UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA PRACTICA Nº BF.5.09-01 Título de la práctica:
INTOXICACIÓN POR CIANURO 1. DATOS INFORMATIVOS: •
Docente: Dr. Carlos García MSc.
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Alumna: Viviana Elizabeth Bravo Suqui
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Curso: quinto año
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Paralelo: ``A``
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Grupo: # 5
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Fecha de elaboración de la práctica: Martes 14 de junio del 2016
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Fecha de entrega de la práctica: Martes 21 de junio del
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2016 Animal de Experimentación: Rata wistar Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 20ml de solución de Cianuro TIEMPOS: Inicio de la práctica: 8:30 am Hora de disección: 9:00AM Hora Inicio de Destilado: 9:30 am Hora de finalización de Destilado:10:00am Hora finalización de la práctica: 10:30 am
``TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS’’
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OBJETIVO:
Observar que tipo de reacciones puede presentar la rata wistar por intoxicación con cianuro.
Saber las diferentes tipos de pruebas de identificación para cianuro.
Observar el efecto que produce el cianuro en el animal y controlar el tiempo que actúa.
@
SINTOMATOLOGIA:
Se observó los movimientos acelerados y torpes (nistagmos) de sus glóbulos oculares, tras este síntoma convulsiona y muere. Fundamento: El cianuro es producido por el cuerpo humano y exhalado en pequeñas concentraciones con cada respiración. Concentraciones relativamente bajas de esta sustancia pueden ser tóxicas para los seres humanos, la flora y la fauna. El cianuro es fuertemente tóxico para los humanos. El cianuro de hidrógeno líquido o gaseoso y las sales alcalinas del cianuro pueden ingresar al cuerpo por inhalación, ingestión o absorción a través de los ojos y la piel. El nivel de absorción de la piel aumenta cuando ésta se encuentra cortada, deteriorada o húmeda. Las sales de cianuro se disuelven con facilidad y se absorben al entrar en contacto con las membranas mucosas. INSTRUCCIONES:
Material limpio.
Mesones de trabajo desinfectados.
Protección de seguridad.
Campana de flujo laminar.
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MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS: MATERIALES
EQUIPOS
VIDRIO:
Vasos
de
Aparato
SUSTANCIAS de
MUESTRA
NaCN 10%
Destilado de vísceras del animal
destilación
Agua destilada
Ácido tartárico al de experimentación.
precipitación
Balanza
Pipetas
Baño maría
Erlenmeyer
Campana
Tubos
20%
Cristales
de
Sulfato Ferroso
de
ensayo
Cloruro Férrico
Probeta
Etanol
Perlas de vidrio
Cl3Fe
Agitador
Fenolftaleína
Embudo
Ácido pícrico
OTROS
Solución
Guantes
Mascarilla
Ácido sulfúrico
Gorro
Ácido clorhídrico
Mandil
Sulfato de cobre
Aguja
Hidróxido
de
yodo
de
sodio
hipodérmica 10 mL
Bencidina
Cronómetro
Ácido acético
Estuche
Hiposulfuro de
disección
amonio
Panema
Yoduro de plata
Agitador
Hidróxido
Fosforo
sodio
Pinzas
Cocineta
Espátula
Gradilla
de
de
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PROCEDIMIENTO:
Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse
Preparar una solución de formaldehido al 4%.
Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una aguja hipodérmica administrar 8mL de solución de formaldehido.
Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los efectos de la intoxicación.
Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso de precipitación.
Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio.
Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 5.8. Con aproximadamente 15 mL
del
destilado
recogido
(muestra)
realizar
las
reacciones
de
reconocimientos en medios biológicos. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN:
Ensayo de Grignard: el ácido pícrico en presencia del HCN, liberado de la muestra ácida, forma isopurpurato alcalino. •
Embeber tiras de papel filtro con solución acuosa de ácido pícrico .
