UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad Pertinencia y Calidez” UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRÁCTICA N° 3 DOCENTE: BQF. Carlos García MSc. ALUMNO: Aguilar Abarca Pamela Andrea. CURSO: 5to Bioquímica y Farmacia PARALELO: A GRUPO N°: 2 FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Martes, 21 de Junio del 2016 FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Martes, 28 de Junio del 2016 Título de la práctica: INTOXICACIÓN ALCOHOL METILICO. Animal experimentado: Cobayo. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal) Volumen administrado: 10ml de solución de Cianuro TIEMPOS: Inicio de la práctica: 07:50 am Hora de administración del toxico al cobayo: 07:52 am Hora de destilación 08:09 am Desceso del animal: 08:05 am Fin de la práctica: 10:30 am. SINTOMATOLOGÍA: Convulsiones, ceguera, desmayos, hinchazón de abdomen, muerte rápida, vomito.
1. OBJETIVOS:
Determinar mediante reacciones de reconocimiento la presencia de alcohol metílico en el cobayo, observando sus síntomas que le han producido al haberle administrado el toxico
2. FUNDAMENTO TEÓRICO El metanol se absorbe por vía oral, piel, mucosas intactas y por vía pulmonar; perfunde rá- pidamente todos los órganos, especialmente aquellos ricos en agua como cerebro, humor acuoso y riñón. La dosis letal del metanol está estimada en 30-240 mL (20-150 gramos). La dosis tóxica mínima es aproximadamente de 100 mg/kg. Se pueden encontrar niveles elevados de
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metanol en sangre luego de exposición dérmica extensa o por inhalación. Una concentración sérica de 40 mg% es mortal.
3. INSTRUCCIONES 3.1 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa 3.2 Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3.3 Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 3.4 4 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario 4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS: MATERIALES Jeringuilla de 10cc. Tubos de ensayo Tabla de disección Mandil Bisturí Equipo de disección OTROS Mascarilla Pipetas Equipo de destilación. Guantes de látex Vaso de precipitación Perlas de vidrio. Mechero. Embudo. Pinzas. Gorro.
SUSTANCIA Agua destilada Metanol Permanganato de potasio al 1% Ácido sulfúrico Acido Tartárico al 20% Acido oxálico Ácido cromotrópico
Nitroprusiato de sodio al 2.5%
EQUIPOS
Aparato de destilación Balanza Baño maría Campana
MUESTRAS Destilado de vísceras del animal de experimentación.
Cloruro de fenilhidracina al 4% Hidróxido de sodio Ácido clorhídrico Cloruro férrico Ferricianuro de potasio al 5% Hidróxido de potasio al 12% Leche
5. ACTIVIDADES A REALIZAR 5.1 Colocarse todo el material de protección antes de entrar al laboratorio. 5.2 Desinfectar el mesón de trabajo para poder realizar la práctica. 5.3 Administrar 10 ml de metanol por vía peritoneal 5.4 Se colocó el cobayo en el panema. 5.5 Observamos las manifestaciones que se presentan y anotamos la hora. 2
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5.6 Se procede amarrar el cobayo en la tabla de disección 5.7 Se rasura la parte abdominal con una gillet donde se va a realizar el respectivo corte
5.8 Con la ayuda de un bisturí se procede abrir el cobayo observando los cambios que presentaron sus órganos. 5.9 Colocamos los fluidos y las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (vaso de precipitación). 5.10 A las vísceras ya picadas le añadimos 25 ml de ácido tartárico. 5.11 Esto lo llevamos al equipo de destilación y se destila respectivamente. 5.12 El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor, se realizan las diferentes reacciones de reconocimiento.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN: 6.1 Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
6.2 Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
6.3 Con Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella.
6.4 Reacción de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.
6.5 Con el Ácido Cromotrópico: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
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6.6 Reacción de Hehner: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
7. GRÁFICOS 3
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Observamos los síntomas que presenta la Rata wistar hasta su muerte.
Aplicamos el toxico.
Escogemos el animal de experimentación.
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Con ayuda de un bisturí sacamos las viseras
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Trituramos las vísceras para llevarlas a destilación.
Se prepara el equipo y se destila
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Después de la destilación obtenemos la solución madre que la que haremos reacciones de identificación. 4
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8. RESULTADOS OBTENIDOS Reconocimiento en medios biológicos:
Reacción de Schiff
Reacción
positivo característico
Antes
coloración violeta.
