Prevalencia de brucella abortus en hembras bovinas mayores de 24 by Medicina Veterinaria JDC

PREVALENCIA DE brucella abortus EN HEMBRAS BOVINAS MAYORES DE 24 MESES DE EDAD EN EL MUNICIPIO DE ZETAQUIRA BOYACA

ANGELICA PATRICIA CASTILLO GALINDO

FUNDACION UNIVERSITARIA JUAN DE CASTELLANOS FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS MEDICINA VETERINARIA TUNJA 2012

PREVALENCIA DE brucella abortus EN HEMBRAS BOVINAS MAYORES DE 24 MESES DE EDAD EN EL MUNICIPIO DE ZETAQUIRA BOYACA

TRABAJO DE GRADO PARA OPTAR EL TÍTULO DE MÉDICO VETERINARIO

ANGELICA PATRICIA CASTILLO GALINDO

DIRIGIDO POR: MAURICIO BOYACA QUINTANA MEDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA ESPECIALISTA EN LABORATOERIO CLINICO

FUNDACION UNIVERSITARIA JUAN DE CASTELLANOS FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS MEDICINA VETERINARIA TUNJA 2012

RESUMEN

En este trabajo se evaluó la seroprevalencia de Brucella Abortus en hembras bovinas mayores de 24 meses; con el fin exponer la problemática de esta enfermedad en el municipio de Zetaquira

y concientizar

a la comunidad en

general sobre las pérdidas económicas y riesgo biológico que genera esta enfermedad en sus fincas. El estudio se realiza en el municipio de Zetaquira Boyacá. Se muestrearon 233 hembras, el tamaño de la muestra se determino con el programa estadístico para el análisis de datos Win episcope 2.0 donde la población total de estudio es 1814 animales (Fedegan 2011), con un intervalo de confianza del 95% y un error del 5%, el muestreo se realizo al azar, en las diferentes veredas del municipio, donde se analizo la presencia de Brucella Abortus con respecto a las veredas, fincas, asistencia técnica por fincas y asistencia técnica por veredas.

Para el diagnostico se empleo la prueba de aglutinación en placa de Rosa de Bengala

arrojando

una

prevalencia

26/233

individuos

seropositivos

equivalentes al 11% y 207/233 individuos negativos equivalentes al 89% del total de hembras muestreadas

PALABRAS CLAVE: Brucella, seroprevalencia, abortos infeccioso, brucelosis

ABSTRACT

In this work Brucella Abortus's seroprevalencia was evaluated in bovine major females of 24 months; with the end to expose the problematics of this disease in Zetaquira's municipality and concientizar to the community in general on the economic losses and biological risk that generates this disease in his estates. The study is realized in Zetaquira Boyacรก's municipality. 233 females were sampled, the size of the sample I determine with the statistical program for the analysis of information Win episcope 2.0 where the total population of study is 1814 animals (Fedegan 2011), with a confidence interval of 95 % and a mistake of 5 %, the sampling I realize at random, in the different paths of the municipality, where I analyze Brucella Abortus's presence with regard to the paths, estates, technical assistance for estates and technical assistance for paths.

For the diagnosis I use the test of agglutination in Rosa's plate of Bengal throwing one prevalencia of 26/233 individual seropositive equivalent to 11 % and 207/233 individual negatives equivalent to 89 % of the total of sampled females

KEY WORDS: Brucella, seroprevalencia, abortions infectious, brucellosis

GLOSARIO

Aborto: expulsión prematura del feto Agente etiológico: entidad capaz de producir una enfermedad Agente patógeno: toda aquella entidad biológica capaz de producir enfermedades o daños a la biología de un huésped (humano, animal, vegetal, etc.) sensiblemente predispuesto Aglutinacion: unión de una suspensión de células portadoras de antígenos, microorganismos o partículas en presencia de anticuerpos específicos Anticuerpos: son proteínas que actúan específicamente microorganismos e impiden que causen daño al hospedero

contra

los

Brucella: genero de microorganismos Gram negativos en forma de bastoncillo corto de clasificación incierta, compuesto por células inmóviles que requieren biotina, niacina, tiamina y a veces suero para su desarrollo. Brucelosis: enfermedad de naturaleza infecto-contagiosa conocida como aborto contagioso o infeccioso. El agente principal en el bovino es la bacteria brucella abortus. Afecta principalmente a bovinos de todas las edades, pero persiste con mayor fecuencia en animales sexualmente adultos, principalmente de las ganaderías de cria y leche. El signo predominante en hembras preñadas es el aborto, o bien el nacimiento prematuro o a termino de terneros muertos o débiles Cepa 19: vacuna elaborada con 19 microoorganismos deferentes, vivos de brucella abortus Contencion: este termino se utiliza para describir métodos seguros para manejar materiales infecciosos en el medio ambiente del laboratorio donde son manipulados o conservados Diagnostico: el diagnostico es el resultado del análisis que se realiza en una primera instancia y que tiene como fin permitir conocer las características especificas de la situación determinada para asi poder actuar en consecuencia, sugeriendo tratamiento o no. Ese análisis diagnostico se basa en la observación de síntomas existentes en el presente o en el pasado

Elisa Competitiva: inmuno ensayo enzimático que utiliza una enzima marcada con un cromógeno inmunoreactivo, para medir la concentración de un elemento desconocido Endemico: especie que habita exclusivamente en determinado territorio; y que es una enfermedad propia de una región geográfica en todo momento Enfermedades Infecciosas: son aquellas producidas por bacterias y organismos similares como los virus y otras especies de microorganismos, se caracterizan por que aparecen luego de la infección del animal, pueden ser o no contagiosas Epidemiologia: ciencia que estudia los factores que determinan e influencian la frecuencia y la distribución de enfermedades, lesiones o acontecimientos relacionados con la salud Erradicar: eliminar por completo la enfermedad (Brucelosis Bovina) Especificidad: la especificidad de una prueba es definida como la rata de sujetos correctamente identificados sin la enfermedad en relación con todos los individuos muestreadas sin la enfermedad Fagocitosis: consumo y metabolismo microorganismos y fragmentos celulares

material

articulado

como

Fisiopatologia: estudia las funciones en el estado de la enfermedad y las modificaciones ocasionadas por la enfermedad Ganaderia: es una actividad económica de origen muy antiguo que consiste en la crianza de animales para su aprovechamiento Hato: hacienda de campo destinada a la cria de toda clase de ganado, y principalmente del mayor ICA: Instituto Colombiano Agropecuario Infeccion: una infección refiere a la colonización que especies exteriores realizan en un organismo que en términos médicos se denomina hospedador Laboratorio: es un lugar que se encuentra equipado con los medios necesarios para llevar a cabo investigaciones, experimentos o trabajos de carácter científico o técnico Mecanismo de transmisión: es el mecanismo por el cual el microorganismo pasa de un hospedero o reservorio en un nuevo hospedero

Orquitis: inflamación de uno o ambos testículos Prevalencia: es la porcion de individuos de un grupo o población que presenta una característica o evento determinado en un momento o periodo de tiempo determinado Prueba diagnostica: análisis químico o biológico de muestras o especímenes realizado en el laboratorio con recursos humanos y tecnonologicos idóneos para su procesamiento; están dirigidas al apoyo en la identificación, tratamiento, prevención, control o investigaion de las enfermedades en animales RB51: vacuna elaborada con microorganismos Reservorio: se llama a aquel organismo que alberga otro en su interior o lo porta sobre si Rosa de Bengala: tetracloroeritrocina

colorante

nombre

químico

dicloroeritrocina

Sensibilidad: la sensibilidad de una prueba es definida como la porción de sujetos con la enfermedad correctamente identificados como positivos entre la totalidad de individuos que fueron muestreadas con la enfermedad Serologia: es un examen de sangre utilizado para detectar presencia de anticuerpos contra un microorganismo. Ciertos microorganismos (antígenos) estimulan al cuerpo para que produzca anticuerpos durante una infección activa Vacunacion: designa la inmunización efectiva de animales susceptibles mediante la administración, según las instrucciones del fabricante y, si procede, conforme a lo estipulado por el Manual Terrestre, de una vacuna que contiene antígenos apropiados contra la enfermedad que se desea controlar Zoonosis: son las enfermedades cuyos agentes causales se transmiten de los animales vertebrados a los seres humanos

TABLA DE CONTENIDO

INTRODUCCION

1.PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. PREGUNTA DE INVESTIGACION

2. OBJETIVOS

2.1. OBJETIVO GENERAL

2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS

3. JUSTIFICACION

4. HIPOTESIS

5. MARCO DE REFERENCIA

5.1. ESTADO DEL ARTE

5.2. MARCO TEORICO

5.2.1. Historia

5.2.2.Distribucion geográfica

5.2.3. Etiología

5.2.4. Epidemiologia

5.2.5. Fuente de infección

5.2.6. Transmisión

5.2.7. Patogenia

5.2.8. Manifestaciones clínicas

5.2.9. Diagnostico

5.2.10. Tratamiento

5.2.11. Prevención y control

5.3. MARCO GEOGRAFICO

5.3.1. Limites del municipio

5.4. MARCO LEGAL

5.4.1. resolución 840 de 2011

6. METODOLOGIA

6.1. TIPO DE ESTUDIO

6.2. DISEÑO EXPERIMENTAL

6.2.1. Universo, Población y muestras

6.2.2. DISEÑO METODOLOGICO

6.2.3. Diseño o análisis estadístico

7. ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS

7.1. RESULTADOS

7.2. ANALISIS Y DISCUSIÓN

IMPACTO

RECOMENDACIONES

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFIA

ANEXOS

LISTA DE TABLAS

Tabla1 Determinacion de la poblacion de estudio

Tabla 2. Relación de la prevalencia de brucelosis bovina en el municipio de Zetaquira (Boyacá) con respecto a la variable vereda.

Tabla 3. Porcentaje de la variable vereda con respecto a la constante de variación en la prevalencia de brucella Abortus en el municipio de Zetaquira (Boyacá)

Tabla 4. De contingencia de Prevalencia de Brucella Abortus con respecto a la asistencia técnica por veredas

Tabla 5. De contingencia de Prevalencia de Brucella Abortus con respecto a la asistencia técnica por fincas

Tabla 6. Análisis de la Prevalencia de Brucella Abortus por fincas en las veredas de Hormigas, Juracambita Carbonela y la Esperanza.

LISTA DE GRAFICOS

Grafico 1.

Porcentaje de resultados de la prevalencia de brucelosis bovina en el municipio de Zetaquira (Boyacá)

Grafico 2.

Porcentaje de positivos y negativos según la vereda en relación a la población total muestread

Grafico 3. Análisis de Gradiente

60 62

INTRODUCCION

La brucelosis es una enfermedad que se mantiene como una de las zoonosis cuya incidencia y prevalencia varían de un país a otro

Afecta la sanidad,

la producción y además tiene una importante repercusión

económica en el comercio internacional de animales y productos. Ocasiona significativas pérdidas en la producción pecuaria debido a que provoca abortos, metritis, infertilidad, nacimiento de animales débiles y esterilidad en machos Por otro lado, constituye un importante problema para la salud pública ya que la mayoría de las bacterias del género son patógenas para el hombre quien adquiere la infección por el consumo de leche no pasteurizada y sus derivados, o por el contacto con material infeccioso.

