UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA Y TOXICOLOGÍA PRÁCTICA Nº BF.8.01-2 TEMA: SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS INTOXICACIONES, SINDROME TOXICOS, TOXICOS VOLATILES Y MINERALES. NOMBRE DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO DATOS INFORMATIVOS: CARRERA: Bioquímica y Farmacia
CALIFICACION
CICLO/NIVEL: Octavo Semestre “B”
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FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 07/junio/2017
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DOCENTE RESPONSABLE: Bioq. CARLOS GARCÍA MSc. ALUMNA: Elena Celi Romero Animal de Experimentación: pollo (vísceras) Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10mL de cloroformo TIEMPOS: Inicio de la práctica: 7:45 Hora de trituración: 8:00 Hora Inicio de Destilado: 8:20 Hora de finalización de Destilado: 8:40 Hora finalización de la práctica: 10:00 1. OBJETIVOS: 1.2 Identificar en el destilado de las vísceras de pollo la presencia de cloroformo mediante diversas reacciones de reconocimiento 1. 2 Revisar bibliográficamente los síntomas producidos por intoxicación por cloroformo.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El cloroformo es un líquido incoloro, volátil y no inflamable con un característico olor dulzón. Ligeramente soluble en agua, miscible con alcohol, éter, benceno, sulfuro de carbono y tetracloruro de carbono. El cloroformo se suele suministrar combinado con un estabilizante como, por ejemplo, el etanol. El cloroformo en trazas puede generarse de manera natural y se forma también al clorar el agua potable o las aguas residuales. Se emplea como materia prima en la industria química (fabricación de carburos fluorados que se utilizan como refrigerantes, resinas, plásticos, etc.). También se utiliza como disolvente en procesos industriales y en el laboratorio. El cloroformo es un depresor del sistema nervioso central y produce efectos tóxicos sobre el hígado y los riñones. Se absorbe bien tanto por vía inhalatoria como por vía oral y dérmica. La principal ruta de eliminación es la exhalación. El dióxido de carbono es su metabolito principal, aunque también puede formarse fosgeno. El cloroformo presenta una toxicidad de leve a moderada, si bien la muerte puede sobrevenir por depresión respiratoria durante la anestesia, o bien con posterioridad debido a su hepatotoxicidad. El cloroformo líquido es altamente irritante. Los efectos críticos del cloroformo aparecen en el hígado y riñones de animales de laboratorio tras la exposición repetida. La exposición de ratas, conejos y cobayas a 25 ppm (124 mg/m3) durante 7 horas/día, 5 días/semana y seis meses provocó cambios histopatológicos en hígado y riñones. Los estudios de exposición profesional al cloroformo indican que las concentraciones de aproximadamente 20-80 ppm (cerca de 100-400 mg/m 3) provocan una serie de quejas leves tales como cefalea, laxitud, depresión y molestias digestivas. A concentraciones a partir de 205 ppm (1.019 mg/m3 ) se han descrito síntomas similares junto con una mayor incidencia de agrandamiento del hígado.[ CITATION INS07 \l 3082 ]
3. RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS SUSTANCIAS E INSUMOS MATERIALES
Vasos de precipitación Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Agitador Embudo Guantes Mascarilla Gorro Mandil Estuche de disección Tubos de ensayo Pinzas Espátula
Gradilla Tela para filtrar Soporte par embudo
EQUIPOS
Campana de gases
SUSTANCIAS
hidróxido de potasio Nitrato de plata Amoniaco diluido
Lejía de sosa -β-naftol -benceno -citrato de piperacina -Yodo -Reactivo de Benedict Alcohol 95%
MUESTRA
Destilado de vísceras del animal de experimentación
4. INSTRUCCIONES:
Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
5. PROCEDIMIENTO:
Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Preparar 10mL de Cloroformo. Recolectar en el vaso de precipitación, con la ayuda del estuche de disección, fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles. Dejar por aproximadamente 15 minutos las vísceras del animal junto al cloroformo y esperar. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN:
Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohoó lica (proporcioó n 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porcioó n se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porcioó n se le agrega solucioó n de nitrato de plata producieó ndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solucioó n alcohoó lica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloracioó n e roja – violaó ceo y con la piridina rojo.
Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejíóa de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en banñ o de Maríóa y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varíóa del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reaccioó n sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de alguó n sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofoó rmica. Reacción de roseboom.- se disuelve un pequenñ o cristal de yodo en la solucioó n muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo estaó presente en la muestra, la coloracioó n violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. Reacción de Benedict.- si la solucioó n muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentracioó n del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
RESULTADOS
Reacción de dunas.- positivo caracteríóstico. Resultado 1: negruzco/ resultado 2: rojizo Reacción de Lustgarten.- positivo caracteríóstico. Azul Reacción de fujiwara.- positivo caracteríóstico. Rosa rojizo Reacción de roseboom.- positivo caracteríóstico. Amarillo rojizo Reacción de Benedict.- positivo caracteríóstico. Gama de colores GRAFICOS Obtención de destilado de vísceras
Reacción de dunas.-
Reacción de Lustgarten.-
Reacción de fujiwara.-
Reacción de roseboom.-
Reacción de Benedict.-
Desecho de vísceras
CONCLUSIÓNES
Se llevó a cabo la administración de cloroformo en las vísceras del pollo, y aunque no se pudo observar in vivo los síntomas de envenenamiento, se investigó en referencias bibliográficas dando como resultado que: La exposición a cloroformo puede ocurrir al respirar aire contaminado o al tomar agua contaminada o al tocar sustancias que lo contienen. las manifestaciones clínicas que serían visibles al presentarse intoxicación por cloroformo son: laxitud, depresión y molestias digestivas, mareos, confusión, somnolencia Los efectos críticos del cloroformo aparecen en el hígado y riñones. puede ser fatal si tragado, inhalado o absorbido a través de piel. causa irritación a piel, ojos y aparato respiratorio. puede afectar el sistema nervioso central, sistema cardiovascular, hígado y riñones. La exposición prolongada puede llevar a la muerte debido a una frecuencia cardíaca irregular y desórdenes renales y hepáticos. Por medio de las reacciones de identificación se identificó que en el destilado de las vísceras del animal existía cloroformo. A pesar de realizar sustituciones de ciertas sustancias, obtuvimos positivos característicos para nuestra práctica.
10. RECOMENDACIONES
Trabajar con las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de accidente que ponga en riesgo nuestra salud. Trabajar en la campana de gases y con mascarilla, ya que ciertas sustancias, tal como el metanol, que es nuestra sustancia base, puede causar problemas al ser inhalada. Trabajar en mesones separados para evitar confusiones. Revisar con días de anticipación que existan los reactivos necesarios para evitar cambiar por parecidos y afectar nuestros resultados.
11. CUESTIONARIO 1. ¿QUE USOS LE DABAN EN EL PASADO AL CLOROFORMO Y PORQUE USOS FUE REEMPLAZADO EN LA ACTUALIDAD? En el pasado, el cloroformo fue usado como anestésico en cirugía; en la actualidad tal uso se ha abandonado. Hoy en día, el cloroformo se usa para manufacturar otros productos químicos. [ CITATION ATS16 \l 3082 ] 2. ¿QUE SINTOMAS A NIVEL DERMICO, NEUROLOGICO YESPIRATORIO SE PRESENTAN CUANDO EXISTE ENVENENAMIENTO POR CLOROFORMO? Aparato respiratorio: La depresión respiratoria es común, y puede producirse neumonitis química y edema pulmonar. Sistema dérmico: Puede causar irritación, quemaduras, urticaria y necrosis. Sistema neurológico: Puede causar depresión del SNC, dolor de cabeza y anorexia. [ CITATION SAN08 \l 3082 ] 3. ¿CUAL ES EL TRATAMIENTO PARA LA INHALACION DEL CLOROFORMO? Tratar los broncoespasmos con inhalación de agonistas beta 2 y con cortico esteroides por vía oral o parenteral. En los pacientes que están inconscientes se debe considerar la intubación orotraqueal o nasotraqueal para el control de las vías respiratorias. [ CITATION SAN08 \l 3082 ] 12. BIBLIOGRAFIA
ATSDR. (2016). CLOROFORMO. Obtenido de https://www.atsdr.cdc.gov/es/toxfaqs/es_tfacts6.html INSHT.
(2007). CLOROFORMO: DOCUMENTACION TOXICOLOGICA. Obtenido de http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valores_Limite/Doc_Toxicologica/Ficher osSerie2/DLEP%2026.pdf
SANAMBI. (2008). CONSEJERIA DE SANIDAD. Obtenido de https://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/137913CLOROFORMO.pdf
13. FIRMA
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