UNIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Docente: Bioq.Farm. García González Carlos Alberto Mg.Sc. Alumna: Macas Paltin Katherine Lisbeth Curso: Quinto año de Bioquímica y Farmacia Paralelo: “A” Grupo N°: 4 Fecha de elaboración de la práctica: Martes, 2 de Agosto del 2016 Fecha de presentación de la práctica: Martes, 9 de Agosto del 2016 10
PRÁCTICA N°BF 5-09-10 1. DATOS INFORMATIVOS 1.1 Tema: Sintomatología y diagnóstico de las intoxicaciones, síndromes tóxicos, tóxicos volátiles y minerales. 1.2 Título de la práctica: INTOXICACIÓN POR COBRE Y HIERRO. 1.3 Animal de Experimentación: vísceras de pollo, camarón. 1.4 Tiempos: 1.4.1 1.4.2 1.4.3 1.4.4 1.4.5
Inicio de la práctica: 8: 00 am Trituración de vísceras: 8:10 am Obtención de solución madre: 8:30 am Pruebas de identificación: 8: 40 am Hora finalización de la práctica: 10:30 am
2. OBJETIVOS 2.1 Determinar propiedades, sintomatología de tóxicos minerales, su interacción producida por cobre y mercurio. 2.2 Observar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de cobre y mercurio en el destilado de las vísceras del animal de experimentación (camarón y vísceras de pollo). 3. FUNDAMENTO TEORICO COBRE: El cobre es uno de los metales de transición e importante metal no ferroso. Su utilidad se debe a la combinación de sus propiedades químicas, físicas y mecánicas, así como a sus propiedades eléctricas y su abundancia. El cobre fue uno de los primeros metales usados por los humanos. La mayor parte del cobre del mundo se obtiene de los sulfuros minerales como la calcocita, covelita, calcopirita, bornita y enargita. Los minerales oxidados son la cuprita, tenorita, malaquita, azurita, crisocola y brocantita. El cobre natural, antes abundante en Estados Unidos, se extrae ahora sólo en Michigan. El grado del mineral empleado en la producción de cobre ha ido disminuyendo TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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regularmente, conforme se han agotado los minerales más ricos y ha crecido la demanda de cobre. Hay grandes cantidades de cobre en la Tierra para uso futuro si se utilizan los minerales de los grados más bajos, y no hay probabilidad de que se agoten durante un largo periodo. HIERRO: El Hierro es un metal del grupo de los elementos de transición, de color blanco plateado, blando, dúctil, maleable, magnético y oxidable, que es muy abundante en la naturaleza formando compuestos y se extrae principalmente de la hematites. La intoxicación por hierro es muy frecuente en niños por las escasas medidas de seguridad con estos medicamentos. Es común que los padres no le den la importancia necesaria porque piensan que los suplementos nutricios, incluidas las vitaminas, son inocuos; por ello, en la mayoría de los casos dejan estos medicamentos al alcance de los niños. Por otro lado, la presentación de estos suplementos casi siempre tiene un aspecto, olor y sabor agradables. La intoxicación por hierro depende de la concentración de hierro elemental en sangre, para lo cual es necesario saber las equivalencias de acuerdo a las diferentes presentaciones farmacológicas existentes. 4. INSTRUCIONES 4.1 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa. 4.2 Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 4.3 Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 4.4 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 5. MATERIALES MATERIALES VIDRIO Vaso de precipitación Pipeta Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Agitador Embudo OTROS Mandil Gorro Mascarilla Guantes Cronometro Agitador
EQUIPOS Aparato de destilación Balanza analítica Campana
SUSTANCIAS Ácido acético Ferricianuro de K Ácido sulfhídrico Hidróxido de sodio Yoduro de Potasio Hidróxido de Amonio Cuprón Cianuro de sodio
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MUESTRA Destilado de vísceras del animal de experimentación (vísceras de pollo y camarón)
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6. PROCEDIMIENTO 6.1 PREPARACION DE LA SOLUCION MADRE 6.1.1 6.1.2 6.1.3 6.1.4 6.1.5
Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse Realizar cortes finos de las vísceras de pollo y el camarón Triturar con ayuda de un pistón las muestras en un mortero Colocar en un vaso de precipitación las muestras trituradas y agregar una pequeña cantidad de sulfato cúprico. Filtrar y colocar en un tubo de ensayo la solución madre.