B. Abortus es una bacteria Gram negativa con un lipopolisacarido (LPS) fuertemente inmunodominante, el que junto con la capacidad de sobrevivir en el interior de células fagociticas constituyen sus principales factores de virulencia (Blasco J. 2002).

En el ganado bovino la bacteria se ubica en la placenta y órganos reproductores por su afinidad por el eritrol. La respuesta inmune frente a B. abortus, patógeno intracelular facultativo, depende principalmente de la activación de la inmunidad mediada por células, que secretan interferon gama (INF-y), citoquina que estimula tanto la actividad bactericida de macrófagos como la actividad citotoxica de los linfocitos T CD8+. Estos últimos capaces de destruir células infectadas con Brucella (Arestegui M; et al, 2007)

Las zonas de mayor prevalencia de la enfermedad en animales corresponden a la región del Mediterraneo, Asia Occidental y algunas partes de Africa y America

Latina, principalmente, en Mexico, en Brasil y en Colombia (Rodriguez et al, 2005; Neta et al. 2009)

Según informes de sanidad animal del Instituto Colombiano Agropecuario ICA entre 2000 y 2006 la prevalencia de brucelosis en Colombia alcanzo cifras hasta del 7%, en animales examinados y del 27%, en predios.

Al ser el Departamento de Boyacá una de las fuentes lecheras más importantes del centro del país, se hace necesario llevar a cabo estudios que contribuyan a conocer el estado real de la prevalencia de esta enfermedad.

El presente estudio permitirá evaluar la prevalencia de Brucella abortus

hembras bovinas mayores de 24 meses en el municipio de Zetaquira, Boyaca, el cual pretende información acerca de la cantidad de animales afectados por la enfermedad con el fin de informar a sus propietarios y a las autoridades sanitarias municipales, adicionalmente, generar el mapa epidemiológico del departamento frente a la brucelosis bovina, y de esta manera conocer la información proveniente del municipio de Zetaquira boyaca sobre la prevalencia de esta enfermedad, mas aun si se tiene en cuenta que el gobierno nacional cuenta con un programa de erradicación que se debe aplicar en todo el país y al cual podríamos incluir este municipio.

1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La brucelosis es una enfermedad que genera un alto grado de dificultades en la comercialización tanto de los animales como de sus subproductos, lo cual afecta seriamente el desarrollo social y económico de los productores; así mismo es un problema de salud pública debido al contagio que puede llegar a tener el humano debido a su carácter zoonotico, “siendo una enfermedad

de control oficial y

declaración obligatoria”. Es una enfermedad que puede estar presente en las ganaderías del municipio, sin que los ganaderos se percaten, por su curso asintomático o presencia de sintomatología difusa reportada por los encargados de la ganadería.

Los porcentajes de presencia de esta enfermedad en el país son alarmantes, el 7% del total de la población bovina del país se encuentra infectada y aproximadamente el 65% de las vacas infectadas tienen mayor probabilidad de abortar durante su vida reproductiva (Samartino L, 2008). Cuando el aborto no se presenta y la gestación llega a su término con frecuencia la cría es débil y el animal recién nacido sufre neumonía y enteritis, lo cual retrasa su crecimiento o es causa de muerte.

Existen reportes por parte de Médicos Veterinarios de la región objeto de estudio en los cuales comunican que se presenta una alta tasa de incidencia de abortos de tipo espontaneo, en hembras con buena condición corporal y por lo general entre los 5 y 8 meses de gestación y que después es muy difícil recuperarlas para la producción afectando significativamente su economía. Teniendo en cuenta que la ganadería es una de las actividades más importantes de la región se hace necesaria la realización de estudios que permitan conocer la prevalencia de esta enfermedad en el municipio erradicación.

para instaurar planes de prevención, control y

1.1.

驴Qu茅

PREGUNTA DE INVESTIGACION

proporci贸n de la poblaci贸n de hembras bovinas mayores de 24

meses son reactores positivos a BrucellaAbortus?

2. OBJETIVOS

2.1.

OBJETIVOGENERAL

Determinar la prevalencia de Brucella Abortus en hembras bovinas mayores de 24 meses de edad en el municipio de Zetaquira, Boyacá, mediante la prueba de aglutinación en placa Rosa Bengala

2.2.

OBJETIVOS ESPECIFICOS



Determinar la cantidad de hembras reactores positivas a Brucella Abortus



Identificar la vereda con mayor prevalencia de Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira Boyacá



Relacionar la prevalencia hallada con la condiciones de manejo ambiental de los animales que resulten positivos a la bacteria Brucella Abortus.



Dar a conocer medidas de prevención y control de dicha enfermedad en la zona objeto de estudio

3. JUSTIFICACION

La brucelosis es una de las enfermedades infecciosas que causa más pérdidas económicas en las explotaciones lecheras del país, por eso se hace necesario conocer información de esta enfermedad.

En el municipio de zetaquira no existen estudios publicados sobre esta zoonosis y es de gran importancia realizar esta investigación ya que aportan conocimiento sobre el estado actual de esta enfermedad, y en los hatos pueden ser tomados en cuenta al momento de evaluar la receptividad de los productores de la región a planes nacionales de erradicación.

Igualmente se debe identificar la población en riesgo, que son los las personas que se encuentran en contacto con los animales portadores de la enfermedad o aquellas personas que sin saberlo consumen los productos contaminados derivados de la explotación bovina y por lo tanto pueden contraerla, lo cual puede traer complicaciones graves para la comunidad. Es necesario que la comunidad y los productores

se enteren que existe una prueba diagnóstica rápida, fácil y

relativamente económica mediante la cual se puede conocer el estado de infección del ganado y así poder tomar las medidas apropiadas para ejercer un control efectivo.

Entre los animales, la infección se trasmite fácilmente, mediante la trasmisión venérea o por ingesta de tejidos infectados o leche, debido a esto es indispensable identificar los animales que se encuentran infectados para impedir la diseminación de la enfermedad e ir obteniendo hatos libres de Brucella abortus.

4. HIPOTESIS

Ho= no existen reactores positivas a Brucella Abortus en las hembras bovinas mayores de 24 meses de edad Hi=

existen reactores positivas a Brucella Abortus en las hembras bovinas

mayores de 24 meses de edad.

5. MARCO DE REFERENCIA

5.1 ESTADO DEL ARTE

La Brucelosis Bovina es una enfermedad infecciosa limitante del desarrollo ganadero. Se encuentra ubicada en la lista B de la OIE donde se enumeran enfermedades transmisibles que se consideran importantes desde el punto de vista socioeconómico y/o sanitario a nivel nacional y cuyas repercusiones en el comercio internacional de animales y productos de origen animal son considerables (Mederos et al. 1981 y OIE, 2003).

Aunque la Brucelosis Bovina lleva más de un siglo de descubierta se encuentra distribuida en todo el mundo, algunos países muestran una mejor situación sanitaria comparados con otros e incluso se ha erradicado de algunas regiones como los países escandinavos por solo citar un ejemplo (Blood et al. 1982).

El curso de la Brucelosis en la historia de la humanidad ha sido tratado por varios autores,quedando muy bien definido. Bräwer y Lehnent entre 1878 a 1880 determinaron el carácter infeccioso de los abortos en bovinos. Bruce en 1887 señaló que la Fiebre de Malta del hombre la producía una pequeña bacteria, cuando logra aislar por vez primera el agente etiológico al cual llamó Micrococcusmelitensis (García et al. 1988; Bofill et al. 1996).

Bang y Stribolt en 1896 lograron comprobar que el aborto infeccioso en las vacas, lo causaba una bacteria que denominaron — Bacillusinfectiosi—. En 1897 se produce un importantísimo avance en el diagnóstico serológico de la enfermedad una vez que Wright ySmith refieren las aglutinaciones específicas en sueros sanguíneos de los enfermos. Zammiten 1905 informa que las cabras transmiten la enfermedad al hombre — surge el concepto de zoonosis— a partir del consumo de la leche infectada. Traum en 1914 pone al descubierto la etiología del aborto

epizoótico del cerdo. Evans en 1918 comprueba el íntimo parentesco entre el Micrococcusmelitensis y el Bacillusabortus, estos resultados junto con los de Meyery Shaw en 1920 permitió agrupar a estos microorganismos en un solo género bacteriano —Brucella— y denominarlos Brucella melitensis y Brucella Abortus (Benítez, 1979) . Se conocen seis especies con sus correspondientes biotipos. Recientemente se produjo unaislamiento de una cepa de mamíferos marinos (OIE, 2000; EN COLOMBIA, 2003).

5.2 MARCO TEÓRICO

Es una enfermedad infecciosa, bacteriana de curso crónico que afecta a bovinos, equinos, ovinos, caprinos y caninos, es causada por Brucella Abortus y se caracteriza por aborto en la hembra y orquitis e infección de las glándulas sexuales en el macho. La bacteria es gram negativa. Se instala en células del sistema inmunológico

En lotes donde la enfermedad es endémica el animal afectado aborta una vez. Después de la exposición y las gestaciones, los períodos de lactancia subsiguientes son aparentemente normales. Las bacterias se encuentran en el útero durante la preñez, y el microorganismo es excretado en la leche y en descargas uterinas.

Las bacterias pueden entrar en el cuerpo a través de las membranas mucosas, las conjuntivas y hasta a través de la piel.

La exposición a la luz solar directa destruye el microorganismo en unas pocas horas.

En las hembras el aborto es la manifestación más obvia. También puede haber producción de mortinatos, placenta retenida y menor producción de leche.

En los machos están afectados las vesículas seminales, epidídimos y testículos. Las bacterias acompañan al semen.

5.2.1 Historia

En 1567 se tuvo noticias de la brucelosis en Inglaterra como causante de aborto. En 1861 Marston descubrió los síntomas de la enfermedad en el hombre. El nombre del agente causal fue dado en honor de Sir David Bruce, quien aisló el germen en 1886, de soldados enfermos en la isla de Malta en el Mediterrraneo, por esta razón la enfermedad en el hombre se llama Fiebre de Malta o del Mediterraneo. En 1894 Wright y Semple descubrieron la prueba de aglutinación. Bang en 1897 aisló el germen de fetos abortados y denomino el agente causal Brucella abortus. En 1905 Zammit confirmo que el germen es transmitido de la cabra al hombre a través de la leche infectada (FRASER, Clarence M, 1993).

En Colombia la enfermedad se conoce desde 1924 con muestras de suero bovino, procedentes del departamento de Cundinamarca y que enviadas a los EE.UU. Fueron diagnosticadas como positivas a Brucella Abortus. El germen fue aislado por el instituto Samper Martinez en 1927. En 1928 se hizo el primer diagnostico por sero-aglutinacion. En la actualidad todo el país se encuentra infectado y como el mayor potencial en la industria ganadera es la especie bovina, se puede concluir que la Brucella más frecuente en nuestro medio es la Brucella Abortus (THRUSFIELD, M 1990)

5.2.2 Distribución geográfica

La brucelosis tiene una distribución geográfica limitada, siendo un problema importante en el Mediterráneo, el oeste de Asia y algunas zonas de África y Latinoamérica, especialmente en países con bajos recursos económicos (Corbel 1997, Moreno y Moriyón 2002).