Después
Reacción de Rimini
Reacción
Negativa
No hubo coloración azul intensa
Antes
Después.
Reacción con difenilhidracina.
Reacción
Positivo característico
Antes 5
rojo grosella.
Después.
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Reacción de marquis.
Reacción
Positivo no característico
Antes
rojo grosella.
Después.
Reacción con Cianuro de sodio + ácido sulfúrico.
Reacción
Positiva no característica
Antes
Después
Reacción de Hehner
Reacción
Positiva no característica
Antes
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Coloración roja.
Después
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9. OBSERVACIONES Se inyecto al animal un total de 10 ml de metanol para producir la muerte del cobayo en donde observamos que al administrar metanol por vía intraperitoneal presento síntomas como disminución del ritmo cardiaco, vómitos, ceguera y por ende convulsiones.
10. CONCLUSIONES Se concluye que la intoxicación por metanol produjo la muerte del animal en un tiempo de 13 minutos con lo que concluimos que el metanol es muy tóxico y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de metanol
11. RECOMENDACIONES
Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla. Las pipetas deben ser específicas para cada reactivo. Colocar correctamente las sustancias a la concentración requerida
12. CUESTIONARIO 12.1 Es peligroso el alcohol metílico? El metanol por sí mismo es poco tóxico, sí que lo son los metabolitos de la oxidación hepática (como el formaldehido y el ácido fórmico), que pueden llegar a producir lesiones en el nervio óptico y acidosis metabólicas.
12.2 Cuales son manifestaciones clínicas más frecuentes?
cefaleas vértigo astenia náuseas dolor abdominal visión borrosa disminución del nivel de conciencia.
12.3 Tipos de alcohol
Alcohol etílico. Es el alcohol utilizado para la producción de bebidas alcohólicas tales como el vino, la sidra y el brandy, entre otras. Hay que tener en cuenta que su consumo afecta a la coordinación de los miembros del cuerpo, a la visión y también puede ocasionar somnolencia, mareos y euforia. Vino Tequila 45-50% Cerveza 4-6% Whisky 45-50%
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Ron 45-50% Vodka 45-50% Acetato de etilo
Alcohol metílico. El metanol puede absorberse a través de la piel, por inhalación o por vía digestiva. La absorción es más rápida por vía digestiva, y según el contenido gástrico, varía de entre 30-60 minutos en su aparición en plasma. No se une a proteínas. La intoxicación se manifiesta de entre 40 minutos a 72 horas, debido a su transformación a acido fórmico. Butanol. Conocido bajo el nombre de alcohol butílico, este compuesto orgánico se caracteriza por encontrarse en estado líquido, ser incoloro, poseer un aroma particular. En caso de ser inhalado, puede ocasionar anestesia, tos, sueño, dificultades en la respiración y aturdimiento. Si llega a entrar en contacto con la piel o con los ojos ocasiona irritación. Etilenglicol. Es un alcohol de estructura similar al alcohol etílico, con la adición de un grupo hidroxilo en cada carbono. Es un líquido incoloro, inodoro y no volátil. Puede ser ingerido por vía oral de forma accidental o con intención, o como sustituto del alcohol por bebedores crónicos. La dosis tóxica es de 50-100 ml, y por encima de 100ml, se considera potencialmente mortal.
13. GLOSARIO
Alcohol: El término alcohol se usa con frecuencia para aludir a bebidas que contienen esta sustancia; por ejemplo el vino, la cerveza y los licores. En este caso, el alcohol, etanol, se ha producido mediante un proceso conocido como fermentación. Metanol: El metanol se define simplemente como un líquido incoloro orgánico a presión y temperatura ambiente. Absorción: La absorción tiene que ver con el ingreso mismo del tóxico al organismo, para ello debe atravesar barreras biológicas más o menos fuertes.
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14. ANEXO
15. BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
BARCELONA, C. (2008). http://www.cat-barcelona.com. Recuperado el 19 de 06 de 2015, de http://www.cat-barcelona.com: http://www.cat-barcelona.com/faqs/view/espeligroso-el-alcohol-metilico TICOBIRRA.COM. (s.f.). http://www.ticobirra.com. Recuperado el 19 de 06 de 2015, de http://www.ticobirra.com: http://www.ticobirra.com/preguntas_frecuentes.php
Fecha de entrega: 27 de Junio del 2016
Pamela Aguilar
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