ÍNDICE Edición 121 - Febrero 2018
INFORMACIÓN DE COYUNTURA
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Guayaquil será sede de la conferencia internacional “GOAL 2018”
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Productores de alimento para camarón piden facilidades en la compra de materia prima
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Agenda acuícola territorial de gremios camaroneros de El Oro 2018
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Diagnóstico oceanográfico-atmosférico de las condiciones ambientales en la costa ecuatoriana
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Grupos de interés ejercen presión para la inclusión del camarón en el Programa de Monitoreo de Importación de mariscos (SIMP), mientras importadores analizan el posible impacto
ARTÍCULOS TÉCNICOS
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Caracterización funcional de un gen modulador 1 de especies oxígeno reactivas en Litopenaeus vannamei
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Retro-adaptación de fincas de camarón a sistemas de recirculación
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El diformato de potasio en la dieta mejora el rendimiento del camarón patiblanco (L. vannamei) mediante la reducción de patógenos bacterianos
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Estrategias naturales para mejorar el crecimiento y la salud en los cultivos de camarón
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Situación y perspectivas del cultivo de camarón blanco en India
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Tecnologías para el tratamiento de agua en la producción de larvas
ESTADÍSTICAS
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Exportaciones de camarón y tilapia Reporte del mercado EEUU - Urner Barry
FERIAS Y CONGRESOS
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Aqua Expo 2018
Editora “AquaCultura” Msc. Shirley Suasnavas ssuasnavas@cna-ecuador.com Consejo Editorial Ing. Attilio Cástano Dr. Philip Buike Econ. Heinz Grunauer Msc. Yahira Piedrahita Mphil. Leonardo Maridueña Diseño, diagramación y foto de portada Ing. Orly Saltos osaltos@cna-ecuador.com Corrección de estilo Silvia Idrovo Valverde silviaidrovo_gye@yahoo.com
Ferias internacionales
NOTICIAS
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Presidente Ejecutivo Ing. José Antonio Camposano
Noticias de interés
Comercialización Lcda. Niza Cely ncely@cna-ecuador.com
EDITORIAL José Antonio Camposano Presidente Ejecutivo
Sector camaronero ecuatoriano asume liderazgo en sostenibilidad acuícola con la presentación de Sustainable Shrimp Partnership
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esde 2016 el sector camaronero ecuatoriano se encuentra trabajando en una iniciativa para liderar un cambio de paradigma en la industria acuícola de la cría del crustáceo. Se trata de una propuesta de valor que busca romper el círculo vicioso de la competencia mundial por un “camarón más barato” y pasar a un esquema de mejoras continuas en producción, procesamiento y comercio del camarón. Igualmente, se busca que los mercados reconozcan los esfuerzos de países como el nuestro por producir una proteína de alta calidad cumpliendo los más altos estándares. Sin duda se trata de una apuesta agresiva por parte del sector privado camaronero nacional, pero estamos conscientes que tenemos las credenciales para emprender un proceso de esta magnitud, pues el camarón ecuatoriano es reconocido por su calidad, sin embargo, hoy en día, esto parece no generar ningún impacto en los mercados de destino, salvo contadas excepciones. La iniciativa será presentada en la próxima edición de la feria “Seafood Expo North America” en la ciudad de Boston a importadores, prensa especializada y demás miembros de la industria. En este foro, se espera que alrededor de 6 empresas del sector camaronero ecuatoriano anuncien la conformación de SSP (Sustainable Shrimp Partnership por sus siglas en inglés) como respuesta a la necesidad de articular esfuerzos por mejorar las prácticas de la
industria sobre la base del ejemplo del modelo que se practica en Ecuador. SSP contará con 4 áreas de enfoque; una de ellas será un nuevo esquema de certificación que contará con la primera iniciativa mundial de cría de camarón sin antibióticos. Lo segundo será un programa para la inclusión de medianas y pequeñas unidades productivas a la certificación SSP mediante el acompañamiento técnico de parte de organizaciones no gubernamentales. Adicionalmente se contará con un grupo de trabajo para que las lecciones aprendidas, a lo largo de este proceso, se compartan con la industria en diferentes foros internacionales. Finalmente se trabajará en una campaña de comunicación para ofrecer más información al consumidor de tal manera que éste pueda tomar mejores decisiones de compra respecto del camarón que consume. Sin duda el contexto local e internacional demandan del sector mucho trabajo en diversos ámbitos, sin embargo, vale destacar la visión y decisión de los empresarios ecuatorianos para emprender una iniciativa como SSP pues ésta busca liderar, con el ejemplo, un cambio en la forma como concebimos la acuicultura camaronera de tal manera que garanticemos la sostenibilidad de la industria. En próximas ediciones de revista AquaCultura compartiremos más detalles de este ambicioso proyecto y cómo los actores del sector pueden sumarse a este esfuerzo.
DIRECTORIO PRIMER VICEPRESIDENTE Econ. Carlos Miranda
PRESIDENTE DEL DIRECTORIO
SEGUNDO VICEPRESIDENTE
Ing. Carlos Sánchez
Ing. Jorge Redrovan
VOCALES PRINCIPALES Ing. Ricardo Solá Ing. Alex Olsen Ing. Ori Nadan Ing. Attilio Cástano Ing. Luis Francisco Burgos Ing. José Antonio Lince Sr. Isauro Fajardo Tinoco Ing. Leonardo De Wind
Ing. Oswin Crespo Ing. Marcelo Vélez Econ. Sandro Coglitore Ing. Rodrigo Laniado Ing. Humberto Trujillo Sra. Verónica Dueñas Ing. Alex Elghoul Ing. Rodrigo Vélez
Ing. Walter Intriago Econ. Danny Vélez Sr. Jorge Chávez Valarezo Dr. Marco Tello Sr. Luis Alvarado Ing. Paulo Gutiérrez
VOCALES SUPLENTES Ing. Edison Brito Alvarado Econ. Freddy Arévalo Ing. Miguel Uscocovich Sr. Iván Rodriguez Ing. Luis Villacís Econ. Roberto Coronel Ing. Diego Illingworth
Sr. Wilson Alcívar Gómez Dra. Liria Maldonado Sr. Joffre Vivanco Ing. Marcos Wilches Ing. Fabricio Vargas Ing. Víctor Ramos Ing. Francisco Pons
Ing. Ronald Baque Dr. Alejandro Aguayo Econ. Heinz Grunauer Ing. David Eguiguren
COYUNTURA
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Guayaquil será sede de la conferencia internacional “GOAL 2018”
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l evento “GOAL 2018” que impulsa el liderazgo de la acuacultura responsable mundial se realizará en el Hilton Colon Guayaquil, del 25 al 27 de septiembre, así lo anunció, el 8 de enero pasado, la organización The Global Aquaculture Alliance (GAA) y la Cámara Nacional de Acuacultura (CNA) como ente copatrocinador. Ecuador fue escogido como sede en reconocimiento al liderazgo de la producción de camarón en términos de 'sostenibilidad' productiva por más de 5 décadas. “La eficiencia de la producción ha evolucionado con alimentos de alta calidad y manejo semiintensivo sin antibióticos", dijo el presidente de la GAA, George Chamberlain. Por su parte, el Presidente Ejecutivo de la Cámara Nacional de Acuacultura (CNA), José Antonio Camposano indicó que se espera contar con la presencia de representantes de la acuacultura mundial para intercambiar conocimientos de innovación y tecnología. "Durante más de 50 años, Ecuador ha demostrado ser un líder en la acuicultura de camarón, cumpliendo con los más altos estándares ambientales y sociales, lo que
lo ha convertido en una referencia mundial en la industria. Ecuador tiene la oportunidad de demostrar a otros países y compradores el compromiso de esta actividad en la producción de un camarón sano, nutritivo, puro, de calidad superior y cultivado de la manera más sostenible", afirmó Camposano. GOAL (Global Outlook for Aquaculture Leadership) es un evento internacional que se realiza desde el 2001 y en la edición 2018 habrá un programa de tres días de conferencias con más de 50 expositores que intercambiarán información sobre las tendencias que determinan el futuro de la producción acuícola responsable y su abastecimiento, así como múltiples oportunidades sociales y de redes para
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Hemos sentido la necesidad de reconocer a su país por hacer las cosas responsablemente y ser innovadores. Es una forma de reconocer el éxito del pasado pero también ver hacia el futuro y la actividad acuícola en Ecuador es un buen ejemplo de cómo las cosas se pueden hacer correctamente.
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alrededor de 400 profesionales del sector acuícola en más de 30 países. El pasado 7 de febrero, delegados del Goal Aquaculture Alliance visitaron Ecuador para mantener la reunión preparatoria del evento. La mesa de trabajo se desarrolló en la Cámara Nacional de Aquacultura con Steven Hedlud, Communications Manager, Sally Krueger, Relationship Manager y José Antonio Camposano, Pdte. Ejec. CNA quienes trazaron la hoja de ruta para la realización de la conferencia internacional●
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Tendremos alrededor de 50 conferencistas de diferentes países, quienes responderán las preguntas de los asistentes, mediante una metodología muy interesante y dinámica. Tengo el presentimiento que la experiencia del GOAL Aquaculture en Ecuador será maravillosa.
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Steven Hedlud Communications Manager
Sally Krueger Relationship Manager
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Productores de alimento para camarón piden facilidades en la compra de materia prima La soya y el trigo son algunos de los componentes principales para la elaboración del alimento balanceado para el camarón. El mayor volumen de estos productos es importado con diferimiento arancelario al 0% otorgado por el Comité de Comercio Exterior (COMEX) de forma temporal. El volumen restante se negocia, por disposición gubernamental, con proveedores nacionales a un precio más caro que en el mercado internacional. Estas condiciones de compra preocupan a algunos representantes de las fábricas de alimento por los costos que debe asumir su industria, la misma que está ejecutando nuevas inversiones en el país con modernas plantas procesadoras de última tecnología, que impulsan innovación y desarrollo.
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stos temas han sido tratados en la comisión de fábricas de alimentos de la Cámara Nacional de Acuacultura que está conformada por varios representantes industriales y quienes, a través de la CNA, han presentado su propuesta a la Ministra de Acuacultura y Pesca, Ana Katuska Drouet, para que solicite la competencia en todo lo que concierne a temas de alimento acuícola como el levantamiento definitivo de las franjas de precios para la soya y el trigo, además de la flexibilidad sobre la obligatoriedad de compra de materia prima nacional. El punto de partida es mejorar el proceso de trámite para la obtención y renovación de licencias para la importación de materias primas, según Danny Vélez, Gerente General de Alimentsa, quien afirma que se debe simplificar el proceso para optimizar tiempo y recursos tanto para el sector privado como público.
Con este tema coincide Carlos Miranda, Gerente General de Skretting quien agrega que es fundamental además, la eliminación definitiva del arancel para la importación de la torta de soya y el trigo, con el fin de mantener la competitividad de la venta del camarón ecuatoriano en mercados internacionales en los que se comercializa el crustáceo cada vez más barato.
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En el 2017 casi llegamos a los $ 2,800 millones de dólares por concepto de divisas para el Ecuador, entonces necesitamos la vía libre para trabajar con velocidad y eso no es lo que está pasando. En la práctica hay materia prima que pasa por los controles de Agrocalidad y luego por el Instituto Nacional de Pesca, cuando este último ente es el que debe emitir la autorización, ya que la autoridad competente ahora es el Ministerio de Acuacultura (MAP).
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Danny Vélez Gerente de Alimentsa
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Competimos contra países que tienen tratado de libre comercio con Estados Unidos y pueden importar la materia prima sin ningún arancel.
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Carlos Miranda Gerente General de Skretting
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- FEBRERO 2018 aunque reconoce que, en el caso de la soya, se requiere una inversión adicional para procesar el grano y convertirlo en pasta. Esta opinión no es compartida del todo por la industria nacional. Al respecto, Carlos Miranda, expresó que no se les puede pasar la factura a la industria de alimento para camarón por las limitaciones de siembra y producción que tiene el país. Indicó que no existe justificación para que la soya nacional sea un 46% más cara que la internacional y que, además, no cumpla con el estándar de calidad ya que contiene menos proteína y más fibra.
A ese criterio se suma el de Gustavo Wray, Gerente General de Agripac, quien expresa que debe establecerse la exoneración definitiva para la importación de materias primas que no pueden ser cubiertas, en su totalidad, por la producción local. Sin embargo, está de acuerdo con que las fábricas procesadoras de alimento para el camarón compren soya y trigo ecuatoriano para proteger la producción nacional,
Un concepto similar expresa Danny Vélez: “se paga $ 370 por una tonelada de soya internacional mientras que la nacional se cotiza en $ 700, además, nosotros no tenemos una industria extracción y yo empleo la pasta de soya que requiere de un proceso: se le saca al grano el aceite y queda el bagazo, que es como un 68% y lo que queda es un 47% de proteína”. Wray sugiere que las autoridades competentes se involucren más en las necesidades de la industria de fábrica de alimentos balanceados y por otra parte considere también la preocupación de los productores de soya y trigo que necesitan tecnificarse para mejorar la calidad de su cosecha con el apoyo económico del gobierno. Vélez, por su parte, afirma que se han desarrollado varias mesas de diálogo pero no se ha podido llegar a consensos,
porque falta una coordinación interministerial entre las carteras de Estado de Acuacultura y Agricultura (MAG y MAP); mientras que Miranda afirma que toda la competencia en materia acuícola la debe tener el nuevo ministerio del ramo “porque hemos perdido todas la esperanzas con el MAG, entidad que ha desestimado todos los justificativos interpuestos”.
Elevación de costos de otros insumos Otra de las dificultades por las que atraviesa la industria de alimentos balanceados para el camarón es el incremento del precio de las vitaminas, porque uno de los principales proveedores dejó de producir debido a un incendio en una planta procesadora de Alemania, la misma que posee el mayor complejo químico del mundo. Este accidente generó daños tan graves que la planta actualmente se encuentra en reconstrucción y se estima que estará operativa en abril. Por otra parte, China, que es uno de los principales productores de vitaminas del mundo, tuvo problemas ambientales con el gobierno de ese país que ordenó el cierre temporal de varias industrias, a causa del aumento de las partículas contaminantes en el aire. Varias fábricas fueron cerradas y las plantas que quedan se encuentran produciendo en un menor nivel.
INDICADORES DE SOYA NACIONAL: En el 2017 se sembró 45 mil hectáreas de soya y su rendimiento fue alrededor de 55 mil toneladas.
" En cuanto a costos puede ser mejor el
importado porque en Ecuador existen dificultades para producirlo, pero es la mejor forma de proteger los de origen nacional. Se debe primero adquirir lo que produce Ecuador y complementarlo con el importado.
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INTERNACIONAL: En el 2017 Ecuador importó más de 951 mil toneladas entre torta de soya y aceite de soya, lo que representó aproximadamente $ 500 millones de dólares. Fuente: Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias INIAP
Gustavo Wray Gerente General de Agripac 11
Torta de soya, alimento para el camarón
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- FEBRERO 2018 “La suma de estos factores generó un incremento agresivo en los precios de las vitaminas, parte de la materia prima requerida para la elaboración de alimentos balanceados” explicó Carlos Miranda. Por otra parte, el precio de la harina de pescado ha sufrido un considerable incremento debido a la oferta y demanda, pues Perú es el país que fija los precios de harina de pescado a nivel mundial, ya que proporciona aproximadamente el 20% de la producción global. En el 2016, la cuota autorizada por el gobierno peruano había sido de USD 3,8 millones de toneladas métricas, mientras que el año 2017 fue de USD 4,3 millones. El cumplimiento de la tasa en el año 2016 fue del 74% de la cuota, mientras en el año 2017 fue del 55%; generando una reducción en la oferta de harina de pescado.
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La situación creó a nivel global un incremento de precios en la harina de pescado, generando una incidencia en los precios de este insumos entre el 13% y 28% en Ecuador. Ante esto, existe el compromiso de la Cámara Nacional de Acuacultura para insistir en viabilizar el tema ante las autoridades competentes dar seguimiento a las necesidades de los productores de alimentos balanceados para el camarón, con el propósito de impulsar el desarrollo de la industria que ha recibido, en los últimos 5 años, una importante inversión extranjera●
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Agenda acuícola territorial de gremios camaroneros de El Oro 2018 La mesa de trabajo entre el sector privado y público tuvo como propósito revisar y dar seguimiento a temas de interés e importancia para el sector camaronero del país y en especial para los productores de la provincia de El Oro. La cita se desarrolló el miércoles 10 de enero de 2018, en el Hotel Oro Verde de la ciudad de Machala.
Subsecretario de Acuacultura, Daniel Carofilis, en mesa de trabajo con camaroneros de El Oro.
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epresentantes de los gremios camaroneros de El Oro: Cámara de Productores de Camarón de El Oro (CPCEO), ASOCAM, Cooperativa Sur Pacífico-Huaquillas, Cooperativa Hualtaco y APROCAM JK, plantearon diversos temas ante el Subsecretario de Acuacultura, Daniel Carofilis y demás autoridades de esa cartera de Estado. Los puntos tratados en esta mesa de trabajo se centraron en 4 ejes: seguridad, ambiente, electrificación y régimen laboral. Estos mismos temas fueron discutidos el 5 de julio de 2017 con la Ministra de Acuacultura, Katuska Drouet.
Seguridad
Se plantearon inquietudes sobre la seguridad jurídica en lo que respecta a la tenencia y la titularización de tierras, aplicables al Proyecto de Ley de Pesca que impulsa el Ministerio del ramo; además se solicitó al Subsecretario, la definición del marco jurídico de soporte a las respectivas normativas del Reglamento General a la Ley de Pesca. Por otro lado, se expuso la urgente necesidad de que el Ministerio de Acuacultura, gestione una reunión interinstitucional, con el Sr. Ministro de Defensa y del Interior, para buscar estrategias reales, aplicables y eficientes en el control por vía marítima, fluvial y terrestre, ante los graves sucesos de robos y asaltos para el sector camaronero Orense y Nacional. Dentro del mismo marco de acción de los
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entes estatales, se solicitó la emisión de un Acuerdo Ministerial para que el permiso de porte de armas, sea provincial y no cantonal para el sector camaronero. Se insistió en el planteamiento realizado por los gremios de El Oro ante autoridades policiales y marítimas, de viabilizar la propuesta de traslado seguro de “Valores Acuícolas” con la Policía Nacional, dentro de la “Ruta Segura”. En el desarrollo de la reunión se conoció el informe del CPGF EM. Hernán Peñaherrera Segura, Director Regional de El Oro, de la Dirección Nacional de los Espacios Acuáticos (DIRNEA), quien expuso el protocolo logístico y operacional de “Ruta Segura”, y solicitó, una mayor difusión interna a los agremiados para lograr su efectiva aplicación. Por su parte, el Subsecretario Carofilis, informó sobre las acciones realizadas por la Dirección de Control Acuícola, en la verificación de la trazabilidad de las procesadoras primarias y comercializadoras de camarón de dudosa procedencia, junto al Servicio Nacional de Aduanas del Ecuador (SENAE).
