Revista num 23

REVISTA DE CALIDAD AMBIENTAL INTERIOR EN HOSPITALES, LABORATORIOS, ANIMALARIOS Y SALAS DE AMBIENTE CONTROLADO International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X

Núm. 23, SEPTIEMBRE 2015

PHOTO: CDC/ Dr. Perdeep Kumar, FELTP

Sumario 4.

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL

CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL Sara Parrondo Manrique FOTOAIR-Unidad de Análisis y Tratamiento Fotocatalítico de Contaminantes en Aire División de Energías Renovables CIEMAT

15.

EDITORIAL

Dra. Gloria Cruceta

CRISIS DE REFUGIADOS Y SALUD El número de personas que llegan a Europa huyendo de la violencia no deja de crecer. La mayoría proceden de Siria, aunque también llegan personas huyendo de las crisis en Irak y Afganistán.

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL

TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS Lic. Miriam L. Delgado Pérez*, Lic. Abilio Ubaldo Rodríguez Pérez ** *Dpto SUMA, ASIC Simón Bolívar Municipio García de Hevia, Estado Táchira, Venezuela. ** Centro Provincial de Higiene y Epidemiologia y Microbiología. La Habana, Cuba

29. BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL. Mº Isabel Madrid Mateo Dra en Biología Departamento de Genética y Microbiología.

Universidad de Murcia

Las sociedades humanas han migrado desde antiguo. Europa y España en particular han sido zonas de refugio de miles de personas, cuando éstas han sufrido crisis económicas, políticas o alimentarias.

La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha hecho un llamamiento a los países de la Unión Europea para que ofrezcan una "respuesta urgente" a las necesidades sanitarias de los refugiados que están llegando a Europa.

En un comunicado, la directora regional de este organismo de Naciones Unidas para Europa, Zsuzsanna Jakab, ha recordado que se deben mantener unos estándares adecuados en la atención sanitaria de los refugiados que están llegando al continente europeo huyendo del conflicto en Siria y otros países, ya que es clave para la protección de sus derechos humanos y la salud de su población. "Debemos asegurarnos de que nuestros sistemas de salud están preparados para prestar una atención” fue la conclusión de su comunicado.

46. PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD

Directora de la Publicación: Dra. Gloria Cruceta

AMBIENTAL EN HOSPITALES

Silvia Gonzalez Romano Tec. De Laboratorio IBICLINIC, IBIZA www.biotecnologiahospitalaria.com

ISSN 2013-746X. Realización: SEGLA s.l. Avda Gaudi, 52 bis, 4º1º Barcelona. 08025 Tel. 934 364 061.

Cualquier forma de reproducción, distribución, o transformación de esta obra sólo puede ser realizada con la autorización de los titulares de la publicación. www.biotecnologiahospitalaria.com

Página 2

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BIOTECNOLOGIA HOSPITALARIA Reconocida como Web Médica Acreditada (WMA), en el programa de certificación de calidad de webs médicas (Colegio Colegio Oficial de Médicos de Barcelona).

International Standard Serial Number (ISSN) 2013-746X 2013 Subscripción n gratuita

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Página 3

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

MÉTODOS PARA

DE EL

MUESTREO

INTRODUCCIÓN

CONTROL

MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

La rama de la microbiología que estudia

los

microorganismos

presentes en el aire, y más concretamente ambientes

en

sanitarios,

los está

Sara Parrondo Manrique orientada principalmente a la Unidad de Análisis y Tratamiento FOTOAIR-Unidad Fotocatalítico de Contaminantes en Aire

vigilancia y el control de las

División de Energías Renovables CIEMAT

infecciones nosocomiales.

En los centros sanitarios, ios, debido al trabajo que se realiza, es importante el desarrollo de esta actividad debido principalmente a dos aspectos: la mayor concentración en el aire de bioaerosoles capaces de generar enfermedades, y la presencia de personas inmunodeprimidas que por p ello resultan

más vulnerables a la acción de

microorganismos patógenos. Es por ello que el control de estos ambientes sea una tarea necesaria que contribuye a proteger la salud de pacientes, personal laboral y visitas.

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Página 4

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

El ámbito sanitario ofrece una gran

heterogeneidad

instalaciones

(salas

quirófanos,

cada

sus

para el muestreo microbiológico ambiental es

blancas,

extenso, elementos como normativa a aplicar,

almacenes,

habitaciones…), que

en

zona

El abanico de métodos que se han desarrollado

esto

implica

económicos,

arquitectónicos…son

cuestiones a tener en cuenta en la selección de uno u otro procedimiento. Una adecuada elección del

unas

mismo, junto con otras decisiones como el tipo de

determinadas

medio de cultivo, caudal, tiempo de muestreo, etc,

respecto a la función que se

van a hacer que los resultados proporcionen buena

características

tenga

factores

desarrolla en ellas y el tipo de

información sobre la composición microbiana del ambiente objeto de estudio.

personas que las ocupan.

En el presente trabajo se pretende realizar una Una

caracterización

del

breve descripción y presentar una visión global de

ambiente de cada zona precisa

algunos de los métodos de muestreo más

un plan de muestreo en el que

significativos

se realice un estudio de las

utilizados

en

microbiología

ambiental.

características del espacio y que

establezca,

cuestiones,

el

entre

otras

método

de

muestreo más adecuado que se debe emplear para conseguir la información que se persigue.

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Página 5

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

MÉTODOS

DE

MUESTREO

MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

Consiste en la exposición de placas de Petri, normalmente de 90 mm de diámetro, al ambiente.

1. Muestreos pasivos

Se pretende que se depositen sobre el medio de

1.1 Sedimentación pasiva

cultivo microorganismos suspendidos en el aire.

Este método tiene la ventaja de que se puede

Es el método más sencillo utilizado en la

realizar en todas las condiciones de trabajo, es

realización de muestreos ambientales, aunque con

económico, requiere poco tiempo de dedicación y

el desarrollo de nuevos equipos y protocolos, a día

es fácil de realizar. No obstante el tiempo de

de hoy está en desuso y se desaconseja debido a la

exposición debe ser corto para evitar que se

baja información y reproducibilidad que presenta

reseque la superficie, por lo que muchos

frente a otros procedimientos.

bioaerosoles permanecen en el aire favoreciendo

Es un método cualitativo y como tal sirve para

los falsos negativos.

identificar ambientes. Los resultados se expresan

En salas blancas se recomienda el uso de placas

como

preparadas e irradiadas para evitar introducir

unidades

formadoras

(ufc)/placa/tiempo.

de

colonias

contaminación.

Figura 1. Placa Petri 90 mm de diámetro irradiada

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Página 6

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

2. Muestreos activos 2.1 Filtración La principal desventaja es que se colmatan Este tipo de muestreo se realiza con un equipo que

con facilidad, limitando por tanto la

consta de una bomba de aspiración de aire

cantidad de material a recoger. Por otra

acoplada a un portafiltro (generalmente casetes de

parte, debido a que son muy finos y su

poliestireno) que contiene el filtro o membrana

superficie lisa

donde quedan retenidos los bioaerosoles.

observación

microscopía

determinación del caudal del aire y el tiempo de son

pasos

determinantes

para

de

los

electrónica

de

barrido.

Además son fácilmente lavables.

la

obtención de muestras representativas y útiles.

directa

microorganismos con microscopía óptica o

Como en cualquier sistema de muestreo, la

muestreo

son idóneos para la

•

Filtros

de

membrana.

Tienen

una

Según el tipo de muestra y el ensayo a realizar se

microestructura compleja y generalmente

puede trabajar con casete abierto o cerrado. Con el

son de ésteres de celulosa, aunque

casete abierto se obtiene una distribución más

también se fabrican de otros materiales.

regular de los microorganismos, lo que facilita su

Estos filtros actúan según el principio de

observación y recuento. Cuando está cerrado los

captación, permitiendo la retención de

microorganismos tienden a acumularse en la zona

microorganismos de tamaño inferior al

central dificultando su observación.

poro

y

la

tinción

directa

de

los

bioaerosoles y su posterior observación en

Existen dos tipos de filtros:

microscopía óptica. Igualmente se pueden •

Filtros capilares. Están hechos de una

depositar sobre un medio de cultivo sólido

fina capa de policarbonato. Los poros

adecuado e incubar para permitir el

consisten en cilindros rectos alineados de

crecimiento de los microorganismos.

forma perpendicular a la superficie del filtro.

Los

microorganismos

serán

retenidos según el principio de difusión por el que se quedarán retenidos los que tengan mayor tamaño que el poro.

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Este

método

es

bastante

laborioso

y

la

recuperación microbiana es baja, siendo la causa principal

la

desecación

que

sufren

los

microorganismos al estar sometidos al flujo de aire.

Página 7

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

Figura 2. Equipo de muestreo de filtración y filtros

2.2 Muestreo por recogida en medio líquido

Con este sistema se obtiene una alta recuperación

(Impingers)

y permite observar organismos vivos, muertos y

También llamados de trampa líquida. En este tipo de

muestreo

se

hace

pasar

un

restos microbianos.

volumen

determinado de aire en forma de burbujas a través de un caldo o solución isotónica, en los cuales quedan

retenidos

la

mayor

parte

de

los

microorganismos.

El recuento de microorganismos se realiza a partir de la siembra de alícuotas de la muestra, pudiendo utilizar a continuación distintas técnicas de análisis

cuantitativo.

También

permite

la

observación directa de la muestra al microscopio.

Figura 3. Muestreador de trampa líquida

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Página 8

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

2.3 Centrifugación (Sampler RCS)

La colecta de microorganismos por centrifugación permite la creación de un torbellino que produce que las partículas suspendidas en el aire impacten sobre las paredes de la cámara, donde se coloca una tira plástica con agar en la que se desarrollarán las colonias de microorganismos.

Posteriormente ese medio se puede incubar para poder hacer un recuento o la identificación de las colonias aplicando diversos métodos.

Es un equipo pequeño y de fácil manejo, por lo que su uso se ha popularizado especialmente en la evaluación de la calidad microbiológica de ambientes hospitalarios. Sin embargo, no es un equipo recomendado para el muestreo de ambientes ocupacionales ya que la superficie de las tiras de agar se satura fácilmente.

Figura 4. Muestreador por centrifugación

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Página 9

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

2.4 Impactación

El principio de colecta por impactación se basa en la tendencia de una partícula a desviarse del flujo de aire debido a la inercia. Las partículas se separan de la corriente principal de aire e impactan sobre la superficie del medio de cultivo directamente confrontado con los orificios de las diferentes placas, en el caso de los captadores Andersen, o de los cabezales en el resto de muestreadores.

