Revista num 19

REVISTA DE CALIDAD AMBIENTAL INTERIOR EN HOSPITALES, LABORATORIOS, ANIMALARIOS Y SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X

Núm. 19, septiembre 2014

GESTIÓN DE LA COMUNICACIÓN EN ALERTAS DE RIESGOS PARA LA SALUD PÚBLICA

Sumario EDITORIAL

4.

DISEÑO

DE

BIOSEGURIDAD RODRIGUEZ

UN

LABORATORIO

NIVEL

3

PADILLA.

(BSL-3).

L.

G.

DE C.

RIVERA

MORALES, Universidad Autónoma de Nuevo León; J.

Dra. Gloria Cruceta

VALDEZ SANDOVAL. Universidad Autónoma de Sinaloa.

26. BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF- . M. I. GUTIERREZ CABEZÓN; J.

CANTERO JIMÉNEZ, Universidad de Jaén.

50.

150 DÍAS DESPUÉS DEL BROTE DE ÉBOLA: ¿DONDE ESTÁ LA RESPUESTA? “Temo por mi vida”, reconoció en una entrevista el virólogo Sheik Umar Khan, responsable de uno de los mejores centros de África Occidental para la lucha contra el Ébola.

Poco después de decirlo, Khan, considerado un héroe nacional en Sierra Leona, contraía la enfermedad, que finalmente acabó con su vida.

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE

INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS). V. MOLEIRO SAN

EMETERIO, Ciemat; M. PEÑA ABAD, Universidad de León.

65.

LABORATORIO BSL3 Y LAS BARRERAS

DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS. CONSIDERACIONES DE DISEÑO, A.A. MIRANDA

ESCAMILLA. Sicapharma, México.

76.

PROCEDIMIENTO

DE

USO

Y

MANTENIMIENTO DE EQUIPOS DE BARRERA DE BIOCONTENCIÓN EN UN LABORATORIO BL3, J.E.

BERMUDEZ RUIZ; M.A. MOCHALES LARA. Instalaciones Hernández.

104.

PROYECTO

Más del 8% de las víctimas mortales de la actual epidemia son profesionales de la salud, en total, más de 100 miembros de personal médico se han contagiado. Hay trabajadores sanitarios locales que tratan de atender a los pacientes de ébola sin formación, entrenamiento y equipo adecuado y, evidentemente, enferman.

El brote está afectando a un gran número de médicos, enfermeras y otros trabajadores de la salud, uno de los recursos más esenciales para contener un brote. Estas trágicas infecciones y muertes erosionan significativamente la capacidad de respuesta. Las cifras actuales de personal contagiado es lamentablemente inadecuado Sentimos no tener una vacuna y por no ser, de momento, capaces de detener la epidemia.

Sabemos que deberíamos estar haciendo más, pero ¿existen recursos, capacidad, formación y personal suficiente?.

CONSTRUCCIÓN

LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3). P. SANDOVAL,

Directora de la Publicación: Dra. Gloria Cruceta

Agrocalidad, (QUITO, ECUADOR).

ISSN 2013-746X. Realización: SEGLA s.l. Avda Gaudi, 52 bis, 4º1º Barcelona. 08025 Tel. 934 364 061.

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Cualquier forma de reproducción, distribución, o transformación 2 de esta obra sólo puede ser realizada con la autorización de los titulares de la publicación. www.biotecnologiahospitalaria.com

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BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA Reconocida como Web Médica Acreditada (WMA), en el programa de certificación de calidad de webs médicas (Colegio Colegio Oficial de Médicos de Barcelona).

International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X 2013

Subscripción n gratuita

biotecnología@biotecnologiahos biotecnología@biotecnologiahospitalaria.com

3

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (bsl-3) (bsl

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL

INTRODUCCIÓN

3 (BSL-3).

Las

enfermedades infecciosas no se

consideran un problema reciente, ya que no sólo se presentan de manera cotidiana Dra Cristina Rodríguez Padilla

en la población en general, sino que han

Jefe del Laboratorio de Inmunología y

estado presentes a lo largo de la historia de

Virología.

la humanidad.

Facultad

de

Ciencias

Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, México.

A pesar de los avances en el Dra.

Lydia

Gpe.

Rivera

Morales

campo de la medicina durante el

Laboratorio de Inmunología y Virología de la Facultad de Ciencias Biológicas.

Universidad Autónoma de Nuevo León.

último

siglo

diagnóstico, . tratamiento,

en

cuanto

prevención las

al y

enfermedades

MC. José Johanatan Valdez Sandoval.

Sandoval Hospital General de Culiacan, Servicios de

infecciosas siguen siendo una

Salud de Sinaloa. Unidad Academica

causa importante de morbilidad y

Escuela

mortalidad alrededor del mundo,

de

Biologia,

Universidad

Autonoma de Sinaloa. sobre

todo

en

los

países

subdesarrollados

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4

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (bsl-3)

stos laboratorios, también llamados de Una de las principales razones de esto es biocontención, se caracterizan porque la aparición de infecciones ocasionadas además de requerir personal con una por

nuevos

microrganismos capacitación especializada, es necesario

potencialmente patógenos y por la reutilizar ciertas prácticas microbiológicas emergencia de enfermedades infecciosas seguras, equipo especial y medidas de que se creían controladas, pero que seguridad

rigurosas para generar un

rápidamente incrementan su incidencia y ambiente seguro para el investigador y el adquieren un carácter epidémico o aún personal que labora en estos laboratorios, pandémico. para el medio ambiente y su entorno. Todo esto con la finalidad de llegar a una rápida detección e identificación del agente La investigación con este tipo de infeccioso enfermedades,

llamadas

y

desarrollar

preventivas y terapéuticas a la mayor

emergentes y re-emergentes y

brevedad posible

que

OBJETIVO

tienen

en

elevada

general

una

medidas

morbimortalidad, Diseñar

requiere

de

la

remodelación

y

la

instalaciones construcción de un laboratorio de

especializadas para el manejo Bioseguridad seguro

de

estos como

3

en

el

agentes Laboratorio

infecciosos,

nivel

son

de

Inmunología

y

los Virología (LIV) de la Facultad de

laboratorios

de

bioseguridad Ciencias

Biológicas

en

la

nivel 3 y 4 (BSL-3 y BSL-4).

Universidad Autónoma de Nuevo León, ubicado en Monterrey, Nuevo León, México.

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5

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

MÉTODOS Se elaboró un proyecto para llevar a cabo el diseño de la remodelación y la construcción del laboratorio de bioseguridad nivel 3 en el LIV. Para realizarlo se buscó la asesoría de la compañía SMITH-CARTER, SMITH que cuenta ta con personal calificado y con experiencia en la construcción de este tipo de laboratorios.

RESULTADOS Como parte del ambicioso proyecto de la Universidad Autónoma de Nuevo León para la investigación dentro de la Facultad de Ciencias Biológicas se llevo a cabo la remodelación y modernización del laboratorio con nivel de Bioseguridad BSL3, ubicado en el último nivel del edificio que alberga laboratorios BSL2 y oficinas administrativas, el acceso al laboratorio es a través del corredor publico estando restringido solo a personal autorizado.

Fig. 1 Planta Arquitectónica del BSL-3

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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

ÁREA DE FUERA DE LA

ÁREA DE LABORATORIOS.

CONTENCIÓN. Puesto que este laboratorio tiene el Después

de

acceder

al

espacio

restringido, se encuentra el área que funcionará como administrativa, donde se podrá llevar el monitoreo del laboratorio,

realizar

reportes

y

seguimiento al trabajo que se realice en el interior del espacio contenido. Así mismo está el cuarto de lavado, donde se recibe material después de ser esterilizado por el autoclave.

Nivel

de

Bioseguridad

BSL3,

es

necesario dotarlo con un ambiente de trabajo seguro que además cumpla con los

requerimientos

en

materia

de

Bioseguridad, por esta razón cuenta con flujo de aire direccional y diferencial de presión en cascada, desde los espacios de menor riesgo a los que requieren mayor seguridad, controlado por un sistema de automatización que permite su monitoreo permanente.

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7

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

Se cuenta también con sistema de alarma contra incendio, control de acceso y alarma de intrusión, así como monitoreo a través de circuito cerrado de televisión. En el sistema de extracción de los cuartos al interior del área contenida se cuenta con filtros HEPA para garantizar la eliminación de cualquier riesgo hacia el exterior.

Fig. 3 Se aprecia las computadoras y los controles de presión, humedad y temperatura del laboratorio

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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

VESTÍBULO. El acceso al área de contención se realiza a través del Vestíbulo, cuarto donde el personal se colocará la ropa de laboratorio y cualquier otra protección adicional que requiera para realizar su trabajo con seguridad. Las puertas de este cuarto se encuentran “exclusadas” lo que garantiza que no sea posible abrirlas simultáneamente, a menos que se trate de una emergencia.

Fig. 4 Se aprecia en el área no contenida las puertas de acceso al cuarto de lavado y al vestíbulo

Fig. 5 En el cuarto de Pre-cultivo se encuentra la autoclave de doble puerta

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9

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

CUARTO DE PRE-CULTIVO. Este cuarto es el mayor con que cuenta el laboratorio y funciona como espacio de trabajo y corredor de acceso a las dos suites del laboratorio, así como al cuarto de equipos. En él se llevaran a cabo labores de preparación y descontaminación de algunos elementos así como albergar equipos de refrigeración.

Fig. 6 Cuarto de Pre-Cultivo

SEGLA, EMPRESA ACREDITADA PARA LA VALIDACIÓN DE QUIRÓFANOS, SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO Y LABORATORIOS.

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10

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

CUARTO DE EQUIPOS. En el podrán ser colocados ultracongeladores y/o refrigeradores para el uso del laboratorio.

Fig. 7 Cuarto de Equipos

CUARTO DE CULTIVO 1 Estos espacios están diseñados para poder llevar a cabo los trabajos que requiera la Facultad, dentro de las condiciones más altas de seguridad para un laboratorio de este tipo. Cuentan cada uno con una Cabina de Bioseguridad Clase II A/B3 y alimentación de CO2, mesa de trabajo y tarja con agua fría y caliente y lavaojos en caso de emergencia.

Fig. 8 Se observa cuarto de cultivo 1 y cuarto de equipos y dentro del cuarto se observa la cabina de Bioseguridad Clase II A/B3

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11

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

CUARTO DE CULTIVO 2.

BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA

Fig. 9 Cabina de Bioseguridad Clase II A/B3

BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA ha sido reconocida como Web Médica Acreditada (WMA) www.biotecnologiahospitalaria.com

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DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

ESPACIO PARA MECÁNICOS

EQUIPOS En este espacio se encuentran los equipos

Puesto que el laboratorio se encuentra en el último nivel del edificio, fue necesaria

la

construcción

de

una

estructura metálica en la azotea para proteger los equipos mecánicos que dan servicio

al

laboratorio

y que no

de

inyección

de

aire

acondicionado, válvulas de control de flujo

de

aire,

compuertas

de

bioseguridad, así como el sistema de extracción, filtros HEPA, válvulas de control de ductos y extractores, servicio de agua y eléctrico.

quedarán a merced de los cambios atmosféricos.

Fig. 10 Espacio para equipos mecánicos

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13

DISEÑO DE UN LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD NIVEL 3 (BSL3)

CONCLUSIONES La construcción de este tipo de laboratorios será de gran utilidad debido a que contribuirán a establecer un punto estratégico para una mejor vigilancia epidemiológica,

diagnóstico,

tipificación

y

microorganismos reemergentes,

estudio

de

emergentes

y

llevar

a

cabo

una

respuesta rápida en caso de brotes y así como sentar las bases para incrementar la

coordinación

y

la

cooperación

internacional, además de colaborar con laboratorios del país para el desarrollo de trabajos conjuntos de investigación.

3. Fauci AS. New and reemerging diseases:

the

biomedical

importance

research.

of

Emerg

Infect Dis 1998; 4:374-8.

4. Racaniello,

V.

Emerging

infectious Diseases. Journal of Clinical

Investigation.

2004.

113: 796-798.

5. Emerging Infectious NIAID

and

Re-emerging

Diseases.

Emerging

List and

of Re-

emerging Diseases.http://www.niaid.nih.g ov/topics/emerging/pages/list.as px 6. Centro

de

Control

de

Enfermedades y Prevención del Instituto Nacional de Salud.

BIBLIOGRAFÍA 1. World

Biosafety

Health

Organization.

Laboratory biosafety manual.

in

andBiomedical

Microbiological Laboratories

Manual. 5th edition. 2009

3rd ed. Geneva; 2004.

2. Morens,D.M., Folkers, G.K. & Fauci, A. The challenge of emerging

and

re-emerging

infectious diseases Nature. 2004.

430: 242-249.

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14

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

INTRODUCCIÓN

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA

Las barreras se consideran todas las medidas técnicas, mecánicas, teóricas y sanitarias que tienen como fin evitar la

ZONA SPF (Specific Pathogen Free)

contaminación en cualquier sentido dentro de un área de producción, mantenimiento,

experimentación

o

sistema mixto, para poder tener como resultado animales con un estatus de calidad en dichas zonas.

Mª Isabel Gutierrez Cabezón Veterinaria

Cuanto mayor sea el número de

UNIVERSIDAD DE JAÉN

barreras implantadas mayor será el

Jacinto Cantero Jiménez

estatus

sanitario

podremos

alcanzar

bioseguridad.

animales.

Queremos

UNIVERSIDAD DE JAÉN

animales S.P.F.

Técnico

Servicio

Prevención

–

al

investigador

que

en

los

obtener

porque ofrecen garantías

de

ensayos experimentales fiables y reproducibles. Con las barreras conseguimos mantengan

animales en

un

se

ambiente

sanitario adecuado.

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15

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Las barreras se clasifican, de máxima a

3) Teóricas;

mínima seguridad, tipo I, tipo II, tipo

organizar

el

III, y tipo IV. El tipo tendrá la

interior

del

importancia para poder saber qué tipo

protocolos

de animales (sanitariamente) podemos

mantenimiento de aparatos y

tener en nuestro animalario.

equipos,

Hay cuatro medidas que hay que tener en cuenta;

Destinadas

a

funcionamiento

de

animalario: trabajo;

de

de

accesos,

autorizaciones de utilización del área

experimental,

de

reproducción y cría de animales,

1) Técnicas; Destinada a proyectar

cuarentena, etc. Profesionales

el animalario de tal forma que

que pueden aconsejar: Técnicos,

permita tener al animal, en el

investigadores, y expertos en

estatus sanitario referido. Los

animales de laboratorio.

profesionales con quienes debe

4) Sanitarias; Destinadas a crear

contarse para este fin serán:

un ambiente eficaz y seguro para

Arquitectos,

evitar

expertos

en

ingenieros

y

animales

de

laboratorios

contaminaciones

y

indeseadas.

Pueden aconsejar: expertos en

2) Mecánicas: Destinadas a cubrir las

zoonosis

necesidades

funcionamiento

que

de permita

cubrir los parámetros generales,

seguridad

biológica,

investigadores, veterinarios

y

médicos, expertos

en

animales de laboratorio.

de ventilación, climatización, sobrepresión, ruidos,

iluminación,

filtración,

esterilización, profesionales

limpieza,

etc. que

Los puedan

aconsejar serán ingenieros y expertos

en

animales

de

laboratorio.

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16

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

SITEMAS

Y

TÉCNICAS

FILTRACIÓN

DE

PARA

CLIMATIZACIÓN

Y

OTROS

Existen diferentes características que definen un filtro:

ENSAYOS Eficacia: equivale al rendimiento de un filtro. Es la proporción entre el número Quizás

la

en

el

es

la

respecto del número de partículas que

filtración tendente a garantizar la

chocan sobre él. Debemos conocer

ausencia de contaminación por

previamente la calidad de aire necesaria

concepto

medio

de

pieza de

clave

barrera

aerosoles

o

por

de partículas retenidas por el filtro

para seleccionar la eficiencia.

partículas transportadas por el aire.

Hay filtros de baja y de alta eficiencia,

dependiendo

En general la mayoría de los “habitáculos y

tamaño

equipos de barrera” utilizan como principio

retenidas. Su eficiencia se mide

la filtración del aire.

de

las

del

partículas

gravimétricamente, valorando el

Filtros: son barreras que retienen partículas

porcentaje

de tamaño inferior a los intersticios o huecos

partículas de polvo retenidas.

en

peso

de

las

por donde pasa el aire. Dado el tamaño tan variable de las partículas suspendidas en el aire se utilizan diferentes técnicas de filtración o combinación de ellas.

Los materiales utilizados como filtro suelen ser fibra de vidrio (el más común por sus muchas ventajas elasticidad, resistencia al fuego y a la abrasión no se deforma y es fácil obtener fibras de diversos tamaños), tejidos metálicos y fibras sintéticas.

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17

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Los de alta eficiencia llamados

En el caso de filtros absolutos, están identificados por el modelo, dimensiones,

filtros

absolutos

retienen

partículas pequeñas, incluso de 0,1

µm

(ULPA),

pero

los

caudal (m3/h), peso, pérdida de carga inicial y pérdida de carga final.

más

frecuentes en las instalaciones para animales con zonas limpias

Pérdida

de

carga:

es

la

energía

requerida para hacer pasar el aire a través del filtro. El filtro va sufriendo una

retienen de 0,5-5 µm e incluso menores

(0.3-0.5

µm,

filtros

HEPA).

colmatación por las partículas que son atrapadas por este. Debido a ello, cada vez

será

necesario

vencer

mayor

resistencia para que pueda pasar el aire.

La eficacia de los filtros aumenta al disminuir el tamaño de las partículas, ya que tendrán mayor movimiento molecular y la adhesión molecular al filtro es mayor.

La pérdida de carga del filtro nos indica su duración, se mide en milímetros de columna de agua (mm.c.a). Dependiendo del tipo de filtro a elegir, éste vendrá con

Otros factores que optimizan la filtración son una mayor densidad de fibra de vidrio (mayor obstáculo que atrapa las partículas) y la velocidad del aire (a menor velocidad mayor

una información de pérdida de carga inicial y otra final. Cuando llegue la resistencia del filtro a la indicada por el fabricante, éste será sustituido.

tiempo de contacto con las particulas).

Penetración: es la proporción entre la concentración de partículas que atraviesan un filtro respecto a una concentración conocida de estas partículas que llegan al mismo.

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18

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Generalmente

la

pérdida

de

carga

Orientaciones prácticas: el flujo de

aumenta con la eficiencia de un filtro. Por

aire tiene que ser lo más uniforme

ejemplo, un filtro de eficacia 99,95%

posible en toda la superficie del filtro.

para partículas de 0,3 µm (Clase H-13)

Actualmente todas las instalaciones

puede tener una pérdida de carga inicial

disponen de pre-filtros antes de los

entre 12 a 30 mm.c.a dependiendo de

filtros de alta eficacia (protegen a éste,

dimensiones, caudal, etc. y una pérdida

alargando su vida).

de carga final recomendada por el fabricante

entre

50

a

60

mm.c.a.

Deben

ubicarse

manómetros

Aumentando la superficie de filtrado

diferenciales en cada área de filtración

disminuye su pérdida de carga de tal

para conocer el ritmo de colmatación de

forma que si aumentamos el área de

los filtros y sondas que registran el

filtración en un 50% duplicamos la

caudal o flujo diferencial de aire,

duración del filtro.

indicando mediante un sistema de alarma su colmatación o perdida de

Capacidad de retención del polvo: es

eficiencia. El punto de entrada del aire

el peso en gramos del contaminante que

del exterior estará protegido con mallas

retiene, cuando la pérdida de carga del

que impidan la entrada de animales

filtro llega al nivel de carga final

(incluidos insectos) a los conductos.

indicado (en el filtro), habiéndose

Hay que evitar prolongar el uso de los

mantenido constante el caudal de aire.

filtros cuando han sobrepasado la

El

pérdida de carga final indicada por el

99,9%

de

las

partículas

en

suspensión en el aire, tienen un tamaño

fabricante.

inferior a 1 µm. Se considera que por cada 10.000 partículas en el aire hay un patógeno

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20

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

La secuencia normal de filtración en una instalación para animales SPF se

Estos

basa en la disposición de prefiltros

armarios ventilados donde se disponen

(90% de eficacia) en la rejilla de

cubetas con animales en condiciones

impulsión de aire desde el exterior; a

estériles (ya que el aire entra filtrado)

continuación, el aire pasa por una

hasta cubículos con capacidad para

bateria de lámparas de rayos UV

varias estanterías de jaulas. Todos ellos

(acción bactericida inmediata) a un flujo

tienen aire filtrado de alta eficiencia y

constante; seguidamente, humedece o

pueden incorporar equipos de aire

deshumedece y pasa por un segundo

climatizado.

filtro

de

bolsas

del

95%,

equipos

pueden

ser

desde

para

finalmente salir a la zona de animales por medio de filtros HEPA del 99.9% de eficacia, con capacidad de retención, en condiciones óptimas, del 99.9% de las partículas que tranporta el aire

Las más comunes son • Armarios ventilados.

