración de oxígeno en los incubadores según Normativa. En todos los locales o laboratorios donde se utilice hidrógeno,
El empleo de puertas con enclavamiento
nitrógeno, CO2, etc habrá detectores específicos
permitirá establecer presiones diferenciales en
con conexión al centro de control del centro y
las distintas zonas del laboratorio con respecto al
sirenas de alarma.
vestuario
sucio
que
deberán
funcionar
adecuadamente en todo momento.
e)
Agua, pilas y desagües: En cada uno de
los laboratorios se instalará próxima a la puerta Se acondicionarán los laboratorios con sistemas
de entrada una pila estanca con accionamiento
de calefacción, refrigeración y ventilación, para
mediante sensor automático. Se dispondrá de un
conseguir en cada una de las zonas del
sistema separado para la recogida de agua
laboratorio la temperatura y humedad necesarias
sanitaria por un lado y para la recogida de
en cada dependencia.
efluentes contaminados mediante un sistema independiente de recogida en bidones.
El aire introducido y extraído del lugar de trabajo se filtrará mediante filtros HEPA. Además se
Habrá
instalarán sistemas de renovación de aire
conducciones a las presiones requeridas, fuego y
continuo.
temperatura, así como distancia adecuada de
estanqueidad
y
resistencia
de
las
protección entre la red de agua y otras instalaciones y sectorización al máximo de toda la red.
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57
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Para ello se colocarán llaves de corte o paso en cada dependencia con red interior de agua y con
También se seguirán las directrices del REAL
llaves de corte por cada aparato. Todas las
DECRETO 664/1997, de 12 de mayo, sobre la
canalizaciones de agua fría y caliente irán
protección de los trabajadores contra los riesgos
identificadas con el color que corresponda de
relacionados con la exposición a agentes
acuerdo al código vigente.
biológicos
durante
el
trabajo. BOE
nº
124 24/05/1997 y la Orden ESS/1451/2013, de Las tuberías serán del material de diámetro
29
apropiados a cada tipo de gas y dispondrán de
disposiciones para la prevención de lesiones
colectores, válvulas antirretorno y reguladores de
causadas por instrumentos cortantes y punzantes
presión y caudal.
en el sector sanitario y hospitalario.
f) de
de
julio,
por
la
que
se
establecen
Sistemas de vacío: Se instalarán tomas vacío
en
todos
los
laboratorios
con
2. Diseño de una zona de alojamiento de
contenedores dispensables para recoger los
animales ABSL-3
líquidos aspirados e inactivarlos para su posterior desecho.
Requerimientos ABSL3 a)
Características
constructivas:
Las
divisiones de los habitáculos deberían hacerse Normativa Los materiales y equipos de origen industrial deberán cumplir las condiciones funcionales y de calidad fijadas por agencias de certificación, así como
las
correspondientes
normas
y
disposiciones vigentes relativas a fabricación y control industrial.
en la Ley 9/2003 de 25 de abril por la que se establece el régimen jurídico de la utilización liberación
Las uniones suelo-paredes y paredes-paredes deben ser cóncavas para facilitar la limpieza y las ventanas y puertas deben ser gruesas y de cierre hermético, para que mantengan la presión dentro de la sala y faciliten los ciclos de desinfección.
El diseño de esta zona BSL-3 seguirá lo expuesto
confinada,
con paneles tipo sándwich con cámara interior.
voluntaria
y
comercialización de organismos modificados genéticamente. www.biotecnologiahospitalkaria.com
El techo ha de ser modular y fácil de desmontar al retirar el sellado de estanqueidad. Los suelos han
de
ser
resistentes,
impermeables,
antideslizantes y fáciles de limpiar. Lo ideal es utilizar en su construcción resinas epoxi, que cumplen esas características. 58
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
d)
Desinfección: La desinfección de la sala
se realizará mediante equipos de desinfección por vía aérea que empleen peróxido de Iluminación: Las luminarias han de ser
hidrógeno como desinfectante de elección. Se
estancas y registrables desde la sala y deben estar
valorará la integración y puesta en marcha de un
programadas para mantener un fotoperiodo fijo
sistema centralizado de VHP para facilitar las
adaptado a la fisiología de la especie empleada y
labores
con un periodo de crepúsculo al encenderse y
instalaciones.
b)
de
desinfección
en
todas
las
apagarse la luz. Es vital la presencia de un grupo electrógeno que entre en funcionamiento si
e)
Climatización:
El
sistema
de
ocurre cualquier fallo de suministro eléctrico.
climatización es un punto vital a controlar puesto que será necesario mantener a los animales bajo
c)
Alojamiento de los animales: En cuanto
condiciones estables de temperatura, humedad y
a los animales, se mantendrán en racks
ventilación
tal y como determina el RD
ventilados o en aisladores, mantenidos a presión
53/2013. Asimismo, el buen funcionamiento del
negativa.
sistema de ventilación y extracción determinará
Para todas las manipulaciones de los animales,
que la sala se mantenga a una depresión
desde las más delicadas (como las necropsias de
adecuada para impedir que los agentes patógenos
los animales) hasta el simple cambio de jaulas,
salgan del habitáculo.
se empleará como mínimo una cabina de bioseguridad de tipo II B.
Se colocarán manómetros en la entrada de cada dependencia para comprobar que se mantiene el gradiente de presiones.
La presión será mayor en el vestuario limpio que en la esclusa de entrada, el vestuario sucio y la sala de esterilización. Asimismo, en la sala con animales se mantendrá una diferencia de presión de al menos -20 pascales con respecto a las otras zonas. Se colocará un filtro HEPA mínimo H13 a la salida del conducto de extracción.
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59
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
El aire extraído no debe recircular al interior de
h)
Validación: La instalación se validará
las salas y será totalmente enviado al exterior
con
certificado
del edificio una vez atravesado el filtro HEPA.
diferenciales, estanqueidad de filtros y pureza
ENAC
para
presiones
del aire según la norma UNE 14644, por lo que La duplicidad de los equipos de climatización y
el mantenimiento debe incluir el control de estos
extracción de aire es un punto a tener en cuenta a
parámetros anualmente.
la hora de diseñar las instalaciones, puesto que asegura el mantenimiento de las barreras de bioseguridad en caso de fallo en el sistema. REQUERIMIENTOS ESPECÍFICOS PARA f)
Equipos de protección individual: La
vestimenta
HANTAVIRUS
consistirá en monos cerrados que
puedan ser esterilizados previamente a su
Una zona de alojamiento de animales con
limpieza.
características ABSL-3 con racks ventilados en depresión para el alojamiento de los animales y
Deben
emplearse
gafas,
gorros,
calzas
y
cabinas
de
bioseguridad
tipo
II para la
respiradores sobre todo en las manipulaciones
realización de operaciones de riesgo nos permite
más delicadas y teniendo en cuenta que son
el trabajo con la mayoría de serotipos de virus
patógenos que se transmiten por vía aérea.
Hanta en especies infectadas experimentalmente y en las especies hospedadoras naturales.
g)
Mantenimiento: Para la organización
del mantenimiento del
ABSL3 es importante
No obstante, para el trabajo con estas últimas, y
disponer de técnicos in situ que puedan
dependiendo de la virulencia y mecanismos de
reconocer situaciones de alarma y actuar de
transmisión del agente en estudio, se puede
forma
el
implementar la instalación con aisladores para
mantenimiento diario de la instalación correrá a
poder llevar a cabo en ella prácticas con un nivel
cargo de personal de mantenimiento del centro
de bioseguridad
específicamente formado.
ABSL4.
inmediata
y
eficaz.
Por
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ello,
lo más cercano posible a
60
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
Los aisladores impiden cualquier contacto físico
Todo el material que salga de las salas y del
entre operario y roedor y por lo tanto la
laboratorio pasará por el autoclave o SAS. Para
transmisión
la limpieza de las jaulas tras la esterilización se
roedor-humano
se
hace
precisa de un lavajaulas al efecto, así como de
prácticamente imposible.
locales adecuados para almacenar el pienso y la cama para los animales, situado todo ello fuera de la zona de contención.
BIBLIOGRAFÍA -
Clement JP. Hantavirus. Antiviral Research, 2003; 57: 121-127.
-
Decreto 204/1994 de ordenación de la gestión de los Residuos Sanitarios.
-
Enria DAM, Levis SC. Zoonosis virales emergengentes;
las
infecciones
por
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-
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Rev. Sci. Tech. Off.int.Epiz, 2004; 213(2): 595-611.
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Hart CA, Bennett M. Hantavirus infections:
El transporte de las muestras fuera de la zona de
epidemiology and pathogenesis. Microbes
contención se realizará a través de SAS
and infection, 1999; 1: 1229-1237.
en
dobles recipientes herméticos para su posterior
-
gestión por empresas especializadas.
Ley 9/2003 25 abril por la que se establece el régimen jurídico de la utilización confinada, liberación voluntaria y comercialización de
Si las muestras se transportan a otro centro el embalaje habría de ser triple. Los cadáveres de los
animales
introducirán
RD 664/1997, de 12 de mayo, sobre la protección de los trabajadores contra los
eliminarán
riesgos relacionados con la exposición a
mediante un gestor autorizado o se autoclavarán
agentes biológicos durante el trabajo. BOE nº
antes de su eliminación.
124 24/05/1997.
herméticos
que
también
-
en
recipientes
se
organismos modificados genéticamente.
se
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61
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
-
Orden ESS/1451/2013, de 29 de julio, por la
-
Ley 10/1998 de Residuos.
que se establecen disposiciones para la
-
Ley 20/1986 Básica de residuos tóxicos y
prevención
de
lesiones
causadas
por
instrumentos cortantes y punzantes en el
peligrosos. -
sector sanitario y hospitalario. -
laborales.
UNE/EN 12128:1998. Niveles de contención
-
en laboratorios de microbiología, zonas de riesgo, instalaciones y requisitos físicos de
-
de residuos sólidos urbanos. -
ORDEN ESS/1451/2013, de 29 de julio, por
and
la que se establecen disposiciones para la
Microbiology, 2006; 8(2): 61-67.
de
lesiones
causadas
por
-
mechanisms.
Normativa
de
Trends
in
construcción
de
sector sanitario y hospitalario.
12128.NTP
Hooper JM, Kamrud KI, Elgh F, Custer D,
Residuos sanitarios. -
Hooper
JW,
Larsen
T,
Custer
372:
Tratamiento
de
NTP 468: Trabajo con animales de experimentación.
Hantavirus M segments elicits neutralizing -
NTP628.
Riesgo
biológico
en
el
transporte de muestras y materiales DM,
Schmaljohn CS. A lethal disease model for
infecciosos. -
Orden de 25 de marzo de 1998 por la que
Hantavirus pulmonary syndrome. Virology,
se adapta en función del progreso técnico
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Facilities:
-
Characteristics
laboratorios de bioseguridad UNE EN
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-
Infections:
instrumentos cortantes y punzantes en el
antibodies end protects against Seoul virus
-
Meyer BJ, Schmaljohn CS. Persistent Hantavirus
Schmaljohn CS. DNA vaccination with -
Ley 42/1975 sobre recogida y tratamiento
seguridad.
prevención
-
Ley 31/0995 de prevención de riesgos
Veterinary
Desing
and
-
Padula PJ, Edelstein A, Miguel DL,
Containment
Lopez NM, Rossi CM, Rabinovich RD.