Stableforth en 1993 plantea que los estimados reales de la prevalencia de Brucelosis en diferentes países, son muy difíciles de establecer, por no ser notificada la enfermedad debidamente; según este mismo autor la infección por Brucella Abortus es del 10 al 30% en muchos países europeos, y resultados similares se han obtenido también en algunos países de América del sur. En el mundo la infección animal por Brucella Abortus sigue siendo la más frecuente a pesar de la vacunación masiva (Samartino 2003).

5.2.3 Etiología o Agente causal. Se trata de un coco bacilo, aeróbico, Gram Negativo, intracelular, facultativo, capaz de multiplicarse y sobrevivir en una variedad de células del huésped, en particular, las células fagociticas o macrófagos (Blasco, J 2002).

Existen 7 especies, Brucella Abortus que infecta bovinos, caninos y al hombre, Brucella Mellitensis que infecta cabras, bovinos, caninos y al hombre, Brucella Cannis que infecta a canidos y al hombre, Brucella Ovis que infecta ovinos, Brucella Suis que infecta cerdos, caninos y al hombre, Brucella maris que infecta mamíferos marinos, Brucella Neotomae que infecta roedores. (DURAN F, 2006). o Poder infectivo. Es probable que el comienzo de la infección por Brucella depende de la magnitud de la dosis de exposición, virulencia del

microorganismo y de la resistencia natural del animal a la Brucella. La resistencia a la infección se basa en la capacidad del hospedador para prevenir el establecimiento de la infección a nivel de las mucosas, por destrucción del organismo invasor. La Brucella invasora usualmente se localiza en los linfonodulos drenantes del sitio de invasión, lo que resulta en hiperplasia del linfonodulo y del tejido retículo endotelial, acompañado por un infiltrado de células de la inflamación. Si la bacteria sobrevive a esta primera barrera de defensas, provoca una infección local, seguido por la diseminación a través de la sangre. Durante la fase de bacteremia (la cual puede durar 2-8 semanas) los huesos, articulaciones, ojos y cerebro pueden ser infectados, aunque la bacteria

puede ser aislada más

frecuentemente en los linfonodulos supramamarios, leche, linfonodulos iliacos, bazo y útero (Enright, F, Samartino, L, 2000). o Poder antigénico. Es alta por su localización en linfonodulos drenantes del sitio de invasión, lo que resulta en hiperplasia del linfonodulo y del tejido reticuloendotelial, acompañado de un infiltrado de células de la inflamación (FRASER, Clarence M. 1993) o Reservorio. Rumiantes salvajes como lo son los alces, búfalos, yak, caribú, jabalí, ciervos, zorros, liebres, roedores, aves de corral y el ganado vacuno, porcino, caprino y ovino (López A, Contreras A, 2004). o Puerta de salida. Placenta, laceraciones en la piel, secreción vaginalmucosa oral, fetos Abortados, Glándula Mamaria, Leche de animales Infectados, Orina y Heces, Sangre, Semen, Embriones Infectados, garrapatas (López A, Contreras A, 2004). o Hospedero susceptible. Principalmente el bovino causando aborto, además pueden presentarse casos en ovinos, porcinos, caprinos, equinos.

o Variables del hospedero susceptible: Edad: en la etapa de 3 a 8 meses de edad el animal tiene gran susceptibilidad Sexo: la hembra con mayor frecuencia que los machos Raza: tanto Bos Indicus con Bos Taurus pueden verse afectados pero son estos últimos quienes por el bajo nivel de inmunidad que presenta hacia este microorganismo con gran predilección a ganglios gestantes o útero activo en bovinos de producción lechera principalmente (López A, Contreras A, 2004).

5.2.4 Epidemiologia

Es una enfermedad importantes

de distribución mundial, la incidencia y prevalencia tienen

variaciones

geográficas.

Las

zonas

mayor

prevalencia

corresponden a la región del Mediterráneo, Asia occidental, algunas partes de África y América donde la mayoría de sus países tienen la enfermedad. Las especies más difundidas son B. melitensis seguida de B. abortus y B. suis.

La forma principal de contagio es por vía digestiva, esta se produce cuando los animales lamen fetos abortados, terneros recién nacidos y/o los genitales de otros animales que excretan gran cantidad de bacterias junto con los tejidos y secreciones de abortos, lo que produce una infección

masiva de bacterias,

además contaminando de esta forma el suelo, los corrales, el material de las camas (cascarillas, paja, aserrín), las fuentes de agua, la Brucella es capaz de sobrevivir en el medio ambiente por largos periodos de tiempo. También es importante la ingestión de alimentos y bebidas contaminadas con secreciones vaginales y leche de hembras enfermas (Zaragoza, 1990).

5.2.5 Fuente de infección La fuente primaria de infección está representada por las hembras grávidas que, al abortar o parir, expulsan grandes cantidades de Brucellas con el feto, el liquido

amniótico y las membranas fetales. También pueden difundir la enfermedad las hembras que, poco después de abortar, eliminan Brucellas con la secreción vaginal, y vacas que al parecer sanas, segregan leche que contienen Brucellas. En menor grado pueden contribuir a la contaminación del campo las materias fecales de terneros que se alimentan de leche contaminada, ya que no todas las Brucellas se destruyen en el tracto digestivo. Los toros sin infección no la contraen por cubrir a vacas infectadas, pero sí la tienen, pueden infectar a estas, aunque muy raras veces. En las demás especies ocurre en forma similar (Lucero et al, 2008; Benavides 1991).

Las fuentes secundarias más importantes desde el punto de vista práctico lo constituyen las membranas fetales, el líquido amniótico y el feto infectado, pues contienen cantidades enormes de Brucella y pueden infectar la cama y el suelo de los establos, y el agua de bebida. A la infección de los establos puede contribuir también

la leche, pues, aproximadamente la mitad de las vacas infectadas,

después de abortar o parir, eliminan Brucella con la leche durante semanas, meses y años; sobre todo en aquellas salas de ordeño donde la higiene es muy deficiente y que al ordeñar, se dejan caer al piso los primeros chorros de leche (despunte). Algunos planteamientos hechos sugieren que puede eliminarse la Brucella por la orina, pero no puede fijarse de antemano si tal orina contribuye a la difusión de la infección y hasta qué punto (Gómez, 1993; Aldari, 1992; Salgado 1991).

5.2.6 Transmisión

La vía de ingreso más importante es el tracto gastrointestinal por ingestión de pastos, forrajes y aguas contaminadas. Las vacas tiene además la costumbre de lamer membranas fetales, fetos y terneros recién nacidos, que cuando contienen todos ellos gran número de Brucella constituyen una fuente de infección muy importante (Benítez, 1979).

El instinto de las vacas de lamer los órganos genitales de otras vacas contribuye también a la transmisión de la infección, sin embargo algunos autores consideran que el contagio por vía cutánea tiene por lo menos, la misma importancia, por ejemplo: se pueden producir infecciones mediante las camas infectadas, cuando hay lesiones en las tetillas o en los extremos de los miembros o en el espacio interdigital que faciliten la penetración del agente patógeno en capas profundas de la piel, al ordeñar, quizás puedan introducir Brucella en la piel de los pezones las manos humedecidas con leche infectada.

La vía vaginal fue utilizada por Bang y otros para reproducir experimentalmente la infección según los experimentos realizados, al parecer se necesitan un gran número de gérmenes (sin precisar cifras) para infectar una vaca por esta vía (Rodríguez Y, et al, 2005).

La vía intrauterina que se emplea en la inseminación artificial es muy importante en la transmisión de la infección. En ambientes cerrados es probable que la infección se transmita por aerosoles. La vía aerogena de penetración ha sido demostrada experimentalmente. La infección artificial se consigue a través de la conjuntiva tras la inoculación de Brucella en ese sitio. La infección parece aumentar a medida que se cerca la madurez sexual, y es grande asimismo en los animales que han alcanzado y no han padecido antes la infección (Radostits O., Gay, D, 2002).

La sangre de los terneros recién nacidos de vacas infectadas no contienen anticuerpos, aunque estos son ingeridos con la leche calostral. Los anticuerpos se demuestran en la sangre después de seis meses. Se ha determinado que aproximadamente el 65% de las vacas infectadas abortan; de estas, el 65% abortan solo una vez, y el 23%, dos veces. Un porcentaje mucho más pequeño abortan más de dos veces. Cuando el aborto no se presenta y la preñez llega a

término, a menudo la críaestá débil y el animal recién nacido sufre neumonía y enteritis, lo cual retrasa seriamente su desarrollo. Se estima que del 40 a 50% de las vacas afectadas tienen alterada su capacidad reproductora, como resultado de la enfermedad (Rodostits O., Gay, d, 2002).

Prevención y control de la brucelosis. No hay duda de que la prevención por el sistema de vacunación periódica de todas las terneras con la c19 ofrece la mejor protección, de la enfermedad (FRASER, M. 1993).

Se considera una enfermedad incurable 

Estrategia de control o Vacunación (hembras entre 3 y 8 meses de edad) o Detección y descarte progresivo de los animales infectados o Vigilar entrada y salida de animales



Bioseguridad

o Brucella Abortus Cepa 19: Vacuna viva liofilizada para reconstruir con diluyente estéril. Para hembras entre 3 y 8 meses DOSIS: 2ml VIA: subcutánea (Lopez-Goñi I., ET AL, 2002) o Brucella Abortus Cepa RB-51: vacuna viva, para reconstruir con diluyente estéril. Puede usarse en hembras de 3 a 8 meses y para revacunar hembras mayores de 15 meses. Dosis: 2ml vía: subcutánea o Erradicación: la brucelosis ha sido eficazmente erradicada en muchos países

entre

ellos

reino

unido.

Suecia,

Noruega,

Checoslovaquia, e Irlanda (Argimon J. y .Jiménez . 2004)

Finlandia,



Precauciones: poner el máximo cuidado en la manipulación y eliminación de los fetos abortados, membranas fetales y vertidos tanto en interés de la salud humana como para impedir la difusión de la enfermedad entre los vacunos, conviene que un

veterinario examine la causa de cualquier

aborto, ya que puede darse el caso de que la vaca infectada haya gestado un ternero a termino completo. Los perros de granja infectados también difunden la infección (Argimon J. y J. Jiménez. 2004). 

Vacunación:

o Dos ciclos en el año, obligatorios en todo el territorio nacional o Hembras bovinas y bufalinas de 3 a 8 meses de edad o Vacunas Cepa 19 o RB51 registradas y aprobadas por el ICA o Se prohíbe vacunar hembras mayores de 8 meses con vacuna Cepa 19, únicamente con Cepa RB51 y con autorización del ICA o Se prohíbe vacunar Machos de cualquier edad o Se pueden vacunar hembras mayores de 15 meses, con autorización y vacuna Cepa RB51 o La vacunación será registrada en el RUV (Registro Único de Vacunación), junto con la vacunación contra fiebre Aftosa. El ICA es el responsablede llevar los registros o La comercialización y aplicación de la vacuna realizada por las organizaciones ganaderas autorizadas (ICA, 2010 Grupo control y erradicación de riesgos zoosanitarios)

5.2.7 Patogenia

La mayoría de los animales se infectan directamente a través de la mucosa oro nasal, por ingestión de alimentos contaminados o por inhalación de polvo de los establos con microorganismos que los animales han secretado con la leche o los exudados vaginales después del aborto (Rodríguez y col 2001).