• Estanterías con jaulas ventiladas.

• Paneles móviles con flujo de aire horizontal.

• Aisladores.

inferiores a 0,3).

• Habitáculos fijos.

• Unidades móviles.

Habitáculo y equipos barrera En la actualidad, el desarrollo de equipamientos

de

filtración

y

aislamiento hacen bastante fácil la instalación

de

áreas

limpias

Sobrepresión

que

permiten mantener y experimentar con animales protegidos del medio exterior.

Es una de las barreras prioritarias para proteger de contaminación por via aérea las instalaciones. Su eficacia se consigue equilibrando correctamente la impulsión y la aspiración o extración del aire al exterior.

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21

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

El orden de sobrepresión será:

OZONIZAIÓN

mayor grado de presión de aire en el pasillo limpio, menor grado en las

El

ozono

es

un

excelente

celdas de animales e inferior en el

desodorante, aunque es inodoro. El olor

pasillo sucio.

con el que se lo suele identificar es una combinación de ozono y nitrógeno

De esta forma, la circulación del

denominado

siempre en dirección pasillo limpio al

compuesto por tres átomos de oxígeno

pasillo sucio, y nunca al revés. En

03, y su punto de ebullición es -112ºC.

óxido

nítrico.

Está

aquellas zonas experimentales en que se trabaje

con

agentes

o

Artificialmente se puede producir por

en

lámparas; pero sólo a unos centímetros

depresión para impedir que salga al

de distancia, por lo que es necesario que

exterior,

circule el aire cerca de las mismas para

contaminantes,

el

patógenos

aire

generando

estará

infecciones

indeseadas por aerosoles.

trasladarlo hacia todos los puntos.

Para identificar los diferentes niveles de presión,

se

diferenciales

utilizan o

bien

manómetros sistemas

electrónicos que al detectar algún cambio en la diferencia de presión hacen sonar una alarma.

El ion activo de oxígeno se combina químicamente

con

sustancias

ambientales cambiando su carácter, siendo uno de los efectos de la oxidación, por lo cual una sustancia olorosa se transforma en otra inodora.

Como mínimo existirá una diferencia de

También se puede generar activando el

presión de 1 mm.c.a de nivel de

oxígeno del aire mediante descargas de

columna de agua entre las zonas que

alto voltaje rompiéndose la molécula de

necesitemos diferenciar, ejemplo: 1 mm

oxígeno y recombinándose sus átomos

entre zona limpia y las celdas, y 1 mm

para formar ozono.

entre las celdas y la zona sucia. Por tanto entre el pasillo limpio y sucio la diferencia de presión será 2 mm.c.a. www.biotecnologiahospitalkaria.com

22

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Esto se consigue haciendo pasar aire

Los equipos de humidificación también

atmosférico lentamente a través de unos

pueden

electrodos conductores que tienen una

inyectándolo

lámina dieléctrica entre los mismos; es

concentración de 0.8-1 mg/l, luego el

la inestabilidad del ozono la que hace

agua se pasa a un tanque de reacción

que tenga una actuación rápida sobre

durante cierto tiempo para asegurar la

cantidad de microorganismos.

eliminación de los microorganismos y

ser

tratados en

con

el

agua

ozono, a

una

materia orgánica. A la salida del tanque Una aplicación interesante del ozono es

la concentración de ozono residual en

introducirlo en los conductos del aire

agua no debe ser superior a 0.1 mg/l.

para

desinfectar

los

equipos

de

climatización, ya que es una de las tareas más difíciles de realizar en las instalaciones.

Si existe evidencia de contaminaciones

SISTEMAS

DE

LIMPIEZA,

DESINFECCIÓN

Y

ESTERILIZACIÓN

a través de los conductos y equipos de climatización del aire, la concentración de

ozono

se

incrementa

teniendo

presente que en los locales por donde salga el aire no debe haber animales ni personas, pues es irritante cuando pasa de

una

determinada

especialmente

en

concentración,

ojos

y

aparato

respiratorio (110 a 175 µg/m3) (véase directiva 91/C192/05 de la UE).

Limpieza: Es el conjunto de operaciones que eliminan

la

materia

orgánica

e

inorgánica del material o superficies. La materia

suele

estar

fijada

a

las

superficies a limpiar con mayor o menor fuerza de adherencia, por lo que hay que emplear medios químicos y mecánicos para superar las fuerzas que se oponen al desprendimiento de dicha materia.

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23

B

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24

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Entre los detergentes aniónicos se Los medios químicos utilizados con este

incluyen los jabones, como grupo más

propósito se denominan detergentes. En

importante. En disolución con el agua

su aplicación tendremos en cuenta

se

factores tales como la temperatura del

normalmente de sodio (Na+), e iones de

agua y el detergente disuelto en ella,

ácidos

concentración del detergente y tiempo

esquemática:

disocian

grasos

para

formar

según

la

iones,

fórmula

de contacto con la superficie a limpiar Poseen efecto antibacteriano contra organismos gram positivos y ácido-

Detergentes: que

resistentes. Los detergentes catiónicos

disminuyen la tensión superficial de las

incluyen a los compuestos de amonio

soluciones acuosas y emulsionan los

cuaternario

compuestos lipídicos permitiendo su

representantes.

Son

compuestos

suspensión

en

químicos

el

agua.

como

principales

Estos

compuestos no sólo se usan en limpieza,

El ion hidrófobo de la molécula que se

sino también como agentes humectantes

disocia tiene una carga positiva en su

y emulsionantes.

extremo polar. Por su parte, los detergentes noiónicos carecen de carga

Hay

tres

grupos

de

detergentes

dependiendo de la carga que presente el extremo

polar

de

la

neta en el extremo polar de su sección hidrofóbica.

molécula:

aniónicos, catiónicos y noiónicos.

Cuando

se utilicen

dos

tipos

de

detergentes para el lavado, uno puede neutralizar al otro, lo que exige hacer un enjuague o aclarado intermedio.

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25

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

A igual concentración básica, los

b) Desprendiendo la suciedad de las

detergentes catiónicos son más eficaces

superficies a limpiar : las moléculas de

que los detergentes aniónicos porque,

detergente se disgregan en dos partes,

además de su acción emulsionante, se

una con carga negativa y otra con carga

combinan parcialmente con proteínas,

positiva, creando fuerzas eléctricas de

grasas y algunos fosfatos mejorando su

repulsión que arrancan las partículas de

“arrastre” durante el lavado.

suciedad que flotarán en el agua formando micelas. Las colas hidrófobas

El detergente en contacto con el agua

del detergente se unen a la grasa

funciona

mientras las hidrófilas lo hacen al agua.

rebajando

la

tensión

superficial del agua. Las gotas de agua tienen forma esférica porque las fuerzas

c) Impidiendo que la suciedad se

de atracción entre sus moléculas no

deposite de nuevo en las superficies a

están compensadas en su superficie (La

limpiar: las micelas así formadas tienen

gota está en estado de tensión).

la

misma

carga

eléctrica

que

la

superficie limpiada, por lo cual no se a) Las moléculas del detergente tienen

depositan

de

nuevo

un extremo hidrófilo que atrae al agua y

superficie.

una cadena hidrófoba que atrae a la

envuelven la suciedad serán expulsadas

grasa. Al entrar en contacto detergente y

con los enjuagues o aclarados.

Estas

sobre

partículas

dicha que

agua, los extremos hidrófilos de las moléculas de detergente se unen a las moléculas de agua, debilitando las fuerzas de atracción de éstas. Como consecuencia, la tensión superficial disminuye, la gota se aplasta y el agua “moja” el material, introduciéndose en todas partes y facilitando a su vez a las partículas

detergentes

ocupar

esos

mismos espacios.

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26

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

El

detergente

finalmente

“comercial”

acabemos

que

utilizando

Las

esporas

bacterianas

tienen

características de resistencia que las convierten en los agentes más difíciles

contendrá normalmente:

de a)El detergente propiamente dicho, los

eliminar

mediante

estos

procedimientos.

agentes tenso activos llamados también surfactantes, que modifican la tensión

Podemos considerar que la desinfección

superficial e interaccionan con las

es el paso intermedio entre la limpieza y

grasas (emulsionantes).

la esterilidad. El mejor medio de eliminar cualquier organismo es la que

aplicación de calor, pero no siempre

colaboran con el surfactante en su

resulta posible hacerlo con la intensidad

acción limpiadora. Suelen ser en su

suficiente (si el calor aplicado está por

mayoría alcalinizantes y ablandadoras

debajo de los 100º tiene una acción

del agua.

restringida) por la naturaleza de los

b)Sustancias

coadyuvantes

materiales a desinfectar. c)Auxiliares

que

no

considerar

agentes

se

(antiapelmazantes, fluorescentes,

pueden

limpiadores

Por tal motivo recurrimos a sustancias

substancias

desinfectantes que podemos definir

blanqueantes,

entre

como agentes químicos que destruyen

otros.). Existen además detergentes que

las

formas

vegetativas

de

los

incorporan algún desinfectante

microorganismos patógenos y que son menos eficaces frente a las esporas.

Desinfección: Este

concepto

procedimientos empleados

físicos para

agrupa o

los

químicos

destruir

los

microorganismos que tienen capacidad patógena.

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27

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

A pesar de ello, a nivel general actúan La

acción

específica

desinfectantes

de

sobre

los

de la siguiente forma:

los

•Coagulan las proteínas o provocan la

microorganismos los clasifica en:

precipitación

•Biocidas

haciéndolas a funcionales.

(bactericidas,

fungicidas,

de

membrana

mismas,

virucidas), matan las formas vegetativas

•Rompen

de los microorganismos.

provocando su muerte.

•Bioestáticos

•Inducen la unión de los grupos

(bacterioestáticos,

la

las

celular,

la

sulfhidrilo libres; las células cuyas

reproducción o la multiplicación de los

proteínas enzimáticas contienen cisteína

microorganismos

y cadenas laterales terminadas en SH,

fungistáticos),

interfieren

sin

en

matarlos

realmente.

no pueden funcionar sin que los grupos

•Esporicidas, consiguen matar esporas

SH estén libres y reducidos. Si los

bacterianas o fúngicas.

grupos sulfhidrilo se fijan la célula queda dañada.

Los Mecanismos de acción de los

•Antagonismo químico; la afinidad de

desinfectantes son complejos y algunos

las enzimas por sus substratos naturales

pocos entendidos, ya que un mismo

es lo que permite realizar la acción

desinfectante, variando parámetros de

catalítica. Si un compuesto se asemeja

tiempo y concentración, tiene acción

mucho a un substrato en sus aspectos

diferente.

esenciales, la enzima mostrará afinidad por ese compuesto. Si la afinidad es muy fuerte el compuesto sustituye al substrato natural de la enzima, evitando la reacción normal e inhibiendo el metabolismo celular.

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28

20/24 octubre 2014, Barcelona

Curso de Técnico de Calidad Ambiental en Interiores (TSCAI/TMCAI), acreditación necesaria para, en aplicación de la norma UNE 171330-2 171330 2 “Calidad de Ambiente en Interiores”, Interiores”, realizar inspecciones. _________________________________________ MAS INFORMACION

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29

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Al plantearnos la elección de un desinfectante debemos realizar una

•Tiempo de recuperación (p. ej., en el

cuidadosa

evaluación

integrando

caso de fumigación, sería el periodo que

criterios

científicos,

técnicos,

es necesario esperar, para que el acceso

económicos y de seguridad con grandes

al área fumigada no sea tóxico para las

dosis de pragmatismo.

personas).

Evidentemente, escoger el desinfectante

Por otra parte, tanto para garantizar la

más potente nos podría garantizar la

correcta acción del desinfectante como

eliminación de la contaminación, pero

la seguridad del personal que deba

puede ser un absurdo desde el punto de

utilizarlo, adoptaremos las siguientes

vista operativo, poseer una relación

precauciones:

coste-beneficio desfavorable o generar

•Utilizar siempre equipo limpio para su

altos niveles de riesgo para el personal.

aplicación.

Hay que conocer en primer lugar sobre

•Limpiar la materia orgánica de la

qué microorganismos queremos actuar

superficie a desinfectar.

y en qué proporción se encuentran.

•Diluir

el

producto

según

las

recomendaciones del fabricante.

A partir de aquí, es imprescindible

•Dejar

tomar en consideración:

permanezca humedecida con la solución

•Composición

química

del

que

la

superficie

tratada

desinfectante al menos

desinfectante, siempre compatible con

durante 5 minutos.

los materiales a tratar.

•Cambiar

•Temperatura de actuación el producto.

inmediatamente si se observa alguna

•Tiempo de contacto del desinfectante

suciedad.

con los microorganismos a eliminar.

•Renovar

•Concentración de los principios activos

cuando se cambie de sala o zona.

del producto y forma de preparación.

•Respetar el tiempo de recuperación

•Forma de aplicación (vaporizado, en

definido por el fabricante.

la

la

solución

solución

desinfectante

desinfectante

forma de spray , etc.).

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30

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Clasificación de los desinfectantes

Según su nivel de actividad

Según composición química

Se clasifican en desinfectantes de

•Alcoholes: etanol, isopropanol.

niveles alto, intermedio o bajo, en

•Aldehídos:

función de su capacidad microbicida.

glutaraldehído,

Los desinfectantes de alto nivel son

formaldehído. cetrimida,

eficaces frente a formas vegetativas de

cloruro de benzalconio, cloruro de

bacterias y hongos y virus. En tiempos

benzetonio y cloruro de cetilpiridina

largos de contacto (3 a 10 horas) son

•Anilidas: triclocarban.

esporicidas. Algunos ejemplos son el

•Biguanidas: clorhexidina, alexidina.

glutaraldehído

•Diamidinas:

23glutaraldehído

•Amonios

cuaternarios:

propamidina,

alcalino, fenolato,

dibromopropamidina.

duopropenida

(yoduros

•Fenol y compuestos fenólicos: cresol,

cuater-nario),

ácido

amilfenol,

peróxido

bitionol,

bisfenoles

cloro

y

amonio

peracético

hidrógeno.

y Los

desinfectantes de nivel intermedio son

(triclosan, hexaclorofeno).

•Halogenados:

de

de

N-

compuestos

activos frente a formas vegetativas de

clorados, yodo y yodóforos.

bacterias y hongos siendo inactivos

•Compuestos de metales pesados (sales

frente a esporas y Mycobacterium

de plata y minerales, Mercromina,

tuberculosis..

Mercresol o Tiomersol)

El

•Oxidantes: peróxido de hidrógeno,

compuestos yodados (povidona yodada)

ácido peracético

y los alcoholes (alcohol etílico, alcohol

•Otros: amidas, ureas, óxido de etileno

isopropílico) son algunos ejemplos. Por

y derivados del ácido carbónico

su parte, los desinfectantes de bajo nivel

hipoclorito

sódico,

algunos

no son activos frente a virus pequeños no lipídicos, ni frente a Mycobacterium tuberculosis ni a esporas bacterianas y poseen baja actividad frente a hongos.

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31

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Su actividad se circunscribe a formas vegetativas bacterianas y algunos virus

Los más habituales son: alcoholes

encapsulados. Suelen utilizarse como

(etílicos e 24 isopropílicos), ácidos

antisépticos.

(acético, salicílico, láctico, bórico), agentes

oxidantes

(peróxido

de

Según su área de aplicación

hidrógeno), compuestos halogenados

•Atmosféricos: pueden ser convertidos

(yodo,

en

clorhexidina.

vapor

(por

calentamiento

–

povidona

yodada)

y

termonebulización-) y se usan para la desinfección de locales y aisladores,

Desinfección por radiación ultravioleta

como el formaldehído, peróxido de

Las bacterias, virus y la mayoría de

hidrógeno.

hongos son vulnerables a los rayos

•Para instrumental: poco corrosivos,

ultravioletas con longitud de onda

fácilmente eliminables por lavado o

menor de 3.000 Å. Son producidos por

evaporación (glutaraldehído).

lámparas de vapor de mercurio con una

•De superficie: para suelos y paredes,

emisión de 2.400 a 2.800 Å. La

mobiliario, cabinas de bioseguridad, etc.

intensidad de las lámparas se expresa en

Se utilizan casi todas las familias

microvatios por cm 2 y para obtener la

químicas y niveles de actividad en

dosis de radiación UV que se está

función del grado de desinfección

aplicando basta con multiplicar dicha

deseado.

intensidad por el tiempo de exposición.

•Antisépticos: preparaciones aplicadas a

Como ejemplo, para poder matar el

tejidos vivos (en la piel, para eliminar

99,9% de un inóculo de Escherichia coli

en lo posible todos los microorganismos

son necesarios 12.000 µw/seg. y cm2.

que

residen

habitualmente

o

transitoriamente en la misma; en los tejidos en general que son asiento de infección o pueden serlo).

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32

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Esterilización

Los hornos suelen contar también con

Se define como un proceso físico o

filtros HEPA para introducir aire que

químico que produce la eliminación

enfríe el interior una vez terminada la

total de la carga microbiana de un

esterilización. El aire es mal conductor

objeto,

formas

del calor, por lo cual éste penetra

esporuladas. Existen tres métodos de

lentamente en los objetos, necesitándose

esterilización físicos (por calor seco,

un “tiempo de penetración del calor”

vapor de agua y radiaciones) y dos

cuidadosamente establecido en función

métodos químicos (óxido de etileno y

de los materiales a esterilizar. Se define

formaldehído).

así mismo el “tiempo de retención”

incluyendo

las

como el tiempo necesario que asegura Esterilización por calor seco (hornos):

que

todas

las

esporas

consiste en exponer los objetos a

resistentes han muerto.

bacterianas

temperaturas elevadas (160 a 200ºC) durante periodos de tiempo de 1 a 2

Esterilización

horas.

se

(autoclave de vapor): se considera la

consigue por conductividad, pasando el

más adecuada dado su alto poder de

calor desde las superficies de los

penetración, elevada acción microbicida

objetos hacia el interior de los mismos.

en cortos periodos de tiempo, ausencia

Normalmente el esterilizador es una

de residuos tóxicos, bajo costo y fácil

cámara con un cuerpo calefactor y con

control de los procesos. El principio

la ayuda de un ventilador se distribuye

físico de la esterilización con vapor se

el calor por la cámara homogéneamente.

basa en el hecho que el agua hierve

La

acción

esterilizante

con

vapor

de

agua

cuando su presión de va por iguala a la atmosférica que la rodea.

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33

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Si aumenta la presión en el autoclave, también aumenta la temperatura de

Antes de usar por primera vez un

ebullición del agua, situándose por

autoclave y al menos una vez al año

encima de 100ºC. Al entrar el vapor en

durante la vida del equipo, debe

contacto con superficies más frías cede

efectuarse una validación de todos los

su calor y se condensa en agua. La caída

programas del mismo para confirmar

de presión resultará en más vapor

que realiza correctamente su función

aplicado a dicha área hasta que la

esterilizadora.

temperatura de la superficie sea igual a Esterilización

la del vapor.

mediante

radiaciones

ionizantes: las radiaciones de alta Gracias a este efecto se consigue la

energía, particularmente la radiación γ ,

penetración del vapor a través de toda la

se utilizan para la esterilización de

carga a esterilizar, liberándose calor

materiales que no toleran las altas

latente

temperaturas y que pueden ser atacados

que

destruye

los

microorganismos.

por

los

desinfectantes

químicos.

Múltiples elementos plásticos de uso Para una correcta esterilización no debe

frecuente

quedar aire dentro del autoclave ya que

esterilizan mediante este procedimiento,

el vapor al mezclarse con el aire no

así como algunos piensos para la

podrá llegar a todos los puntos de la

alimentación de los animales.

en

los

laboratorios

se

carga a esterilizar. Suele resolverse este problema realizando el vacío en la

Óxido de etileno: es un gas muy

cámara del autoclave antes de comenzar

penetrante y altamente explosivo a

la esterilización.

concentraciones en el aire mayores del 3% (la concentración máxima segura en

El vapor debe ser puro y saturado, sin

aire es de unas 10 ppm. en volumen).

partículas, y estar en equilibrio con el agua a una determinada temperatura. Se pueden programar diferentes ciclos para cada tipo de material a esterilizar.

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34

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

La acción esterilizante del óxido de

Esterilización

etileno está en función del tiempo,

normalmente se utiliza para aquellos

temperatura, humedad relativa y presión

materiales que no pueden esterilizarse

del gas.

en autoclave de vapor, bien por su tamaño

con

o

formaldehído:

porque

no

La acción del oxido de etileno se

temperaturas

atribuye a su poder alquilante de los

esterilizante del formaldehído se debe a

grupos sulfhidrilo, amino, carboxilo e

su propiedad de reaccionar con los

hidroxilo de las moléculas proteicas. Es

grupos amino de las moléculas proteicas

efectivo

produciendo un efecto letal sobre los

contra

todo

tipo

de

elevadas.

microorganismos, incluyendo virus y

microorganismos,

esporas bacterianas.

vegetativo

como

tanto

La

resisten

en

acción

estado

esporulados.