GRUPO Nª 1: Reacción Ferrocianuro de potasio 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. A la solución madre se le acidifica con ácido acético, luego se agrega unas gotas de ferrocianuro de potasio, si da la coloración azul es positiva. GRUPO Nª 2: Reacción con SH2 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. A la solución madre se agrega una pequeña cantidad de SH2, si se forma un precipitado color negro es positiva.} GRUPO Nª 3: Reacción con hidróxido de amonio 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. A la solución madre se agrega unas gotas de NaOH, si da la coloración azul pegajoso es positiva. GRUPO Nª 4: Reacción con IK 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. Adicionar a la solución muestra gota a gota yoduro de potasio, primeramente se forma un precipitado blanco que luego se transforma a pardo verdoso o amarillo GRUPO Nª 5: Reacción con NH4OH 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. A la solución muestra agregar unas gotas de NH4OH en caso de ser positivo se forma un precipitado color azul claro de solución NO3(OH)Cu GRUPO Nª 6: Reacción con Yoduro de potasio 1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 2. Adicionar a la solución madre 3 gotas de yoduro de potasio, previamente diluido, si se forma un precipitado pardo verdoso o amarillento es positivo 7. REACCIONES: 7.1 Reacción con el Ferrocianuro de Potasio: En un medio acidificado con ácido acético, el cobre reacciona dando un precipitado rojo oscuro de ferrocianuro cúprico, insoluble en ácidos diluidos, soluble en amoniaco dando color azul. K4Fe(CN)6 + 2Cu(NO3) Cu2 Fe(CN)6 + KNO3 TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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7.2 Reacción con el Amoniaco: La solución muestra tratada con amoniaco, forma primero un precipitado verde claro pulverulento que al agregarle un exceso de reactivo se disuelve fácilmente dando un hermoso color azul por formación de un compuesto cupro-amónico. Cu (NO3)2 + 4NH3 Cu (NH3)4 . (NO3)2 7.3 Reacción con el Cuprón: En solución alcohólica al 1 % al que se le adiciona gotas de amoniaco, las sales de cobre reaccionan produciendo un precipitado verde insoluble en agua, amoniaco diluido, alcohol, ácido acético, soluble en ácidos diluidos y poco solubles en amoniaco concentrado. C6H5-C=NOH C6H5-CHOH + Cu(NO3)2
C6H5-C=N-O Cu + 2HNO3 C6H5-C-N-O
7.4 Reacción con el Yoduro de Potasio: Adicionando a la solución muestra gota a gota, primeramente se forma un precipitado blando que luego se transforma a pardo-verdoso o amarillo. Cu(NO3)2 + IK + I37.5 Reacción con los cianuros alcalinos: A una pequeña cantidad de muestra se agregan unos pocos cristales de cianuro de sodio formando un precipitado verde de cianuro de cobre, a este precipitado le agregamos exceso de cianuro de sodio y observamos que se disuelve por formación de un complejo de color verde-café. (NO3)Cu + 2CNNa (CN)2Cu + NO3- + Na+ (NO3)Cu + 3CNNa [Cu(CN)3]= + 3Na+ 7.6 Reacción con el Hidróxido de Amonio: A la solución muestra, agregarle algunas gotas de NH4OH, con lo cual en caso positivo se forma un precipitado color azul claro de solución NO3 (OH) Cu. Este precipitado es soluble en exceso de reactivo, produciendo solución color azul intenso que corresponde al complejo [Cu(NH3)4]++. (NO3)2Cu + NH3 Cu(OH)NO3 (NO3)2Cu +3 NH3 2[Cu(NH3)4++ + NO3H + H2O 7.7 Reacción con el SH2: A la solución muestra, hacerle pasar una buena corriente de SH2, con lo cual en caso de ser positivo se forma un precipitado color negro este precipitado es insoluble en exceso de reactivo, en KOH 6M, en ácidos minerales diluidos y fríos. (NO3)2Cu + SH2 SCu+ 2NO3H TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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7.8 Reacción con el SH2: A una pequeña porción de solución muestra agregarle gota a gota de solución de IK, con lo cual en caso de ser positivo se forma inicialmente un precipitado color blanco que luego se transforma en pardo verdoso o por formaciones de iones tri yoduros, el mismo que se puede volar con Tio sulfato de sodio. (NO3)Cu + Tri yoduros 7.9 Reacción con el Hidróxido de Sodio: A 1ml de solución muestra, agregamos algunas gotas de de NaOH, con lo cual en caso de ser positivo se debe formar un precipitado color azul pegajoso por formación de Cu(OH)2.Este precipitado es soluble en ácidos minerales y en álcalis concentrados. Cu++ + 2OH Cu(OH)2 8