Ambiente
En la agenda territorial El Oro 2018 se contó con la presencia, del Director Provincial de Ambiente, Ing. Reinaldo Sánchez, a quien se le solicitó el informe actualizado del proyecto presentado por la compañía YilportEcu S.A.
COYUNTURA “Dragado de los Muelles 1, 2, 3, 4, 5, 6; zona de maniobra y canal de acceso de Puerto Bolívar”. El funcionario informó que la licencia ambiental para la ejecución del proyecto, ya había sido otorgada, a pesar de las observaciones técnicas presentadas por el Director de Ambiente de la CNA, Leonardo Maridueña, al Ministro de Ambiente Tarsicio Granizo y a la Ministra de Acuacultura Katuska Drouet, en julio de 2017; en aquella mesa de trabajo estuvieron presentes los representantes de los gremios camaroneros de El Oro y el Presidente Ejecutivo de la Cámara Nacional de Acuacultura, José Antonio Camposano.
- FEBRERO 2018 En tal sentido, se solicitó al Subsecretario que canalice con el Ministerio de Trabajo, la socialización previa con los gremios camaroneros del país del Acuerdo próximo a emitirse para el sector camaronero, con la expectativa de que esa nueva modalidad contractual sea realmente aplicable a las necesidades del sector de acuerdo a su operatividad y desarrollo de la actividad acuícola.
se pondrá en funcionamiento la Dirección Provincial de Acuacultura en El Oro 2018, a fin de resolver diferentes temas con mayor celeridad. La agenda acuícola territorial de los gremios camaroneros de El Oro 2018, dejó sobre la mesa otros puntos que se irán desarrollando en futuras mesas de trabajo, en aspectos como: bio-seguridad, larvas, capacitación, entre otros temas●
Ante todos los planteamientos realizados en la mesa de trabajo, el Subsecretario de Acuacultura, Daniel Carofilis, confirmó que
Actualmente en el marco de esta agenda, se requirió al Director provincial de Ambiente, Reinaldo Sánchez, realice un mayor seguimiento al manejo de desechos sólidos y aguas servidas de los Gobiernos Autónomos Descentralizados Municipales (GADMS), para prevenir el perjuicio al medio ambiente en los Esteros. Además, ante la llegada de la estación invernal se pidió las facilidades necesarias para coordinar eficientemente los permisos de limpieza y desazolve de los canales.
Electrificación
Participó en la reunión El Ing. Juan Carlos Medina, Administrador de la Corporación Nacional de Electricidad (CNEL EP), Unidad de Negocio El Oro, quien realizó la exposición del informe técnico sobre el estatus del proyecto “Repotenciación de la red trifásica de medio voltaje para el Archipiélago de Jambelí, Etapas I, II, III, IV”.
Subsecretario de Acuacultura, Daniel Carofilis y el Capitán Segundo Calderón, Presidente de la Cámara de Productores de Camarón de El Oro.
En este encuentro se programó la interacción y participación informativa, entre la Subsecretaría de Acuacultura, los gremios camaroneros de El Oro, CNA, MINISTERIO DE ELECTRICIDAD Y ENERGÍA RENOVABLE y la CNEL, para lograr una óptima socialización del tema para los futuros beneficiarios.
Régimen laboral
Los representantes de los gremios camaroneros de El Oro, solicitaron revisar el modelo de contrato de trabajo, que contemplaría la normativa, en lo que respecta a las cuadrillas de pesca, de uso en el sector camaronero.
Ingeniero Kelvin Enríquez de la Corporación Nacional de Electricidad (CNEL EP) expuso sobre el proyecto de repotenciación de la red trifásica de medio voltaje para el Archipiélago de Jambelí.
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Diagnóstico oceanográficoatmosférico de las condiciones ambientales en la costa ecuatoriana En las últimas semanas se viene hablando de la presencia del fenómeno de "La Niña", en la costa ecuatoriana, incluso se han efectuado vaticinios sobre lo que podría ocurrir en la acuicultura en el país. Al respecto se trata de ilustrar a nuestros lectores sobre los pronósticos y su base científica para este anunciado evento, observaciones que hasta el momento no son concluyentes y que los efectos generados actualmente no van mas allá de un invierno normal, con condiciones oceanográficoatmosféricas similares a las del 2017.
Autor: Leonardo S. Mariduena Director de Ambiente de la Cámara Nacional de Acuacultura lmariduena@cna-ecuador.com
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l fenómeno de “El Niño” es una corriente cálida mientras que "La Niña" es un evento anómalo frío. En ocasiones, pero no siempre, el primer fenómeno es seguido por el segundo. Este es un periodo de vientos fuertes y un surgimiento de las aguas profundas sobre el Pacífico tropical oriental. Con "La Niña", las anomalías en la temperatura de las aguas superficiales del mar son esencialmente opuestas a las observadas durante "El Niño", estas son más frías que lo normal sobre el Pacífico tropical oriental y más calientes sobre el Pacífico tropical occidental. Cuando ocurre "La Niña" hay un mayor número de huracanes en la cuenca del Atlántico, en nuestro país se manifiesta con sequía. La Administración Nacional Oceánica y Atmosférica de Estados Unidos (NOAA), anuncia que el fenómeno climático responsable de crudos inviernos y grandes sequías en todo el mundo ha llegado y hará sentir sus efectos en varios meses. Sin embargo, la misma NOAA, en el reporte del 12 de febrero del 2018 expresa: “Una transición de, La Niña, a condiciones
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oceanográficas neutrales, es más probable que ocurra durante la primavera del hemisferio norte, esto es el periodo marzomayo, con una probabilidad de 55%.
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Fig. 1 NOAA, Feb. 12 2018.
Sin embargo (Fig 1) estas anomalías térmicas negativas, las viene observando la NOAA desde febrero del 2017 en profundidades de 20 metros, sin que se haya manifestado "La Niña" en nuestras costas; con los efectos que este oceanográfico atmosférico presente. Es necesario indicar, que la NOAA establece sus predicciones basadas en las observaciones efectuadas en lo que se denomina región 3; la misma que corresponde al Océano Pacifico Central, (la costa ecuatoriana corresponde a la región 1-2) aplicando modelos que le permiten predecir la ocurrencia de anomalías. El análisis de la (Fig. 2) de la NOAA, si bien es cierto presenta características anómalas en la temperatura superficial del mar a lo largo del Pacifico Central, se observa que frente a nuestras costas, Colombia y Panamá incluyendo gran parte de Perú las condiciones son normales para la época del año, no se evidencian anomalías; sin embargo de Galápagos hacia el Oeste la anomalía negativa oscila entre +0.30 C y +1.30 C .
Fig. 2 NOAA Feb, 12 2018
Al respecto se puede concluir que, aún cuando la NOAA indica que las condiciones de "La Niña" están presente, los valores de la Temperatura Superficial del Mar (TSM) muestran condiciones normales en el borde costero continental y un poco más frías alrededor de las Islas Galápagos. Según el Boletín Diario Oceanográfico del Instituto del Mar del Perú (IMARPE) emitido el 14 de febrero del 2018 “las condiciones térmicas muestran el incremento de la temperatura durante el transcurso de enero, presentando en la región valores de 20°C a 26°C, predominando condiciones normales con algunos núcleos cálidos al norte de la región y núcleos fríos cerca de la costa norte del Perú”. Conforme se muestran en la (Fig. 3) que se presentan a continuación, tomada del documento arriba indicado. Respecto a la situación climatológica, el Comité Nacional del ERFEN (Estudio Regional del Fenómeno El Niño), en su boletín del 9 de febrero del 2018, refiriéndose a las perspectivas indica “se prevé la ocurrencia de precipitaciones frecuentes de intensidad
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moderada a fuerte en el litoral ecuatoriano y de menor intensidad y frecuencia en las regiones insular, interandina y amazónica. Este régimen de precipitaciones generará un incremento de caudales en los ríos del litoral, con posibles inundaciones en las poblaciones que son vulnerables a este tipo de procesos. En las demás regiones del país se espera que los ríos no superen sus caudales normales históricos. El modelo de transferencia lineal prevé que las precipitaciones del Litoral estén en condiciones bajo la normal y cercanas a la normal mensual, es decir se presentaría una irregularidad en las precipitaciones. La climatología de febrero indicó que para la costa norte ecuatoriana la TSM fluctuó en alrededor de los 26°C, mientras que en la costa centro sur la TSM fue entre 25°C y 26°C con tendencias a su incremento progresivo. Por su parte en la región Insular se esperaría que la TSM se mantuvo entre 22°C a 23°C.
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Conclusiones: Las condiciones presentes aparentan normalidad en nuestra franja costera, vaticinándose un invierno normal; sin embargo aún la NOAA da una probabilidad de ocurrencia del 45%; que en caso de suceder, se manifestaría durante la estación seca, cuando siempre han prevalecido temperaturas más bajas y vientos más fríos debido a la presencia de la corriente de Humboldt. Las condiciones imperantes en el ecosistema marino costero a lo largo de la costa ecuatoriana corresponden a las condiciones normales que ocurren cada año durante la estación lluviosa. Por lo tanto no se esperarían cambios significativos que alteren los parámetros de la calidad del agua costera correspondientes a la época lluviosa del año●
Bibliografía consultada: - Boletín de la NOAA, 12 de febrero 2018. - Boletín Diario Oceanográfico, 14 de febrero del 2018 - Boletín del ERFEN, Boletín del 9 de Febrero del 2018.
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Grupos de interés ejercen presión para la inclusión del camarón en el Programa de Monitoreo de Importación de mariscos (SIMP), mientras importadores analizan el posible impacto
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Autor: Jason Huffman Reporte Seaman
adicional
Ecuador estaría en mejor forma que la mayoría de los países para manejar SIMP. Foto de Stephen Velasco.
de
Tom
Reporte del 18 de enero de 2018 del portal Undercurrent News
n Washington, DC, se han intensificado los esfuerzos de lobby dirigidos a obligar a los importadores de camarón de los Estados Unidos a cumplir rápidamente con los nuevos requerimientos de importación de mariscos de la Administración Nacional Oceánica y Atmosférica (NOAA por sus siglas en inglés), al tiempo que el congreso de la nación trabaja en modo de crisis para evitar el cierre del Gobierno. El 18 de enero de 2018, según reporta el portal Undercurrent News, los legisladores parecían tener casi suficientes votos para otra resolución que mantendría al gobierno de los Estados Unidos en funcionamiento hasta el 16 de febrero pasado, otorgando más tiempo para un mayor acuerdo presupuestario fiscal para este año. Pero los importadores estadounidenses, tienen una preocupación mayor respecto a la pelea del presupuesto en Washington: el drama mantiene viva una disposición contenida en una legislación fiscal cuyos impactos en el mercado serían incalculables.
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En particular, la medida que a ellos más les preocupa está oculta en el proyecto de ley del Senado 1662, una legislación introducida en julio del año pasado, para financiar los departamentos de Comercio y Justicia, así como la Administración Nacional de Aeronáutica y Espacio (NASA por sus siglas en inglés) y otros programas relacionados con la ciencia. La sección 513 del proyecto le otorgará a Comercio, que es una agencia emparentada con la Administración Nacional Oceánica y Atmosférica (NOAA por sus siglas en inglés), solo 30 días después de la promulgación del proyecto para empezar a exigir a los importadores de camarón que cumplan con un nuevo "Programa de Monitoreo de Importación de Mariscos" (SIMP), un esfuerzo para combatir la pesca ilegal no reportada ni regulada, así como los fraudes de pesca. Pese a que el Servicio Nacional de Pesca Marina de NOAA ha prometido un enfoque inicial más suave de la aplicación, la fecha límite del cumplimiento para los
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importadores de algunas 15 diferentes especies de pescado, incluyendo bacalao, mahi mahi, mero, pez espada y cinco tipos diferentes de atún, quedó para el 1 de enero de 2018. Después de esa fecha, se esperaba que los importadores empezaran a satisfacer 17 nuevos requerimientos de mantenimiento de registro, incluyendo dónde y cuándo el pescado es atrapado, la cantidad y peso de la cosecha y el tipo de maquinaria utilizada. La información debe ser ingresada en un programa electrónico. La NOAA indefinidamente excluyó al camarón y a la abulón de los requerimientos, señalando en la regla final que a los productores domésticos de camarones de acuacultura no se les requiere proporcionar el tipo de información que SIMP solicita. Esa declaración parece confirmar lo que sugirieron los productores domésticos de que la administración estaba preocupada sobre una posible objeción de la Organización Mundial de Comercio (OMC). Pero esto podría ser modificado por la sección 513 del proyecto de presupuesto de Comercio y Justicia, una medida peleada por los senadores republicamos Thad Cochran de Missouri, que es el miembro más antiguo del congreso (40 años) y el poderoso Presidente del Comité de Asignaciones del Senado, y Richard Shelby de Alabama, Presidente del Comité de Comercio, Justicia y panel de Ciencia. “Los presidentes Cochran y Shelby mostraron el 18 de enero pasado que les importa la sobrevivencia de la industria de camarón estadounidense, el beneficio económico y el crecimiento del empleo en las comunidades de la costa del golfo”, señaló Edward T. Hayes, consejero de la Asociación Americana de procesadores de camarón (ASPA), uno de los grupos que abogan por el SIMP para el camarón, según un boletín de prensa emitido en julio de 2017. “Esta medida asegurará que la salud y seguridad del consumidor americano estará en primer lugar cuando se trate de importaciones de camarón de acuacultura”, indicó.
La Sección 513, contenida en el Proyecto de Ley del Senado 1662, eliminaría la suspensión que impide que NOAA aplique sus requisitos SIMP a las importaciones de camarón.
Legisladores del Estado del Golfo se congregaron también en la Cámara de Representantes La legislación de presupuesto de la Cámara aún no incluye ninguna provisión para aplicar el SIMP al camarón, así que es más probable que la medida de la sección 513 del Senado tendrá que sobrevivir a una “conferencia” como se denomina a la reunión convocada por varios miembros del Senado y representantes de la Cámara para resolver diferencias y alcanzar consensos sobre similares proyectos de legislación.
Pero eso es justo lo que espera ASPA y la Alianza de Camarones del Sur (SSA), otro grupo que representa a los productores americanos de pesca salvaje y cría en finca de camarón doméstico. Ellos indican que los cambios igualarán las condiciones de competencia en el mercado local. “Para ser claros, no estamos contra las importaciones de camarón. Obviamente el mercado estadounidense demanda mucho más camarón del que nuestra pesquería puede producir. Pero hemos hecho y continuaremos haciendo todo lo
El senador de Missouri Thad Cochran, el poderoso presidente del Comité de Asignaciones del Senado, es una de las fuerzas detrás de la medida que requeriría que los importadores de camarón cumplan con SIMP. Foto del Comité de Asignaciones del Senado.
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Otro gran importador estadounidense señaló que su empresa ha estado monitoreando muy de cerca la situación y coincidió en que no sería difícil cumplir con el SIMP. Gracias a reglas de comercio, requerimientos de compradores y análisis de riesgos y controles de puntos críticos (HACCP), su compañía ya captura información de trazabilidad de todo el camarón que suministra y la conserva durante cinco años, dijo. Tras un cambio a la propuesta anterior, SIMP requiere que los records se mantengan por dos años. Su mayor temor, dijo, es que las agencias de regulación estadounidenses no tengan suficiente personal para manejar las nuevas responsabilidades.
La ventaja latina Dos barcos luchan por la captura de camarón salvaje en la costa de Georgia. Foto de Bruce Tuten.
que esté en nuestro poder para pelear contra la importación ilegal de camarón, la cual disfruta de una sustancial ventaja competitiva en el mercado sobre nuestros pescadores”, escribió John Williams, director ejecutivo de SSA, en una carta enviada al inicio de este mes al Capitolio. La carta de Williams urge a legisladores y ejecutivos de diversas agencias gubernamentales a contactar al representante de Texas y director republicano del Comité de Asignaciones de Comercio, Justicia y Panel de Ciencia, John Culbertson, y otros miembros del subcomité para solicitarles que acepten la propuesta del Senado. A mediados de enero pasado, no menos de 11 miembros del estado del Golfo de la Casa de Representantes de Estados Unidos, 10 republicanos y 1 demócrata, enviaron una carta firmada conjuntamente al secretario de Comercio, Wilbur Ross, solicitando al jefe de la agencia que supervisa NOAA que elimine la exclusión del camarón al SIMP. “Este importante paso protegerá a los Estados Unidos de ser un terreno de desecho de productos del mar ilegales y contaminados, y estabilizará a un mercado que ha estado sujeto a una larga manipulación”, señala la
carta, que supuestamente fue organizada por la oficina del representante republicano de Louisiana, Garret Graves.
Preocupación La industria estadounidense de importación de camarón está preocupada, pero se siente bien acerca de su capacidad para ponerse al día, de dársele el tiempo suficiente. “No tengo duda de que esto pasará”, señalaron un grupo de importadores de camarón al ser consultados sobre el tema.
Los proveedores de camarón en países de Asia, como Tailandia, tendrán mayores problemas que los países latinoamericanos, como Ecuador, proporcionando información relacionada con el SIMP debido a la escala de sus industrias de camarón de finca y el tamaño de sus operaciones pues éstas tienden a ser más grandes.
La Asociación Nacional de Restaurantes también presiona Las cosas podrán verse desalentadoras para los importadores, pero no todas las presiones
“Sin embargo, al igual que con similares acciones gubernamentales, esperaríamos que la FDA (Administración de Drogas y Alimentos) flexibilicen la aplicación y su cumplimiento al principio”, dijeron. A pesar de esta postura, sobre el mismo tema, un importador de camarón de acuacultura de India, afirmó que un mes no sería suficiente tiempo para estar listos. El camarón de finca no tendrá dificultades en cumplir dijo, pero “todavía necesitaremos un mínimo de seis meses de aviso para documentar apropiadamente la adquisición de materia prima”, agregó.
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Una finca de camarón en Tailandia. Los importadores pueden tener dificultades para mantenerse al día con los nuevos requisitos de mantenimiento de registros, ya que las operaciones tienden a ser más pequeñas y numerosas.