Ambiente muestreado

Medio de cultivo

Figura 5. Esquema tipo del cabezal de un muestreador

2.4.1 Impacto en cascada (Andersen) Cada una de las placas tiene 400 orificios cuyo Dentro de esta clase de muestreadores es el

diámetro disminuye sucesivamente, por lo que la

referente por antonomasia y el más usado en los

velocidad del aire se incrementa de una etapa a la

estudios

está

siguiente. Los bioaerosoles que son arrastrados en

constituido por una serie de seis placas de

la corriente de aire son separados por su tamaño

aluminio acopladas a una bomba de vacío.

en seis fracciones al pasar por las placas

aerobiológicos.

Este

equipo

perforadas.

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Página 10

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

Las partículas de una masa mayor son depositadas en la etapa superior, mientras que las partículas más pequeñas, capaces de mantenerse en el flujo de aire a baja velocidad, son transportadas sucesivamente a mayor velocidad y se impactan sobre la superficie de colecta de las siguientes etapas. Bajo cada placa se coloca una caja Petri con el medio apropiado, en cuya superficie se desarrollarán los microorganismos viables. Es un método con una alta sensibilidad pero tiene un alto coste.

Figura 6. Muestreador Andersen

2.4.2

Otros

muestreadores

por Posteriormente estas placas se incuban y se

impactación

obtienen

las

diferentes

actualidad su uso está muy extendido debido a que

formadoras de colonias.

son rápidos y fáciles de manejar.

Los

Son equipos portátiles con un único nivel de

esterilizados con algún agente entre un muestreo y

captación basado en la inercia de las partículas. El

otro.

equipo consta de una bomba de aire que fuerza un

Este método permite adecuar el caudal, en función

flujo

ya

de la bomba empleada, y el tiempo de muestreo

preconfigurado por el fabricante. Este aire impacta

para adaptarlo al tipo de ambiente que se va a

sobre la placa Petri situada inmediatamente debajo

muestrear.

generalmente

deben

ser

de

se

contabilizan

cabezales

conteo

que

Son muestreadores de última generación. En la

determinado,

mediante

colonias

unidades

autoclavados

o

con el medio de cultivo considerado más adecuado.

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Página 11

MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

Es importante fijar estos parámetros bien para obtener muestras representativas y evitar el desecamiento del medio de cultivo.

El mercado ofrece varias marcas de muestreadores de este tipo con diferentes características. Como ejemplo podemos citar los muestreadores SAS, que se comercializan con uno o dos cabezales, lo que puede resultar interesante para poder realizar réplicas o poder muestrear simultáneamente con dos medios de cultivo, lo que nos permite aumentar la selectividad del muestreo.

Resultan reseñables también los muestreadores fabricados por la empresa IUL que permiten la rotación del cabezal durante el muestreo. Esto hace que se mejore la distribución de los microorganismos en el medio de cultivo y por lo tanto obtener una mayor recuperación.

Figura 7. Muestreadores SAS de uno y dos cabezales

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MÉTODOS DE MUESTREO PARA EL CONTROL MICROBIOLÓGICO AMBIENTAL

CONCLUSIONES -

Sánchez-Muñoz M, Muñoz-Vicente M,

Como se ha descrito, existen numerosos métodos

Cobas G, Portela R, Amils R y Sánchez

de muestreo para el control microbiológico

B. Comparison of three high-flow single-

ambiental. La utilización de un método u otro

stage impaction-based air samplers for

deberá considerar: la normativa existente, la

bacteria quantification: DUO SAS SUPER

necesidad de identificar únicamente organismos

360,

viables, su concentración, la accesibilidad a la

Analytical Methods 4 399-405.2012.

SAMPL’AIR

and

SPIN

AIR.

zona a muestrear, etc.

La elección del método de muestreo supone por

-

Hernández Calleja A. NTP 609: Agentes biológicos: equipos de muestreo (I). 2001.

tanto un punto importante sobre el que se tiene que reflexionar antes de plantear un estudio microbiológico ambiental. En el contexto que nos

-

Hernández Calleja A. NTP 610: Agentes biológicos: equipos de muestreo (II). 2001.

ocupa, esta elección junto con una buena ejecución del procedimiento, va a permitir a los centros sanitarios

obtener resultados que les

-

Macher J. M. Evaluation of bioaerosol

permitan tomar acciones que contribuyan a

sampler

performance.

Appl.

Occup.

asegurar la salud de las personas que están en su

Environ. Hyg. 12 (11) 730 – 736. 1997.

interior.

BIBLIOGRAFÍA

-

Sánchez B, Sánchez-Muñoz M, MuñozVicente M, Cobas G, Portela R, Suárez S, González A, Rodríguez N y Amils R. Photocatalytic elimination of indoor air biological and chemical pollution in realistic conditions. Chemosphere 87 625630. 2012.

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PERITO JUDICIAL EN CALIDAD AMBIENTAL INTERIOR 13 octubre / 30 noviembre 2015 Plazas limitadas

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Tel Información 934 364 061 Página 14

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

DIAGNÓSTICO HEPATITIS B/C

Y

DE

VIRAL

TIPO

ENFERMEDAD

DE

CHAGAS

En

el

presente

muestran

estudio

los

se

resultados

obtenidos tras un año de trabajo (año 2014) en el diagnóstico

Lic. Miriam L. Delgado Pérez*, LIc. Abilio Ubaldo Rodríguez Pérez **

serológico por tecnología SUMA (Sistema Ultra Micro Analítica)

*Dpto SUMA, ASIC Simón Bolívar Municipio García de Hevia, Estado Táchira, Venezuela.

de dichas enfermedades en la

** Centro Provincial de Higiene y Epidemiologia y Microbiología. La Habana, Cuba

municipio

población

residente del

en

estado

éste de

Táchira, Venezuela.

Resumen: El universo estuvo constituido por 7.343 pacientes Los

métodos

de diagnóstico

para detectar

enfermedades infecciosas han evolucionado con el desarrollo de la Biotecnología y las técnicas Inmunoenzimáticas, tal es el caso de la tecnología Sistema

Ultra

Micro

Analítica

(SUMA)

y se analizaron un total de 21.714 muestras, por la Tecnología SUMA, desarrollada por el Centro de Inmunoensayos de Cuba, siguiendo las instrucciones para tipo de técnica de diagnóstico, los cuales se relacionan a continuación:

desarrollada por el centro de Inmunoensayos de Cuba, mediante la cuales se pueden determinar la

UMELISA HBsAg PLUS

presencia

de

de

HBsAg Confirmatory Test

diferentes

enfermedades

se

UMELSA HCV 3ra generación

encuentran Enfermedad

Antígenos

la

o

Anticuerpos

entre

las

que

Hepatitis viral tipo B, C y

UMELISA CHAGAS

de Chagas. (1,2,3,4,5,6,7).

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DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Con respecto a la Hepatitis B, en 27 muestras el

En todos los casos la realización de éstos estudios

UMELISA HBsAg PLUS, fue positivo, lo que se

de pesquizajes mediante las técnicas

corresponde con 9 pacientes y de los cuales 8

UMELSA, por la tecnología SUMA, ha sido útil y

pacientes resultaron confirmados como positivos a

servirá de base para estudios posteriores de

dicho estudio.(8,9). Por otra parte, el 21% de la

incidencia

muestra estudiada (68 pacientes), fue positivo a

detectadas.

poblacional

de

las

de

infecciones

Hepatitis viral tipo C. Tener ya identificados portadores en la población es un paso de avance en la prevención y seguimiento de dichos

Introducción

pacientes. (9,10,11,12,13) Los El

62

%

de

las

muestras

para

métodos detectar

estudiadas para el diagnóstico

infecciosas

de Enfermedad de Chagas fue

con

positivo, lo

Biotecnología

cual confirma

el

de

el

diagnóstico

enfermedades

han

evolucionado

desarrollo y

de

las

la

técnicas

planteamiento sobre la endemia

Inmunoenzimáticas,

de

caso de la tecnología Sistema

dicha

enfermedad,

siendo

el

Ultra

precoz de la misma, para evitar

desarrollada por el centro de

la

Inmunoensayos

y

las

Analítica

es

muy importante el diagnóstico

cronicidad

Micro

tal

(SUMA)

de

Cuba,

consecuencias fatales de dicha

mediante la cuales se pueden

infección. (1,3,14,15,16,17).

determinar Antígenos

la o

presencia

de

Anticuerpos

de

diferentes enfermedades entre las

que

Hepatitis

se viral

encuentran tipo

B,

C

la y

Enfermedad de Chagas.

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DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Éste método se basa en un sistema de diagnóstico integral sobre la base de las técnicas

de

En

Cuba

existe

una

red

inmunoensayos, que en los últimos 17 años ha

laboratorios

estado dirigido fundamentalmente a programas o

utilizan la Tecnología SUMA, la

aplicaciones de salud en tres líneas de trabajo

cual

fundamentales: -

abarca,

maternos,

Programa Materno- Infantil: diagnóstico prenatal y neonatal Certificación de sangre

-

Vigilancia epidemiológica

bancos

que

hospitales de

sangre,

policlínicos y centros de higiene y

-

instalados

de

epidemiología,

modelo

de

siendo

aplicación

un en

pesquisajes masivos para países También se está utilizando como marcadores tumorales, en el diagnóstico y seguimiento de cáncer

de

próstata,

hepatocarcinoma,

en vías de desarrollo. También ésta tecnología es utilizada en

coriocarcinoma, molahidatiforme, etc.(1)

países como Venezuela, Brasil,

Debido a que la enfermedad causada por estos

Argentina, México, Colombia y

virus es difícil de detectar en sus primeros estadíos

China.(1)

y a que no crecen en cultivos celulares que por demás son extremadamente costosos, los ensayos serológicos son los más ampliamente utilizados en el diagnóstico. (1)

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Página 17

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

En el Municipio García de Hevia, del estado Táchira,

Venezuela,

se

trabajan

Desarrollo:

muestras

humanas, recolectadas mediante venipuntura, para

Hepatitis tipo B:

el pesquizaje epidemiológico y diagnóstico de

El virus de la Hepatitis

Hepatitis viral tipo B, tipo C y

hepadnavirus, de ADN de doble cadena y tiene un

Chagas, ésta

B (VHB) es un

última de alta incidencia en la población, las

antígeno

cuales son procesadas mediante dicha tecnología.

antigénicamente heterogéneo y un tercer antígeno

En el presente estudio se muestran los resultados obtenidos tras un año de trabajo (año 2014) en el diagnóstico serológico por tecnología SUMA de dichas enfermedades en la población residente en éste municipio del estado de Táchira, Venezuela.

“e”

de

superficie

(HBsAg)

quees

( HbeAg), el cual es identificado como

soluble. Tiene una distribución mundial , en forma endémica y es común en grupos de alto riesgo( personas que se inyectan por vía intravenosa con material

contaminado,

relaciones

sexuales

múltiples y desprotegidas, empleados, pacientes Objetivos:

de centros de hemodiálisis y que reciben

1. Demostrar la utilidad de la Tecnología SUMA para el pesquizaje de

Hepatitis

hemoderivados, instituciones de discapacitados mentales, personal de salud, entre otros).

