3.15. Embriog´enesis som´atica

3.15. EMBRIOG ´ ENESIS SOM ´ ATICA 83

Inducci´on de callo

Para la inducci´on de callo en mel´on, se utilizan las pl´antulas germinadas in vitro; se toman las yemas apicales y se transfieren al medio de cultivo establecido. Los cultivos se llevan a la sala de crecimiento a 22 ◦C ± 1, fotoperiodo 16/8 e intensidad lum´ınica 1000 lux.

(a) (b)

Figura 3.34. a.Formaci´on de callo friable a partir de brotes de mel´on utilizando 2mg/L de BAP (Tirado, 2001). b.Subcultivo y desarrollo del callo friable de mel´on (Tirado, 2001).

Los embriones som´aticos o asexuales pueden resultar de un proceso de diferenciaci´on directa o indirecta a partir de c´elulas, ´organos o callos de una planta, es decir, sin necesidad de fusi´on de gametos. La embriog´enesis som´atica fue definida por Haccius (1978) como el proceso por cual se forma un nuevo individuo a partir de una sola c´elula, la cual carece de conexiones vasculares con el tejido parental.

Los embriones som´aticos son aptos para crecer y diferenciarse hasta formar plantas normales. Pueden originarse de manera directa o indirecta, es decir, con previa formaci´on de callo ´o, por el contrario, la formaci´on de estructuras globulares a partir del tejido de partida cuando esta es directa. Los embriones som´aticos pasan por los mismos estadios de los embriones sexuales: globular, acorazonado, torpedo y cotiledonar (Parrot et ´al. 1988).

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CAP ´ ITULO 3. SECCI ´ ON DEL EXPLANTE

Posterior a la formaci´on de los embriones som´aticos, debe ocurrir una serie de eventos hasta la obtenci´on de las pl´antulas: la proliferaci´on, maduraci´on y germinaci´on. Cada una de estas etapas requiere la adici´on de compuestos qu´ımicos apropiados para un ´optimo desarrollo.

La embriog´enesis som´atica puede verse afectada por diferentes factores. El tipo de explante es indispensable, ya que no todos los tejidos presentan capacidad de desdiferenciaci´on y diferenciaci´on, por lo que se aconseja utilizar tejidos j´ovenes como cotiledones, hipoc´otilos y embriones (Litz & Jarret, 1991). El medio de cultivo es otro factor importante; generalmente se utiliza el medio propuesto por Murashige & Skoog (1962) debido a los altos niveles de sales, especialmente nitr´ogeno, lo cual permite un apropiado desarrollo. Es aconsejable suministrar al medio reguladores de crecimiento teniendo en cuenta el genoma de la planta y el tipo de explante. Evans et ´al. (1981) consideran que la mayor´ıa de los sistemas embriog´enicos requieren la presencia de auxinas, generalmente 2,4-D, adem´as de factores de crecimiento, como las condiciones del medio ambiente, es decir, temperatura, humedad, fotoperiodo, intensidad de la luz, principalmente. Estas pr´acticas buscan la formaci´on de estructuras embrionarias a partir de c´elulas som´aticas, para obtener mayor n´umero de plantas utilizando estos precesos.

Cuadro 3.1. Comparaci´on entre embriones cig´oticos y embriones som´aticos (C´ordoba, 2005).

EMBRIONES CIG

´ OTICOS EMBRIONES SOM

´ ATICOS Formados por el ´ovulo fertiizado Se forman de c´elulas som´aticas o gam´eticas aisladas, sin requerirse la fusi´on de gametos

Informaci´on gen´etica altamente variable Organizaci´on bipolar (eje-apicalradical) Con suspensor (columna de c´elulas ef´ımera que une el embri´on con la c´elula basal del tejido parental y determina su desarrollo) Informaci´on gen´etica id´entica a la del parental Organizaci´on bipolar (eje-apicalradical) Carecen de suspensor que lo una con el tejido materno

Carece de reservas alimenticias, de cubierta seminal y de megaesporofito (Parrot et ´al.,1991)