COYUNTURA
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en Washington provienen de aquellos que buscan que el SIMP se aplique al camarón. Hay que contar a la Asociación Nacional de Restaurantes (NRA por sus siglas en inglés), entre quienes están asediando a los miembros del Congreso para mantener la exención. “La industria de servicio de alimentos depende de fuentes de mariscos importados, para proveer a los restaurantes a lo largo del país con comida de mariscos saludables y deliciosos. Si esta provisión de último minuto se mantiene en el proyecto, causará disrupciones en la cadena de abastecimiento de camarón, y probablemente llevará a problemas de disponibilidad, pérdidas de empleo y precios más altos para los consumidores”, dijo Cicely Simpson, vicepresidente ejecutivo de NRA, en una carta enviada en diciembre. Pueda que no sea la Asociación Nacional de Rifle (NRA por sus siglas en inglés), pero esta otra NRA también es un lobby poderoso, representando a una industria con cerca de $799 billones en ventas anuales y 14.7 millones de trabajadores, casi el 10% de la fuerza de trabajo en Estados Unidos●
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GENÉTICA
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Caracterización funcional de un gen modulador 1 de especies oxígeno reactivas en Litopenaeus vannamei Autores: Hong-Hui He , Yi-Miao Chi , Kai Yuan , Xiao-Yun Li , Shao-Ping Weng , Jian-Guo He , Yi-Hong Chen , * b, c
b, c
a
b, c
b, c
a, b, c
a, c
a
Key Laboratory of Marine Resources
and Coastal Engineering in Guangdong Province, South China Sea Bio-Resource Exploitation and Protection Collaborative Innovation Center (SCS-REPIC), School of Marine Sciences, SunYat-sen University, 135 Xingang Road West, Guangzhou 510275, PR China. b
School of Life Sciences, Sun Yat-sen
University,
135
Xingang
Road
West,
Guangzhou 510275, PR China. c
State
Key
Laboratory
for
Biocontro,
Institute of Aquatic Economic Animals and Guangdong Province Key Laboratory for
Aquatic
Economic
Animals,
SunYatsenUniversity, 135 Xingang Road West, Guangzhou 510275, PR China.
Introducción
L
as especies oxígeno reactivas (ROS) son moléculas químicamente reactivas que contienen oxígeno, e incluye peróxidos, radicales hidroxiles, superóxidos, y oxígeno libre. Las ROS son producidas de manera intracelular a través de varios mecanismos, dependiendo de la célula y el tipo de tejido. El complejo NADPH oxidasa (NOX) es el principal productor de ROS y está situado en las membranas celulares, mitocondrias, peroxisomas, y retículo endoplásmatico. La mitocondria convierte la energía celular en trifosfato adenosina (ATP) por fosforización oxidativa. Durante la fosforización oxidativa, los protones son transportados a través de la membrana mitocondrial por la cadena de transporte de electrones. Aquí, los electrones son transferidos a través de una serie de proteínas por una reacción oxidación-reducción, y finalmente son recibidas por una molécula de oxígeno. La mayoría de moléculas de oxígeno son reducidas para producir agua, mientras que algunas son prematuramente e incompletamente reducidas para producir radicales superóxido (O-2). Además de ser un subproducto natural del metabolismo del oxígeno, las ROS también juegan un rol importante en la señalización celular y homeostasis. Las ROS están
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también involucradas en la inmunidad; por ejemplo, las ROS son mediadoras de la activación de la vía TRAF6-ASK1-p38, que es requerido para la mediación de TLR4 para inmunidad innata en células HEK293. Las ROS también poseen varias funciones fisiológicas, incluyendo la regulación del crecimiento de células vegetales. Estas moléculas están también involucradas en la diferenciación celular, por ejemplo, las ROS mitocondriales promueven la diferenciación epidermal y el crecimiento del folículo capilar. Sin embargo, niveles intracelulares elevados de las ROS también pueden causar daños a lípidos, proteínas y al ADN, lo que es conocido como estrés oxidativo. Bajo estrés oxidativo, los niveles de las ROS incrementan dramáticamente, dañando así, estructuras celulares. Las ROS también son generadas por fuentes externas como la radiación ionizada. El daño extensivo de las ROS a la mitocondria puede generar una apoptosis o muerte celular programada. El estrés oxidativo causa varias condiciones patofisiológicas en el cuerpo, como enfermedades neurodegenerativas, cáncer, síndrome de fatiga crónica, trastornos del
GENÉTICA
- FEBRERO 2018 corazón y vasos sanguíneos, y enfermedades de tipo inflamatorio. Por su amplia gama de funciones, es esencial que las células y los tejidos mantengan la homeostasis de las ROS. Algunos circuitos regulan la inducción de ROS como una respuesta protectora a un estrés oxidativo. Por ejemplo, p53 previene la acumulación de daño que pudiera causarse por la producción endógena continua de H2O2 regulando GPX1 y sestrinas, que son funciones de sulfiredoxinas homólogas. El C-myc aumenta la tolerancia de ROS activando la transcripción de genes de biosíntesis de GSH en respuesta al H2O2. El factor relacionado del gen NF-E2, de 2-Kelch como la proteína asociada a ECH1 (ruta Nfr2-Keap1), que regulan las respuestas de protección contra el estrés ambiental y xenobiótico, son una señal clave que encamina a organismos multicelulares al estrés antioxidante. Las funciones de esta relación se reflejan por los genes codificantes Nrf2 que comprenden enzimas y antioxidantes xenobióticos de fase II. En años recientes, se ha determinado el papel esencial que desempeña un modulador de la especie oxígeno reactivo de proteína mitocondrial 1 (ROMO1), en la regulación redox dependiente de la dinámica mitocondrial y la transducción de señales dependientes de las ROS. Un número considerable de informes indican que el estrés ambiental incide en el aumento del nivel de ROS – que son dañinos para el camarón -, mientras que los niveles bajos son importantes para la inmunidad innata en camarones. Además, la hipoxia ambiental incrementa la producción de las ROS en L. vannamei, y las enzimas antioxidantes superóxido dismutasa (SOD), catalasas (CAT), y glutatión peroxidasa (GPx) en extractos de músculo y hepatopáncreas, inducen cambios significativos en respuesta a ROS. La exposición a Cd2+ también induce estrés oxidativo y daño al ADN, así como también incrementa la actividad respiratoria en hemocitos en L. vannamei. La exposición a largo plazo al estrés por pH, induce la producción de ROS en hemocitos de L.
vannamei, así como incrementa niveles de MDA y de la expresión ARNm de catalasa. Estudios previos han revelado que las ROS juegan un papel sobre la tolerancia en el virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV). Por ejemplo, el WSSV inhibe la producción de las ROS en células huésped 6h post infección, lo que pudiera reprimir la replicación del WSSV. Hasta ahora, aún no se ha aclarado el mecanismo de regulación de ROS ante respuestas de estrés de L. vannamei. En este estudio, se investiga la regulación de las ROS de L. vannamei, el gen homólogo del modulador de especies oxígeno reactivas 1 (LvROMO1), que es bien conocido se vincula a la generación de ROS en vertebrados clonados. Nosotros nos centraremos en la relación entre la generación de ROS inducida por estrés y la expresión de LvROMO1, para obtener algunos datos útiles sobre la regulación de las ROS en L. vannamei.
Materiales y métodos Experimento con camarón Especímenes juveniles (~7 g) fueron criados en una camaronera en la ciudad de Zhuhai, provincia de Guangdong, China. Los camarones fueron aclimatados por lo menos una semana en un tanque con sistema de recirculación de agua, el mismo que fue llenado con agua de mar (2.5% de salinidad), a una temperatura de alrededor 28°C antes del experimento. Clonación de longitud completa de LvROMO1 ADNc de L. vannamei Basados en la secuencia EST de LvROMO1 en el GenBank (Acceso No. FE083597), se diseñaron los primers para obtener el extremo 5´y 3´ de LvROMO1 amplificando rápidamente los extremos de ADNc (RACE). La plantilla de ADNc para la reacción en cadena de la polimerasa RACE (PCR) se preparó utilizando el kit de amplificación BD SMART RACE de ADNc (Clontech, Japón). Las regiones 50 y 30 no traducidas (UTR) se amplificaron usando primers LvROMO1 5´ RACE1/LvROMO1 5´RACE2 y LvROMO1 3´ RACE1/LvROMO1 3´ RACE2, respectivamente.
La PCR obtenida se realizó utilizando los productos de PCR de la primera ronda como plantillas y LvROMO1 5´RACE2 o LvROMO1 3´ RACE2 junto con un primer universal (NUP) A, respectivamente, y el protocolo de PCR fue el mismo que la primera ronda de PCR. Las secuencias de primers están enlistadas en la Tabla 1. Análisis bioinformático La proteína de dominio de LvROMO1 fue predicha usando el programa SMART (http:// smart.embl-heidelberg.de/ ). La secuencia de proteína ROMO1 en otras especies del GenBank fueron buscadas y analizadas usando BLAST (http://www.ncbi.nlm.nih. gov/BLAST/ ). El dominio de ROMO1 fue analizado independientemente por el Clustal de Alineación de secuencia múltiple Omega (http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/ ). Se elaboró un árbol filogenético vecino (NJ) usando las secuencias de aminoácidos deducidas de ROMO1 empleando el método Bootstrap MEGA 6.0., con 3000 replicaciones. Investigación del perfil de expresión y análisis RT-PCR en tiempo real Para perfilar la expresión de LvROMO1, se sacrificaron 15 camarones para utilizar y colectar sus músculos, hemocitos, branquias, corazones, ceca pílorica, pedúnculos, hepatopáncreas, epidermis, nervios, estómago e intestinos. Los camarones fueron luego divididos en tres muestras paralelas para el análisis de la expresión tisular. El ARN fue extraído usando un Mini Kit RNeasy (Qiagen, Alemania) para luego ser transcrito de forma inversa en ADNc usando un kit de reactivo Script RT (TaKaRa, Japón). Los ensayos de RT-PCR en tiempo real fueron realizados con un sistema LightCycler 480 (Roche, Alemania). Los resultados se calcularon usando el método 2-ΔΔCt después de la normalización a LvEF-1a (número de acceso del GenBank GU136229). Los primers QPCR-LvROMO1-F / QPCRLvROMO1-R y QPCR-LvEF-1 a-F / QPCRLvEF1a-R se usaron para detectar LvROMO1 y LvEF-1a, respectivamente (Tabla 1). El RTPCR en tiempo real se realizó en un Sistema LightCycler 480 (Roche, Alemania). Los parámetros optimizados de ciclos
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GENÉTICA
- FEBRERO 2018 de LvROMO1 en camarones infectados, cada L. vannamei sano fue inyectado vía intramuscular en el segundo segmento abdominal con 50 μL de WSSV inóculo (alrededor de 105 viriones), 50 μL de V. alginolyticus (7.0 x 105 CFU/g), o PBS como control. El ARN total fue aislado de los hemocitos a los 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72 y 96 horas post infección (hpi). Para el experimento de infección MC-LR, se diluyó MC-LR (Sigma-Aldrich) a una concentración de 14 ng/ μL con PBS, y cada L. vannamei sano fue inyectado en el segundo segmento abdominal con 50 μL de MC-LR diluido. El ARN total se aisló inmediatamente de las branquias a las 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48, 72 y 96 horas después de haberlos inyectado. Para la inducción al estrés oxidativo, se inyectaron a los camarones 5 μL/50 μL de b-glucano, mientras que el grupo de control fueron inyectados con PBS (n = 300). El ARN total se aisló inmediatamente de hemocitos a las 3, 6, 9, 12, 18, 24, 30, 36, 48 y 72 horas después de la inyección de MC-LR. Síntesis de ARN bicatenario Con el fin de investigar la función de LvROMO1, se usó la interferencia de ARN para disminuir la expresión de LvROMO1 en L. vannamei. Las plantillas de ADN de LvROMO1 dsRNA (designado como dsLvROMO1) fueron preparadas mediante PCR usando los pares de primers, DsRNA-LvROMO1-T7-F / DsRNALvROMO1-R y DsRNALvROMO1-F / DsRNALvROMO1-T7-R (Tabla 1).
térmicos fueron los siguientes: 95°C durante 2 min para activar la polimerasa, seguido de 40 ciclos de 95°C durante 15 s, 60°C durante 15 s, y 72°C para 10 s. Después del protocolo de ciclado, las curvas de fusión se obtuvieron mediante el aumento
de temperatura de 72°C a 95°C (0.5 °C/s) para desnaturalizar el ADN bicatenario. Desafíos inmunológicos y análisis de RTPCR en tiempo real Para investigar los perfiles de expresión
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Productos con un promotor T7, fueron confirmados mediante una secuenciación. Posteriormente, los productos se usaron como plantillas para las hebras del ARN en sentido y antisentido, y luego fueron sometidas a transcripción in vitro y purificación mediante el uso del Sistema-T7 RiboMAX ™ (Promega, EE. UU.) para la producción de ARN a gran escala, siguiendo el protocolo del fabricante. El dsLvROMO1 tenía 537 pb de longitud. Se prepararon plantillas de ADN para la proteína de fluorescencia verde (dseGFP) de la síntesis de ARNds, como se describe en la bibliografía.
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Fig. 1. Caracterización de LvROMO1. (A) Los ORF´s de las secuencias de nucleótidos se muestran en letras mayúsculas; las secuencias 5´ y 3 -UTR se muestran en letras minúsculas. Los nucleótidos y aminoácidos están numerados a la izquierda de las secuencias. Los dominios conservados fueron sombreados. Los motivos de inestabilidad 3-UTR (attta) están enmarcados. Las señales poli A (aataaa) fueron subrayadas. (B) alineamiento de secuencia múltiple de las proteínas ROMO1.
Reporte de ensayos sobre la doble luciferasa Para investigar la influencia de LvROMO1 en la expresión génica de péptidos antimicrobianos (AMP), se llevaron a cabo ensayos para reportar la doble luciferasa. El vector de expresión para la lectura de larga duración de cuadro (ORF) de LvROMO1 se realizó usando pAc5.1 / V5-His B (Invitrogen, EE. UU.), y los productos de PCR se amplificaron con primers pAcB-LvROMO1KpnI-F / pAcB-LvROMO1-XhoI-R (Tabla 1). El gen informador de vectores pGL3Atta, pGL3-Drs, y pGL3-Mtk y el vector de expresión pAcB-LvDorsal fueron obtenidos
previamente en el laboratorio y utilizado en los ensayos de luciferasa. Los ensayos para el gen informante se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Localización subcelular de LvROMO1 Se construyó el vector de expresión pIZeGFP-LvROMO1 insertando el fragmento de ADN eGFP en los vectores recombinantes de pIZ-LvROMO1 (primers en la Tabla 1). Células de Spodoptera frugiperda 9 (Sf9) fueron mantenidas a 28°C en suero Grace con un medio sin serum (Sigma Aldrich, EE. UU.) suplementado con un 10% de suero bovino fetal (FBS). Las células fueron sembradas en cubre
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objetos tratados con poli-L-lisina en 24 platos. Después de 24 h, las células fueron transfectadas con pIZeGFP-LvROMO1. A las 48 h después de la transfección, las células del cubreobjeto fueron lavadas dos veces con PBS y se tiñeron con la solución Hoechst 33258 (Beyotime, China) y el Kit MitoTracker Red (Beyotime). Las células tratadas se observaron bajo un microscopio de barrido láser confocal (Leica TCS SP5). Prueba de mortalidad acumulativa de LvROMO1 en camarones post infección con WSSV o V. alginolyticus La expresión de LvROMO1 fue regulada negativamente por la interferencia del ARN (ARNi) usando una secuencia específica
GENÉTICA de ARNds, y la RT-PCR fue realizada para investigar la eficiencia de RNAi a las 72 h después de haber inyectado ARNds. El factor de alargamiento de L. vannamei 1a (LvEF1a) se usó como control interno. Para determinar la mortalidad acumulada de LVROMO1 en camarones caídos, camarones sanos fueron inyectados en el segundo segmento abdominal con 7 μL de dsLvROMO1, dseGFP o PBS (n = 150). Aproximadamente 48 h después, los camarones fueron inyectados nuevamente con 50 μL del inóculo de WSSV, V. alginolyticus o PBS (n = 50) La mortalidad acumulada se registró cada 12 horas. Detección intracelular de niveles ROS en células S2 Las células S2 fueron transfectaron con el vector de expresión pAcB-LvROMO1 o el AcBLvActin200. Aproximadamente 48 horas más tarde, las células fueron lavadas dos veces con PBS, y teñidas con 5mm de CellROX® Green Reagent (Life Technologies, USA) durante 30 min a 28°C. Después de dos baños adicionales con PBS, los cubreobjetos fueron montados en el portaobjeto con 2 mL de solución antifade. Las señales fluorescentes fueron examinadas usando un microscopio de escáner con láser confocal (Leica TCS SP5).
- FEBRERO 2018 Se usó el software ImageJ para determinar la intensidad de fluorescencia total de las células en el campo y área celular para calcular la fluorescencia total de cada grupo. La expresión de LvROMO1-V5 y LvActin200-V5 se confirmó con inmunotransferencia mediante el uso del anticuerpo anti-V5 (Invitrogen, USA), y se obtuvieron señales con un kit de prueba de sustrato de máxima sensibilidad SuperSignal West Femto (Pierce).
Análisis histopatológico y detección de apoptosis A las 72 horas de la inyección de MC-LR, el hepatopáncreas de los camarones fue fijado en una solución Davidson AFA (33% etanol, 22% formalina, 11.5% ácido acético, 33.5% H2O) por 24 horas, para luego ser transferidos a 70% etanol y almacenados hasta su análisis histopatológico. Secciones de parafina de tejido embebido fueron teñidos con hematoxilina y eosina (H&E). Para la detección de apoptosis, después de 48 h de la inyección con MC-LR, los hematocitos del camarón fueron aislados inmediatamente por anticoagulación. Luego, las mezclas fueron centrifugadas a 1,000 g por 7 min.
Fig. 2. Expresión relativa de LvROMO1 en varios tejidos y localización subcelular de LvROMO1. (A) La expresión relativa de LvROMO1 en varios tejidos se comparó contra el músculo. Los resultados se basan en tres experimentos independientes y se expresan como valores de Desviación Estándar media ± DE. (B) La ubicación de las proteínas se visualizó bajo un microscopio confocal de escaneo láser un Leica. La proteína de fusión eGFP-LvROMO1 se mostró expresada en la mitocondria.
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El sobreflotante fue descartado, y lo que precipitó fue lavado con 1 x Anexina V tampón de unión (10 mM HEPES / NaOH, pH 7.4, 140 mM NaCl, 2.5 mM CaCl2) y luego se centrifugó de nuevo a 1, 000 g durante 7 min. Posteriormente, las células se resuspendieron en el tampón y la tinción fue suministrada por un Kit de detección de apoptosis de Annexin V-FITC (SigmaeAldrich, EE. UU.) siguiendo el protocolo del fabricante. Después del teñido, se realizó una citometría de flujo con BD Accuri C6 (BD Biosciences, EE. UU.), para determinar la relación de apoptosis de los hemocitos. Análisis estadístico Los datos numéricos se presentaron como ± desviación estándar media (SD). Los promedios de dos muestras se compararon mediante la prueba t de Student. El asterisco * indica p <0.05, ** indica p <0.01, en todos los casos. Todos los experimentos se repitieron al menos tres veces. Además, las diferencias en los niveles de mortalidad entre los tratamientos se analizaron mediante el gráfico de Kaplane-Meier (prueba log-rank Х2).