Viral tipo B, C y Enfermedad de Chagas

La identificación de los casos sobre la base clínica

en la población objeto de estudio.

se realiza solamente en el 10% de los niños y entre

2. Identificar

pacientes portadores de las

el 30% y 50% de los adultos que logran un cuadro

enfermedades anteriormente señaladas y

ictérico. Los individuos con infección crónica

contribuir en su seguimiento y control.

pueden o no tener antecedentes de hepatitis

3. Reconocer la incidencia de Hepatitis B, C

clínica. Entre el 15% y 25 %, de las personas con

y Enfermedad de Chagas en el Municipio

infección

García

prematuramente

de

Hevia,

estado

Venezuela

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Táchira,

crónica por

por

VHB,

cirrosis

o

fallecen carcinoma

hepatocelular. (1, 2, 3)

Página 18

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Se considera que la infección por VHB, es la

El UMELISA HBsAg PLUS es un ensayo

causa mundial del 80% de los pacientes con

inmunoenzimático heterogéneo tipo “sándwich”

carcinoma hepatocelular y ocupa el 2do lugar

de 3ra generación que emplea las ventajas de la

después

reacción de alta afinidad entre la estreptavidina y

del tabaco entre los carcinógenos

humanos conocidos.(1,2)

la biotina, utilizando como fase sólida tiras de

Los humanos son el único reservorio, los chimpancés son susceptibles pero hasta ahora no se han identificado ningún otro reservorio animal.(1,2,3)

ultramicroELISA,

revestidas

con

anticuerpos

monoclonales murinos de alta afinidad dirigidos contra el determinante común “α” del HBsAg. Su

detectabilidad

para muestras de suero o

plasma es de 0, 325 UI/ml.(1,2,4, 5)

Modo de transmisión: -

Secreciones o excreciones solo

se

han

corporales:

demostrado

que

son

HBsAg Confirmatory Test;

infecciosos la sangre y líquidos derivados

A pesar de la especificidad de las técnicas para la

del suero

detección del HBsAg, se pueden obtener falsos

-

Saliva

positivos debido a errores de manipulación,

-

Semen

instrumentales o a la ocurrencia de reacciones

-

Secreciones vaginales

inespecíficas, es por ellos que surgen los ensayos confirmatorios, que nos permiten afirmar que la

Periodo de incubación: 45 a 180 días. Promedio 60-90 días. La variación depende de la cantidad de

reacción positiva, es

provocada

por

la

presencia de HBsAg en la muestra. (1,2, 6)

virus en el inóculo, el modo de transmisión y El ensayo HBsAg confirmatory test, se basa en el

factores del huésped.(1,2,3)

principio de neutralización, mediante el cual una El diagnóstico consiste en la

detección de

antígenos y anticuerpos específicos en el suero.

El HBsAg es el primer marcador que aparece después de

la infección viral, su presencia

muestra repetidamente positiva reacciona con un neutralizante (suero de conejo anti HBsAg positivo) y con un suero control libre de anti HBsAg (suero de conejo normal).

antecede la aparición de los síntomas, indica infección

viral,

pero

no

necesariamente

replicación viral o hepatitis crónica.(1,2,3,4,5)

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Página 19

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Los anticuerpos en

exceso neutralizan los

El virus de la hepatitis tipo C, es un ARN virus

determinantes antigénicos de la muestra, lo que es

con cubierta, clasificado dentro del género

demostrado por la disminución significativa de la

hepacavirus , de la familia flaviridae, del cual se

señal de fluorescencia con respecto a la muestra

han identificado varios genotipos. (1,3,4)

tratada con el reactivo control. Las muestras de suero o plasma se analizan puras y diluídas (1:101) con solución salina. Se considera positiva cuando Mn= 0,7 Mc y Mc > 4 Donde

Mc: muestra con reactivo control

Se transmite por vía parenteral y se ha identificado en

todas las zonas del mundo,

teniendo su mayor prevalencia entre personas que se drogan por vía intravenosa y los hemofílicos

y

Mn : muestra con reactivo neutralizante

(70-80%), en menor proporción se observa en heterosexuales, homosexuales, trabajadores de la salud y contactos familiares (1-5%).(1,3,4) La enfermedad tiene un comienzo insidioso, la

Hepatitis viral tipo C

gravedad oscila desde casos sin manifestaciones

La hepatitis viral no A y no B (HNANB),

clínicas ( 75%), hasta casos mortales que suelen

representa mas del 90% de las hepatitis adquiridas

ser raros. En más del 60% de los adultos las

por vía parenteral a través de sangre o sus

infecciones son menos graves. Del 30-40% de las

derivados, se ha sugerido que hasta el 10% de los

personas con la forma crónica, presentan hepatitis

donantes pueden ser infecciosos. Como mínimo

crónica

activa y

entre

más de la mitad de HNANB, evolucionan a la

pueden

desarrollar

cirrosis

cronicidad y en una alta proporción se alcanza la

(10,11,12,13)

cirrosis y heptocarcinoma.(1,3,5,7) Con la identificación del virus de la Hepatitis tipo

un

5-20% hepática.

Se considera a los humanos como único reservorio.

C(HCV) en 1989, y el desarrollo de los métodos inmunoenzimáticos para su estudio, se ha podido demostrar que el VHC es la principal causa de las HNANB post transfusional y que la presencia de anticuerpos contra el mismo en el suero o plasma de una persona indica

que la misma ha sido

La transmisión se debe a exposición percutánea a sangre o

hemoderivados

contaminados

(especialmente en toxicómanos por inyección). El período de incubación oscila entre 2 semanas a 6 meses, siendo lo más común entre 6-9 semanas.

expuesta al virus y por tanto constituye un transmisor potencial de la enfermedad.(1,7,8,9).

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Página 20

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

La

transmisibilidad

comienza

desde

varias

En caso de reacción positiva el anticuerpo

semanas antes de comenzar los primeros síntomas

marcado

y persistir por tiempo indefinido. Se desconoce el

previamente sobre la fase sólida (anticuerpo del

grado

VHC + antígenos de recubrimiento), el cual

de

inmunidad

que

confiere

la

infección.(1,3,13).

se

unirá

al

complejo

formado

mediante la aplicación de un sustrato fluorigénico

El UMELSA HCV,

es un ensayo para la

detección de anticuerpos dirigidos contra el virus de la hepatitis tipo C, en muestras de suero, plasma y sangre seca en papel de filtro, el cual ha

permitirá que sea medida la intensidad de fluorescencia, lo cual permite detectar la presencia de los anticuerpos

de Hepatitis tipo C, en la

muestra.(1)

sido de esencial importancia en: -

Pesquizaje de donantes de sangre y

Enfermedad de Chagas:

órganos -

Control de grupos de riesgo

La enfermedad de Chagas es una

-

Estudio de pacientes con hepatopatías.

parasitosis

hística-

producida

por

Es un ensayo inmunoenzimático

indirecto que

utiliza como fase sólida tiras de microELISA recubiertas correspondientes

con

péptidos

sintéticos,

el

hemática, protozoo

flagelado Trypanosoma cruzi. Es endémica

de

las

regiones

tropicales de América del Sur y

a las regiones del núcleo,

regiones no estructurales (NS4 y NS5) y una

Central, donde se considera uno

proteína recombinante de la región NS3 del VHC

de los principales problemas de

( virus de hepatitis C)(1)

salud pública. estimó

en

En 1987 la OMS 90

millones

de

personas expuestas al riesgo de infección y en 20 millones

el

número de las ya infectadas.

(1,3,13,14).

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Página 21

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Producto del largo período de incubación y la

Por las características clínicas

aparición de una respuesta humoral temprana, la

inespecíficos en la fase inicial de la enfermedad,

serología

el período prolongado de incubación y las

adquiere una gran importancia en la

de los signos

detección precoz de los casos, de manera tal que

complicaciones fatales

se considera portador a todo individuo con

crónica, el diagnóstico serológico cobra gran

resultados

valor.(1,3,!4)

positivos en dos de los ensayos

que ocurren en la fase

serológicos establecidos (Inmunofluorescencia, hemaglutinación

o

fijación

del El

complemento).(1,3,15,16)

UMELISA

Chagas,

es

una

técnica

inmunoenzimática que posibilita la detección de anticuerpos IgG específicos de T. cruzi, en La enfermedad atraviesa por

3 fases: aguda,

indeterminada y crónica. La fase aguda comienza

muestras de suero humano. Puede ser utilizado con los siguientes fines:

entre la 1ra -3ra semana después de la infección inicial, la parasitemia es elevada pero los signos clínicos

son generalmente inaparentes. En la

etapa indeterminada

-

Pesquizaje de donantes de sangre

-

Pesquizaje de grupos de riesgo en áreas endémicas

disminuye la parasitemia

haciéndose muy difícil la detección y el nivel de

El

anticuerpos se incrementa. La fase crónica es

inmunoenzimático indirecto en el que se utiliza

frecuentemente mortal y se caracteriza por daños

como fase sólida tiras de ultramicroELISA

irreversibles

revestidas

del

miocardio

y

del

tubo

digestivo.(1,3,17) La transmisión tiene lugar básicamente por tres vías:

UMELISA

con

representativos inmunodominantes

Chagas,

tres de de

es

un

ensayo

péptidos

sintéticos

diferentes

regiones

la

membrana

de

Trypanosoma cruzi, que han sido obtenidos mediante síntesis química en fase sólida.

-

picada de triatomíneos infectados

-

Exposición a sangre contaminada

-

Transmisión vertical de la madre al feto por vía transplacentaria

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Página 22

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Las muestras se fijan a los antígenos de

Métodos:

recubrimientos y puede ser medida la intensidad de la fluorescencia emitida mediante la aplicación

Todas las muestras fueron analizadas por la

de un sustrato fluorigénico, lo que detectará la

Tecnología SUMA, desarrollada por el Centro de

presencia de anticuerpos IgG específicos al

Inmunoensayos

Trypanosoma cruzi (1,12, 14)

instrucciones para tipo de técnica de diagnóstico,

de

Cuba,

siguiendo

las

los cuales se relacionan a continuación: UMELISA HBsAg PLUS

Materiales y Métodos

HBsAg Confirmatory Test UMELSA HCV 3ra generación

Universo: El universo estuvo constituido

UMELISA CHAGAS

por 7343 pacientes.

Muestras: se analizaron un total de 21714 muestras y de ellas: -

7066 para diagnóstico de Hepatitis B

-

36 confirmatorios de Hepatitis B

-

7150 para diagnóstico de Hepatitis C

Se realizó este estudio a: - pacientes que concurrieron a los módulos o emergencias y que clínica o epidemiológicamente, fueran sospechosos de portar algunas de las infecciones señaladas.