Construction
Hantavirus
Pulmonary
Handbook. (P. Mani, & P. Langevin, Edits.)
outbreak
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Hantavirus infections and their prevention.
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in
Argentina:
Syndrome
for
molecular
person-to-person
62
BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS
-
RD 664/1997 sobre la protección de los trabajadores
-
-
contra
los
-
riesgos
Henttonen H, Plyusnin A, Vaheri A.
relacionados con la exposición a agentes
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biológicos durante el trabajo.
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Hantavirus
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infection
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edificios no residenciales. Requisitos de
Containment
prestaciones ventilación
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los
Global
Expansion Biological
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High-
Laboratories;
sistemas
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National Academy of Sciences; National
acondicionamiento
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Research Council, 2006. ISBN 0-7726-
recintos.
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5629-0.
63
MARCO NORMATIVO Y APLICABILIDAD
REAL DECRETO 1027/2007, de 20 de julio, por el que se aprueba el Reglamento de Instalaciones Térmicas en los Edificios. Este reglamento constituye el marco normativo básico en el que se regulan las exigencias de eficiencia energética y de seguridad que deben cumplir las instalaciones térmicas en los edificios para atender la demanda de bienestar e
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higiene de las personas.
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64
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
LABORATORIOS BSL3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS. CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Los
laboratorios
BSL-3
son
En este trabajo se mencionan algunasel espacios confinados para características de estas dos barreras de manejo de agentes patógenos que bio-contención. provocan enfermedades graves en humanos o animales, pero que no se propagan de un individuo a otro. La cualidad de contención se logra mediante la aplicación de
ALEJANDRO ANTONIO MIRANDA ESCAMILLA
tres niveles de barreras conocidas
Director de Operaciones de SICAPHARMA, México, especializado en proyectos de validación de sistemas de contención para la industria farmacéutica.
como
primarias,
secundarias
y
terciarias. La barrera que protege al investigador y medio ambiente interior
es
bioseguridad, sistema
el
gabinete
mientras
HVAC
es
la
que
de el
barrera
secundaria que protege al medio ambiente exterior de la dispersión de aire.
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65
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
INTRODUCCIÓN: Las enfermedades por entes biológicos tanto en humanos como en animales ha existido desde el origen del hombre, ya se mencionaba el aislamiento como una medida de contención en la antigüedad, solo basta con leer los textos bíblicos y reconocer a la lepra como una enfermedad que no solo discriminaba a quien la padecía
sino
que
era
una
forma
de
estigmatización, hoy sabemos que no requiere de aislamiento, y sigue persistiendo hasta la fecha este padecimiento.
OBJETIVOS: Describir características importantes a considerar en el diseño primarias
y selección de las barreras
gabinetes de bioseguridad (BSC) y
secundaria, sistema HVAC. HIPÓTESIS: El no considerar ciertas características de diseño en la selección de los BSC y construcción de los sistemas HVAC incrementa los riesgos de biológicos y las consecuencias a la salud pública pueden ser catastróficas.
. No
obstante
a
los
avances
médicos, clínicos y tecnológicos
MATERIAL Y MÉTODOS: Para este trabajo de investigación se realiza
aún existen agentes patógenos de
revisión bibliográfica de las principales fuentes
los cuales se sabe que son de alto
autorizadas en materia de bioseguridad, la
riesgo, para lo cual se trabaja
Organización Mundial de la Salud (OMS),
intensamente para encontrar la
Federal Drug Administration (FDA), Public Health Agency of Canada (PHAC).
cura o el tratamiento, y para ello, las muestras contaminadas deben
La búsqueda de la información se realiza por medio de internet directamente en las páginas de
ser manejadas en instalaciones
estos organizamos.
adecuadas al nivel de riesgo que representa el agente patógeno.
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66
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
RESULTADOS: El resultado de la investigación demuestra que
La misma OMS, ha mencionado que, “aun
todas las organizaciones de salud emplean como
cuando actualmente gran parte de la labor de
fuente
principal
a
la
investigación y de los recursos sanitarios van
Salud,
los
dirigidos a tratar las enfermedades más que a
gabinetes
de
prevenirlas, centrarse en los riesgos para la salud
bioseguridad se aplican bajo los mismos criterios
es la clave de la prevención, sin embargo a pesar
y los criterios de diseño y construcción de
de los esfuerzos realizados por los distintos
sistemas HVAC siguen lineamientos estándar
gobiernos en esta materia, las epidemias en
pero en los aspectos de presurización y cambios
ciertas regiones del mundo, son una constante
por hora no existen criterios de aceptación
debido a múltiples factores, entre ellos la falta de
internacionales.
higiene, agua insalubre, malos hábitos, mal
Organización estándares
de
de
información,
Mundial selección
de
la de
nutrición, entre muchos más. Cada nueva enfermedad representa altos riesgos entre la DISCUSIÓN: Cuando hablamos de BIO-SEGURIDAD o BIOCONTENCIÓN es necesario incluir un concepto
población
mundial,
y
las
enfermedades
infectocontagiosas, por su naturaleza y grado de riesgo requieren de un manejo especializado.
fundamental, y este se refiere a “RIESGO”, el cual la OMS define como, “La probabilidad de un resultado sanitario adverso, o un factor que
El
manejo
especializado
de
muestras biológicas provenientes
aumenta esa probabilidad”. (1) de personas o animales infectados implica
considerar
precautorias de
aislamiento que
eviten su propagación.
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medidas
67
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Estas precauciones de aislamiento deben ser acordes al riesgo que implica el agente infeccioso,
de
tal
forma
que
todos
los
laboratorios de investigación, diagnóstico y de atención de salud (de salud pública, clínicos o de hospital) deben estar diseñados para cumplir, como mínimo, los requisitos del nivel de
Cuadro 1. Clasificación de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo
bioseguridad 2. Dado que ningún laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras que recibe, el personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo más altos de lo previsto. (2) En este escenario toman relevancia los conceptos de contención, aislamiento, bio riesgo, y con ellos la importancia del diseño, construcción, operación y mantenimiento de los laboratorios de bio seguridad (BSL) que garanticen el grado de
Grupo de riesgo 1 (Riesgo individual y poblacional escaso o nulo) Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales. Grupo de riesgo 2 (Riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo) Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede provocar una infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de propagación es limitado.
contención requerido. En este trabajo se describen los conceptos de contención (aislamiento) que como mínimo deben considerarse en dichos laboratorios.
Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo) Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.
El principal objetivo de los laboratorios BSL-3, es proporcionar un espacio contenido para el manejo de agentes exóticos o nativos y que pueden causar serios daños potenciales o letales como resultado de la exposición a estos agentes, sin embargo, el laboratorio por sí solo
Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado) Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces. (2)
no
garantiza el control del riesgo; es indispensable que se consideren los siguientes elementos:
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68
LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
1. Las barreras primarias incluyen entre otros: a. La indumentaria b. El uso de gabinetes de bioseguridad c. Envases primarios de las muestras Estas barreras son las de mayor criticidad para protección del personal. 2. Las barreras secundarias: a. Diseño arquitectónico b. Sistema HVAC c. Sistemas de tratamiento de
Entre los elementos a considerar en el diseño del BSL-3 BS está el sistema de aire HVAC y el uso de gabinetes de bioseguridad (BSC) clase II o III, que deben trabajar de
forma
sincronizada,
garantizado protección al personal y al medio ambiente.
efluentes d. Equipamiento para esterilización de muestras y materiales en BARRERAS PRIMARIAS
contacto con el agente infeccioso e. Sistemas de duchas para el personal Estas barreras son las que protegerán el
BARRERAS SECUNDARIAS
BARRERAS TERCIARIAS
BIO BIOCONTENCIÓN
medio ambiente del agente patógeno. 3. Las barreras terciarias: a. Accesos controlados b. Flujos definidos que no permitan el ingreso o salida de personal y muestras sin control.
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69
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Los BSC están diseñados para proporcionar protección al personal, al medio ambiente del laboratorio (4) y fuera de este, la muestra que se maneja, la atmósfera del laboratorio y los materiales de trabajo de la exposición a las salpicaduras y los aerosoles infecciosos que pueden generarse al manipular material que contiene agentes infecciosos, como cultivos primarios, soluciones madre y muestras de diagnóstico. (Los aerosoles se producen en cualquier actividad que transmita energía a un material líquido o semilíquido, por ejemplo, al agitarlo, verterlo a otro recipiente, removerlo o verterlo sobre una superficie o sobre otro líquido). (3) La selección correcta del tipo de gabinete es fundamental para garantizar que será una barrera primaria. En el cuadro 2 se puede apreciar los criterios mínimos a considerar al momento de seleccionar el CSB (2). Por otra parte, el diseño y la construcción de la instalación contribuyen a la protección de los trabajadores de laboratorio, proporcionando una barrera para proteger a las personas fuera del laboratorio, y proteger a las personas o animales en la comunidad de agentes infecciosos que pueden
ser
liberados
accidentalmente
laboratorio. (3)
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70
del
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
La selección de las barreras secundarias depende del riesgo de transmisión de agentes específicos, por ello, cuando el riesgo de infección por la exposición a un aerosol infeccioso está presente,
La selección adecuada debe considerar la
es necesario que los niveles de contención
resistencia
primaria y múltiples barreras secundarias se
presiones positivas o negativas provocadas por el
establezcan e implementen para evitar que los
aire suministrado/extraído en cada cuarto.
agentes infecciosos se escape y difundan al medio ambiente.
física para
poder soportar las
Los valores de presión diferencial son el resultado del aire suministrado, del aire extraído
Estas características de diseño incluyen sistemas
y de las fugas identificadas y de las no
de ventilación especializados para garantizar el
identificadas.
flujo
de
aire
direccional,
las
presiones
diferenciales y cambios de aire por hora; sistemas
de
tratamiento
de
aire
para
descontaminar o eliminar los agentes del aire de escape (exhaust) de los sistemas HVAC; zonas de acceso controlado; esclusas (airlock) en las
En los BSL-3, el aire se debe desplazar desde las áreas adyacentes hacia el área de máxima contención el uso de los sistemas HVAC, a continuación
se
destacan
algunos
los
requisitos y recomendaciones para la instalación de estos sistemas.
entradas de laboratorio o edificios. Una de las principales característica de diseño del laboratorio es que debe ser hermético, para lo cual, los materiales de construcción deben ser seleccionados para garantizar este aspecto. Es un requisito crítico el tipo y características de los materiales de construcción, así como los métodos de construcción para las paredes, pisos, techos exteriores, plafones interiores, juntas para muros-muros; muros-plafones; muros-pisos; y en todos aquellos accesorios que se instalan en paredes, plafones y que pueden provocar fugas desde el laboratorio. www.biotecnologiahospitalkaria.com
de
71
LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
A continuación se destacan algunos de los requisitos y recomendaciones para la instalación talación de sistemas de climatización: El aire debe ser extraído de las zonas de alta contención para evitar la reintroducción en el laboratorio, de acuerdo con las normas aplicables, tales como ANSI / ASHRAE 62.1.