B. abortus, además de infectar al ganado bovino, puede infectar a otras especies como búfalos, bisontes, alces, jabalíes, zorros, renos, camellos y animales marinos (Mandell 1995, Cloeckaert y col 2000). Inmediatamente después de la penetración e independientemente de la vía de entrada, las bacterias son transportadas, libres o en el interior de células fagocíticas, hasta los ganglios linfáticos más próximos al lugar de entrada. Si las bacterias no son destruidas, pueden sobrevivir largos períodos de tiempo en el interior de las células fagocíticas (Ilarmon y col 1988).

Los ganglios linfáticos responden a la agresión por medio de una hiperplasia reticuloendotelial y linfática, que puede tardar varias semanas en producirse y persistir durante meses. En los fagosomas de los macrófagos, Brucella sobrevive y se multiplica, inhibiendo la fusión del fagosoma que contiene la bacteria y el lisosoma, mediante la acidificación rápida del medio (Pizarro-Cerda y col 1998, Celli y col 2003, Ko y Splitter 2003).

En células fagocíticas no profesionales, la internalización de B. Abortus se asocia al dominio extracelular de la proteína tirosina quinasa y la activación de una serie de pequeñas GTPasas (Guzmán- Berri y col 2001), tendiendo a localizarse dentro del retículo endoplásmico rugoso (Corbel 1997).

La especial afinidad que estas bacterias tienen por el endometrio grávido y por la placenta fetal de bovinos hace que estas bacterias también proliferen extensamente en trofoblastos de la placenta que rodean al feto (Meador y Deyoe 1989), lo que condiciona que la principal manifestación clínica de la infección aguda en los animales sea el aborto durante el último tercio de la gestación, o el nacimiento de animales prematuros poco viables (Ficht 2003). En bovinos machos provoca alteraciones testiculares y una disminución de la fertilidad, acompañadas algunas veces por abscesos en testículos y epidídimo (Hausler y Koontz 1974).

En humanos la infección se produce a través del contacto con secreciones de animales infectados o consumo de leche cruda o queso contaminado. El consumo de carne no es una fuente de contaminación (Mandell 1995). Brucella puede ingresar al organismo a través de lesiones de la piel, mientras se manipulan animales infectados o sus desechos (Vilissova 2002).

5.2.8 Manifestaciones clínicas o Signos clínicos en bovinos: o Aborto en el último tercio de la gestación o Nacimiento de muertos a termino o Nacimiento de prematuros o débiles o Retención de placenta: metritis o Machos: inflamación de vesículas seminales, ampollas y epidídimos o Signos clínicos en humanos: o Sudoración profusa o Dolor muscular o Insomnio o Fiebre continua, intermitente o irregular o Depresión o Impotencia sexual o Dolor de cabeza o Debilidad y fatiga pronunciadas o Irritabilidad o Nerviosismo o Dolor de huesos y articulaciones o Hígado, bazo y ganglios linfáticos aumentados de tamaño (Caron, E., et al, 1996). o Pérdidas económicas ocasionadas por brucelosis. o Disminuye la producción de leche

o Perdidas de crías o Repetición de servicios o Perdidas de lactancias o Eliminación de toros y vacas o Elevados costos de la asistencia técnica y tratamientos efectivos

5.2.9 Diagnostico

El diagnostico definitivo de la infección, se establece aislando la bacteria en cultivos de sangre, medula ósea u otros tejidos. Los métodos serológicos solo aportan un diagnostico presuntivo. o Métodos directos: Se basan en evidenciar la presencia de la bacteria o sus componentes en los tejidos de los animales o el hombre. El diagnostico definitivo requiere el aislamiento de la bacteria, este procedimiento puede tardar entre 7 y 30 días. También se utiliza la reacción en Cadena de la Polimerasa PCR pero no todos los países la utilizan o Métodos indirectos:Las dificultades propias de la implementación del aislamiento de Brucella a partir de distintos tejidos hacen que los métodos de diagnostico indirectos sean el recurso diagnostico más utilizado o Existen numerosas pruebas serológicas que están diseñadas para detectar no solo el mayor número de individuos infectados sino al mismo tiempo diferenciar entre infectados y vacunados, así como detectar reacciones cruzadas (Segura J. C. 2005)

Dentro de las pruebas serológicas utilizadas en el diagnostico tenemos: 1. Prueba de aglutinación con y sin 2-mercaptoetanol 2. Prueba de Rosa de Bengala

3. Ring Test 4. Fijación de Complemento 5. Elisa indirecta 6. Elisa de Competencia o Competitiva 7. Fluorescencia Polarizada

o Interpretación de las pruebas diagnosticas

A la hora de interpretar resultados de las pruebas diagnosticas se debe tener en cuenta varios parámetros, que de no analizarlos detenidamente pueden generar confusión en especial cuando se vacuna con Cepa 19, algunos de estos son: edad del animal, edad de vacunación, cepa vacunal empleada, prueba diagnóstica empleada, parámetros reproductivos, clínica del animal y antecedentes epidemiológicos de la enfermedad en la finca, esto con el fin de realizar un análisis global del resultado o Elección de las pruebas diagnosticas

Para la elección de la prueba, se debe hacer un análisis de los factores de riesgo asociados a la enfermedad como tamaño del hato, densidad, manejo reproductivo, manejo de vacunas, tipo de explotación, antecedentes epidemiológicos y presencia de otros animales susceptibles, además de una alta sensibilidad y especificidad.

Cuando se desconoce el estatus epidemiológico y existe un mediano o alto grado de infección debemos realizar pruebas tamiz, que nos brinde una información general de la población como Rosa de Bengala, Elisa indirecta o Ring Test. Cuando existe un conocimiento real de los factores de riesgo, epidemiologia, predios con prevalencias bajas o que se encuentren libres

de la enfermedad, se debe realizar Elisa Competitiva, Fijación de complemento o fluorescencia polarizada (Acosta, M. 1999)

5.2.10 Tratamiento

A pesar de los extensos estudios realizados en los últimos 15 años, la terapia antibiótica optima para el tratamiento de la brucelosis esta aun en discusión debido a la fisiopatología de la enfermedad, relación hospederoparasito, efectividad y costo del tratamiento y el riesgo zoonotico, por lo anterior no se recomienda el tratamiento. Debido a que la localización de la Brucella es intracelular; para su tratamiento se requiere la asociación de más de un antimicrobiano por varias semanas, lo que resulta costoso a la hora de evaluar la relación costo-beneficio.

5.2.11 Prevención y control

Para la prevención de la brucelosis bovina, se utiliza como primera medida la vacunación de terneras entre los 3 y 8 meses, en nuestro país se encuentran disponibles las vacunas Cepa19 y RB51. Para vacunar terneras después de los 8 meses se debe hacer únicamente con Cepa 19 con el diagnostico serológico. Cabe anotar que la vacunación no es una medida curativa sino preventiva, y que existe la posibilidad que animales vacunados se infecten en hatos positivos. Como medida de control, únicamente deben ingresar animales negativos al hato o provenientes de fincas libres y se deben eliminar los animales positivos y los hijos de vacas confirmadas como positivas (Xolalpa C. 1999)

o Técnica Brucella por Rosa de Bengala

La realización de la técnica de rosa de bengala tiene como principal objetivo la detección de anticuerpos. Método que detecta anticuerpos aglutinantes empleando células de Brucella inactivadas, teñidas con rosa de bengala y resuspendidas en un tapón acido

El pH de la suspensión impide la aglutinación inespecífica de las bacterias, constituyendo así la especificidad de la prueba. En la reacción intervienen anticuerpos aglutinantes de las clases IgM e IgA. De la siguiente manera:

Dejar que los sueros controles, sueros diagnostico y el antígeno alcancen la temperatura del laboratorio (18ºC a 25ºC) antes de iniciar la prueba  Homogenizar las muestras de suero controles y diagnostico una vez equilibradas a temperatura ambiente, usando la centrifuga, la agitación debe llevarse a cabo hasta confirmar visualmente que las fases de crioglobulinas del fondo se hayan homogenizado con los componentes menos densos de los sueros.  Colocar 30 microlitros de los sueros controles positivos y negativos en los sitios de la placa previamente definidos e identificados para ello, y colocar los sueros problema en lugares sucesivos también identificados, el suero restante se almacena en un banco de sueros. En cada ciclo de montaje de la prueba incluir un máximo de 5 sueros si no se dispone de un mezclador múltiple y un máximo de 10 sueros por ciclo si se dispone de este.  Homogenizar el antígeno invirtiendo y girándolo con movimientos manuales suaves. El agitador de tubos no debe ser empleado para esta operación

 Añadir igual volumen de antígeno 30 microlitros sobre los 30 microlitros de suero. Mezclar el suero y el antígeno exhaustivamente con el mezclador o con palillos individuales  Llevar la placa a agitación de 20 ciclos por minuto, durante 4 minutos cronometrados si se dispone del agitador unidireccional. En caso contrario, hacer la agitación manual en círculos amplios, describiendo una órbita que permita la mezcla continua  Leer los resultados exactamente al final del periodo. Registrar de inmediato los resultados de cada suero en el formato correspondiente, formato de registro de resultados, lectura prueba de aglutinación antígeno Rosa de Bengala.  Desinfectar la placa al finalizar la prueba, sumergiéndola en una solución de hipoclorito de sodio en concentración de 5ppm durante 30 min  Lavar la placa con detergente neutro que incluya surfactantes anionicos y no iónicos, durante el tiempo recomendado por el fabricante. Enjuagar bien con agua corriente y por ultimo con agua destilada. Secar en horno o al ambiente

Positivo se presenta aglutinación fina con borde y fondo transparente o formación de grumos definidos

Negativo no se produce aglutinación, esto es de coloración rosada uniforme sin grumos de ninguna naturaleza y sin formación de borde (ICA 2010)

5.3. MARCO GEOGRAFICO Imagen1: Ubicación geográfica de Zetaquira en la región de Lengupa, Boyacá

El municipio de Zetaquira está ubicado en las estribaciones de la Cordillera Oriental, en la zona suroccidental del departamento de Boyacá. Es el primer Municipio de la región de Lengupá la cual está conformada por los Municipios de Miraflores, Zetaquira, San Eduardo, Páez y Campohermoso. El municipio de Zetaquira corresponde a las estribaciones de la cordillera Oriental con alturas desde de 1875 msnm hasta los 3600 msnm cuenta con territorios montañosos donde se destacan los altos de cerro negro, el páramo de coroneles, peñalaura, los indios, el fiscal, el alto de la vieja. Bañan sus suelos las aguas de los ríos Fueche, Mueche Rusa, a los que tributan numerosas quebradas y fuentes menores.

Zetaquira es un municipio colombiano ubicado en la provincia de Lengupá en el departamento de Boyacá. Está situado a 67 km de la ciudad de Tunja, capital del departamento. El municipio limita al norte con Pesca, al sur con Miraflores, al oriente con Berbeo, San Eduardo y Aquitania y al occidente con Ramiriquí y Chinavita.