Resultados y Discusión Clonación y análisis de secuencia de LvROMO1 La longitud completa del ADNc de LvROMO1 fue de 945 pb, la cual incluía 56-bp 5´de una región no traducida (UTR), y un 649-bp 3´-UTR con una cola (A) de poli (Fig. 1A). El ORF de LvROMO1 tiene una longitud de 249 pb y codifica una proteína putativa de 83 aminoácidos con un calculado peso molecular de 8,68 kDa. Durante el análisis de dominio conservador utilizando el programa SMART, se demostró que LvROMO1 contenía un Dominio putativo ROMO1 (Fig. 1C). La mayoría de los miembros de esta familia de proteínas contienen aproximadamente 100 aminoácidos que son altamente homólogos en su secuencia de proteína (Fig. 1B). Los ROMO1 están ampliamente distribuidos y podrían ser detectados tanto en las levaduras, como en humanos. Estas son proteínas mitocondriales responsables del aumento del nivel de ROS intracelular.
GENÉTICA
- FEBRERO 2018 Análisis filogenético Para investigar la relación entre LvROMO1 y sus homólogos, se llevó a cabo múltiples secuencias alineadas, que demostraron que las proteínas ROMO1 están conservadas en invertebrados (Fig. 1B). LvROMO1 se mostró 82% de igualdad que ROMO1 de otro camarón Hyalella azteca, y 79% de igualdad a ROMO1 de la hormiga Pogonomyrmex barbatus. Por lo tanto, el árbol filogenético mostró que estos ROMO1s pueden estar divididos en tres grupos (Fig. 1D). El grupo 1 y OlROMO1. El grupo 3 incluía LvROMO1, DmROMO1, BmROMO1, TcROMO1, PbROMO1, y TpROMO1. Estos hallazgos indican que ROMO1s son proteínas altamente conservadas tanto por vertebrados como invertebrados. Desde que se probó que el ROMO1 juega un rol en mamíferos en cuanto a la inducción de la producción de ROS en la mitocondria, es probable que LvROMO1 también funcione en regular la producción de ROS en L. vannamei. LvROMO1 está transcrito constitutivamente en varios tejidos y localizado las mitocondrias El análisis de RT-PCR en tiempo real mostró que LvROMO1 se expresa en todos los tejidos que se examinaron en este estudio. El LvROMO1 se reguló positivamente en la epidermis y hemocitos del camarón, lo que fue 11.2 y 13.0 veces mayores que en el músculo, respectivamente (Fig. 2A). El corazón demostró el nivel más bajo de expresión LvROMO1 (Fig. 2A). Como la epidermis y los hemocitos son tejidos importantes para la inmunidad innata del camarón, la expresión relativamente alta de niveles de LvROMO1, en estos tejidos particularmente, pueden ser lo que contribuya a la resistencia del camarón a los microorganismos patógenos. La localización subcelular de las proteínas proporciona pistas esenciales con respecto a sus funciones. ROMO1 es el mediador clave de la producción intracelular de ROS que ha sido localizada en la membrana externa mitocondrial y se sabe que está relacionado con el daño oxidativo del ADN. En este estudio, un ensayo de
Fig. 3. Efecto biológico de la inyección de b-glucano. (A) El nivel de expresión de LvROMO1 se midió mediante RT-PCR en tiempo real y se normalizó a LvEF-1a y se comparó sobre el tiempo cero. (B) Los niveles de ROS se normalizaron con el nivel de ROS en células S2 transfectadas con plásmido vacío. La transfección de pAcB-LvROMO1 aumentó el nivel de ROS aproximadamente 3.4 veces que el grupo pAcB-LvActin200. La expresión de LvActin200-V5 y LvROMO1-V5 se detectaron con anticuerpos anti-V5.
distribuciones subcelulares demostró que LvROMO1- eGFP se expresa en células Sf9 y se agrega predominantemente en citoplasma. La tinción MitoTracker Red confirmó que LvROMO1-eGFP estaba localizado en la mitocondria (Fig. 2B). Por el contrario, el eGFP no fusionado se distribuyó uniformemente. En el presente estudio, se demostró que LvROMO1 sobreexpresado aumentó significativamente los niveles de ROS en células S2, que eran aproximadamente 3.4 veces que el vector del grupo control; y el LvActin200 sobreexpresado no aumentó los niveles de ROS en células S2 (Fig. 3B). Estos resultados, sugieren que LvROMO1
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puede también localizarse en la mitocondria de L. vannamei, y funcionar en la regulación de ROS. LvROMO1 es inducido sucesivamente por estrés oxidativo, por inyección de MC-LR, o infección de V. alginolyticus, pero no por infección por de WSSV Un estudio previo demostró que el b-glucano (5 μM/μL) causa estrés oxidativo en el camarón, lo que se confirmó a través de un ensayo de citometría de flujo en este estudio. El perfil de la expresión de LvROMO1 en hemocitos se detectó mediante un RT-PCR en tiempo real, y este reveló que, sobre el estrés oxidativo, la expresión de LvROMO1 aumentó de 12 hpi a 96 hpi, y alcanzó un pico máximo de 36 hpi, que era 4.4 veces mayor que la del control (Fig. 3A).
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Fig. 4. Efecto dañino de la inyección de MC-LR en L. vannamei. [(A) a] El nivel de expresión de LvROMO1 se midió usando un RT-PCR en tiempo real; [(A) b] La inyección de MC-LR aumentó significativamente el nivel de ROS en los hemocitos de camarón en varios momentos. [(B) a] La expresión de LvROMO1 disminuyó 72 h después de la inyección de dsLvROMO1, pero no la inyección de dseGFP; [(B) b] La regulación negativa de LvROMO1 redujo significativamente la tasa de apoptosis de los hemocitos de camarón en el tratamiento MC-LR, en comparación con el grupo inyectado con dseGFP; [(B) c] A las 72 h post Inyección de MC-LR, la estructura de las células del hepatopáncreas del camarón, fueron seriamente dañadas.
Los bajos niveles de ROS, que son un componente importante de inmunidad innata, también pudieran erradicar microorganismos patógenos. Para investigar la función inmune de ROMO1 en L. vannamei, se investigó el perfil de la expresión de LvROMO1 en hemocitos de camarón sobre WSSV-, sobre la infección de V. alginolyticus o la inyección de MC-LR. La expresión de LvROMO1 alcanzó su punto máximo a las 9 h después de la infección con WSSV, y fue 6.8 veces mayor que la del control. Luego regresó a su nivel normal de expresión a las 30 h después de la infección por WSSV (Fig. 5A). LvROMO1 incrementó 3 h después de la infección por V. alginolyticus, y
alcanzó su pico 48 h más tarde, siendo 15.5 veces mayor que la del control (Fig. 6A). De hecho, algunos estudios han sugerido que ROS afecta la capacidad anti-patógena del camarón. Por ejemplo, el tratamiento para WSSV desafió al camarón con una doble dosis de b-glucano, resultando en una reducción en la replicación viral. LvROMO1 podría inducir la producción de ROS en el camarón, y la infección del WSSV- o V. alginolyticus afecta la expresión de LvROMO1, como se muestra en el presente estudio, y que a su vez pudiera afectar la capacidad anti-WSSV o anti V. alginolyticus de L. vannamei.
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Inyectar MC-LR al camarón, aumenta la producción de ROS, resultando finalmente en apoptosis El MC-LR es severamente dañino para una variedad de organismos acuáticos, incluyendo el camarón. La citometría de flujo indicó que inyectar MC-LR aumenta significativamente los niveles de ROS en los hemocitos del camarón [Fig. 4A (b)]. El análisis histopatológico también mostró que la inyección de MC-LR da como resultado una lesión en el hepatopáncreas [Fig. 4B (c)]. Los camarones inyectados con MC-LR presentaron hepatopáncreas con extensos y severos daños estructurales [Fig. 4B (c)].
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Fig. 5. LvROMO1 juega un rol en la resistencia a V. alginolyticus. (A) La expresión de LvROMO1 en hemocitos en diversos puntos temporales después de infección por V. alginolyticus. (B) Actividad relativa de luciferasa de pGL3Mtk, pGL3Atta y pGL3Drs en células S2. (C) La infección por V. alginolyticus aumentó significativamente el nivel de ROS en los hematocitos del camarón en varios momentos. (D) La mortalidad acumulada de camarones infectados con V. alginolyticus.
En camarones que muestran una regulación de la expresión de LvROMO1 por ARNi [Fig. 4B (a)], la citometría de flujo reveló que la relación de apoptosis de los hemocitos disminuyó significativamente con la inyección MC-LR, en comparación con la del camarón control [Fig. 4B (b)]. Estos hallazgos sugieren que la inyección de MC-LR induce a la expresión de LvROMO1 y termina en apoptosis de hemocitos, así como una gran lesión que involucra al hepatopáncreas. La caída de la expresión de LvROMO1 disminuye la producción de ROS y aumenta la mortalidad acumulada de camarones infectados por V. alginolyticus Para comprender mejor las funciones de las ROS ante respuestas antipatogénicas de L. vannamei, se evaluaron los niveles de ROS de los hemocitos de camarón infectado con V. alginolyticus. La citometría de flujo indico que la infección por V. alginolyticus induce un aumento en los niveles de ROS (Fig. 5C). Anteriormente mostramos que LvROMO1 podría mejorar los niveles de ROS (Fig. 3B),
y por lo tanto se nos pidió que mostremos si LvROMO1 está involucrado en la resistencia a V. alginolyticus. Para revelar la función antibacteriana de LvROMO1, se investigó la mortalidad acumulada de L. vannamei infectado por V. alginolyticus además de LVROMO1. Para la inyección de dsLvROMO1 además del grupo de infección de V. alginolyticus, la mortalidad acumulada del camarón fue del 38%, 56% y 62% a 8, 12 y 24 phi, respectivamente (Fig. 5D). Para la inyección de dsLveGFP y el grupo de infección de V. alginolyticus, la mortalidad acumulada del camarón fue del 30%, 40% y 40% a 8, 12 y 24 phi, respectivamente (Fig. 5D). Aunque todavía nos faltan evidencias directas para demostrar que ROMO1 está involucrado en respuestas antipatógenas, varios estudios sugieren que puede haber una transferencia no deseada con el mecanismo de acción de NF-kB. Por ejemplo, la producción de ROS es mediada por ROMO1 promoviendo la activación de NF-kB constitutivo en tejidos de carcinoma hepatocelular.
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ROMO1 regula los estados redox y sirve como inductor de los factores NF-kBdriven EMT en la anemia de Fanconi. Para obtener más evidencias de la función inmune de LvROMO1, se llevó a cabo ensayos con luciferasa, demostrando que LvROMO1 mejora la expresión de genes informadores que contienen promotores de Drs, Atta y Mtk por 3.7, 3.8 y 3.9 veces, respectivamente (figura 5B). Estos resultados sugieren que LvROMO1 posiblemente esté involucrado en la lucha de inmunidad antibacteriana del camarón a través de la vía ROMO1-NF-kB. La caída de la expresión de LvROMO1 aumenta la mortalidad acumulada de camarones infectados con WSSV. Este estudio mostró que la expresión de LvROMO1 es inducido en una etapa temprana (con un valor máximo: 9 hpi) de infección por WSSV, para luego volver a su nivel de expresión normal (Fig. 6A). Un estudio previo indicó que las ROS podrían inhibir la replicación del WSSV, y para una infección exitosa, WSSV desarrolla una estrategia para reprimir los niveles de ROS
GENÉTICA
- FEBRERO 2018 en las células huésped. Además, la expresión de LvROMO1 está asociada con la regulación de los niveles de ROS. En el presente estudio, demostramos que para los camarones infectados con el WSSV, la mortalidad acumulada de camarones inyectados con dsLvROMO1 a los 72, 84, 96, 108, 120 y 132 hpi fueron 56%, 80%, 90%, 96%, 98% y 100%, respectivamente; y la mortalidad acumulada de camarones inyectados con dseGFP a 72, 84, 96, 108, 120 y 132 hpi fueron 32%, 56%, 56%, 64%, 76% y 80%, respectivamente (figura 6B). Estos hallazgos confirman que las ROS podría inhibir el WSSV en el camarón, y sugiere que LvROMO1 juega un papel en la generación de una respuesta anti-WSSV.
Conclusiones
En este estudio, encontramos que la expresión de LvROMO1 es inducida por infecciones del WSSV y V. alginolyticus, y ambas por b-glucano y la inyección MC-LR. La regulación negativa de LvROMO1 aumentó la mortalidad acumulada de camarones infectados con V. alginolyticus probablemente causado por la disminución de la expresión de AMPs y de la producción de ROS.
Fig. 6. Mortalidad acumulada después del tratamiento con dsLvROMO1 y ensayo de infección experimental con WSSV. (A) La expresión de LvROMO1 en hemocitos en varios momentos después de la infección del WSSV. (B) La mortalidad acumulada del camarón infectado con WSSV.
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Por otra parte, se observó que la caída de la expresión de LvROMO1, que previamente ha sido reportado que disminuye la respuesta de los ROS del huésped, aumentó la mortalidad acumulada de camarones infectados con WSSV. Por lo tanto, se concluyó que ROMO1 es necesario para contrarrestar a V. alginolyticus y al WSSV en L. vannamei. Por otra parte, el aumento de ROMO1 también contribuyó a la apoptosis inducida por MC-LR y al daño hepatopancreático en los camarones●
PRODUCCIÓN
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Retroadaptación de fincas de camarón a sistemas de recirculación Ing. Fernando Huerta fhuertadorman@gmail.com Darryl E. Jory, Ph.D. darryl.jory@gaalliance.org
La retro-adaptación de fincas camaroneras grandes y semi-intensivas para operación de recirculación tiene varias ventajas y proporciona una calidad del agua mejorada y estable. Note la resultante coloración de agua constante en estos piscinas de producción.
Tecnología ventajosa para operaciones grandes, abiertas y Varias grandes fincas de camarón semi-intensivas en América Latina, originalmente construidas para operar con un urante varios años, nuestro equipo ha colaborado en el desarrollo y la puesta recambio significativo de agua a punto de tecnología para modernizar a través de flujo abierto con el y “cerrar” fincas de camarón semi-intensivas medio ambiente circundante, caracterizadas por los grandes piscinas han sido retro-adaptadas a abiertos típicos de la región de América un modo de operación de Latina, para que puedan ser operados recirculación de agua. Esta utilizando un enfoque de recirculación de modificación proporciona agua. numerosos beneficios, incluida Como se describe a continuación, este una mejor bioseguridad.
D
enfoque ha sido relativamente común en muchas áreas de cultivo de camarón en Asia, pero prácticamente inexistente en América Latina hasta la última década.
Esta fue desarrollada combinando tecnologías de tratamiento de aguas comerciales conocidas y establecidas utilizadas en todo el mundo con la tecnología desarrollada para operar unidades de producción de camarones - en su mayoría viveros - utilizando bioflocs bacterianos y cero recambios de agua por hasta 150 días, con excelentes resultados de producción y supervivencia. Se ha aplicado con éxito en varias grandes operaciones de cultivo de camarón a través de toda América Latina, y creemos
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que la tecnología se puede aplicar más ampliamente y en otros lugares. Las razones para retro-adaptar y modernizar una finca grande incluyen un mejor manejo de varias enfermedades del camarón (exclusión de patógenos y vectores) y para mejorar la calidad del agua en piscinas de producción en áreas que se ven afectadas significativamente por las variaciones climáticas estacionales de temperatura, precipitación (salinidad), composición de comunidades microbianas y otras variables cíclicas anuales. Las condiciones más estables y un mejor control de la salinidad del agua permiten la co-producción de otras especies como la tilapia en algunas áreas. Y al reducir significativamente las aportaciones (externas) de agua del medio ambiente, además de los obvios beneficios de bioseguridad, otros problemas - mareas rojas, contaminación industrial, agrícola o urbana y otros - pueden ser eliminados en su mayoría.
Sistemas de cultivo de camarón en Asia La industria de cultivo de camarón en Asia es típicamente intensiva e involucra el uso de pequeños piscinas de 1 ha o menos, y con crecientes profundidades promedio. Muchos
PRODUCCIÓN
- FEBRERO 2018 piscinas están revestidos con plástico y concreto, y típicamente tienen aireación mecánica a través de aireadores de ruedas de paletas y/o sopladores que bombean aire a través de difusores en los fondos del piscina a alrededor de 1 HP por cada 400 a 600 kilogramos de camarón producido. Hay un uso significativo de probióticos. Viveros de alta densidad se utilizan como una fase intermedia entre los laboratorios y los piscinas de engorde, y los piscinas suelen sembrarse a 100 o más animales por metro cuadrado. También ha habido un movimiento importante en los últimos años hacia tasas de recambio de agua marcadamente reducidas que respaldan la bioseguridad mediante la exclusión de patógenos y vectores de enfermedades. Muchas fincas también se han “cerrado” y operan bajo recirculación de agua mediante la conversión de algunos piscinas en reservorios, y la implementación de la reutilización máxima posible de agua.
Sistemas de cultivo de camarón en América Latina En América Latina, una gran mayoría de las fincas camaroneras son semi-intensivas y operan a densidades medias de siembra. Estas instalaciones se construyen por encima de la línea de marea alta e incluyen una estación de bombeo y canales de distribución de agua y reservorios, y en su mayoría utilizan alimentos acuícolas comerciales. Los piscinas se cosechan drenando a través de una red o usando una bomba de cosecha.
son cada vez más comunes. Los fertilizantes orgánicos (en su mayoría estiércol y subproductos agrícolas) fueron ampliamente utilizados en el pasado, pero esta práctica está desapareciendo por diversas razones, incluidas las preocupaciones de bioseguridad. La productividad natural de piscinas es importante para el crecimiento del camarón juvenil durante las primeras semanas después de la siembra. Aunque las tasas de intercambio de agua que se suelen utilizar son del 5 al 10 por ciento del volumen del piscina por día, en los últimos años muchos productores han adoptado prácticas de intercambio más estrictas del 2 al 5 por ciento. Estas tasas de cambio más bajas reducen los costos de bombeo y minimizan las necesidades de fertilizantes y la posibilidad de introducción de patógenos. Si bien hay fincas en las Américas que han podido convertirse con éxito de modos de producción semi-intensivos a más intensivos, estos casos son relativamente raros y no parece haber ningún movimiento real hacia la adopción generalizada de esta tecnología en la región, porque la disponibilidad de la tierra generalmente no es una restricción para un mayor crecimiento de la industria.