El cien por ciento de aire exterior (es decir, desde el ambiente exterior) debe ser suministrado en zonas de alta contención para evitar la recirculación de aire dentro de la zona de contención. ANSI / ASHRAE 62.1 proporciona más orientación sobre la ventilación ilación de la calidad del aire interior aceptable.
Deben existir controles en el sitio para prevenir y / o notificar de fallas de presurización del laboratorio por fallas de los ventiladores. El uso de humidificadores auxiliares localizados puede ser considerado para dar cabida a la humedad adicional que puede ser requerida equerida para el personal y el bienestar animal.
Dispositivos diseñados para proporcionar fuga controlada en la zona de contención deben ser diseñados para asegurar que el flujo de aire se mantiene y garantiza la protección contracorriente. Servicios de soporte mecánico para sistemas HVAC deben estar situados lo más cerca posible de la barrera de contención. Los filtros HEPA deben estar situados lo más cerca posible de la barrera de contención para reducir la longitud de la red de ductos que puedan estar contaminados. Las válvulas se deben instalar para aislar secciones de la red de conductos. Ref. (4) Canadian Biosafety Standards and Guidelines (CBSG) First Edition
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72
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Mantener el balanceo correcto a lo largo de la cascada de presiones puede resultar complejo, no olvidemos que en todo momento que debe
mantenerse
la
bio-contención,
por
lo
que
es
altamente
recomendable para garantizar dicha cascada, controlar el volumen de aire de inyección y extracción y no exclusivamente realizar el ajuste observando la presión diferencial.
El instituto ANSI y la asociación AIHA respaldan el uso de controles en el volumen de aire y no en la presión diferencial como único factor de ajuste. (6) No existen especificaciones de valores de presión diferencial para los BSL-3 pero se recomienda al menos 0.05”WC (12.45Pa). Po lo anterior, la exactitud y estabilidad del dispositivo del control de flujo de aire juega un papel crítico en el mantenimiento de la presurización para la contención y la ventilación.
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73
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Adicionalmente a la presurización, es necesario mantener tazas de ventilación conocidas como cambios por hora, sin embargo al igual que la presurización, no existen especificaciones, pero se recomienda un mínimo de seis cambios por hora (6CPH), aunque la práctica común es de 10-12 CPH para BSL-3.
La Organización Mundial de la Salud ha establecido el siguiente cuadro que resume los requisitos por nivel de bioseguridad (2)
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74
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
CONCLUSIONES La bioseguridad es una materia que involucra a los
países,
(gobierno/población)
y
a
las
instituciones de salud e investigación, es en éstas
BIBLIOGRAFÍA:
últimas y sus funcionarios que depende el
1.- Informe sobre la salud en el mundo 2002,
diseño, construcción y operación.
Organización Mundial de la Salud; 2002. OMS, documento WHO/FCH/CAH/01.20 (revisado). 2.- Manual de bioseguridad en el laboratorio. –
El éxito o fracaso de un BSL-3 se
3a ed. Organización Mundial de la Salud. 2005 3.- Appendix A – Primary Containment for
encuentra
en
sus
barreras
de
Biohazards: Selection, Installation and Use of
contención, siendo el aire uno de
Biological
los
Microbiological and Biomedical Laboratories
más
críticos
ya
que
a
diferencia de otros efluentes, el
Safety
Cabinets;
Biosafety
in
5th Edition; HHS Publication No. (CDC) 211112, Revised December 2009
aire
no
se
puede
observar
4.- Canadian Biosafety Standards and Guidelines
haciéndolo un factor crítico en la
(CBSG) First Edition, Publication Number:
biocontención.
130037 5.- BSL-3 Laboratory Design Resource, Phoenix controls, 2011 6.- American National Standar for Laboratory
La adecuada selección de los gabinetes por tipo de agente patógeno y el diseño de los sistemas
Ventilation (ANSI/AIHA Z9.5- 2003) section 5.1.1 pp 27-28
HVAC, permitirán una correcta contención. A nivel internacional existe homogeneidad en los criterios para los BSL-3.
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75
LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
PROCEDIMIENTO DE USO U Y
MANTENIMIENTO
DE
QUÉ ES UN LABORATORIO BL-3? BL
EQUIPOS DE BARRERA DE BIOCONTENCIÓN
EN UN
LABORATORIO BL3 JOSE EDUARDO BERMUDEZ RUIZ, Ingeniero técnico.
Son laboratorios en los que se trabaja con agentes biológicos del grupo de riesgo igual o inferior al nivel de contención de dicho laboratorio, en este caso, se trabajarán con agentes biológicos del grupo de riesgo 3 o
MIGUEL ÁNGEL MOCHALES LARA, Ingeniero técnico.
inferior. El personal debe contar con adiestramiento específico para el manejo de agentes de alto riesgo clasificados en el grupo de riesgo 3.
INSTALACIONES HERNANDEZ, S.L.
En el laboratorio se realiza trabajo con agentes que
pueden
causar
un
daño
serio
y
potencialmente mortal como resultado de la inhalación o exposición a los mismos. El laboratorio cuenta con un diseño y características especiales tendientes a proteger al operador y al ambiente. Todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de protección siguiendo protocolos rigurosos. igurosos. Los laboratorios se mantienen con una presión de aire negativa, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente.
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76
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
TABLA GRUPOS DE RIESGO DE LOS AGENTES BIOLÓGICOS (REAL DECRETO 664/1997, de 12 de mayo) AGENTES BIOLÓGICO DEL GRUPO DE RIESGO
RIESGO INFECCIOSO
1
Poco probable que cause enfermedad Pueden causar una enfermedad y constituir un peligro para los trabajadores Puede provocar una enfermedad grave y constituir un serio peligro para los trabajadores Provocan una enfermedad grave y constituyen un serio peligro para los trabajadores
2
3
4
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RIESGO DE PROPAGACIÓN A LA COLECTIVIDAD No
PROFILAXIS O TRATAMIENTO EFICAZ
Poco Probable
Posible generalmente
Probable
Posible generalmente
Elevado
No conocido en la actualidad
Innecesario
77
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
¿QUÉ ES EL ESPACIO BIOCONTENIDO? Barreras primarias o bioseguridad. Es el conjunto de obra civil que envuelve
a
laboratorios,
salas
comunes, pasillos y otros espacios
Las barreras primarias son barreras físicas o equipos
de
protección
personal
entre
el
trabajador del laboratorio y el patógeno, como y elementos técnicos de barrera
por ejemplo:
como líneas de fluidos, conductos, Procedimientos válvulas dumper, Airlocks, SAS, autoclaves, etc., estén estos o no rodeados
o
sectorizados
por
paramentos interiores.
de
trabajo
(buenas
prácticas) Equipos de Protección Personal; cabinas de bioseguridad
guantes,
máscaras
o
aparatos respiratorios especiales, etc. Equipos de trabajo Vigilancia de la salud Limpieza y desinfección
En definitiva, cualquier paramento interior no
Envases primarios de contención.
constituye la zona biocontenida, sino el conjunto físico de la instalación.
El personal de este tipo de laboratorios usa estos tipos de equipos de seguridad para protegerse
BARRERAS DE CONTENCIÓN.
directamente al trabajar con organismos.
Cada nivel de bioseguridad tiene barreras establecidas para ofrecer protección contra los microorganismos.
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78
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Barreras secundarias o biocontención.
Las barreras secundarias son aspectos estructurales del laboratorio que hacen que el ambiente de trabajo sea más seguro frente al riesgo de infección. Estas incluyen lavamanos, áreas de contención especiales para trabajar directamente con los organismos, y patrones especiales de ventilación diseñados para prevenir la contaminación de otras salas y otros trabajadores en el edificio. Es decir, barreras entre el agente biológico y el medioambiente. Aquí se incluyen: Filtros HEPA. Duchas de descontaminación. Tratamiento de efluentes (Biowaste). Autoclaves Airlock - SAS (Security Airlock System)
ZONA A CONVENCIONAL
ZONA B CONTENCIÓN BIOLÓGICA
Figura 1
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79
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
A efectos prácticos cada local de
Barreras terciarias o bioprotección.
la Estas barreras son las propias organizativas del laboratorio, y en ellas se incluyen:
zona
NCB-3
dispone
de,
al
menos, una pareja de filtros H14; uno a la entrada de aire y otro a la
Cerraduras de puertas con llave magnética
salida.
Cámara de vigilancia Autorización previa (Acreditación) Cada unidad de filtrado está formada por el filtro
Cuarentenas. Flujos
de
movimientos
interiores
y
exteriores.
H14 propiamente dicho y un cajón difusor que aloja el filtro en su interior. A unos de los lados de este cajón se emboca el conducto de entrada o
FILTROS HEPA.
salida de aire a/ desde la unidad climatizadora. En el otro lado, situado directamente en la sala
Descripción.
dispone de un difusor para insuflar el aire. El
Los locales de los laboratorios con nivel de
cajón está construido de forma tal que impide el
contención tipo NCB-3 precisan altas tasas de
paso de aire por el exterior del filtro, lo que
aporte de aire de ventilación, debidamente
deberá ser testado (test de integridad) cada vez
tratado y climatizado a fin de mantener las
que se haga un cambio de filtro.
condiciones de confort adecuadas en los mismos y, sobre todo, asegurar las diferencias de presión necesarias respecto a los espacios externos a la zona de biocontención.
Cada local del espacio biocontenido ha de disponer de un juego de compuertas que permita aislarlo del resto del sistema de ventilación/ presurización, a fin de poder realizar operaciones
Los filtros HEPA H14 son los encargados finales
de descontaminación, limpieza y cambio de
de que todo ese enorme volumen de aire, no
filtros sin alterar el funcionamiento del resto del
arrastre contaminantes hacia el interior del
laboratorio.
espacio biocontenido, ni, sobre todo, deje escapar ningún organismo patógeno de él.
Para alargar la vida de los filtros de entrada, la unidad climatizadora debe disponer de una serie de filtros previos en grado creciente de nivel de filtración.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Mantenimiento. Periodicidad. Cada fabricante suministra unas curvas de caudal/ pérdida de carga del filtro que fabrica, que servirán para determinar cuándo hay que realizar la sustitución de éste, al superar la pérdida de carga un valor determinado. Para medir este parámetro la instalación ha de disponer de tomas de presión antes y después de cada filtro. Procedimiento. El mantenimiento del filtro consiste básicamente en la sustitución del mismo por uno nuevo y el procedimiento vendrá determinado por la posibilidad de descontaminar el filtro antes de su retirada o no. CASO 1. Si las tomas de descontaminación de la sala se sitúan entre el filtro y la compuerta de aislamiento con los conductos, cada vez que se haga un ciclo de descontaminación, el filtro queda asimismo descontaminado y se puede retirar por el local al que presta servicio, sacándolo del espacio biocontenido por autoclave.
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CASO 2. Si las tomas de descontaminación están situadas directamente en la sala, sólo una de las caras del filtro queda descontaminada. Esto ocurre también cuando los cajones de los filtros están situados fuera de la sala. Para cambiarlo es preciso emplear unas bolsas estancas termosellables diseñadas al efecto. Para ello se coloca una primera bolsa acoplada al cajón y a través de ella se extrae y se deposita el filtro en la bolsa que se sella y se corta quedando una parte cerrada con el filtro dentro y otra cerrada en un extremo y el otro acoplado al cajón. Sobre ésta se aplica otra bolsa con el nuevo filtro dentro. Se extrae el resto de bolsa antiguo, manipulando a través de la bolsa nueva y se deposita el nuevo filtro en el cajón.