7448 para diagnóstico de Enfermedad de Chaga

- embarazadas captadas y posteriormente en cada uno de los trimestres de embarazo

Materiales: - pacientes pre operatorios - Computadora laptop ACER - toda persona de zona endémica como parte de su - Equipo lector PR 621

pesquizaje

- Equipo lavador MW 2001

- toda persona en edad fértil y perteneciente a los

- Incubadora K Lab 601 fijada a 37 º C

grupos

de

riesgo

conocidos

para

estas

enfermedades.

- Impresora Lasser Jet Pro 200 Las muestras positivas por primera vez fueron - Papel BOND 16

nuevamente analizadas en dos ocasiones más para lograr un algoritmo de al menos 2 estudios positivos

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de

los

tres

realizados.

Página 23

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Se realizó Confirmatorio de Hepatis B, a todas las muestras repetidamente positivas en el examen de Hepatitis tipo B.(UMELISA HBsAg PLUS)

Resultados: En el gráfico No1, se muestran el total tal de pacientes estudiados y de las muestras procesadas por técnica de UMELISA, en el Municipio García de Hevia, estado Táchira durante el año 2014, para cada tipo de estudio ( Hepatitis B, C y Enfermedad de Chagas) Total de pacientes y muestras analizadas analizadas y por tipo de técnica realizada

8000

7343

7066

7150

7000

7438

total pactes examinados Hepatitis B

6000 5000

confirmatorio HB

4000 3000

Hepatitis C

2000 1000

36

Chagas

0

Fuente: Registros del Lab SUMA y Dpto Estadística ASIC Simón Bolívar. Mcpio García de Hevia El análisis de los resultados mostrados, indica que estos estudios fueron realizados a una buena parte de la población que los requirió, no obstante, y a pesar de que los mismos pueden ser realizados en la localidad, aun existen pacientes a los que no se les indicó, lo cual indica una baja percepción de la existencia de dichas infecciones en la población y en el personal médico, a pesar de tratarse tratarse de estudios de pesquizajes.

En el gráfico No. 2 se observa la positividad de las muestras de Hepatitis B, C y Enfermedad de Chagas estudiadas, durante el período analizado.

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Página 24

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Resultados de las muestras positivas

Hepatitis B 9% (27 pctes) confirmatorio HB 8% (8 pctes)

Chagas 62% (204 pctes)

Hepatitis C 21% (68 pctes)

Fuente: Registros del Lab SUMA y Dpto Estadística ASIC Simón Bolívar. Mcpio García de Hevia

Se puede apreciar que el 62 % de las muestras

En éste sentido a pesar de ser una baja positividad

estudiadas para el diagnóstico de Enfermedad de

es importante dicho hallazgo, teniendo en cuenta

Chagas fue positivo, lo cual confirma el

que sin éste tipo de estudio no se hubiera conocido

planteamiento

dicha

el estado de dichos pacientes, lo cual además de

enfermedad, siendo muy importante el diagnóstico

ser un riesgo para su salud, lo constituye desde el

precoz de la misma, para evitar la cronicidad y las

punto de vista epidemiológico. Por lo que es

consecuencias

importante

sobre

fatales

la

endemia

de

dicha

de

infección.

(1,3,14,15,16,17) Con respecto a la Hepatitis B, podemos observar

que

se

conozcan

las

vías

de

transmisión y se eduque a la población sobre ellas a fin de evitar la misma a personas sanas.

que en 27 muestras el UMELISA HBsAg PLUS,

Otro hallazgo que consideramos importante es

fue positivo, lo que se corresponde con 9

haber encontrado un 21% de la muestra estudiada

pacientes y de los cuales 8 pacientes resultaron

(68 pacientes), positivos a Hepatitis viral tipo C.

confirmados como positivos a dicho estudio.

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Página 25

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

Lamentablemente no contamos con el test para la

Mediante la realización de éste estudio, se

confirmación de dichos resultados, no obstante

pudo reconocer la incidencia de dichas

tener ya identificados portadores en la población

infecciones en el municipio García de

es un paso de avance en la prevención y

Hevia, lo cual es un paso imprescindible

seguimiento de dichos pacientes. Nuevamente el

para la atención de las mismas como

pesquizaje de dichas infecciones ha sido la vía de

problemas de salud en dicha localidad.

detección

de

población

“enferma”

entre

supuestamente sanos, que pueden comenzar

BIBLIOGRAFÍA

tratamientos y mejorar su calidad de vida, además

1. Colectivo de autores: Tecnología SUMA.

de tener conciencia de su infección y evitar su

Aplicaciones y Uso. Edit Ciencias Médicas.

transmisibilidad.

Cuba, 2007

Consideramos

que en

todos

los

casos

la

realización de éstos estudios de pesquizajes mediante las técnicas

de UMELSA, por la

tecnología SUMA, ha sido útil y ha servido de base para estudios posteriores de incidencia poblacional de las infecciones detectadas.

Conclusiones: La utilización de la Tecnología SUMA para el pesquizaje de Hepatitis viral tipo B, C y Enfermedad de Chagas, fue una herramienta útil en el diagnóstico precoz de dichas infecciones.

2. Sherlock, S.: The natural history of Hepatitis B. Postgrad Med J,63:7, 1987 3. Llop, A. et al.: Microbiología y parasitología Médicas, ECIMED, Cuba 2000 4. Koneman,E.W

S,

Allen,

S.:

Diagnostico Microbiologico/Microbiological diagnosis. 2008 - books.google.com 5. Acosta, C.: Actualización sobre hepatitis viral: etiología,

patogenia,

diagnóstico

microbiológico y prevención. Rev Cubana Med

Gen

Integr v.16 n.6 Ciudad

de

La

Habana nov.-dic. 2000 6. Cabezas, S. et al .: Hiperendemicidad de

La identificación de pacientes portadores

Hepatitis viral B y Delta en pueblos indígenas

de Hepatitis tipo B, C y Enfermedad de

de la Amazonía Peruana. Rev. Perú. Med. exp.

Chagas, permitió su tratamiento y control

Salud Publica v.23 n.2, Lima abr. 2006

clínico y epidemiológico y el seguimiento de las mismas, en la población de estudio.

7. Boscato,

L.M.,

Stuart,M.:

Heterophilic

antibodies: a problem for all inmunoassays.

Clin Chem.34:27, 1989.

www.biotecnologiahospitalaria.com

Página 26

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL TIPO B/C Y ENFERMEDAD DE CHAGAS

8. Kenna, JG. Et al.: Methods reducing non-

15. Ferreira A,W. et al.: Trypanosoma cruzy

specific antibody binding un Enzime-Linked

antibodies,

Immunosorbent Assays. J Imm Methods. 85:

Immumoenzimatic tests for screening of blood

409, 1985

donors. Rev Inst. Med. Trop. Sao Pablo 33,

9. Choo, Q.L., et al.: hepatitis C virus: the major

en

Bergmeyer,

H.V.:

1991

causative agente of viral non-A, non-B

16. Pann, A. A. et al.: Clinical evaluation of an

hepatitis. Bristish Medical Bulletin 46: 423-

EIAnmfor the sensitive and specif detection of

441, 1990

serum

10. Alter, H.J.: You´ll wonder where the yellow went:

a

15

years

retrospective

of

posttransfusion hepatitis. En Moore SB, ed.

Transfusion

Transmited

Viral

(Chagas

antibody disease).

to

Trypanosoma The

J.of

cruzy

Infections

diseasse165: 585-588, 1992 17. Moncayo, A.: Chagas diseasse: epidemiology

Dissease.

and prospects for interruption of transmission

Arlington, VA. Am Assoc Banks, pp 53-86,

in the America. Wld hlth, statist, quartr. 45:

1987

276-279, 1992

11. Wick, M.R., et al.: Non- A, Non- B, hepatitis associated with blood transfusion. Transfusion 25: 93- 101, 1989 12. Farfan, G. Cabezas, C.: Prevalencia de la Hepatitis Viral C en donantes de sangre del Perú.

Rev.

gastroenterol.

Perú v.23 n.3 Lima jul./set. 2003 13. Van der Poel, et al.: Infectivity of

blood

seropositive for hepatitis C virus antibodies.

Lancet 335: 558-560, 1990 14. Vallenas, F. , et al.: Prevalencia de anticuerpos contra Trypanosoma cruzi en donadores de sangre del IMSS, Orizaba, Veracruz, México.

Salud Pública Mex vol 48 No1 Cuernavaca ene-feb, 2006

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Página 27

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Pรกgina 28

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

RESUMEN

BACILOS GRAMNEGATIVOS CON

Las

CARBAPANEMASAS Y

infecciones

nosocomiales

producidas por bacterias y hongos

SU INCIDECIA EN LA

oportunistas

INFECCIÓN

importante

NOSOCOMIAL

son de

pacientes

la

una

causa

morbilidad

hospitalizados

constituyen

una

carga

económica

significativa

en y

social

y

para

el

Mº Isabel Madrid Mateo Dra en Biología Departamento

de

Genética

Microbiología.

y

paciente y el sistema de salud. Por ello, se han diseñado una serie de

Universidad de Murcia medidas de

prevención y control

medio ambiental que incluyen un correcto

mantenimiento

de

las

instalaciones de climatización, la limpieza superficies,

adecuada la

de

utilización

las de

métodos de barrera y el aislamiento apropiado de las

diferentes áreas

de riesgo de un hospital.

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Página 29

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

Las

infecciones

nosocomiales

son

infecciones adquiridas durante la estancia en un hospital y que no estaban presentes ni en el período de incubación ni en el

Sin embargo, en la actualidad existe una crisis mundial sanitaria debido a la emergencia

de

resistencias

a

los

carbapenemes en este grupo de bacterias.

momento de ingreso del paciente. Estas

El mecanismo implicado es la producción

infecciones

ocasionan

una

elevada

de carbapanemasas capaces de hidrolizar

mortalidad,

prolongan

la

estancia

este grupo de antimicrobianos y que se

hospitalaria

y

aumentan

los

costes

asistenciales de forma significativa.

la

mayoría

nosocomiales aureus,

de

destacan

Pseudomonas

las

infecciones

Staphylococcus aeruginosa

y

especies importantes pertenecientes a la familia

a

elementos

genéticos

otros

genes

de

resistencia

a

antimicrobianos. El resultado final suele ser

la

aparición

de

“superbacterias”

multirresistentes de difícil tratamiento y control en el ambiente hospitalario.

como

Ante tal problema y debido a la relevancia

Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae,

del tema, en este trabajo se hace una

Enterococcus sp. y Enterobacter sp.

revisión de cuáles son los principales

Las

Enterobacteriaceae,

asociado

trasferibles, los cuales suelen contener

Entre los microorganismos responsables de

han

infecciones

causadas

por

estos

microorganismos normalmente se tratan utilizando generación

antibióticos de

amplio

de

última

microorganismos que han desarrollado resistencias

frente

a

antibióticos

carbapenémicos.

espectro

carbapenémicos.