Los modelos de producción en las Américas se basan principalmente en piscinas más grandes (de 5 a 10 hectáreas) sembrados de 10 a 30 animales por metro cuadrado usando PL cultivadas en laboratorio, seleccionadas para crecimiento y resistencia contra patógenos prevalecientes, tasas de intercambio de agua reducidas, uso de alimentos acuícolas comerciales y con alguna aireación mecánica y un mayor uso de viveros intermedios en los últimos años (Jory, D.E. In press. Aquaculture, 3rd edition. Ch. 21 – Marine Shrimp. Wiley).
Pasos en la conversión a la operación de recirculación La retro-adaptación de una finca de camarón con muchos y grandes piscinas originalmente diseñada para funcionar con un importante recambio de agua por flujo a través - para operar recirculando el agua requiere una serie de pasos, una planificación cuidadosa y una implementación detallada. Típicamente, estos pasos implican primero una evaluación topográfica exhaustiva y cálculos detallados de volúmenes de agua, tiempos de residencia de agua y otros datos hidráulicos. El diseño adecuado optimiza la sedimentación de sólidos en suspensión y el
El diseño de la finca es generalmente asimétrico, particularmente para las fincas más antiguas que se construyeron para aprovechar cada metro cuadrado de tierra, aunque las fincas más nuevas tienden a ser más simétricas que las fincas extensivas. La preparación del piscina debe tener secados que se realizan típicamente una vez al año, con labranza y encalado de los suelos con diversos materiales de cal y una fertilización con diversos compuestos para promover la producción natural. Las aplicaciones de varios inóculos bacterianos para mejorar la calidad del agua
Vista aérea de una finca retro-adaptada que muestra una unidad de sedimentación, piscinas de producción y un reservorio.
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PRODUCCIÓN
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Se necesitan instalaciones de producción separadas para producir los grandes volúmenes de enmiendas bacterianas aplicadas al sistema de agua de manera regular.
movimiento/recirculación del agua alrededor de la finca, con sus beneficios inherentes (aumento del movimiento y oxigenación del agua, promoción de la degradación aeróbica del lodo, otros) - y mientras algunas fincas son más adecuadas para la retroadaptación - la mayoría de las fincas se pueden convertir a recirculación al menos en un grado significativo. El movimiento/ recirculación del agua a través de la finca la homogeneiza y promueve la destratificación, la desgasificación y mayores niveles de oxígeno disuelto. En un sistema de recirculación, el tratamiento del agua se produce in situ (a través del movimiento, la aireación y las aplicaciones de enmiendas bacterianas) y, a menudo, también requiere sacrificar algunos piscinas para construir una o más unidades de sedimentación. Estas unidades de sedimentación deben tener un área no menor al 10 por ciento del área de piscinas de la finca, a menudo son al menos dos veces más profundas que los piscinas de producción promedio, y tienen un tiempo de retención hidráulica de dos a tres días con un porcentaje de recirculación típico de 10 a 20 por ciento. Es muy importante que cualquier diseño de retro-adaptación tenga objetivos claros y alcanzables basados en expectativas realistas. La tecnología generalmente no reduce los costos totales de energía para operar una finca, pero cambia la forma en que se utiliza, con mucho más énfasis en mover y homogeneizar el agua alrededor de la finca en lugar de bombear agua nueva a las fincas para luego volver a liberarla. el medio ambiente como efluentes. Un componente importante de la operación
de una finca de recirculación son las aplicaciones regulares de enmiendas bacterianas (usamos nuestra propia fórmula para este propósito) para ayudar y apoyar la degradación de lodos y materia orgánica, reducir la incidencia de microorganismos patógenos y mejorar la calidad general del agua. Básicamente, convertir todo el volumen de agua de la finca en un sistema de flóculos autótrofos/heterotróficos. Esto requiere establecer una instalación de producción de bacterias separada dentro de la finca, o más de una unidad, dependiendo del tamaño y la modularidad de la finca, y las distancias involucradas. El manejo de piscinas grandes de camarón, una vez que la finca ha sido acondicionada para operar en modo de recirculación de agua, requiere un monitoreo exhaustivo y oportuno de varios parámetros de calidad del agua, con un laboratorio adecuadamente configurado, dotado de personal y apoyado. La gestión de una finca de recirculación también requiere personal con mejores antecedentes técnicos y una comprensión
Vista de aplicaciones de enmiendas bacterianas.
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de cómo funciona el nuevo sistema. Como la circulación continua de agua es crítica, la operación de aireadores y circuladores debe estar asegurada al igual que su suministro de energía (la redundancia es clave). Algunas recomendaciones para mejorar y acelerar la estabilidad de un nuevo sistema de recirculación: - Todos los procedimientos deben abordarse y manejarse de manera profiláctica, no terapéutica. - El componente de adición bacteriana es crítico, y se debe incorporar antes del comienzo del ciclo y antes de sembrar las PL de camarón. - Se debe prestar especial atención al monitoreo de la calidad del agua, en particular los niveles de oxígeno disuelto durante los días nublados. - El exceso de agua de lluvia debe ser liberado del sistema. - Aunque el rendimiento de la finca mejorará con el tiempo, los piscinas todavía deben secarse de vez en cuando, y esta decisión dependerá de su rendimiento general y apariencia.
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Ventajas y desventajas de la retro-adaptación a recirculación La tecnología tiene numerosos efectos beneficiosos, y las fincas retro-adaptadas son sistemas respetuosos con el medio ambiente ya que los efluentes son esencialmente eliminados. Hay una reducción significativa de los sólidos en suspensión y las demandas de oxígeno biológica y química debido a la mejora de la calidad del suelo y la acción bacteriana; también, una reducción marcada en olores y sabores indeseables por la exclusión de cianobacterias y hongos debido a la exclusión competitiva. La eficiencia de bombeo aumenta debido a los niveles de bombeo más bajos, el tiempo de inactividad entre ciclos de producción se reduce y no hay necesidad de fertilización orgánica o inorgánica. Los requisitos de aireación mecánica para los sistemas más intensivos a menudo se pueden reducir significativamente, ya que la recirculación promueve niveles más altos de oxígeno disuelto. Hay una mayor bioseguridad debido al bombeo mínimo de agua nueva desde el exterior (exclusión de patógenos y vectores), entradas mínimas de contaminantes y la estabilidad ambiental resultante (oxígeno disuelto, salinidad, pH, comunidades bacterianas, otros) dentro del sistema que reduce los niveles de estrés en el camarón cultivado y su susceptibilidad a las enfermedades, y apoya la supervivencia y el crecimiento del camarón, animales mejor pigmentados en la cosecha y la productividad en general. La tecnología de retro-adaptación/ recirculación también tiene algunas consideraciones importantes que pueden limitar su aplicación. Los costos iniciales de la retro-adaptación y construcción son altos, y las operaciones requieren un alto nivel de conocimiento técnico por parte del personal dedicado. La dependencia en la aireación mecánica es muy alta; en algunos casos se pueden necesitar hasta 24 horas. Puede haber algunas limitaciones en la capacidad de bombeo y las opciones dependiendo de las características de los piscinas originales y su distribución. Se requieren insumos
El monitoreo cuidadoso y el control de varios parámetros microbiológicos y de calidad del agua son muy importantes para el funcionamiento adecuado de las fincas retro-adaptadas que operan bajo recirculación.
significativos que incluyen adiciones de enmiendas bacterianas y de otras para mantener el equilibrio iónico del agua durante las estaciones lluviosas.
Perspectivas La retro-adaptacion de grandes fincas de camarón existentes - originalmente construidas para operar mediante un recambio significativo de agua del medio circundante por flujo a través - a un modo de operación de recirculación requiere modificaciones significativas de infraestructura y un esquema de gestión diferente.
Algunas fincas son más adecuadas para la retro-adaptación, pero la mayoría de las fincas se pueden convertir a recirculación, al menos en cierta medida, y esta ha sido nuestra experiencia con varias empresas a través de América Latina. Los beneficios son numerosos, incluida la bioseguridad mejorada (exclusión de patógenos y vectores) y una calidad del agua más estable y una composición de comunidad microbiana deseable. La recirculación a través de la finca homogeneiza el agua y promueve la destratificación, desgasificación y mejores niveles de oxígeno disuelto●
Recircular el agua a través de una finca bajo el modelo de retro-adaptacion adecuada puede mejorar significativamente la calidad general del agua.
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NUTRICIÓN
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El diformato de potasio en la dieta mejora el rendimiento del camarón patiblanco (L. vannamei) mediante la reducción de patógenos bacterianos Autor: Christian Lückstädt* and Nicolas Greiffenstein christian.lueckstaedt@addcon. com
S
e estima que la producción intensiva del camarón patiblanco, Litopenaeus vannamei (Boone 1931), en América Central y el Sudeste Asiático alcanzó los 3.5 millones de toneladas en 2017 (GOAL, 2016). A pesar del notable progreso en la nutrición del camarón y la formulación de alimentos a lo largo de los años, los brotes de enfermedades en los piscinas de camarón todavía pueden conducir a reveses en productividad y a un mayor uso de antibióticos. Por ejemplo, la industria tailandesa de camarón patiblanco (Litopenaeus vannamei) solía producir más de 0.5 millones de toneladas anuales, pero ha sido afectada por enfermedades bacterianas en los últimos años, reduciendo las ganancias y las exportaciones de camarón en más del 50% para 2013. Aunque se ha tecnificado la producción de camarón (Figura 1),
camarón cultivado en todo el mundo, con un costo global estimado para la industria de la acuicultura de USD 1 billón. Ambas enfermedades son causadas por especies de Vibrios, bacterias que residen en el intestino del camarón y el hepatopáncreas. En ambos casos, las células de los órganos afectados se rompen, lo que reduce la ingesta de alimento y afecta la condición del camarón con una mortalidad masiva unas pocas semanas después de la siembra. La mancha blanca a menudo ocurre un mes después de la siembra y se manifiesta como
Se han presentado pérdidas severas, como el síndrome de la mancha blanca (2010) y el síndrome de mortalidad temprana (EMS, siglas en Ingles, especificado como síndrome de necrosis hepatopancreática aguda, AHPNS 2012). El EMS es una enfermedad mortal que ocasionalmente se encuentra en el
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Figura 1: Finca moderna de camarón (L. vannamei) en América Latina
NUTRICIÓN
- FEBRERO 2018 un consumo reducido de alimento y menor absorción de nutrientes en el intestino del camarón. Esto conduce a animales debilitados con caparazones blandos y hepatopáncreas encogidos, ya que la absorción de alimentos se bloquea y se evacua sin digerir como heces blancas, que se pueden notar en la superficie del agua de los piscinas. En América Latina, los investigadores identificaron recientemente cuatro cepas de bacterias que causan el Síndrome de Mortalidad Temprana (EMS) en las fincas camaroneras (GAA, 2017). Fueron aislados del estómago del camarón enfermo o del sedimento en cultivos afectados por AHPNS. Lightner et al. (2013) identificaron a Vibrio parahaemolyticus, una bacteria común en aguas salobres, como el patógeno causante del EMS. Coloniza el tracto gastrointestinal del camarón en combinación con un fago, produciendo una toxina que conduce a la disfunción del tracto digestivo del camarón y la mortalidad masiva. Para combatir la recesión económica, el Departamento de Pesca anunció fuertes medidas de bioseguridad en las fincas, que fueron seguidas estrictamente por los productores de camarón. Sin embargo, todas estas medidas fueron solo un enfoque intermedio, que de hecho obstaculizó la producción de camarón (muchas fincas dejaron de producir durante una temporada completa) y los camaroneros continuaron buscando y estableciendo redes para identificar alternativas que podrían aplicarse para reducir la mortalidad en esta especie afectada. Además de los prebióticos basados en extractos de hierbas combinados con inmunoestimulantes, aplicados en diversas formas al agua del piscina o al alimento, la mezcla de muchos de los acidificantes comúnmente disponibles en los alimentos del camarón permaneció ignorada, ya que a menudo se asumían que sus ingredientes activos volátiles eran insuficientes. Sin embargo, dado que se sabe que los ácidos orgánicos inhiben directamente las bacterias
Figura 2: A partir del día 5, los camarones tratados con KDF mostraron 40% menos de mortalidad en comparación con el grupo control, todos desafiados con Vibrio harveyi (5 x 106 UFC ml-1)
Gram negativas patógenas, este último enfoque parece ser el más prometedor desde el punto de vista mecanístico, especialmente después de que los investigadores japoneses descubrieran que el EMS tiene un desencadenante específico en el ambiente, lo cual es el pH alto en los piscinas. Los ensayos se llevaron a cabo en Malasia, en cooperación con la Universidad de Kinki en Japón, donde se encontró que a un pH más bajo, la enfermedad disminuía rápidamente, mientras que a un pH más alto, se manifestaba repetidamente. Por lo tanto, un acidificante dietético puede tener un papel de apoyo en la supresión de la aparición de la enfermedad.
ppm para V. harveyi y 4500 ppm para V. parahaemolyticus, lo que concuerda con los ensayos anteriores de Tailandia. Como KDF es una sal doble de ácido fórmico y su formiato unido a potasio (Figura 3), el 70% de los ingredientes activos equivalentes de ácido fórmico no corrosivos están completamente disponibles en el
En Tailandia, la inclusión de 0.2% y 0.5% de diformato de potasio (KDF) en el alimento aumentó significativamente la supervivencia en un 40% de camarones patiblancos desafiados con Vibrio harveyi (5 x 106 UFC ml1 ), en comparación con el tratamiento control (Figura 2). Ensayos posteriores en Ecuador (2016) cuantificaron con una prueba de Concentración Inhibitoria Mínima (MIC, siglas en Ingles) la cantidad de diformiato de potasio necesaria para detener el crecimiento de Vibrio harveyi y Vibrio parahaemolyticus. Las dosis necesarias oscilaron entre 3500
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Figura 3: Diformiato de potasio (KDF), el acidificante de sal doble de ácido fórmico y formiato unido a potasio
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intestino del camarón, incluso después del peletizado y extrusión del alimento, debido a su estabilidad a altas temperaturas y la no lixiviación, y se ha demostrado que la dureza, la durabilidad y la estabilidad en el agua también son mejoradas, un parámetro muy importante en la alimentación del camarón. Las moléculas de ácido fórmico no disociadas penetran la pared celular de las bacterias patógenas Gram negativas y acidifican su pH citoplásmico, lo que requiere que la célula neutralice su pH a través de la bomba H + -ATP, causando un gasto energético excesivo. A medida que las moléculas de ácido fórmico no disociadas continúan penetrando en la pared celular bacteriana, la bacteria agota rápidamente su presupuesto energético, lo que finalmente conduce a la muerte celular (Figura 4). Cuando el camarón infectado consume alimento con KDF, su intestino y hepatopáncreas, muy afectados por Vibrio, serán “limpiados” del patógeno, lo que permite a las bacterias benéficas aumentar su crecimiento (eubiosis) y proteger aún más al camarón contra tales enfermedades y otros vectores bacterianos, ya que los piscinas a menudo se consideran “cajas negras”, a pesar de las fuertes medidas de gestión ambiental.
de 6.5 a 5.8, reduciendo así el pH de uno de los principales factores de entrada en este piscina de “caja negra”: el alimento. Como se mencionó anteriormente, los brotes de EMS / AHPNS se observaron con mayor severidad en piscinas con valores de pH alcalino (8.5 a 8.8) en comparación con los de pH más bajo.
El pH debe tenerse en cuenta. Se ha demostrado que la inclusión de KDF en las dietas de acuicultura reduce el pH de la dieta
Una vez que los acidificantes estables, como KDF, se incorporan a los alimentos del camarón, se ingieren, se digieren y se
Figura 4: El pH citoplásmico celular de las bacterias Gram negativas se acidifica a través de la penetración de la molécula que conduce al gasto de energía, la interrupción del ADN y la muerte celular.
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evacúan, el pH del agua puede permanecer dentro de los rangos inferiores y contribuir a la reducción de la enfermedad al quitar el activador del EMS que ocurre a un pH más alto. También se conduce a un mejor estado de salud del camarón, ya que se contrarrestan las bacterias Gram negativas en su sistema digestivo●
SALUD
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Estrategias naturales para mejorar el crecimiento y la salud en los cultivos de camarón Autores: Luis E. Trujillo, Leonor Rivera, Eugenio Hardy, Erika M. Llumiquinga , Francisco Garrido, Jesús A. Chávez , Victor H. Abril, José M. País-Chanfrau Bionatura letrujillo3@espe.edu.ec
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os antibióticos se han utilizado tradicionalmente para tratar las infecciones microbianas en la acuicultura en todo el mundo. Sin embargo, el uso y el abuso de antibióticos puede causar efectos adversos no deseados como la acumulación de antibióticos en los tejidos de los animales, supresión inmune, desarrollo de bacterias resistentes a los antibióticos y destrucción de la flora microbiana ambiental. Por lo tanto, las investigaciones encaminadas a la sustitución de antibióticos por productos naturales como los probióticos, los prebióticos y los lipopolisacáridos (LPS) han recibido recientemente una atención considerable. Este hecho asegura el desarrollo de diferentes bioprocesos para obtener estas moléculas. El término probiótico significa “para la vida”, y se deriva de las palabras griegas “pro” y “bios”. La definición más amplia de probióticos fue formulada por Fuller indicando que un probiótico es considerado como “un suplemento alimenticio microbiano vivo que
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afecta beneficiosamente al animal huésped mejorando su equilibrio intestinal”. Sin embargo, no sólo los microorganismos vivos deben ser considerados como probióticos, sino también cualquier microorganismo o cualquiera de sus componentes que puedan conferir cualquier efecto fisiológico beneficioso al huésped o al medio ambiente donde vive el microorganismo. Un prebiótico, a diferencia de un probiótico, no es un organismo y por lo tanto tiene menos influencia en el medio ambiente natural. Basándose en la definición de Gibson y Roberfroid, los prebióticos son ingredientes alimentarios no digeribles que afectan de manera beneficiosa al huésped al estimular selectivamente el crecimiento y / o la actividad de uno o un número limitado de bacterias en el colon y así mejorar la salud del huésped. Los prebióticos tienen dos características principales, la primera es que son alimentos naturales, y la segunda es que no son organismos vivos, por lo que este hecho
SALUD
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constituye una ventaja sobre los probióticos. La incorporación de prebióticos en la dieta no necesita autorización como aditivos alimentarios ya que están bien descritos en la literatura. Originalmente, los prebióticos se utilizaron para estimular bifidobacterias y lactobacilos en la microbiota humana. Los lipopolisacáridos inducen efectos fuertes en el sistema inmune del camarón. La presente revisión destaca el uso de probióticos, prebióticos y LPS, mecanismos de acción y retos futuros en el uso y producción de estas moléculas en la acuicultura.