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DUCHAS DE DESCONTAMINACIÓN. Funcionamiento. El acceso a la zona de contención biológica en un laboratorio tipo BL-3 se realiza a través de dos puertas enclavadas con ducha. En la mayoría de los casos la entrada no se realiza por la ducha, pero en algunos caso como el del ejemplo sí. Al tratarse de un laboratorio de contención biológica, las presiones conforme se entra en el recinto van más presión a menos, pues todo el recinto de biocontención se encuentra en depresión.
ENTRADA PERSONAL TÉCNICO
DUCHA
VESTUARIO FEMENINO ZONA SUCIA
DUCHA
VESTUARIO FEMENINO ZONA LIMPIA
VESTIBULO BL-3
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Entrada. 1. NOTIFICAR LA INTENCIÓN DE ACCEDER AL BL-3. 2. RECOGER LA VESTIMENTA DE TRABAJO •
Mono buzo protección biológica ( Tyvek)
•
Mascarilla protección respiratorio (P2)
•
Par de calcetines
•
Juego de ropa interior desechable
•
Toalla
3. ACCEDER AL VESTUARIO (ZONA LIMPIA) •
El acceso será facilitado por el Personal Técnico
4. DESPRENDERSE DE ROPA Y RESTO DE ACCESORIOS No esta permitido introducir al BL-3: •
Pendientes, cadenas, relojes, pirsin
•
Lentillas
•
Compresas
•
Cualquier otro tipo de material no descontaminable
5. COLOCARSE LA ROPA DE TRABAJO Y EQUIPOS DE PROTECCIÓN Se seguirá el siguiente orden: •
Ropa interior
•
Calcetines
•
Mono buzo
•
Mascarilla protección respiratoria
•
Guantes de protección (nitrilo)
•
Patucos desechables
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
6. SOLICITAR AUTORIZACIÓN DE ACCESO
A
ACCESO NO PERMITIDO
B
PULSAR
ACCESO PERMITIDO
7. ACCEDER AL VESTURARIO ZONA SUCIA •
Abrir puerta A
•
Cerrar puerta A
•
Esperar a oír enclavamiento puerta A y desenclavamiento puerta B
•
Abrir puerta B
•
Cerrar puerta B
8. COLOCAR UN SEGUNDO PAR DE GUANTES 9. COLOCAR ZUECOS •
Retirar patucos
•
Colocarse los zuecos
•
Volver a colocar los patucos sobre los zuecos
10. ACCEDER AL VESTIBULO ZONA BL-3
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Salida. 1. ACCEDER AL VESTÍBULO PREVIO •
Nos desprendemos de los patucos y del primer par de guantes
•
Descontaminamos, en su caso, las gafas correctoras (CR-36 y aclarado posterior)
2. ACCEDER AL VESTUARIO ZONA SUCIA Nos retiramos la ropa y equipos de protección en este orden: •
Zuecos
•
Mono buzo
•
Ropa interior y calcetines
•
Guantes
•
Mascarilla
3. SOLICITAR AUTORIZACIÓN DE SALIDA 4.
ACCESO NO PERMITIDO
PULSAR
ACCESO PERMITIDO
5. ACCEDER A LA DUCHA •
Abrir puerta B
•
Cerrar puerta B
•
Proceder al duchado (150 segundos / 180 segundos)
6. ACCEDER AL VESTUARIO ZONA LIMPIA •
Una vez cortada la salida de agua, la puerta A se desenclavara
7. SALIDA DEL BL-3
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Mantenimiento. El mantenimiento de la ducha de descontaminación básicamente consiste en: •
Verificación semanal del enclavamiento de puertas y seguridades.
•
Limpieza diaria de vestuarios y recinto de ducha.
TRATAMIENTO DE EFLUENTES (BIOWASTE). Descripción. El equipo de barrera destinado al tratamiento de los efluentes líquidos por choque
térmico
(BIOWASTE),
está
formado
básicamente
por
dos
depósitos: un acumulador donde se almacenan con la seguridad adecuada los líquidos hasta alcanzar el volumen adecuado y un digestor donde se realiza la esterilización propiamente dicha. Precisa para su funcionamiento de suministro de vapor, agua, aire comprimido y alimentación eléctrica.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Los componentes principales del biowaste son:
4 5 7
3
2 1
1. Depósito recolector de líquidos por gravedad. 2. Bomba de trasiego de líquido del recolector al depósito acumulador, accionada por nivel de llenado del recolector. 3. Depósito acumulador dotado de controles de nivel, temperatura y seguridad. 4. Digestor dotado de controles de nivel, temperatura y seguridad. 5. Bomba de recirculación del digestor. 6. Intercambiador de enfriamiento. 7. Cuadro eléctrico de mando y control.
El vapor interviene en el proceso como agente de calentamiento suministrando calor limpio al contenido del digestor, mediante la energía de cambio de estado de vapor a líquido para calentar el contenido hasta la fase de esterilización. El biowaste puede disponer de generador de vapor integrado o no. Si el generador de vapor va integrado, precisará que el agua de suministro tenga la calidad adecuada para no dejar incrustaciones tanto en el generador como en los circuitos, para lo que ha de tratarse mediante un sistema de ósmosis inversa o algún otro sistema de desmineralización.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Los aparatos con toma de vapor externa sólo
Al inicio del programa lo único que se hace es
emplean el agua para el proceso de enfriamiento,
recoger el agua de las zonas de trabajo hasta
para lo que se emplea un intercambiador de
alcanzar un volumen suficiente para realizar un
placas,
agua
proceso de esterilización en el digestor. Los
descalcificada. Únicamente interviene en un
efluentes llegan por gravedad al depósito
intercambio térmico sin cambio de estado.
recolector, de donde son elevados al acumulador
El aire comprimido se usa para el accionamiento
hasta que en éste se alcanza el volumen
de automatismos neumáticos del equipo y para
necesario y pasan al digestor para hacer un ciclo
presurizar los depósitos, a fin de asegurar la
de esterilización mientras en los otros depósitos
evacuación de agua del digestor, una vez
se siguen recogiendo efluentes.
procesada. El aire se debe suministrar seco,
El ciclo de tratamiento normalmente esteriliza
filtrado y exento de aceite.
los efluentes recogidos, los recipientes a presión
por
lo
que
será
suficiente
y los circuitos utilizados en el tratamiento. Uso. El funcionamiento del biowaste se totalmente
El autómata que controla el funcionamiento del
automática mediante un programa
biowaste dispone habitualmente de un menú de
informático
el
histórico de ciclos y/o un registrador, donde
conjunto
queda reflejada información sobre las fechas y
sin
horas de los ciclos realizados, el número de
controla
de
forma que
comportamiento
del
acumulador-digestor,
rige
intervención directa de operador.
ciclos de cada tipo realizados, etc. Dependiendo del volumen de residuos generados en el laboratorio
se
deberá
información
diaria
o
comprobar
esta
semanalmente,
para
asegurarse de la ausencia de errores o alarmas.
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Mantenimiento. Las Cualquier anomalía en el funcionamiento de un componente del sistema de tratamiento, incide con
más
o
menos
importancia,
en
el
funcionamiento y resultado final de los procesos que puede efectuar dicho equipo.
acciones
básicas
de
mantenimiento
preventivo han de asegurar que: Las condiciones de suministro de fluidos (vapor,
agua,
aire
comprimido,
electricidad) sean las adecuadas. Se estén siguiendo las instrucciones de
Los sistemas de tratamiento están dotados de
operación indicadas por el fabricante
componentes
para el uso correcto del sistema de
fundamentales
para
su
funcionamiento, con una vida limitada en algunos casos y prácticamente ilimitada en otros. El mantenimiento preventivo ha de permitir la sustitución de las piezas perecederas antes de que
pueda
afectar
negativamente
en
el
tratamiento. Los equipos están instalados de acuerdo a normativas vigentes. Se ajustan correctamente los instrumentos de medida y control. Las acciones periódicas de mantenimiento que
funcionamiento del sistema de tratamiento.
han de ser planificadas en el sistema de Permite además conservar el equipo en buenas
seguimiento del equipo son:
condiciones de trabajo y detectar el desgaste prematuro de otras piezas. Debe ser realizado sólo por personal formado. El técnico de mantenimiento debe tener en cuenta que al
Operaciones diarias. Estas operaciones diarias pueden ser efectuadas por el propio mantenedor/ operador del equipo:
inspeccionar el equipo y encontrar algún
Comprobar, si el aparato dispone de
componente defectuosos o deteriorado, éste debe
registrador gráfico, que dispone de
reemplazarse,
suficiente papel y el trazo escrito en el
asegurándose
que
funciona adecuadamente.
el
nuevo
mismo es bueno. Si el sistema dispone de generador de vapor, realizar la purga del mismo.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Operaciones semanales.
Estas
operaciones
Comprobación
semanales
pueden
ser
del
indicador
de
temperaturas y contrastar su valor con
efectuadas por el propio mantenedor/ operador
un termómetro patrón o con los valores
del equipo:
indicados por el registrador gráfico.
Limpieza de filtro de entrada de residuos al Comprobación del indicador de presión y
acumulador. superficies
contrastar su valor con un manómetro
externas mediante paño humedecido
patrón o con los valores indicados por
con detergentes no ácidos.
el registrador gráfico.
Limpieza
general
de
las
Comprobación Operaciones trimestrales. Estas
operaciones
trimestrales
del
valor
de
los
manómetros de acumulador, digestor y deben
ser
recámara digestor con el manómetro
realizadas por SAT:
patrón.
Comprobación de las condiciones de suministro de fluidos al sistema de Operaciones anuales.
tratamiento. Limpieza de los filtros de alimentación y
por SAT:
evacuación de aire. Limpieza del filtro de entrada de agua.
Limpieza de asiento, obturador y calibrado de las válvulas de seguridad de la cuba
Operaciones semestrales. Estas
operaciones
semestrales
Estas operaciones anuales deben ser realizadas
deben
ser
realizadas por SAT:
del digestor, recámara del digestor y acumulador. Limpieza de asiento y obturador de las
Limpieza de purgadores termostáticos. Comprobación del reglaje y valor de tarado de los presostatos de control de suministro de fluidos y de la recámara del digestor.
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válvulas de retención de: rotura de vacío del digestor, entrada de aire del acumulador, acumulador,
entrada rotura
acumulador.
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de
vapor
al
vacio
del
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Revisión de asiento de las válvulas neumáticas siguientes: entrada vapor
Operaciones decenales.
acumulador, entrada vapor recámara
Inspección y prueba periódica con OCA de los
digestor,
recipientes a presión.
purga
purga
recámara
digestor,
continua
digestor,
llenado
digestor, salida de agua recámara
AUTOCLAVE.
digestor, entrada de agua recámara digestor,
vaciado cámara digestor,
circuito
limpieza
despresurización contrapresión
digestor,
digestor,
aire
digestor,
contrapresión
recámara
aire digestor,
entrada de aire acumulador, entrada de agua biocontaminada al acumulador, escape
continuo
acumulador,
despresurización acumulador, entrada agua
fría
al
intercambiador
de
refrigeración. Revisión bomba recirculación de agua. Revisión bomba llenado acumulador. Revisión y limpieza de incrustaciones calcáreas de tuberías. Cambio de filtros estériles.