•
El ensayo presenta su máxima sensibilidad
•
Un color rojo naranja indica resultado positivo
Ensayo con Fenolftaleína:
Fenolftaleína 1 g de muestra + sulfato ferroso
Un color rosado claro indica resultado positivo
Ensayo de Magnin: Se basa en la formación de azul de Prusia. •
impregna una tira de papel con hidróxido de sodio al 2%
•
4 gotas de solución de sulfato ferroso
•
Finalmente por agregado de unas gotas de ácido clorhídrico
•
Un color azul indica resultado positivo
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Reacción sulfociánica o de Von Liebig. Consiste en el agregado de un exceso de polisulfuro al destilado y posterior calentamiento para formar sulfocianuro. •
Unos 5 ml de muestra se colocan en una cápsula de porcelana.
Con calor. •
agregan unas gotas de polisulfuro de amonio (amarillo)
•
color amarillo se considera prácticamente sulfocianuro
•
se acidifica con solución concentrada de HCl hasta reacción ácida frente al rojo congo.
•
El compuesto puede aislarse por tratamiento con éter etílico realizando tres extracciones
•
Luego se trata el residuo con 2 o 3 gotas de cloruro férrico al 0.5% y aparece color rojo intenso de intensidad variable
Ensayos cuantitativos Ensayo de Magnin: Constituye una valoración en donde se forma una sal estable de AgCN . Se impregna una tira de papel con hidróxido de sodio al2% y se expone en el interior del recipiente unos minutos. Se retira y se extiende sobre una cápsula de porcelana. Se distribuyen sobre la superficie expuesta 4 gotas de solución de sulfato ferroso 2%. Se observa un precipitado verdoso que luego pasa a castaño (hidróxido férrico).Finalmente por agregado de unas gotas de ácido clorhídrico concentrado se observa color azul por formación azul de Prusia. Es una reacción poco sensible pero muy específica. Siempre se efectúan por lo menos dos reacciones: una muy sensible y otra muy específica. Si las dos reacciones arrojan resultados positivos se realiza el aislamiento. Método de microdifusión de Feldstein-Klendshoj.
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Colocar en el compartimiento interno de la unidad de microdifusión 3.3 ml de hidróxido de sodio 0.1N
•
Compartimiento externo 2 a 4 ml de muestra
•
Reactivo liberante: 2 a 3 gotas de ácido sulfúrico al 10% en el compartimiento externo.
•
Reactivo liberante se agregan 2 a 3 gotas de ácido sulfúrico al 10% en el compartimiento externo.
•
Se toma 1 ml de la solución alcalina del compartimiento interno y se coloca en un tubo de ensayo
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Se prepara un blanco colocando en otro tubo 1 ml de hidróxido de sodio 0.1N.
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Se agregar 2 ml de fosfato monosódico 1M y 1 ml de cloramina T al 0.25%. Mezclar y dejar en reposo 2 a 3 minutos, agregar por último 3 ml de reactivo piridina-barbitúrico, mezclar y dejar en reposo 10 minutos. En presencia de ión cianuro aparece color rosado cuya absorbancia se mide a 580nm. GRÁFICOS:
Escogemos el animal de experimentación.
Aplicamos el toxico.
Observamos los síntomas que presenta la Rata wistar hasta su muerte.
Con ayuda de un bisturí sacamos las
Trituramos las vísceras para llevarlas a destilación.
Despues de la destilación obtenemos la solución madre que la que haremos reacciones de identificación.
vísceras.
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RESULTADOS OBTENIDOS:
Azul de Prusia: positivo
Reacción de la fenolftaleína: positivo
Transformación de cianuros a sulfocianuros: positivo
Reacción de la bencidina: positivo
Con el ácido pícrico: positivo
Con yoduro de plata: positivo
Con solución de yodo: positivo Conclusiones: Mediante la presente práctica se logró observar las reacciones de la rata al colocarle el cianuro como poca movilidad y convulsiones. El toxico se le ``TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS’’
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administro de manera rápida para que muera de inmediato y no sufra el animal. Todas las reacciones de identificaciones fueron necesarias para el estudio y verificación de este toxico que es letal. Recomendaciones
Asegurar de tener todos los reactivos de trabajo. Usar la protección adecuada como: bata, guantes, mascarilla, etc. Colocar ventilación por el cianuro liberado.