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Página 30

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

INTRODUCCIÓN

Las

infecciones

nosocomiales

son

infecciones adquiridas durante la estancia en un hospital y que no estaban presentes ni en el período de incubación ni en el momento de ingreso del paciente [1].

Estas infecciones ocasionan una elevada mortalidad, hospitalaria

prolongan y

aumentan

la

estancia los

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costes

asistenciales de forma significativa. Según los datos del Estudio de Prevalencia de Infección Nosocomial en España (EPINE) publicados en el año 2014, la infección del tracto urinario (ITU-A) fue la infección identificada con mayor frecuencia, seguida de infecciones de localización quirúrgica (IQ-O, IQ-P), bacteriemias (BCM) y neumonía (NEU5) (Figura 1) [2].

http://campusvirtual.segla.net/

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Página 31

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

En

general,

estas

infecciones

relacionadas

con

asistenciales

invasivos:

están

Además, existen múltiples condiciones del

procedimientos

huésped que predisponen a la adquisición

la

infección

de infecciones nosocomiales, entre las que

urinaria nosocomial con el cateterismo

destacan

urinario, la infección quirúrgica con el

neutropenia.

procedimiento quirúrgico, la infección

la

inmunosupresión

y

Según los datos aportados en el informe

respiratoria con la ventilación mecánica

EPINE 2014, los principales grupos

invasiva y la bacteriemia de catéter con el

causantes de infección nosocomial en

cateterismo vascular.

España son los cocos Gram-positivos, las enterobacterias

y

los

bacilos

Gram-

negativos no fermentadores.

Cuando se comparan estos datos con los grupos causantes de enfermedades infecciosas en la comunidad, en éste último grupo se observa una disminución significativa en el porcentaje de infecciones causadas por cocos Gram-positivos y bacilos Gram-negativos no fermentadores [2].

0 ITU-A IQ-O IQ-P BCM NEU5 ITU-B IQ-S VRB-BRON SIS-CLIN IAC3-CVC NEU4

100

200

300

400

500

600

700 627

499 495

364 358 249 230 189 153 152 145

Figura 1. Las localizaciones más frecuentes de infecciones nosocomiales hospitalarias

durante el año 2014

en España, según el informe EPINE [2].

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Página 32

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIร N NOSOCOMIAL

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Pรกgina 33

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

Entre los microorganismos específicos

El agente quimioterápico que con más

responsables

las

frecuencia se emplea para el control de las

destacan

infecciones hospitalarias es el meropenem,

Pseudomonas

un antibiótico betalactámico que pertenece

importantes

al subgrupo de los carbapenemes [2].

familia

Precisamente, los carbapenemes han sido

Escherichia

el antibiótico de amplio espectro de

coli, Klebsiella pneumoniae, Enterococcus

elección para el tratamiento de las

sp. y Enterobacter sp. (Figura 2).

infecciones causadas por enterobacterias.

de

infecciones

mayoría

nosocomiales

Staphylococcus aeruginosa

la

y

aureus, especies

pertenecientes Enterobacteriaceae,

a

de

la como

forma parte del CLUSTER de biotecnología, biomedicina y tecnologías médicas de Cataluña, junto a más de 500 empresas y una amplia red de centros de investigación, parques científicos, universidades, hospitales y entidades.

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Página 34

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

Actualmente, existe una crisis mundial

Además, existe el agravante de que los

sanitaria debido a la emergencia de

antibióticos nuevos para el tratamiento de

bacterias Gram-negativas que presentan

los

resistencia a los carbapenemes, entre las

multirresistentes se encuentran en las

que destacan las bacterias de la familia

etapas iniciales de desarrollo y no es

Enterobacteriaceae,

probable que estén disponibles a corto

Pseudomonas

Acinetobacter.

y

bacilos

Gram-negativos

plazo.

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NORMA UNE 179007 DE AENOR. www.segla.net Tel. 934 364 061

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Página 35

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

0

3

6

9

Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa

Staphylococcus aureus Klebsiella pneumoniae Enterococcus faecalis Staphylococcus epidermidis Candida albicans Enterococcus faecium Enterobacter cloacae Proteus mirabilis Clostridium difficile Acinetobacter baumannii Stenotrophomonas maltophilia Morganella morganii Klebsiella oxytoca Estafilococo coagulasa-negativo Serratia marcescens Enterobacter aerogenes Candida glabrata Escherichia coli enteropatógena

12

15

18 15,17

11,18 10,59 6,60 6,53 6,34 5,65 3,99 3,13 2,67 2,32 1,64 1,61 1,42 1,30 1,22 1,13 0,86 0,81 0,71

Porcentaje sobre el total, %

Figura 2. Los microorganismos responsables de las infecciones nosocomiales detectadas en España durante el año 2014, según el informe EPINE [2].

5. DESARROLLO Debido a la relevancia del tema y a los

5.1

antecedentes descritos, este trabajo se ha

carbapenemes

desarrollado

Mecanismos

de

resistencia

a

5.1.1 Producción de carbapanemasas

con la finalidad de profundizar en el

En los últimos años se ha producido una

conocimiento de importantes especies de

gran alarma y preocupación por la gran

bacterias multirresistentes patógenas de

dispersión de los bacilos gramnegativos

humanos y los mecanismos de resistencia

resistentes a los carbapenémicos en los

que presentan frente a carbapenemes.

que el mecanismo implicado es la producción de betalactamasas capaces de hidrolizar este grupo de antimicrobianos y que se han asociado a elementos genéticos trasferibles.

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Página 36

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

Estas

enzimas

se

denominan

No obstante, dentro de las carbapenemasas

genéricamente

carbapanemasas

y

se

de clase A, las que mayor importancia

agrupan

las

diferentes

clases

epidemiológica tienen son las denominas

A,

B

o

KPC que reciben este nombre por haberse

metalobetalactamasas y clase D o enzimas

encontrado inicialmente en K. pneumoniae

tipo OXA-48 . En la Figura 3 se recogen

(KPC = K. pneumoniae carbapenemases).

estas

más

Las enzimas KPC se han descrito no solo

relevantes y los microorganismos en los

en Enterobacteriaceae sino también en P.

que se encuentran habitualmente.

aeruginosa y en A. baumannii. Las

en

moleculares:

clase

enzimas,

clase

indicando

las

enzimas

KPC

hidrolizan

de

forma

eficiente penicilinas, cefalosporinas y Clase A carbapenémicos.

Destaca

una

enzima

de

origen

cromosómico denominada SME, de la cual existen al menos tres variantes (SME-1, -2

Clase B

y -3) que confieren un fenotipo con

Las enzimas IMP y VIM tienen un perfil

pérdida marcada de sensibilidad a los

hidrolítico

carbapenémicos y un perfil hidrolítico que

antibióticos

incluye el aztreonam y en menor medida o

excepción del aztreonam y no se inhiben

inexistente a las cefalosporinas de tercera

por el ácido clavulánico, sulbactan y

y cuarta generación.

tazobactam. Sin embargo se inhiben por

Otras enzimas relacionadas son las de los

agentes quelantes de cationes divalentes

grupos IMI (IMI-1 y -2) y NMC-A encontradas inicialmente en diferentes especies del género Enterobacter.

que

incluye

betalactámicos

todos con

los la

como el EDTA, compuestos tiólicos como el ácido 2-mercaptopropiónico, o el ácido dipicolínico. Con características similares se han descrito con posterioridad enzimas de los grupos SPM, GIM, SIM, AIM, DIM y KHM, y más recientemente la enzima NDM-1.

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Página 37

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

En España se han descrito tanto enzimas del tipo IMP, en P. aeruginosa y A. baumannii, como del tipo VIM en diferentes enterobacterias, P. aeruginosa y A. baumanii.

Clase D En el grupo de las OXA también se encuentran variantes que hidrolizan los carbapenémicos.

Entre ellas destacan las variantes de los subgrupos OXA-23, OXA-24, OXA-58, OXA-143 y, en menor medida, OXA-51 descritas en Acinetobacter spp. y sobre todo la OXA-48 descrita en enterobacterias en países del entorno mediterráneo. En P. aeruginosa las carbapenemasas de tipo OXA tienen menos importancia que en el género Acinetobacter.

Clase molecular1 (Grupo 2 funcional )

Enzimas

A (2f)

B (3)

D (2df)

Inhibición por Localización genética

ATM

Microorganismos

-

R

Serratia marcscens Enterobacter cloacae

+

-

R

Enterobacterias

Pl

+

-

R

Enterobacterias Pseudomonas aeruginosa

Pl

L1 CcrA Cpha BcII

-

+

S/R

Stenotrophomonas maltophilia Bacteroides. fragilis Aeromonas hydrophila Bacillus cereus

Crom

IMP, SPM, SIM, GIM, VIM, AIM, DIM, KHM, NDM

-

+

S

Enterobacterias Pseudomonas spp.

BGNNF

Pl (Crom)4

OXA (OXA-48)

±

-

S

Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa Enterobacterias

Crom, Pl

CLA

EDTA

Sme, IMI, NmcA

±

KPC GES

3

Crom

1 Según la clasificación de Ambler, 2según la clasificación de Bush y Jacoby, 2010; 3puede aparecer resistente por la 4 coexistencia con otros mecanismos de resistencia, ocasionalmente de codificación cromosómica. CLA, ácido clavulánico; ATM, aztreonam; BGNNF, bacilos gramnegativos no fermentadores; Pl, plasmídica; Crom, cromosómica

Figura 3. Clasificación general de las carbapanemasas [3].

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Página 38

BACILOS GRAM-NEGATIVOS CON CARBAPANEMASAS Y SU INCIDECIA EN LA INFECCIÓN NOSOCOMIAL

5.1.2 Detección de carbapanemasas: nueva prueba bioquímica de cribado.

La detección de microorganismos productores de carbapanemasas en los laboratorios clínicos es de vital importancia para la instauración de los protocolos terapeúticos más adecuados y la implementación de medidas de control de la dispersión de tales microorganismos.

Recientemente, se ha desarrollado una prueba bioquímica denominada Carba NP test II que permite identificar y discriminar entre las distintas clases de carbapanemasas (A, B y D). El test se basa en la detección de la acidificación resultante de la hidrólisis del antibiótico imipenem, combinando una excelente sensiblidad (100%) y especificidad (100%). Además es rápido y presenta una buena relación coste-efectividad [4].

Figura 4. Resultados representativos del Carba NP test II [4].