Funcionamiento. La
esterilización
por
autoclave
usa
una
combinación de altas temperaturas y vapor presurizado para descontaminar los elementos colocados en la cámara de esterilización. Para elementos sólidos y materiales porosos, como ropa, residuos orgánicos, etc., se crea vacío en la cámara antes de la adición de vapor caliente. Esto
asegura
que
el
vapor
penetre
completamente en el material. El objetivo de la esterilización es matar todos los patógenos que puedan estar presentes en el material y/o residuos, lo cual nos garantiza el paso de material de la zona B a la zona A (ver figura 1) con total seguridad. Fases de esterilización.
Verificar funcionamiento de ciclos de trabajo. Verificar estado del intercambiador de enfriamiento. Verificar sensores de nivel de: acumulador, digestor y depósito recolector.
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Aire a las juntas. Durante esta primera etapa se sellan las puertas mediante aire a las juntas. Una vez las juntas están contra las puertas, se pasa a la siguiente fase.
92
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Prevacío dinámico.
Calentamiento.
Se realiza vacío en la cámara hasta alcanzar la
Mantiene abierta la válvula de entrada de vapor a
presión de vacío determinada por el operario.
la cámara.
Una vez alcanzado este vacío se mantiene la
Se controla la apertura de la válvula de vapor a
válvula de vacío abierta y la bomba en
cámara correspondiente dependiendo de la
funcionamiento y a su vez la válvula de vapor
temperatura seleccionada y de la presión teórica
cámara
respecto a los valores reales de temperatura y
modulando
entre
0
y
un
30%
dependiendo de la presión de cámara, durante el tiempo seleccionado en la receta.
presión. La presión teórica se calcula a partir de la
Esta fase es ideal para hacer vacío a reactores y
temperatura seleccionada, mediante la tabla de
sistemas filtrantes.
vapor de agua, en la que para cada temperatura le
Pulsos de vacío.
corresponde una presión.
Se entiende por pulsos en vacío el hecho de
Cuando la cámara alcanza la temperatura
hacer vacío dentro de la cámara hasta una
seleccionada empieza la esterilización.
presión seleccionada, seguido de la entrada de vapor hasta la presión seleccionada como presión máxima. Estos pulsos se repetirán tantas veces como se haya configurado en la receta.
Esterilización. Durante la esterilización la válvula de entrada de vapor a cámara sigue regulando su apertura a partir de los mismos parámetros, con el fin de
Tiene por objeto la eliminación rápida del aire y
mantener la presión y la temperatura lo más
el precalentamiento del material a esterilizar.
estable posible.
Pulsos en presión.
La fase finaliza cuando la temperatura de control
Se entiende por pulsos en presión el hecho de
ha estado por encima de la temperatura
inyectar presión a la cámara de la autoclave hasta
seleccionada el tiempo seleccionado y el Fo
una presión seleccionada, seguido de una
acumulado es igual o mayor al Fo seleccionado.
descompresión hasta la presión seleccionada. Estos pulsos se repetirán tantas veces como se haya seleccionado en la receta. Esta fase es ideal para cargas porosas.
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El valor de Fo en la esterilización nos indica que según la temperatura de control y el tiempo de esterilización transcurrido, tiene el mismo efecto esterilizante que Fo minutos a 121 °C.
93
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Secado.
Enfriamiento.
Primero se descomprime la cámara hasta la
Para enfriar la carga, se presuriza y mantiene la
presión atmosférica más 10 kPa., en el caso de
cámara por encima de la presión para la
haber esterilizado por encima de este valor. En
esterilización, a la vez que se van eliminando
ese momento, abre la válvula de vacío cámara,
condensados.
en
el
momento
que
alcanza
la
presión
seleccionada, sin dejar de hacer vacío, inicia el
Al alcanzar la temperatura de control 100 °C, se
tiempo de secado en vacío.
deja de presurizar la cámara y con la bomba funcionando y la válvula de purga abierta, se
Cuando finaliza el tiempo en vacío incrementa el
consigue alcanzar la presión atmosférica más 10
número de pulsos y deja de hacer vacío e
kPa. lentamente. Una vez alcanzada esta presión
introduce aire estéril en la cámara hasta el valor
se introduce aire estéril en la cámara para
seleccionado de presión, en este momento
mantener presión
comienza a contar el tiempo en presión
haciendo purga con la bomba. Esta fase finaliza
manteniendo, con aire estéril, esa presión.
cuando la temperatura seleccionada es alcanzada.
Durante toda la fase de secado, la recámara se
Fin de ciclo.
mantiene llena de vapor a la presión de trabajo
Una vez finalizadas todas las fases se pasa a Fin
para facilitar el calentamiento y el secado del
de ciclo, momento en el cual la autoclave se
producto del interior de la cámara.
ajusta hasta presión atmosférica para poder abrir
La fase finaliza después del tiempo de vacío y
las puertas. Una vez se mantenga durante 30
haber
segundos seguidos a presión atmosférica el ciclo
realizado
el
número
seleccionados.
de
pulsos
atmosférica
acabará y dará permiso a la puerta que corresponda.
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y se sigue
94
LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Marketing online Mantenimiento. El objetivo de un plan de mantenimiento es mostrar una guía de actuaciones para los elementos de la instalación que requieran un mantenimiento.
El
éxito
de
un
plan
de
mantenimiento depende básicamente de lo exhaustivo de la información y su correcto análisis, por lo que el plan de mantenimiento debe
convertirse
en
un
documento
modificable en función de sus necesidades y de la experiencia. El plan de mantenimiento está basado en una serie de acciones y controles ntroles que según el caso deben
ser
desde
diarias
a
anuales.
Biotecnología Hospitalaria
vivo
Entendemos tendemos la elaboración del plan de marketing online para nuestros clientes como un proceso colaborativo.
La
información del mantenimiento debe ser anotada exhaustivamente ya que ésta puede ser de gran utilidad en otras operaciones de mantenimiento.
Somos muy conscientes de la importancia que tiene el marketing online en las empresas y trabajamos con el máximo rigor e ilusión. Tenemos una amplia base de datos muy dirigida al sector salud y biotecnológico.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Autoclave. Período S S
Operación Comprobar y limpiar la superficie de la cámara con una solución de jabón y un paño. Limpiar las superficies interiores de las puertas con una solución de jabón y un paño.
S
Limpieza de los paneles de control, pantalla, registrador e impresora.
D
Verificar el funcionamiento y papel de impresora y registrador.
6M
Inspección del aislamiento de la cámara.
D
Lubricar juntas en su alojamiento con spray de silicona.
6M
Verificar el funcionamiento de las válvulas de seguridad
5A
Sustitución o retimbrado de las válvulas de seguridad (Ver normativas de industria locales)
S
Extraer las juntas de su alojamiento y limpiarlas con una solución de jabón y un trapo limpio. Lubricarlas con spray de silicona.
2A S
Sustitución de la junta de la cámara Limpiar la célula fotoeléctrica y el reflector.
M
Comprobar que no haya fugas en los cilindros de las puertas: el movimiento debería ser continuo durante todo su recorrido.
M
Comprobar que los cilindros de bloqueo funcionen correctamente
M
Limpiar las guías de las puertas. Prueba hidrostática de la cámara y Recamara y retimbrado (Ver normativas de industria locales)
5A
Tuberías. Período
Operación
M
Inspección de fugas de las tuberías principales.
6M
Desmontar y limpiar los purgadores.
A
Verificar el estado y sujeción de tubos, reapretar si procede
A
Comprobar el estado de aislamiento térmico.
M
Reapretar Triclanes, y sustituir juntas si procede.
6M 3A
Verificar las tuberías auxiliares de control Sustitución de todas las juntas Triclamp
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Válvulas. Período M 6M
Operación Inspección de las válvulas de seguridad. Accionar las válvulas manuales.
2A
Inspeccionar y limpiar las válvulas manuales. Sustituir en caso necesario.
A
Desmontar y limpiar las válvulas de aguja.
2A
Desmontar y limpiar las válvulas neumáticas, sustituir juntas de cierre si es necesario.
A
Comprobar el funcionamiento y cierre de las válvulas neumáticas
6M
Comprobar el funcionamiento de las electroválvulas.
Filtros. Período
Operación
D
Desmontar y limpiar los filtros coladores
6M
Desmontar y limpiar los filtros coladores
M
Limpiar el filtro de rompe vacío
M
Limpiar filtro o sustituir si fuese necesario
Bombas. Período
Operación
M
Comprobar la ausencia de fugas en la bomba de vacío
M
Comprobar al entrada de aire a bomba
M
Comprobar la temperatura de salida de la bomba.
6M
Limpieza del sistema de refrigeración del motor y comprobar el calendario de engrases aconsejado por el fabricante de la bomba.
Sistema neumático. Período 6M M
Operación Comprobar la ausencia de fugas en todas las válvulas neumáticas. Comprobar la ausencia de fugas en las conexiones de entrada de aire a las juntas.
2A M 6M 6M A
Comprobar la ausencia de fugas en el depósito auxiliar de juntas. Comprobar la ausencia de fugas en los cilindros. Comprobar la ausencia de fugas en las electroválvulas. Comprobar la ausencia de fugas en todas las conexiones de cilindros. Comprobar el funcionamiento de las válvulas de retención.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Instrumentos. Período 6M 6M
Operación Temperatura (SONDAS) Reapretar conexiones. Calibrar lecturas. Temperatura (Termostatos)
6M 6M 6M 6M 6M A M 6M 6M M A M 6M
Reapretar conexiones. Comprobar funcionamiento Presión (Transductores) Reapretar conexiones Calibrar lecturas Presión (Presostatos) Reapretar conexiones Comprobar punto de ajuste Comprobar actuación. Comprobar actuación. Presión (Manómetros) Comprobar estado. Comprobar ausencia de fugas. Calibrar lectura. Nivel (Interruptores de nivel) Comprobar estado y funcionamiento. Señales eléctricas Comprobar y ajustar, finales de carrera de puerta.
Componentes eléctricos.
Período
Operación
6M
Usar aire comprimido seco y baja presión, para limpiar el interior del cuadro eléctrico.
6M 6M 6M 6M A
Comprobar el contactor de la bomba de vacío, y consumo. Comprobar todos los cables de potencia. Comprobar todos los cables de control. Comprobar las protecciones. Comprobar las tensiones de maniobra
6M
Comprobar las salidas de ventilación. Limpiar la pantalla táctil y el panel principal.
A S D S
Comprobar todos los terminales de conexión de motores sensores en general. Limpieza de la pantalla táctil y registrador Verificar el estado de papel de la impresora y registrador Comprobar el funcionamiento de la fotocélulas de las puertas.