5.3.1 Límites del municipio: El municipio limita al Oriente con el municipio de Zetaquira , San Eduardo y Aquitania, al Occidente con el municipio de Ramiriquí y Chinavita , al Norte con el municipio de Rondon ,Total y Pesca y al Sur con el municipio de Miraflores.

Extensión total: Tiene una extensión de 262 Kilómetros cuadrados Km2

Temperatura media: 18 Grados º C

Distancia de referencia: El Municipio de Zetaquira se localiza al sureste de Tunja (Capital del Departamento de Boyacá), a una distancia aproximada de 67 km. Sobre la carretera que conduce a Miraflores (Carretera del Progreso); está ubicada en el flanco oriental de la Cordillera

Economía Las actividades económicas predominantes del municipio son la agricultura y la ganadería, caracterizada por productores minifundistas, economía campesina de subsistencia, cultivos permanentes, anuales y transitorios. Los principales productos agrarios son el café, la caña de azúcar, el maíz, el plátano, la yuca, el fríjol, la arracacha, y frutales. Los productos pecuarios son ganado vacunos y porcinos. También se presentan actividades económicas menos intensivas como la piscicultura y la explotación de canteras. Los aspectos económicos en forma organizada agricultura (Fruticultura) y la ganadería constituyen las dos grandes fuentes de la economía del municipio, también

encontramos comercio, servicio bancario, y otras actividades menores. Más recientemente está la producción agrícola (la fruticultura de Granadilla, Lulo, Tomate de árbol, Uchuva, Pitahaya, Bananito, Mora y Tomate). Los anteriores productos se pretenden transportar en forma especializada a las exportadores de fruta y a los grandes almacenes de cadena en Bogotá, lo mismo ocurre con la ganadería que ha vendido en pie a Ramiriquí y a los frigoríficos de la capital del País. En el municipio funciona Entidades Financieras como el Banco Agrario de Colombia, el cual colabora con el desarrollo de microempresas (pequeña y mediana empresa) haciendo prestamos y apoyando algunos proyectos de la localidad; La Cooperativa de Ahorro y Crédito, este ente es propio del Municipio y cuya finalidad es la de hacer préstamos a todos sus clientes o socios.

5.4 MARCO LEGAL

5.4.1 RESOLUCION 840 DE 2011 Diario Oficial No. 47.987 de 18 de febrero DE 2011, Instituto Colombiano Agropecuario. Por medio de la cual se establecen medidas sanitarias para la prevención, el control y la erradicación de la brucelosis en las especies bovina, bufalina, caprina, ovina y porcina en Colombia.

La Gerente General del Instituto Colombiano Agropecuario (ICA), en el uso de sus facultades legales y en especial de las que le confiere el artículo 4° del Decreto 1840 de 1994, el artículo 4° del Decreto 3761 de 2009, y

CONSIDERANDO:

El Instituto Colombiano Agropecuario (ICA) es la entidad responsable de la sanidad agropecuaria en Colombia, encargada de coordinar las acciones relacionadas con los programas de prevención, control, erradicación y manejo de

plagas y enfermedades de los animales y de sus productos, de importancia cuarentenaria o de interés económico Nacional o local.

Es deber del ICA establecer, reglamentar, coordinar, supervisar y evaluar las acciones de prevención, control y erradicación de la brucelosis bovina en el territorio nacional.

La brucelosis bovina o aborto infeccioso es una enfermedad que afecta a diferentes especies animales y puede producir cuantiosas pérdidas económicas. Igualmente, es una zoonosis, ya que afecta al hombre en forma severa y es considerada como una enfermedad profesional.

En virtud de lo anterior,

RESUELVE:

Articulo 1°. Objeto. Establecer medidas sanitarias para la prevención, el control y la erradicación de la brucelosis en las especies bovina, bufalina, caprina, ovina y porcina en el territorio nacional.

Articulo 2°. Campo de aplicación. Los requisitos establecidos en la presente resolución serán aplicados a todas las personas naturales o jurídicas que requieran cumplir con el programa de brucelosis en las especies bovina, bufalina, caprina, ovina y porcina.

Articulo 3°. Definiciones. Para efectos de la presente resolución se adoptan las siguientes definiciones:

BRUCELOSIS. Enfermedad de naturaleza infecto-contagiosa conocida como aborto contagioso o infeccioso. El agente principal en el bovino es la bacteria

Brucella Abortus. El sigo predominante en hembras preñadas es el aborto, o bien el nacimiento prematuro o a termino de terneros muertos o débiles.

Se consideran otras especies animales susceptibles a brucelosis las especies bufalina, porcina, caprina, equina, canina, ovina y algunas silvestres como cervidas, zorros y mamíferos marinos.

LABORATORIO AUTORIZADO. Persona jurídica, oficial o particular, idónea y técnicamente competente que ejerce la actividad de diagnostico correspondiente a las pruebas serológicas de Rosa de Bengala en especies animales susceptibles a brucelosis o ELISA indirecta para el diagnostico de brucelosis bovina y cumple a conformidad con el reglamento y requisitos exigidos por el ICA.

LABORATORIO OFICIAL ICA. Establecimiento de la entidad en la cual se realizan procedimientos para análisis de especímenes biológicos de origen animal, como apoyo a los programas de prevención, control, erradicación, investigación aplicada, diagnostico, tratamiento, seguimiento y vigilancia de enfermedades animales o zoonosis.

ORGANISMO DE INSPECCION AUTORIZADO. Persona natural o jurídica, pública o privada reconocida por el ICA, que mediante la ejecución de actividades de campo e inspección directa, verifica el cumplimiento o no de los requisitos establecidos en las referencias normativas expedidas por el ICA, sobre la materia objeto de autorización. Estos organismos están conformados por Médicos Veterinarios o Médicos Veterinarios Zootecnistas.

PLANTA DE BENEFICIO ANIMAL. Todo establecimiento en donde se benefician las especies de animales que han sido declaradas como aptas para el consumo y que han sido registradas y autorizadas para este fin.

PERIODO DE INTERCICLO. Periodo intermedio entre los ciclos de vacunación contra brucelosis.

VACUNACION. Designa la inmunización efectiva de animales susceptibles mediante la administración según las instrucciones del fabricante, y si procede, conforme a lo estipulado por el Manual de Pruebas de Diagnostico y Vacunas para los Animales Terrestres de la OIE, de una vacuna que contiene antígenos apropiados contra la enfermedad que se desea controlar.

ZONA LIBRE. Designa una zona en la que la ausencia de la enfermedad considerada ha sido demostrada por el respeto de las condiciones prescritas por el Código Terrestre para el reconocimiento de zonas libres de la misma. En el interior y en los límites de la zona libre, los animales y productos de origen animal, así como el transporte de los mismos, son objeto de un control veterinario oficial. Articulo 4°. Vacunación. Se establecen 2 ciclos de vacunación anual obligatorios contra la brucelosis bovina, con vacunas registradas y aprobadas por el ICA (cepa 19 y cepa RB51).

Parágrafo 1°. Una vez terminado cada ciclo de brucelosis bovina, las cooperativas lecheras, plantas pasteurizadoras, plantas recolectoras y plantas productoras de lácteos

en el territorio nacional, deben exigir a sus proveedores la copia del

Registro Único de Vacunación (RUV), como requisito para la compra de leche, y enviar al ICA el listado de sus proveedores máximo treinta días después de terminado el ciclo. Parágrafo 2º. La Federación Colombiana de Ganaderos – Fondo Nacional del Ganado (Fedegan-FNG), será el responsable de la impresión de los Registros Únicos de Vacunación (RUV), así como de su distribución a las organizaciones ejecutoras de los ciclos de vacunación en el país y del reporte de la vacunación al ICA.

Articulo 5°. Distribución y aplicación de la vacuna. La distribución y la aplicación de la vacuna debe ser realizada por medio de las Organizaciones Ganaderas, Cooperativas y Organizaciones del Sector que formen parte de la infraestructura técnica y administrativa del Programa Nacional para la Erradicación de la Fiebre Aftosa establecida por Fedegan-FNG.

Parágrafo. En los casos en que la vacunación se vaya a realizar directamente por el titular de los animales, se debe contar con la asistencia técnica de un Médico Veterinario o Medico Veterinario Zootecnista con matricula profesional.

Articulo 6°. Vacunaciones estratégicas. Estas vacunaciones son realizadas en los casos en que se requiera el refuerzo de la inmunidad del hato con la Cepa RB51, previa autorización del ICA.

Parágrafo 1°. En el periodo de interciclo el interesado podrá adquirir, previa autorización del ICA, vacuna Cepa 19 o Cepa RB51 para terneras entre tres (3) y ocho (8) meses de edad que por razones justificadas no fueron vacunadas durante el ciclo, para lo cual debe solicitar el biológico a la Organización Ganadera, Cooperativa u Organización del Sector que forme parte de la infraestructura técnica y administrativa del Programa Nacional para la Erradicación de la Fiebre Aftosa establecida por Fedegan-FNG, quien estará obligada a suministrar el numero de dosis requeridas de forma oportuna.

Parágrafo 2°. Las vacunaciones adelantadas en el periodo de interciclo únicamente podrán ser realizadas por el ICA o por Médicos Veterinarios integrantes de los Organismos de inspección.

Articulo 7°. Sistemas de identificación. En todos los casos las terneras vacunadas contra la brucelosis bovina deben ser identificadas individualmente utilizando

cualquiera de las siguientes opciones y consignar dicha información en el Registro Único de Vacunación (RUV): Con la letra ―V‖ en el cachete derecho (región maseterica) por medio de marca fría con nitrógeno liquido o hierro candente, la cual será realizada por el titular o administrador de la ganadería con el apoyo de Fedegan.

Con sistemas de identificación individual como tatuaje, orejera, microchip o chapeta. Con una muesca con la letra ―V‖ realizada con un sacabocado en el borde medio externo de la oreja derecha y dos (2) cm de profundidad, inmediatamente después de aplicada la vacuna. Esta actividad será coordinada directamente por FedeganFNG quien informara al ICA y a los comités locales correspondientes de las zonas del país, en las cuales este sistema de identificación será usado. Esta identificación será realizada directamente por Fedegan.

Articulo 8°. Toma de muestras. Para que el diagnostico de la brucelosis sea reconocido oficialmente por el ICA, la toma de las muestras debe ser realizada por el área técnica del Instituto (auxiliares de campo y Médicos Veterinarios o Médicos Veterinarios Zootecnistas) o por Médicos Veterinarios o Médicos Veterinarios Zootecnistas de los Organismos de Inspección Autorizados, reservándose el ICA la facultad de repetir la toma de muestras cuando lo considere necesario.

Parágrafo. Los organismos de Inspección Autorizados podrán disponer de personal de apoyo exclusivamente para la toma de muestras de animales con destino de subastas, ferias comerciales y fincas que no se encuentren en proceso de certificación o recertificacion para ser declaradas libres de brucelosis.

Articulo 9°. Diagnostico de brucelosis. Las pruebas para el diagnostico de brucelosis serán realizadas en los laboratorios del ICA o en aquellos que se encuentren autorizados por el instituto.