CUESTIONARIO: 1. CUALES SON LAS PROPIEDADES FISICAS DEL CIANURO. Propiedades físicas
Fórmula química: HCN Masa molecular: 27.0 g/mol. Punto de ebullición: 26° C Punto de fusión: -13° C Densidad relativa del líquido (agua = 1g/ml): 0.69 g/ml Densidad relativa de vapor (aire =1g/ml): 0.94 g/ml. Solubilidad en agua: Miscible. Presión de vapor (kPa a 20° C): 82.6 Temperatura crítica: 183.6° C 1 Temperatura de autoignición: 538° C
2. CUALES SON LOS EFECTOS PARA LA SALUD HUMANA Y EL MEDIO AMBIENTE. Si se produce una exposición de corta duración la sustancia es irritante en ojos y en el tracto respiratorio. La sustancia puede causar efectos en la respiración celular debido al ión cianuro CN-, dando lugar a convulsiones y pérdida del conocimiento, pudiendo incluso llegar a producir la muerte. En el caso de que se dé una exposición prolongada ó repetida la sustancia puede afectar al tiroides. La evaporación de esta sustancia a 20° C, produce una concentración nociva de la misma en aire, provocando confusión mental, somnolencia, dolor de cabeza, náuseas, convulsiones, jadeo, pérdida del conocimiento, enrojecimiento de los ojos y la muerte. En cuanto a su afección al medio ambiente, se trata de una sustancia que en contacto con el aire, puede originar incendios y reacciones explosivas. En procesos de combustión se forman gases tóxicos y corrosivos, llegando incluso a la formación de óxidos de nitrógeno que son precursores en la formación de 1 ozono troposférico, dañino para los seres vivos. ``TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS’’
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3. ¿CÓMO MATA EL CIANURO? Es potencialmente letal, actuando como tóxico a través de la inhibición del complejo citocromo c oxidasa, y por ende bloqueando la cadena transportadora de electrones, sistema central del proceso de respiración celular. Por consecuencia, causa una baja en el oxígeno intracelular, impidiendo la homeostasis de las células. Afecta también, al estar cargado negativamente, el traspaso de electrones por medio de canales, creando un ambiente positivo dentro de la célula. Esto genera una gran cantidad de cargas que generan suficiente energía como para que el AMP cíclico se pueda convertir en ADP, creando una sobre estimulación en varios procesos. El principal efecto nocivo y letal de las diversas variedades de cianuro es el impedir que el oxígeno portado por los glóbulos rojos pueda ser utilizado como aceptor de hidrógeno en el final de la cadena respiratoria intramitocondrial En una autopsia, el cadáver presenta gran cantidad de oxígeno en las venas y una gran cantidad de ácido láctico, producto de la respiración anaeróbica realizada 2 por las células carentes de oxígeno. Glosario: Acidificar: Convertir en ácido una sustancia. Dar propiedades ácidas a los 3. cuerpos que no las tienen, por la adición de sustancias ácidas Acido pícrico: es un sólido cristalino amarillo. Se utiliza como explosivo potente y oxidante fuerte en los combustibles de cohetes, cerillas, técnicas de 4 tratamiento del cuero, en los métodos de grabado de metales, las baterías. Cianuro: Sustancia química, potencialmente letal, que actúa rápidamente y puede existir de varias formas. Cloramina: Las cloraminas son un tipo de aminas orgánicas que se producen cuando el amoníaco y el cloro (en forma de ácido hipocloroso) reaccionan entre . sí Cada vez se emplea más la cloramina en vez de cloro en las plantas de tratamiento de agua, debido a que la cloramina es mucho más estable y no desaparece del agua asegurando la desinfección hasta el momento en que el 5 agua llega al consumidor. Microdifusión: consiste en propulsar el aceite esencial por compresión de aire. es parecido al de las bombas de los acuarios. Llevan un pequeño motor eléctrico incorporado y es este el que permite que el aceite esencial salga en 6 millones de microparticúlas hacía fuera.