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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Así mismo el SAS dispone de una toma para introducir Peróxido al interior de la cámara, es SECURITY AIRLOCK SYSTEM O SAS.
por ello que en el cuadro dispongamos de un selector para elegir entre una desinfección por
Características
formol o una desinfección por peróxido de hidrógeno. El
equipo
se
ha
construido
con
panel
autoportante tipo sándwich con caras de acero inoxidable AISI 304 de 0.6 mm y alma de
El equipo ofrece una estanqueidad entre salas y
espuma de poliestireno extruido, con puertas de
entre cada sala y su cámara interna, debido a que
acceso enclavadas al interior del mismo de acero
se ha dotado a cada una de las puertas de una
inoxidable enrasada al piso con junta neumática
junta perimetral e hinchable para este fin.
perimetral, ventana y enclavamiento eléctrico, con junta alojada en el perímetro del canto de la hoja. Se trata de una junta hinchable perimetral
Funcionamiento.
continua de neopreno de 40x15 mm de grosor
En el presente capitulo detallamos las secuencias
que permite el cierre estanco de las puertas. Las
de operación para cada uno de los SAS de sala
cerraduras son electromagnéticas de última
con junta hinchable.
generación que no necesitan rampas para acceso. Como hemos citado anteriormente, los sas pueden Con formolizador interior en hueco lateral diseñado para una correcta saturación sin condensaciones. Sistema de convección forzada
funcionar
realizando
ciclos
de
descontaminación bien con un formolizador o con un generador de Peroxido. Secuencia funcionamiento del ciclo.
que asegura la perfecta homogeneización de la mezcla del agente germicida. En el siguiente esquema se puede observar las secuencias o ciclos que se realiza el SAS dependiendo de la puerta que se abra en cada caso. Para ello sería conveniente ver la figura 1 de la página . Los tiempos de ventilación y el ciclo de peróxido o formo variará en función del tamaño del SAS a tratar.
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¿Colaboramos? En Biología Hospitalaria le ayudamos a Organizar Conferencias, Workshops, SpeedNetworking´s, Congresos. Desde la planificación estratégica inicial hasta el informe final de resultados y estadísticas, su mejor elección es delegar la organización de su evento científico en nuestras manos.
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100
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
ABRIR A
ABRIR B
BLOQUEO B
BLOQUEO A
CERRAR A
CERRAR B
INICIO CICLO
INICIO CICLO
VENTILACION 4 MIN
VENTILACION 2 MIN
DESBLOQUEO B
SEÑAL INICIO PEROXIDO
FINAL CICLO
SEÑAL FINAL PEROXIDO
VENTILACION 8 MIN
DESBLOQUEO A
FINAL CICLO
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101
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
Mantenimiento. Eléctrico. Antes de maniobrar en el cuadro eléctrico, se procederá a desconectar el interruptor del cuadro de distribución que alimenta al citado cuadro eléctrico así como el interruptor de corte de las
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baterías. Antes de proceder a maniobrar cualquier elemento eléctrico, es preciso desconectar el correspondiente interruptor.
Antes de proceder a revisar o reparar cualquier elemento accionado por un motor eléctrico, es preciso
desconectar
el
interruptor
correspondiente al motor.
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102
LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO
•
Mensualmente comprobar el correcto
En el caso de avería del ventilador de extracción,
funcionamiento de las lámparas, en
se procederá a eliminar el cordón de silicona y
caso de fundirse, proceder a la
desconectarlo de la caja de conexiones.
sustitución de las mismas. •
Limpiar semestralmente el cuadro Filtros.
eléctrico con aire comprimido Semestralmente comprobar el estado de los
relés
debido
provocado
por
al
salto
desgaste de
(chispas), así como el estado de todos los cables de potencia y maniobra. •
•
arco
Sustitución del filtro G3-G4 cada dos meses.
•
Sustitución de los filtros HEPA (EU10 a EU14/ H10 a H16):
Es recomendable el cambio de los filtros HEPA
Comprobar anualmente las fijaciones de los cables y que estén tensados
cuando los filtros existentes tengan un incremento de carga superior a 5-8 mm.c.d.a.
Ventiladores y motores.
(50-80 Pa) a la perdida de carga medida en las
No manipular ningún aparato móvil, sin antes
condiciones iniciales.
haber desconectado su elemento motriz.
Después de un cambio de filtros absolutos es
No acercarse a ningún aparato u órgano en
necesario realizar un Test de integridad D.O.P.,
movimiento sin extremar las precauciones y en
con el fin de asegurar la eficacia de filtración de
ningún caso vistiendo ropas que no sean
los filtros y la correcta estanqueidad de la junta
enterizas y ajustadas.
de estos con el bastidor de la caja de filtración.
Los ventiladores no deben trabajar nunca sin una protección adecuada. Verificar de vez en cuando que los reguladores de
velocidad
de
los
ventiladores
están
encendidos, bajo ningún concepto tocar la regulación de los mismos.
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DISEÑO,
INSTALACIONES
Y
PUESTA
EN
MARCHA
DE
LABORATORIOS
DE
BIOSEGURIDAD
BL3/BL4
Y
ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)
INTRODUCCIÓN.
El
pueblo
de
Ecuador
y
los
servicios en sanidad animal, que
PROYECTO
CONSTRUCCIÓN
involucran
LABORATORIO VETERINARIO CON
nacionales
NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL
erradicación
3)
los
programas
de
control
de
Fiebre
y
Aftosa,
Brucelosis, Tuberculosis Bovina, Rabia Silvestre, Cólera Porcino,
PATRICIO SANDOVAL Médico Veterinario. Responsable Laboratorio Sanidad Animal. AGROCALIDAD.
Anemia Infecciosa Equina y las enfermedades aviares (Influenza Aviar,
Newcastle,
Salmonelosis,
Agrocalidad
Laringotraqueitis),
así
Quito/Ecuador
vigilancia
enfermedades
de
las
como
la
exóticas como la Influenza Aviar, la
Encefalopatía
requieren técnico
del de
apoyo un
diagnóstico
Espongiforme;
y
y
soporte
laboratorio de
control
de de
calidad y de un área específica para manejo de microorganismos de
alto
riesgo
zoonótico
y
epidemiológico, de
importancia
económico.
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DISEÑO,
INSTALACIONES
Y
PUESTA
EN
MARCHA
DE
LABORATORIOS
DE
BIOSEGURIDAD
BL3/BL4
Y
ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)
Para fines pertinentes se dirá que la bioseguridad es
el
conjunto
de
medidas
preventivas,
destinadas a mantener el control de factores de riesgo
laborales
procedente
de
agentes
biológicos, físicos o químicos, logrando la
Cosa similar sucede con la Peste Porcina
Clásica,
Encefalitis
Espongiforme Bovina (BSE), Rabia
prevención de impactos nocivos, asegurando que
Paresiante, los diferentes tipos de
el desarrollo o producto final de dichos
influenzas y las enfermedades de
procedimientos no atenten contra la salud y
control que son exóticas a nuestro
seguridad del personal del laboratorio.
país,
tal
es
diferentes
el
tipos
caso de
de
los
Influenzas
JUSTIFICACIÓN DE NECESIDAD DE UN
altamente
BSL3
diagnóstico y manipulación deben
Muchas de las enfermedades de control oficial,
realizarse dentro de un laboratorio
enfermedades exóticas y una vez que el Ecuador
patógenas.
Su
que mantenga altos niveles de
sea declarado libre de Fiebre Aftosa, esta enfermedad debe ser tratada exclusivamente en
biocontención,
con
normas
de
este tipo de laboratorio, adicionando un nivel
bioseguridad tipo 3 o más alta.
superior de bioseguridad (BSL 3+), equivalente
(BSL 3A O BSL 4)
al nivel de Bioseguridad Agricultura (BSL 3A). OBJETIVOS. El
objetivo general de construir este tipo de
laboratorio (BSL 3) es para disponer de un área diagnóstica ideal para la determinación, estudio y
aislamiento
de
agentes
patógenos
que
requieren de este tipo de contención para evitar su diseminación.
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DISEÑO,
INSTALACIONES
Y
PUESTA
EN
MARCHA
DE
LABORATORIOS
DE
BIOSEGURIDAD
BL3/BL4
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ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)
INFRAESTRUCTURA
FÍSICA-
Otro de los objetivos es el de reducir al mínimo
CONSTRUCCIONES E INSTALACIONES
la exposición del personal de los laboratorios,
El Laboratorio BSL 3 tiene la particularidad de
otras
ser diseñado para disponer de instalaciones de
personas
y
el
entorno
a
agentes
potencialmente peligrosos.
gran complejidad técnica para cumplir con las
Poner al servicio del público en general una
rigurosas
herramienta ideal para manipulación de agentes altamente investigación,
infecciosos
para
aislamiento,
fines
identificación
de y
medidas
de
bioseguridad
que
garanticen el adecuado manejo y control de microorganismos vivos y agentes infecciosos que serán manipulados.
conservación de los mismos. Las medidas de bioseguridad que deben aplicarse en este tipo de laboratorios y las instalaciones ENFERMEDADES
CON
PRESENCIA
DEMOSTRADA EN ECUADOR
que
manipulen
agentes
infecciosos
vivos
dependientes del nivel de riesgo de los
El control oficial de las enfermedades que
microorganismos
afectan a los animales, no ha sido el idóneo a
incrementará de manera relevante cuando se
través de los tiempos, esto debido a que el país
manipulen virus de enfermedades vesiculares, en
no contaba con un laboratorio oficial de control y
especial de fiebre aftosa que pudieran ser
monitoreo de enfermedades de interés pecuario
liberadas al medio ambiente como consecuencia
ni de control de enfermedades emergentes y
de un accidente laboratorial cuando el país sea
reemergente, mucho menos de la investigación,
declarado como libre de esta enfermedad.
control y aislamiento de agentes patógenos de peligro en un laboratorio adecuado para este tipo de control.
a
ser
analizados
Para cumplir este requerimiento, es necesario comprender
los
diferentes
tipos
de
microorganismos y el nivel de bioseguridad que requieren para su manipulación.
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se
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Y
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BIOSEGURIDAD
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BIOSEGURIDAD
CLASIFICACIÓN
DE
Bioseguridad: La Organización Mundial de la
BIOLÓGICOS
Salud (OMS), define la Bioseguridad como: “El
Los “agentes biológicos” se definen como
término utilizado para referirse a los principios,
microorganismos
técnicas y prácticas aplicadas con el fin de evitar
reproducirse y transferir material genético,
la exposición no intencional a patógenos y
susceptibles de generar cualquier tipo de
toxinas o su liberación accidental”.
infección, reacción alérgica o toxicidad.
RIESGO DE CONTAMINACIÓN
De modo convencional, los riesgos relativos de
vivos
LOS
con
AGENTES
capacidad
de
los agentes infecciosos se clasifican en grupos de El elemento más importante de la contención
es
el
cumplimiento
estricto de adecuadas prácticas y técnicas microbiológicas.
riesgo: 1, 2, 3 y 4. El grupo de riesgo 1 representa el mínimo nivel de riesgo para el personal de laboratorio y la comunidad y el grupo de riesgo 4 representa el máximo. En el nivel de bioseguridad requerido (BSL3) se
Las
personas
infecciosos
o
que
trabajan
materiales
con
agentes
potencialmente
manipulan agentes biológicos del grupo 3, agentes
que
pueden
ser transmitidos
por
infectados deben conocer los riesgos potenciales,
partículas del ambiente a través de aire y pueden
y también deben estar capacitados y ser expertos
causar enfermedad seria o que amenaza la vida
en las prácticas y técnicas requeridas para
de las personas.
manipular dichos materiales en forma segura. El Manual de Bioseguridad en el Laboratorio, en La organización a cargo del laboratorio será
su tercera edición de la OMS, señala que para
responsable de brindar los mecanismos de
trabajar con enfermedades como las abajo
capacitación adecuada para el personal.
enlistadas, se debe manejar la bioseguridad de manera estricta en lo referente a las medidas dentro del laboratorio, así como las instalaciones y el equipamiento adecuado.