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Página 39

DESCONTAMINACIÓN MEDIANTE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO VAPORIZADO TRAS EL TRANSPORTE DE UN PERRO (VIVO), QUE PRESUNTAMENTE HA ESTADO EN CONTACTO CON EL VIRUS ÉBOLA

5.2

Microorganismos

con

considera

la

multirresistencia

a

antibióticos como la resistencia a más de

carbapanemasas 5.2.1

Se

Acinetobacter

baumanii

dos

de

los

siguientes

antibióticos:

multirresistente

grupos

cefalosporinas

antipseudomónicas

(cefepime,

ceftazidima),

carbapenemes

Generalidades

antipseudomónicos

Acinetobacter baumanii es un cocobacilo

imipenem),

Gram-negativo,

(ciprofloxacino,

aerobio

estricto,

no

de

(meropenem, fluoroquinolonas levofloxacino),

fermentador, catalasa positivo, oxidasa

aminoglucósidos

(gentamicina,

positivo e inmóvil. Uno de los rasgos más

tobramicina, amikacina) o sulbactam [6].

característicos de este microorganismo es

En los hospitales pueden aparecer cepas

su capacidad para desarrollar resistencias

endémicas y epidémicas de A. baumanii.

bacterianas.

Las

cepas

epidémicas

suelen

ser

Meropenem e imipenem suponen el

introducidas en el hospital por un paciente

tratamiento de elección en infecciones por

colonizado, a partir del cual la cepa puede

cepas de A. baumanii sensibles, aunque la

extenderse a otros pacientes y al ambiente.

resistencia

A.

a

carbapenemes

está

baumanii

puede

sobrevivir

en

aumentando de forma considerable y

superficies

constituye un signo de la aparición de

equipamiento médico, etc.). La bacteria se

multirresistencia [5].

puede diseminar a través del aire a

secas

(cortinas,

muebles,

distancias cortas mediante gotitas de agua y a través de la descamación de la piel de pacientes que están colonizados, pero el modo de transmisión más común es a través de las manos del personal sanitario.

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Página 40

DESCONTAMINACIÓN MEDIANTE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO VAPORIZADO TRAS EL TRANSPORTE DE UN PERRO (VIVO), QUE PRESUNTAMENTE HA ESTADO EN CONTACTO CON EL VIRUS ÉBOLA

Las infecciones nosocomiales en que se aísla Acinetobacter incluyen: neumonía asociada

a

ventilación

mecánica,

infecciones de piel y tejidos blandos, infecciones de heridas, infecciones del tracto urinario, meningitis postquirúrgicas o en relación con drenajes ventriculares y bacteriemias primarias [7].

Además, algunas cepas de Acinetobacter expresan

además

metalo-β-lactamasas,

tales como VIM e IMP. La resistencia a carbapenemes de Acinetobacter spp. se ha relacionado con la pérdida de proteínas que probablemente forman parte de los canales de porinas de la membrana externa. Es probable que las -β-lactamasas y las alteraciones en la membrana externa actúen de forma conjunta para conferir

Mecanismos de resistencia La capacidad de Acinetobacter para adquirir

resistencia

antimicrobianos

puede

a

múltiples

deberse

a

la

relativa impermeabilidad de su membrana externa y a la exposición ambiental a un

resistencia a los agentes β-lactámicos.

Acinetobacter tiene además bombas de eflujo capaces de expulsar de forma activa un

amplio

espectro

de

agentes

antimicrobianos que actúan sobre la pared bacteriana [8].

gran reservorio de genes de resistencia.

Las especies de Acinetobacter poseen una amplia variedad de β-lactamasas que hidrolizan penicilinas,

y

confieren

resistencia

cefalosporinas

a y

carbapenemes. Recientemente, se han descrito un amplio número de enzimas DOXA.

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Página 41

DESCONTAMINACIÓN MEDIANTE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO VAPORIZADO TRAS EL TRANSPORTE DE UN PERRO (VIVO), QUE PRESUNTAMENTE HA ESTADO EN CONTACTO CON EL VIRUS ÉBOLA

La mayoría de las cepas presentan 5.2.2

Pseudomonas

aeruginosa también un olor característico similar a la

multirresistente uva o a una fruta madura.

Generalidades Pseudomonas aeruginosa presenta un gran Pseudomonas aeruginosa es el principal

número

de

factores

de

patógeno de la familia Pseudomonadaceae

estructurales

(cápsula

exopolisacarida,

y se identifica por ser un bacilo Gram-

adhesinas,

negativo ligeramente curvado que crece

endotoxinas), toxigénicos (exotoxinas A, S

mejor en aerobiosis, es muy versátil

y T) y enzimáticos (elastasa, proteasa

nutritivamente y no fermenta hidratos de

alcalina, fosfolipasa C).

pili,

pigmentos

virulencia:

difusibles,

carbono.

Las

infecciones

nosocomiales

por

Pseudomonas aeruginosa se atribuyen Sus colonias suelen presentar un típico

principalmente

color

microorganismo en pacientes sometidos a

verdoso

que

proviene

de

la

a

la

adquisición

producción de pigmentos fluorescentes

ventilación

mecánica,

como la pioverdina (pigmento amarillo

antibiótico, quimioterapia o cirugía.

del

tratamiento

verdoso) o la piocianina (pigmento azul hidrosoluble).

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Página 42

DESCONTAMINACIÓN MEDIANTE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO VAPORIZADO TRAS EL TRANSPORTE DE UN PERRO (VIVO), QUE PRESUNTAMENTE HA ESTADO EN CONTACTO CON EL VIRUS ÉBOLA

Sin

embargo

existe

una

pequeña

proporción de individuos que albergan la Pseudomonas

aeruginosa

desde

Mecanismos de resistencia De las carbapenemasas de la clase A se

la

han descrito en Pseudomonas aeruginosa

comunidad y pueden servir de cómo

la KPC y GES/IBC, ambas plasmídicas.

fuente de infección grave. Hasta un 7% de individuos sanos pueden ser portadores de Pseudomonas aeruginosa en la garganta, mucosa nasal, piel y hasta un 24% en las heces [9]. P. aeruginosa es causante de diferentes cuadros clínicos, entre los que destacan respiratorio

la

infección en

forma

del de

tracto

neumonía

relacionada con la ventilación mecánica, las

infecciones

crónicas

ya

sea

Dentro de las KPC (KPC-10), en la Pseudomonas aeruginosa se han descrito la KPC-2 Y la KPC-5, con un espectro sobre todos los betalactámicos, aunque el espectro de hidrólisis para carbapenemes y monobactámicos es diez veces menor que para las penicilinas y cefalosporinas.

Dentro de las GES (GES-12) solo se identificaron la GES-1 y GES-5 [10].

en En Pseudomonas aeruginosa se han

pacientes con fibrosis quística (FQ) o con identificado hasta 8 grupos de MBL enfermedad pulmonar obstructiva crónica plasmídicas (IMP, VIM, SPM, SIM GIM, (EPOC), y las infecciones de la piel y de AIM, DIM Y KHM), de las cuales las más partes blandas (infección de quemaduras o extendidas son las IMP y las VIM. La herida quirúrgica).

VIM-2

es

la

carbapanemasa

más

prevalente en el genero Pseudomonas.

Dentro de las IMP, existen 21 variantes de las que todas excepto las -3,-5,-17,-23- y 24 se identificaron en la Pseudomonas aeruginosa [11].

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Página 43

DESCONTAMINACIÓN MEDIANTE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO VAPORIZADO TRAS EL TRANSPORTE DE UN PERRO (VIVO), QUE PRESUNTAMENTE HA ESTADO EN CONTACTO CON EL VIRUS ÉBOLA

La diseminación de MBL esta en aumento

BIBLIOGRAFÍA

en los últimos años, lo que genera un problema

emergente.

Los

genes

responsables de la producción de MBL

[1] CDC/NHSN Surveillance Definition of

suelen formar parte de integrones que

Healthcare-Associated

contienen además genes de resistencia a

Criteria for Specific Types of Infections in

otros

los

the Acute Care Setting. Disponible en:

aminoglucósidos. Estos integrones pueden

http://www.cdc.gov/nhsn/pdfs/pscmanual/

localizarse en el cromosoma pero también

17pscnosinfdef current.pdf.

antibióticos

como

en plásmidos transferibles de una bacteria a otra lo que facilita su diseminación [12].

[2]

Sociedad

Infection

and

Española de Medicina

Preventiva, Salud Pública e Higiene.

Dentro de las carbapanemasas de clase D

EPINE: Evolución 1990-2014. Disponible

tipo OXA, en Pseudomonas aeruginosa

en:

solo se ha identificado la OXA-40. Esta

http://hws.vhebron.net/epine/Descargas/E

enzima presenta actividad hidrolítica sobre

PINE%201990-2014%20web.pdf.

carbapenemes con actividad prácticamente nula frente a cefalosporinas de espectro extendido y monobactámicos [10].

[3] Calvo J, Cantón R, Fernández Cuenca F, Mirelis B, Navarro F. Detección fenotípica de mecanismos de resistencia en

gramnegativos. Procedimientos en

Microbiología Clínica 2011; 38: 1-54.

[4]. Dortet L, Poirel L, Nordmann P. Rapid identification of carbapenemase types

in

Enterobacteriaceae

and

Pseudomonas spp. by using a biochemical test. Antimicrob Agents Chemother 2012; 56 (12): 6437-6440.

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Página 44

DESCONTAMINACIÓN MEDIANTE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO VAPORIZADO TRAS EL TRANSPORTE DE UN PERRO (VIVO), QUE PRESUNTAMENTE HA ESTADO EN CONTACTO CON EL VIRUS ÉBOLA

[5]. Poirel L, Nordmann P. Carbapenem resistance in Acinetobacter baumanii:

[10] Juan C, Oliver A. Carbapenemasas en

mechanisms

especies de genero Pseudomonas. Enferm

and

epidemiology.

Clin

Microbiol Infect 2006; 12: 826-836.

Infecc Microbiol Clin 2010; 28 Suppl

[6].

1:19-28

Young LS, Sabel AL, Price CS.

Epidemiologic, clinical and economic

[11] Walsh T.R., Toleman M.A, Poirel L.,

evaluation of an outbreak of clonal

Nordmann P. Metallo-beta-lactamases: the

multidrug-resistant

quiet before the storm? Clin Microbiol

Acinetobacter

baumanii infection in a surgical intensive

Rev 2005, 18 (2): 306-25

care unit. Infect Control Hosp Epidemiol [12] Zavascki AP, Cruz RP, Goldani LZ. 2007; 28: 1247-1254.

Risk

factors

for

imipenem-resistant

[7] Munoz-Price LS, Weisntein RA.

Pseudomonas aeruginosa: a comparative

Acinetobacter infection. N Engl J Med

analysis of two case-control studies in

2008; 358:1271-1281.

hospitalized patients. J Hosp Infect 2005,

[8] Rice LB. Challenges in indentifying

59 (2): 96-101

new antimicrobial agents effective for treating infections with Acinetobacter baumanii and Pseudomonas aeruginosa.

Clin Infect Dis 2006; 43: 100-105.

[9] Berthelot P, Grattard F, Mahul P, et al.

Prospective

study

colonization

and

of infection

nosocomial due

to

Pseudomonas aeruginosa in mechanically ventilated patients. Intensive Care Med 2001; 27(3): 503-512.

