automatización
Automatización del desarrollo de líneas celulares
Izasa Scientific
El desarrollo de líneas celulares es el proceso mediante el cual la maquinaria celular es cooptada para fabricar productos biológicos terapéuticos u otras proteínas de interés.
E
sto implica con mayor frecuencia la producción de anticuerpos en células cultivadas en cultivos en suspensión para su uso eventual en biorreactores en la etapa de fabricación. El desarrollo de estas líneas celulares es un proceso largo y arduo con numerosos pasos y desafíos (Imagen 1). Una vez que las células han sido transfectadas con la construcción de interés, se requiere un paso de selección para enriquecer aquellas células que han tomado la construcción. Luego, las células individuales deben aislarse, cultivarse en colonias y analizarse para detectar la producción de proteínas de interés. Una vez que se ha rea-
Culture cells
Transfect
Selection/ enrichment
lizado este análisis de producción, los principales candidatos se multiplican y mantienen para probar la estabilidad de la expresión de las proteínas. Eventualmente, los principales éxitos se optimizan en diferentes condiciones de medios para mejorar expresión u otros atributos de la proteína (por ejemplo, glicosilación) antes de escalar a niveles de producción. Debido a que este proceso tarda meses en completarse, existen muchos más desafíos en el flujo de trabajo que en una típica conexión celular a corto plazo. Primero, mantener la esterilidad es esencial durante varias manipulaciones y durante las semanas de crecimiento de una sola célula. En segundo
Isolate single cells & expand
Assess protein production
Test genomic stability
lugar, como con la mayoría de estos procesos, el rendimiento requerido para identificar un puñado de clones óptimos suele requerir miles de muestras. Este rendimiento luego disminuye después de la fase de selección de hits, por lo que uno debe programar campañas superpuestas para maximizar los recursos. Finalmente, a medida que los clones se mueven a través del sistema y son reformateados en placas de menor densidad durante la selección de hits, todos los datos registrados previamente deben rastrearse y verificar cómo estas células se establecen en líneas. Hemos superado estos desafíos al automatizar el establecimiento y la selección de clones para el desarrollo de líneas celulares.
Optimize process
Scale-up
Imagen 1: Proceso de desarrollo de líneas celulares; los pasos automatizados que se describen aquí se indican en rojo
técnicas de LABORATORIO
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Nº 469 MARZO 2022
QC