Parágrafo 1°. Las agremiaciones o institutos del sector público o privado que tengan convenio de cooperación técnica o de autorización con el ICA, podrán adquirir de los representantes comerciales en el país, los reactivos de Elisa Indirecta, FPA y Elisa Competitiva registrados ante el ICA para el diagnostico de brucelosis la enfermedad y cancelaran al Instituto el valor del procedimiento por muestra según lo establecido en el Acuerdo que establece las tarifas para los servicios técnicos que presta la Institución

Parágrafo 2°. Los laboratorios autorizados por ICA para el diagnostico de brucelosis, deben utilizar reactivos para las pruebas de Rosa de Bengala y Elisa indirecta que se encuentren

registrados ante el ICA y establecer las tarifas

correspondientes por el servicio de procesamiento de las muestras.

Articulo 10°. Pruebas de diagnostico. Para el diagnostico oficial de brucelosis en animales, se utilizaran las siguientes pruebas:

Especie bovina: Aglutinación con antígeno Rosa de Bengala, Elisa indirecta en suero sanguíneo o en suero de leche, Fluorescencia Polarizada (FPA), Elisa Competitiva, Fijación de Complemento.

Especie bufalina, caprina, ovina, equina y porcina, para la detección de brucelosis debida a Brucella Abortus: Aglutinación con antígeno Rosa de Bengala, Fluorescencia Polarizada (FPA), Elisa Competitiva, Fijación de Complemento.

Parágrafo 1°. Las pruebas de Aglutinación con Rosa de Bengala, FPA, Fijación de Complemento y Elisa Indirecta en suero sanguíneo y suero de leche, serán empleadas como pruebas tamiz.

Los resultados emitidos por la prueba de Fluorescencia Polarizada (FPA) como sospechosos deben ser analizados por la prueba de ELISA Competitiva para diferenciar anticuerpos de infección de anticuerpos

vacunales o requieran de

cuarenta y cinco (45) días para un nuevo análisis por la FPA.

Parágrafo 2°. Los animales de cualquier especie que se encuentren castrados no requieren pruebas serológicas de brucelosis para ninguno de los propósitos definidos en la presente resolución.

Las hembras que aborten deben muestrearse mínimo 30 días posteriores de ocurrido el evento.

Articulo 11°. Validez de la prueba. Los resultados oficiales a brucelosis tendrán validez de 60 días calendario desde su expedición.

Articulo 12°. Exclusividad. Las pruebas de Elisa Competitiva y FPA para el diagnostico de brucelosis son de uso exclusivo del ICA y los reactivos utilizados para ellas solo pueden ser comercializados para el Instituto.

Articulo 13°. Certificación de fincas libres de brucelosis. Para certificar una finca como libre de brucelosis es necesario que la ganadería haya sido evaluada y verificada como negativa a esta enfermedad. Los ganaderos podrán optar por implementar uno de los siguientes procedimientos:

PARA BOVINOS:

Prueba en leche: Realizar tres (3) muestreos en leche con intervalo de 60 días entre uno y otro con resultados negativos a la prueba de Elisa Indirecta, realizada en muestra de leche por cada 15 vacas como máximo. Los machos enteros mayores de ocho (8) meses de edad que se encuentren en la finca deberán ser sometidos a una prueba serológica de Rosa de Bengala, FPA o Elisa Indirecta. La ganadería que resulte negativa en esta serie de muestreos tiene el beneficio de movilizar los animales a cualquier destino excepto a fincas y zonas libres de brucelosis por un término de 60 días calendario. Las ganaderías con resultados positivos en leche en cualquiera de los muestreos deben realizar un chequeo en suero sanguíneo aplicando la prueba de Elisa Indirecta o FPA a la totalidad de las hembras bovinas de las cuales se recolecto la muestra de leche. Para lograr la certificación como ―FINCA LIBRE DE BRUCELOSIS BOVINA‖, después de los 60 días de los muestreos iníciales, se debe realizar un análisis serológico con resultados negativos a la prueba de Elisa Indirecta o FPA en el 100% de las hembras mayores de veinticuatro (24) meses de edad y en los machos enteros mayores de ocho (8) meses de edad.

Dos pruebas en sueros sanguíneos: Realizar un chequeo a la totalidad de hembras bovinas y bufalinas mayores de veinticuatro (24)

meses de edad y

machos enteros de estas dos especies mayores de ocho (8) meses de edad. Para la especie bovina se utilizaran las pruebas de Rosa de Bengala, Elisa Indirecta o FPA, para la especie bufalina se utilizaran las pruebas de Rosa de Bengala o FPA, la ganadería que resulte negativa en este muestreo tiene el beneficio de movilizar los animales a cualquier destino excepto a fincas y zonas libres de brucelosis por un término de 120 días calendario. Después de los 120 días se debe realizar un muestreo a la totalidad de hembras bovinas y bufalinas mayores de veinticuatro (24) meses de edad y machos enteros mayores de ocho (8) meses

de edad de las dos especies. Para la especie bovina se utilizaran las pruebas de Elisa Indirecta o FPA. Para la especie bufalina se utilizaran las pruebas de Elisa Competitiva o FPA.

Tres pruebas en sueros sanguíneos: Obtener resultados negativos de dos (2) muestreos realizados con intervalo de cuatro /4) a seis (6) meses a las hembras bovinas y bufalinas mayores de veinticuatro (24) meses de edad y machos enteros mayores de ocho (8) meses de edad de las dos especies, a través de muestreos representativos de la población. Para la especie bovina se utilizaran las pruebas de Rosa de Bengala, Elisa Indirecta FPA. Para la especie bufalina se utilizaran las pruebas de Rosa de Bengala o FPA.

La ganadería que resulte negativa a esta serie de muestreos tiene el beneficio de movilizar los animales a cualquier destino excepto a fincas y zonas libres de brucelosis por un término de 120 días calendario.

Después de los 120 días se debe realizar un muestreo sanguíneo a la totalidad de hembras bovinas y bufalinas mayores de veinticuatro (24) meses de edad y machos enteros mayores de ocho (8) meses de edad de las dos especies. Para la especie bovina se utilizaran las pruebas de Elisa Indirecta o FPA. Para la especie bufalina se utilizaran las pruebas de Elisa Competitiva o FPA. Si la totalidad de animales de la finca resultan negativos, el ICA la certificara como ―FINCA LIBRE DE BRUCELOSIS BOVINA”.

Cuando se trate de ganaderías de ciclo completo (cría, levante y ceba) y que existan machos enteros para la ceba, se analizara una proporción de los mismos teniendo en cuenta la tabla que define el número de animales a muestrear para el procedimiento 1.3.1.3 del presente artículo.

Parágrafo 1°. El diagnostico definitivo de la situación de la brucelosis en una finca para efectos de certificación como libre de la enfermedad, sin importar las especies susceptibles evaluadas, se realizara de forma integral con base en criterios epidemiológicos y clínicos, apoyados con los resultados de laboratorio obtenidos en los laboratorios del ICA o autorizados por el mismo.

Parágrafo 2°. En las fincas cuyas ganaderías

se confirmen animales como

positivos a brucelosis, se deben implementar las acciones descritas en el artículo 18 de la presente Resolución, relacionado con el saneamiento de fincas afectadas por brucelosis; para lograr el certificado como Finca Libre de Brucelosis, es necesario obtener dos (2) resultados consecutivos negativos, con un intervalo de cuatro (4) a seis (6) meses a la totalidad de las hembras bovinas mayores de veinticuatro (24) meses de edad y a los machos enteros mayores de ocho (8) meses de edad, por las pruebas de Elisa Indirecta o FPA para los bovinos; y por la prueba de Elisa Competitiva o FPA para los búfalos.

Parágrafo 3°. A partir del 1° de enero de 2012, para la participación de ganados puros en ferias, exposiciones y remates de ganados, será necesario que los animales procedan de fincas certificadas como libres de brucelosis bovina.

Articulo 14. Vigencia del certificado. El certificado de finca libre de brucelosis para las especies bovina, bufalina, porcina, caprina y ovina, tendrá vigencia de un (1) año y se podrá solicitar su renovación treinta (30) días calendario antes de su vencimiento de acuerdo con los siguientes procedimientos:

Para Bovinos. El certificado se renovara aplicando de forma alterna, anual e indefinida los siguientes procedimientos:

Primer año: Realizar un muestreo a la totalidad de hembras bovinas y bufalinas mayores de veinticuatro (24) meses de edad y machos enteros de estas dos

especies mayores de ocho (8) meses de edad. Para la especie bovina se utilizaran las pruebas de Rosa de Bengala, Elisa Indirecta o FPA. Para la especie bufalina se utilizaran las pruebas de Rosa de Bengala o FPA.

Siguiente año: Cumpliendo con cualquiera de las siguientes opciones:

Presentar al ICA los resultados negativos en dos (2) muestreos realizados con la prueba de Elisa Indirecta en muestras de leche por cada quince (15) hembras bovinas como máximo, con intervalo de sesenta (60) días cada una. Si existen bufalinas en el predio mayores a veinticuatro (24) meses de edad y machos enteros mayores de ocho (8) meses de edad existentes en la finca, se requieren resultados serológicos negativos a la prueba de FPA o Elisa Competitiva.

Presentar al ICA los resultados negativos al 10% de la población total de hembras bovinas y bufalinas mayores de veinticuatro (24) meses de edad por la prueba de Elisa Indirecta o FPA para los bovinos; y de Elisa Competitiva o FPA para los búfalos.

Parágrafo 1°. En caso de presentarse abortos durante el tiempo de validez de la certificación, las hembras afectadas de cualquier especie deben

incluirse

obligatoriamente en el muestreo para la recertificacion.

Parágrafo 2°. En el evento de superar la fecha de vencimiento del certificado de finca libre de brucelosis, se deben iniciar nuevamente los trámites tendientes a su expedición como si fuera por primera vez.

Parágrafo 3°. Los animales donantes de semen, embriones u ovocitos deben presentar resultados negativos a brucelosis a las pruebas de FPA o Elisa Indirecta, con una vigencia no mayor a treinta días antes del ingreso al lugar de recolección.

Articulo 15. Movilización de animales. Los productores, comercializadores y transportadores que movilicen bovinos, bufalinos, ovinos, caprinos y porcinos, deben portar la Guía Sanitaria de Movilización Interna expedida por el ICA o por la entidad que esta delegue, indicando el tiempo autorizado de acuerdo con la distancia de la movilización.

Para obtener la Guía Sanitaria de Movilización Interna de animales, de acuerdo con su destino, se establecen los siguientes requisitos para brucelosis:

Hembras Bovinas y Bufalinas mayores a veinticuatro (24) meses de edad a cualquier destino: Tener el registro único de vacunación vigente contra brucelosis bovina e identificación de la misma.

Hembras Bovinas y Bufalinas mayores a veinticuatro (24) meses de edad y machos enteros para reproducción mayores de ocho (8) meses de edad incluyendo ganaderías de lidia con destino a:

Parágrafo 1°. Los animales de fincas certificadas como libres de brucelosis no requieren resultados negativos a brucelosis para su movilización a cualquier destino del país; así mismo, los animales que tengan como destino las plantas de beneficio, los machos enteros para ceba y los que participen en subastas de ganado con destino inmediato a plantas de beneficio.