La

concentración debe ser del orden de 2 En los autoclaves basados en este

mg/L.

compuesto, el óxido de etileno se utiliza mezclado con otros gases de soporte

Esterilizacion con peróxido: el peróxido

(clásicamente clorofluorocarbonos, en

de hidrógeno es un potente agente

la

carbono

oxidante que, en forma gaseosa o de

principalmente) sometido a diferentes

vapor y al contrario de lo que ocurre en

temperaturas según qué se quiera

fase

esterilizar

espectro de actividad microbicida y es

actualidad

dióxido

(hasta

de

60ºC

y

en

líquida,

presenta

un

amplio

concentraciones de 1.2 a 1.4 mg/litro).

rápidamente esporicida.

Los ciclos pueden durar desde 1 hasta

Es

18 horas para aquellos materiales que

esterilización a baja temperatura que

permitan una menor penetración del

permite la biodescontaminación de salas

gas.

o pequeños habitáculos cerrados (en

una

aplicaciones

tecnología

que

rápida

de

denominábamos

aplicaciones a presión atmosférica).

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35

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Es virucida, esporicida , fungicida y

b) Las cubetas vacías son depositadas

bactericida. Fácil de usar, no deja

en la cinta del túnel de lavado

residuos y bueno en presencia de

lavaracks y a medida que las cubetas

materia orgánica.

salen

limpias,

se

encarga

de

recogerlas y apilarlas en carretillas o en bandas de transporte que las

Sistema de limpieza por aspiración

conduce a la zona de llenado de Aunque no es muy extensa la implantación de aspiración centralizada para deshacerse de todos los residuos generados en los animalarios, sí que merece una especial mención, ya que evitan

contaminaciones

de

diversa

índole al eliminar los circuitos de residuos por áreas. Este sistema se hace en tres pasos

viruta. Este sistema es muy flexible, permitiendo tratar otros materiales transportados en cestas codificadas (botellas de agua, tapaderas de jaulas, cobertores, etc.). c) El llenado de viruta se realiza automáticamente por medio de un dosificador que aporta la cantidad de viruta que necesita cada tipo de

a) Una vez que han llegado las cubetas sucias al área de lavado se vacía su contenido en un recipiente especial que aspira la cama sucia y la conduce a un contenedor donde se almacena hasta su recogida por los servicios de limpieza e inclusive

cubeta, el cual consta de un equipo de aspiración que transporta los lechos

desde

donde

están

almacenados hasta un dispensador, que lleva a cabo su distribución. El sistema extrae el polvo de los lechos limpios.

puede pasar directamente a un incinerador.

El

recipiente

de

aspiración evita la acumulación de polvo

en

el

disminuyendo

área

de

lavado

igualmente

la

proporción de alérgenos.

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36

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Uno de los problemas más frecuentes que

puede

observarse

en

los

animalarios, afecta a los cubos de basura

que

son

sacados

con

los

Sus principales características son las siguientes:

desechos procedentes de las jaulas de

a) Las puertas no se pueden abrir al

animales, y dejados en la calle para su

mismo tiempo, debido a un

recogida por los servicios de limpieza,

anclaje eléctrico que permite

pues bien, son un auténtico reclamo

abrir una puerta cuando la otra

para los roedores salvajes que atraídos

esta cerrada.

por el olor de los restos de los roedores

b) El mismo sistema impide que la

de laboratorio, tocan, lamen o manchan

presión de aire del interior de la

los

son

cabina no sea inferior al del área

introducidos de nuevo vacíos en las

limpia no podrá abrirse la otra

instalaciones,

puerta.

cubos

que

más

creando

tarde

un

puente

c) Generalmente estos habitáculos

perfecto a la contaminación.

disponen en su interior de luces U.V. que mantienen controlado el

crecimiento

de

Sistemas de doble puerta (SAS o

microorganismos.

AIR-LOCK)

puede emplearse algún sistema de

Con frecuencia es necesario pasar

También

desinfección

rápido

(formolización o peróxido de

de una zona contaminada a otra limpia,

hidrógeno),

o hacer entregas de material o animales

breve espacio de tiempo el

de una zona limpia a otra menos

habitáculo

protegida. Para ello se dispone de

nuevamente.

diferentes

tipos

de

que

recupere

para ser

en

utilizado

habitáculos

adaptados al paso de personal y material grande, para la salida de material sucio o para el paso de animales.

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37

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Hay que evitar tener las puertas de las

Pasillos y accesos

celdas abiertas, ya que las presiones no En la actualidad es encontrar

instalaciones

frecuente

con

doble

pasillo, por donde circula todo el material necesario . Supone una gran ventaja contar con esta doble vía que permite

recibir

por

un

pasillo

(denominado sucio) todos los materiales procedentes de las celdas de animales

se podrán mantener debido al flujo de aire que escapará hacia donde hay menos presión, tendiendo a igualarse ésta entre los dos pasillo. No se abrirán nunca ambas puertas de una celda al mismo tiempo. El anclaje eléctrico permite

resolver

este

problema

automáticamente.

(cubetas, jaulas, viruta, botellas, etc.) que son conducidos a una zona de lavado en donde se procesará dicho

Zonas de seguridad biológica

material y se someterá a lavados e Estas zonas se diseñan para trabajar

incluso a esterilizado. con El material una vez tratado pasará a otra zona

(almacén

limpio)

para

ser

distribuido a las celdas a través del pasillo denominado limpio. El pasillo limpio estará en sobrepresión con respecto a la zona de lavado y pasillo sucio (el aire circula del pasillo limpio hacia las celdas y de las celdas hacia el pasillo sucio).

agentes

patógenos,

radiactivos,

isótopos animales

inmunodeprimidos, etc. En ellas el aire está en depresión para evitar que salga al

exterior

Suelen

cualquier

disponer

de

contaminante. equipos

de

esterilización para el material que tenga que salir al exterior (cubetas, jaulas, equipos de manipulación, etc.) y el acceso está siempre controlado y sólo para personas autorizadas. Disponen de vestuarios para el cambio de ropa antes de acceder a manipular los animales.

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38

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Por

tanto,

el

material

sucio

se

Equipos de lavado de jaulas y

introducirá por la zona de lavado y se

material

extraerá por la zona de almacenamiento de material limpio.

Es otra de las piezas importantes de una instalación

de

producción

y/o

experimentación animal.

Filtración y tratamiento del agua

Se considera como una auténtica barrera

Es prioritario someterla a un tratamiento

debido a que generalmente permite

que garantice la ausencia de carga

programas de lavado con uno o más

microbiológica,

tipos de detergente (ácido, alcalino), el

Pseudomonas

agua

diferentes

Clostridium. Su disponibilidad para los

temperaturas (hasta 80ºC) para que la

animales será en todos los casos ad

limpieza sea lo más eficaz posible. Los

libitum. El agua se somete a diferentes

equipos actuales disponen de diferentes

tipos de tratamientos:

se

utilizad

a

programas para alargar o acortar los

especialmente spp.,

Coliformes

y

Cloración: con una concentración

igualmente

de cloro libre residual de 0.5 mg/l se

someter el material a ciclos de vapor o

mejora considerablemente la calidad del

desinfectantes.

agua, ya que tiene un gran poder

tiempos

de

lavado,

e

oxidante

tanto

sobre

sustancias

orgánicas como inorgánicas (al margen Otra de las ventajas es que nos permite comunicar por medio de las puertas

o

bocas

de

la

de su bajo coste).

Acidificación: se trata de añadir

lavadora

ácido clorhídrico al agua hasta un pH de

(dependiendo si el modelo es de túnel o

2.5 aproximadamente: este medio ácido

de armario) la zona de lavado con la

impide que los microorganismos se

zona de almacenamiento de material

multipliquen.

limpio.

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39

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Estos

dos

sistemas

son

bastantes

Esterilización

con

rayos

eficaces, ya que permiten tener el agua

ultravioletas: consiste en el paso del

en los biberones durante períodos de 2 ó

agua a través de uno o varios tubos de

3 días en buenas condiciones sanitarias.

cierta longitud (1 metro o más) que

Si el agua contenida en los biberones no

disponen de lamparas de rayos UV

tuviese

se

protegida herméticamente, con emisión

contaminaría con bastante rapidez, pues

de radiaciones una longitud de onda de

los animales (sobre todo roedores)

254 nm de alta eficacia bactericida. La

suelen dejar residuos de comida, saliva,

destrucción de microorganismos suele

viruta, etc., que se introducen dentro de

ser instantánea.

tratamiento

alguno

la botella. Esto hace necesario sutituir con frecuencia la botella entera (mínimo dos veces en semana).

Esterilización en autoclave: es otro de los sistemas aplicados al agua. En centros, donde se alojen animales en

Filtración: previo a la cloración o acidificación se puede someter al agua a filtración. Se hace 2 ó 3 filtros de carbono activo, de diferente grado de filtración para que los residuos que transporta el agua se depositen de acuerdo a su tamaño. El grado de filtración oscila entre 40 - 10 y 5 µm, dependiendo de la calidad del agua de la red.

condiciones SPF, inmunodeprimidos o similar es el método más seguro.

Siempre y cuando el colectivo animal sea reducido.

Ozonización:

el

ozono

es

un

oxidante puro que reacciona muy bien con el agua sin dejar subproductos pudiéndose emplear en exceso sin contraindicaciones, al descomponerse espontánea y rápidamente en el agua (para una concentración de O3 en agua de 3 g/m3 es necesario inyectarlo en una concentración de 10 g/m3).

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BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

La desventaja del ozono, es su

En la pared que divide las dos

acción corrosiva sobre las conducciones

zonas, baja una placa transparente que

y tuberias (hierro, plomo y en menor

cubre todo el ancho del tanque hasta

medida

introducirse unos centímetros dentro del

al

plástico).

Como

características destacan:

liquido. Este sistema permite pasar productos o incluso animales metidos

•

Eliminación

de

olores

y

sabores.

en una bolsa herméticamente cerrada, sumergiéndola debajo de la placa, podrá

• Decoloración del agua.

ser recogida al instante por el operario

• Oxidación de las sales ferrosas,

que está en la otra zona. Se emplea para

manganésicas y sulfurosas.

• Eliminación de fenoles.

introducir en la barrera material no esterilizable.

• Reducción de las proporciones de detergentes.

Barreras

antiroedores

y

atrapa-

insectos Tanque de inmersión (dunk-tank o dip-tank)

Los roedores salvajes suponen un riesgo latente si hacen aparición en el

Permiten el paso de material de una

animalario es por ello que suele

zona a otra atravesando un medio

emplearse un sistema bastante simple y

liquido. Consta de un depósito situado

que consiste en colocar una chapa de

estratégicamente entre una zona limpia

unos 30-40 cm. (terminada en forma

y otra sucia, este tanque está cubierto de

curva por arriba) en las bases de los

un desinfectante de amplio espectro,

marcos de todas aquellas puertas que

hasta un determinado nivel.

dan al exterior.

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41

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

Estas chapas se deslizan sobre unas

Por ello, es importante la elección del

guías, por lo cual son bastante fáciles de

equipamiento

quitar y poner.

función que en general se compone de batas,

Los equipos para atrapar insectos, constan

de

una

luz

ultravioleta

denominada luz negra (no es peligrosa, ya que es de 330-380 nm), tiene la particularidad de atraer a los insectos,

adecuado

guantes,

protectores

para

mascarillas,

de

cada

gorros,

zapatos,

etc.

Dependiendo de las diferentes áreas que tenga el centro (zona sucia, limpia, experimental, etc.) se distribuirá la ropa adecuada para cada una de ellas.

razón por la cual se coloca cerca de un campo eléctrico de alta tensión que electrocuta al insecto al rozar sus alas

Equipos

en estos circuitos. Este método es muy

(generador eléctrico)

de

corriente

autónoma

eficaz para todos los insectos voladores.

Estos equipos son de suma importancia debido, entre otras razones, a la garantía de recepción de energía eléctrica en Utilización de ropa específica

caso de fallos en la red general.

El hombre es portador de un elevado número de microorganismos que emite

En este tipo de instalaciones no hay otro

constantemente a su entorno por medio

sistema de ventilación auxiliar, dada la

de partículas que desprende al hablar,

ausencia de ventanas u otras vías que

respirar, toser, por descamación cutánea

podrían aportar aire fresco, y por lo

y

tanto hay que garantizar mediante un

principalmente

ejercitando

movimientos.

generador

cualquier

deficiencia

de

energía eléctrica, que impidiese el funcionamiento de los equipos de ventilación,

climatización

u

otros

equipos.

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42

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

En la actualidad muchos de estos equipos o parte de ellos (plantas

Cuando proceda debe instalarse un

enfriadoras, fancoils, humedificadores,

grupo electrógeno auxiliar, con el fin de

etc.) están duplicados, para garantizar,

asegurar el funcionamiento de los

en

sistemas

caso

de

averías,

la

correcta

ventilación.

esenciales

para

la

supervivencia de los animales y de la iluminación en caso de avería e

Sistemas de alarma

interrupción en el suministro.

Se recomienda que esté protegido mediante la instalación de dispositivos que detecten los incendios y la entrada

Se

colocarán

instrucciones

en

lugar

claras

sobre

visible los

procedimientos a seguir en caso de

de personas no autorizadas.

emergencia. Se recomienda instalar Los defectos técnicos o las averías del

alarmas en los viveros de peces por si

sistema de ventilación son otro riesgo

fallara el suministro de agua.

que puede causar molestias e incluso la muerte de los animales por asfixia o exceso de calor o en los casos menos graves, tener efectos negativos sobre un procedimiento hasta el punto de hacerlo

Se procurará que el funcionamiento de un sistema de alarma produzca los menores

trastornos

posibles

a los

animales.

fracasar y obligar a repetirlo.

En consecuencia,

conviene instalar

dispositivos de detección adecuados en conexión con el sistema de calefacción y ventilación con el fin de que el personal

pueda

supervisar

su

funcionamiento en general.

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43

BARRERAS MECÁNICAS PARA MANTENER UNA ZONA SPF – SPECIFIC PATHOGEN FREE

BIBLIOGRAFÍA; Alonso RM, Martí MC, Constans A: Trabajo Sistemas de intercomunicación

personal

entre las

distintas zonas, conviene definir y establecer un completo sistema de intercomunicación de las distintas zonas entre sí y con el exterior. Las señales sonoras

de

aviso

de

estos

intercomunicadores serán de intensidad moderada y trabajar a frecuencias no audibles o molestas para los animales.

Se puede utilizar telefonía movil y sistemas de ”buscas” para localización del personal, además del envío de mensajes

o

instruciones

por

informática.

animales

de

experimentación, INHST, Nota técnica

Con el fin de evitar la circulación innecesaria del

con

red

de prevención 468-1997 Booth

NH,

McDonald

LE:

Farmacología y terapéutica veterinaria, Vol II. Editorial Acribia, S.A. 1987.

CDC-NIH:

Biosafety

Microbiological

and

in

Biomedical

Laboratories, 3ª ed, CDC-NIH, 1993.

Constans A: Exposición a agentes biológicos: seguridad y buenas prácticas de laboratorio, INHST, Nota técnica de prevención 376-1995.

García García-Saavedra MJ, Vicente García

JC:

Técnicas

de

descontaminación.

Limpieza.Desinfección.Esterilización.

Editorial Paraninfo, 1997 Kahrs RF: Principios generales de desinfección.

RevueScientifique

et

Technique de l’Office International des Epizooties. 14(1), 143-163, 1995 Kruse RH, Puckett WH, Richardson JH: Biological safety cabinetry, Clinical Microbiology Reviews , 4:207-241, 1991.

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44

CURSO eLEARNING DE ESPECIALIZACIÓN (Ed. a distancia): Inicio: 04 noviembre / Finalización: 04 diciembre 2014 (1 mes)

NUEVAS DIRECTRICES EN EL DISEÑO DE SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO EN HOSPITALES: Tema 1: Proyecto de Revisión de Norma UNE 100713 AENOR. Tema 2: Diseño de Salas de aislamiento para pacientes infectados o sospechosos de estarlo con Ébola. Tema 3: Diseño de Unidades con Presión Positiva.

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45

VIDEOCONFERENCIAS

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Les presentamos un innovador Curso online, asista a nuestras videoconferencias y clases virtuales con nuestros Profesores desde cualquier lugar del mundo.

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PLATAFORMA TECNOLÓGICA

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46

PROGRAMA

:

Módulo I: Actual fase de revisión de la Norma UNE 100713 de AENOR "Instalaciones de aire acondicionado en Hospitales", en base a los standares europeos CEN/TC 156/WG. •

Contenido Temático: Las normas técnicas se elaboran en el seno de AENOR a través de los Comités Técnicos de Normalización. El proceso de elaboración de una Norma UNE está sometido a una serie de fases, antes de su aprobación.

En este Módulo se explicará la actual fase de revisión de la Norma UNE 100713 "Instalaciones de acondicionamiento de aire en Hospitales", basada en stándares europeos (CEN/TC 156/WG).

Módulo II: Diseño de salas de aislamiento para pacientes infectados con virus de naturaleza severa (OMS): Síndrome respiratorio de oriente medio (MERS-CoV), virus H5N1 y H7N9 de gripe aviar y Ëbola.

•

Contenido Temático: Se explicará de manera práctica las características de las salas de aislamiento para pacientes con infecciones por virus de naturaleza severa (Síndrome respiratorio de oriente medio (MERS-CoV), virus H5N1 y H7N9 de gripe aviar y Ëbola). Asimismo el alumno aprenderá la aplicación de medidas estructurales con el fin de aislar a este tipo de pacientes y prevenir el paso de contaminantes desde las habitaciones al entorno inmediato y a otras áreas del Hospital.

Módulo III: Diseño de salas de ambiente controlado con Presión positiva (salas inmunodeprimidos, fecundación in vitro, farmacia ...).

•

Contenido Temático: Las condiciones ambientales y estructurales para salas de ambiente controlado son de vital importancia para los estrictos requerimientos que necesitan, tanto este tipo de pacientes, fármacos y/o cultivos "in vitro".

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47

PROFESORADO

:

Dra. GLORIA CRUCETA, Médico, Directora de SEGLA, Presidenta del Comité CTN 171 de Calidad Ambiental en Interiores de AENOR, Coordinadora del GT1 "Validación y diseño de Laboratorios de Bioseguridad y Animalarios de AENOR, Técnico Superior en Prevención de Riesgos Laborales, especialidad en Higiene Industrial.

Experto técnico de ENAC para Calidad Ambiental en Interiores.

D. JAIRO BETANCOURT, Biólogo por la University of Miami (EEUU), desempeña actualmente el cargo de Biosafety Officer, Laboratory Safety Specialist en el LABORATORY SAFETY OF THE UNIVERSITY OF MIAMI, es miembro activo de ABSA (American Biological Safety Association), además es promotor de Bioseguridad de ABSA en Sudamérica y Asesor en Bioseguridad y en Diseño de Laboratorios de contención en Venezuela, Colombia, México, Argentina y Panamá.

D. JAUME CERA. Ingeniero Técnico Industrial, Director departamento climatización en JG INGENIEROS S.A. JG Ingenieros es miembro fundador de ASINCE (Asociación Española de Consultores en Ingeniería) y de First Q Consulting Engineers, (Sociedad de ingenierías europeas de instalaciones), que tiene como objetivo desarrollar proyectos comunes a nivel europeo. Grupo JG Ingenieros ha llevado a cabo numerosos proyectos y direcciones de Obra civil e instalaciones de salas de ambiente controlado en Hospitales.

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48

INSCRIPCIONES

:

SECRETARÍA TÉCNICA E INFORMACIÓN Las inscripciones se deben realizar a través de nuestro Campus virtual www.segla.net Tel. 0034 934 364 061, email oficina.tecnica@segla.net

ORGANIZA

:

PARTNER DEL CONOCIMIENTO

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49

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

RESUMEN

El objetivo de este trabajo ha sido prever el diseño de un laboratorio BSL-3 para el estudio y manejo de Hantavirus,

Victoria Moleiro San Emeterio Lic. Biotecnología. Estudiante de Doctorado y Técnico de Gestión del Proyecto CellCam Div. de Terapias Innovadoras en el Sistema Hematopoyético. CIEMAT Marina Peña Abad Veterinaria. UNIVERSIDAD DE LEÓN.

incluyendo

una

zona

ABSL-3 de alojamiento de animales para estudios de cepas vacunales creadas por modificación genética y productos antivirales.

