UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA Y TOXICOLOGÍA PRÁCTICA Nº BF.8.01-1 TEMA: SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS INTOXICACIONES, SINDROME TOXICOS, TOXICOS VOLATILES Y MINERALES. NOMBRE DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR METANOL DATOS INFORMATIVOS: CARRERA: Bioquímica y Farmacia CICLO/NIVEL: Octavo Semestre “B” FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 31/Mayo/2017 DOCENTE RESPONSABLE: Bioq. CARLOS GARCÍA MSc. ALUMNA: Elena Celi Romero Animal de Experimentación: pollo (vísceras) Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. Volumen administrado: 10mL de Alcohol Metílico. TIEMPOS: Inicio de la práctica: 7:45 Hora de trituración: 8:00 Hora Inicio de Destilado: 8:20 Hora de finalización de Destilado: 8:40 Hora finalización de la práctica: 10:00 1. OBJETIVOS: 1.2 Identificar en el destilado de las vísceras de pollo la presencia de alcohol metílico mediante diversas reacciones de reconocimiento 1. 2 Revisar bibliográficamente los síntomas producidos por intoxicación por alcohol metílico 2. FUNDAMENTO TEÓRICO: El metanol es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CH3OH. Es utilizado como combustible, principalmente al juntarlo con la gasolina. [ CITATION Sou09 \l 3082 ]
Su empleo dentro de la producción de bebidas alcohólicas adulteradas ha dado lugar a brotes de intoxicaciones agudas. La exposición al tóxico se da predominantemente por vía oral, aunque la absorción inhalada o transdérmica puede dar lugar a una intoxicación. La susceptibilidad a los efectos tóxicos del metanol es variable, pero la ingesta de una pequeña cantidad puede dar lugar a una intoxicación grave. La intoxicación, tanto accidental como con fines suicidas, presenta una elevada morbimortalidad, debido en gran parte a la dificultad para confirmar el diagnóstico, lo que retrasa el tratamiento, el cual debería ser iniciado ante la mínima sospecha del cuadro sin esperar la confirmación por laboratorio, ya que la precocidad de la administración de las medidas terapéuticas es crucial a fin de limitar el daño y posibilitar una potencial recuperación del paciente. [ CITATION Lor09 \l 3082 ] 3. RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS SUSTANCIAS E INSUMOS MATERIALES
Vasos de precipitación
Pipetas
Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Agitador Embudo Guantes Mascarilla Gorro Mandil Estuche de disección Tubos de ensayo Pinzas Espátula Gradilla Tela para filtrar Soporte par embudo
EQUIPOS
Campana de gases
SUSTANCIAS
Hidróxido de sodio HCl Cloruro de fenil hidracina yoduro de potasio Ácido sulfúrico Leche Cloruro férrico Sulfato ferroso Ácido sulfúrico Ácido clorhídrico
Formol Yodato de potasio Violeta de genciana
MUESTRA
vísceras del animal experimentación
de
4. INSTRUCCIONES:
Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. Llevar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
5. PROCEDIMIENTO:
Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Preparar una solución de formaldehido al 4%.
Recolectar en el vaso de precipitación, con la ayuda del estuche de disección, fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4% y perlas de vidrio. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. Reacción de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta. Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. Reacción de Hehner Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. RESULTADOS Reacción de Schiff: POSITIVO NO CARACTERISTICO Reacción de Rimini: POSITIVO CARACTERISTICO Con la Fenilhidracina: POSITIVO CARACTERISTICO Reacción de Marquis: POSITIVO NO CARACTERISTICO Ácido Cromotrópico: POSITIVO CARACTERISTICO
Reacci贸n de Hehner: POSITIVO NO CARACTERISTICO
GRAFICOS Reacci贸n de Schiff: color violeta
Reacci贸n de Rimini: color azul intenso
Con la Fenilhidracina: color rojo grosella
Reacci贸n de Marquis: color violeta
Ácido Cromotrópico: color rojo
Reacción de Hehner: color violeta o rojo violeta
CONCLUSIÓNES
Se llevó a cabo la administración de alcohol metílico en las vísceras del pollo, y aunque no se pudo observar in vivo los síntomas de envenenamiento, se investigó en referencias bibliográficas dando como resultado que: entre la ingesta y la aparición de las manifestaciones clínicas el intervalo es variable (de pocos minutos hasta 72 horas). En la mayoría de los casos los síntomas iniciales se siguen de un periodo asintomático. Los principales síntomas visibles son vómito, incoordinación motora y depresión o alteración del sistema nervioso central con movimientos alterados y actitud extraña y después de unas horas puede terminar en coma y hasta la muerte.