Parágrafo 2°. Para la movilización de toros de lidia a muerte no se exige resultado negativo a brucelosis; sin embargo, si se llegasen a presentar indultos, los toros para ser empleados como sementales, deben ser muestreados en la ganadería de destino con la prueba de Elisa Indirecta o FPA con resultados negativos.

Articulo 16. Confirmación de animales positivos. Todo animal con resultado positivo a las pruebas para el diagnostico de brucelosis, debe ser sometido a la prueba confirmatoria de acuerdo con lo establecido en el artículo 10 de la presente resolución para descartar la presencia de infección en el predio.

El ICA autorizara de forma inmediata la movilización de los animales negativos siempre y cuando se presente el comprobante para la realización de la prueba confirmatoria de los animales con resultados positivos a las pruebas tamiz.

Si no se realiza la prueba confirmatoria el predio de origen se toma como sospechoso de brucelosis, no se autorizara la expedición de guías sanitarias de movilización.

En caso de resultar positivo el o los animales, la ganadería debe ingresar al programa de saneamiento de fincas afectadas por brucelosis, de lo contrario no se autorizaran la expedición

de próximas solicitudes

de guías sanitarias

movilización interna de este predio. Este procedimiento se realizara de acuerdo con lo establecido en el artículo 18 numeral 4 de la presente resolución.

Articulo 17. Fincas afectadas por Brucelosis. Se considera una finca afectada por brucelosis, aquella cuyos animales presenten una de las siguientes condiciones:

Presencia o ausencia de cuadro clínico reproductivo compatible con brucelosis y con resultados positivos a las pruebas de FPA o Elisa Competitiva.

Aislamiento del agente etiológico.

Articulo 18. Saneamiento de las fincas afectadas por brucelosis. Las fincas confirmadas como positivas a brucelosis, ingresaran al sistema de información y vigilancia epidemiológica del ICA y deben someterse a las siguientes acciones:

Cuarentena de la finca

Salida de animales: La salida de animales debe ser realizada previa solicitud del interesado, condicionado a un resultado negativo a brucelosis por las pruebas de FPA o Elisa Competitiva, con un resultado no mayor a 30 días.

Ingreso de animales: Los animales que ingresen deben ser negativos a las pruebas de Elisa Competitiva o FPA; estos resultados no deben ser mayores a 30 días.

El profesional oficial o autorizado concertara con los ganaderos la eliminación de animales positivos sin excederse de un plazo de 60 días calendario y en la ganadería se deben implementar las demás actividades concernientes al control de la enfermedad de acuerdo con lo establecido en el instructivo del ICA para el saneamiento de fincas afectadas por brucelosis.

Previa evaluación serológica con las pruebas de Elisa Indirecta o FPA en las hembras bovinas; y Elisa Competitiva o FPA en las hembras bufalinas y con la autorización del médico veterinario responsable de la oficina local del ICA, se podrán vacunar con Cepa RB51 en cualquier época del año bajo la supervisión del profesional oficial o autorizado, las hembras adultas que resulten negativas a brucelosis y que no se encuentren preñadas.

Identificar a los bovinos y bufalinos confirmados como positivos a brucelosis con marca de fuego con la letra ―B‖ en el lado izquierdo de la base de la cola. Sacrificar los animales positivos a brucelosis en la planta de beneficio más cercana al área de jurisdicción de la finca, esta planta debe ser autorizada por el Instituto de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos (Invima) o la autoridad que haga sus veces, prohibiéndose su movilización con destino a otras zonas del país.

Someter a proceso de pasteurización toda la leche proveniente de predios positivos a brucelosis como requisito para su consumo directo o transformación.

Articulo19. Vigilancia epidemiológica. Los ganaderos, profesionales, técnicos pecuarios y demás personas que tengan conocimiento de signos o síntomas compatibles con brucelosis, están en la obligación de informar este hecho ante el ICA, o la autoridad sanitaria más cercana.

Articulo 20. Prohibiciones. Abstenerse de:

Alterar el destino y marcas de los animales autorizados o cualquier otro dato consignado en la Guía Sanitaria de Movilización Interna.

Comercializar la leche proveniente de predios positivos a brucelosis con destino diferente a la pasteurización.

Comercializar animales con destino a la producción de leche y/o reproducción sin el cumplimiento de los requisitos sanitarios exigidos en la presente resolución.

Adulterar los resultados de laboratorio o enmascarar

la toma, envió y

procesamiento de los sueros tomados para diagnostico.

Permitir el ingreso a concentraciones ganaderas de animales sin cumplir con los requisitos sanitarios exigidos

Comercializar reactivos para el diagnostico de brucelosis para las pruebas de Elisa Competitiva y FPA con destino a laboratorios diferentes a los del ICA.

Articulo 21. Sanciones. El incumplimiento de cualquiera de las disposiciones de la presente resolución

se sancionara de conformidad con lo establecido en el

Capitulo X del Decreto 1840 de 1994, sin perjuicio de las acciones civiles y penales a que haya lugar.

Articulo 22. Control oficial. Los funcionarios del ICA en el ejercicio de las actividades de inspección, vigilancia y control que realicen en virtud de la presente resolución, tendrán el carácter de inspectores de Policía Sanitaria, gozaran del apoyo y protección de las autoridades civiles y militares para el cumplimiento de sus funciones.

6. METODOLOGIA

6.1 TIPO DE ESTUDIO

El principal objetivo es evaluar la prevalencia de Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira, se enmarca dentro de estudio epidemiológico descriptivo de corte transversal, ya que solo se hará dentro de un tiempo determinado, teniendo en cuenta las variables veredas, fincas, asistencia técnica por veredas y asistencia técnica por fincas.

6.2 DISEÑO EXPERIMENTAL

6.2.1 Universo, Población y muestras

El estudio se llevara a cabo en el Municipio de Zetaquira, teniendo en cuenta una población de 1814 hembras bovinas mayores de 24 meses de edad según el censo ganadero correspondiente al 1 julio de 2010.

Para el tamaño de la muestra se utilizo el programa WIN EPISCOPE 2.0 para generar la fracción representativa de la población a muestrear la cual es de 12.8% que corresponde a 233 individuos, con un nivel de confianza del 95%, error absoluto esperado 5% y con una prevalencia esperada del 50%.

TABLA1 DETERMINACION DE LA POBLACION DE ESTUDIO

6.2.2 DISEÑO METODOLOGICO Las muestras se obtuvieron por venopuncion de la vena coccígea, esta se ubica a lo largo

de la cola por ventral, se utilizaron agujas y tubos vacutainer,

muestra tomada se almaceno en tubos sin anticuagulante. El procedimiento fue: 1. Sujeción del animal 2. Inmovilización del animal 3. Desinfección con alcohol y solución yodada 4. Venopuncion 5. Identificación y rotulado de la muestra de sangre 6. Almacenamiento de la muestra 7. Embalaje y transporte de las muestras al laboratorio

Una vez lograda la muestra de sangre se procedió a la obtención y conservación del suero, que en un medio como el nuestro debe coagular en 20-30 minutos, mas la literatura recomienda esperar 1-2 horas a temperatura ambiente, de esta se podrá obtener mayor cantidad de suero acercándose a un 40% del volumen original de suero.

Se realizo el envió de las muestras refrigeradas asegurándose que el empaque fuese el adecuado para conservarlas por debajo de los 20 a 30°C, hasta su arribo al laboratorio. Los aislantes de poliuretano (icopor) con hielo son suficientes para conservar la congelación durante el tiempo que transcurre hasta su llegada al laboratorio

El tubo que contiene la sangre se debe centrifugar a 1.500 r.p.m. durante 5-10 minutos para separar las células del suero, con una pipeta Pasteur se debe separar el suero o sobrenadante y es transferido al ependorf para la realización de las diferentes pruebas.

Luego de la obtención del suero se procedió a tomar una cantidad igual a 30mcl, que se mezclo con igual cantidad de antígeno, sobre una lámina de vidrio. El diámetro mínimo que se debe alcanzar con la mezcla de estas dos soluciones debe ser de 2 cm, agitándose durante 4 minutos, trascurrido este tiempo se procede a examinar la reacción en búsqueda de la presencia de aglutinación, la aglutinación de cualquier intensidad indicara que la muestra es positiva.

El almacenamiento y procesamiento de las muestras se realizo dentro de las instalaciones del laboratorio Veterinario Microzoo avalado por ICA. El cual cuenta con los equipos e instalaciones idóneas para emitir resultados de alta confiabilidad.

 Métodos del laboratorio: Prueba de Rosa de Bengala: Esta prueba utiliza como antígeno en una suspensión bacteriana a la que se ha añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir del animal. Proporciona una aproximación diagnostica en pocos minutos con una sensibilidad y especificidad muy altas. Presenta elevado grado de correlación con la suroaglutinacion, por su simplicidad, es muy útil como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos negativos se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos de enfermedad de curso muy prolongado. 

Procedimiento:

1. Colocar a temperatura ambiente el reactivo. 2. Para la medición de los reactivos, utilizar la pipeta automática y adicionar cantidades de 30 3. Mezclar el Antígeno Rosa de Bengala con movimientos manuales suaves hasta encontrar una mezcla homogénea 4. Añadir igual volumen de Antígeno (30ul) sobre los 30ul de suero. Mezclar el suero y el Antígeno con un aplicador, (usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este paso para cada muestra de paciente y controles. 5. Agitar la placa en círculos amplios describiendo una órbita que permita la mezcla

durante 4 minutos cronometrados e inmediatamente realizar la

lectura (Alton, G.G. 1990).

6.2.3 Diseño o análisis estadístico. Los datos se analizaron mediante el paquete estadístico spss versión 15.0 y se aplicara un análisis descriptivo en donde se tendrán las variables veredas, fincas, asistencia técnica por veredas y asistencia técnica por fincas para la enfermedad objeto de estudio (spss versión 15.0).

7. ANALISIS Y DISCUSIร N DE RESULTADOS

7.1 RESULTADOS

En el Municipio de Zetaquira (Boyacรก), se muestrearon 233 hembras bovinas mayores de 24 meses de edad correspondientes a 13 veredas. El anรกlisis realizado en el laboratorio mediante la prueba de aglutinaciรณn en placa Rosa de Bengala para Brucella Abortus reporto una prevalencia de 26 animales positivos a la prueba, equivalentes al 11% y 207 animales negativos equivalentes al 89% del total de hembras muestreadas.

Grafico 1. Porcentaje de resultados de la prevalencia de brucelosis bovina en el municipio de Zetaquira (Boyacรก)

Prevalencia de Brucella Abortus Hembras Positivas

Hembras Negativas

11%

89%

Variable vereda: se tomaron las 13 veredas correspondientes al municipio de Zetaquira, obteniendo los siguientes resultados con respecto a esta variable:

Grafico 2. Porcentaje de positivos y negativos según la vereda en relación a la población total muestread

Tabla 2. Relación de la prevalencia de brucelosis bovina en el municipio de Zetaquira (Boyacá) con respecto a la variable vereda.