En este trabajo se especifican los las

condiciones

técnicas

y

requerimientos particulares para el diseño, construcción y puesta en .funcionamiento instalaciones características,

de de basados

unas estas en

el

análisis de riesgo e incluyendo la normativa a seguir para llevar a cabo el proyecto

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50

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

INTRODUCCIÓN Los

Hantavirus

son

virus

de

la

familia

Bunyaviridae. Son virus esféricos y envueltos de

Muchos de los roedores mantienen el virus de una manera asintomática.

90-100 nm de diámetro cuyo genoma está formado El primer miembro de la familia de los

por RNA.

Hantavirus fue descubierto en 1970. Desde entonces se han identificado más de 20 hantavirus, de los que aproximadamente la mitad Los

Hantavirus

pueden

ser

encontrados por todo el mundo y causan

dos

humanas

graves

enfermedades

El serotipo más extendido en Europa es el virus Puumala, causante de una variedad más leve de

hemorrágica

HFRS que se ha dado en denominar nefropatía

con síndrome renal (HFRS) y el

epidémica, con un 90% de casos leves y cuyo

la

síndrome

fiebre

a

serotipos tiene un hospedador natural distinto.

menudo

fatales,

y

causan HFRS o HPS. Cada uno de los distintos

pulmonar

por

reservorio es el ratón Clethrionomys glareolus.

El estudio de las enfermedades causadas por

Hantavirus (HPS).

Hantavirus en modelos animales se ha visto entorpecido por la ausencia de un modelo animal adecuado.

Los Hantavirus, a diferencia de lo que ocurre con el resto de los miembros de la familia Bunyaviridae, no se mantienen en artrópodos, sino que se transmiten

cíclicamente

entre

roedores

persistentemente infectados, pudiendo darse la infección humana de una manera incidental. La transmisión se produce de forma primaria por inhalación de aerosoles de roedores infectados, heces o saliva.

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51

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

Recientemente se ha publicado la

validez

de

un

modelo

hámsteres

en

infectados ANÁLISIS

experimentalmente con el virus Andes

que

podría

DE

RIESGO

Y

RECOMENDACIONES EN EL TRABAJO

reflejar

CON HANTAVIRUS

fielmente las características de Las enfermedades causadas por Hantavirus son

la HPS humana.

endémicas en Europa. Los principales serotipos de Hantavirus asociados con la enfermedad en Europa son: Sin nombre, Puumala, Seoul y

Para la prevención de las enfermedades causadas

Hantaan.

por Hantavirus se han diseñado diferentes

presentar serología positiva para estos serotipos.

vacunas con distinto grado de eficacia. Debido a

Los agentes exóticos requerirían un mayor nivel

la

de biocontención.

presencia

de

diferentes

serotipos

de

La población

es

susceptible de

Hantavirus el mayor reto consiste en el desarrollo de una vacuna polivalente para todos

Los aerosoles de saliva o excreciones infectadas están claramente implicados en la transmisión de

ellos.

los Hantavirus en humanos. La transmisión de Los Hantavirus son clasificados en el RD 664/97

Hantavirus de roedores a humanos en el

como agentes biológicos incluidos en el grupo

laboratorio

III, pero se hará necesario un análisis detallado

documentada. Los operarios pueden resultar

de los distintos serotipos a utilizar para

infectados al exponerse a las excreciones de los

establecer

roedores, material de necropsia fresco y las

las

medidas

de

biocontención

necesarias en cada caso a la luz de los datos

vía

aerosoles

camas de los animales.

disponibles sobre la persistencia y mecanismos de transmisión de los serotipos implicados.

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52

ha

sido

bien

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 BSL Y ABSL-3 3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

En los lugares de alojamiento de los animales, el periodo de exposición al material infeccioso requerido para la transmisión puede ser corto. corto

c)

Otras rutas potenciales de infección en el

infectadas experimentalmente que no excretan el

laboratorio pueden ser ingestión, contacto con

virus se recomienda que el trabajo se desarrolle

material infeccioso, membranas mucosas o piel

en animalarios ABSL-22 con prácticas del mismo

lacerada y, en particular, las mordeduras. El

nivel. Las prácticas susceptibles de generar

trabajo con cultivos celulares infectados también

aerosoles se llevarán a cabo en cabinas de

es un mecanismo de transmisión.

bioseguridad. El suero y las muestras de tejido

No se ha demostrado transmisión a partir de muestras humanas ni de persona a persona salvo en el caso del virus Andes en Argentina.

Para el trabajo con especies hospedadoras

de roedores infectados deben manejarse de acuerdo a prácticas BSL-3, BSL aunque el laboratorio sea BSL-2.

Debido a la naturaleza virulenta viru de los agentes A la vista de estos datos y siguiendo las

causantes de la HPS y a que puede ocurrir

recomendaciones del CDC, podemos establecer

transmisión de animales a humanos, las personas

los siguientes niveles de biocontención en el

que trabajen con especies hospedadoras naturales

trabajo con estos virus:

deben tomar precauciones especiales.

a)

De

Para el manejo de muestras de humanos

este

modo,

el

trabajo

que

implique

sería suficiente con un BSL-2.

inoculación de muestras muest del virus debería

b)

llevarse a cabo en animalarios ABSL-4 ABSL o

Para el manejo de muestras de tejido y

cultivos virales se recomiendan instalaciones

condiciones similares.

BSL-2, incluyendo prácticas BSL--3. El cultivo de virus a gran escala requiere un nivel de biocontención 4.

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53

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

DISEÑO DE UN LABORATORIO BSL-3 Y UNA

ZONA

DE

ALOJAMIENTO

DE

ANIMALES.

Este sistema estará compuesto por un vestuario sucio en el que deberá dejarse todo lo que se lleve de fuera. Habrá que ducharse con agua y

La definición de las necesidades de espacio,

ponerse ropa interior y traje especial cerrado y

tipología de los locales necesarios para el

con puños cerrados. Además, deberá emplearse

desarrollo de las actividades, será coordinada

protección de ojos y mascarilla.

directamente por los responsables que utilizarán las instalaciones, contando en todo momento con el asesoramiento de un comité especializado en bioseguridad.

Posteriormente se pasará por un sistema de esterilización por aire a través del cual se accederá al vestuario limpio que permitirá el

1. Diseño zona BSL-3. Área de cultivos celulares y manejo de Hantavirus.

acceso al laboratorio. Entre la primera esclusa y el laboratorio

El acceso a la zona BSL-3 estará restringido a

existirá también un SAS para el

usuarios con formación y autorización necesarios

paso

para trabajar en estos niveles de bioseguridad.

de

materiales

con

autoclave de doble puerta al que

Por ello, se accederá al laboratorio mediante el

se

podrá

acceder,

previa

empleo de la tarjeta con banda magnética que da

esterilización, a través de un

acceso al resto de áreas confinadas BSL-1 y BL2 del edificio, con el reconocimiento adicional de retina que asegurará el acceso únicamente a los usuarios autorizados. Se realizará un histórico de acceso a la zona.

Este cuarto se utilizará como almacén de material para los laboratorios y dispondrá de frigoríficos

para

almacenar

requieran refrigeración.

Esta zona dará acceso tanto a los laboratorios BSL-3 como al animalario ABSL-3 y se accederá mediante un sistema de tres esclusas con sistema SAS para personal. www.biotecnologiahospitalkaria.com

54

productos

que

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

Una vez en la zona BSL-3 en laboratorio constará de:

Sala microscopios fluorescencia y confocal: Para estudio de muestras biológicas con acceso desde la esclusa. Esta sala tendrá requerimiento

Tres laboratorios de cultivos celulares:

de oscuridad total, sistema de extracción de aire

Acceso a través del un distribuidor-esclusa

caliente, control de temperatura estricto, en torno

común. Toda la manipulación en estas salas se

a 20-22ºC, sistema de alta presión y mesas

hará en cabinas de flujo laminar tipo II y III, en

antivibratorias.

función de qué se esté manejando.

Laboratorio de citometría de flujo: Este Cada uno de ellos alojará de 3 a 6 cabinas de

laboratorio estará en la zona BSL-3 porque la

flujo laminar, de 6 a 8 incubadores de cultivos

manipulación de muestras para su análisis será

celulares,

de riesgo para los usuarios debido a la dispersión

4

microscopios,

3

neveras,

4

centrífugas con tapas de seguridad en los

de aerosoles.

cestillos y otros pequeños aparatos necesarios para estas actividades.

Albergará dos equipos analizadores dos equipos separadores. Toda la manipulación de las

Habrá una ultracentrífuga, para la concentración

muestras previa al análisis se hará en cabinas de

de sobrenadantes virales que requerirá el empleo

bioseguridad tipo III. Necesitará un sistema de

de rotores en los que el material biológico estará

refrigeración y extracción de aire caliente.

confinado, puesto que su apertura y cerrado se

Deberá disponer además de un circuito cerrado

realizará exclusivamente dentro de cabinas de

de refrigeración de agua, para refrigeración de

bioseguridad tipo III.

equipos y sistema de alta presión.

En estos laboratorios el material de desecho

Sala

de

congeladores

y

criogenización:

saldrá de la cabina de bioseguridad cerrado en

Albergará 5 ultracongeladores (-80ºC) con

bolsas de autoclave o recipientes especiales para

sistema de seguridad de CO2 líquido y 3

su inactivación y eliminación y en determinados

criogenizadores de almacenaje de muestras en

casos deberá inactivarse previamente dentro de

nitrógeno

la cabina y nunca se empleará vidrio u objetos

monitorización continua, buena ventilación y un

punzantes ni existirán pipeteros fuera de las

detector-alarma de concentración de oxígeno.

cabinas.

Necesitará sistema de refrigeración y conexión

líquido.

Este

cuarto

directa con el exterior. www.biotecnologiahospitalkaria.com

55

requiere

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

Almacén material sucio: Servirá de paso intermedio de los residuos biológicos antes de ser inactivados o autoclavados. En esta sala se instalará un autoclave de doble puerta que comunicará con el distribuidor, por donde saldrá el material-residuos autoclavados.

Las puertas deben ser resistentes al fuego, homologadas con certificado de garantía. El mobiliario

debe

ser

robusto

con

espacio

suficiente entre mesas, armarios, estanterías, cabinas y otros equipos.

Todos los laboratorios de cultivo cumplirán las

a)

Electricidad:

El

desarrollo

de

la

normas establecidas en el Real Decreto 664/1997

instalación eléctrica se regirá por los criterios

de 12 de Mayo, para un laboratorio de nivel III y

indicados en los Reglamentos Oficiales. Se

Real Decreto 951/1997, de 20 de Junio y de la

dispondrá sobre bandejas y falsos techos, no

Ley 9/2003, de 25 de Abril.

deberá ser empotrada.

Deberá tener un sistema de alimentación

INSTALACIÓN

ininterrumpida con circuito independiente y cobertura para equipos informáticos, cabinas de bioseguridad, neveras, congeladores, citómetros

En las diferentes estancias de la zona BSL-3

de flujo, etc.

deberá haber suelos resistentes a ácidos, sin juntas y con aristas redondeadas, recubiertos con

Se sectorizará al máximo toda la instalación para

resinas epoxi, antideslizantes y de fácil limpieza.

evitar posibles fallos que repercutan en procesos

Falsos techos registrables de material, fácil montaje y desmontaje. Puertas de paso a laboratorio amplias y en algún caso de hojas pivotantes con zócalo de protección inferior con cierre automático que permita el enclavamiento

en marcha, de manera que en cada laboratorio y en las distintas dependencias se instalará un cuadro eléctrico independiente para no verse afectados

por

cortes

o

averías

laboratorios.

para establecer presiones diferenciales.

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56

de otros

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

La instalación eléctrica se encontrará protegida

c)

Sistemas de alarma: Al margen del

frente a riesgo de incendio y explosión.

sistema contra incendios se instalará un sistema

Luminarias fluorescentes empotrables, estancas

de presencia/ausencia de personal que permita la

y antideflagrantes.

localización del personal en todo momento y provea de sistemas de seguridad contra intrusos.

b)

Climatización: Las áreas de laboratorios

tipo

BSL-3

programación

tendrán

una

independiente

instalación del

resto

y del

edificio.

d)

Gases: Se instalarán tomas CO2 y de N2,

para regular la concentración de oxígeno en los incubadores según Normativa. En todos los locales o laboratorios donde se utilice hidrógeno,

El empleo de puertas con enclavamiento

nitrógeno, CO2, etc habrá detectores específicos

permitirá establecer presiones diferenciales en

con conexión al centro de control del centro y

las distintas zonas del laboratorio con respecto al

sirenas de alarma.

vestuario

sucio

que

deberán

funcionar

adecuadamente en todo momento.

e)

Agua, pilas y desagües: En cada uno de

los laboratorios se instalará próxima a la puerta Se acondicionarán los laboratorios con sistemas

de entrada una pila estanca con accionamiento

de calefacción, refrigeración y ventilación, para

mediante sensor automático. Se dispondrá de un

conseguir en cada una de las zonas del

sistema separado para la recogida de agua

laboratorio la temperatura y humedad necesarias

sanitaria por un lado y para la recogida de

en cada dependencia.

efluentes contaminados mediante un sistema independiente de recogida en bidones.

El aire introducido y extraído del lugar de trabajo se filtrará mediante filtros HEPA. Además se

Habrá

instalarán sistemas de renovación de aire

conducciones a las presiones requeridas, fuego y

continuo.

temperatura, así como distancia adecuada de

estanqueidad

y

resistencia

de

las

protección entre la red de agua y otras instalaciones y sectorización al máximo de toda la red.

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57

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

Para ello se colocarán llaves de corte o paso en cada dependencia con red interior de agua y con

También se seguirán las directrices del REAL

llaves de corte por cada aparato. Todas las

DECRETO 664/1997, de 12 de mayo, sobre la

canalizaciones de agua fría y caliente irán

protección de los trabajadores contra los riesgos

identificadas con el color que corresponda de

relacionados con la exposición a agentes

acuerdo al código vigente.

biológicos

durante

el

trabajo. BOE

nº

124 24/05/1997 y la Orden ESS/1451/2013, de Las tuberías serán del material de diámetro

29

apropiados a cada tipo de gas y dispondrán de

disposiciones para la prevención de lesiones

colectores, válvulas antirretorno y reguladores de

causadas por instrumentos cortantes y punzantes

presión y caudal.

en el sector sanitario y hospitalario.

f) de

de

julio,

por

la

que

se

establecen

Sistemas de vacío: Se instalarán tomas vacío

en

todos

los

laboratorios

con

2. Diseño de una zona de alojamiento de

contenedores dispensables para recoger los

animales ABSL-3

líquidos aspirados e inactivarlos para su posterior desecho.

Requerimientos ABSL3 a)

Características

constructivas:

Las

divisiones de los habitáculos deberían hacerse Normativa Los materiales y equipos de origen industrial deberán cumplir las condiciones funcionales y de calidad fijadas por agencias de certificación, así como

las

correspondientes

normas

y

disposiciones vigentes relativas a fabricación y control industrial.

en la Ley 9/2003 de 25 de abril por la que se establece el régimen jurídico de la utilización liberación

Las uniones suelo-paredes y paredes-paredes deben ser cóncavas para facilitar la limpieza y las ventanas y puertas deben ser gruesas y de cierre hermético, para que mantengan la presión dentro de la sala y faciliten los ciclos de desinfección.

El diseño de esta zona BSL-3 seguirá lo expuesto

confinada,

con paneles tipo sándwich con cámara interior.

voluntaria

y

comercialización de organismos modificados genéticamente. www.biotecnologiahospitalkaria.com

El techo ha de ser modular y fácil de desmontar al retirar el sellado de estanqueidad. Los suelos han

de

ser

resistentes,

impermeables,

antideslizantes y fáciles de limpiar. Lo ideal es utilizar en su construcción resinas epoxi, que cumplen esas características.

58

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

d)

Desinfección: La desinfección de la sala

se realizará mediante equipos de desinfección por vía aérea que empleen peróxido de Iluminación: Las luminarias han de ser

hidrógeno como desinfectante de elección. Se

estancas y registrables desde la sala y deben estar

valorará la integración y puesta en marcha de un

programadas para mantener un fotoperiodo fijo

sistema centralizado de VHP para facilitar las

adaptado a la fisiología de la especie empleada y

labores

con un periodo de crepúsculo al encenderse y

instalaciones.

b)

de

desinfección

en

todas

las

apagarse la luz. Es vital la presencia de un grupo electrógeno que entre en funcionamiento si

e)

Climatización:

El

sistema

de

ocurre cualquier fallo de suministro eléctrico.

climatización es un punto vital a controlar puesto que será necesario mantener a los animales bajo

c)

Alojamiento de los animales: En cuanto

condiciones estables de temperatura, humedad y

a los animales, se mantendrán en racks

ventilación

tal y como determina el RD

ventilados o en aisladores, mantenidos a presión

53/2013. Asimismo, el buen funcionamiento del

negativa.

sistema de ventilación y extracción determinará

Para todas las manipulaciones de los animales,

que la sala se mantenga a una depresión

desde las más delicadas (como las necropsias de

adecuada para impedir que los agentes patógenos

los animales) hasta el simple cambio de jaulas,

salgan del habitáculo.

se empleará como mínimo una cabina de bioseguridad de tipo II B.

Se colocarán manómetros en la entrada de cada dependencia para comprobar que se mantiene el gradiente de presiones.

La presión será mayor en el vestuario limpio que en la esclusa de entrada, el vestuario sucio y la sala de esterilización. Asimismo, en la sala con animales se mantendrá una diferencia de presión de al menos -20 pascales con respecto a las otras zonas. Se colocará un filtro HEPA mínimo H13 a la salida del conducto de extracción.

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59

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

El aire extraído no debe recircular al interior de

h)

Validación: La instalación se validará

las salas y será totalmente enviado al exterior

con

certificado

del edificio una vez atravesado el filtro HEPA.

diferenciales, estanqueidad de filtros y pureza

ENAC

para

presiones

del aire según la norma UNE 14644, por lo que La duplicidad de los equipos de climatización y

el mantenimiento debe incluir el control de estos

extracción de aire es un punto a tener en cuenta a

parámetros anualmente.

la hora de diseñar las instalaciones, puesto que asegura el mantenimiento de las barreras de bioseguridad en caso de fallo en el sistema.

REQUERIMIENTOS ESPECÍFICOS PARA f)

Equipos de protección individual: La

vestimenta

HANTAVIRUS

consistirá en monos cerrados que

puedan ser esterilizados previamente a su

Una zona de alojamiento de animales con

limpieza.

características ABSL-3 con racks ventilados en depresión para el alojamiento de los animales y

Deben

emplearse

gafas,

gorros,

calzas

y

cabinas

de

bioseguridad

tipo

II para la

respiradores sobre todo en las manipulaciones

realización de operaciones de riesgo nos permite

más delicadas y teniendo en cuenta que son

el trabajo con la mayoría de serotipos de virus

patógenos que se transmiten por vía aérea.

Hanta en especies infectadas experimentalmente y en las especies hospedadoras naturales.

g)

Mantenimiento: Para la organización

del mantenimiento del

ABSL3 es importante

No obstante, para el trabajo con estas últimas, y

disponer de técnicos in situ que puedan

dependiendo de la virulencia y mecanismos de

reconocer situaciones de alarma y actuar de

transmisión del agente en estudio, se puede

forma

el

implementar la instalación con aisladores para

mantenimiento diario de la instalación correrá a

poder llevar a cabo en ella prácticas con un nivel

cargo de personal de mantenimiento del centro

de bioseguridad

específicamente formado.

ABSL4.

inmediata

y

eficaz.

Por

www.biotecnologiahospitalkaria.com

ello,

lo más cercano posible a

60

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

Los aisladores impiden cualquier contacto físico

Todo el material que salga de las salas y del

entre operario y roedor y por lo tanto la

laboratorio pasará por el autoclave o SAS. Para

transmisión

la limpieza de las jaulas tras la esterilización se

roedor-humano

se

hace

precisa de un lavajaulas al efecto, así como de

prácticamente imposible.

locales adecuados para almacenar el pienso y la cama para los animales, situado todo ello fuera de la zona de contención.

BIBLIOGRAFÍA -

Clement JP. Hantavirus. Antiviral Research, 2003; 57: 121-127.

-

Decreto 204/1994 de ordenación de la gestión de los Residuos Sanitarios.

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infecciones

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-

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Rev. Sci. Tech. Off.int.Epiz, 2004; 213(2): 595-611.

-

Hart CA, Bennett M. Hantavirus infections:

El transporte de las muestras fuera de la zona de

epidemiology and pathogenesis. Microbes

contención se realizará a través de SAS

and infection, 1999; 1: 1229-1237.

en

dobles recipientes herméticos para su posterior

-

gestión por empresas especializadas.