Por medio de las reacciones de identificación de identifico el metanol proveniente del destilado de las vísceras del animal.
10. RECOMENDACIONES
Trabajar con las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar accidentes. Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de accidente que ponga en riesgo nuestra salud. Trabajar en la campana de gases y con mascarilla, ya que ciertas sustancias, tal como el metanol, que es nuestra sustancia base, puede causar problemas al ser inhalada. Trabajar en mesones separados para evitar confusiones. Revisar con días de anticipación que existan los reactivos necesarios para evitar cambiar por parecidos y afectar nuestros resultados.
11. CUESTIONARIO A. ¿QUE ES EL ACIDO FORMICO? Es un ácido orgánico de un solo átomo de carbono, y por lo tanto el más simple de los ácidos orgánicos. Su fórmula es HCOOH (CH2O2). Entre otras propiedades es un ácido líquido, incoloro, de olor irritante, con punto de ebullición de 100,7 °C y de congelación de 8,4 °C y es completamente soluble en agua pues su cadena carbonada es muy corta y fácilmente ionizable. El ácido fórmico es el principal responsable de la toxicidad ocular y de la acidosis metabólica anión gap elevado. [ CITATION Ino14 \l 3082 ] B. ¿CUALES SON LOS PELIGROS DEL ALCOHOL ADULTERADO POR METANOL? El alcohol metílico, no es apto para el consumo humano, se trata de una sustancia que se obtiene de la destilación de la madera y es utilizado como sustancia activa de solventes y removedores de lacas y barnices. Su consumo, puede ser fatal, ya que afecta principalmente el sistema nervioso central, destruyendo la mielina, tejido que recubre a los nervios, evitando que éstos se comuniquen y disminuyendo funciones como el movimiento. Los síntomas que podemos tener al ingerir una bebida adulterada son: fuertes dolores de cabeza, mareo, ceguera, náuseas, vómito, nerviosismo, ansiedad y resaca intensa. [ CITATION Vel \l 3082 ] Los efectos de estas modificaciones del alcohol, derivan de una reacción bioquímica que desencadena una serie de reacciones que traen por consecuencia el mal funcionamiento del organismo a diferentes niveles. Esto produce daños irreparables y efectos perjudiciales en el cuerpo humano, incluyendo una muerte instantánea. Algunos de los padecimientos más recurrentes y comunes con este consumo reportados por el consumidor son: alteraciones neurológicas, cefalea, náuseas, vómito, visión borrosa, alteraciones en la respiración, estado de coma y lamentablemente, la muerte. [ CITATION Ino14 \l 3082 ]
C. ¿CUALES SON LAS SECUELAS DE CONSUMIR METANOL? El envenenamiento por metanol es potencialmente mortal pudiendo tener graves repercusiones como acidosis metabólica, aparece deterioro neurológico progresivo hasta la aparición de convulsiones o coma, ceguera y muerte. 12. BIBLIOGRAFIA
Inocencio, I., Meraz, J., Gonzales, M., & Fernandez, P. (febrero de 2014). bebidas adulteradas: metanol asesino. Obtenido de http://vinculacion.dgire.unam.mx/Congreso-Trabajos-pagina/PDF/Congreso%20Estudiantil%202014/Proyectos %202014-%20%C3%81rea/1.%20Ciencias%20Biol%C3%B3gicas/ciencias%20de%20la %20salud/3.30%20CIN2014A10268-%20Ciencias%20de%20la%20Salud.pdf Lorias, J., Bermeo, A., Ramirez, A., & Fernandez, D. (septiembre de 2009). Archivos de medicina de urgencia de Mexico. Obtenido de http://www.medigraphic.com/pdfs/urgencia/aur- 2009/aur092f.pdf Sousa, G. (octubre de 2009). metanol y etsanol. Obtenido de http://profesores.fi-b.unam.mx/l3prof/Carpeta%20energ %EDa%20y%20ambiente/MetanolEtanol.pdf
Velasquez, D., Almeida, H., & Huerta, S. (s.f.). detector de bebidas adulteradas con metanol. Obtenido de http://www.acmor.org.mx/reportescongreso/2013/prepa/prototipos/17-detector-de-bebidas-adulteradas-conmetanol.pdf
13. FIRMA
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