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Página 45

CURSO eLEARNING DE ESPECIALIZACIÓN (Ed. a distancia): 26 OCTUBRE / 30 NOVIEMBRE 2015

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Página 46

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

RESUMEN

PREVENCIÓN DE

Las

infecciones

nosocomiales

ENFERMEDADES

producidas por bacterias y hongos

NOSOCOMIALES VS

oportunistas

BIOSEGURIDAD

importante

AMBIENTAL EN

pacientes

HOSPITALES

constituyen

una

económica

significativa

son de

la

una

causa

morbilidad

en

hospitalizados carga

y

social

y

para

el

Silvia Gonzalez Romano

paciente y el sistema de salud. Por

Tec. De Laboratorio

ello, se han diseñado una serie de

IBICLINIC, IBIZA medidas de

prevención y control

medio ambiental que incluyen un correcto

mantenimiento

de

las

instalaciones de climatización, la limpieza superficies,

adecuada la

de

utilización

las de

métodos de barrera y el aislamiento apropiado de las

diferentes áreas

de riesgo de un hospital.

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Página 47

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

INTRODUCCIÓN Éstas ocurren en todo el mundo y afectan a Definimos enfermedad nosocomial como

los países desarrollados y a los carentes de

aquella que se contrae en el ámbito

recursos. Las infecciones contraídas en los

hospitalario por un paciente internado por

establecimientos de atención de salud

una razón distinta de esa infección. Una

están entre las principales causas de

infección que se presenta en un paciente

defunción y de aumento de la morbilidad

internado en un hospital o en otro

en pacientes hospitalizados.

establecimiento de atención de salud en quien la infección no se había manifestado

Las más frecuentes son las de heridas

ni estaba en período de incubación en el

quirúrgicas, las vías urinarias y las vías

momento del internado.

respiratorias inferiores. Se ha demostrado que la máxima prevalencia de infecciones más

nosocomiales ocurre en unidades de

una

cuidados intensivos y en pabellones

enfermedad nosocomial son; las bacterias,

quirúrgicos y ortopédicos de atención de

Pseudomona aeruginosa, Acinetobacter,

enfermedades

Streptococcus y Staphylococcus aureus

prevalencia de infección son mayores en

resistentes

pacientes con mayor vulnerabilidad por

Los

microorganismos

comunes

que

Enterobacterias

patógenos

pueden

a

la como

causar

meticilina.Las la

E.coli

,

coliformes y salmonellas; y los hongos filamentosos

como

Aspergillus

agudas.

Las

tasas

de

causa de edad avanzada, enfermedad subyacente o quimioterapia.

sp,

Mucor,Scedosporium y Rhizopus.

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Página 48

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

Basándonos en el nivel de riesgo que Por ello es

muy importante que los

presentan los pacientes que son atendidos

niveles de contaminación del aire se

en diferentes áreas del hospital se pueden

mantengan en niveles mínimos, sobre todo

distinguir tres zonas hospitalarias:

en las áreas en las que se atienden a pacientes con alto riesgo frente a estas

-áreas de alto riesgo: quirófanos donde se

infecciones.

realizan intervenciones de alto riesgo como cirugía con prótesis, trasplantes

Denominamos

bioseguridad

ambiental a aquella situación del

hepáticos y pulmonar y áreas de hospitales donde

se

atiendes

a

pacientes

neutropénico. medio

ambiente

improbable supceptibles

que

que

hace

enfermos

adquieran

procesos

-áreas de riesgo intermedio: quirófanos donde

se

realizan

vehiculizados

por

el

resto

de

intervenciones quirúrgicas y áreas de hospitalización

infecciosos

el

pacientes

donde

críticos

se

(uci,

atienden

a

reanimación,

hemodinámica...)

aire.

Para garantizar la calidad y limpieza

- áreas de menor riesgo: restos de unidades asistenciales.

de los sistemas de ventilación y de la totalidad del área se realizan entre

otras

medidas,el

control

microbiológico ambiental mediante la

determinación

de

hongos

oportunistas y bacterias totales.

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Página 49

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

CLASIFICACIÓN DE LOS QUIRÓFANOS

La clasificación de quirófanos, mediante la medición ambiental de la concentración de partículas es de suma importancia, ya que cuantifica la calidad del aire en quirófanos y nos proporciona una valoración objetiva para determinar el tipo de cirugía más adecuada en cada quirófano. Dependiendo del número número de partículas clasificaremos la sala según la FEDERAL STANDARD 209 E o según la ISO 14664-1.

14664

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Página 50

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

RECOMENDACIONES PARA EL CONTROL DE LA BIOSEGURIDAD EN ÁREAS QUE HABITUALMENTE ATIENDEN A PACIENTES DE ALTO RIESGO

QUIRÓFANOS DONDE SE REALIZAN INTERVENCIONES DE ALTO RIESGO: CIRUGíA CON IMPLANTES

SISTEMAS

DE

CLIMATIZACIÓN Temperatura 18-26ºC

PROCEDIMIENTOS DE

DISCIPLINA

LIMPIEZA

INTRAQUIRÓFANO

DIARIA: Limpieza 30 min. Vestimenta:

bata

o

pijama

antes de actividad quirúrgica quirúrgico, calzas o zapato y al finalizar la actividad

específico de quirófano, gorro, mascarilla.

Humedad relativa 40- Entre intervenciones limpieza Circulación: 60%

del

de superficies horizontales. número de personas presentes y Superficies verticales en caso disminuir de salpicadura

Mínimo

restricción

de

15-20 Para

renovaciones

cada

al

máximo

los

movimientos del personal quirófano

se Mantener puertas y ventanas

de utilizará agua limpia

cerradas

aire/hora Presión

diferencial Producto: Agua,

positiva 10 pascales

desinfectante

(

jabón

y

amonios

cuaternarios, lejía) Aire filtrado :Prefiltro, filtro de alta eficacia, filtro

absoluto

en

posición terminal

Funcionamiento continuo del sistema

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Página 51

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

RECOMENDACIONES PARA ÁREAS DE RIESGO INTERMEDIO

QUIRÓFANOS

DONDE

SE

REALIZAN

EL RESTO

DE

INTERVENCIONES

QUIRÚRGICAS SISTEMAS

DE PROCEDIMIENTOS

DISCIPLINA

CLIMATIZACIÓN

DE LIMPIEZA

INTRAQUIRÓFANO

Temperatura 18-26ºC

DIARIA: Limpieza 30 min. Vestimenta:

bata

o

pijama

antes de actividad quirúrgica y quirúrgico,

calzas

o

zapato

al finalizar la actividad

específico de quirófano, gorro, mascarilla.

Humedad

relativa

40- Entre intervenciones limpieza Circulación:

60%

de

superficies

de salpicadura renovaciones

al

máximo

los

movimientos del personal

de Para cada quirófano se utilizará Mantener puertas y ventanas

aire/hora Presión

del

horizontales. número de personas presentes y

Superficies verticales en caso disminuir

15

restricción

agua limpia diferencial Producto:

positiva 10 pascales

cerradas Agua,

desinfectante

(

jabón

y

amonios

cuaternarios, lejía) Aire filtrado

con una

eficacia mínima del 95% Funcionamiento continuo del sistema

VERIFICACIÓN Y www.biotecnologiahospitalaria.com

MANTENIMIENTO DE LOS Página 52

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

SISTEMAS DE VENTILACIÓN:

VERIFICACIÓN DE LOS NIVELES DE

•

Los sistemas de ventilación deben

BIOSEGURIDAD

(CONTROL

MICROBIOLÓGICO)

verificarse y controlarse periódicamente.

•

Los

sistemas

de

climatización

CONTROLES OBLIGATORIOS

deben estar íntegros, de forma de forma que no existan fugas ni rupturas que puedan contaminar las canalizaciones de

de la

Sistema de registro diario

temperatura, humedad relativa y presión

Verificación

mensual

de

la

renovación del aire.

•

Cambio de los filtros intermedios

cada 6 meses.

•

-Averías o anomalías de mantenimiento del sistema de climatización.

-Temperatura superior a 28ºC.

diferencial.

•

siguientes incidencias y tras la toma de medidas para su corrección:

aire.

•

En caso de producirse alguna de las

Cambio de los filtros absolutos

cuando se colmaten o existan anomalías en su funcionamiento

-Humedades o goteras en el techo o paredes -Obras dentro del bloque quirúrgico.

Previo a la puesta en marcha de una nueva instalación.

-Tras la aparición de un caso de infección nosocomial.

CONTROLES RECOMENDABLES

En ausencia de casos por infección nosocomial o de obras en el hospital se realizarán

con

periodicidad

máxima

mensual, ajustando éstos a las necesidades y recursos locales.

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Página 53

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

MÉTODOS

DE

OBTENCIÓN

DE

MUESTRAS

Serán tomadas por personal competente,

El muestreador debe estar calibrado y

debidamente formado y entrenado.

ajustado el volumen de muestreo ( caudal

Se usará un muestreador por impacto

de 0.5 L,dos tomas, o 1000 L de una vez).

acorde a los requisitos de la norma ISO

Además es importante comprobar la carga

14698 Partes 1 y2.

de bateria, que en las placas que vamos a

La sala debe estar en reposo y sin

usar no presenten ningún crecimiento y

actividad antes de iniciar el muestreo y

que el cabezal este limpio y desinfectado.

hay que asegurar que los equipos de

Se usaran placas de tipo Petri y/o del tipo

acondicionamiento de aire se encuentren

Rodac.

en

funcionamiento.

ventanas,guillotinas

Hay

que

y

evitar puertas

abiertas.Deberemos anotar ls suciedad o cualquier

condición

anormal.

Sin

presencia humana y si la hay debe estar sin hablar,sin moverse ni interferir en los flujos de aire.

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Página 54

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

CRITERIO DE VALORACIÓN DE RESULTADOS

CLASIFICACIÓN

VALOR

PARÁMETROS

Ambiente muy limpio

<10 ufc/m3

Aerobios Mesófilos totales

Ambiente limpio

10-100 ufc/m3

Aerobios Mesófilos totales

Ambiente aceptable

100-200 ufc/m3

Aerobios Mesófilos totales

Admisible

Ausencia= 0 ufc/m3

Hongos: Aspergillus,mucor.....

MEDIOS DE CULTIVO PARA LA TOMA DE AIRE,TEMPERATURA Y DURACIÓN DE INCUBACIÓN

MICROORGANISMOS

MEDIOS

DE TEMPERATURA

CULTIVO

Aerobios mesófilos totales Estándar (TSA) Hongos

TIEMPO INCUBACION

35-37 ºC

Sabouraud- Dextrosa + 1ª-37ºC

3 días 2 días

cloranfenicol Agar Rosa de bengala

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2º Tª ambiente

5 días

Página 55

DE

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

INFECCIONES La probabilidad de muerte es bastante alta.