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1. Bacterias: 1. Brucella abortus, B. mellitensis,
Estas enfermedades, constan entre las que han sido tomadas en cuenta como prioritarias a ser
B. suis, B. canis 2. Mycobacterium
tuberculosis,
diagnosticadas en el laboratorio de sanidad animal de AGROCALIDAD, y requieren que
bovis
para su estandarización entre las pruebas a ser
3. Pseudomona pseudomallei
realizadas, que se cuente con un nivel de
2. Priones: 1. Encefalopatía
espongiforme
bioseguridad 3 (BSL 3), debido a que son entes
bovina
patológicos con alto riesgo biológico de gran
2. Scrapie
contaminación, ya sea por aire, fómites y
3. Encefalitis
espongiforme
personal de laboratorio, se haga necesario disponer de control con barreras que limiten su
transmisible
salida y difusión.
3. Virus: 1. Rinoneumonitis equina 2. Rinotraqueitis infecciosa bovina 3. Artritis y encefalitis caprina
DEFINICIÓN
4. Encefalitis equina del Este
BIOSEGURIDAD EN LABORATORIOS
5. Encefalitis equina del Oeste
El nivel de bioseguridad deberá ser asignado al
6. Enfermedad
laboratorio o a un área del laboratorio de acuerdo
de
Newcastle
(velogénica)
DE
LOS
NIVELES
DE
con el tipo de microorganismo que se manipule.
7. Enfermedad vesicular del cerdo De acuerdo con el Manual de Bioseguridad en
8. Estomatitis Vesicular
Laboratorios de Microbiología y Biomedicina
9. Fiebre aftosa
(Cuarta Edición), publicado por el CDC (Center
10. Influenza aviar
for Disease Control and Prevention) y el NIH
11. Metritis contagiosa equina
(National Institute of Health) de los Estados
12. Peste porcina clásica 13. Rabia virus calle y virus salvaje
manera los
(rabia paralítica) 14. Síndrome
respiratorio
Unidos de América, se clasifican de la siguiente
y
niveles
de bioseguridad
instalaciones de laboratorio.
reproductivo porcino (PRRS) 15. Fiebre del Valle del Rift www.biotecnologiahospitalkaria.com
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para
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Nivel de bioseguridad 1
Nivel de bioseguridad 2
Las prácticas, los equipos de seguridad, el diseño
Las prácticas, los equipos, el diseño y la
y la construcción de la instalación del Nivel de
construcción de instalaciones del Nivel de
Bioseguridad 1 son adecuados para laboratorios
Bioseguridad 2 son aplicables a laboratorios
destinados a la educación o capacitación
educativos, de diagnóstico, de producción,
secundaria
otros
clínicos u otros laboratorios donde se trabaja con
laboratorios en los cuales se trabaja con cepas
un amplio espectro de agentes de riesgo
definidas y caracterizadas de microorganismos
moderado que se encuentran presentes en la
viables que no se conocen como generadores
comunidad
sistemáticos de enfermedades en humanos
enfermedad humana de variada gravedad.
o
universitaria,
y
para
adultos sanos.
y
que
están
asociados
con
Se deben utilizar las demás barreras primarias
OMS - Nivel 1: “Grupo de riesgo 1 (riesgo
que correspondan, tales como máscaras contra
individual
nulo)
salpicaduras, protección facial, delantales y
pocas
guantes.
y
poblacional
Microorganismos
que
escaso
o
tienen
probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales”. (MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Tercera Edición ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD, Ginebra 2005). Ejemplo
de
microorganismos
thuringiensis,
grupo
1:
Lactobacillus
acidophylus, Micrococcus luteus. Neurospora crassa,
Pseudomonas
fluorescens,
marcesens.
como
piletas
para
lavado
de
manos
instalaciones de descontaminación de desechos a fin de reducir la contaminación potencial del
Serratia
OMS - Nivel 2: “Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo)Manipula
agentes
patógenos
que
pueden
provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, los animales o el medio ambiente.
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e
medio ambiente.
Agrobacteriun radiobacter, Aspergillus níger, Bacillus
Se debe contar con barreras secundarias, tales
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La exposición en el laboratorio puede provocar
La tuberculosis Mycobacterium, el virus de la
una infección grave, pero existen medidas
encefalitis de St. Louis, y el Coxiella burnetii
preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de
son representativos de los microorganismos
propagación es limitado.” (MANUAL DE
asignados a este nivel.
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Tercera Edición ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Ginebra 2005).
Las barreras secundarias para este nivel incluyen el acceso controlado al laboratorio y estrictos requisitos de ventilación que minimicen el riesgo
Ejemplo de microorganismos de este grupo
de liberación de aerosoles infecciosos desde el
según OIE: Virus: Virus de influenza tipos A, B
laboratorio.
y C; virus de la enfermedad de Newcastle; virus Orf (parapoxvirus). Bacterias: Alcaligenes spp.; Arizona spp.; Campylobacter spp.; Chlamydia psittaci
(no
aviar);
Clostridium
tetani;
Clostridium botulinum; Corynebacterium spp.; Erysipelothrix rhusiopathiae; Escherichiae coli; Haemophilus spp.; Leptospira spp.; Listeria monocytogenes; Moraxella spp.; Mycobacterium avium;
Pasteurella
spp.;
Proteus
spp.;
Pseudomonas spp.; Salmonella spp.; Hongos: Aspergillus
fumigatus;
Microsporum
spp.;
OMS - Nivel 3: “Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo) Agentes
patógenos
que
suelen
provocar
enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propagan de un individuo a
otro.
Existen
terapéuticas
medidas
eficaces”.
preventivas
(MANUAL
y DE
BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Tercera Edición ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Ginebra 2005). Ejemplo de microorganismos de este grupo
Trichophyton spp.
según OIE: Grupo 3 Virus: Virus de la rabia; Nivel de bioseguridad 3
virus de la encefalomielitis equina (tipo Este,
Las prácticas, equipos de seguridad y el diseño y
tipo Oeste, tipo Venezolano); virus de la
la construcción de las instalaciones del Nivel de
encefalitis japonesa B; virus de la encefalitis
Bioseguridad 3 pueden aplicarse a instalaciones
ovina.
clínicas, de producción, investigación, educación
Burkholderia mallei (Pseudomonas mallei);
o diagnóstico, donde se trabaja con agentes
Brucella spp.; Chlamydia psittaci (solo cepas
exóticos
aviares); Coxiella
con
respiratoria,
y
potencial que
pueden
de
transmisión provocar
una
Bacterias:
Bacillus
burnetti; Mycobacterium
bovis. Encefalitis Espongiforme bovina.
infección grave y potencialmente letal. www.biotecnologiahospitalkaria.com
anthracis;
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Nivel de bioseguridad 3 a
Nivel de bioseguridad 4
OIE - Nivel 3A. “Grupo de riesgo 3A” (riesgo
Las prácticas, equipos de seguridad, el diseño y
individual y poblacional elevado).
la construcción de instalaciones del Nivel de Bioseguridad 4 son aplicables al trabajo con
Agentes
patógenos
que
suelen
provocar
enfermedades graves en los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces, sin
agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual de enfermedades que ponen en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de aerosoles y para las cuales no existen vacunas o terapias disponibles.
embargo, las pérdidas económicas asociadas a brotes de la enfermedad representan un riesgo
Los agentes con una relación antigénica cercana
elevado.
o idéntica a los agentes de los Niveles de Bioseguridad 4 deben manejarse conforme a las
La OIE ha establecido principalmente esta categorización para el virus de la fiebre Aftosa y en general para ciertos agentes biológicos que tengan efectos en especies animales de gran tamaño. El USDA-ARS (US Department of Agriculture / Agricultural Research Service) ha
recomendaciones de este nivel. Cuando se han obtenido datos suficientes, el trabajo con estos agentes puede continuarse a este nivel o a un nivel inferior. Los virus como Marburg o la fiebre
hemorrágica
Congo-Crimeana
se
manipulan al Nivel de Bioseguridad 4.
adoptado en sus exigencias y estándares el nivel 3A de biocontención.
OMS - Nivel 4. “Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado) Agentes
El ser humano puede ser portador e importante vector en la transmisión de la enfermedad, motivo por el cual se deben garantizar óptimos procedimientos para manejo del personal en los laboratorios.
patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas
Las instalaciones que deben cumplir BSL3A son
eficaces.” (MANUAL DE BIOSEGURIDAD
las mismas exigidas para microorganismos de
EN EL LABORATORIO Tercera Edición
nivel 4, con algunas pocas excepciones.
ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Ginebra 2005.)
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El área requerida para el funcionamiento de un ENFERMEDADES A SER
laboratorio con las características requeridas
DIAGNÓSTICADAS
deberá ser manejado en un área de 500 m2 de
Por el tipo de laboratorio, las enfermedades a ser
área libre funcional.
diagnosticadas son: Entre las construcciones a contratarse constan: 1. Cultivos Bacterianos de: 1. Brucella abortus, B. mellitensis,
o Construcción de un Laboratorio BSL 3
B. suis, B. canis 2. Mycobacterium
tuberculosis,
o Diseño de Áreas. o Sistemas de ingresos del personal.
bovis
o Sistema de ingreso de muestras
2. Priones: 1. Encefalopatía
espongiforme
(Pass box, Pass trougth, SAS químico)
bovina
o Diseño
2. Scrapie 3. Encefalitis
espongiforme
de
tratamiento
de
efluentes. o Diseño de los sistemas eléctricos
transmisible
y de transmisión de voz y datos.
3. Virus:
o Diseño de sistemas de telemetría,
1. Encefalitis equina del Este
automatización y control de los
2. Encefalitis equina del Oeste 3. Enfermedad
de
Newcastle
o Descripción de los componentes y
(velogénica)
materiales
4. Enfermedad vesicular del cerdo
proyectados
5. Estomatitis vesicular
constructivos en
los
planos
arquitectónicos.
6. Fiebre aftosa
o Sistema de detección y alarma de
7. Influenza aviar
incendio.