Tabla 3. Porcentaje de la variable vereda con respecto a la constante de variación en la prevalencia de brucella Abortus en el municipio de Zetaquira (Boyacá)

Tabla 4. De contingencia de Prevalencia de Brucella Abortus con respecto a la asistencia técnica por veredas

Tabla 5. De contingencia de Prevalencia de Brucella Abortus con respecto a la asistencia técnica por fincas

Tabla 6. Anรกlisis de la Prevalencia de Brucella Abortus por fincas en las veredas de Hormigas, Juracambita Carbonela y la Esperanza.

Grafico 3. Anรกlisis de Gradiente

7.2 ANALISIS Y DISCUSIÓN En el municipio de zetaquira (Boyacá), no se conocen estudios de enfermedades de carácter zoonotico, el presente trabajo es el primer estudio realizado en el municipio de Zetaquira que incluye la recolección de 233 muestras de sangre que corresponden al 12.8% de la población total de hembras bovinas mayores de 24 meses de edad, utilizando el programa WIN EPISCOPE 2.0 el cual indica

número de individuos a muestrear a partir del tamaño de la población total.

Al evaluar la Prevalencia de Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira, el estudio reporto 11% que corresponde a 26/233 individuos positivos y un 89% correspondientes a 207/233 individuos negativos como se indica en el grafico 1;tenemos que la prevalencia de Brucella Abortus en hembras mayores de 24 meses en el municipio de Zetaquira Boyacá es del 11%, es decir que de cada 100 hembras mayores de 24 meses de edad 11 presentaran Brucella Abortus, esta prevalencia se puede deber a que los animales reactores, pudieron haber sido comprados fuera del sector, por lo que se sospecha

que tenían títulos a

brucelosis antes de entrar a las fincas. Esta situación se presenta por el hecho de que los productores no exigen certificado de brucelosis al momento de la compra, lo cual incrementa la posibilidad de adquirir animales infectados, además este municipio se caracteriza por ser una zona de alta comercialización de animales, si a esto le agregamos el hecho que la práctica de vacunación contra la brucelosis es poco usual en la zona por parte de los propietarios, no es extraño conseguir animales reactores.

En cuanto a la variable vereda Se pudo evidenciar que el 53.84% de las veredas del municipio de Zetaquira presentan hembras positivas con Brucella Abortus, en donde tenemos que la vereda de Hormigas presenta ocho casos de Brucella Abortus, donde la finca El Piñito tiene el 87.5% de hembras positivas. Mientas que las veredas de Guanatá y La Esperanza

presentan cinco casos de hembras

mayores de 24 meses infectadas con Brucella Abortus, teniendo en cuenta que el

80% de los casos de la vereda de Guanatá están en la finca El Arcoiris y el 60% de los casos de la vereda de La Esperanza se encuentran en la finca El Silencio. No obstante las veredas de Guanatá Crucero, Gacal, Gacal Bolivar, Guanatá la Colorada, Juracambita y Centro Rural no presentaron ningún caso de Brucella Abortus en las hembras bovinas mayores de 24 meses. Lo que equivale al 46.16% de veredas no infectadas en el municipio de Zetaquira.

En términos probabilísticos tenemos que 0.1113 de las hembras presentan Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira, es decir que el 11.13% de las hembras están infectadas. De donde las veredas que tuvieron hembras positivas y se encuentra por debajo de este valor son Patanova con un Coro con un

, Alto del

que equivale a un 17.1% aproximadamente de hembras

que presenta Brucella Abortus.

Se puede observar que la vereda de Juracambita Carbonela presenta los valores más altos en la prevalencia de Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira con una prevalencia de 0.5714. Esto nos indica que existe una constate de variación en la prevalencia de BrucellaAbortus

Además podemos ver

que en la vereda Juracambita Carbonela de cada 10

hembras bovinas mayores de 24 meses, 6 presentaran Brucella Abortus aproximadamente, teniendo en cuenta que en las fincas de esta vereda se hace asistencia técnica pero se pudo evidenciar que en esta zona se venden

compran animales constantemente y no se exige el certificado que demuestre que los animales estén libres de Brucella o no.

También se pudo evidenciar que el 76.92% de las veredas del municipio de Zetaquira prestan asistencia técnica, pero esta variable no es un indicador que determine la presencia de Brucella Abortus en las hembras bovinas mayores de 24 meses, ya que el 60% de las veredas que presentan asistencia técnica tienen

hembras con Brucella Abortus mientas que el 33.33% de veredas que no presentan asistencia técnica tienen hembras positivas. Esto se puede deber a que en algunas veredas del municipio de Zetaquira no tienen el suficiente conocimiento

de la enfermedad, el diagnostico correcto, la vacunación y la

eliminación de los animales positivos con un único destino sacrificio.

En las veredas Hormigas, Juracambita Carbonela y la Esperanza se observa que la prevalencia de estas veredas dobla a la prevalencia presentada en el municipio de Zetaquira, teniendo en cuenta que el 57.14% de las fincas tienen asistencia técnica. De donde 23 de cada 100 hembras mayores de 24 meses presentan Brucella Abortus, es recomendable que en estas veredas se empiece a hacer una asistencia técnica más compleja y sistematizada para que los índices de Brucella Abortus disminuyan.

Referente a la variable asistencia técnica por fincas se pudo concluir

que el

62.96% de fincas del municipio de Zetaquira presentan asistencia técnica de donde el 35.29% de las fincas que muestran asistencia técnica tienen hembras positivas, por otro lado tenemos que el 40% de las fincas que no presentan asistencia técnica tiene hembras positivas; lo que nos lleva a concluir que por fincas la asistencia técnica si es un factor determinante en la presencia de Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira. Ya que la asistencia técnica está disminuyendo la presencia de Brucella Abortus en las fincas del municipio de Zetaquira en un 4.71%.

Esto nos lleva a que si se hiciera una asistencia técnica constante y más completa este valor seria significativo, puesto que la asistencia técnica que se hace en las fincas es muy escasa y no cuenta con el personal calificado para esta labor. En el análisis de gradiente se observo que en promedio por vereda existe dos hembras infectadas con Brucella Abortus en el municipio de Zetaquira, este valor puede oscilar entre un intervalo de 0 a 4 hembras infectadas por vereda con una

confianza del 95%.

Es decir que la vereda de las Hormigas debe realizar

controles constantes para poder bajar los índices de hembras que presentan Brucella Abortus.

En términos generales es bueno indicar que según la normativa sanitaria contemplada en el artículo 36 de Normas para el Programa de Prevención, Control y Erradicación de la Brucelosis (Resolución No. 001192 del 18 de abril del 2008) aquellos animales detectados como positivos deben ser

eliminados con el

propósito de evitar la propagación a los demás animales y a los seres humanos, sin embargo esto en términos generales no se está cumpliendo ya que no existe un sistema de indemnización que mitigue las pérdidas económicas para los ganaderos, por lo tanto otra alternativa de solución podría ser la implementación de un sistema de incentivos en el valor de la leche para aquellos productores que certifique sus predios como libres de esta enfermedad.

IMPACTO

La brucelosis produce un alto impacto económico de gran importancia, ya que está indicando que hay perdidas en las grandes explotaciones ganaderas del municipio de Zetaquira debido a fallas reproductivas como son (aborto, bajas tasas de concepción) y mala calidad de la leche, y que si se toman medidas correctivas se puede contribuir a mejorar la vida económica de los productores.

Desde el punto de vista social y ambiental afecta especialmente a los pequeños ganaderos quienes son el sector más vulnerable en muchas poblaciones rurales del país, la brucelosis es en gran parte

una enfermedad que se transmite al

humano (zoonosis), y se transmite a otras especies animales como caninos, equinos, porcinos, ovinos y caprinos. Así que los resultados del presente trabajo permitirán a las autoridades correspondientes evaluar los efectos

que están

obteniendo con las medidas de prevención y control de la enfermedad en la zona y tomar decisiones sobre posibles modificaciones o extremar las medidas ya instauradas. Este estudio se realizo con el objetivo de concientizar a los pequeños ganaderos sobre la importancia de vacunar sus animales contra la Brucella Abortus, e implementar estudios serológicos a cada uno de sus animales para diagnosticar posibles brotes de Brucella, para que el ganadero de solución a ello realizando la eliminación de animales positivos a la enfermedad para evitar posibles contagios, llevar un control en el momento de traslado de animales de otras fincas como exigir el registro de vacunas otorgado por Fedegan.

RECOMENDACIONES

Se recomienda hacer programas de capacitación a los ganaderos de la región sobre la gran importancia que tiene dicha enfermedad puesto que les origina pérdidas económicas; realizando una adecuada vacunación en los ciclos correspondientes, exigencia de los certificados de vacunación en el momento de la compra de animales así como la guía de movilización de los mismos

Eliminación de hembras hijas de madres positivas y revisar los toros que se utilizan para las montas

Para detectar los animales

positivos con la infección

de brucella se hace

necesario monitorear constantemente con técnicas de Rosa de Bengala, siendo la única prueba oficial para el diagnostico de brucella

Dar un incentivo significativo a todos los ganaderos que logren tener su finca libre de brucelosis

Confirmar el diagnostico por medio de pruebas como ELISA competitiva a individuos reactores positivos

Controlar la movilización del ganado especialmente si estos provienen de otras zonas donde se ha comprobado la presencia de la enfermedad

Sacrificar todos los animales reactores positivos a Brucella Abortus para impedir la diseminación de la misma tanto en el municipio de Zetaquira como en otras zonas aledañas

Realizar programas de estudio constantes para erradicar los problemas epidemiológicos de Brucella Abortus en le región

CONCLUSIONES

Se reporta una prevalencia de 26/233 individuos positivos equivalentes al 11% y 207/233 individuos negativos equivalentes al 89% del total de hembras muestreadas

La brucelosis es un problema complejo y por su naturaleza es necesario continuar realizando estudios que permitan conocer el comportamiento dentro de los hatos ganaderos así como el comportamiento de las vacunas que actualmente se están utilizando.

La prueba de aglutinación en placa Rosa de Bengala no es 100% diagnostica pero da visión real y aproximada del estado actual de Brucelosis en el municipio de Zetaquira por su alta sensibilidad y especificidad; por lo tanto es necesario confirmar el diagnostico por medio de pruebas como ELISA Competitiva o inmunofluorescencia polarizada

Es de vital importancia que las autoridades sanitarias realicen las jornadas de vacunación en todos los hatos, teniendo en cuenta los pequeños ganaderos y las veredas más alejadas del municipio

En el municipio de Zetaquira el porcentaje de hembras mayores de 24 meses de edad reactores positivas a Brucella Abortus fue del 11% y al compararla con los informes de sanidad animal del Instituto Colombiano Agropecuario ICA entre 2000 y 2006 la prevalencia de brucelosis alcanzo cifras del 7%, se nota una diferencia significativa lo cual es preocupante y nos da a pensar que los planes de control y erradicación de la enfermedad no están dando los resultados esperados.

Hacer conocedores de los resultados obtenidos a los ganaderos puede resultar de gran utilidad para evitar el traslado de la enfermedad mediante leche,

adicionando ademรกs capacitaciones para que ellos tomen consciencia de la gravedad de la enfermedad.

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ANEXOS

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