Ley 9/2003 25 abril por la que se establece el régimen jurídico de la utilización confinada, liberación voluntaria y comercialización de

Si las muestras se transportan a otro centro el embalaje habría de ser triple. Los cadáveres de los

animales

introducirán

RD 664/1997, de 12 de mayo, sobre la protección de los trabajadores contra los

eliminarán

riesgos relacionados con la exposición a

mediante un gestor autorizado o se autoclavarán

agentes biológicos durante el trabajo. BOE nº

antes de su eliminación.

124 24/05/1997.

herméticos

que

también

-

en

recipientes

se

organismos modificados genéticamente.

se

www.biotecnologiahospitalkaria.com

61

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

-

Orden ESS/1451/2013, de 29 de julio, por la

-

Ley 10/1998 de Residuos.

que se establecen disposiciones para la

-

Ley 20/1986 Básica de residuos tóxicos y

prevención

de

lesiones

causadas

por

instrumentos cortantes y punzantes en el

peligrosos.

-

sector sanitario y hospitalario.

-

laborales.

UNE/EN 12128:1998. Niveles de contención

-

en laboratorios de microbiología, zonas de riesgo, instalaciones y requisitos físicos de

-

de residuos sólidos urbanos.

-

ORDEN ESS/1451/2013, de 29 de julio, por

and

la que se establecen disposiciones para la

Microbiology, 2006; 8(2): 61-67.

de

lesiones

causadas

por

-

mechanisms.

Normativa

de

Trends

in

construcción

de

sector sanitario y hospitalario.

12128.NTP

Hooper JM, Kamrud KI, Elgh F, Custer D,

Residuos sanitarios.

-

Hooper

JW,

Larsen

T,

Custer

372:

Tratamiento

de

NTP 468: Trabajo con animales de experimentación.

Hantavirus M segments elicits neutralizing -

NTP628.

Riesgo

biológico

en

el

transporte de muestras y materiales DM,

Schmaljohn CS. A lethal disease model for

infecciosos.

-

Orden de 25 de marzo de 1998 por la que

Hantavirus pulmonary syndrome. Virology,

se adapta en función del progreso técnico

2001; 289: 6-14.

el RD 664/97.

International Veterinary Biosafety Working Group.

(2006).

Facilities:

-

Characteristics

laboratorios de bioseguridad UNE EN

infection. Virology, 1999; 255: 269-278.

-

Infections:

instrumentos cortantes y punzantes en el

antibodies end protects against Seoul virus

-

Meyer BJ, Schmaljohn CS. Persistent Hantavirus

Schmaljohn CS. DNA vaccination with -

Ley 42/1975 sobre recogida y tratamiento

seguridad.

prevención

-

Ley 31/0995 de prevención de riesgos

Veterinary

Desing

and

-

Padula PJ, Edelstein A, Miguel DL,

Containment

Lopez NM, Rossi CM, Rabinovich RD.

Construction

Hantavirus

Pulmonary

Handbook. (P. Mani, & P. Langevin, Edits.)

outbreak

Krüguer DH, Ulrich R, Lundkvist A.

evidence

Hantavirus infections and their prevention.

transmission of Andes virus. Virology,

Microbes and infection, 2001; 3: 1129-1144.

1998; 241: 323-330.

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in

Argentina:

Syndrome

for

molecular

person-to-person

62

BASES TÉCNICAS PARA EL DISEÑO DE INSTALACIONES BSL-3 Y ABSL-3 PARA EL TRABAJO CON HANTAVIRUS

-

RD 664/1997 sobre la protección de los trabajadores

-

-

contra

los

-

riesgos

Henttonen H, Plyusnin A, Vaheri A.

relacionados con la exposición a agentes

Hantavirus infections in Europe. Lancet

biológicos durante el trabajo.

Infect. Dis, 2003; 3: 653-661.

Real Decreto 53/2013, de 1 de febrero,

-

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básicas aplicables para la protección de

HD,

los

en

infection causes an acute neurological

experimentación y otros fines científicos,

disease that is fatal in adult laboratory

incluyendo la docencia.

mice. Journal of Virology, 2002; 76(17):

Safronetz D, Ebihara H, Feldmann H,

8890-8899.

animales

Hantavirus

utilizados

pulmonary

-

syndrome.

-

uitem T,

Kariwa

H,

Nagata

High-Containment

Wilson, D. E., Memarzadeh, F., Traum,

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Arikawa J,

de

Yoshii K, Takashima I.

virus

infection

in

hamsters

(Mesocricetus

resembling

Hantavirus

Syrian auratus)

infection

Simpson

SQ,

pulmonary

GC.

syndrome.

Hantavirus Heart&Lung,

Level

3

od

Health;

Laboratory Requirements:

http://www.ors.od.nih.gov/sr/dohs/Docu ments/bsl3_certguide.pdf -

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UNE EN13779:2005. Ventilación de

the

edificios no residenciales. Requisitos de

Containment

prestaciones ventilación

de y

los

Global

Expansion Biological

of

High-

Laboratories;

sistemas

de

National Academy of Sciences; National

acondicionamiento

de

Research Council, 2006. ISBN 0-7726-

recintos.

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5629-0.

63

MARCO NORMATIVO Y APLICABILIDAD

REAL DECRETO 1027/2007, de 20 de julio, por el que se aprueba el Reglamento de Instalaciones Térmicas en los Edificios. Este reglamento constituye el marco normativo básico en el que se regulan las exigencias de eficiencia energética y de seguridad que deben cumplir las instalaciones térmicas en los edificios para atender la demanda de bienestar e

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higiene de las personas.

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64

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

LABORATORIOS BSL3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS. CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Los

laboratorios

BSL-3

son

En este trabajo se mencionan algunasel espacios confinados para características de estas dos barreras de manejo de agentes patógenos que bio-contención. provocan enfermedades graves en humanos o animales, pero que no se propagan de un individuo a otro. La cualidad de contención se logra mediante la aplicación de

ALEJANDRO ANTONIO MIRANDA ESCAMILLA

tres niveles de barreras conocidas

Director de Operaciones de SICAPHARMA, México, especializado en proyectos de validación de sistemas de contención para la industria farmacéutica.

como

primarias,

secundarias

y

terciarias. La barrera que protege al investigador y medio ambiente interior

es

bioseguridad, sistema

el

gabinete

mientras

HVAC

es

la

que

de el

barrera

secundaria que protege al medio ambiente exterior de la dispersión de aire.

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65

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

INTRODUCCIÓN: Las enfermedades por entes biológicos tanto en humanos como en animales ha existido desde el origen del hombre, ya se mencionaba el aislamiento como una medida de contención en la antigüedad, solo basta con leer los textos bíblicos y reconocer a la lepra como una enfermedad que no solo discriminaba a quien la padecía

sino

que

era

una

forma

de

estigmatización, hoy sabemos que no requiere de aislamiento, y sigue persistiendo hasta la fecha este padecimiento.

OBJETIVOS: Describir características importantes a considerar en el diseño primarias

y selección de las barreras

gabinetes de bioseguridad (BSC) y

secundaria, sistema HVAC. HIPÓTESIS: El no considerar ciertas características de diseño en la selección de los BSC y construcción de los sistemas HVAC incrementa los riesgos de biológicos y las consecuencias a la salud pública pueden ser catastróficas.

.

No

obstante

a

los

avances

médicos, clínicos y tecnológicos

MATERIAL Y MÉTODOS: Para este trabajo de investigación se realiza

aún existen agentes patógenos de

revisión bibliográfica de las principales fuentes

los cuales se sabe que son de alto

autorizadas en materia de bioseguridad, la

riesgo, para lo cual se trabaja

Organización Mundial de la Salud (OMS),

intensamente para encontrar la

Federal Drug Administration (FDA), Public Health Agency of Canada (PHAC).

cura o el tratamiento, y para ello, las muestras contaminadas deben

La búsqueda de la información se realiza por medio de internet directamente en las páginas de

ser manejadas en instalaciones

estos organizamos.

adecuadas al nivel de riesgo que representa el agente patógeno.

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66

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

RESULTADOS: El resultado de la investigación demuestra que

La misma OMS, ha mencionado que, “aun

todas las organizaciones de salud emplean como

cuando actualmente gran parte de la labor de

fuente

principal

a

la

investigación y de los recursos sanitarios van

Salud,

los

dirigidos a tratar las enfermedades más que a

gabinetes

de

prevenirlas, centrarse en los riesgos para la salud

bioseguridad se aplican bajo los mismos criterios

es la clave de la prevención, sin embargo a pesar

y los criterios de diseño y construcción de

de los esfuerzos realizados por los distintos

sistemas HVAC siguen lineamientos estándar

gobiernos en esta materia, las epidemias en

pero en los aspectos de presurización y cambios

ciertas regiones del mundo, son una constante

por hora no existen criterios de aceptación

debido a múltiples factores, entre ellos la falta de

internacionales.

higiene, agua insalubre, malos hábitos, mal

Organización estándares

de

de

información,

Mundial selección

de

la de

nutrición, entre muchos más. Cada nueva enfermedad representa altos riesgos entre la DISCUSIÓN: Cuando hablamos de BIO-SEGURIDAD o BIOCONTENCIÓN es necesario incluir un concepto

población

mundial,

y

las

enfermedades

infectocontagiosas, por su naturaleza y grado de riesgo requieren de un manejo especializado.

fundamental, y este se refiere a “RIESGO”, el cual la OMS define como, “La probabilidad de un resultado sanitario adverso, o un factor que

El

manejo

especializado

de

muestras biológicas provenientes

aumenta esa probabilidad”. (1) de personas o animales infectados implica

considerar

precautorias de

aislamiento que

eviten su propagación.

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medidas

67

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Estas precauciones de aislamiento deben ser acordes al riesgo que implica el agente infeccioso,

de

tal

forma

que

todos

los

laboratorios de investigación, diagnóstico y de atención de salud (de salud pública, clínicos o de hospital) deben estar diseñados para cumplir, como mínimo, los requisitos del nivel de

Cuadro 1. Clasificación de los microorganismos infecciosos por grupos de riesgo

bioseguridad 2. Dado que ningún laboratorio puede ejercer un control absoluto sobre las muestras que recibe, el personal puede verse expuesto a organismos de grupos de riesgo más altos de lo previsto. (2) En este escenario toman relevancia los conceptos de contención, aislamiento, bio riesgo, y con ellos la importancia del diseño, construcción, operación y mantenimiento de los laboratorios de bio seguridad (BSL) que garanticen el grado de

Grupo de riesgo 1 (Riesgo individual y poblacional escaso o nulo) Microorganismos que tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales.

Grupo de riesgo 2 (Riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo) Agentes patógenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede provocar una infección grave, pero existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de propagación es limitado.

contención requerido.

En este trabajo se describen los conceptos de contención (aislamiento) que como mínimo deben considerarse en dichos laboratorios.

Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo) Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces.

El principal objetivo de los laboratorios BSL-3, es proporcionar un espacio contenido para el manejo de agentes exóticos o nativos y que pueden causar serios daños potenciales o letales como resultado de la exposición a estos agentes, sin embargo, el laboratorio por sí solo

Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado) Agentes patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente.

Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces. (2)

no

garantiza el control del riesgo; es indispensable que se consideren los siguientes elementos:

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68

LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

1. Las barreras primarias incluyen entre otros: a. La indumentaria b. El uso de gabinetes de bioseguridad c. Envases primarios de las muestras Estas barreras son las de mayor criticidad para protección del personal.

2. Las barreras secundarias: a. Diseño arquitectónico b. Sistema HVAC c. Sistemas de tratamiento de

Entre los elementos a considerar en el diseño del BSL-3 BS está el sistema de aire HVAC y el uso de gabinetes de bioseguridad (BSC) clase II o III, que deben trabajar de

forma

sincronizada,

garantizado protección al personal y al medio ambiente.

efluentes d. Equipamiento para esterilización de muestras y materiales en BARRERAS PRIMARIAS

contacto con el agente infeccioso e. Sistemas de duchas para el personal Estas barreras son las que protegerán el

BARRERAS SECUNDARIAS

BARRERAS TERCIARIAS

BIO BIOCONTENCIÓN

medio ambiente del agente patógeno.

3. Las barreras terciarias: a. Accesos controlados b. Flujos definidos que no permitan el ingreso o salida de personal y muestras sin control.

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69

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Los BSC están diseñados para proporcionar protección al personal, al medio ambiente del laboratorio (4) y fuera de este, la muestra que se maneja, la atmósfera del laboratorio y los materiales de trabajo de la exposición a las salpicaduras y los aerosoles infecciosos que pueden generarse al manipular material que contiene agentes infecciosos, como cultivos primarios, soluciones madre y muestras de diagnóstico. (Los aerosoles se producen en cualquier actividad que transmita energía a un material líquido o semilíquido, por ejemplo, al agitarlo, verterlo a otro recipiente, removerlo o verterlo sobre una superficie o sobre otro líquido). (3) La selección correcta del tipo de gabinete es fundamental para garantizar que será una barrera primaria.

En el cuadro 2 se puede apreciar los criterios mínimos a considerar al momento de seleccionar el CSB (2).

Por otra parte, el diseño y la construcción de la instalación contribuyen a la protección de los trabajadores de laboratorio, proporcionando una barrera para proteger a las personas fuera del laboratorio, y proteger a las personas o animales en la comunidad de agentes infecciosos que pueden

ser

liberados

accidentalmente

laboratorio. (3)

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70

del

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

La selección de las barreras secundarias depende del riesgo de transmisión de agentes específicos, por ello, cuando el riesgo de infección por la exposición a un aerosol infeccioso está presente,

La selección adecuada debe considerar la

es necesario que los niveles de contención

resistencia

primaria y múltiples barreras secundarias se

presiones positivas o negativas provocadas por el

establezcan e implementen para evitar que los

aire suministrado/extraído en cada cuarto.

agentes infecciosos se escape y difundan al medio ambiente.

física para

poder soportar las

Los valores de presión diferencial son el resultado del aire suministrado, del aire extraído

Estas características de diseño incluyen sistemas

y de las fugas identificadas y de las no

de ventilación especializados para garantizar el

identificadas.

flujo

de

aire

direccional,

las

presiones

diferenciales y cambios de aire por hora; sistemas

de

tratamiento

de

aire

para

descontaminar o eliminar los agentes del aire de escape (exhaust) de los sistemas HVAC; zonas de acceso controlado; esclusas (airlock) en las

En los BSL-3, el aire se debe desplazar desde las áreas adyacentes hacia el área de máxima contención el uso de los sistemas HVAC, a continuación

se

destacan

algunos

los

requisitos y recomendaciones para la instalación de estos sistemas.

entradas de laboratorio o edificios.

Una de las principales característica de diseño del laboratorio es que debe ser hermético, para lo cual, los materiales de construcción deben ser seleccionados para garantizar este aspecto.

Es un requisito crítico el tipo y características de los materiales de construcción, así como los métodos de construcción para las paredes, pisos, techos exteriores, plafones interiores, juntas para muros-muros; muros-plafones; muros-pisos; y en todos aquellos accesorios que se instalan en paredes, plafones y que pueden provocar fugas desde el laboratorio. www.biotecnologiahospitalkaria.com

de

71

LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

A continuación se destacan algunos de los requisitos y recomendaciones para la instalación talación de sistemas de climatización: El aire debe ser extraído de las zonas de alta contención para evitar la reintroducción en el laboratorio, de acuerdo con las normas aplicables, tales como ANSI / ASHRAE 62.1.

El cien por ciento de aire exterior (es decir, desde el ambiente exterior) debe ser suministrado en zonas de alta contención para evitar la recirculación de aire dentro de la zona de contención.

ANSI / ASHRAE 62.1 proporciona más orientación sobre la ventilación ilación de la calidad del aire interior aceptable.

Deben existir controles en el sitio para prevenir y / o notificar de fallas de presurización del laboratorio por fallas de los ventiladores.

El uso de humidificadores auxiliares localizados puede ser considerado para dar cabida a la humedad adicional que puede ser requerida equerida para el personal y el bienestar animal.

Dispositivos diseñados para proporcionar fuga controlada en la zona de contención deben ser diseñados para asegurar que el flujo de aire se mantiene y garantiza la protección contracorriente.

Servicios de soporte mecánico para sistemas HVAC deben estar situados lo más cerca posible de la barrera de contención. Los filtros HEPA deben estar situados lo más cerca posible de la barrera de contención para reducir la longitud de la red de ductos que puedan estar contaminados. Las válvulas se deben instalar para aislar secciones de la red de conductos.

Ref. (4) Canadian Biosafety Standards and Guidelines (CBSG) First Edition

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72

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Mantener el balanceo correcto a lo largo de la cascada de presiones puede resultar complejo, no olvidemos que en todo momento que debe

mantenerse

la

bio-contención,

por

lo

que

es

altamente

recomendable para garantizar dicha cascada, controlar el volumen de aire de inyección y extracción y no exclusivamente realizar el ajuste observando la presión diferencial.

El instituto ANSI y la asociación AIHA respaldan el uso de controles en el volumen de aire y no en la presión diferencial como único factor de ajuste. (6) No existen especificaciones de valores de presión diferencial para los BSL-3 pero se recomienda al menos 0.05”WC (12.45Pa).

Po lo anterior, la exactitud y estabilidad del dispositivo del control de flujo de aire juega un papel crítico en el mantenimiento de la presurización para la contención y la ventilación.

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73

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Adicionalmente a la presurización, es necesario mantener tazas de ventilación conocidas como cambios por hora, sin embargo al igual que la presurización, no existen especificaciones, pero se recomienda un mínimo de seis cambios por hora (6CPH), aunque la práctica común es de 10-12 CPH para BSL-3.

La Organización Mundial de la Salud ha establecido el siguiente cuadro que resume los requisitos por nivel de bioseguridad (2)

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74

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

CONCLUSIONES La bioseguridad es una materia que involucra a los

países,

(gobierno/población)

y

a

las

instituciones de salud e investigación, es en éstas

BIBLIOGRAFÍA:

últimas y sus funcionarios que depende el

1.- Informe sobre la salud en el mundo 2002,

diseño, construcción y operación.

Organización Mundial de la Salud; 2002. OMS, documento WHO/FCH/CAH/01.20 (revisado).

2.- Manual de bioseguridad en el laboratorio. –

El éxito o fracaso de un BSL-3 se

3a ed. Organización Mundial de la Salud. 2005 3.- Appendix A – Primary Containment for

encuentra

en

sus

barreras

de

Biohazards: Selection, Installation and Use of

contención, siendo el aire uno de

Biological

los

Microbiological and Biomedical Laboratories

más

críticos

ya

que

a

diferencia de otros efluentes, el

Safety

Cabinets;

Biosafety

in

5th Edition; HHS Publication No. (CDC) 211112, Revised December 2009

aire

no

se

puede

observar

4.- Canadian Biosafety Standards and Guidelines

haciéndolo un factor crítico en la

(CBSG) First Edition, Publication Number:

biocontención.

130037 5.- BSL-3 Laboratory Design Resource, Phoenix controls, 2011 6.- American National Standar for Laboratory

La adecuada selección de los gabinetes por tipo de agente patógeno y el diseño de los sistemas

Ventilation (ANSI/AIHA Z9.5- 2003) section 5.1.1 pp 27-28

HVAC, permitirán una correcta contención. A nivel internacional existe homogeneidad en los criterios para los BSL-3.

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75

LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

PROCEDIMIENTO DE USO U Y

MANTENIMIENTO

DE

QUÉ ES UN LABORATORIO BL-3?

BL

EQUIPOS DE BARRERA DE BIOCONTENCIÓN

EN UN

LABORATORIO BL3 JOSE EDUARDO BERMUDEZ RUIZ, Ingeniero técnico.

Son laboratorios en los que se trabaja con agentes biológicos del grupo de riesgo igual o inferior al nivel de contención de dicho laboratorio, en este caso, se trabajarán con agentes biológicos del grupo de riesgo 3 o

MIGUEL ÁNGEL MOCHALES LARA, Ingeniero técnico.

inferior.

El personal debe contar con adiestramiento específico para el manejo de agentes de alto riesgo clasificados en el grupo de riesgo 3.

INSTALACIONES HERNANDEZ, S.L.

En el laboratorio se realiza trabajo con agentes que

pueden

causar

un

daño

serio

y

potencialmente mortal como resultado de la inhalación o exposición a los mismos. El laboratorio cuenta con un diseño y características especiales tendientes a proteger al operador y al ambiente. Todos los materiales son manipulados utilizando vestimenta y equipo de protección siguiendo protocolos rigurosos. igurosos. Los laboratorios se mantienen con una presión de aire negativa, lo cual ayuda a impedir que los agentes nocivos escapen al ambiente.