GRÁFICOS
8.1 OBTENCION DE LA SOLUCION MADRE DE LAS VISCERAS DE POLLO
1cortar finamente
4. Filtrar
2. triturar
3. Agregar 5. Solucion madre cuprico.
sulfato
8.2 OBTENCION DE LA SOLUCION MADRE DE LAS VISCERAS DE CAMARON
1cortar finamente
3. Agregar cuprico.
2. triturar
4. Filtrar
sulfato
5. Solucion madre
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9. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
REACCIÓN CON FERROCIANURO DE POTASIO
RESULTADO: color azul (+)
REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
ANTES: AZUL CLARO
DESPUES: AZUL
REACCIÓN CON SH2: precipitado Negro
RESULTADO: precipitado negro (+) REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
ANTES: AZUL CLARO
DESPUES: PRECIPITADO NEGRO
REACCION CON NaOH RESULTADO: Azul pegajoso REACCION NEGATIVA
ANTES: AZUL CLARO
REACCION POSITIVA
DESPUES: AZUL PEGAJOSO
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REACCIÓN CON IK
RESULTADO: amarillo o verdoso (+) REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
ANTES: AZUL CLARO
DESPUES: VERDOSO
REACCIÓN CON NH4OH
RESULTADO: Precipitado azul claro (+) REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
ANTES: AZUL CLARO
DESPUES: PRECIPITADO AZUL
RESULTADO: Verde (+)
REACCIÓN CON CUPRÓN
REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
ANTES: AZUL CLARO
DESPUES: VERDE
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REACCIÓN CON CIANURO DE SODIO
RESULTADO: Verde (+)
REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
ANTES: AZUL CLARO
DESPUES: VERDE
10. RESULTADOS MUESTRAS
K4Fe(CN)6
H2S
NaOH
IK
NH4OH
Cuprón
Camarón Pollo
-
-
-
+ +
+ +
+
Cianuro De Na +
11. OBSERVACIONES En esta práctica se pudo conocer las pruebas de identificación del cobre y el hierro. Estos minerales son extremadamente toxico para la salud ya que causan intoxicaciones que podrían causar la muerte 12. RECOMENDACIONES
Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas específicas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
13. CONCLUSIÓN Mediante la revisión de artículos científicos, se pudo conocer como el cobre y el hierro son compuestos muy toxico que puede provocar daños muy perjudiciales en el ser humano e incluso la muerte. Es importante mencionar que al realizar las reacciones de reconocimiento de este toxico entre ellas: reacción con ferrocianuro de potasio, reacción con ácido sulfhídrico, reacción con hidróxido de sodio, reacción con yoduro de potasio, reacción con hidróxido de amonio, cupron y cianuro de sodio se pudo detectar que tanto las vísceras de camaron como de pollo existe la presencia de cobre y hierro cuando utilizamos el IK y el NH4OH. TODO ES VENENO NADA ES VENENO TODO DEPENDE DE LA DOSIS
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14. CUESTIONARIO: 14.1 ¿En que nomás existe la presencia de cobre? - Ciertas monedas: todas las monedas de un centavo en los Estados Unidos hechas antes de 1982 contenían cobre - Ciertos insecticidas y fungicidas - Alambre de cobre - Algunos productos de acuario - Suplementos minerales y vitamínicos (el cobre es un micronutriente esencial, pero demasiada cantidad puede ser mortal) 14.2 Cuál es el cuadro clínico de intoxicación por cobre El cuadro se caracteriza por vómitos (inmediatos postingesta), dolor retro-esternal y epigástrico, sudoración y diarrea. Cuando se produce la absorción de los compuestos, ocurren hemólisis, anemia, ictericia, fallo renal y hepático. 14.3 ¿Cuál es la Dosis de intoxicación por hierro? La intoxicación con menos de 40 mg/kg se considera como leve, entre 40-60 mg/kg como moderada y más 60 mg/kg es la potencialmente letal. 14.4 ¿Cuáles son los órganos comprometidos en una intoxicación aguda por hierro? Los órganos y sistemas comprometidos en una intoxicación aguda por hierro son: 14.4.1 Cardiovascular: en el cual se puede evidenciar choque carcinogénico y vasodilatación (arteriolar y venosa) secundarias a un efecto directo del hierro mismo y el aumento de los niveles de ferritina circulante 14.4.2 Gastrohepático: se evidencian lesiones por contacto del hierro con la mucosa intestinal como ulceras, infartos de mucosa y necrosis. Luego se presenta cicatrización redundante que culmina en estenosis intestinales o fístulas. Frecuentemente se encuentran nauseas, vómito, diarrea y sangrado de vías digestivas como síntoma a lo antes descrito 14.4.3 Sistema nervioso central: el daño en este órgano es multicausal ya que hay responsabilidad directa del hierro sobre las neuronas y la glía, como efecto de las lesiones secundarias producidas por el daño de la fosforilación oxidativa y la acidosis metabólica con brecha aniónico elevada y también pueden haber alteraciones secundarias al compromiso cardiovascular ya mencionado 15 GLOSARIO 15.1 ANEMIA: Síndrome que se caracteriza por la disminución anormal del número o tamaño de los glóbulos rojos que contiene la sangre o de su nivel de hemoglobina. 15.2 EPIGASTRO: el epigastrio es una de las nueve regiones arbitrarias en que se divide al abdomen. Limita hacia arriba con la apófisis xifoides del esternón y con los bordes condrales (que forman el arco costal), hacia abajo con la región umbilical y