Los probióticos en la acuicultura Los probióticos son formulaciones microbianas cultivadas que se mezclan con enzimas y cereales fermentados unidos a un sustrato o formulación de uso en acuicultura. En el campo de los organismos acuáticos, los probióticos se han definido como “células microbianas capaces de viajar a través del tracto gastrointestinal y de mantenerse vivas, con el objetivo de mejorar la salud”. Una definición más amplia postula que “los probióticos se definen como entes vivos o muertos, o incluso un componente de los microorganismos que actúan bajo diferentes modos de acción al conferir efectos beneficiosos no sólo al huésped sino también a su medio ambiente”. Existe un interés creciente por los probióticos que ha sido estimulado por varios factores, entre ellos: 1) resultados científicos y clínicos interesantes utilizando organismos probióticos bien documentados 2) inquietudes sobre efectos secundarios y daños ambientales
Cepas microbianas autorizadas y probadas utilizadas como probióticos en condiciones de campo
Datos experimentales obtenidos en tanques de cultivo de camaron Penaeus monodon tratados y no tratados con probóticos.
Los probióticos funcionan de acuerdo con mecanismos de exclusión competitiva por los cuales los patógenos son reemplazados o excluidos por el desarrollo de una población microbiana beneficiosa en la superficie intestinal, lo que reduce las incidencias de la enfermedad, mejor salud y mejor crecimiento del huésped (Fig.2).
antagonistas o por interferencia de adhesión. Algunos de los estudios previos realizados en los primeros 90 años del siglo pasado, reportados por Nogami y Maeda, y Rengpipat et al. mostraron un mejor crecimiento y supervivencia de crustáceos con suplementos probióticos.
Las cepas bacterianas, de levadura o sus componentes son capaces de producir sustancias inhibidoras que podrían interactuar directamente con patógenos bacterianos y virales.
Algunos estudios describen un aumento significativo en el peso de camarones tratados con probióticos sobre el grupo no tratado a nivel de finca como se muestra en la Tabla 2.
El crecimiento de estos patógenos se evita a través de la producción de metabolitos
Lara-Flores et al. explicó que las bacterias probióticas son buenos candidatos para
3) Para el uso de productos naturales 4) el desarrollo de interesantes antagonistas acuáticos para la acuicultura ecológica. La Tabla 1 muestra cepas microbianas probadas con éxito como probióticos en condiciones de campo.
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Figura 2: Como actúan los probióticos en el camarón. La inhibición directa de patógenos mediante la modulación del sistema inmune del camarón, la producción de sustancias inhibidoras que podrían interactuar directamente con patógenos y también son capaces de manipular la microflora y las condiciones físico-químicas del ecosistema del piscina.
aumentar la digestión de nutrientes y el crecimiento en organismos acuáticos. Irianto y Austin afirmaron que los compuestos nocivos en la dieta pueden ser destoxificados por la acción de enzimas hidrolíticas tales como amilasas y proteasas, y también que los nutrientes en los organismos podrían ser mejorados por vitaminas como por ejemplo, biotina y vitamina B12. Las enzimas digestivas son necesarias para romper los compuestos complejos en moléculas más simples y absorbibles que podrían ser utilizadas por el huésped. Por lo tanto, la suplementación dietética con probióticos aumenta el crecimiento a través de la contribución enzimática que in incrementa la digestibilidad. Los constituyentes de la digestión de proteínas generados por la acción de enzimas proteolíticas endógenas también contribuyen a aumentar la digestibilidad de los piensos asociados con la administración de probióticos. De hecho, la bacteria probiótica Lactobacillus plantarum mejora la expresión génica y las respuestas inmunes en el camarón blanco Litopenaeus vannamei, cuando se combina en su dieta.
Específicamente, L. plantarum mejora la actividad de la fenoloxidasa, la profenoloxidasa (proPO) y la superóxido dismutasa (SOD), junto con la tasa de supervivencia después de la estimulación con V. alginolyticus. Estos efectos se observan cuando las bacterias se dan en la dieta a 1010 ufc/ kg durante 168 horas. L. plantarum tiene una gran efectividad contra Vibrio harveyi. Desafíos experimentales in vivo, muestra que Litopenaeus vannamei aumentó la resistencia en comparación con un grupo control no expuesto a V. harveyi. Estos resultados han sugerido que la cepa probiótica tiene un efecto inmuno-reactivo sobre el huésped, posiblemente relacionado con compuestos extracelulares liberados de bacterias que pueden estimular respuestas inmunes inespecíficas. La actividad de L. plantarum es responsable del aumento del recuento total de hemocitos y de la actividad PO. De acuerdo con los resultados de esta investigación, se sugirió que la actividad aglutinante es la causa principal relacionada con la eliminación más efectiva de la hemolinfa y hepatopancreas
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por el camarón alimentado con la dieta suplementada con probiótico. Cuando se desafió con Vibrio nigripulchritudo, el Pediococcus acidilactici influyó en las defensas antioxidantes y el estrés oxidativo de Litopenaeus vannamei. Muestra eficacia en marcadores de defensa antioxidantes como SOD, catalasa, glutatión peroxidasa, glutatión y daño tisular. Esta cepa fue eficiente en el mantenimiento de los niveles de defensa antioxidante durante un período más largo que el control y los grupos de camarones no infectados. Entre las tres cepas, Bacillus P64 muestra un índice de inmunidad significativamente mayor y una respuesta inmune similar a la de Vibros alginolyticus. Además, el Bacillus P induce un aumento en la población de células hialinas. Estas cepas muestran actividad antagonista contra los patógenos del camarón. Cuando los camarones juveniles son alimentados con quitina y Vibros gazogenes, el número de bacterias tipo vibrio en la tripa anterior y posterior disminuye significativamente y el número de hemocitos cambia significativamente.
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El cambio en el número de hemocitos probablemente refleja el estado inmunológico del camarón debido a que los hemocitos están involucrados tanto en defensas celulares como humorales del camarón. Los β-glucanos de levadura también se han aplicado como probióticos en la acuicultura para modular el sistema inmune innato de los peces y para mejorar la supervivencia de los peces frente a patógenos.
Los prebióticos en la acuicultura Los prebióticos, a diferencia de los probióticos, no son organismos vivos por lo que tienen menos influencia en el medio ambiente. Mahious et al., Fooks et al. y Gibson et al. describieron que cualquier alimento que llega al colon por ejemplo, carbohidratos no digeribles, péptidos, proteínas y ciertos lípidos, puede ser un candidato a prebiótico. Sin embargo, los carbohidratos no digeribles como oligosacáridos, inulina, transgalactooligosacárido y lactulosa son considerados como el foco de la mayoría de los oligosacáridos. En peces, los oligosacáridos de manano (MOS )y FOS son quizás los oligosacáridos más bien estudiados a pesar de la información sobre el uso de otros compuestos similares a oligosacáridos en animales acuáticos. La estructura química de algunos de estos oligosacáridos se presenta en la
Lactulosa
inulina
figura 2. Bailey et al. Y algunos estudios demostraron que los prebióticos pueden modificar la comunidad microbiana del tracto gastrointestinal para potenciar las respuestas inmunes no específicas. La fermentación prebiótica en el colon por las bacterias causa una modificación significativa de la microflora colónica. De hecho, los oligosacáridos sirven como sustrato para el crecimiento y la proliferación de bacterias anaerobias, principalmente las bifidobacterias, que inhiben el crecimiento de bacterias putrefactivas y patógenas presentes en el cólon. La producción resultante de sustancias que estimulan el sistema inmunológico aumenta la protección del huésped contra las infecciones. Li et al encontraron que la suplementación con FOS de cadena corta a concentraciones de 0,025 a 0,8% (m/m) aumenta la capacidad respiratoria de hemocitos en el camarón blanco del Pacífico Litopenaeus vannamei cultivado en un sistema con recirculación. Los prebióticos pueden modificar la comunidad microbiana del tracto gastrointestinal para mejorar las respuestas inmunes no específicas, también ayudan a reducir el pH del intestino a través de la formación de ácidos grasos de cadena corta, lo que favorece las bacterias beneficiosas que bloquean la adhesión de los patógenos
Fructo - oligosacárido
y los sitios de los receptores de toxinas, la competición de nutrientes y la estimulación del sistema inmunológico. Sin embargo, los informes sobre el efecto de los prebióticos sobre los parámetros de crecimiento de las especies no son concluyentes y algunos son contradictorios. La dieta de Beluga (Huso huso) suplementada con 1, 2 y 3% (m/m) de inulina ha afectado negativamente a una variedad de parámetros tales como aumento de peso, crecimiento, relación de eficiencia proteica, proteína y retención de energía, eficiencia alimentaria al suplementar con inulina. Además, Refstie et al encontró que el salmón atlántico alimentado durante 3 semanas con una dieta basada en harina de pescado suplementada con 75 g/kg de inulina aumenta la masa relativa del tracto gastrointestinal, pero la capacidad de absorción del pez no se ve afectada. Una dieta con 20 g/kg de oligofructosa, un FOS producido por hidrólisis enzimática parcial de inulina, aumenta el crecimiento de larvas de rodaballo, pero 20 g/kg de inulina en sí misma no tiene efecto sobre el crecimiento. La ingesta de prebióticos depende del tipo de ingredientes utilizados en las formulaciones de la dieta y, por lo tanto, variará entre las especies y el alimento suministrado. El tipo de prebiótico para suplementar, características animales
Manno-oligosacáridos
Figura 3: Estructura quimica de los fructo-oligosacáridos (FOS), la inulina, la lactulose y los manno-oligosacaridos (MOS).
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- FEBRERO 2018 específicas (especie, edad, etapa de producción) y tipo de dieta se han identificado como consideraciones importantes al suplementar prebióticos en dietas de pescado. Sin embargo, muchos resultados experimentales no han sido concluyentes con respecto al beneficio de algunos de estos prebióticos. No obstante, debe prestarse atención al desarrollo de bioprocesos, formulaciones prácticas y consideraciones económicas que aseguren la producción sostenible.
Los lipopolisacáridos inmunoestimuladores
como
Los efectos del LPS sobre el sistema inmunológico del camarón han sido objeto de numerosos artículos. Los casos interesantes que pueden aportar evidencia de la posible aplicación de LPS como inmunoestimulante en la cría de camarón se describen a continuación. Los porcentajes de proliferación de hemocitos pueden aumentar, aproximadamente tres veces, después de la estimulación con LPS. Además, la captación de 3 H timidina en los hemocitos circulantes puede ser significativamente 26 veces mayor en camarones estimulados con LPS que en los no estimulados. El sistema de activación proPO del Penaeus mejora en gran medida con el tratamiento con LPS, lo que sugiere su participación en el no auto-reconocimiento. Además, la actividad PO en el suero de camarón aumentó con el tratamiento con LPS. La administración oral de Pantoea agglomerans con LPS mejora la resistencia a la enfermedad frente a la viremia aguda de los peneidos e induce la actividad inactivadora de los virus en la hemolinfa del camarón Kuruma, Penaeus japonicas. La proliferación de la mayoría de las células en el tejido hematopoyético del camarón tigre negro (Penaeus monodon) puede incrementarse significativamente después de la inyección de LPS. La inyección de camarón blanco del Pacífico Litopenaeus vannamei con LPS disminuyó los niveles de ARNm de péptidos antimicrobianos, penaeidin 2, penaeidin 3,
penaeidin 4 de una manera dependiente de la dosis, mientras que los niveles de ARNm de serin proteinasa y proPO no cambian significativamente. La estimulación de los hemocitos del camarón Litopenaeus vannamei con LPS conduce a la formación de trampas extracelulares características de fibras hechas a partir del ADN de la célula huésped. Los grupos de camarón tigre negro (Penaeus monodon) alimentados con gránulos recubiertos con LPS mostraron mayores tasas de supervivencia que los grupos de control cuando se desafíaron frente al Vibrio harveyi75. Además, los niveles de genes relacionados con la inmunidad como por ejemplo, la isoforma 3 del factor anti-LPS, la lectina de tipo C y la peritrofina de tipo mucina, están regulados en los intestinos del grupo de P. monodon alimentado con dieta suplementada con LPS una o dos veces al día, a diferencia de del grupo de control. La expresión de lectina 3 de tipo C de Litopenaeus vannamei en branquias está regulada positivamente después del desafío contra LPS. Los LPSs pueden regular la cactina de L. vannamei en hemocitos.
Los lipopolisacáridos (LPS), también conocidos como lipoglicanos y endotoxinas, son moléculas grandes que consisten en un lípido y un polisacárido compuesto de O-antígeno, núcleo externo y núcleo interno unidos por un enlace covalente ; se encuentran en la membrana externa de las bacterias Gram-negativas y provocan fuertes respuestas inmunes en los animales. Las estrategias naturales para mejorar el crecimiento y la salud en los cultivos masivos del camarón para evitar la necrosis y liberar moléculas endógenas como por ejemplo, L, β y P, mientras que al mismo tiempo estas moléculas endógenas pueden causar cambios en la viabilidad celular, desgranulación y necrosis de hemocitos, indicativo de activación de la inmunidad in vitro.
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La inyección de LPS causa una disminución de los recuentos totales de hemocitos semi-granulares y granulares de Penaeus monodon. Además, la actividad de esterasa no específica, la producción de especies reactivas de oxígeno y la producción de óxido nítrico se induce significativamente en los hemocitos de camarón inyectado con LPS, mientras que la relación de células apoptóticas de hemocitos aumenta. Recientemente se han informado métodos para aislar y caracterizar los LPS con el fin de usarlos en el cultivo del camarón.
Conclusiones: La aplicación de probióticos, prebióticos y LPS en acuicultura ha mostrado resultados positivos, pero la evaluación de los efectos biológicos de estas entidades en el medio natural y la rentabilidad de las opciones de tratamiento son insuficientes. Además, la mezcla de estos reactivos biológicos para formar simbióticos tiene un campo muy prometedor en cultivos de camarón81 ya que esta estrategia ha tenido cierto éxito en otras especies marinas. Siguiendo las numerosas herramientas de secuenciación del genoma que están actualmente en uso, la investigación futura sobre probióticos, prebióticos y efectos de LPS debería involucrar el análisis de transcriptome y proteoma usando ensayos de alto rendimiento. Además, se debe estudiar el desarrollo de transcriptomas y proteomas en la microbiota intestinal. Desde el punto de vista bacteriológico, es de gran importancia continuar evaluando si los cambios microbianos tienen algún efecto positivo sobre la salud de los peces y de las conchas, contribuyen a inhibir la colonización de las bacterias patógenas en el intestino y mejorar la inmunidad innata. Por lo tanto, los estudios con todas estas sustancias deberían tener una alta prioridad en el futuro, y los estudios de desafíos deberían incluirse como un estándar de oro para evaluar sus efectos sobre la salud del camarón●
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Situación y perspectivas del cultivo de camarón blanco en India Autor: Yahira Piedrahita Directora Ejecutiva de la Cámara Nacional de Acuacultura ypiedrahita@cna-ecuador.com
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on un crecimiento acelerado de su industria, India se mantiene como el mayor exportador de camarón del mundo y espera superar las 700,000 toneladas en 2018. Sin embargo, existen algunos cuellos de botella que deben ser resueltos y en los que tanto el sector productor como el gobierno concentran sus esfuerzos. Este artículo ha sido preparado por Yahira Piedrahita en base a la información proporcionada por los principales actores de la industria durante el evento AquaIndia 2018, realizado en Chenai (Tamil Nadu) durante los primeros días de febrero. El cultivo de camarón de manera tecnificada empezó en India en los ’80 y la producción se incrementó de forma constante debido a la tecnología de producción en laboratorios implementada por la Autoridad de Desarrollo de las Exportaciones de Productos Marinos (The Marine Products Export Development Authority, MPEDA, por sus siglas en inglés), que impulsó la industria de camarón (Penaeus monodon) e incrementó las exportaciones de India hasta 1994. A partir de 1995, la producción se redujo debido a la caída de los precios, los impuestos anti-dumping de los países importadores y las enfermedades, por lo que la industria estaba buscando reproductores de P. monodon libres de enfermedades
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o cualquier otra especie alternativa para recuperar la producción. Esta búsqueda permitió identificar la disponibilidad de Penaeus vannamei libre de patógenos específicos (SPF). El Comité Nacional de Introducción de Especies Exóticas en Aguas Indias aprobó las operaciones de cultivo experimental de la nueva especie y pruebas de producción de postlarvas fueron realizadas en 2003 bajo condiciones controladas de bioseguridad, así como el engorde por 3-4 ciclos en fincas experimentales. Desde entonces, el cultivo de P. vannamei se ha ido generalizando y en la actualidad más del 95% de las camaroneras se dedican a la producción de esta especie.
Producción de semilla Con estrictas medidas de bioseguridad, el cultivo de camarón blanco se abastece mediante la importación de reproductores SPF, que a su ingreso son mantenidos en las Instalaciones de Cuarentena Acuática (Aquatic Quarantine Facility -AQF), y posteriormente en el Centro de Multiplicación de Reproductores (Broodstock Multiplication Centre -BMC), operados por el gobierno de India, en cooperación con el Instituto Oceánico de Hawaii. Tres BMC adicionales están en proceso de diseño y construcción y
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existe una capacidad instalada para producir 100 billones de postlarvas por año. Al momento, existen ciertos inconvenientes en la producción de semillas, entre ellos durante el paso de las larvas de zoea a misis, debido a causas que no han sido completamente explicadas, pero que podrían ser las altas cargas bacterianas presentes en los sistemas de cultivo. También los alimentos vivos en maduración constituyen una entrada de patógenos como el EHP, por lo que los operadores de maduraciones y laboratorios de larvas buscan alternativas para minimizar los riesgos Entre los mecanismos regulatorios para lograr un adecuado suministro de reproductores de calidad, así como el correcto funcionamiento de esta fase de la cadena de producción, se incluye el registro obligatorio con la Autoridad de Acuicultura Costera (CAA), inspecciones de rutina, obligatorias, en los protocolos establecidos por las autoridades (como MPEDA) y pruebas rutinarias de muestras aleatorias realizadas por las autoridades reguladoras (EIA).
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Producción de post larvas e importaciones de reproductores de P. vannamei en India
Cultivo en fincas De acuerdo a los datos presentados por la Federación de Productores de Camarón de India (PFFI) el país cuenta con aproximadamente 200,000 hectáreas dedicadas al cultivo; 153,000 ha bajo lo que ellos denominan “cultivo científico”, es decir, con densidades entre 30-60 animales/m2, mecanismos de bioseguridad implementados, uso de probióticos y tecnologías apropiadas como aireadores y alimentadores automáticos. Existen otras 50,000 ha operadas bajo el sistema de cultivo tradicional y con densidades menores y es probable que existan cientos de fincas que no han sido registradas ni monitoreadas por la autoridad. Adicionalmente, se menciona que existen 1’190,000 ha con potencial para extender la acuicultura en el país, especialmente el cultivo de camarón y el gobierno promueve el desarrollo de la actividad como una forma de apoyar a un segmento de la población a salir de la pobreza.