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76

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

TABLA GRUPOS DE RIESGO DE LOS AGENTES BIOLÓGICOS (REAL DECRETO 664/1997, de 12 de mayo) AGENTES BIOLÓGICO DEL GRUPO DE RIESGO

RIESGO INFECCIOSO

1

Poco probable que cause enfermedad Pueden causar una enfermedad y constituir un peligro para los trabajadores Puede provocar una enfermedad grave y constituir un serio peligro para los trabajadores Provocan una enfermedad grave y constituyen un serio peligro para los trabajadores

2

3

4

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RIESGO DE PROPAGACIÓN A LA COLECTIVIDAD No

PROFILAXIS O TRATAMIENTO EFICAZ

Poco Probable

Posible generalmente

Probable

Posible generalmente

Elevado

No conocido en la actualidad

Innecesario

77

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

¿QUÉ ES EL ESPACIO BIOCONTENIDO? Barreras primarias o bioseguridad.

Es el conjunto de obra civil que envuelve

a

laboratorios,

salas

comunes, pasillos y otros espacios

Las barreras primarias son barreras físicas o equipos

de

protección

personal

entre

el

trabajador del laboratorio y el patógeno, como y elementos técnicos de barrera

por ejemplo:

como líneas de fluidos, conductos, Procedimientos válvulas dumper, Airlocks, SAS, autoclaves, etc., estén estos o no rodeados

o

sectorizados

por

paramentos interiores.

de

trabajo

(buenas

prácticas) Equipos de Protección Personal; cabinas de bioseguridad

guantes,

máscaras

o

aparatos respiratorios especiales, etc.

Equipos de trabajo Vigilancia de la salud Limpieza y desinfección

En definitiva, cualquier paramento interior no

Envases primarios de contención.

constituye la zona biocontenida, sino el conjunto físico de la instalación.

El personal de este tipo de laboratorios usa estos tipos de equipos de seguridad para protegerse

BARRERAS DE CONTENCIÓN.

directamente al trabajar con organismos.

Cada nivel de bioseguridad tiene barreras establecidas para ofrecer protección contra los microorganismos.

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78

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Barreras secundarias o biocontención.

Las barreras secundarias son aspectos estructurales del laboratorio que hacen que el ambiente de trabajo sea más seguro frente al riesgo de infección. Estas incluyen lavamanos, áreas de contención especiales para trabajar directamente con los organismos, y patrones especiales de ventilación diseñados para prevenir la contaminación de otras salas y otros trabajadores en el edificio. Es decir, barreras entre el agente biológico y el medioambiente.

Aquí se incluyen: Filtros HEPA. Duchas de descontaminación.

Tratamiento de efluentes (Biowaste).

Autoclaves Airlock - SAS (Security Airlock System)

ZONA A CONVENCIONAL

ZONA B CONTENCIÓN BIOLÓGICA

Figura 1

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79

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

A efectos prácticos cada local de

Barreras terciarias o bioprotección.

la Estas barreras son las propias organizativas del laboratorio, y en ellas se incluyen:

zona

NCB-3

dispone

de,

al

menos, una pareja de filtros H14; uno a la entrada de aire y otro a la

Cerraduras de puertas con llave magnética

salida.

Cámara de vigilancia Autorización previa (Acreditación) Cada unidad de filtrado está formada por el filtro

Cuarentenas.

Flujos

de

movimientos

interiores

y

exteriores.

H14 propiamente dicho y un cajón difusor que aloja el filtro en su interior. A unos de los lados de este cajón se emboca el conducto de entrada o

FILTROS HEPA.

salida de aire a/ desde la unidad climatizadora.

En el otro lado, situado directamente en la sala

Descripción.

dispone de un difusor para insuflar el aire. El

Los locales de los laboratorios con nivel de

cajón está construido de forma tal que impide el

contención tipo NCB-3 precisan altas tasas de

paso de aire por el exterior del filtro, lo que

aporte de aire de ventilación, debidamente

deberá ser testado (test de integridad) cada vez

tratado y climatizado a fin de mantener las

que se haga un cambio de filtro.

condiciones de confort adecuadas en los mismos y, sobre todo, asegurar las diferencias de presión necesarias respecto a los espacios externos a la zona de biocontención.

Cada local del espacio biocontenido ha de disponer de un juego de compuertas que permita aislarlo del resto del sistema de ventilación/ presurización, a fin de poder realizar operaciones

Los filtros HEPA H14 son los encargados finales

de descontaminación, limpieza y cambio de

de que todo ese enorme volumen de aire, no

filtros sin alterar el funcionamiento del resto del

arrastre contaminantes hacia el interior del

laboratorio.

espacio biocontenido, ni, sobre todo, deje escapar ningún organismo patógeno de él.

Para alargar la vida de los filtros de entrada, la unidad climatizadora debe disponer de una serie de filtros previos en grado creciente de nivel de filtración.

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80

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Mantenimiento.

Periodicidad.

Cada fabricante suministra unas curvas de caudal/ pérdida de carga del filtro que fabrica, que servirán para determinar cuándo hay que realizar la sustitución de éste, al superar la pérdida de carga un valor determinado. Para medir este parámetro la instalación ha de disponer de tomas de presión antes y después de cada filtro.

Procedimiento.

El mantenimiento del filtro consiste básicamente en la sustitución del mismo por uno nuevo y el procedimiento vendrá determinado por la posibilidad de descontaminar el filtro antes de su retirada o no.

CASO 1. Si las tomas de descontaminación de la sala se sitúan entre el filtro y la compuerta de aislamiento con los conductos, cada vez que se haga un ciclo de descontaminación, el filtro queda asimismo descontaminado y se puede retirar por el local al que presta servicio, sacándolo del espacio biocontenido por autoclave.

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81

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CASO 2. Si las tomas de descontaminación están situadas directamente en la sala, sólo una de las caras del filtro queda descontaminada. Esto ocurre también cuando los cajones de los filtros están situados fuera de la sala. Para cambiarlo es preciso emplear unas bolsas estancas termosellables diseñadas al efecto. Para ello se coloca una primera bolsa acoplada al cajón y a través de ella se extrae y se deposita el filtro en la bolsa que se sella y se corta quedando una parte cerrada con el filtro dentro y otra cerrada en un extremo y el otro acoplado al cajón. Sobre ésta se aplica otra bolsa con el nuevo filtro dentro. Se extrae el resto de bolsa antiguo, manipulando a través de la bolsa nueva y se deposita el nuevo filtro en el cajón.

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DUCHAS DE DESCONTAMINACIÓN. Funcionamiento.

El acceso a la zona de contención biológica en un laboratorio tipo BL-3 se realiza a través de dos puertas enclavadas con ducha. En la mayoría de los casos la entrada no se realiza por la ducha, pero en algunos caso como el del ejemplo sí.

Al tratarse de un laboratorio de contención biológica, las presiones conforme se entra en el recinto van más presión a menos, pues todo el recinto de biocontención se encuentra en depresión.

ENTRADA PERSONAL TÉCNICO

DUCHA

VESTUARIO FEMENINO ZONA SUCIA

DUCHA

VESTUARIO FEMENINO ZONA LIMPIA

VESTIBULO BL-3

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Entrada.

1. NOTIFICAR LA INTENCIÓN DE ACCEDER AL BL-3.

2. RECOGER LA VESTIMENTA DE TRABAJO •

Mono buzo protección biológica ( Tyvek)

•

Mascarilla protección respiratorio (P2)

•

Par de calcetines

•

Juego de ropa interior desechable

•

Toalla

3. ACCEDER AL VESTUARIO (ZONA LIMPIA) •

El acceso será facilitado por el Personal Técnico

4. DESPRENDERSE DE ROPA Y RESTO DE ACCESORIOS No esta permitido introducir al BL-3: •

Pendientes, cadenas, relojes, pirsin

•

Lentillas

•

Compresas

•

Cualquier otro tipo de material no descontaminable

5. COLOCARSE LA ROPA DE TRABAJO Y EQUIPOS DE PROTECCIÓN Se seguirá el siguiente orden: •

Ropa interior

•

Calcetines

•

Mono buzo

•

Mascarilla protección respiratoria

•

Guantes de protección (nitrilo)

•

Patucos desechables

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84

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6. SOLICITAR AUTORIZACIÓN DE ACCESO

A

ACCESO NO PERMITIDO

B

PULSAR

ACCESO PERMITIDO

7. ACCEDER AL VESTURARIO ZONA SUCIA •

Abrir puerta A

•

Cerrar puerta A

•

Esperar a oír enclavamiento puerta A y desenclavamiento puerta B

•

Abrir puerta B

•

Cerrar puerta B

8. COLOCAR UN SEGUNDO PAR DE GUANTES 9. COLOCAR ZUECOS •

Retirar patucos

•

Colocarse los zuecos

•

Volver a colocar los patucos sobre los zuecos

10. ACCEDER AL VESTIBULO ZONA BL-3

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85

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Salida.

1. ACCEDER AL VESTÍBULO PREVIO •

Nos desprendemos de los patucos y del primer par de guantes

•

Descontaminamos, en su caso, las gafas correctoras (CR-36 y aclarado posterior)

2. ACCEDER AL VESTUARIO ZONA SUCIA Nos retiramos la ropa y equipos de protección en este orden: •

Zuecos

•

Mono buzo

•

Ropa interior y calcetines

•

Guantes

•

Mascarilla

3. SOLICITAR AUTORIZACIÓN DE SALIDA 4.

ACCESO NO PERMITIDO

PULSAR

ACCESO PERMITIDO

5. ACCEDER A LA DUCHA •

Abrir puerta B

•

Cerrar puerta B

•

Proceder al duchado (150 segundos / 180 segundos)

6. ACCEDER AL VESTUARIO ZONA LIMPIA •

Una vez cortada la salida de agua, la puerta A se desenclavara

7. SALIDA DEL BL-3

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Mantenimiento.

El mantenimiento de la ducha de descontaminación básicamente consiste en: •

Verificación semanal del enclavamiento de puertas y seguridades.

•

Limpieza diaria de vestuarios y recinto de ducha.

TRATAMIENTO DE EFLUENTES (BIOWASTE).

Descripción.

El equipo de barrera destinado al tratamiento de los efluentes líquidos por choque

térmico

(BIOWASTE),

está

formado

básicamente

por

dos

depósitos: un acumulador donde se almacenan con la seguridad adecuada los líquidos hasta alcanzar el volumen adecuado y un digestor donde se realiza la esterilización propiamente dicha. Precisa para su funcionamiento de suministro de vapor, agua, aire comprimido y alimentación eléctrica.

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Los componentes principales del biowaste son:

4 5 7

3

2 1

1. Depósito recolector de líquidos por gravedad.

2. Bomba de trasiego de líquido del recolector al depósito acumulador, accionada por nivel de llenado del recolector.

3. Depósito acumulador dotado de controles de nivel, temperatura y seguridad.

4. Digestor dotado de controles de nivel, temperatura y seguridad.

5. Bomba de recirculación del digestor.

6. Intercambiador de enfriamiento.

7. Cuadro eléctrico de mando y control.

El vapor interviene en el proceso como agente de calentamiento suministrando calor limpio al contenido del digestor, mediante la energía de cambio de estado de vapor a líquido para calentar el contenido hasta la fase de esterilización.

El biowaste puede disponer de generador de vapor integrado o no. Si el generador de vapor va integrado, precisará que el agua de suministro tenga la calidad adecuada para no dejar incrustaciones tanto en el generador como en los circuitos, para lo que ha de tratarse mediante un sistema de ósmosis inversa o algún otro sistema de desmineralización.

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88

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Los aparatos con toma de vapor externa sólo

Al inicio del programa lo único que se hace es

emplean el agua para el proceso de enfriamiento,

recoger el agua de las zonas de trabajo hasta

para lo que se emplea un intercambiador de

alcanzar un volumen suficiente para realizar un

placas,

agua

proceso de esterilización en el digestor. Los

descalcificada. Únicamente interviene en un

efluentes llegan por gravedad al depósito

intercambio térmico sin cambio de estado.

recolector, de donde son elevados al acumulador

El aire comprimido se usa para el accionamiento

hasta que en éste se alcanza el volumen

de automatismos neumáticos del equipo y para

necesario y pasan al digestor para hacer un ciclo

presurizar los depósitos, a fin de asegurar la

de esterilización mientras en los otros depósitos

evacuación de agua del digestor, una vez

se siguen recogiendo efluentes.

procesada. El aire se debe suministrar seco,

El ciclo de tratamiento normalmente esteriliza

filtrado y exento de aceite.

los efluentes recogidos, los recipientes a presión

por

lo

que

será

suficiente

y los circuitos utilizados en el tratamiento.

Uso. El funcionamiento del biowaste se totalmente

El autómata que controla el funcionamiento del

automática mediante un programa

biowaste dispone habitualmente de un menú de

informático

el

histórico de ciclos y/o un registrador, donde

conjunto

queda reflejada información sobre las fechas y

sin

horas de los ciclos realizados, el número de

controla

de

forma que

comportamiento

del

acumulador-digestor,

rige

intervención directa de operador.

ciclos de cada tipo realizados, etc. Dependiendo del volumen de residuos generados en el laboratorio

se

deberá

información

diaria

o

comprobar

esta

semanalmente,

para

asegurarse de la ausencia de errores o alarmas.

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LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Mantenimiento.

Las Cualquier anomalía en el funcionamiento de un componente del sistema de tratamiento, incide con

más

o

menos

importancia,

en

el

funcionamiento y resultado final de los procesos que puede efectuar dicho equipo.

acciones

básicas

de

mantenimiento

preventivo han de asegurar que: Las condiciones de suministro de fluidos (vapor,

agua,

aire

comprimido,

electricidad) sean las adecuadas.

Se estén siguiendo las instrucciones de

Los sistemas de tratamiento están dotados de

operación indicadas por el fabricante

componentes

para el uso correcto del sistema de

fundamentales

para

su

funcionamiento, con una vida limitada en algunos casos y prácticamente ilimitada en otros.

El mantenimiento preventivo ha de permitir la sustitución de las piezas perecederas antes de que

pueda

afectar

negativamente

en

el

tratamiento.

Los equipos están instalados de acuerdo a normativas vigentes.

Se ajustan correctamente los instrumentos de medida y control.

Las acciones periódicas de mantenimiento que

funcionamiento del sistema de tratamiento.

han de ser planificadas en el sistema de Permite además conservar el equipo en buenas

seguimiento del equipo son:

condiciones de trabajo y detectar el desgaste prematuro de otras piezas. Debe ser realizado sólo por personal formado. El técnico de mantenimiento debe tener en cuenta que al

Operaciones diarias.

Estas operaciones diarias pueden ser efectuadas por el propio mantenedor/ operador del equipo:

inspeccionar el equipo y encontrar algún

Comprobar, si el aparato dispone de

componente defectuosos o deteriorado, éste debe

registrador gráfico, que dispone de

reemplazarse,

suficiente papel y el trazo escrito en el

asegurándose

que

funciona adecuadamente.

el

nuevo

mismo es bueno.

Si el sistema dispone de generador de vapor, realizar la purga del mismo.

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90

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Operaciones semanales.

Estas

operaciones

Comprobación

semanales

pueden

ser

del

indicador

de

temperaturas y contrastar su valor con

efectuadas por el propio mantenedor/ operador

un termómetro patrón o con los valores

del equipo:

indicados por el registrador gráfico.

Limpieza de filtro de entrada de residuos al Comprobación del indicador de presión y

acumulador. superficies

contrastar su valor con un manómetro

externas mediante paño humedecido

patrón o con los valores indicados por

con detergentes no ácidos.

el registrador gráfico.

Limpieza

general

de

las

Comprobación Operaciones trimestrales.

Estas

operaciones

trimestrales

del

valor

de

los

manómetros de acumulador, digestor y deben

ser

recámara digestor con el manómetro

realizadas por SAT:

patrón.

Comprobación de las condiciones de suministro de fluidos al sistema de Operaciones anuales.

tratamiento.

Limpieza de los filtros de alimentación y

por SAT:

evacuación de aire.

Limpieza del filtro de entrada de agua.

Limpieza de asiento, obturador y calibrado de las válvulas de seguridad de la cuba

Operaciones semestrales.

Estas

operaciones

semestrales

Estas operaciones anuales deben ser realizadas

deben

ser

realizadas por SAT:

del digestor, recámara del digestor y acumulador.

Limpieza de asiento y obturador de las

Limpieza de purgadores termostáticos.

Comprobación del reglaje y valor de tarado de los presostatos de control de suministro de fluidos y de la recámara del digestor.

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válvulas de retención de: rotura de vacío del digestor, entrada de aire del acumulador, acumulador,

entrada rotura

acumulador.

91

de

vapor

al

vacio

del

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Revisión de asiento de las válvulas neumáticas siguientes: entrada vapor

Operaciones decenales.

acumulador, entrada vapor recámara

Inspección y prueba periódica con OCA de los

digestor,

recipientes a presión.

purga

purga

recámara

digestor,

continua

digestor,

llenado

digestor, salida de agua recámara

AUTOCLAVE.

digestor, entrada de agua recámara digestor,

vaciado cámara digestor,

circuito

limpieza

despresurización contrapresión

digestor,

digestor,

aire

digestor,

contrapresión

recámara

aire digestor,

entrada de aire acumulador, entrada de agua biocontaminada al acumulador, escape

continuo

acumulador,

despresurización acumulador, entrada agua

fría

al

intercambiador

de

refrigeración.

Revisión bomba recirculación de agua.

Revisión bomba llenado acumulador.

Revisión y limpieza de incrustaciones calcáreas de tuberías.

Cambio de filtros estériles.

Funcionamiento.

La

esterilización

por

autoclave

usa

una

combinación de altas temperaturas y vapor presurizado para descontaminar los elementos colocados en la cámara de esterilización. Para elementos sólidos y materiales porosos, como ropa, residuos orgánicos, etc., se crea vacío en la cámara antes de la adición de vapor caliente.

Esto

asegura

que

el

vapor

penetre

completamente en el material. El objetivo de la esterilización es matar todos los patógenos que puedan estar presentes en el material y/o residuos, lo cual nos garantiza el paso de material de la zona B a la zona A (ver figura 1) con total seguridad.

Fases de esterilización.

Verificar funcionamiento de ciclos de trabajo.

Verificar estado del intercambiador de enfriamiento.

Verificar sensores de nivel de: acumulador, digestor y depósito recolector.

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Aire a las juntas.

Durante esta primera etapa se sellan las puertas mediante aire a las juntas. Una vez las juntas están contra las puertas, se pasa a la siguiente fase.

92

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Prevacío dinámico.

Calentamiento.

Se realiza vacío en la cámara hasta alcanzar la

Mantiene abierta la válvula de entrada de vapor a

presión de vacío determinada por el operario.

la cámara.

Una vez alcanzado este vacío se mantiene la

Se controla la apertura de la válvula de vapor a

válvula de vacío abierta y la bomba en

cámara correspondiente dependiendo de la

funcionamiento y a su vez la válvula de vapor

temperatura seleccionada y de la presión teórica

cámara

respecto a los valores reales de temperatura y

modulando

entre

0

y

un

30%

dependiendo de la presión de cámara, durante el tiempo seleccionado en la receta.

presión.

La presión teórica se calcula a partir de la

Esta fase es ideal para hacer vacío a reactores y

temperatura seleccionada, mediante la tabla de

sistemas filtrantes.

vapor de agua, en la que para cada temperatura le

Pulsos de vacío.

corresponde una presión.

Se entiende por pulsos en vacío el hecho de

Cuando la cámara alcanza la temperatura

hacer vacío dentro de la cámara hasta una

seleccionada empieza la esterilización.

presión seleccionada, seguido de la entrada de vapor hasta la presión seleccionada como presión máxima. Estos pulsos se repetirán tantas veces como se haya configurado en la receta.

Esterilización.

Durante la esterilización la válvula de entrada de vapor a cámara sigue regulando su apertura a partir de los mismos parámetros, con el fin de

Tiene por objeto la eliminación rápida del aire y

mantener la presión y la temperatura lo más

el precalentamiento del material a esterilizar.

estable posible.

Pulsos en presión.

La fase finaliza cuando la temperatura de control

Se entiende por pulsos en presión el hecho de

ha estado por encima de la temperatura

inyectar presión a la cámara de la autoclave hasta

seleccionada el tiempo seleccionado y el Fo

una presión seleccionada, seguido de una

acumulado es igual o mayor al Fo seleccionado.

descompresión hasta la presión seleccionada.

Estos pulsos se repetirán tantas veces como se haya seleccionado en la receta.

Esta fase es ideal para cargas porosas.

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El valor de Fo en la esterilización nos indica que según la temperatura de control y el tiempo de esterilización transcurrido, tiene el mismo efecto esterilizante que Fo minutos a 121 °C.

93

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Secado.

Enfriamiento.