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BIBLIOGRAFÍA: 1. EINECS, 2007, CIANURO DE HIDRÓGENO (HCN) (en línea) 19-06-2016 disponible en: http://www.prtr-es.es/Cianuro-de-hidrogenoHCN,15672,11,2007.html 2. BETOVDM, 2012, COMO MATA EL CIANURO Y EL ARSENICO(en línea) 19-06-2016 disponible en: https://betovdm.wordpress.com/2012/04/07/como-mata-el-cianuro-y-elarsenico/ 3. DICCIONARIO, 2014, ACIDIFICAR (en línea) 19-06-2016 disponible en: http://www.acanomas.com/Diccionario-Espanol/50408/ACIDIFICAR.htm 4. PREVOR, 2015, Ácido Pícrico: Entender el riesgo de productos químicos específicos (en línea) 19-06-2016 disponible en: http://www.prevor.com/es/acido-picrico 5. GREENFACT, 2016, Cloraminas (en línea) 19-06-2016 disponible en: http://www.greenfacts.org/es/glosario/abc/cloramina.htm 6. JOVER, A, 2010, Difusor por micro-difusión (en línea) 19-06-2016 disponible en: https://aromaterapiafamiliar.wordpress.com/2010/04/22/difusor-por-microdifusion-versus-difusor-ultrasonico/
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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA Toxicología Docente: Dr. Carlos García MSc. Alumna: Viviana Elizabeth Bravo Suqui Curso: quinto año
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Paralelo: ``A`` Tema: INVESTIGACION SOBRE EL CIANURO Cianuro.
El cianuro es una sustancia química, caracterizada por la presencia de una unidad química formada por el enlace - carbono-nitrógeno (CN ) se combina con una gran mayoría de compuestos orgánicos e inorgánicos. Es potencialmente letal, que actúa rápidamente sobre el sistema respiratorio. Básicamente, el cianuro se presenta como cianuro de hidrógeno (HCN), que es un gas, o en forma de cristales como el cianuro de sodio (NaCN) o el cianuro de potasio (KCN). Generalmente, el cianuro se caracteriza por un olor a “almendras amargas”, pero no siempre emana un olor y no todas las personas pueden detectarlo. El cianuro es uno de los principales compuestos utilizados por la industria química debido a su composición de carbono y nitrógeno, ambos elementos comunes, y a la facilidad con la cual reacciona con otras sustancias. Alrededor del 80% del cianuro fabricado en el mundo se emplea en la producción de químicos orgánicos (nitrilo, nylon y plásticos acrílicos); así como en la fotografía y la producción de goma sintética. El cianuro de hidrógeno gaseoso se ha utilizado ampliamente para exterminar a los roedores y depredadores grandes, y en la práctica hortícola, para controlar las plagas de insectos que han desarrollado resistencia a otros pesticidas.