NOSOCOMIALES FÚNGICAS

En el caso de Cándida, responsable de 8 de cada 10 infecciones fúngicas, la tasa de

Existen más de 200.000 especies de hongos, sin embargos se conocen menos de 200 especies que pueden producir infecciones en el ser humano y el 90% de

mortalidad es del 30%. Por otra parte, el Aspergillus es menos frecuente pero aún mas

letal,

con

un

promedio

de

fallecimiento de casi el 90%.

las micosis pueden ser atribuidas a sólo una docena.

Durante

las

dos

últimas

En el caso de los hongos oportunistas

décadas la incidencia de las

representados por especies como Cándida

infecciones

y

Aspergillus

no

suelen

causar

fúngicas

y

muy

concretamente la aspergilosis

enfermedades por invasión en personas sanas. Pero estas variedades fúngicas

invasiva

pueden causar infecciones, a menudo

manera

letales, en paciente con el sistema inmune

ha

aumentado

inexorable.

de

Otras

infecciones

fúngicas

elevadísima

mortalidad

con

debilitado.

De

las

infecciones

nosocomiales

producidas por hongos,más del 90% estan

inmunodeprimidos, producida

por

como

en la

Scedosporium

causadas por especies pertenecientes al género Cándida (la más frecuente) y

prolificans han aparecidos en

Aspergillus.

nuestros hospitales.

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Página 56

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

Los pacientes con mayor riesgo

De estos dos tipos de hongos letales mencionados

de

una

micosis invasiva

por

nos

centraremos

específicamente al Aspergillus spp.

hongos filamentos capaces de trasmitirse por vía área son los ASPERGILOSIS NOSOCOMIAL pacientes

con

cáncer

hematológico

(particularmente

leucemia aguda) los receptores

El Aspergillus spp es un hongo saprofito que posee una gran ubicuidad.Sus esporas pueden persistir en el medio ambiente

de transplantes de órganos a los

que

se

tratamiento

les

administra

durante largo tiempo.Este hongo produce aspergilosis.

inmunodepresor, El Aspergillus fumigatus se ha convertido

los paciente con SIDA, diabetes o que reciben esteroides a altas dosis y los que son sometidos a

en uno de los patógenos oportunistas más importantes en los países desarrollados, produciendo cuadro neumónicos muy graves o fatales que eran desconocidos

cirugía mayor.

hace tan solo veinte años.

Este hecho se relaciona con el progresivo

Los brotes de infecciones fúngicas por

incremento

de

pacientes

hongos filamentosos se han descrito

inmunodeficiencias, ya sean adquiridas o

especialmente en pacientes neutropénicos.

terapéuticas, así como los sometidos a

Algunos de los brotes se han asociado con

intervenciones

actividades de construcción y renovación

duración.

complejas

con

de

larga

dentro y alrededores de los hospitales. Y otros brotes por el mal funcionamiento o contaminación

de

los

sistemas

de

ventilación o filtración de aire.

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Página 57

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

Puede clínicos

producir que

diversos

incluyen

hipersensibilidad,

síndromes cuadros

infección

local

de o

El diagnóstico de la aspergilosis invasora debe basarse ,como el de cualquier enfermedad

infecciosa

En los enfermos con tos, al igual que

confirmación microbiológica. Al ser una

sucede con otros inmunodeprimidos, la

enfermedad con síntomas variables y poco

aspergilosis es la forma más frecuente

específicos, la sospecha clínica debe ser

pudiendo

siempre confirmada

hemorrágica,

infección

pulmonar con

en

la

la

sospecha

bronconeumonía

y

en

aspergilosis invasora.

causar

clínica

grave,

posterior

por técnicas

de

imagen lo suficientemente sensibles.

abcesos únicos o múltiples e invasión de las arterias pulmonares con producción de

El tipo adecuado de muestra para el

infarto distal o hemorragia. Clínicamente,

diagnóstico microbiológico dependerá de

los pacientes suelen referir tos seca, dísnea

la accesibilidad de la lesión, siendo

y dolor pleurítico. La fiebre no siempre

preferibles las muestras obtenidas por

está presente y no es raro que el enfermo

aspiración o biopsia. Además del cultivo

presente diseminación. En este caso los

micológico,

enfermos suelen referir cefaleas, dolor

examen

facial y alteraciones visuales.

muestra (en fresco o mediante tinciones

debe

realizarse

microscópico

directo

siempre de

la

específicas),que facilitará la instauración Con frecuencia la enfermedad se disemina,

precoz del tratamiento en caso de ser

pudiendo afectar a cerebro, hígado, bazo,

positivo.

riñón, vasos sanguíneos, corazón, ojos, tubo digestivo, huesos y articulaciones.

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Página 58

PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

la

Fran¢oise Meunier, directora de la Oficina

detección de componentes fúngicos es ya

Central de la Organización para la

una realidad. Por otra parte, el diagnóstico

Investigación y Tratamiento del Cáncer en

molecular aplicado a la micología está

Bruselas, dijo que aunque las muertes por

comenzando a dar sus frutos y la detección

infección de hongos que se expanden por

de DNA de Aspergillus en sangre se

el riego sanguíneo son más comunes en

perfila como una herramienta muy útil en

los

un futuro inmediato.La infección por

hematológicas, como la leucemia, incluso

Aspergillus no es la más frecuente en los

en los tumores sólidos, el 5% de los

hospitales pero suele ser una de las más

enfermos que muere presenta evidencia de

graves porque no hay tratamiento eficaz.

una infección invasiva por hongos en la

Se calcula que más del 80% de los

autopsia.

pacientes hospitalizados que contraen este

Según

hongo, fallece.

prevención

Complementariamente

al

cultivo,

pacientes

con

esta científica, para

la

enfermedades

encontrar una infección

por

Aspergillus es especialmente importante Las probabilidades de sobrevivir al hongo

porque

no

hay

tratamiento.

Puede

son mayores cuanto antes se identifique la

conseguirse con algo tan sencillo como

infección, pero tampoco hay pruebas de

retirar una maceta de la habitación del

diagnóstico y a menudo el tratamiento se

paciente (el hongo germina en la tierra) o

empieza cuando se sospecha que puede

algo tan drástico como derribar una unidad

haber infección.

entera de trasplante de médula ósea, si se ha producido una contaminación.

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PREVENCIÓN DE ENFERMEDADES NOSOCOMIALES VS BIOSEGURIDAD AMBIENTAL EN HOSPITALES

En el medio hospitalario, los pacientes con Está claro que es una catástrofe que un paciente entre en el hospital para hacerse un trasplante de médula ósea y se le tenga que explicar que va a morir por una infección por Aspergillus», dijo esta

riesgo de sufrir una aspergilosis profunda deben evitar el contacto con productos vegetales (plantas, semillas o especias).

Por otra parte, es necesario un completo alejamiento cualquier

especialista.

de

estos

enfermos

de

trabajo

de

construcción

o

reforma.

En los enfermos con sida, Aspergillus no es el hongo que más debe preocupar. Sin embargo, se han encontrado esporas de este hongo en las hojas de marihuana y es un problema para los pacientes de sida que recurren a esta hierba como terapia para

La utilización de filtros de alta eficacia, filtros absolutos HEPA y en particular de flujo laminar, reduce en gran medida, pero no completamente, el riesgo de una aspergilosis muchos

aliviar los síntomas.

de

invasora. estos

Por

desgracia,

enfermos

encuentran

ya

se

colonizados

Con este hábito, el Aspergillus encuentra por Aspergillus cuando llegan al hospital una entrada directa a los pulmones y y, además, en una habitación es muy puede hacer estragos en el sistema difícil mantener un ambiente libre de respiratorio

de

estos

pacientes esporas por mucho que se extremen las

inmunodeprimidos. medidas de aislamiento (las inevitables Actualmente la prevención es la medida

entradas del personal sanitario son una de

más eficaz para el control de las

las causas más frecuentes de rotura del

aspergilosis invasoras.

flujo laminar y de circulación de esporas procedentes de su vestimenta).

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A pesar de todo, los pacientes con elevado

Hay fármacos que previenen una infección

riesgo de aspergilosis (receptores de

de hongos, pero que, al mismo tiempo,

hígado o pulmón, neutropénicos y grandes

pueden favorecer el desarrollo de otros

quemados)

hongos

deben

ser

albergados

en

que

no

responden

a

los

habitaciones especialmente diseñadas, con

medicamentos preventivos, los fármacos

aislamiento

y

preventivos han de darse sólo a los

ventanas, aire filtrado a través de HEPA,

pacientes que tienen un alto riesgo de

flujo laminar, presión diferencial positiva

infección.

adecuado

de

puertas

y un elevado número de renovaciones de aire (más de doce por hora).

CONCLUSIÓN

Las medidas preventivas anteriormente mencionadas deben ir acompañadas de una adecuada formación del personal sanitario a cargo de estos enfermos, en todos los aspectos relacionados con la aspergilosis nosocomial y su profilaxis.

Aún con grandes lagunas de conocimiento sobre algunos aspectos de su prevención y control tenemos datos suficientes como para estructurar o poner en marcha una serie de medidas de prevención de estas

Así mismo, es necesario realizar una

enfermedades en determinados pacientes o

vigilancia epidemiológica adecuada sobre

determinadas situaciones de riesgo.

estos pacientes de alto riesgo mediante cultivos nosofaríngeos periódicos para dectectar

cuanto

antes

las

posibles

colonizaciones por Aspergillus.

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BIBIOGRAFÍA

-Revista Iberoamericana de Micología

-Vigilancia y control de la bioseguridad

200; 17:S100-102.

ambiental ambiental. H. Rebollo Rodrigo,

-Prevención

de

nosocomiales:

las

infecciones

F. Antolín Juárez, Paz Rodriguez Cundín .

guía

práctica

Guía de Prevención de la infección

HO/CDC/CSR/EPH/2002. Capítulo VIII:

nosocomial.

Medio ambiente.

- Temario del curso 2015 SEGLA:

-Recomendaciones para la Verificación de

ANÁLISIS

la Bioseguridad Ambiental (BSA) respecto

AMBIENTAL Y DE SUPERFICIES EN

a Hongos Oportunistas. Grupo de trabajo

HOSPITALES.

de la Sociedad Española de Medicina

-Norma UNE-EN 779:2003 Filtros de aire

Preventiva, Salud Pública e Higiene y el

utilizados en ventilación general para

INSALUD.

eliminación de partículas. Determinación

-Recomendaciones para la Vigilancia,

de las prestaciones de los filtros.

MICROBIOLÓGICO

Prevención y Control de Infecciones en Hospitales en Obras. Grupo de trabajo de la

Sociedad

Española

de

Medicina

Preventiva, Salud Pública e Higiene y el INSALUD. 2000.

-Control

microbiológico

ambiental:

aspectos prácticos y evaluación de riesgos.

Dra. M.C. Gaspar. Jornadas sobre control microbiológico ambiental.

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