Primero se descomprime la cámara hasta la

Para enfriar la carga, se presuriza y mantiene la

presión atmosférica más 10 kPa., en el caso de

cámara por encima de la presión para la

haber esterilizado por encima de este valor. En

esterilización, a la vez que se van eliminando

ese momento, abre la válvula de vacío cámara,

condensados.

en

el

momento

que

alcanza

la

presión

seleccionada, sin dejar de hacer vacío, inicia el

Al alcanzar la temperatura de control 100 °C, se

tiempo de secado en vacío.

deja de presurizar la cámara y con la bomba funcionando y la válvula de purga abierta, se

Cuando finaliza el tiempo en vacío incrementa el

consigue alcanzar la presión atmosférica más 10

número de pulsos y deja de hacer vacío e

kPa. lentamente. Una vez alcanzada esta presión

introduce aire estéril en la cámara hasta el valor

se introduce aire estéril en la cámara para

seleccionado de presión, en este momento

mantener presión

comienza a contar el tiempo en presión

haciendo purga con la bomba. Esta fase finaliza

manteniendo, con aire estéril, esa presión.

cuando la temperatura seleccionada es alcanzada.

Durante toda la fase de secado, la recámara se

Fin de ciclo.

mantiene llena de vapor a la presión de trabajo

Una vez finalizadas todas las fases se pasa a Fin

para facilitar el calentamiento y el secado del

de ciclo, momento en el cual la autoclave se

producto del interior de la cámara.

ajusta hasta presión atmosférica para poder abrir

La fase finaliza después del tiempo de vacío y

las puertas. Una vez se mantenga durante 30

haber

segundos seguidos a presión atmosférica el ciclo

realizado

el

número

seleccionados.

de

pulsos

atmosférica

acabará y dará permiso a la puerta que corresponda.

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y se sigue

94

LABORATORIOS BSL-3 3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Marketing online Mantenimiento.

El objetivo de un plan de mantenimiento es mostrar una guía de actuaciones para los elementos de la instalación que requieran un mantenimiento.

El

éxito

de

un

plan

de

mantenimiento depende básicamente de lo exhaustivo de la información y su correcto análisis, por lo que el plan de mantenimiento debe

convertirse

en

un

documento

modificable en función de sus necesidades y de la experiencia.

El plan de mantenimiento está basado en una serie de acciones y controles ntroles que según el caso deben

ser

desde

diarias

a

anuales.

Biotecnología Hospitalaria

vivo

Entendemos tendemos la elaboración del plan de marketing online para nuestros clientes como un proceso colaborativo.

La

información del mantenimiento debe ser anotada exhaustivamente ya que ésta puede ser de gran utilidad en otras operaciones de mantenimiento.

Somos muy conscientes de la importancia que tiene el marketing online en las empresas y trabajamos con el máximo rigor e ilusión.

Tenemos una amplia base de datos muy dirigida al sector salud y biotecnológico.

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95

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

Autoclave.

Período S S

Operación Comprobar y limpiar la superficie de la cámara con una solución de jabón y un paño.

Limpiar las superficies interiores de las puertas con una solución de jabón y un paño.

S

Limpieza de los paneles de control, pantalla, registrador e impresora.

D

Verificar el funcionamiento y papel de impresora y registrador.

6M

Inspección del aislamiento de la cámara.

D

Lubricar juntas en su alojamiento con spray de silicona.

6M

Verificar el funcionamiento de las válvulas de seguridad

5A

Sustitución o retimbrado de las válvulas de seguridad (Ver normativas de industria locales)

S

Extraer las juntas de su alojamiento y limpiarlas con una solución de jabón y un trapo limpio. Lubricarlas con spray de silicona.

2A S

Sustitución de la junta de la cámara Limpiar la célula fotoeléctrica y el reflector.

M

Comprobar que no haya fugas en los cilindros de las puertas: el movimiento debería ser continuo durante todo su recorrido.

M

Comprobar que los cilindros de bloqueo funcionen correctamente

M

Limpiar las guías de las puertas.

Prueba hidrostática de la cámara y Recamara y retimbrado (Ver normativas de industria locales)

5A

Tuberías.

Período

Operación

M

Inspección de fugas de las tuberías principales.

6M

Desmontar y limpiar los purgadores.

A

Verificar el estado y sujeción de tubos, reapretar si procede

A

Comprobar el estado de aislamiento térmico.

M

Reapretar Triclanes, y sustituir juntas si procede.

6M 3A

Verificar las tuberías auxiliares de control Sustitución de todas las juntas Triclamp

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Válvulas.

Período M 6M

Operación Inspección de las válvulas de seguridad.

Accionar las válvulas manuales.

2A

Inspeccionar y limpiar las válvulas manuales. Sustituir en caso necesario.

A

Desmontar y limpiar las válvulas de aguja.

2A

Desmontar y limpiar las válvulas neumáticas, sustituir juntas de cierre si es necesario.

A

Comprobar el funcionamiento y cierre de las válvulas neumáticas

6M

Comprobar el funcionamiento de las electroválvulas.

Filtros.

Período

Operación

D

Desmontar y limpiar los filtros coladores

6M

Desmontar y limpiar los filtros coladores

M

Limpiar el filtro de rompe vacío

M

Limpiar filtro o sustituir si fuese necesario

Bombas.

Período

Operación

M

Comprobar la ausencia de fugas en la bomba de vacío

M

Comprobar al entrada de aire a bomba

M

Comprobar la temperatura de salida de la bomba.

6M

Limpieza del sistema de refrigeración del motor y comprobar el calendario de engrases aconsejado por el fabricante de la bomba.

Sistema neumático.

Período 6M M

Operación Comprobar la ausencia de fugas en todas las válvulas neumáticas.

Comprobar la ausencia de fugas en las conexiones de entrada de aire a las juntas.

2A M 6M 6M A

Comprobar la ausencia de fugas en el depósito auxiliar de juntas.

Comprobar la ausencia de fugas en los cilindros.

Comprobar la ausencia de fugas en las electroválvulas.

Comprobar la ausencia de fugas en todas las conexiones de cilindros.

Comprobar el funcionamiento de las válvulas de retención.

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97

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Instrumentos.

Período 6M 6M

Operación Temperatura (SONDAS) Reapretar conexiones.

Calibrar lecturas.

Temperatura (Termostatos)

6M 6M 6M 6M 6M A M 6M 6M M A M 6M

Reapretar conexiones.

Comprobar funcionamiento Presión (Transductores) Reapretar conexiones Calibrar lecturas Presión (Presostatos) Reapretar conexiones Comprobar punto de ajuste Comprobar actuación.

Comprobar actuación.

Presión (Manómetros) Comprobar estado.

Comprobar ausencia de fugas.

Calibrar lectura.

Nivel (Interruptores de nivel) Comprobar estado y funcionamiento.

Señales eléctricas Comprobar y ajustar, finales de carrera de puerta.

Componentes eléctricos.

Período

Operación

6M

Usar aire comprimido seco y baja presión, para limpiar el interior del cuadro eléctrico.

6M 6M 6M 6M A

Comprobar el contactor de la bomba de vacío, y consumo.

Comprobar todos los cables de potencia.

Comprobar todos los cables de control.

Comprobar las protecciones.

Comprobar las tensiones de maniobra

6M

Comprobar las salidas de ventilación. Limpiar la pantalla táctil y el panel principal.

A S D S

Comprobar todos los terminales de conexión de motores sensores en general.

Limpieza de la pantalla táctil y registrador Verificar el estado de papel de la impresora y registrador Comprobar el funcionamiento de la fotocélulas de las puertas.

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98

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Así mismo el SAS dispone de una toma para introducir Peróxido al interior de la cámara, es SECURITY AIRLOCK SYSTEM O SAS.

por ello que en el cuadro dispongamos de un selector para elegir entre una desinfección por

Características

formol o una desinfección por peróxido de hidrógeno.

El

equipo

se

ha

construido

con

panel

autoportante tipo sándwich con caras de acero inoxidable AISI 304 de 0.6 mm y alma de

El equipo ofrece una estanqueidad entre salas y

espuma de poliestireno extruido, con puertas de

entre cada sala y su cámara interna, debido a que

acceso enclavadas al interior del mismo de acero

se ha dotado a cada una de las puertas de una

inoxidable enrasada al piso con junta neumática

junta perimetral e hinchable para este fin.

perimetral, ventana y enclavamiento eléctrico, con junta alojada en el perímetro del canto de la hoja. Se trata de una junta hinchable perimetral

Funcionamiento.

continua de neopreno de 40x15 mm de grosor

En el presente capitulo detallamos las secuencias

que permite el cierre estanco de las puertas. Las

de operación para cada uno de los SAS de sala

cerraduras son electromagnéticas de última

con junta hinchable.

generación que no necesitan rampas para acceso.

Como hemos citado anteriormente, los sas pueden Con formolizador interior en hueco lateral diseñado para una correcta saturación sin condensaciones. Sistema de convección forzada

funcionar

realizando

ciclos

de

descontaminación bien con un formolizador o con un generador de Peroxido.

Secuencia funcionamiento del ciclo.

que asegura la perfecta homogeneización de la mezcla del agente germicida.

En el siguiente esquema se puede observar las secuencias o ciclos que se realiza el SAS dependiendo de la puerta que se abra en cada caso. Para ello sería conveniente ver la figura 1 de la página . Los tiempos de ventilación y el ciclo de peróxido o formo variará en función del tamaño del SAS a tratar.

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ABRIR A

ABRIR B

BLOQUEO B

BLOQUEO A

CERRAR A

CERRAR B

INICIO CICLO

INICIO CICLO

VENTILACION 4 MIN

VENTILACION 2 MIN

DESBLOQUEO B

SEÑAL INICIO PEROXIDO

FINAL CICLO

SEÑAL FINAL PEROXIDO

VENTILACION 8 MIN

DESBLOQUEO A

FINAL CICLO

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101

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Mantenimiento.

Eléctrico.

Antes de maniobrar en el cuadro eléctrico, se procederá a desconectar el interruptor del cuadro de distribución que alimenta al citado cuadro eléctrico así como el interruptor de corte de las

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baterías.

Antes de proceder a maniobrar cualquier elemento eléctrico, es preciso desconectar el correspondiente interruptor.

Antes de proceder a revisar o reparar cualquier elemento accionado por un motor eléctrico, es preciso

desconectar

el

interruptor

correspondiente al motor.

http://campusvirtual.segla.net/

“Oportunidades esperando tus ideas”

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102

LABORATORIOS BSL-3 Y LAS BARRERAS DE CONTENCIÓN PRIMARIAS Y SECUNDARIAS, CONSIDERACIONES DE DISEÑO

•

Mensualmente comprobar el correcto

En el caso de avería del ventilador de extracción,

funcionamiento de las lámparas, en

se procederá a eliminar el cordón de silicona y

caso de fundirse, proceder a la

desconectarlo de la caja de conexiones.

sustitución de las mismas.

•

Limpiar semestralmente el cuadro Filtros.

eléctrico con aire comprimido Semestralmente comprobar el estado de los

relés

debido

provocado

por

al

salto

desgaste de

(chispas), así como el estado de todos los cables de potencia y maniobra.

•

•

arco

Sustitución del filtro G3-G4 cada dos meses.

•

Sustitución de los filtros HEPA (EU10 a EU14/ H10 a H16):

Es recomendable el cambio de los filtros HEPA

Comprobar anualmente las fijaciones de los cables y que estén tensados

cuando los filtros existentes tengan un incremento de carga superior a 5-8 mm.c.d.a.

Ventiladores y motores.

(50-80 Pa) a la perdida de carga medida en las

No manipular ningún aparato móvil, sin antes

condiciones iniciales.

haber desconectado su elemento motriz.

Después de un cambio de filtros absolutos es

No acercarse a ningún aparato u órgano en

necesario realizar un Test de integridad D.O.P.,

movimiento sin extremar las precauciones y en

con el fin de asegurar la eficacia de filtración de

ningún caso vistiendo ropas que no sean

los filtros y la correcta estanqueidad de la junta

enterizas y ajustadas.

de estos con el bastidor de la caja de filtración.

Los ventiladores no deben trabajar nunca sin una protección adecuada.

Verificar de vez en cuando que los reguladores de

velocidad

de

los

ventiladores

están

encendidos, bajo ningún concepto tocar la regulación de los mismos.

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103

DISEÑO,

INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

DE

LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

BL3/BL4

Y

ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)

INTRODUCCIÓN.

El

pueblo

de

Ecuador

y

los

servicios en sanidad animal, que

PROYECTO

CONSTRUCCIÓN

involucran

LABORATORIO VETERINARIO CON

nacionales

NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL

erradicación

3)

los

programas

de

control

de

Fiebre

y

Aftosa,

Brucelosis, Tuberculosis Bovina, Rabia Silvestre, Cólera Porcino,

PATRICIO SANDOVAL Médico Veterinario. Responsable Laboratorio Sanidad Animal. AGROCALIDAD.

Anemia Infecciosa Equina y las enfermedades aviares (Influenza Aviar,

Newcastle,

Salmonelosis,

Agrocalidad

Laringotraqueitis),

así

Quito/Ecuador

vigilancia

enfermedades

de

las

como

la

exóticas como la Influenza Aviar, la

Encefalopatía

requieren técnico

del de

apoyo un

diagnóstico

Espongiforme;

y

y

soporte

laboratorio de

control

de de

calidad y de un área específica para manejo de microorganismos de

alto

riesgo

zoonótico

y

epidemiológico, de

importancia

económico.

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104

DISEÑO,

INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

DE

LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

BL3/BL4

Y

ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)

Para fines pertinentes se dirá que la bioseguridad es

el

conjunto

de

medidas

preventivas,

destinadas a mantener el control de factores de riesgo

laborales

procedente

de

agentes

biológicos, físicos o químicos, logrando la

Cosa similar sucede con la Peste Porcina

Clásica,

Encefalitis

Espongiforme Bovina (BSE), Rabia

prevención de impactos nocivos, asegurando que

Paresiante, los diferentes tipos de

el desarrollo o producto final de dichos

influenzas y las enfermedades de

procedimientos no atenten contra la salud y

control que son exóticas a nuestro

seguridad del personal del laboratorio.

país,

tal

es

diferentes

el

tipos

caso de

de

los

Influenzas

JUSTIFICACIÓN DE NECESIDAD DE UN

altamente

BSL3

diagnóstico y manipulación deben

Muchas de las enfermedades de control oficial,

realizarse dentro de un laboratorio

enfermedades exóticas y una vez que el Ecuador

patógenas.

Su

que mantenga altos niveles de

sea declarado libre de Fiebre Aftosa, esta enfermedad debe ser tratada exclusivamente en

biocontención,

con

normas

de

este tipo de laboratorio, adicionando un nivel

bioseguridad tipo 3 o más alta.

superior de bioseguridad (BSL 3+), equivalente

(BSL 3A O BSL 4)

al nivel de Bioseguridad Agricultura (BSL 3A).

OBJETIVOS. El

objetivo general de construir este tipo de

laboratorio (BSL 3) es para disponer de un área diagnóstica ideal para la determinación, estudio y

aislamiento

de

agentes

patógenos

que

requieren de este tipo de contención para evitar su diseminación.

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105

DISEÑO,

INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

DE

LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

BL3/BL4

Y

ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)

INFRAESTRUCTURA

FÍSICA-

Otro de los objetivos es el de reducir al mínimo

CONSTRUCCIONES E INSTALACIONES

la exposición del personal de los laboratorios,

El Laboratorio BSL 3 tiene la particularidad de

otras

ser diseñado para disponer de instalaciones de

personas

y

el

entorno

a

agentes

potencialmente peligrosos.

gran complejidad técnica para cumplir con las

Poner al servicio del público en general una

rigurosas

herramienta ideal para manipulación de agentes altamente investigación,

infecciosos

para

aislamiento,

fines

identificación

de y

medidas

de

bioseguridad

que

garanticen el adecuado manejo y control de microorganismos vivos y agentes infecciosos que serán manipulados.

conservación de los mismos.

Las medidas de bioseguridad que deben aplicarse en este tipo de laboratorios y las instalaciones ENFERMEDADES

CON

PRESENCIA

DEMOSTRADA EN ECUADOR

que

manipulen

agentes

infecciosos

vivos

dependientes del nivel de riesgo de los

El control oficial de las enfermedades que

microorganismos

afectan a los animales, no ha sido el idóneo a

incrementará de manera relevante cuando se

través de los tiempos, esto debido a que el país

manipulen virus de enfermedades vesiculares, en

no contaba con un laboratorio oficial de control y

especial de fiebre aftosa que pudieran ser

monitoreo de enfermedades de interés pecuario

liberadas al medio ambiente como consecuencia

ni de control de enfermedades emergentes y

de un accidente laboratorial cuando el país sea

reemergente, mucho menos de la investigación,

declarado como libre de esta enfermedad.

control y aislamiento de agentes patógenos de peligro en un laboratorio adecuado para este tipo de control.

a

ser

analizados

Para cumplir este requerimiento, es necesario comprender

los

diferentes

tipos

de

microorganismos y el nivel de bioseguridad que requieren para su manipulación.

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se

106

DISEÑO,

INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

DE

LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

BL3/BL4

Y

ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)

BIOSEGURIDAD

CLASIFICACIÓN

DE

Bioseguridad: La Organización Mundial de la

BIOLÓGICOS

Salud (OMS), define la Bioseguridad como: “El

Los “agentes biológicos” se definen como

término utilizado para referirse a los principios,

microorganismos

técnicas y prácticas aplicadas con el fin de evitar

reproducirse y transferir material genético,

la exposición no intencional a patógenos y

susceptibles de generar cualquier tipo de

toxinas o su liberación accidental”.

infección, reacción alérgica o toxicidad.

RIESGO DE CONTAMINACIÓN

De modo convencional, los riesgos relativos de

vivos

LOS

con

AGENTES

capacidad

de

los agentes infecciosos se clasifican en grupos de El elemento más importante de la contención

es

el

cumplimiento

estricto de adecuadas prácticas y técnicas microbiológicas.

riesgo: 1, 2, 3 y 4. El grupo de riesgo 1 representa el mínimo nivel de riesgo para el personal de laboratorio y la comunidad y el grupo de riesgo 4 representa el máximo.

En el nivel de bioseguridad requerido (BSL3) se

Las

personas

infecciosos

o

que

trabajan

materiales

con

agentes

potencialmente

manipulan agentes biológicos del grupo 3, agentes

que

pueden

ser transmitidos

por

infectados deben conocer los riesgos potenciales,

partículas del ambiente a través de aire y pueden

y también deben estar capacitados y ser expertos

causar enfermedad seria o que amenaza la vida

en las prácticas y técnicas requeridas para

de las personas.

manipular dichos materiales en forma segura.

El Manual de Bioseguridad en el Laboratorio, en La organización a cargo del laboratorio será

su tercera edición de la OMS, señala que para

responsable de brindar los mecanismos de

trabajar con enfermedades como las abajo

capacitación adecuada para el personal.

enlistadas, se debe manejar la bioseguridad de manera estricta en lo referente a las medidas dentro del laboratorio, así como las instalaciones y el equipamiento adecuado.

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DISEÑO,

INSTALACIONES

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PUESTA

EN

MARCHA

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LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

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1. Bacterias: 1. Brucella abortus, B. mellitensis,

Estas enfermedades, constan entre las que han sido tomadas en cuenta como prioritarias a ser

B. suis, B. canis 2. Mycobacterium

tuberculosis,

diagnosticadas en el laboratorio de sanidad animal de AGROCALIDAD, y requieren que

bovis

para su estandarización entre las pruebas a ser

3. Pseudomona pseudomallei

realizadas, que se cuente con un nivel de

2. Priones: 1. Encefalopatía

espongiforme

bioseguridad 3 (BSL 3), debido a que son entes

bovina

patológicos con alto riesgo biológico de gran

2. Scrapie

contaminación, ya sea por aire, fómites y

3. Encefalitis

espongiforme

personal de laboratorio, se haga necesario disponer de control con barreras que limiten su

transmisible

salida y difusión.

3. Virus: 1. Rinoneumonitis equina 2. Rinotraqueitis infecciosa bovina 3. Artritis y encefalitis caprina

DEFINICIÓN

4. Encefalitis equina del Este

BIOSEGURIDAD EN LABORATORIOS

5. Encefalitis equina del Oeste

El nivel de bioseguridad deberá ser asignado al

6. Enfermedad

laboratorio o a un área del laboratorio de acuerdo

de

Newcastle

(velogénica)

DE

LOS

NIVELES

DE

con el tipo de microorganismo que se manipule.