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Cianuro en la naturaleza En la naturaleza, el cianuro es formado, excretado y degradado por miles de animales, plantas, insectos, hongos y bacterias. Los niveles de cianuro potencialmente liberado por la digestión o inadecuada preparación de plantas cianogénicas pueden llegar a concentraciones de cientos de partes por millón. La ingesta de estos vegetales puede originar la muerte en animales y el envenenamiento del ser humano. En la naturaleza se encuentran presentes bajas concentraciones de cianuro, por ejemplo, en muchos insectos y plantas, entre las que se incluyen una amplia variedad de especies vegetales. El cianuro se encuentra en almendras, albaricoques, bambúes, frijoles germinados, cerezas, aceitunas, papas, sorgo, soya, y nueces, a las que brinda protección contra los depredadores Cianuro en minería aurífera Desde aproximadamente finales del siglo XIX, el cianuro de sodio es empleado intensamente en operaciones auríferas para la disolución o lixiviación de oro. El proceso fue patentado en el Reino Unido por J.S. MacArthur y los hermanos W. y R. Forrest el 19 de octubre de 1887. Del total de la producción mundial de cianuro, alrededor del 20% se utiliza para fabricar cianuro de sodio, una forma sólida de cianuro cuya manipulación es relativamente fácil y segura. De este porcentaje, el 90%, es decir, el 18% de la producción total, se utiliza en minería en todo el mundo, mayormente para la recuperación de oro. Los procesos de extracción aurífera empleada en operaciones mineras requieren de soluciones muy diluidas de cianuro de sodio, generalmente entre 0.01% y 0.05% de cianuro (100 a 500 partes por millón). En contacto con el oro, el cianuro forma complejos estables, razón por la cual su importancia en minería aurífera. Toxicidad del cianuro La inadecuada manipulación o empleo del cianuro lo convierte en un compuesto potencialmente tóxico. En Canadá, el cianuro puede ser descargado en valores de - - CN total de entre 1-2 mg/l y CN WAD de 0.1 0.5 mg/l; mientras que en Estados Unidos los límites establecidos por la Agencia de Protección Ambiental (EPA, por sus siglas en inglés) son de 0.2 mg/l de cianuro WAD y ``TODO ES VENENO, NADA ES VENENO, TODO DEPENDE DE LA DOSIS’’
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1 mg/l de cianuro total. En el Perú, la legislación establece niveles de cianuro total de1 mg/l; 0.1 mg/l de cianuro libre y 0.2 mg/l de cianuro WAD. Diariamente los seres humanos tienen contacto directo con el cianuro o sus derivados a través de los alimentos que consume y productos que utiliza. De otro lado, en la industria minera son numerosos los trabajadores que tienen contacto frecuente con este reactivo no reportándose accidentes fatales o muertes originadas por la intoxicación de este compuesto. La causa principal de muerte por cianuro involucra la ingesta de plantas cianogénicas, cuyos elevados niveles de cianuro provocan una parálisis permanente de las extremidades. A nivel tisular (tejidos), el cianuro actúa sobre el sistema respiratorio, impidiendo el uso del oxígeno mediante la inhibición de la acción de las enzimas respiratorias. Una vez que se encuentra en el torrente sanguíneo, el cianuro forma un complejo estable con la citocromo oxidasa, una enzima que promueve el traspaso de electrones a las mitocondrias de las células durante la síntesis de 2 adenosin trifosfato (ATP) . Si la citocromo oxidasa no funciona correctamente las células no consiguen aprovechar el oxígeno del torrente sanguíneo, lo que causa hipoxia citotóxica o asfixia celular. Métodos de tratamiento Los sistemas o métodos de tratamiento del cianuro deberán estar dirigidos a eliminar la potencial toxicidad del reactivo para la vida silvestre y acuática, así como de las aves. Estos procedimientos podrían incluir la remoción del cianuro de: pulpas de relave de operaciones de molienda; eliminación de soluciones provenientes del proceso de Merrill-Crowe; soluciones de exceso de operaciones de lixiviación en pilas o “vat”; soluciones sobrenadantes de presas de relaves; y de filtraciones1. BIBLIOGRAFIA: 1.
Guerrero JJ. Cianuro: Toxicidad y destrucción biológica. Rev El Ing Minas. 2005;10(35):22-25. http://www.sabetodo.com/documentos/cianurotoxdestrucbiologica.pdf.
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