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Producción de camarón en India 2014-2017
Índices de producción y productividad - Densidades medias de siembra: 30 animales/m² - Tamaño promedio de cosecha - 18 gramos - Supervivencia final promedio: 55% - Costo promedio de producción: US $ 4.42 (55-60 animales/kg)
La producción total se ha incrementado
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- FEBRERO 2018 debido a la expansión de las áreas de cultivo; sin embargo, la productividad se ha visto reducida y la tasa media de eficiencia bordea el 60%. El cultivo de camarón solo es rentable debido a los altos precios actuales; pero los precios están cayendo, causando preocupación respecto a la sostenibilidad de la industria. La mayor producción proviene de Andhra Pradesh, donde se cosecha el 61% del camarón de país, seguido por West Bengal (10%), Gujarat (9%), Odhisa (9%) y el resto en Kerala, Karnataka, Goa y Maharastra. La producción del 2017, así como los estimados para este año (PFFI) se presentan a continuación: En cuanto a las enfermedades, el mayor problema reportado es la alta prevalencia de mancha blanca (WSSV), que ocasiona elevadas mortalidades. La enfermedad causada por el microsporidio Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) se extiende desenfrenadamente por las áreas de cultivo, provocando un crecimiento lento, lo que reduce significativamente el tamaño de cosechas y aumenta la tasa de conversión de alimento. El síndrome de heces blancas también afecta los cultivos. Hasta la fecha, India no ha reportado oficialmente la presencia de EMS en sus cultivos, así como tampoco de otros patógenos serios.
Nuevas tendencias en el cultivo de camarón Las medidas de bioseguridad se han incrementado en las fincas. Se utilizan precriaderos para llevar las postlarvas a estadíos juveniles y fortalecer la salud en la fase inicial, lo que les permite enfrentar mejor las enfermedades y mejorar las supervivencias finales, reduciendo el costo de producción y aprovechando mejor la época de buenas condiciones climáticas para el cultivo. Para superar el síndrome de EHP y heces blancas, se aplica cal a los fondos, se controla de la calidad de las semillas, y se realiza una desinfección rigurosa de las aguas de origen antes de la siembra.
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Las piscinas utilizadas para precría en Andhra Pradesh, donde se produce el 60% del camarón indio, son de tamaños entre 1 y 2 ha., en donde se mantienen animales a densidades de 2-3 millones/ ha para transferir animales de 3 - 5g en aproximadamente 35 días.
Aspectos relativos al mercado
Producción de alimento balanceado
Los principales mercados del producto lo constitituyen Estados Unidos, China y la Unión Europea. Para controlar la calidad de las exportaciones de camarón, India mantiene algunas regulaciones, controladas principalmente por MPEDA, que incluyen el Plan Nacional de Control de Residuos (NRCP), equivalente al Plan Nacional de Control de Ecuador, como un requisito legal para exportar a los países de la UE. Previo a la cosecha, los camaroneros deben realizar un muestreo obligatorio (pre-harvest testing, PHT) para confirmar la ausencia de sustancias controladas y posteriormente, un muestreo pre embarque (pre-shipment testing, PST) para obtener el certificado sanitario emitido por EIC y poder exportar el producto.
Existe una capacidad instalada para producir más de 2’000.000 TM de alimentos para acuacultura. En 2017, la producción superó el millón de toneladas y cada año se están instalando una o dos nuevas fábricas en el país. El aumento del costo de las materias primas constituye una preocupación seria, ya que los productores enfrentan un aumento de la tasa de conversión (debido a problemas mencionados previamente) y un aumento general del costo de alimentación, a pesar de la gran competencia entre productores de balanceados.
Procesamiento del camarón A la fecha, existen 344 fábricas procesadoras aprobadas por la UE (fuente: MPEDA). Las unidades de procesamiento de camarón en India son aprobadas por el Consejo de Inspección de Exportaciones de la India (EIC), que los clasifica en unidades elegibles para exportar a la Unión Europea y unidades elegibles para exportar a otros países.
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De acuerdo a NOAA Fisheries, India es el principal proveedor de camarón de los Estados Unidos y durante 5 años consecutivos el mayor consumidor de camarones del mundo.
La industria ha adoptado métodos modernos de manejo y procesamiento, además de medidas de control de calidad adecuadas para mejorar la calidad de los alimentos marinos, como el cumplimiento obligatorio de HACCP para todas las plantas de procesamiento. Fuentes de la industria consideran que el porcentaje de rechazo a sus exportaciones
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es muy bajo y no debería representar una amenaza para el cierre de mercados. Sin embargo, constituye un grave problema de inocuidad de los alimentos (debido a la utilización de antibióticos específicamente prohibidos, como cloranfenicol y nitrofuranos), y aunque se detectan en solo el 0,22% de sus exportaciones, constituye una gran preocupación para los exportadores, ya que enfrentan la mayor parte de los rechazos. Las inspecciones al camarón procedente de India se han vuelto más estrictas, en particular en Europa, donde los controles de calidad e inocuidad pasaron del 10% al 50% de los contenedores que arriban al territorio comunitario y al momento está pendiente la publicación de los resultados la auditoría realizada por la DG SANCO para verificar las garantías que India ofrece a las exportaciones de camarón, especialmente respecto al control de medicamentos y contaminantes. La disminución de la demanda de las tallas más grandes también representa un problema, especialmente para los productores pequeños y marginales, que en su mayoría prefieren producir animales de gran tamaño, por lo que en el futuro el equilibrio económico de los cultivos podría estar en riesgo. De acuerdo a la PFFI, India puede mantener su récord de producción si logra mejorar la productividad, superar las amenazas de los patógenos existentes y emergentes y también tomar medidas proactivas para garantizar el cumplimiento de las normativas de seguridad alimentaria.
MERCADOS: exportaciones de camarón congelado de la India (MPEDA)
Perspectivas de la industria India se prepara para alcanzar 700,000 toneladas en 2018. Esperan igualar, y luego superar, la producción de China, convirtiéndose en el mayor productor y exportador de P.vannamei del mundo.
Por ello, consideran positivo que el gobierno esté tomando medidas para sostener la producción y el crecimiento, garantizar el 100% de cumplimiento de la seguridad alimentaria y para controlar la propagación de enfermedades.
Tan solo en el estado de Andhra Pradesh esperan superar las 400,000 toneladas y la producción de semilla alcanzará un máximo histórico de 70.000 millones de postlarvas. Sin embargo, la industria necesita mejorar la productividad para garantizar la rentabilidad y sostenibilidad, principalmente mediante el control de enfermedades para mejorar las supervivencias y el crecimiento.
Las partes interesadas evolucionan constantemente para producir y exportar camarones de alta calidad.
Otra preocupación es la falta de un programa integral de control de calidad para abordar de manera proactiva los problemas de
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inocuidad de los alimentos y la trazabilidad de sus productos. Los productores demandan al gobierno instalaciones acreditadas para el control de patógenos y residuos en todas las fases de la cadena; insumos certificados y suministro sostenido de semilla de calidad mediante la construcción de nuevos centros de cuarentena y multiplicación de reproductores. El incremento del consumo interno de camarón y la implementación de programas de mejoramiento genético para especies nativas (como Penaeus indicus) también son temas sobre los que la industria se ha planteado objetivos●
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Tecnologías para el tratamiento de agua en la producción de larvas El propósito de este artículo es introducir unas de las tecnologías más factibles para el tratamiento de agua en la etapa de producción de larvas, utilizando técnicas de producción basadas en el método Galveston de aguas claras. Este artículo no incluye los tratamientos de aguas residuales, los cuales serán presentados en la siguiente edición. Autor: Philip Buike Gerente técnico de la Cámara Nacional de Acuacultura pbuike@cna-ecuador.com
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os productores de larvas deben proveer diferentes perfiles de calidad de agua, según la etapa metamórfica de las larvas, a lo largo de esta fase de producción. Inicialmente, se necesita condiciones oligotróficas (mar abierto) y luego en las etapas bentónicas se requieren características bioquímicas similares a las aguas litorales. Por tal razón, las operaciones de mayor éxito tienden a ser las que pueden ajustar las características de sus cultivos para cumplir ambos requisitos. (J. Ogle,2006)
de onda entre 250 - 270 Nm. Agua prefiltrada pasa por una región restringida conteniendo una seria de lámparas UV. Los micro-organismos contenidos en el agua son inactivados por la luz UV. Este tipo de luz es un bacteriostático, no es un bactericida y su acción interrumpe el proceso normal de replicación de las células a nivel del ADN cromosómico. La cual implica que no hay una reducción en la carga bacteriana en el punto de tratamiento, pero esta población no puede aumentar. (E.P.A,1991)
Protocolos estrictos de filtración, son requisitos primordiales en la producción de larvas, como una medida de seguridad contra la tendencia contínua de la degradación ambiental y específicamente para prevenir la introducción de micro-organismos potencialmente peligrosos dentro del medio de producción. J. Treece, Fox. J. M, 2009)
La Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura (F.A.O) recomienda dosificaciones mínimas de 30 mW- Seg/cm2 para la desinfección de agua para la producción de larvas de camarón. (A. Arbor, 2001)
Tecnologías disponibles para el tratamiento de agua La siguiente información se basa en los avances de la industria del embotellado de agua, la cual se caracteriza por una legislación muy clara, los volúmenes de producción son altos y la tecnología es absolutamente confiable; estas cualidades son consideradas importantes para la producción de larvas.
1. Irradiación Ultra Violeta (UV):
UV es utilizada principalmente como un proceso de desinfección, que aprovecha el efecto germicida de la luz UV con longitudes
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Aunque hay varios tipos de tecnología UV disponibles, el sistema de presión baja e intensidad baja (LpLi) es utilizada en más del 90% de las operaciones de depuración de agua al nivel mundial. Las ventajas principales de LpLi, son su alta eficiencia y su costo relativamente bajo. Sin embargo, la necesidad de utilizar una cantidad alta de lámparas conlleva una serie de problemas relacionados con la operación y mantenimiento del sistema. (J. C. Kruithof, 2002) Típicamente una lámpara LpLi cuesta alrededor de $ 500, comparado con $ 5.000 por unidad para sistemas de mayor presión e intensidad. (M. J. Parrota, 2014).
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- FEBRERO 2018 Los problemas de operación son los siguientes: El proceso de tratamiento con UV consiste de una serie de lámparas puestas dentro de un tubo de cuarzo. Debido al alto nivel de energía de luz UV, la temperatura de este tubo puede subir, causando precipitación de sales en su superficie lo que reduce la eficiencia del sistema. (D. Reed, 1998)
En resumen, el tratamiento de aguas naturales por irradiación UV tiene cierto potencial para pequeñas operaciones. Su función es sencilla, compacta, tiene una buena relación costo-beneficio y presenta
muy poco riesgo a la salud humana; sin embargo, hay algunos problemas significativos de diseño que podrían limitar su amplio uso en los laboratorios de larvas en el Ecuador.
Con estas dosificaciones, los residuos de ozonificación son casi indetectables; sin embargo, las concentraciones necesarias para la eliminación completa de cryptozoas por ejemplo, pueden llegar a concentraciones mayores de 5mg/l de ozono. En estos casos, una eliminación post-ozono, de los residuos es obligatorio. (S. Adham, 1995)
de dólar para cada tonelada de agua tratada. Precios que pueden ser significativamente más altos en zonas de proliferación de patógenos peligrosos y/o altos niveles de materia orgánica disuelta. (M. Berdash, 2014).
Sólidos en suspensión también pueden obstruir la transmisión de luz UV, y como consecuencia la pre-filtración mecánica es obligatoria en el tratamiento de aguas naturales. (D. Reed, 1998) En la práctica, los sistemas UV frecuentemente sufren fallos de operación porque su función depende de microcircuitos de control, diodos y resistores. Estos componentes tienen poca resistencia al agua salada, lo que aumenta significativamente la posibilidad de daños en ámbitos marinos. (P. K. Overbask, 2006)
2. Tecnologías avanzadas de oxidación: i, Ozono O3 La oxidación desinfecta medios acuáticos por la carbonización completa de los compuestos orgánicos presentes y es efectiva contra todas las formas de vida conocidas, y lógicamente conlleva ciertos riesgos contra la salud humana en caso de exposición directa a ésta. (R.G. Rice, 1998) Desde el principio de los 80´s, la aplicación de ozono y sus derivados para la desinfección de agua ha aumentado exponencialmente, en especial para la reducción de materia orgánica disuelta y la eliminación de patógenos peligrosos. (L. Tan, 1999) Con la necesidad de eliminar los residuos del proceso de clorinización, muchas operaciones acuícolas en Europa y Canadá están utilizando tecnologías de oxidación como su método principal de tratamiento de agua. (A. Karimi Y J. Redman, 2007) Normalmente el tiempo de retención es entre 8 y 10 minutos con una dosificación de ozono entre 0.5-2mg/l para agua potable.
Uno de los mayores obstáculos contra el uso amplio de ozono para el tratamiento de agua potable, es un riesgo para la formación de bromatos (BrO3-), un potente agente cancerígeno para humanos y altamente tóxico para crustáceos. Esto puede pasar cuando las aguas naturales tienen niveles altos de bromo. En general, concentraciones mayores de 50mg/lt pueden resultar en la formación de bromatos. En este momento el único manejo de la formación de bromatos ha sido la depresión de pH (< 6.5) en el punto de contacto con el ozono. (W. Glaze, 2012) Por lo general, los costos asociados con la implementación de un sistema de ozono son entre $ 40.000 a $ 60.000 por kilo de Ozono/día de capacidad de generación de ozono. En términos prácticos, el proceso de ozonificación cuesta entre 8 y 12 centavos
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ii, Ozono con Peróxido de Hidrógeno H2O2 Cuando se adiciona H2O2 a agua ozonificada hay una serie de reacciones que ocurren.
WH. Glaze, J. W. Kane, D. H. Chapin, 1987
Aunque los productos finales son inocuos (oxígeno y agua) los intermediarios son altamente reactivos, y estos radicales libres producirán una reacción en cadena cuando se encuentran con iones hidroxiles, provenientes de la disociación del peróxido de hidrógeno. Así se puede ver que con el sistema O3-H2O2,
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la concentración de radicales libres son mucho más altos y consecuentemente la potencial oxidativa es mayor que una solución compuesta únicamente de derivativas de ozono molecular. Este sistema es ideal para situaciones donde la transparencia y la ausencia completa de materia orgánica son factores importantes. Sin embargo, las reacciones en cadena son complejas y a cierto modo impredecibles porque no todas las interacciones con materia orgánica han sido descritas. Sí puede tener fluctuaciones de concentraciones de radicales libres dependiendo de la carga orgánica, lo que implica cambios en la concentración de ozono requerido para neutralizar el medio. Por tal razón, esta tecnología aún está considerada en desarrollo porque no todas las reacciones químicas y biológicas son controlables. (R. R. Trussell y I. N. Najm, 2011) iii, UV con Peróxido de Oxígeno Peróxido de hidrógeno se descompone al producir radicales libres cuando está expuesto a la luz UV. Adicionando H2O2 antes del proceso de irradiación por UV,
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ahora es un proceso relativamente común para la eliminación de micro-contaminantes en aguas de pozo (sistemas de flujo bajo y tiempos de exposición extendidos), donde está considerado como una alternativa relativamente sencilla, confiable y económica. (J. C. Vickers, 2009) También se ha utilizado la tecnología para desinfectar aguas superficiales, pero es importante reconocer que la reacción H2O2 con el UV es relativamente lenta, requiriendo períodos de exposición más largos. Sistemas con flujos mayores tienen que utilizar H2O2 en concentraciones hasta 20mg/l, necesitando la instalación del sistema de la eliminación de residuos después de irradiación. Carbón activado es el método de preferencia, aunque cloro, tiosulfato, sulfato y aireación han sido utilizados para la eliminación de residuos de peróxido de hidrógeno. (WH. Glaze, J. W. Kane, D. H. Chapin, 1987)
Como consecuencia de utilizar las concentraciones altas de H2O2, es muy importante tomar las medidas de seguridad adecuadas referentes a su almacenaje cerca del área de producción. Esto será un punto
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crítico para su aplicación segura en los laboratorios de larvas de Ecuador. En términos generales, las Tecnologías Avanzadas de Oxidación AOT,s descritos en este artículo son muy efectivos y la mayoría están disponibles a nivel comercial; sin embargo, todos los sistemas que desinfectan a través de oxidación total, potencialmente pueden producir residuos secundarios letales para las larvas. Por lo tanto, el agua tendrá que ser neutralizada después del tratamiento, y antes de ser utilizado en sistemas biológicos. La mayoría de los sistemas actuales que emplean AOT,s tienen filtros de carbón activado y filtros UV secundarios después del punto de contacto con el agente oxidativo. (Fig. 2) Con este requisito, se puede decir que los AOT,s tienen mucho potencial para el tratamiento de agua en los laboratorios, siempre y cuando los productos secundarios de oxidación sean adecuadamente manejados, particularmente los bromatos.
MANEJO ACUÍCOLA
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3. Filtración biológica: La aplicación de procesos biológicos para el tratamiento de agua (potable) no ha tenido una aceptación fácil por parte de la industria, principalmente por la preocupación sobre la posible introducción de patógenos. Sin embargo, se ha logrado superar esta barrera con el reconocimiento de que la filtración biológica es el proceso más efectivo, económico y seguro para obtener condiciones biológicamente estables en las aguas post-tratadas. Nuestra experiencia con el cultivo de larvas en Ecuador respalda ampliamente este hecho. (P. P. Jackson, 1998) La implementación de sistemas biológicos para el acondicionamiento de agua aumentó significativamente con la introducción de AOT,s (ozono) como el tratamiento preferido para el agua potable. En poco tiempo se observó que el nivel de Materia Orgánica Disuelta (DOM) y la Demanda Biológica de Oxígeno (BOD) eran muy altos a pesar de la ozonificación. La repoblación de agentes biológicos después del punto de contacto era muy rápido, y generalmente dominada por especias no deseadas. (G. Montgomery Watson 2012)
Granulado (GAC) está considerado el mejor medio de filtración, aunque también es el más caro. Antracita es una buena opción en aguas tropicales tomando en cuenta que su actividad está estrechamente relacionada con la temperatura del medio (28°C +) pero la arena no está considerada como una materia ideal de filtración para sistemas biológicos por su tendencia a formar zonas anaeróbicas, que a su vez propicia la colonización de bacterias fermentadoras. Dado eso, muchos filtros biológicos solo llevan una capa de entre 15 y 30 centímetros de arena, cuya función es prevenir el desprendimiento de la película bacteriana hacia el efluente. (J. Z. Wang, 2005) Es importante notar que los filtros biológicos, aunque pueden parecer filtros mecánicos de arena, tienen una función muy distinta, y el uso habitual de cloro en los sistemas mecánicos dejarán los filtros biológicos inoperativos. El manejo de filtros biológicos puede ser algo complicado en situaciones de carga orgánica variable, porque la máxima eficiencia viene cuando la población de bacterias heterotróficas está equilibrada con la provisión de nutrientes (materia orgánica contenida en el agua).