7. Enfermedad vesicular del cerdo De acuerdo con el Manual de Bioseguridad en

8. Estomatitis Vesicular

Laboratorios de Microbiología y Biomedicina

9. Fiebre aftosa

(Cuarta Edición), publicado por el CDC (Center

10. Influenza aviar

for Disease Control and Prevention) y el NIH

11. Metritis contagiosa equina

(National Institute of Health) de los Estados

12. Peste porcina clásica 13. Rabia virus calle y virus salvaje

manera los

(rabia paralítica) 14. Síndrome

respiratorio

Unidos de América, se clasifican de la siguiente

y

niveles

de bioseguridad

instalaciones de laboratorio.

reproductivo porcino (PRRS) 15. Fiebre del Valle del Rift www.biotecnologiahospitalkaria.com

108

para

DISEÑO,

INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

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LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

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Nivel de bioseguridad 1

Nivel de bioseguridad 2

Las prácticas, los equipos de seguridad, el diseño

Las prácticas, los equipos, el diseño y la

y la construcción de la instalación del Nivel de

construcción de instalaciones del Nivel de

Bioseguridad 1 son adecuados para laboratorios

Bioseguridad 2 son aplicables a laboratorios

destinados a la educación o capacitación

educativos, de diagnóstico, de producción,

secundaria

otros

clínicos u otros laboratorios donde se trabaja con

laboratorios en los cuales se trabaja con cepas

un amplio espectro de agentes de riesgo

definidas y caracterizadas de microorganismos

moderado que se encuentran presentes en la

viables que no se conocen como generadores

comunidad

sistemáticos de enfermedades en humanos

enfermedad humana de variada gravedad.

o

universitaria,

y

para

adultos sanos.

y

que

están

asociados

con

Se deben utilizar las demás barreras primarias

OMS - Nivel 1: “Grupo de riesgo 1 (riesgo

que correspondan, tales como máscaras contra

individual

nulo)

salpicaduras, protección facial, delantales y

pocas

guantes.

y

poblacional

Microorganismos

que

escaso

o

tienen

probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales”. (MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Tercera Edición ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD, Ginebra 2005).

Ejemplo

de

microorganismos

thuringiensis,

grupo

1:

Lactobacillus

acidophylus, Micrococcus luteus. Neurospora crassa,

Pseudomonas

fluorescens,

marcesens.

como

piletas

para

lavado

de

manos

instalaciones de descontaminación de desechos a fin de reducir la contaminación potencial del

Serratia

OMS - Nivel 2: “Grupo de riesgo 2 (riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo)Manipula

agentes

patógenos

que

pueden

provocar enfermedades humanas o animales pero que tienen pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la población, los animales o el medio ambiente.

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e

medio ambiente.

Agrobacteriun radiobacter, Aspergillus níger, Bacillus

Se debe contar con barreras secundarias, tales

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INSTALACIONES

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BIOSEGURIDAD

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La exposición en el laboratorio puede provocar

La tuberculosis Mycobacterium, el virus de la

una infección grave, pero existen medidas

encefalitis de St. Louis, y el Coxiella burnetii

preventivas y terapéuticas eficaces y el riesgo de

son representativos de los microorganismos

propagación es limitado.” (MANUAL DE

asignados a este nivel.

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Tercera Edición ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Ginebra 2005).

Las barreras secundarias para este nivel incluyen el acceso controlado al laboratorio y estrictos requisitos de ventilación que minimicen el riesgo

Ejemplo de microorganismos de este grupo

de liberación de aerosoles infecciosos desde el

según OIE: Virus: Virus de influenza tipos A, B

laboratorio.

y C; virus de la enfermedad de Newcastle; virus Orf (parapoxvirus). Bacterias: Alcaligenes spp.; Arizona spp.; Campylobacter spp.; Chlamydia psittaci

(no

aviar);

Clostridium

tetani;

Clostridium botulinum; Corynebacterium spp.; Erysipelothrix rhusiopathiae; Escherichiae coli; Haemophilus spp.; Leptospira spp.; Listeria monocytogenes; Moraxella spp.; Mycobacterium avium;

Pasteurella

spp.;

Proteus

spp.;

Pseudomonas spp.; Salmonella spp.; Hongos: Aspergillus

fumigatus;

Microsporum

spp.;

OMS - Nivel 3: “Grupo de riesgo 3 (riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo) Agentes

patógenos

que

suelen

provocar

enfermedades humanas o animales graves, pero que de ordinario no se propagan de un individuo a

otro.

Existen

terapéuticas

medidas

eficaces”.

preventivas

(MANUAL

y DE

BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO Tercera Edición ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Ginebra 2005).

Ejemplo de microorganismos de este grupo

Trichophyton spp.

según OIE: Grupo 3 Virus: Virus de la rabia; Nivel de bioseguridad 3

virus de la encefalomielitis equina (tipo Este,

Las prácticas, equipos de seguridad y el diseño y

tipo Oeste, tipo Venezolano); virus de la

la construcción de las instalaciones del Nivel de

encefalitis japonesa B; virus de la encefalitis

Bioseguridad 3 pueden aplicarse a instalaciones

ovina.

clínicas, de producción, investigación, educación

Burkholderia mallei (Pseudomonas mallei);

o diagnóstico, donde se trabaja con agentes

Brucella spp.; Chlamydia psittaci (solo cepas

exóticos

aviares); Coxiella

con

respiratoria,

y

potencial que

pueden

de

transmisión provocar

una

Bacterias:

Bacillus

burnetti; Mycobacterium

bovis. Encefalitis Espongiforme bovina.

infección grave y potencialmente letal. www.biotecnologiahospitalkaria.com

anthracis;

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INSTALACIONES

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DE

BIOSEGURIDAD

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Nivel de bioseguridad 3 a

Nivel de bioseguridad 4

OIE - Nivel 3A. “Grupo de riesgo 3A” (riesgo

Las prácticas, equipos de seguridad, el diseño y

individual y poblacional elevado).

la construcción de instalaciones del Nivel de Bioseguridad 4 son aplicables al trabajo con

Agentes

patógenos

que

suelen

provocar

enfermedades graves en los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente existen medidas preventivas y terapéuticas eficaces, sin

agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual de enfermedades que ponen en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de aerosoles y para las cuales no existen vacunas o terapias disponibles.

embargo, las pérdidas económicas asociadas a brotes de la enfermedad representan un riesgo

Los agentes con una relación antigénica cercana

elevado.

o idéntica a los agentes de los Niveles de Bioseguridad 4 deben manejarse conforme a las

La OIE ha establecido principalmente esta categorización para el virus de la fiebre Aftosa y en general para ciertos agentes biológicos que tengan efectos en especies animales de gran tamaño. El USDA-ARS (US Department of Agriculture / Agricultural Research Service) ha

recomendaciones de este nivel. Cuando se han obtenido datos suficientes, el trabajo con estos agentes puede continuarse a este nivel o a un nivel inferior. Los virus como Marburg o la fiebre

hemorrágica

Congo-Crimeana

se

manipulan al Nivel de Bioseguridad 4.

adoptado en sus exigencias y estándares el nivel 3A de biocontención.

OMS - Nivel 4. “Grupo de riesgo 4 (riesgo individual y poblacional elevado) Agentes

El ser humano puede ser portador e importante vector en la transmisión de la enfermedad, motivo por el cual se deben garantizar óptimos procedimientos para manejo del personal en los laboratorios.

patógenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y que se transmiten fácilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente no existen medidas preventivas y terapéuticas

Las instalaciones que deben cumplir BSL3A son

eficaces.” (MANUAL DE BIOSEGURIDAD

las mismas exigidas para microorganismos de

EN EL LABORATORIO Tercera Edición

nivel 4, con algunas pocas excepciones.

ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD Ginebra 2005.)

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INSTALACIONES

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PUESTA

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MARCHA

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BIOSEGURIDAD

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El área requerida para el funcionamiento de un ENFERMEDADES A SER

laboratorio con las características requeridas

DIAGNÓSTICADAS

deberá ser manejado en un área de 500 m2 de

Por el tipo de laboratorio, las enfermedades a ser

área libre funcional.

diagnosticadas son: Entre las construcciones a contratarse constan: 1. Cultivos Bacterianos de: 1. Brucella abortus, B. mellitensis,

o Construcción de un Laboratorio BSL 3

B. suis, B. canis 2. Mycobacterium

tuberculosis,

o Diseño de Áreas. o Sistemas de ingresos del personal.

bovis

o Sistema de ingreso de muestras

2. Priones: 1. Encefalopatía

espongiforme

(Pass box, Pass trougth, SAS químico)

bovina

o Diseño

2. Scrapie 3. Encefalitis

espongiforme

de

tratamiento

de

efluentes. o Diseño de los sistemas eléctricos

transmisible

y de transmisión de voz y datos.

3. Virus:

o Diseño de sistemas de telemetría,

1. Encefalitis equina del Este

automatización y control de los

2. Encefalitis equina del Oeste 3. Enfermedad

de

Newcastle

o Descripción de los componentes y

(velogénica)

materiales

4. Enfermedad vesicular del cerdo

proyectados

5. Estomatitis vesicular

constructivos en

los

planos

arquitectónicos.

6. Fiebre aftosa

o Sistema de detección y alarma de

7. Influenza aviar

incendio.

8. Peste porcina clásica 9. Rabia virus calle y virus salvaje

respiratorio

reproductivo porcino (PRRS)

o Diseño de sistema de gases. o Oficina técnica externa

(rabia paralítica) 10. Síndrome

demás sistemas.

y

o Esterilización y tratamiento de material biológico o Área técnica interna

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INSTALACIONES

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RIESGOS

ASOCIADOS

AL

LABORATORIO BSL3 Debido al inminente riesgo que implica el manejo de enfermedades y su afectación al medio ambiente y personas y animales del entorno, es indispensable realizar un buen manejo de medidas de la bioseguridad y el correcto tratamiento de los productos y efluentes de los respectivos análisis, se convertirán en

ÁREAS DISEÑADAS •

Acceso de personas

El área laboratorial tendrá acceso restricto bajo sistema de identificación individual que permita trazabilidad

con

claves

alfa

numéricas

individuales y/o registro de huella dactilar para las diferentes áreas internas, también deberán tener control de acceso por igual bajo un sistema individual y solo permitido al personal interno.

desechos los cuales de no darles el tratamiento adecuado, causarán un gran daño no sólo al ambiente del lugar, sino a todo el sistema

•

Vestidores:

ecológico del la zona y de otros lugares vecinos.

Dentro del laboratorio BSL 3, el personal portará Para el caso de Ecuador, donde hasta el momento no se han presentado casos de fiebre aftosa por más de 37 meses, se vuelve inminente la utilización de este tipo de laboratorio en vista de que esta enfermedad se la ubica en el grupo de riesgo 3 agricultura (BSL 3 A).

ropa adecuada para esta área, luego para el ingreso al BSL 3 deben mudar completamente de ropa a ropa de laboratorio, incluida ropa interior descartable. El área contempla un vestidor de uso general con una zona considerada limpia, donde se dejarán todas las pertenencias y ropas del laboratorio BSL 3, y un vestidor donde el personal calzará y vestirá indumentaria adecuada para

trabajar

exclusivamente

dentro

del

laboratorio BSL 3.

A la salida de esta área, en el vestidor interno se dejará toda la ropa y calzado utilizado dentro de la zona restringida, obligatoriamente tomará una ducha y ocupará ropa de aseo personal externa.

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•

•

Lavamanos:

Tratamiento del aire:

Debe existir uno en cada sección o sala de los

El sistema de ventilación del área laboratorial

laboratorios y deberá contar con un sistema de

debe ser exclusivo para dicha área y sin

grifos que puedan accionarse sin la utilización de

recirculación.

las manos. El sitio más recomendable para su

dimensionadas para obtener una circulación de

ubicación es cercano a la puerta de salida.

aire adecuada desde áreas potencialmente menos

•

presiones

deberán

ser

contaminadas hacia las más críticas con un Lavaojos y duchas de emergencia:

Es necesario contar con un sistema de ducha de emergencia y lavaojos en el interior del área diagnóstica cercana a las salas de mayor riesgo, además de un equipo de ayuda en caso de emergencia, y uno estratégicamente localizado para uso general.

•

Las

diferencial mínimo de 15 Pa entre las salas.

El aire extraído deberá pasar por dos filtros HEPA con eficiencia 99,97% para partículas de hasta 0.3 micrones, dispuestos en serie. Debe contar con dos ventiladores de extracción instalados en paralelo siendo uno de emergencia y accionado por alternancia automatizada, quedando siempre uno en "stand by". En cuanto

Tratamiento de efluentes:

a las presiones negativas, Todo el efluente liquido generado en el área, inclusive agua de las duchas y de los sanitarios,

iniciar con un

la cascada deberá

mínimo de -15 Pa en los

vestidores internos.

debe ser descontaminado antes de ser vertido al sistema público. deberán

garantizar

Las cañerías y accesorios su

estanqueidad,

como

asimismo soportar la presión negativa de las

•

Residuos sólidos.

salas sin que se produzcan desifonajes. Todo el

El proyecto deberá presentar recomendaciones

sistema debe ser construido en acero negro.

para el manejo de los residuos sólidos que además de la normativa general que el propio

El proceso de tratamiento debe ser químico y/o térmico.

laboratorio

establezca

en

función

de

las

exigencias internacionales por bioseguridad y legislación vigente en el país, cumpla con las normativas ambientales vigentes.

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•

Autoclave:

ÁREAS

DE

DIAGNÓSTICO

Utilizado en la descontaminación y esterilización

IMPLEMENTADAS

de materiales descartables, material de vidrio y

Área de serología.

residuos

sólidos.

Utilizarán

calor

húmedo

(vapor) a 121 °C o mas, operadas con restricción por identificación por claves alfa numéricas individuales que permitan trazabilidad de su operación.

A

SER

Esta área permitirá hacer el monitoreo y control del

comportamiento

inmunológico

de

las

enfermedades mediante la seroconversión, ya sea por la aplicación de vacunas o por la exposición a los agentes patógenos de la enfermedad que se

Deberán asegurar la esterilización de lo tratado,

está monitoreando. Las enfermedades que se

con control y registro de tiempo, presión y

estudiarían en esta área son:

temperatura.

Fiebre Aftosa y Enfermedades Vesiculares.

Peste Porcina Clásica.

PERSONAL

Influenza Porcina.

El personal requerido para este tipo de

Influenza Aviar.

laboratorio,

Brucelosis

son

técnicos

altamente

especializados en técnicas diagnósticas por virus

Enfermedad de Newcastle.

neutralización, serología, microbiología y sobre todo en el manejo de normas de bioseguridad

Área de virología.

para laboratorios BSL 3, éstos deben ser médicos veterinarios microbiología,

con

especialización

epidemiología

en

veterinaria,

cultivos celulares y crianza de animales de laboratorio; eventualmente pueden ser técnicos de carrera afines al diagnóstico con experiencia en enfermedades zoonósicas y de biología molecular.

Dentro de esta área se dará prioridad al análisis de

agentes

patógenos

virales,

los

cuales

requieren ser analizados o aislados, de manera tal que, se pueda orientar el diagnóstico de patógenos virales. Tratamiento de cultivos celulares,

aislamiento

viral

y

virus

neutralización. Además un área para extracción de material genético de patógenos que entran en el diagnóstico de este laboratorio.

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INSTALACIONES

Y

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BIOSEGURIDAD

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Encefalopatía

Enfermedades:

espongiforme

Bovina.

Será

aplicada las pruebas de inmunihistoquímica y

Fiebre Aftosa.

Transfer Blot a todas las muestras con sospecha

Peste Porcina Clásica. En esta área se llevará a

de rabia paralíca que lleguen al laboratorio.

cabo pruebas de inmunofluorescencia directa para la detección antigénica a partir de cortes de

Área de bacteriología.

amígdalas, bazo, riñón y nódulos linfáticos

El área de bacteriología será implementada para

empleando anticuerpos monoclonales, de manera

llevar a cabo el análisis de enfermedades de

que pueda ser diagnosticado a partir de muestras

importancia sanitaria como lo son Salmonella y

de animales sospechosos. Se tiene previsto

Mycobacterium, las cuales no solo representan

analizar, en base a estudios de prevalencia

un riesgo para la salud animal sino también, son

obtenidos en otros países, 1600 muestras de las

riesgo para la salud humana.

cuales las que resulten ser positivas, se emplearán para llevar a cabo el aislamiento viral e identificación del agente mediante RT – PCR.

Enfermedades:

Rabia. La prueba recomendada tanto por la OIE

Brucelosis Bovina. El aislamiento de esta

como

identificación

bacteria se llevará a cabo a partir de muestras de

inmunoquímica del antígeno del virus, mediante

tejido o leche, de manera tal que se puedan aislar

la prueba de Inmunofluorescencia, la cual tiene

cepas lisas, las cuales seleccionen a fin de poder

una fiabilidad del 95 – 99%. El análisis se estima

emplearlas en el análisis confirmatorio por

llevarse a cabo en unos 100 animales.

medio de PCR.

por

la

OMS,

Encefalomielitis

es

equina

la

venezolana.

Será

Área de cultivo celular.

identificada mediante la prueba de fijación de

Está diseñada para la preparación de líneas

complemento

celulares que se emplearán en el aislamiento y

o

Inhibición

de

la

hemoaglutinación tras la inoculación en cultivo

replicación

celular.

confirmación de enfermedades virales.

Los

caracterizados

aislados

además

por

podrán

medio

ser

viral

para

el

de

inmunofluorescencia indirecta.

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diagnóstico

y

DISEÑO,

INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

DE

LABORATORIOS

DE

BIOSEGURIDAD

BL3/BL4

Y

ANIMALARIOS DE INVESTIGACIÓN.PROYECTO CONSTRUCCIÓN LABORATORIO VETERINARIO CON NIVEL DE BIOSEGURIODAD 3 (BSL 3)

Los cultivos se examinarán en cuanto a

Enfermedades: Enfermedades vesiculares. Para el diagnóstico de esta enfermedad, se procederá a inocular las muestras en las que se sospeche del virus en

crecimiento vírico por inmunofluorescencia, el aislamiento

positivo

se

caracterizarán

por

secuenciación génica parcial.

líneas celulares de células VERO, BHK-21 o IB

Adicionalmente la prueba de neutralización

RS-2, estas líneas celulares se sembrarán y

vírica con anticuerpo fluorescente (prueba

desarrollarán a fin de poder ser empleadas en el

prescrita

proceso

requiere aislar el virus en cultivo celular.

de

diagnóstico

diferencial.

Cabe

indicarse que el virus de la Estomatitis vesicular desarrolla efecto citopático en las tres líneas celulares, el virus de Fiebre aftosa desarrolla efecto citopático en el grupo de líneas celulares BHK-21, mientras que el virus de Exantema Vesicular del cerdo afecta al grupo IB RS-2.

Posterior al aislamiento en cultivo celular, se efectuarán las pruebas de confirmación.

Peste Porcina Clásica. Dentro de esta área se llevará a cabo la siembra y el desarrollo de las líneas celulares de elección para esta enfermedad

para

el

comercio

internacional),

Rabia. Se requerirá llevar a cabo el cultivo del virus en celular BHK – 21 C13, en las cuales, tras

la

replicación

identificado

viral,

mediante

este la

podrá prueba

ser de

inmunofluorescencia, esta técnica reemplaza la inoculación en ratones, es más rápida, menos costosa e igual de eficiente.

La prueba de neutralización vírica en cultivo celular con anticuerpo fluorescente (prueba prescrita para

el comercio internacional),

requiere aislar el virus en cultivo celular.

a saber células PK15. La PPC será cultivada a partir de muestras que hayan resultado ser

Encefalomielitis Equina Venezolana. Este

positivas tras la Inmunofluorescencia directa, se

virus puede ser aislado en cultivo celular,

tiene como antecedente que 80% de las muestras

pudiéndose emplear células VERO, RK – 13,

a analizar por Inmunofloresencia directa resultan

BHK – 21, tras su aislamiento, las muestras

ser positivas o sospechosas a PPC, por lo que

serán analizadas mediante una prueba de

será necesario que estas 1200 muestras (80% de

Fijación de complemento (FC) o Inhibición de la

muestras analizadas por Inmunofluorescencia

hemoaglutinación (HI). Se tiene estimado llevar

directa), sean resembradas en células OK15.

a cabo anualmente el aislamiento viral de 300 muestras.

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INSTALACIONES

Y

PUESTA

EN

MARCHA

DE

LABORATORIOS

DE

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BL3/BL4

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Influenza porcina. Tras la identificación de seroconversión en granjas porcinas, se llevará a cabo un muestreo de los animales a fin de identificar el agente causal, para lo cual se inocularán inocul las muestras en líneas celulares MDCK, a partir de este aislamiento se procederá a efectuar pruebas de HI e Identificación del virus mediante un diagnóstico confirmatorio mediante PCR. En base a antecedentes de otros países se recomienda muestrear 750 animales, sin embargo este número puede aumentar en caso de evidenciarse altos índices de animales con problemas respiratorios. planos propuestos.

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2ª CONGRESO NACIONAL DE BIOSEGURIDAD 29/31 de octubre 2014 Parc de Recerca Biomédica de Barcelona

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