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hacia los lados con los bordes laterales del músculo recto del abdomen.2 Se encuentra entre los hipocondrios derecho e izquierdo. 15.3 FOSFORIACION: La fosforilación es la adición de un grupo fosfato, o no fosfato molecular criogenizado inorgánico a cualquier otra molécula. Su papel predominante en la bioquímica lo convierte en un importante objeto de investigación sobre todo en la fosforilación de proteínas y de fructosa. 15.4 GLIA: Las células gliales (conocidas también genéricamente como glía o neuroglia) es una matriz interneural formada por células estrelladas y fusiformes que se diferencian de las neuronas por no poseer contactos sinápticos. Sus membranas contienen canales iónicos y receptores capaces de percibir cambios ambientales. Las señales activadas dan lugar la liberación de transmisores aunque carecen de las propiedades para producir potenciales de acción. 15.4 INFARTO: Obstrucción de los tejidos que forman un órgano, o una parte de él, debido a la interrupción del riego sanguíneo de la arteria o las arterias correspondientes; conduce a la muerte o necrosis de los tejidos. 16. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 16.1 Jover Francisco (2001) Intoxicación aguda por hierro en un caso. Revista médica de Chile. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S003498872001000600010 16.2 Bustamante Luis. (2011). Intoxicación aguda por hierro. Revista CES Medicina. Disponible en: http://www.redalyc.org/pdf/2611/261119568008.pdf 16.3 Universidad de Maryland (2012). Intoxicación por Cobre. http://umm.edu/health/medical/spanishency/articles/intoxicacion-por-cobre
Disponible
en:
16.4 Repetto T. (1993) Glosario de términos toxicológicos. Asociación española de Toxicología. Disponible en: http://buscatox.com/05pub/Glosario%20terminos%20toxicologicos%20toxicologia%20Repetto.pdf
17. FIRMA DE RESPONSABLE:
KATHERINE MACAS P. C.I 0705839835
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18. ANEXOS DATOS OBTENIDOS EN LA PRร CTICA
MUESTRAS ANALIZADAS
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ARTICULO CIENTIFICO
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INTOXICACION AGUDA POR HIERRO Acute iron poisoning LUIS ALFONSO BUSTAMANTE-CRISTANCHO Forma de citar: Bustamante-Cristancho LA. Intoxicación aguda por hierro.Rev. CES Med 2011; 25(1):79-96
RESUMEN Los pacientes intoxicados representan un reto en el enfoque diagnóstico y terapéutico en los servicios de urgencias. La intoxicación por hierro es una condición médica relativamente frecuente en los pacientes pediátricos y gestantes, dada la fácil adquisición de este mineral en los suplementos vitamínicos, que son corrientemente formulados en las consultas médicas de promoción y prevención y en los programas de control prenatal. La intoxicación aguda por hierro representa un alto potencial letal y para llegar a dicho estado se requieren dosis extremadamente altas como 200 a 250 mg/kg de hierro elemental, aunque recientemente se describe con valores mayores de 150 mg/kg y otros con 75 mg/kg; sin embargo, se empiezan a observar manifestaciones de toxicidad con ingestas mayores de 15 a 20 mg/kg. En el presente artículo se hace una revisión de la intoxicación aguda por hierro desde su metabolismo básico, pasando por los mecanismos existentes para la regulación de las sobrecargas férricas agudas y tomando conceptos necesarios para la comprensión de los procesos fisiopatológicos de las manifestaciones de toxicidad, según el órgano blanco potencialmente lesionado. Se hace una reseña de las modalidades diagnósticas y terapéuticas establecidas, así como los aportes de algunas investigaciones para la posible identificación de antídotos distintos a la deferoxamina. Por último, se presenta un algoritmo diagnóstico y terapéutico en base a la revisión hecha Link: Cristancho, L. A. B. (2011). Intoxicación aguda por hierro. Revista CES Medicina, 25(1), 79-96.
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