8. Peste porcina clásica 9. Rabia virus calle y virus salvaje
respiratorio
reproductivo porcino (PRRS)
o Diseño de sistema de gases. o Oficina técnica externa
(rabia paralítica) 10. Síndrome
demás sistemas.
y
o Esterilización y tratamiento de material biológico o Área técnica interna
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RIESGOS
ASOCIADOS
AL
LABORATORIO BSL3 Debido al inminente riesgo que implica el manejo de enfermedades y su afectación al medio ambiente y personas y animales del entorno, es indispensable realizar un buen manejo de medidas de la bioseguridad y el correcto tratamiento de los productos y efluentes de los respectivos análisis, se convertirán en
ÁREAS DISEÑADAS •
Acceso de personas
El área laboratorial tendrá acceso restricto bajo sistema de identificación individual que permita trazabilidad
con
claves
alfa
numéricas
individuales y/o registro de huella dactilar para las diferentes áreas internas, también deberán tener control de acceso por igual bajo un sistema individual y solo permitido al personal interno.
desechos los cuales de no darles el tratamiento adecuado, causarán un gran daño no sólo al ambiente del lugar, sino a todo el sistema
•
Vestidores:
ecológico del la zona y de otros lugares vecinos. Dentro del laboratorio BSL 3, el personal portará Para el caso de Ecuador, donde hasta el momento no se han presentado casos de fiebre aftosa por más de 37 meses, se vuelve inminente la utilización de este tipo de laboratorio en vista de que esta enfermedad se la ubica en el grupo de riesgo 3 agricultura (BSL 3 A).
ropa adecuada para esta área, luego para el ingreso al BSL 3 deben mudar completamente de ropa a ropa de laboratorio, incluida ropa interior descartable. El área contempla un vestidor de uso general con una zona considerada limpia, donde se dejarán todas las pertenencias y ropas del laboratorio BSL 3, y un vestidor donde el personal calzará y vestirá indumentaria adecuada para
trabajar
exclusivamente
dentro
del
laboratorio BSL 3. A la salida de esta área, en el vestidor interno se dejará toda la ropa y calzado utilizado dentro de la zona restringida, obligatoriamente tomará una ducha y ocupará ropa de aseo personal externa.
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•
•
Lavamanos:
Tratamiento del aire:
Debe existir uno en cada sección o sala de los
El sistema de ventilación del área laboratorial
laboratorios y deberá contar con un sistema de
debe ser exclusivo para dicha área y sin
grifos que puedan accionarse sin la utilización de
recirculación.
las manos. El sitio más recomendable para su
dimensionadas para obtener una circulación de
ubicación es cercano a la puerta de salida.
aire adecuada desde áreas potencialmente menos
•
presiones
deberán
ser
contaminadas hacia las más críticas con un Lavaojos y duchas de emergencia:
Es necesario contar con un sistema de ducha de emergencia y lavaojos en el interior del área diagnóstica cercana a las salas de mayor riesgo, además de un equipo de ayuda en caso de emergencia, y uno estratégicamente localizado para uso general. •
Las
diferencial mínimo de 15 Pa entre las salas. El aire extraído deberá pasar por dos filtros HEPA con eficiencia 99,97% para partículas de hasta 0.3 micrones, dispuestos en serie. Debe contar con dos ventiladores de extracción instalados en paralelo siendo uno de emergencia y accionado por alternancia automatizada, quedando siempre uno en "stand by". En cuanto
Tratamiento de efluentes:
a las presiones negativas, Todo el efluente liquido generado en el área, inclusive agua de las duchas y de los sanitarios,
iniciar con un
la cascada deberá
mínimo de -15 Pa en los
vestidores internos.
debe ser descontaminado antes de ser vertido al sistema público. deberán
garantizar
Las cañerías y accesorios su
estanqueidad,
como
asimismo soportar la presión negativa de las
•
Residuos sólidos.
salas sin que se produzcan desifonajes. Todo el
El proyecto deberá presentar recomendaciones
sistema debe ser construido en acero negro.
para el manejo de los residuos sólidos que además de la normativa general que el propio
El proceso de tratamiento debe ser químico y/o térmico.
laboratorio
establezca
en
función
de
las
exigencias internacionales por bioseguridad y legislación vigente en el país, cumpla con las normativas ambientales vigentes.
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•
Autoclave:
ÁREAS
DE
DIAGNÓSTICO
Utilizado en la descontaminación y esterilización
IMPLEMENTADAS
de materiales descartables, material de vidrio y
Área de serología.
residuos
sólidos.
Utilizarán
calor
húmedo
(vapor) a 121 °C o mas, operadas con restricción por identificación por claves alfa numéricas individuales que permitan trazabilidad de su operación.
A
SER
Esta área permitirá hacer el monitoreo y control del
comportamiento
inmunológico
de
las
enfermedades mediante la seroconversión, ya sea por la aplicación de vacunas o por la exposición a los agentes patógenos de la enfermedad que se
Deberán asegurar la esterilización de lo tratado,
está monitoreando. Las enfermedades que se
con control y registro de tiempo, presión y
estudiarían en esta área son:
temperatura.
Fiebre Aftosa y Enfermedades Vesiculares. Peste Porcina Clásica.
PERSONAL
Influenza Porcina. El personal requerido para este tipo de
Influenza Aviar.
laboratorio,
Brucelosis
son
técnicos
altamente
especializados en técnicas diagnósticas por virus
Enfermedad de Newcastle.
neutralización, serología, microbiología y sobre todo en el manejo de normas de bioseguridad
Área de virología.
para laboratorios BSL 3, éstos deben ser médicos veterinarios microbiología,
con
especialización
epidemiología
en
veterinaria,
cultivos celulares y crianza de animales de laboratorio; eventualmente pueden ser técnicos de carrera afines al diagnóstico con experiencia en enfermedades zoonósicas y de biología molecular.
Dentro de esta área se dará prioridad al análisis de
agentes
patógenos
virales,
los
cuales
requieren ser analizados o aislados, de manera tal que, se pueda orientar el diagnóstico de patógenos virales. Tratamiento de cultivos celulares,
aislamiento
viral
y
virus
neutralización. Además un área para extracción de material genético de patógenos que entran en el diagnóstico de este laboratorio.
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Encefalopatía
Enfermedades:
espongiforme
Bovina.
Será
aplicada las pruebas de inmunihistoquímica y
Fiebre Aftosa.
Transfer Blot a todas las muestras con sospecha
Peste Porcina Clásica. En esta área se llevará a
de rabia paralíca que lleguen al laboratorio.
cabo pruebas de inmunofluorescencia directa para la detección antigénica a partir de cortes de
Área de bacteriología.
amígdalas, bazo, riñón y nódulos linfáticos
El área de bacteriología será implementada para
empleando anticuerpos monoclonales, de manera
llevar a cabo el análisis de enfermedades de
que pueda ser diagnosticado a partir de muestras
importancia sanitaria como lo son Salmonella y
de animales sospechosos. Se tiene previsto
Mycobacterium, las cuales no solo representan
analizar, en base a estudios de prevalencia
un riesgo para la salud animal sino también, son
obtenidos en otros países, 1600 muestras de las
riesgo para la salud humana.
cuales las que resulten ser positivas, se emplearán para llevar a cabo el aislamiento viral e identificación del agente mediante RT – PCR.
Enfermedades:
Rabia. La prueba recomendada tanto por la OIE
Brucelosis Bovina. El aislamiento de esta
como
identificación
bacteria se llevará a cabo a partir de muestras de
inmunoquímica del antígeno del virus, mediante
tejido o leche, de manera tal que se puedan aislar
la prueba de Inmunofluorescencia, la cual tiene
cepas lisas, las cuales seleccionen a fin de poder
una fiabilidad del 95 – 99%. El análisis se estima
emplearlas en el análisis confirmatorio por
llevarse a cabo en unos 100 animales.
medio de PCR.
por
la
OMS,
Encefalomielitis
es
equina
la
venezolana.
Será
Área de cultivo celular.
identificada mediante la prueba de fijación de
Está diseñada para la preparación de líneas
complemento
celulares que se emplearán en el aislamiento y
o
Inhibición
de
la
hemoaglutinación tras la inoculación en cultivo
replicación
celular.
confirmación de enfermedades virales.
Los
caracterizados
aislados
además
por
podrán
medio
ser
viral
para
el
de
inmunofluorescencia indirecta.
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diagnóstico
y
DISEÑO,
INSTALACIONES
Y
PUESTA
EN
MARCHA
DE
LABORATORIOS
DE
BIOSEGURIDAD
BL3/BL4
Y
ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)
Los cultivos se examinarán en cuanto a
Enfermedades: Enfermedades vesiculares. Para el diagnóstico de esta enfermedad, se procederá a inocular las muestras en las que se sospeche del virus en
crecimiento vírico por inmunofluorescencia, el aislamiento
positivo
se
caracterizarán
por
secuenciación génica parcial.
líneas celulares de células VERO, BHK-21 o IB
Adicionalmente la prueba de neutralización
RS-2, estas líneas celulares se sembrarán y
vírica con anticuerpo fluorescente (prueba
desarrollarán a fin de poder ser empleadas en el
prescrita
proceso
requiere aislar el virus en cultivo celular.
de
diagnóstico
diferencial.
Cabe
indicarse que el virus de la Estomatitis vesicular desarrolla efecto citopático en las tres líneas celulares, el virus de Fiebre aftosa desarrolla efecto citopático en el grupo de líneas celulares BHK-21, mientras que el virus de Exantema Vesicular del cerdo afecta al grupo IB RS-2. Posterior al aislamiento en cultivo celular, se efectuarán las pruebas de confirmación. Peste Porcina Clásica. Dentro de esta área se llevará a cabo la siembra y el desarrollo de las líneas celulares de elección para esta enfermedad
para
el
comercio
internacional),
Rabia. Se requerirá llevar a cabo el cultivo del virus en celular BHK – 21 C13, en las cuales, tras
la
replicación
identificado
viral,
mediante
este la
podrá prueba
ser de
inmunofluorescencia, esta técnica reemplaza la inoculación en ratones, es más rápida, menos costosa e igual de eficiente. La prueba de neutralización vírica en cultivo celular con anticuerpo fluorescente (prueba prescrita para
el comercio internacional),
requiere aislar el virus en cultivo celular.
a saber células PK15. La PPC será cultivada a partir de muestras que hayan resultado ser
Encefalomielitis Equina Venezolana. Este
positivas tras la Inmunofluorescencia directa, se
virus puede ser aislado en cultivo celular,
tiene como antecedente que 80% de las muestras
pudiéndose emplear células VERO, RK – 13,
a analizar por Inmunofloresencia directa resultan
BHK – 21, tras su aislamiento, las muestras
ser positivas o sospechosas a PPC, por lo que
serán analizadas mediante una prueba de
será necesario que estas 1200 muestras (80% de
Fijación de complemento (FC) o Inhibición de la
muestras analizadas por Inmunofluorescencia
hemoaglutinación (HI). Se tiene estimado llevar
directa), sean resembradas en células OK15.
a cabo anualmente el aislamiento viral de 300 muestras.
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INSTALACIONES
Y
PUESTA
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DE
LABORATORIOS
DE
BIOSEGURIDAD
BL3/BL4
Y
ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)
Influenza porcina. Tras la identificación de seroconversión en granjas porcinas, se llevará a cabo un muestreo de los animales a fin de identificar el agente causal, para lo cual se inocularán inocul las muestras en líneas celulares MDCK, a partir de este aislamiento se procederá a efectuar pruebas de HI e Identificación del virus mediante un diagnóstico confirmatorio mediante PCR. En base a antecedentes de otros países se recomienda muestrear 750 animales, sin embargo este número puede aumentar en caso de evidenciarse altos índices de animales con problemas respiratorios. planos propuestos.
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2ª CONGRESO NACIONAL DE BIOSEGURIDAD 29/31 de octubre 2014 Parc de Recerca Biomédica de Barcelona
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