De hecho se observó exactamente lo mismo con los primeros intentos de ozonificación en Ecuador, con niveles iguales o más altos de bacterias en los reservorios, unas horas después del tratamiento. La implementación de filtración biólogica después de la ozonificación es una manera muy efectiva de prevenir monocultivos inestables de bacterias, y adicionalmente se ha demostrado ser un método eficiente para remover varios contaminantes abióticos del agua que incluye: Nitratos, Bromatos, Cloratos y sales de metales pesados particularmente Selenatos, Cromatos y Óxidos Férricos. (H. H. Glaze, 2004) El diseño, operación y selección del medio de filtración son aspectos altamente relacionados con las características de cada sistema; sin embargo, el Carbón Activado
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A veces es necesario arrancar el filtro con la adición de una solución de amoníaco NH3 al principio de la corrida. Sistemas recirculatorios tienen una gran ventaja en esta área, porque la carga y consecuentemente la población bacteriana, tiende a ser mucho más constante. Sin embargo, los sistemas de flujo directo pueden ser manejados con precisión siempre y cuando no hayan cambios dramáticos de carga orgánica a corto plazo. (D. Reed, 2008)
Conclusión: Brevemente he descrito las características principales de algunas alternativas disponibles para el tratamiento del agua. Como se puede apreciar, no existe aún una solución perfecta, todas las tecnologías mencionadas tienen sus pro y sus contras. Por ejemplo, UV tiene muchos factores a su favor como su costo relativamente bajo, su instalación fácil y su ausencia total de residuos peligrosos; pero la falta de confiabilidad es una limitación muy seria para su aplicación en países como Ecuador. Como siempre, las decisiones finales serán orientadas hacia las tecnologías que pueden proveer el máximo nivel de confianza con el mínimo nivel de costo y complejidad●
ESTADÍSTICAS
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COMERCIO EXTERIOR EXPORTACIONES DE CAMARÓN ECUATORIANO (LIBRAS VS DÓLARES) 2010 - 2017
EXPORTACIONES DE CAMARÓN ECUATORIANO: COMPARATIVO MENSUAL (LIBRAS) 2016 - 2018
Fuente: Cámara Nacional de Acuacultura
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ESTADÍSTICAS
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COMERCIO EXTERIOR EVOLUCIÓN DEL PRECIO DEL CAMARÓN ECUATORIANO: PROMEDIO ANUAL (LIBRA) 2010 - 2017
EVOLUCIÓN DEL PRECIO DEL CAMARÓN ECUATORIANO: PROMEDIO MENSUAL (LIBRA) ENERO 2016 A ENERO 2018
PORCENTAJE DE PARTICIPACIÓN DE MERCADO DEL CAMARÓN ECUATORIANO (LIBRAS) ENERO - DICIEMBRE 2016 vs ENERO - DICIEMBRE 2017
Fuente: Cámara Nacional de Acuacultura
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ESTADÍSTICAS
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COMERCIO EXTERIOR EXPORTACIONES DE TILAPIA ECUATORIANA A EEUU: (LIBRAS vs DÓLARES) ENERO 2016 A NOVIEMBRE 2017
EXPORTACIONES DE TILAPIA ECUATORIANA A EEUU: EVOLUCIÓN DEL PRECIO PROMEDIO (LIBRA) NOVIEMBRE 2016 A NOVIEMBRE 2017
Fuente: Cámara Nacional de Acuacultura
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URNER BARRY
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Reporte de las importaciones de camarón a Estados Unidos Importaciones de EE. UU. Todos los tipos, por tipo
L
as importaciones de camarón de noviembre acaban de liberarse y el patrón continúa. Las importaciones de noviembre aumentaron un 5,9%, dejando a las importaciones un 10% más altas en lo que va del año. El valor de importación promedio para el mes de noviembre de 2017 fue de $ 4.46 frente a los $ 4.26 del pasado noviembre (2016). Las importaciones de India e Indonesia fueron significativamente más altas durante el mes; las importaciones de la India también están marcadamente más altas en lo que va del año con el 39,7%, pero las importaciones de Indonesia han disminuido ligeramente en lo que va del año. Las importaciones de Tailandia, Vietnam y Ecuador bajaron en noviembre y en lo que va del año. Las importaciones chinas están más altas tanto para el mes como en lo que va del año. Las importaciones mexicanas y argentinas están marcadamente más altas en noviembre.
Las importaciones camarón apanado y cocido están más altas en lo que va del año pero mezcladas para noviembre.
mantuvo por debajo del promedio de los cinco años anteriores por el resto del año calendario.
Suministro de camarones en los Estados Unidos y situación del Golfo
El Servicio Nacional de Pesca Marina ha informado de desembarques en noviembre de 2017 (todas las especies, sin cabeza) de 8.898 millones de libras, comparado con las 9.063 millones en noviembre de 2016.
Los valores de mercado han variado de constantes a firmes en las semanas y meses recientes; los precios de reposición más altos, las crecientes preocupaciones por el suministro y las oportunidades limitadas para el reemplazo, se mantienen favorables para los precios.
El total acumulado ahora es de 93.75 millones de libras; 5.7 millones de libras o 6.5 por ciento por encima del total de enero a noviembre de 2016 que fue de 88.03 millones de libras●
El ritmo de los desembarques disminuyó durante la temporada de huracanes y se
Importaciones de camarón en lo que va del año por desglose
Ciclos mensuales de importación por país (todos los tipos) Las importaciones de Honduras y Guyana también están marcadamente más altas durante el mes. Importaciones de camarón HLSO para noviembre, incluyendo las de camarón de pelado fácil, aumentaron 4.9% en comparación con el año anterior, siendo 3.2% más altas en lo que va del año. Las importaciones de camarón pelado fueron un 8% más altas en noviembre, mientras que las importaciones en lo que va del año aumentaron un 41,9%.
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Aqua Expo promueve la continua mejora en las prácticas de producción sustentable del camarón ecuatoriano para mejorar su competitividad. Este año, expositores nacionales y extranjeros participarán en el ciclo de conferencias con temas relacionados al mejoramiento de protocolos de cultivo, manejo de pre-crías, bioremediación, soluciones prácticas para la alimentación, patologías, entre otros temas. Además, en la exposición comercial se mostrará la innovación y tecnología en productos o servicios relacionados al sector acuícola.
FERIAS INTERNACIONALES
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Ferias internacionales 2018 Se trata de la feria comercial de productos del mar más grande e importante de Norte América. Este año se realizará del 11 al 13 de marzo en Boston- Estados Unidos. En su trigésima octava edición se estima una participación de más de 1.200 expositores y se prevé la visita de 21.600 compradores y oferentes de productos del mar frescos, congelados y con valor agregado, de más de 100 países. La CNA cuenta con un pabellón de 180m2 y la participación de 9 empresas exportadoras ecuatorianas. Su vigésima sexta edición se llevará a cabo del 24 al 26 de abril en Bruselas – Bélgica y es considerada una de las ferias más importantes de la industria del mercado europeo y mundial. El propósito es atraer compradores y proveedores de productos relacionados con productos del mar y servicios, incluidos los mariscos frescos, congelados, vivos, procesados y de valor agregado y, así mismo, reforzar las relaciones comerciales ya existentes. 9 empresas conforman el pabellón de 206m2 organizado por la CNA. La World Seafood Shanghai celebrará su décimo tercera edición del 29 al 31 de agosto en Shanghai New International Expo Center, China. El objetivo de este encuentro internacional es propiciar que productores, distribuidores y consumidores intercambien ofertas de alta gama y se concreten negocios en la industria acuícola y pesquera global. Con el objetivo de aumentar la promoción de nuestro producto en China, la CNA asumió esta nueva responsabilidad con un stand de 90m2. Esta feria Internacional de Productos del Mar Congelados (CONXEMAR) se realizará del 2 al 4 de octubre en Vigo – España . El punto de encuentro tiene el propósito de generar la importación y exportación, venta y distribución de productos del mar. España es uno de los principales destinos de nuestro camarón, y Conxemar es una feria referente para el mercado europeo de productos del mar. Se realiza en una superficie de exposición de 31,500m2 , donde la CNA tiene un pabellón de 100m2. La presencia de Ecuador en la feria comercial de productos del mar más importante de Asia representa para el sector exportador una gran oportunidad de negocio para ampliar la comercialización a ese destino. Su vigésima tercera edición, se llevará a cabo del 7 al 9 de noviembre en Qingdao, China. Se prevé que más de 29.500 visiten este encuentro comercial donde participarán 1.500 compañías de 46 países. Asia es el principal destino exportación de nuestro camarón. La CNA cuenta con un espacio de 198m2.
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Prestigiosa fuente de información nacional e internacional que muestra los avances tecnológicos y de innovación para el desarrollo sostenible de la industria. Contiene los artículos técnicos más recientes sobre nutrición, producción, patología y manejo acuícola. La revista se posiciona como una de las más leídas en el sector acuícola americano porque cuenta con los últimos resultados científicos en lo que respecta a prácticas de alimentación, diagnóstico de enfermedades y su control, producción sostenible, buenas prácticas de cultivo, diversificación, clima y medio ambiente. “AQUA Cultura” es distribuida a más de 1500 organizaciones, institutos, empresas, afiliados y particulares. Además, la revista se encuentra disponible para su visualización en el sitio web de la Cámara Nacional de Acuacultura www.cnaecuador.com Publica tu anuncio en nuestra revista:
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NOTICIAS
- FEBRERO 2018
Gobierno no atiende demandas del sector camaronero pese al impulso económico que esta actividad representa
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a industria, que actualmente lidera la exportación no petrolera del país, avanza sin el debido soporte gubernamental, pues la inexistente determinación política para solucionar temas de inseguridad y la permanencia de aranceles para la importación de las materias primas y equipos decepciona al sector, según indicó José Antonio Camposano, Presidente de la Cámara Nacional de Acuacultura (CNA) “Estamos prácticamente solos, pero logramos cumplir uno de nuestros objetivos en 2017, exportar el primer contenedor a Brasil”. La empresa brasileña Mar & Rio Pescado confirmó la importación de 10 toneladas de camarón de origen ecuatoriano. El producto que salió desde el puerto de Guayaquil a finales de enero, llegó por vía marítima el pasado 16 de febrero al puerto de São José do Río Preto, ubicado a 15 horas de Sao Paulo. Se prevé que en los próximos días Ecuador ingrese 25 toneladas más del producto. La reapertura del mercado de Brasil se dio luego de 18 años del cierre comercial por supuestos problemas fitosanitarios alegados por ese país. La medida fue revertida luego de una perseverante gestión emprendida por la CNA desde enero de 2017 para cumplir con todas las exigencias de registro, control de calidad y demás tramitología requerida por Brasil. Uno de los más grandes desafíos se suscitó en agosto de 2017 cuando la CNA interpuso
Entre enero y diciembre del año pasado se exportaron $ 3.038 millones de dólares del crustáceo Fuente: Banco Central del Ecuador (BCE).
un recurso de apelación ante la demanda planteada por la Asociación Brasileña de Criadores de Camarón, que buscaba detener el ingreso del crustáceo ecuatoriano con el argumento de que representaba un riesgo fitosanitario para la producción local, pese a que en febrero de ese mismo año el Ministerio de Agricultura de Brasil había dado paso a que empresas ecuatorianas inicien procesos de registro para exportar. Finalmente, la justicia falló a favor de Ecuador y el trámite siguió su curso, pues en los últimos tres meses de 2017, los posibles importadores cumplieron con rigurosas exigencias de etiquetado para ingresar el producto a Brasil hasta lograr acreditarse y cumplir con su propósito. Brasil representa para Ecuador un mercado potencial total de 200 millones de libras que, a mediano plazo, podría significar entre 25 millones y 40 millones de dólares anuales. Sin embargo, hay un nuevo mercado por reabrir, se trata de México, que hace tres años puso una barrera comercial al producto ecuatoriano para precautelar su producción local y evitar posibles riesgos sanitarios injustificados. Ecuador es el primer productor de camarón en América con una generación del 60% en todo el continente y la industria continúa creciendo gracias a las inversiones privadas nacionales y extranjeras; sin embargo, existen condiciones de compra de materias primas que preocupan a algunos representantes de
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las fábricas de alimentos por los costos que debe asumir mientras destinan sus recursos a edificar plantas procesadoras de última tecnología, que traen innovación y desarrollo. Los representantes exigen la eliminación definitiva del arancel para la importación de la torta de soya y el trigo, con el fin de mantener la competitividad de la venta del camarón ecuatoriano en mercados internacionales en los que se comercializa el crustáceo cada vez más barato. Además, solicitan se descarte la obligatoriedad de adquirir materia prima nacional que es 46% más cara que la extranjera y que necesita mayor procesamiento. Pero uno de los temas emergentes que representa un riesgo inminente para el sector camaronero es la inseguridad, debido a los altos índices delictivos generan pérdidas superiores a los 60 millones de dólares anuales y la inversión en sistemas de seguridad por parte del sector privado resulta insuficiente debido a que se enfrentan a bandas organizadas. Esto ocurre a vista y paciencia de los organismos de control y de justicia que no toman acciones concretas para desacelerar esta problemática; mientras tanto, el Ministro del Interior César Navas, mantiene el silencio ante los reiterados pedidos por escrito para tratar personalmente este tema que se ha vuelto insostenible para el sector acuícola●
NOTICIAS
- FEBRERO 2018
Periodistas internacionales conocen la producción sustentable del camarón de Ecuador Los comunicadores Verónica Dulanto Herrero y Juan Ignacio Contreras Valverde del programa español "En el Punto de Mira" de canal cuatro de Mediaset de España y el periodista Ricardo Torres de la revista Seafood Brasil visitaron Ecuador con el propósito de elaborar reportajes sobre las buenas prácticas en los cultivos y los procesos de calidad en planta. Dentro sus respectivas agendas, los periodistas realizaron entrevistas al Presidente Ejecutivo de la Cámara Nacional de Acuacultura para conocer sobre cifras de producción y exportación del crustáceo, además sus características que lo hacen competitivo en el mercado internacional.
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NOTICIAS
- FEBRERO 2018
Reclamo público por falta de respuesta del gobierno ante la inseguridad que enfrenta el sector Guayaquil.- El Presidente Ejecutivo de la Cámara Nacional de Acuacultura, José Antonio Camposano, reclamó públicamente la falta de respuesta por parte del Ministro del Interior, César Navas, porque hace más de 7 meses que solicitó por escrito y de forma enfática una reunión con la máxima autoridad en materia de seguridad y todavía no hay un pronunciamiento al respecto. Mediante un boletín de prensa y entrevistas con periodistas de varios medios de comunicación dio a conocer su criterio sobre la falta de decisión política que existe para atender la crisis de inseguridad que vive el sector camaronero. La nueva alerta se produjo porque en los primeros 20 días de 2018, una persona fue asesinada en manos de la delincuencia en la Isla Mondragón en el Golfo de Guayaquil y otros 4 actos delictivos se registraron en varias provincias, al momento hay 13 detenidos, pero persiste la desconfianza en los organismos de justicia.
Taller para la implementación de métodos de auditoría Guayaquil.- La Directora Ejecutiva de la Cámara Nacional de Acuacultura realizó un taller de denominado “Fortalecimiento de los servicios de inspección acuícola e implementación de métodos de auditoría de acuerdo a los requerimientos de la Unión Europea”. La capacitación se realizó el 22 y 23 de enero en la sala de sesiones de la CNA y estuvo dirigida a funcionarios de la dirección y control de la Subsecretaría de Calidad e Inocuidad con el propósito de fortalecer la capacidad de garantizar los requisitos que exige la Unión Europea en los laboratorios, fincas acuícolas y establecimientos de procesamiento de productos para el sector. Una vez concluida la parte teórica, todos los convocados realizaron visitas el 24 y 25 de enero como un ensayo de campo, para poner en práctica los parámetros de evaluación y unificar criterios para garantizar los resultados.
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NOTICIAS
- FEBRERO 2018
Mesa de trabajo con la Subsecretaria de Calidad e Inocuidad Guayaquil.- En las instalaciones de la Cámara Nacional de Acuacultura, la Subsecretaria de Calidad e Inocuidad, Catalina Cárdenas, mantuvo una reunión con el Presidente Ejecutivo de la Cámara Nacional de Acuacultura (CNA), José Antonio Camposano, La Directora Ejecutiva CNA, Yahira Piedrahita y la Jefe de Comercio Exterior, María Fernanda Vilches, para dar seguimiento a las actividades conjuntas como sector privado y público. En la mesa de trabajo se analizaron las competencias y atribuciones de la entidad estatal y los parámetros de evaluación que se aplicarán para otorgar el licenciamiento de calidad e inocuidad acorde a los requerimientos de la Unión Europea.
El camarón entre los productos premium del Ecuador
Taller de socialización del plan de electrificación
Guayaquil.- En las instalaciones del Ministerio de Comercio Exterior, el Presidente Ejecutivo de la Cámara Nacional de Acuacultura recibió el reconocimiento que califica al camarón como uno de los productos premium del Ecuador. Esta designación se le otorgó también al banano, atún, cacao y flores, que junto con el camarón constituyen el 70% de las exportaciones no petroleras y 8% del PIB, según cifras del Banco Central de Ecuador (BCE). El desarrollo de una marca sectorial que impulse la promoción de exportaciones en mercados internacionales es parte de la política pública.
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Guayaquil.- En el auditorio de la Cámara Nacional de Acuacultura se desarrolló el "Taller de Socialización del Plan de Electrificación para el sector camaronero” que tiene como objetivo realizar el cambio de matriz energética a aproximadamente 100 mil hectáreas en cuatro años. El evento fue coordinado entre el Ministerio de Acuacultura y Pesca y la Cámara Nacional de Acuacultura y contó con la asistencia del Subsecretario Daniel Carofilis y demás autoridades de esa cartera de Estado. Se abordaron temas de interés, como el procedimiento de reclasificación para sujetarse a la nueva tarifa eléctrica, la misma que tiene un costo inferior a la actual, el delegado de la Gerencia de Distribución de CNEL- Guayas resolvió las interrogantes.